肝硬化动物模型

鳖甲
大黄
莪术
桃仁
厚朴
柴胡
方解
君药：鳖甲软坚散结，通络开痹
臣药：大黄、牡丹、桃仁、蛰虫破血攻瘀，疏通经络；莪术具有消积
止痛、破血行气的效果
佐药：柴胡、厚朴行气开郁，调达郁结；半夏、葶苈、瞿麦、石韦，
祛痰除湿；三七、当归，活血、止痛、化瘀；赤芍具有散瘀止
痛以及清热凉血的效果；人参、阿胶可益气养血。
使药：甘草
5
正常组（NC）生理盐水 鳖甲煎丸低剂量组(2.5 g·kg-1·d-1) 鳖甲煎丸中剂量组(5 g·kg-1·d-1) 鳖甲煎丸高剂量组(10g·kg-1·d-1) 阳性药对照组（恩替卡韦片20mg/次）
巴马香猪
选择同种系巴马小型猪60头，随机分为5组，雌雄不限，
3-4月龄，体重12-15kg。采用复合因素法造模(65%的玉
蛰虫
方剂选择
方剂功效：行气化瘀，软坚散结，全方共奏破血通络，理气祛痰，益气 养血。 主治：疟疾日久不愈，胁下痞硬有块，结为疟母。 选方原因：活血化瘀，软坚散结是肝硬化药物治疗的关键所在。
鳖甲煎丸能有效缓解肝纤维化并且对肝硬化的早期都有良好 疗效，同时尚有活血祛淤，化淤解毒，软坚散结，调节免疫， 益气养血之功效，改善肝功能
米面+35%的胆固醇+四氯化碳+苯巴比妥钠的混合饲料，
10%的无水乙醇作为唯一饮料)，每日一次，连续24周至形
成终末期肝病为止。 选择巴马香猪的原因： (1)猪的心血管系统 的解剖结构、消化系统、营养需要、骨骼发育以及矿物质代谢与人类十分 相似，猪的脏器重量也近似于人。 (2)巴马小型猪生长缓慢，性情温顺，且4个月龄左右猪的生理特点最接近人。 (3)猪的体重、体积明显大于大鼠、兔子，有利于手术操作。 (4)猪的体积大小和驯服习性允许进行反复采样、进行各种外科手术，
门脉性肝硬化
肝体积缩小，重量减轻，表面及切面均遍布大 小相近的小结节，直径在0.1-0.5cm，结节间有 收缩下陷的纤维组织，由于纤维组织增多，肝 质地变硬，切面边缘锐利。
早期无明显症状，后期出现 门脉高压症和肝功能障碍。
门脉高压症表现：1、腹水； 2、慢性淤血性脾大；3、侧 支循环形成（脐周及复辟静 脉曲张，形成“海蛇头”）； 4、胃肠淤血水肿（食欲减退、 消化不良）。
分组与治疗 组别
正常组（NC）
阳性药对照组(Sily) 鳖甲煎丸低剂量组(POL) 鳖甲煎丸中剂量组(POM) 鳖甲煎丸高剂量组(POH)
给药情况
生理盐水
恩替卡韦片5mg/次 0.15g·kg-1·d-1 0.3g·kg-1·d-1 0.6g·kg-1·d-1
Part
04
检测指标
检Fra Baidu bibliotek指标
01 生化指标
是各种病因引起的肝脏疾病的终末期病变，病变以慢性进行性、弥 漫性的 肝细胞变性坏死、肝内纤维组织增生和肝细胞结节状再生为基本 病理特征，广泛增生的纤维组织分割原来的肝小叶并包绕成大小不等的 圆形或类圆形的肝细胞团形成假小叶，引起肝小叶结构及血管的破坏和 改建。
病毒性 肝炎
慢性酒精 中毒
胆汁淤 积
药物及 化学毒
病理指标分级
S0级
S1级
S2级
S3级
病理指标分级
假小叶形成，纤维间隔包绕在假小叶周围，间隔内胶原纤维环绕假小叶呈 平行排列。淋巴、单核细胞浸润。
预期结果
与模型组相比，若出现鳖甲煎丸低剂量组、中剂量组、高剂量 组和阳性药组动物腹水减少，黄疸症状减轻，出血倾向好转。 动物血清ALT、AST、总胆红素、血清肌酐、水平降低。而白蛋 白，A/G比值呈逐渐上升的趋势。凝血酶原时间则缩短，则说明 鳖甲煎丸对肝硬化动物有治疗作用。
肝硬化的临床表现-代偿期
可有肝炎临床表现，亦可隐匿起病。可有轻度乏力、腹胀、轻度黄疸，肝掌、 蜘蛛痣。
肝硬化的临床表现-失代偿期
有肝功损害及门脉高压症候群。 （1）全身症状 乏力、消瘦、面色晦暗，尿少、下肢水肿。 （2）消化道症状 食欲减退、腹胀、胃肠功能紊乱甚至吸收不 良综合征，肝源性糖尿病，可出现多尿、多食等症状。 （3）出血倾向及贫血 齿龈出血、鼻衄、紫癜、贫血。 （4）内分泌障碍 蜘蛛痣、肝掌、皮肤色素沉着、女性月经失 调、男性乳房发育、腮腺肿大。 （5）低蛋白血症 双下肢水肿、尿少、腹腔积液、肝源性胸腔 积液。 （6）门脉高压 脾大、脾功能亢进、门脉侧支循环建立、食管 -胃底静脉曲张，腹壁静脉曲张。
感谢聆听
生化指标以本研究组中的正常对照 组均数为标准，分别在治疗前及治 疗后进行监测。 取总胆红素(T.BIL ) > 30.9111.9umol/L， 白蛋白(ALB ) <37.9613.96g/L, 血清肌酐> 80.10116.23umol/L 凝血酶原时间(PT) > 13.2113.43s 谷丙转氨酶、谷草转氨酶 六个标准同时具备作为本研究终末 期肝病的纳入标准。
物
广泛增生的纤维组织分割原来的肝小叶并包绕成大小不等的圆形或类 圆形的肝细胞团形成假小叶，引起肝小叶结构及血管的破坏和改建。
正常肝小叶
假小叶
正常肝脏为紫红色，表面平滑湿润，质地柔软，边缘尖锐， 包膜光整，肝脏无变形; 肝硬化后肝脏颜色暗红，表面粗糙，有许多明显的黄白色颗 粒和小结节，边缘变钝，肝脏硬度增加明显。
Part
04
分组造模 给药方案
SD大鼠
四氯化碳法：50%四氯化碳橄榄油溶液皮下注射,0.13mL /100g 体重,首剂加倍,每周2次,共12周形成肝纤维化。
60只大鼠，雌雄不限，3-4月龄，体 1 重150-200g。
2
造模成功后，按照随机数字法将60只 3
大鼠随机分为5组，每组12只。
4
按照分组每天灌胃治疗,持续5周。
Part
05
学习感想
答疑时间
请老师对我们的方案提出 宝贵意见！
患者治疗方案
治疗组患者口服鳖甲煎丸( 国药集团中联药业有 限公司) ， 3 g/次， 3 次/d; 口服抗病毒药物恩替卡韦分 散片( 正大 天晴药业集团股份有限公司) 进行抗病毒 治疗，0.5mg， 每日 1 次，临睡前空腹服用。对照组仅 给予口服抗病毒 药物恩替卡韦分散片( 正大天晴药业集团股份有限公司) 进行抗病毒治疗，0.5mg，每日 1 次，临睡前空腹服用。 两组均治疗24 周。
阳性药选择
肝硬化疾病至今无特效药。 恩替卡韦片 （中美上海施贵制药有限公司）0.5mg/次 选择依据：恩替卡韦具有很强的治疗效果，可以快速起效，常应用于 临床。抗病毒效果良好，且不易产生耐药性，与普通片和胶囊剂相比， 服用较方便，且吸收快，具有生物利用度高等优势，可大程度地抑制 乙型肝炎病毒的复制过程，缓解肝细胞炎症，减轻坏死症状，减少并 发症的发生。
肝功能障碍：肝细胞长期反 复受到损伤所致。 表现：1、蛋白质合成障碍； 2、出血倾向；3、胆色素代 谢障碍（黄疸）；4、雌激素 灭活障碍；5、肝性脑病。
Part
03
方剂与阳性药
中医病因病机
肝硬化是以肝组织弥漫性纤维化，假小叶和再生结节形成为特征的慢性肝 病，为临床常见疑难病症。
中医学认为，肝硬化多因风寒外袭、饮食所伤，感受毒邪所致，肝失疏泄、 气滞血瘀是该病的基本病机。
症状：胁痛如刺，蜘蛛痣，肋下积块（肝脾肿大）舌质紫暗，或瘀斑瘀点 病患经中医诊断为气血亏虚，瘀血阻络，肝气郁结，热毒未尽证者。
方剂选择
鳖甲煎丸
原方来源：《金匮要略》
功用：行气化瘀，软坚散结
改进组方后的组成：鳖甲、大黄、牡丹、桃仁、蛰虫、柴胡、厚朴、甘草、阿
胶、人参、半夏、葶苈、瞿麦、石韦、三七、芍药、莪术
肝硬化动物模型
陈思勉 17级中药学（药品经营与管理） 张嘉雪 17一院医学影像学
1
病因与病机
2
研究现状
3
方剂与阳性药的选择
4
分组、造模、给药方案
5
检测指标
Part
01
研究背景及现状
选题背景：肝硬化是临床常见的慢性进行性肝病，由一种或多种病因长
期或反复作用形成的弥漫性肝损害。肝纤维化是由 于感受了致病因素， 从而引发了肝脏内在的结缔组织 出现了病理性的异常增生，因此肝纤维 化是所有的慢 性肝病尤其是进展性肝病所共有的病理学基础，并且也是 朝肝硬化发展的必经之路。
诊断肝硬化
在诊断肝硬化及肝纤维化手段 方面，既往被公认的相对金标准 为肝穿刺下的肝组织 学病理检查，但其具有一定的创伤性，同 时患者依 从性较差，同时肝组织穿刺术无法做到反复多次检查， 而其他的诸如透明质酸等血液肝纤维指标检验缺乏敏 感性，容 易导致漏诊误诊，进而不利于疾病的早期诊断 和早期预测。
02 病理组织
开腹取肝左、右叶肝脏两份组织， 大小分别约1cm X 1cm，在10%福 尔马林溶液中固定24-48小时后取材， 经石蜡包埋、常规切片后行苏木素 一伊红染色(H.E染色)和胶原纤维染 色(Masso。染色)，显微镜下取40和 100放大倍数观察。术后关腹，予 80万u青霉素预防感染，继续喂养。 肝纤维化分级参照西安传染病会议 所订标准
死亡率高 并发症多 初期缺乏特异性诊断 未发现切实有效的药物
发病现状
我国肝硬化发病高峰年龄为 35～48岁，男性大于女性。近 年来肝硬化发病及死亡高峰年
龄段均有年轻化趋势。
治疗现状
肝硬化是因组织结构紊乱 而致肝功能障碍。
目前尚无根治办法。 主要在于早期发现和阻止
病程进展。
Part
02
病因与病机
肝硬化