血液中葡萄糖的测定

血液中葡萄糖的测定

一目的

掌握邻甲苯胺法测定血糖的原理和方法。

二原理

在热的醋酸溶液中，葡萄糖的醛基与邻甲苯胺缩合、脱水，生成蓝绿色的希夫碱衍生物，在630nm具有最大的吸收峰。其颜色的深浅在一定范围内与血糖浓度成正比。将标准葡萄糖溶液与样品按相同方法处理，在630nm波长处比色，即可测得样品中葡萄糖含量。

三仪器设备

分光光度计、试管、移液管、电炉、烧杯、洗耳球、试管夹、棕色瓶

四试剂

邻甲苯胺试剂：称取硫脲0.75g，溶于470ml冰醋酸中，加邻甲苯胺30ml。置棕色瓶中。此试剂具有腐蚀性，应避免接触皮肤。

12 mmol/L苯甲酸溶液：450ml蒸馏水中加入0.7g苯甲酸，加热助溶，冷却后定容到500ml。葡萄糖标准储存液（100 mmol / L）：称取无水葡萄糖1.802g，溶于80ml苯甲酸溶液中，再定容到100ml。

葡萄糖标准应用液（5 mmol / L）：取标准储存液5ml，加苯甲酸溶液至100ml。

五操作

1.采得待测血样后立即离心以分离血浆（3,000转离心15分钟）。

2.取干燥试管4支，分别标出号码，按下表添加试剂。

4.以空白管调零，读取各管630nm处吸光度值。

5.计算

血糖mmol/L = 测定管吸光值× 5

标准管吸光值