第12章 核酸的降解和核苷酸代谢
基础生物化学 第十二章(1-3节)-核酸的合成与分解
+ H2 O
尿囊素
尿囊酸酶
+ H2 O
尿囊酸 4NH3
2CO2
尿酶
+2H2O
尿素
乙醛酸
二、嘧啶核苷酸的代谢1
1,尿嘧啶与胸腺嘧啶在哺乳动物体内分解时,先
还原成对应的二氢衍生物。
2,破开环状结构分别产生β-丙氨酸及β-氨基异
丁酸。
3,最后成为CO2和NH3
胞嘧啶具有氨基,所以要先在胞嘧啶脱氨酶的作
通过用同位素标记的化合物实验来 确定,即用标有同位素的各种营养物喂 鸽子,然后将其排出的尿酸进行分析。
(一)嘌呤环的元素来源2(图示)
天冬氨酸
N1
6C
CO2
甲酰FH4
C2
5C
N7
甘氨酸
C8 甲酰FH4 N3
谷氨酰胺
4C
N9
谷氨酰胺
(二)合成过程(总)
从头合成嘌呤的途径已于50年代被
Greenberg等基本搞清,此途径是在核糖- 5-磷酸的第一碳原子上逐步增加原子生 成次黄苷酸(肌苷酸) ,然后再由次黄 苷酸转变为腺苷酸和鸟苷酸。 反应分为两个阶段: 1,次黄苷酸的合成(11步反应) 2,腺苷、鸟苷的生成 (南大P480,图12-2)
途径称为补救途径。通过补救途径可以重新 利用核酸分解产生的嘌呤和嘧啶或它们的衍 生物。
从胸腺嘧啶或胸苷转变成胸苷酸的补救途径,
除真菌外,对所有细胞都是一样的,故常利 用放射性同位素标记胸腺嘧啶或胸苷参入DNA 的实验作为检查DNA合成的手段。
三、核苷酸合成的补救途径2
核苷 核糖-1-磷酸
激酶
核糖-5-磷酸
1.鸟嘌呤的分解
动物组织中广泛含有鸟嘌呤酶,可以催化 鸟嘌呤水解脱氨产生黄嘌呤,然后黄嘌呤在黄 嘌呤氧化酶的作用下氧化成尿酸。
核酸降解和核苷酸代谢
R-5'-P
R-5'-P
5-氨基咪唑-4-羧酸 核苷酸(CAIR)
5-氨基咪唑核苷酸 (AIR)
甲酰甘氨咪核苷酸 (FGAM)
O
C
HO
C
C H2N
N Asp
H2O
ATP
CH
N
合成酶
R-5'-PFra bibliotekCOOH OC
HC N C H
CH2
C
H2N COOH
延胡索酸 N
CH
N
裂解酶
R-5'-P
O
C
H2N
C
C H2N
二、嘌呤核苷酸的降解
AMP
GMP
嘌呤核苷酸的结构
AMP GMP
H(I) 黄嘌呤氧化酶
(次黄嘌呤)
X
G
(黄嘌呤)
黄嘌呤 氧化酶
嘌呤碱的最终 代谢产物
腺嘌呤脱氨酶含量极少 腺苷脱氨酶和腺苷酸脱氨酶活性较高
腺嘌呤脱氨基主要在 核苷和核苷酸水平
鸟嘌呤脱氨酶分布广
鸟嘌呤脱氨基主要 在碱基水平
嘌呤类在核苷酸、核苷和碱基三个水平上的降解
1. 从头合成途径
(1)尿嘧啶核苷酸的合成
2ATP 2ADP+Pi
Gln + HCO3氨甲酰磷酸合成酶Ⅱ
(CPS-Ⅱ )
H2N C OPO3H2 + Glu
O
氨甲酰磷酸
CO2 + NH3 + H2O
2ATP N-乙酰谷氨酸
2ADP+Pi
氨基甲酰磷酸
Pi
线粒体
鸟氨酸
瓜氨酸
鸟氨酸循环
鸟氨酸
尿素
核苷酸代谢
(三)嘧啶核苷酸合成的调控
三个酶受终产物的反馈抑制:氨甲酰磷酸合成酶Ⅱ
1)氨甲酰磷酸合成酶Ⅱ受 UMP抑制,影响UMP、CTP 合成。
ATCase
2)ATCase受CTP抑制;影响 UMP、CTP合成。
3)CTP合成酶受CTP抑制,只 影响CTP合成。
CTP合成酶
不同生物关键酶不同
都受终产物反馈抑制,但具体机制不同: 动物:氨甲酰磷酸合成酶Ⅱ
HGPRT缺陷的男性儿童表现为一种自毁容貌综合症 (Lesch-Nyhan Syndrome ) ,为先天性遗传疾病(缺 乏HGPRT),行为对立,侵略性强,自咬手指、脚趾、 嘴唇等,智力低下。
3、生理意义:
节省能量和氨基酸的消耗; 某些器官(脑、骨髓等)因酶的缺乏,
只能进行补救途径合成。
①核糖核苷酸还原酶(RR)含R1和R2蛋白; ②硫氧还蛋白(T)含巯基; ③硫氧还蛋白还原酶(TR)催化氧化型T的还
原,FAD为辅基。
酶体系催化反应由NADPH提供氢: NADPH →TR→T→RR→核糖核苷酸还原→ 脱氧核糖核苷酸。
孤电子转移
3’-自由基核苷酸形成
脱氧核苷酸形成
孤电子转移
2’-脱氧3’-自由基核苷酸形成
三、嘧啶的分解:
在肝中进行,分解产物均易溶于水。
§12 -2 核苷酸的生物合成
基本途径: 1、“从无到有”途径(de novo synthesis)
利用简单化合物,主要在肝中进行 2、补救途径(salvage)
替补途径,利用核苷酸分解产物,在 脑、骨髓中进行
2. 从头合成途径的三个特征:
1)参与从头合成途径的酶在细胞中以庞大 的多酶融合体出现;
1、经碱基(嘧啶或嘌呤)核苷磷酸化酶催化
生物化学 第十二章 核酸降解及核苷酸代谢
利用磷酸核糖、
氨基酸、甲酸 盐及CO2等简 单物质为原料,
经过一系列酶
促反应,合成
核糖核苷酸的 途径
(一)嘌呤核苷酸的从头合成
AMP
GMP
嘌呤碱合成的元素来源
CO2
Gly
Asp
甲酰基 (一碳单位)
甲酰基 (一碳单位)
Gln (酰胺基)
合成过程
1. 在PRPP基础上逐步合成嘌呤环, 首先合成IMP(IMP合成);
核酸酶内切酶
核糖核酸酶(RNase)
RNase:作用于RNA内部的磷酸二酯键,主要有RNaseA; 产物:5′-OH末端和3′-磷酸基末端的寡核苷酸片段。
Py Pu Py Py G A C U G A
p
p
p
p
p
p
p
p
p
p
OH
5´
3´
RNase A
A A RNase T1
A A T1
RNase对RNA的水解位点示意图 (Pu:嘌呤 Py:嘧啶)
酶
Alu I Bam H I Bgl I EcoR I Hind Ⅲ Sal I Sma I
常用的DNA限制性内切酶的专一性
辨认的序列和切口
说明
‥ ‥A G C T ‥‥ ‥ ‥T C G A ‥ ‥
四核苷酸,平端切口
‥ ‥G G A T C C ‥‥ ‥ ‥C C T A G G ‥‥
六核苷酸,粘端切口
GMP
嘌呤核苷酸从头合成特点
Ø嘌呤核苷酸是在5-磷酸核糖基础上进行的; Ø由IMP转化产生AMP或GMP; ØIMP的合成需5个ATP,6个高能磷酸键; ØAMP或GMP的合成又需1个GTP或ATP。
核酸的降解与核苷酸代谢上课课件
51
(三)脱氧核糖核苷酸的合成
脱氢一般通过核糖核苷酸还原酶★实现
多在二磷酸核苷★的水平上发生,有些原核生 物在三磷酸核苷水平进行
学校类
52
核糖核苷酸的还原反应
NADP+
硫氧还蛋白
NADPH+H +
还原酶
FAD
硫氧还蛋
白(还原
型)
P-P-CH2
O
N
SH
硫氧还蛋 S
SH
白(氧化 S
ATP 、Mg2+ 型) 核糖核苷酸还原酶
基团、CO2、磷酸核糖。
学校类
22
•过程
1. IMP的合成 2. AMP和GMP的生成
学校类
23
PP-1-R-5-P
AMP ATP
(5’-磷酸核糖-1’-焦磷酸) PRPP合成酶
PRPP
谷氨酰胺
酰胺转移酶 谷氨酸
R-5-P
(5-磷酸核糖)
H2N-1-R-5´-P
(5´-磷酸核糖胺)
在谷氨酰胺、甘氨酸、一 碳单位、二氧化碳及天冬 氨酸的逐步参与下
P-P-CH2 N
O
+ H2O
OH H
脱氧核糖核苷二磷酸
SH 硫氧还蛋白
SH
S 硫氧还蛋白
S
硫氧还蛋白 还原酶
S 谷氧还蛋白
S
SH 谷氧还蛋白
SH
谷氧还蛋白 还原酶
FAD
FADH2
GSSG
谷胱甘肽 还原酶
合成特点:1 用原料先合成嘧啶环,
然后再与磷酸核糖连接生成嘧啶核苷
酸; 2 先合成UMP,再转变成其它嘧啶
核苷酸。
学校类
41
第十二章 核酸代谢
点
IMP 3. 在IMP基础上完成
AMP和GMP的合成
3. 以UMP为基础, 完 成CTP, dTMP的合成
5'-P-R PRPP
IMP
CO2+Gln H2N-CO-P
OMP
总结
AMP dAMP dGMP GMPUMP dUMP CMP dCMP dTMP
ADP dADP dGDP GDP UDP dUDP CDP dCDP dTDP
腺苷+Pi
腺苷+ATP
腺苷激酶
腺苷酸+ADP
生理意义
●节省: 减少从头合成时能量和原料的消耗 ● 作为某些器官(脑,骨髓和脾)合成核苷酸的途径
二、嘧啶核苷酸的合成代谢
(一)、从头合成途径
先合成嘧啶环,然后再与磷酸核糖连接生
成嘧啶核苷酸.
谷氨酰胺
C
N
C
天冬氨酸
CO2 C
C
N
(一) 从头合成途径的反应过程
CDP 核糖核苷酸还原酶
dNDP dADP dGDP dUDP dCDP
TDP
dTDP
dNDP+ATP dADP+ATP dGDP+ATP dUDP+ATP
dCDP+ATP
激酶 激酶 激酶 激酶 激酶
dNTP+ADP dATP +ADP dGTP+ADP dUTP+ADP
dCTP+ADP
dUDP O
(1) 嘌呤碱与PRPP直接合成嘌呤核苷酸
次黄嘌呤
次黄嘌呤核苷酸
90%
次黄嘌呤-鸟嘌呤
嘌呤碱 PRPP磷酸(H核G糖P转R移T酶) PPi
生物化学合工大第十二章核酸的酶促降解和核苷酸代谢ppt课件
核糖核苷酸的生物合成
1、嘌呤核苷酸的生物合成
(1) 从头合成途径 (2) 补救途径(自学)
2、嘧啶核苷酸的生物合成
(1) 从头合成途径 (2) 补救合成途径(自学)
嘌呤环上各原子的来源
来自CO2 来自天冬氨酸
来自甘氨酸
来自“甲酸盐”
来自“甲酸盐”
来自谷氨酰胺的酰胺氮
5-磷酸核糖焦磷酸
甘氨酸
5-磷酸 核糖胺
HCHLeabharlann CH2N5N,5-NC1H0-OC-HF2H-F4 H4
一碳基团的 S-腺苷蛋氨酸 来源与转变
参与 甲基化反应
N5-CH2-FH4
丝氨酸 FH4
NAD+
NDAH+H+ N5 , N10 -CH2-FH4还原酶
N5 N10 - CH2-FH4
为胸腺嘧啶合 成提供甲基
NAD+ NDAH+H+
N5 , N10 -CH2-FH4脱氢酶
1、核酸酶的分类
(1)根据对底物的 专一性分为
核糖核酸酶(RNase) 脱氧核糖核酸酶(DNase)
非特异性核酸酶
核酸内切酶 (2)根据切割位点分为 核酸外切酶
2、核酸酶的作用特点
外切核酸酶对核酸的水解位点
BBBBBBBB
5´ p
p
p
p
p
p
p
p
OH 3´
牛脾磷酸二酯酶
( 5´端外切5得3)
蛇毒磷酸二酯酶
组氨酸 苷氨酸
FH4
N5, N10 = CH-FH4
参与嘌呤合成
HCOOH FH4
H2O 环水化酶
H+
N10 -CHO-FH4
核酸的酶促降解和核苷酸代谢
核酸的酶促降解和核苷酸代谢核酸是构成生物体遗传物质的重要分子之一、它们在生物体内起着关键的功能,包括存储遗传信息、传递遗传信息和参与生物体的代谢过程。
然而,核酸分子并不是永久存在的,它们会经历酶促降解和核苷酸代谢过程。
酶促降解是一种通过酶催化反应将核酸分子分解为较小的碎片的过程。
这一过程在细胞中起着至关重要的作用,因为它能够控制细胞内的核酸浓度,并对细胞进行修复和调控。
具体而言,核酸的酶促降解主要通过核酸酶参与。
核酸酶可以识别特定的核酸分子,切割磷酸二酯键并将其分解成较小的碎片。
酶促降解的过程是高度调控的,这意味着细胞可以根据需要来降解核酸分子。
核酸酶的酶促降解反应可以发生在DNA和RNA分子上。
在DNA分子中,核酸酶可以通过识别特定的序列或结构来切割DNA链。
这些酶可以在DNA复制、修复和重组过程中发挥重要的作用。
在RNA分子中,核酸酶则可以通过识别特定的次级结构来切割RNA链。
这些酶在RNA降解和剪接等过程中起着关键作用。
核苷酸的合成通常发生在两个方向上。
一方面,细胞通过核苷酸合成途径将脱氧核苷酸和核苷酸合成为DNA和RNA的单体。
这些途径包括脱氧核苷酸合成途径和核苷酸合成途径。
另一方面,细胞还可以通过核苷酸分解途径将核苷酸分解为核苷和磷酸。
这些途径包括核苷酸降解途径和氨基酸代谢途径。
核酸酶和核苷酸代谢的失调会导致DNA和RNA的不稳定和降解,影响细胞的正常功能。
此外,核苷酸代谢紊乱还与多种人类疾病的发生和发展密切相关。
因此,研究核酸的酶促降解和核苷酸代谢机制对于理解生物体的正常功能和疾病的发生具有重要意义。
华中农业大学生物化学本科试题库 第12章 核酸的降解和核苷酸代谢
8. A
9. B
10.B
11.D 12. B。
2. 对
3. 对
4. 对
5.错
6. 对
7. 对
8. 对
9. 错
10. 对
(五) 简答题 1. 稀碱的作用下,RNA 在碱(OH-)的作用下生成 2ˊ,3ˊ-环核苷酸的中间物,然后由于 H2O 的参入生成 2′-和 3′-核苷酸的混合物。进一步水解生成核苷。DNA 的核糖 2 位上没有羟基,在碱(OH-)的作用下不能生成 2ˊ,3ˊ-环核 苷酸的中间物。DNA 不能被碱水解。 2. 嘌呤核苷酸分解的过程如下: 腺嘌呤核苷酸→腺嘌呤核苷→次黄嘌呤核苷→次黄嘌呤 *║ 鸟嘌呤核苷酸→ 鸟嘌呤核苷→ 黄嘌呤核苷→ 黄嘌呤→ 尿酸→尿囊素→尿囊酸→尿素+乙醛酸。 (*黄嘌噙氧化酶催化 的反应。 ) 人、猿类、鸟类、爬虫类和大多数的昆虫以尿酸作为嘌呤碱的最终代谢产物;其它多种生物还可进一步降解尿酸,形 成不同的代谢产物,除上述提及的哺乳动物,其它哺乳动物体中嘌呤的降解产物为尿囊素。某些硬骨鱼可将尿囊素进一步分 解形成尿囊酸;大多数鱼类、两栖类中尿囊酸可再分解为尿素和乙醛酸;某些低等动物可将尿素分解为氨和二氧化碳。 其它原因导致体内过多的尿酸积累特别是在关节组织中积累可产生痛风症。 别嘌呤醇通过抑制黄嘌呤氧化酶, 减少尿 酸的生成可缓解痛风症。 3. 嘌呤和嘧啶核苷酸的合成,通过完全不同的途径进行。嘌呤核苷酸合成的第一步是 5-磷酸核糖-1-焦磷酸(PRPP) 与谷氨酰胺生成 5-磷酸核糖胺(PRA) 。最后合成的产物是次黄嘌呤核苷酸,然后再转变为鸟嘌呤和腺嘌呤核苷酸。嘧啶核 苷酸的合成一开始没有核糖参加,合成的产物是嘧啶碱的前体乳清酸,然后再与 5-磷酸核糖-1-焦磷酸(PRPP)生成乳清酸 核苷酸,再进一步转变为尿嘧啶核苷酸。 在嘌呤核苷酸合成过程中有:谷氨酰胺、甘氨酸和天冬氨酸参加。 在嘧啶核苷酸全成过程中有:谷氨酰胺和天冬氨酸参加。 4. 嘌呤核苷酸合成的调节: (1)催化合成途径第一步反应的磷酸核糖焦磷酸转酰胺酶是别构酶,受 AMP 和 GMP 的反馈抑制。 (2)次黄嘌呤核苷酸氧化成黄嘌呤是由次黄嘌呤核苷酸氧化酶催化,过量的 GMP 抑制该酶的活性。 (3)次黄嘌呤核苷酸在 GTP 供能的条件下,与天冬氨酸生成腺苷酸琥珀酸,催化该反应的腺苷酸琥珀酸合成酶,受 过量 AMP 的抑制。 嘧啶核苷酸合成的调节: (1)氨甲酰磷酸合成酶Ⅱ受 UMP 的反馈抑制。 (2)天冬氨酸转氨甲酰酶(ATCase)是别构酶,ATP 是正效应物,GTP 是负效应物。 (3)CTP 合成酶受 CTP 的抑制。 5. 羽田杀菌素(N-羟-N-甲酰甘氨酸)与天冬氨酸结构相似,可强烈抑制腺苷酸琥珀酸合成酶的活性,该酶催化:次黄 嘌呤+天冬氨酸+GTP→腺苷酸琥珀酸,然后由腺苷酸琥珀酸裂解为腺苷酸和延胡索酸。羽田杀菌素阻止腺苷酸琥珀酸生成, 减少腺苷酸的合成量,是一种具有抗癌作用的抗菌素。 6. 标记氨基氮的腺嘌呤进入人、小鼠和鸽子体内,分解后标记物出现在 NH3 上排出体外。标记 N7 的腺嘌呤进入人和鸽 子体内分解后,标记物出现在尿酸分子中,进入小鼠体内分解后,标记物出现在尿囊酸分子中。 7. 将标记 14C4 的腺嘌呤在含有鱼的腺嘌呤分解酶系统中, 14C4 出现在腺嘌呤分解的最终产物乙醛酸分子上。 H — 14 C4OCOOH 3Cp 8. (1)该寡核苷酸为十二个单核苷酸所组成,各种单核苷酸的分子比例为 A:C:G:U = 2:4:4:2。 ApUp (2) 胰核糖核酸酶处理得到的多核苷酸碎片的 3 端均含有嘧啶(U 或 C)核苷酸:
核酸代谢
次黄嘌呤核苷酸 (IMP)
(2) 腺苷酸及鸟苷酸的合成
• IMP在腺苷酸代琥珀酸合成酶的催化下,由
天冬氨酸提供氨基合成腺苷酸代琥珀酸 (AMP-S),然后裂解产生腺苷酸(AMP)。
• IMP在IMP脱氢酶的催化下,以NAD+为受氢 体,脱氢氧化为黄苷酸(XMP),黄苷酸在
鸟苷酸合成酶催化下,由谷氨酰胺提供氨 基合成鸟苷酸(GMP)
(2) IMP形成AMP与GMP
O || C HN | HC N C || C N CH N | R-5‟-P
天冬氨酸
Mg2+ GTP
IMP
• 酶:腺苷酸代琥珀 酸合成酶; 腺苷酸 代琥珀酸 • 氨基:Asp提供; 合成酶 • 中间产物:腺苷酸 代琥珀酸(AMP-S)
腺苷酸代琥珀酸 裂解酶
NH2 | C N HN C | || CH HC C N N | R-5‟-P
Pu :嘌呤
ห้องสมุดไป่ตู้Py
Py:嘧啶
Py
p
Pu
Py
G
A
C
A
p
G
A
3’
p p p p p p p p OH
5’
RNAase I RNAase I RNAase T1 RNAase T1
多数限制性内切酶识别的碱基序列为4-8个碱基的回文 顺序(palindrome)(从前往后与从后往前碱基一样). 作用:在微生物细胞内发挥防御外来DNA入侵. 自身DNA的酶切位点上经甲基化修饰而得到保护.
O || C HN C | || C C || N O H
IMP
N CH N | R-5‟-P
谷氨酰胺 谷氨酸
O || C
N
生物化学考研 核酸的降解和核苷酸代谢
– 对象是B- 和 T-细胞 – 阻碍免疫反应
• 腺苷脱氨酶缺乏症Adenosine deaminase deficiency (ADA) :一种严重的免疫缺陷症, 腺苷脱氨酶的缺乏可使T淋巴细胞因代谢 产物的累积而死亡,从而导致严重的联合 性免疫缺陷症(SCID)。通常导致婴儿 出生几个月后死亡。
还开了药物别嘌呤醇.
• 几天以后,情况已解决并且已经停止服用嘌呤 醇了。重新测定尿酸水平(7.1毫克/升)。医生 给他一些关于改变生活方式的建议。
痛风
尿酸排泄的削弱与过量产生导致发病 尿酸结晶沉淀在关节(痛风性关节炎),肾脏, 输尿管(结石) 黄嘌呤氧化酶抑制剂可以抑制尿酸产生, 用来治 疗痛风药物治疗–次黄嘌呤类似物结合黄嘌呤氧 化酶降低尿酸的生成
次黄嘌呤
黄嘌呤
H2O+O2 H2O2 黄嘌 H2O+O2
尿囊素
呤氧
尿酸氧化酶 H2O化2酶 尿酸
H2O 尿囊 CO2+H2O2 2H2O+O2
素酶
尿囊酸
尿囊酸尿酶素 + 乙醛酸
H2O
脲酶
4NH3 + 2CO2
嘌呤的分解代谢
NH2
N
N
N H
N
Adenine
+H2O 腺嘌呤脱氨酶
O
N
NH
N H
N
NH2
核苷
•把一个嘌呤或嘧啶基与糖通过N-糖苷键的产物
• 嘌呤的N9原子与糖的C1形成糖苷键 • 嘧啶的 N1原子与糖的C1 形成糖苷键
磷酸基团 • 单-,二-或三磷酸
磷酸基团可接合到糖的C3或C5原子
核苷酸
• 一个或更多的磷酸基团通过酯化反应结合的核苷在 分子的5′端的产物
第十二章核酸降解与核苷酸代谢ppt课件
(3)核苷经核苷酸水解生成碱基和戊糖
二、碱基的代谢 1、嘌
呤 的 分 解
2、嘧 啶 的 分 解
第二节 核苷酸合成
一、从头合成 1、嘌呤核苷酸合成 (1)嘌呤环各元素来源
(2) 合 成 途 径
(3)合成特点
a、先经合成氨甲酸磷酸,再与天冬氨酸硫含 生成乳清酸,再被转移至SPRPP的CI’上生 成乳清酸核苷酸。
b、乳清酸核苷酸经脱羧及转氨基因生成尿苷 酸、胞苷酸。
二、补救合成途径
由磷酸核糖转移酶催化将未合成或代谢中 产生的碱基转移至磷酸核糖的C1‘羟基上而 形成核苷酸。
三、脱氧核苷酸的合成
DNA中所含脱氧核苷酸由核糖核苷二磷 酸水平还原而成
四、DNA胸苷酸合成
1、由dump经胸苷酸合成酶还原并从亚甲 基四氢叶酸转甲基而生成dtmp
第十二章 核酸降解与核苷酸代谢 第一节 核酸降解
一、核酸的降解 1、核酸的分解过程
核苷酸 核苷酸酶 H2O
核苷+Pi
核苷磷酸化酶
核苷+Pi
嘌呤碱或嘧啶碱+戊糖-1-磷酸
核苷+H2O 核苷水解酶 嘌呤碱或嘧啶碱+戊糖
2、核酸的降解
(1)水解核苷酸之间连接的3‘,5’磷酸二 脂键,生成多核苷酸电离或单核苷酸催化 水解的酶为核酸酶,水解核酸分子内的磷 酸二酯键的核酸酶为内环酶,从核酸-端逐 个水解核苷酸的酶为外 氧胸苷,过后经胸苷酸酶催化与ATP反应 生成胸苷酸。
华中农业大学生物化学考研试题库附答案核酸的降解和核苷酸代谢
第12章核酸的降解和核苷酸代谢一、教学大纲基本要求核酸的酶促降解,水解核酸的有关酶(核酶外切酶、核酶内切酶、限制性内切酶),核苷酸、嘌呤碱、嘧啶碱的分解代谢,嘌呤核苷酸的合成,嘧啶核苷酸的合成,脱氧核糖核苷酸的合成,辅酶核苷酸的合成。
二、本章知识要点(一)核酸的酶促降解核酸酶(nucleases):是指所有可以水解核酸的酶,在细胞内催化核酸的降解,以维持核酸(尤其是RNA)的水平与细胞功能相适应。
食物中的核酸也需要在核酸酶的作用下被消化。
核酸酶按照作用底物可分为:DNA酶(DNase)、RNA酶(Rnase)。
按照作用的方式可分为:核酸外切酶和核酸内切酶,前者指作用于核酸链的5‘或3’端,有5’末端外切酶和3’末端外切酶两种;后者作用于链的内部,其中一部分具有严格的序列依赖性(4~8 bp),称为限制性内切酶。
核酸酶在DNA重组技术中是不可缺少的重要工具,尤其是限制性核酸内切酶更是所有基因人工改造的基础。
(二)核苷酸代谢1.核苷酸的生物学功能①作为核酸合成的原料,这是核苷酸最主要的功能;②体内能量的利用形式;③参与代谢和生理调节;④组成辅酶。
核苷酸最主要的功能是作为核酸合成的原料,体内核苷酸的合成有两条途径,一条是从头合成途径,一条是补救合成途径。
肝组织进行从头合成途径,脑、骨髓等则只能进行补救合成,前者是合成的主要途径。
核苷酸合成代谢中有一些嘌呤、嘧啶、氨基酸或叶酸等的类似物,可以干扰或阻断核苷酸的合成过程,故可作为核苷酸的抗代谢物。
不同生物嘌呤核苷酸的分解终产物不同,人体内核苷酸的分解代谢类似于食物中核苷酸的消化过程,嘌呤核苷酸的分解终产物是尿酸。
嘧啶核苷酸的分解终产物是β-丙氨酸或β-氨基异丁酸。
核苷酸的合成代谢受多种因素的调节。
(1)嘌呤核苷酸代谢①嘌呤核苷酸的合成代谢:体内嘌呤核苷酸的合成有两条途径,一是从头合成途径,一是补救合成途径,其中从头合成途径是主要途径。
嘌呤核苷酸合成部位在胞液,合成的原料包括磷酸核糖、天冬氨酸、甘氨酸、谷氨酰胺、一碳单位及CO2等。
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核酸的降解和核苷酸代谢单元自测题第12 章核酸的降解和核苷酸代谢单元自测题(一)名词解释或概念比较1.核酸内切酶与核酸外切酶;2.核酸酶与限制性内切酶;3.核苷酸的从头合成与补救途径;4.同裂酶与同尾酶;(二)填空题1.限制性核酸内切酶主要来源于,能识别双链DNA 中,并同时断裂。
这类酶可分为两大类,只有第( ) 类限制性内切酶广泛用于基因操作。
2.识别同一断裂序列的限制性内切酶称为( ) ,识别相似断裂序列并能产生通过碱基互补相互缔合粘性末端的限制性内切酶称为( ) 。
3.核苷、核苷酸和核苷二磷酸,分别是核苷激酶、核苷酸激酶和核苷二磷酸激酶作用的底物,酶促反应的产物分别是( ) 、( ) 和( ) 。
4.同位素标记证明,嘌呤碱的N1 来自( ) ,C2 和C8 来自( ) ,N3 和N9 来自( ) ,C4、C5 和N7来自( ) ,C6 来自( ) 。
5.同位素标记证明,嘧啶碱的各种元素分别来自( ) 和( ) 。
6.嘌呤核苷酸合成的第一步是由( ) 酶催化( ) 和谷氨酰胺生成5―磷酸核糖胺的反应。
7.嘌呤核苷酸合成的产物是( ) 核苷酸,然后再转变为腺嘌呤核苷酸和( ) 。
8.嘧啶合成的起始物氨甲酰磷酸的合成需要( ) 作为氨的供体,尿素循环中的氨甲酰磷酸是由( ) 作为氨的供体,它们分别由氨甲酰磷酸合成酶Ⅰ和Ⅱ催化,前者存在于( ) 内,后者存在于胞浆中。
9..coli 细胞中,在催化嘧啶核苷酸合成的关键酶是( ) ,GTP 是该酶的( ) 调节物,是该酶的( ) ATP 调节物。
10.三磷核苷酸是高能化合物,A TP 参与( )转移,GTP 为( ) 提供能量,UTP 参与( ) ,CTP 与( ) 的合成有关。
11 .核糖核苷酸还原生成脱氧核糖核苷酸的酶促反应,通常是以为底物。
催化该反应的酶系由( ) 、( ) 、( ) 和( ) 四种蛋白。
12.生物体内有些核苷酸的衍生物如( ) 、( ) 和( ) 可作辅酶。
(三)选择题1.5-磷酸核糖和ATP 作用生成5-磷酸核糖焦磷酸(PRPP),催化方反应的酶是:A 核糖激酶;B 磷酸核糖激酶;C 三磷酸核苷酸激酶;D 磷酸核糖焦磷酸激酶。
2.在.coli 细胞中受嘧啶碱和嘧啶核苷酸反馈抑制的酶是:A 氨甲酰磷酸合成酶;B 二氢乳酸脱氢酶;C 天冬氨酸氨甲酰转移酶;D 乳清酸核苷酸焦磷酸化酶。
3.别嘌呤醇与次黄嘌呤的结构相似,它强烈地抑制下列哪种酶的活性:A 次黄嘌呤氧化酶;B 黄嘌呤氧化酶;C 次黄嘌呤还原酶;D 黄嘌呤还原酶。
4.鸟类为了飞行的需要,通过下列哪种排泄物释放体内多余的氨:A 尿素;B 尿囊素;C 尿酸;D 尿囊酸。
5.胸腺嘧啶除了在DNA 出现,还经常在下列哪种RNA 中出现:A mRNA;B tRNA;C 5S rRNA;D 18S rRNA。
6.在生物体内下列物质的合成除哪种外都是由S―腺苷甲硫氨酸提供甲基:A 磷酸肌酸;B 肾上腺素;C 卵磷脂;D 胸腺嘧啶。
7.下列哪一个代谢途径是细菌和人共有的:A 嘌呤核苷酸的合成;B 氮的固定;C 乙醇发酵;D 细胞壁粘肽的合成。
8.痛风症是由于尿酸在组织中,特别是在关节内积累过量引起的,治疗的原则是:A 激活尿酸分解酶;B 激活黄嘌呤氧化酶;C 抑制鸟嘌呤脱氢酶;D 抑制黄嘌呤氧化酶。
9.存在胞浆中的氨甲酰磷酸合成酶Ⅱ:A 以N-乙酰谷氨酸为正效应物; C 受UMP 的反馈抑制;C 催化尿素循环的第一步反应;D 以游离氨为底物。
10.胞嘧啶核苷生成胞嘧啶核苷酸由A TP 提供磷酸基团,催化该反应的酶是:A 胸苷激酶;B 尿苷激酶;C 腺苷激酶;D 鸟苷激酶。
11.氟尿嘧啶(5-Fu)的抗癌作用机理为()A 抑制二氢叶酸还原酶的活性,从而抑制TMP 的合成;B 抑制尿嘧啶的合成,从而减少RNA 的生物合成;C 抑制胞嘧啶的合成,从而减少DNA 的生物合成;D 抑制胸腺嘧啶核苷酸合成酶的活性,从而抑制DNA 的生物合成。
12.关于别嘌呤醇治疗痛风,说法错误的是:A 痛风是由于体内尿酸过量积累造成的,经过别嘌呤醇治疗的患者排泄黄嘌呤和次黄嘌呤;B 别嘌呤醇不能被黄嘌呤氧化酶氧化;C 别嘌呤醇是黄嘌呤氧化酶的自杀性底物;D 别嘌呤醇可以被黄嘌呤氧化酶氧化。
(四)是非题1.嘌呤核苷酸的脱氨过程主要由嘌呤脱氨酶催化嘌呤碱脱氨。
2.腺嘌呤和鸟嘌呤脱去氨基后,分别生成次黄嘌呤和黄嘌呤。
3.别嘌呤醇治疗痛风症,因为该酶可以抑制黄嘌呤氧化酶,阻止尿酸生成。
4.多数鱼类和两栖类的嘌呤碱分解排泄物是尿素,而人和其它哺乳动物是尿囊素。
5.嘌呤核苷酸和嘧啶核苷酸的生物合成过程相同,即先合成碱基再与磷酸核糖连接生成核苷酸。
6.A TP 为GMP 的合成提供能量,GTP 为AMP 的合成提供能量,缺乏ATP 和GTP 中的任何一种都会影响另一种的合成。
7.当dUMP 转变为dTMP 时,其甲基供体是N5,N10―亚甲基THFA。
8.尿苷激酶催化胞嘧啶核苷生成胞嘧淀核苷酸。
9.蛇毒磷酸二酯酶和牛脾磷酸二酯酶都是内切酶。
10.细菌的细胞内有一类识别并水解外源DNA 的酶,称为限制性内切酶。
(五)简答题1.简要说明碱水解核糖核酸的机制和脱氧核糖核酸抗碱的原因。
2.比较在不同生物体内嘌呤核苷酸分解产物的差异。
3.嘧啶和嘌呤核苷酸的合成各有什么特点?指出在合成过程中分别有哪些氨基酸参加?4.简要说明嘌呤和嘧啶核苷酸合成的调节。
5.羽田杀菌素是天冬氨酸的结构类似物,说明它在嘌呤核苷酸合成中的抑制作用。
6.将标记氨基氮的腺嘌呤和标记N7的腺嘌呤拌入人、小鼠和鸽子的食物中,在它们的哪种排泄物上有标记?7.将标记14C4 的腺嘌呤拌入含有鱼的腺嘌呤分解酶系统中,腺嘌呤分解的最终产物(脲和乙醛酸)是否有标记?写出带标记物的分子式。
8.一个碱基组成为A2C4G4U2 的寡核苷酸用特定酶水解,水解后测定产物的碱基组成。
(1)胰核糖核酸酶处理生成3 分子Cp,1 分子含有A 和U 的二核苷酸,1 分子只含有G 的二核苷酸,一个含有G 和U 的二核苷酸和一个含有A、C 和G 的三核苷酸。
(2)用高峰淀粉酶处理得到Ap,两个Gp 和3 个三核苷酸,其中一个含有A、C 和U;第二个含有C、G,第三个含有C、G 和U。
试推断该寡核苷酸的碱基序列。
9.鼠肝脏RNA 中胞苷酸的那些原子来自下列指定的碳原子:(1)草酰乙酸的β羧基碳原子;(2)氨的氮原子;(3)Glu 的氮原子。
10.如果细胞补救地利用一分子游离腺嘌呤来合成核苷酸,试计算该途径少用高能磷酸键的数目。
11.试述核酸物质作为营养保健品是否具有科学性,说明理由(供讨论)。
六、参考答案(一) 名词解释或概念比较1.核酸内切酶是能水解核酸分子内磷酸二酯键的核酸酶。
核酸外切酶是指从核酸链的一端逐个水解下核苷酸的酶。
2.核酸酶是指作用于核酸的磷酸二酯键的酶。
限制性内切酶是指能识别并水解外源双链DNA 的核酸内切酶。
3.核苷酸的从头合成是指由氨基酸[磷酸戊糖、CO2 和NH3 等化合物为原料合成核苷酸的途径,又称为从无到有途径;补救途径是由预先形成的碱基和核苷合成核苷酸。
4.同裂酶是识别和切割同一碱基序列的限制性内切酶;同尾酶是指识别并切割相似碱基序列并能产生通过碱基互补相互缔合粘性末端的限制性内切酶。
(二) 填空题1.微生物双链DNA 中特异的短核苷酸序列DNA 的两段链Ⅱ2.同裂酶同尾酶3.单磷酸核苷酸二磷酸核苷酸三磷酸核苷酸4.天冬氨酸甲酸盐谷氨酰胺的酰胺基甘氨酸二氧化碳5.氨甲酰磷酸天冬氨酸6.磷酸核糖焦磷酸转酰胺酶5-磷酸核糖焦磷酸7.次黄嘌呤鸟嘌呤核苷酸8.谷氨酰胺游离氨线粒体内9.氨甲酰磷酸合成酶负正2 10.能量蛋白质生物合成糖原合成磷脂11.二磷酸核苷酸硫氧还蛋白硫氧还蛋白还原酶蛋白质B1 B212.黄素核苷酸(FMN,FAD)吡啶核苷酸(NAD+,NADP+)辅酶A(三) 选择题1. B 2. A 3. B 1.对4. C 5. B 6. D 7. A 8. A 9. B 10.B 11.D 12. B。
(四) 是非题2.对3.对4.对5.错6.对7.对8.对9.错10.对(五) 简答题1.稀碱的作用下,RNA 在碱(OH-)的作用下生成2ˊ,3ˊ-环核苷酸的中间物,然后由于H2O 的参入生成2′-和3′-核苷酸的混合物。
进一步水解生成核苷。
DNA 的核糖2 位上没有羟基,在碱(OH-)的作用下不能生成2ˊ,3ˊ-环核苷酸的中间物。
DNA 不能被碱水解。
2.嘌呤核苷酸分解的过程如下:腺嘌呤核苷酸→腺嘌呤核苷→次黄嘌呤核苷→次黄嘌呤*║ 鸟嘌呤核苷酸→ 鸟嘌呤核苷→ 黄嘌呤核苷→ 黄嘌呤→ 尿酸→尿囊素→尿囊酸→尿素+乙醛酸。
(*黄嘌噙氧化酶催化的反应。
)人、猿类、鸟类、爬虫类和大多数的昆虫以尿酸作为嘌呤碱的最终代谢产物;其它多种生物还可进一步降解尿酸,形成不同的代谢产物,除上述提及的哺乳动物,其它哺乳动物体中嘌呤的降解产物为尿囊素。
某些硬骨鱼可将尿囊素进一步分解形成尿囊酸;大多数鱼类、两栖类中尿囊酸可再分解为尿素和乙醛酸;某些低等动物可将尿素分解为氨和二氧化碳。
其它原因导致体内过多的尿酸积累特别是在关节组织中积累可产生痛风症。
别嘌呤醇通过抑制黄嘌呤氧化酶,减少尿酸的生成可缓解痛风症。
3.嘌呤和嘧啶核苷酸的合成,通过完全不同的途径进行。
嘌呤核苷酸合成的第一步是5-磷酸核糖-1-焦磷酸(PRPP)与谷氨酰胺生成5-磷酸核糖胺(PRA)。
最后合成的产物是次黄嘌呤核苷酸,然后再转变为鸟嘌呤和腺嘌呤核苷酸。
嘧啶核苷酸的合成一开始没有核糖参加,合成的产物是嘧啶碱的前体乳清酸,然后再与5-磷酸核糖-1-焦磷酸(PRPP)生成乳清酸核苷酸,再进一步转变为尿嘧啶核苷酸。
在嘌呤核苷酸合成过程中有:谷氨酰胺、甘氨酸和天冬氨酸参加。
在嘧啶核苷酸全成过程中有:谷氨酰胺和天冬氨酸参加。
4.嘌呤核苷酸合成的调节:(1)催化合成途径第一步反应的磷酸核糖焦磷酸转酰胺酶是别构酶,受AMP 和GMP 的反馈抑制。
(2)次黄嘌呤核苷酸氧化成黄嘌呤是由次黄嘌呤核苷酸氧化酶催化,过量的GMP 抑制该酶的活性。
(3)次黄嘌呤核苷酸在GTP 供能的条件下,与天冬氨酸生成腺苷酸琥珀酸,催化该反应的腺苷酸琥珀酸合成酶,受过量AMP 的抑制。
嘧啶核苷酸合成的调节:(1)氨甲酰磷酸合成酶Ⅱ受UMP 的反馈抑制。
(2)天冬氨酸转氨甲酰酶(ATCase)是别构酶,A TP 是正效应物,GTP 是负效应物。
(3)CTP 合成酶受CTP 的抑制。
5.羽田杀菌素(N-羟-N-甲酰甘氨酸)与天冬氨酸结构相似,可强烈抑制腺苷酸琥珀酸合成酶的活性,该酶催化:次黄嘌呤+天冬氨酸+GTP→腺苷酸琥珀酸,然后由腺苷酸琥珀酸裂解为腺苷酸和延胡索酸。