多耐药基因mdr-1检测

多药耐药(MDR)

多　药　耐　药（ＭＤＲ）　肿瘤细胞对化疗药物的耐受性是肿瘤治疗的主要障碍，也是白血病化疗效果改善缓慢的主要原因。

尽管各种新的化疗药物和新的治疗方案连续不断地推出，但是收效却总是不太令人满意。

在临床上，许多肿瘤特别是白血病的初次化疗一般可取得较好的结果，然而最终仍难免要复发，且复发后的治疗效果往往较差，其主要原因就是肿瘤细胞对化疗药物产生了耐药性。

据估计，癌症死亡中有90%以上存在着耐药这一现象。

因此对肿瘤耐药现象的研究与治疗方法的研究具有同样的重要性。

肿瘤细胞的耐药性可分为原发性耐药（intrinsic resistance）和获得性耐药（acquired resistance）。

前者在化疗前就存在于肿瘤细胞中，与药物的使用无关，后者是由化疗药物诱导产生的，即在药物使用前对药物敏感，而在药物应用后产生的耐药。

获得性耐药根据耐药谱不同可分为原药耐药（primary drug resistance, PDR）和多药耐药（multi resistance, MDR）。

原药耐药只对使用过的药物产生耐药，对其他药物不产生交叉耐药，而多药耐药则是由一种药物诱发，而同时对其他多种结构和作用机制完全不同的药物产生交叉耐药，导致一些联合化疗方案的失败。

一，肿瘤细胞耐药机制白血病治疗的失败在很大程度上是由于白血病细胞对化疗药物产生了耐药。

虽然人们作了很大的努力来证明肿瘤细胞产生耐药的机制，但总的来说耐药的形成过程的了解还很少，从实验观察到的结果，可以归纳为以下几方面。

（一）药物吸收减少药物对肿瘤细胞的杀伤作用，依赖于进入细胞内的药物浓度。

许多药物通过细胞膜进入细胞，这是个个主动的领带能量的过程，与药物浓度梯度有关。

参与此过程的载体蛋白结构的改变，可导致细胞对药物吸收的减少，细胞内有效药物浓度降低，其后果就细胞对药物产生耐药性。

对MTX转运的研究认为，耐药性的产生可由于药物与细胞膜结合载体蛋白的亲和力下降，或者细胞所表达的载体蛋白的数量下降。

卵巢癌组织中MDR-1、Wnt-1、FZD-1基因的表达变化及其与化疗耐药的关系

ａｄｔｅｒｌｔｎｈｐｗｉｒｇｒｓｓａｃ．Ｍｅｌｄ６ａｅｆｏａｉｌｃｎｅｅｅｄｖｄｄｉｔｗｒｕｓｔｘｌｃｅ — ｎｈｅａｉｓｉｔｄｕ．ｅｉｔｎｅｏｈｔＯｓ０ｃｓｓｏｖｒｌａｃｒｗｒｉｉｅｎｏｔｏｇｏｐ：ａｏｈｍｏｌａ
ＣｈｎｅａｄｒｌｔｎｈｐｏｘｒｓｉｎｏａｇｎｅａｉｓｉｆｅｐｅｓｏｆＭＤＲ－Ｗｎ－ａｄＦＤ－ｇｎｓｏ１．ｔ１ｎＺ１ｅｅ
ｉａｒｎｏｖｉｃａｎｅｒｔｓｕｔｕｇ・ｅｓｉｔｃｅａｎｃｉｅｗｉｄｒｓｈｒｓａｎ
Ｐ均＜．５；００）但在 Ⅱ组中，Ｒ１和Ｗｎ一、Ｚ．基因的表达无相关性（分别为一００１．３，ＭＤ－ｔＦＤ１１ｒ．９、００１Ｐ均＞００）．５。结论卵巢癌组织中ＭＤ－因有较高的阳性表达率，卵巢癌的化疗耐药有关，Ｄ一基因可能通过抑制Ｒ１基与ＭＲ１
Ｉ组分为先期化疗有效组（Ｉ组）２例和化疗后复发组（ＩＡ２Ｂ组）。采用实时荧光定量Ｒ．Ｃ８例ＴＰＲ技术检测各组
卵巢癌组织中的ＭＤ．、ｔ、Ｚ．因。结果Ｉ组ＭＲ１基因阳性表达率为７％（１３） Ⅱ组为８％Ｒ１Ｗｎ一ＦＤ１基１Ｄ一０２／０，６
Ｌ／ＢｏｗｅＵ — ｎ．Ｈｏｇａｎｘｉ

临床评价MDR (2)

临床评价MDR多药耐药性（Multidrug Resistance, MDR）是指一种疾病在用普通疗法治疗时药物失效的情况。

MDR已经成为当今医学界的一个严重问题，导致难以治疗和控制疾病的蔓延。

，对于MDR的临床评价显得尤为重要。

本文将围绕临床评价MDR 的方法和意义展开论述。

MDR的定义和机制MDR是指疾病在使用常规疗法时出现耐药现象。

耐药性的产生可以通过多种途径，其中最主要的机制是通过细菌、真菌或其他病原体的基因突变来获得。

这些突变使得病原体对抗生素等药物表现出抗性。

临床评价MDR的方法1. 药物敏感性试验药物敏感性试验是常用的评价MDR的方法之一。

它通过将病原体与一系列不同浓度的药物接触，观察其对药物的反应，从而评估病原体对药物的敏感性。

这种方法可以帮助医生确定最佳的治疗方案，针对具体病原体选择最有效的药物。

2. 基因测序分析基因测序分析可以揭示病原体基因组中的各种突变信息。

这些突变可能与药物抵抗力的产生有关。

通过对病原体基因组进行测序，并与基因库进行比对分析，可以找出可能与MDR相关的突变位点。

这种方法有助于了解MDR的发生机制，并为研发新的治疗方法提供依据。

3. 临床病例观察临床病例观察是一种对MDR进行评价的方法。

通过观察患者对治疗的反应，可以初步判断其对于药物的敏感性。

，这种方法受到诸多因素的影响，患者用药的依从性、其他并发症等，并不能作为唯一的评估MDR的方法。

临床评价MDR的意义1. 指导治疗临床评价MDR可以帮助医生选择最适合患者的治疗方案。

通过评估病原体对药物的敏感性，可以选择最有效的药物来治疗疾病。

这样可以减少药物的不必要使用，提高治疗效果，并减少药物耐药性的发展。

2. 防止交叉感染临床评价MDR还可以帮助医院采取相应的感染控制措施，防止病原体的交叉感染。

通过评估病原体对抗生素等药物的敏感性，可以采取相应的隔离措施，减少交叉感染的风险。

3. 指导药物研发临床评价MDR对于药物研发具有重要意义。

肿瘤多药耐药基因 (MDR1)核酸检测试剂盒说明书

CatSA-67021MDR1(RNA)2010(第二版)1/2肿瘤多药耐药基因(MDR1)核酸扩增检测试剂盒说明书(PCR-荧光探针法)【名称】通用名：肿瘤多药耐药基因(MDR1)核酸检测试剂盒说明书英文名：Multidrug Resistance Gene (MDR1)Fluorescence quantitative Polymerase Chain Reaction (PCR)Diagnostic kit 汉语拼音：zhong liu duo yao nai yao ji yin (MDR1)he suan kuo zeng jian ce shi ji he shuo ming shu【目的】本试剂盒适用于检测肿瘤患者新鲜组织、全血等样本中多药耐药基因(MDR1)mRNA ，用于对化疗药物产生耐药的辅助诊断及其病人药物治疗的疗效监控。

其检测结果仅供临床参考。

【原理】本试剂盒选取一对肿瘤多药耐药基因(MDR1)特异性引物和一条特异性荧光杂交探针，应用Trizol 提取RNA ，经逆转录酶作用将RNA 转录成cDNA ，后者在、耐热DNA 聚合酶（Taq 酶）作用下，配以FQ-Buffer(内含Mg 2+、Tris-HCl 等)四种核苷酸单体（dNTPs ）等成分，通过PCR-荧光探针体外扩增法对肿瘤多药耐药基因(MDR1)进行扩增，从而达到快速准确实时定量检测之目的。

【组成】名称数量规格RNA 提取液B 1管500μl/管逆转录酶系1管40μl/管MDR1-RT MIX 2管140μl/管Taq 酶系1管80μl/管MDR1-PCR MIX 1管960μl/管MDR1阳性质控品1管50μl/管(1×107Copies/ml)阴性质控品1管500μl/管DEPC 水1管2000μl/管备注：10×RCLB 、RNA 提取液A (500500μμl Trizol reagents reagents))等另行配备。

多药耐药基因MDR1 mRNA核酸扩增(RT-PCR)

多药耐药基因MDR1 mRNA核酸扩增（RT-PCR）荧光检测试剂盒使用说明书MDR1 mRNA RT-PCR Detection Kit前言多药耐药基因MDR1的表达产物P糖蛋白是一种ATP依赖型膜转运蛋白，它可以将药物及许多其他相关分子从细胞内排出，参与许多正常的生理活动。

MDR1基因在许多肿瘤细胞中均呈高表达，是导致肿瘤细胞对药物产生耐受的重要因素之一。

本试剂盒采用实时荧光定量RT-PCR技术，可以精确检测微量肿瘤组织、外周血及其他组织和体液中细胞的MDR1表达，能够对肿瘤的治疗方案的确定、治疗效果的评价和预后提供帮助，并与其他与MDR1表达相关的科研工作提供有力的工具。

检测标本外周血、骨髓、组织等检测目标胃癌、肝癌、肠癌、肺癌、脑胶质瘤、卵巢癌、白血病等各种肿瘤细胞的多药耐药性试剂盒规格及组成试剂盒规格20次/盒。

试剂盒组成Trizol 12.5ml75%酒精 5mlRT反应液 450µlm-MLV逆转录酶 25µlRNasin 25µlMDR1 PCR反应液 1505µlTaq酶 70µlDEPC-H2O 500µl阴性对照 20µl阳性对照 20µl标准品2支（109copy/ml）稀释液 500μl/支自备试剂、材料1.5ml Eppendorf管、0.5 ml Eppendorf管, 10μl 、200μl 、1000μl吸头（进口,无菌）、氯仿、异丙醇。

（注意：所用的实验器材都要DEPC处理，做到无RNA酶污染）建议：鉴于荧光PCR反应的灵敏度要求，请使用本公司推荐的相应耗材。

标本的采集、处理和保存本试剂盒上适用于外周血有核细胞检测。

静脉血5ml（肝素抗凝）*，用淋巴细胞分离液分离有核细胞，将有核细胞收集到1.5ml 管中（进口,无菌），1,5000rpm离心5min,弃上清，在沉淀中加入Trizol 500μl（请参照Trizol的使用说明书）混匀置室温10分钟，加入氯仿100μl混匀，4 0C 10000rpm 10分钟,吸取上层水相于1.5ml管中,并加入3倍体积的异丙醇（预冷）混匀,置冰上20分钟,离心15000rpm 15分钟（沉淀RNA）。

PPMP调控KBv200细胞株mdr1基因表达逆转其多药耐药

PPMP调控KBv200细胞株mdr1基因表达逆转其多药耐药袁匀;王丽莉;张积仁【期刊名称】《解放军医学杂志》【年(卷),期】2001(026)003【摘要】为研究糖脂合成酶抑制剂苯基棕榈酰胺吗啡丙醇（DL-threo-1-phenyl-2-palmitoylamino-3-morpholino-1-propanol*HCl，PPMP）对人恶性肿瘤多药耐药细胞株KBv200多药耐药mdr1基因的mRNA表达的调控，以及PPMP 对细胞株KBv200的多药耐药性的逆转作用，作者应用体外细胞培养技术对细胞株KBv200进行PPMP处理，用RT-PCR技术分析PPMP处理前后细胞mdr1的mRNA表达，以流式细胞仪检测PPMP处理前后KBv200及其敏感株KB细胞内罗丹明-123的药物浓度变化。

结果显示5μmol/L、15μmol/L PPMP可部分抑制KBv200细胞mdr1 mRNA表达，25μmol/L PPMP可完全抑制KBv200细胞mdr1 mRNA表达；PPMP可增加KBv200细胞内罗丹明荧光强度，随着PPMP 浓度的增加，耐药细胞内的罗丹明荧光强度逐渐增大。

提示PPMP对细胞株KBv200的多药耐药基因mdr1有抑制作用，并可以逆转KBv200的多药耐药性，逆转作用与PPMP浓度呈正相关。

%The current study was designed to investigate the effects of PPMP (DL-threo-1-phenyl-2- palmitoylamino-3-morpholino-1-propanol), a kind of glycolipids synthase inhibitor, on the modulation of mdr1 mRNA expression and the reversing effect of multi-drug resistance by PPMP in human malignancy KBv200cell line. In vitro KBv200 cells were treated with PPMP in different concentration, the alterations of mRNA expression of drug-resistant gene mdr1 in KB(sensitive cell line) and KBv200 (before and after the treatment of PPMP) cells were analyzed by RT-PCR. Intracellular rhodamine(Rh123) concentration was measured by flow cytometry. PPMP was found to inhibit mdr1 gene expression of KBv200 at the mRNA level, and complete inhibition appeared at 25μmol/L PPMP treatment for 48h. PPMP could increase intracellular Rh123 accumulation in resistant cell lines. This modulation of gene expression and Rh123 accumulation was directly correlated with the concentration of PPMP. It suggested that PPMP, a chemical inhibitor of glycolipids synthase, could modulate mdr1 expression at the mRNA level in a content dependent manner, PPMP possesses MDR-reversing activity.【总页数】3页(P163-165)【作者】袁匀;王丽莉;张积仁【作者单位】第一军医大学珠江医院;第一军医大学珠江医院;第一军医大学珠江医院【正文语种】中文【中图分类】R73-34;R73-35【相关文献】1.表没食子儿茶素没食子酸酯逆转多药耐药肝癌细胞株基因表达谱变化 [J], 唐海桦;周铭;张海英;梁钢2.汉防已甲素、罗通定及川芎嗪对肿瘤细胞株KBV200多药耐药性逆转作用的研究 [J], 徐建业;周琦;汤伟3.卵巢癌细胞株COC1/DDP多药耐药逆转对中性鞘糖脂表达的调控作用 [J], 李胜平;王丽莉;张积仁;张健4.靶向mdr1b/mdr1a基因siRNA逆转T24/ADM多药耐药性研究 [J], 刘正清;姚启盛;杨勇;陈从波;龚小新;黄力;王黎5.切割MDR1 RNA的核酶(Ribozyme)对肝癌多药耐药细胞株BEL-7402/DOX化疗耐药性的逆转作用 [J], 王宝成;郭军;顾广玉;师秋丽;狄剑时;姚长樱;植晓燕;徐芳因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

多重耐药菌目标性监测分析总结报告

多重耐药菌目标性监测分析总结报告一、引言多重耐药菌（MDR）在临床医学中越来越成为一个严重的问题。

为了加强对MDR的监测和控制，本次报告对多重耐药菌的目标性监测进行了分析和总结。

二、目的本次目标性监测的主要目的是了解多重耐药菌在不同地区的流行情况、分析其耐药机制以及寻找有针对性的治疗方法。

通过监测分析，可以提供有力的科学依据，为临床治疗和公共卫生决策提供参考。

三、监测方法本次目标性监测采用以下方法：1. 临床标本收集：选择不同类型的标本，包括血液、尿液、呼吸道分泌物等，从不同医院的患者中进行采集，确保样本的代表性。

2. 菌株分离和鉴定：将采集到的标本进行菌落分离和纯化，使用传统方法或分子生物学方法进行菌株的鉴定，确保监测结果的准确性。

3. 药敏试验：采用标准的药敏试验方法，测试不同菌株对多种抗生素的敏感性，记录最小抑菌浓度（MIC）和抗生素的抑菌环直径，为后续的耐药机制分析提供参考。

四、监测结果根据本次目标性监测的结果，我们得出以下结论：1. 多重耐药菌的流行情况：在不同地区的医院，MDR感染范围广泛，涉及多个临床科室和不同类型的标本。

耐药菌株的分布存在一定的地域差异，但普遍存在。

2. 耐药机制分析：通过对不同MDR菌株的耐药机制进行分析，我们发现耐药基因的传播是导致MDR的主要原因之一。

其中，耐药基因的水平传播和可移动性基因元件的介导共同促进了MDR菌株的形成。

3. 治疗方法：根据对多重耐药菌的药敏试验结果，我们发现MDR菌株对大部分传统抗生素具有较高的耐药性。

因此，应该优先选择其他治疗手段，如联合用药、靶向治疗和药物修饰等。

五、建议针对多重耐药菌目标性监测的分析结果，我们提出以下建议：1. 加强监测：不同地区的医院应建立多重耐药菌的监测网络，及时、准确地报告MDR的感染情况，以便制定有效的防控策略。

2. 提高临床规范：医疗机构应加强规范化操作，严格执行手卫生、消毒灭菌和患者隔离等措施，减少多重耐药菌的传播。

多重耐药菌感染的监测分析与防控措施

多重耐药菌感染的监测分析与防控措施随着抗生素的广泛应用，多重耐药菌感染已经成为当今世界范围内的一大公共卫生问题。

多重耐药菌对抗生素的耐药性使得医治感染变得更加困难，严重危害患者的生命安全。

及时的监测分析和有效的防控措施显得尤为重要。

一、多重耐药菌的定义和分类多重耐药菌是指对两种或两种以上的抗菌素具有耐药性的细菌。

按照其抗药谱的扩展程度，多重耐药菌可以分为三种类型：Ⅰ型多重耐药菌（MDR，Multidrug Resistant），即对至少一种抗生素耐药；Ⅱ型多重耐药菌（XDR，Extensively Drug-Resistant），即对多种抗生素耐药；Ⅲ型多重耐药菌（PDR，Pandrug-Resistant），即对所有已知抗生素耐药。

二、多重耐药菌感染监测分析1. 监测对象多重耐药菌感染的监测对象主要包括医院内的患者、医护人员和医疗设施，以及社区环境中的相关标本等。

2. 监测内容（1）多重耐药菌感染的发病情况：对医院内患者发生的多重耐药菌感染进行统计，包括感染类型、部位、病原菌、感染情况等。

（2）多重耐药菌的耐药谱分析：对多重耐药菌的耐药谱进行分析，了解其对各类抗生素的耐药情况，以指导临床用药。

（3）多重耐药菌的传播途径和机制：研究多重耐药菌的传播途径和机制，了解其在医疗环境和社区环境中的传播规律，为制定有效的防控策略提供依据。

3. 监测方法（1）临床标本检验：对临床患者的分泌物、组织等标本进行菌落计数和耐药菌分离鉴定。

（2）分子生物学检测：利用分子生物学技术对多重耐药菌进行分子水平的检测和分析，包括耐药基因检测、耐药菌分子分型等。

（3）环境监测：对医疗机构的医疗设施、空气、水等环境进行定期的监测，了解多重耐药菌的分布情况。

三、多重耐药菌感染的防控措施1. 加强感染控制措施（1）强化手卫生：医护人员和患者必须严格遵守手卫生的规范，避免交叉感染。

（2）严格执行无菌操作：手术室、医疗器械等环境必须保持无菌，避免手术感染。

非常重要的药物基因ABCB1基因介绍

【VIPs 】ABCB1基因简介概述ABCB1 (MDR1)是广泛存在于生命各个领域的三磷酸腺苷(ATP)结合盒(ABC)基因之一，其编码转运蛋白和通道蛋白，起着外排泵的作用，负责细胞内稳态。

ABCB1编码一种长度为1280个氨基酸的蛋白质，称为P-糖蛋白（P-gp ），又称多药耐药蛋白1（MDRP1），是人三磷酸腺苷（ATP ）结合盒（ABC ）转运蛋白超家族中49个公认成员之一，P-gp 的二级结构揭示了该蛋白具有两个同源半体，每个半体均包含六个跨膜结构域和一个核苷酸结合结构域（P-gp 通过磷酸化和N-糖基化进行翻译后修饰）。

P-gp 蛋白结构P-gp 的组织分布及功能P-gp 在屏障和消除器官细胞的质膜中以极化的方式表达，具有保护和排泄功能。

P-gp 在血脑屏障、大肠及小肠的黏膜、睾丸毛细血管上皮细胞、肝细胞、肾上腺及肾近端小管均有表达。

其功能是在ATP供能下，将进入细胞内的底物主动泵出细胞外，已知在许多药物的吸收、分布和排泄中发挥重要作用。

比如：1.P-gp在口服药物的首过消除中发挥了重要作用，通过将药物排出到小肠和结肠的面腔上皮和肝脏的面胆小管来限制其生物利用度。

ABCB1在氯吡格雷的肠道吸收中的作用环节外排2.P-gp限制了底物从血液-组织屏障（例如血-脑，血液-脑脊髓液，血-胎盘，血液-睾丸屏障）的顶侧或浆膜侧向“庇护所”器官的渗透。

3.P-gp在肾上腺皮质的表达被认为在激素运输、体内平衡和糖皮质激素抵抗中发挥作用。

4.在淋巴细胞和其他免疫和血液成分中，P-gp被认为在病毒抵抗和运输细胞因子和包膜病毒中发挥作用。

5.P-gp也被认为对外周和中枢神经系统的类固醇分配和脂质稳态很重要。

6.胞内P-gp已在内质网、囊泡和核膜中检测到，并与功能未知的细胞运输机制有关。

与多药耐药的临床挑战相关，P-gp在许多由癌变组织中过表达。

与P-gp相互作用的化合物P-gp能识别和排出大量结构和生化无关的底物(环的，线性的，碱性的，不带电的，两性离子的，负电荷的，疏水的，芳香的，非芳香的，两性的)，分子量从250到4000不等。

MDR1

然后使用ＭＴＩ＂法检测细胞的增殖活性计算癌细胞的耐药指数；一份组织用于免疫组化检测ＭＤＲ１
和ＴＣＲＰ１蛋白表达；最后一份使用ｑＲＴ — ＰＣＲ定量检测ＭＤＲ１和ＴＣＲＰ１基因表达的情况。结果
分析癌细胞耐药指数与耐药基因之间的相关性发现两者之间存在正相关，其中ＭＤＲ１与癌细胞耐药
有４０份
两个与癌细胞耐药眭相关的重要基因，研究ＭＤＲ１口腔癌组织，经病理证实为鳞癌，每一份癌组织
和ＴＣＲＰ１基因在癌组织中的表达情况可间接反映块分为三份：一份用于原代培养、一份用于免疫细胞的耐药性也可以用于预判化疗的效果『４ｌ。本组化、一份用于ｑＲＴ — ＰＣＲ检测。切取一块癌组织研究旨在观察口腔鳞癌患者癌细胞的耐药性是否置于ＲＰＭＩ１６４０培养液，去除癌组织的脂肪组织、与ＭＤＲ１和ＴＣＲＰ１两种耐药基因存在相关性，从坏死组织和表面污染组织，然后用ＰＢＳ漂洗干净；而为口腔癌患者的合理化疗提供一些依据。
ＤＯＩ：１０．３７６０／ｃｍａ．ｊ．ｉｓｓｎ．１００７－１２４５．２０１５．２２．０１１作者单位：２６６３００胶州市人民医院口腔科
国际医药卫生导报２０１５年第２１卷第２２期
ＩＭＨＧＮ，Ｎｏｖｅｍｂｅｒ２０１５，Ｖｏ１．２１Ｎｏ．２２

ABCG2、MDR1基因表达水平与5-氟尿嘧啶耐药的CD44＋SGC-7901／5-Fu多药耐药关系

ABCG2、MDR1基因表达水平与5-氟尿嘧啶耐药的CD44＋SGC-7901／5-Fu多药耐药关系李跃军;卓德斌【期刊名称】《中国老年学杂志》【年(卷),期】2014(0)18【摘要】目的：探讨乳腺癌耐药蛋白（ABCG2）、P-糖蛋白（MDR1）基因表达水平与5-氟尿嘧啶（5-Fu）耐药的 CD44＋SGC-7901/5-Fu多药耐药关系。

方法采用反复短期暴露并逐步递增药物浓度法建立5-Fu耐药胃癌细胞株SGC7901/5-Fu，鼠抗人CD44抗体，流式细胞术（ FACS）检测分选CD44＋SGC-7901/5-Fu。

四甲基偶氮唑蓝（ MTT）比色法测定SGC-7901/5-Fu、CD44＋SGC-7901/5-Fu 、CD44-SGC-7901/5-Fu细胞5-Fu耐药指数及交叉耐药性。

RT-PCR方法分别检测对数期生长的 SGC-7901、SGC-7901/5-Fu、CD44＋SGC-7901/5-Fu 、CD44-SGC-7901/5-Fu细胞 ABCG2、MDR1 mRNA表达。

结果CD44＋SGC-7901/5-Fu相对于SGC-7901细胞的耐药指数为12．5（P＜0．05），但CD44-SGC-7901/5-Fu相对于SGC-7901细胞的耐药指数为1．2（P＞0．05）。

CD44＋SGC-7901/5-Fu对ADM、MMC和DDP也有交叉耐药性，CD44-SGC-7901/5-Fu对ADM、MMC和DDP无交叉耐药性。

与对照组（正常SGC-790）细胞比较，ABCG2、MDR1在5-Fu耐药的 SGC-7901细胞株中表达明显增强（P＜0．05）。

与5-Fu 耐药的 SGC-7901细胞株比较， CD44＋SGC-7901/5-Fu细胞株ABCG2、MDR1表达继续增加（P＜0．05）；。

与5-Fu耐药的 SGC-7901细胞株比较，CD44-SGC-7901/5-Fu细胞 ABCG2、MDR1表达差别无统计学意义（ P＞0．05）。

多重耐药菌的检测与控制策略

多重耐药菌的检测与控制策略多重耐药菌（MDR）是指具有对多种不同类型抗生素产生耐药能力的细菌。

由于MDR的出现给传统的治疗方法带来了巨大的挑战，因此，及早检测和有效控制MDR的传播变得至关重要。

本文将讨论多重耐药菌的检测方法以及采取的控制策略。

一、多重耐药菌的检测方法1. 基因测序方法基因测序是一种高效而准确的检测方法，通过直接检测细菌基因组中的耐药基因，可以确定细菌是否具有耐药能力。

同时，基因测序还能提供有关耐药基因的详细信息，帮助临床医生选择更有效的抗生素治疗方案。

2. 免疫测定方法免疫测定方法是通过检测细菌表面的特定蛋白质或者抗生素代谢产物来确定细菌的存在与否。

免疫测定方法具有快速、简单的特点，并且可以在现场进行测试，对于快速筛查多重耐药菌是一种有效的方法。

3. 传统培养方法传统培养方法是一种常用且可靠的细菌检测方法，通过将样品进行培养，待菌落形成后进行鉴定和抗生素敏感性测试。

虽然传统培养方法耗时较长，但仍然被广泛应用于多重耐药菌的检测中。

二、多重耐药菌的控制策略1. 加强感染控制措施医疗机构是多重耐药菌传播的高风险区域，因此加强感染控制措施是防止MDR传播的重要策略之一。

医疗机构应设立明确的感染控制团队，建立健全的感染控制方案和操作规范，并加强培训，提高医护人员的意识。

2. 合理使用抗生素过度和不合理使用抗生素是导致MDR快速传播的主要原因之一。

为了减少MDR的发生，医疗机构应该建立抗生素管理委员会，制定合理的抗生素使用指南，并加强抗生素使用的监测和审查。

3. 提倡手卫生和环境清洁多重耐药菌可以通过接触传播，因此，加强手卫生和环境清洁是控制MDR传播的重要措施。

医护人员应定期进行手卫生培训，提高个人卫生意识。

此外，医疗机构应加强环境清洁，特别是对高风险区域进行定期消毒。

4. 定期筛查和监测定期筛查和监测是早期发现和控制MDR传播的关键。

医疗机构应建立健全的筛查和监测机制，定期对患者和医护人员进行多重耐药菌的筛查，并及时采取相应的隔离措施和治疗措施。

结核分枝杆菌的耐药性及检测方法

结核分枝杆菌的耐药性及检测方法结核病是一种由结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis）引起的慢性传染病，主要累及肺部，但也可侵犯其他器官。

然而，近年来出现了结核分枝杆菌对抗生素的耐药性问题，给结核病的防治带来了巨大挑战。

本文将就结核分枝杆菌的耐药性机制以及常用的检测方法进行论述。

一、耐药性机制1.多重耐药（MDR）多重耐药是指结核分枝杆菌对两种最主要的抗结核药物——异烟肼和利福平同时产生耐药现象。

这种耐药形式使得传统治疗手段无法有效控制感染，并且增加了传播风险。

2.延迟耐药（XDR）延迟耐药是在MDR基础上，又产生对氟喹诺酮类等二线抗结核药物的耐药性。

这使得治疗选择更加有限，且通常需要使用更昂贵和毒副作用更大的抗结核药物。

3.全耐药（TDR）全耐药是指对所有一线和二线抗结核药物都产生耐药现象，这种情况下仅能依靠其他的药物才能进行治疗。

然而，这些替代治疗方案费用昂贵且可行性有限。

二、检测方法1.传统的抗生素敏感性测试传统的抗生素敏感性试验使用培养分枝杆菌，并将其接种于含有抗生素的琼脂平板上。

通过观察细菌在不同浓度抗生素下的生长情况来判断其对该抗生素是否具有耐药性。

尽管这种方法简单易行，但其确诊时间较长，且容易出现误判。

2.分子检测方法随着分子生物学技术的进步，利用PCR技术可以更快速地检测结核分枝杆菌的耐药基因突变。

这种方法通过检测与耐药性相关基因序列的存在与否来确定细菌对特定抗生素是否具有耐药性。

由于PCR技术高灵敏度和高特异性，它已成为常用的结核分枝杆菌耐药性检测方法之一。

3.流式细胞术流式细胞术利用荧光标记的结核分枝杆菌单个细胞对特定抗生素的反应进行测定。

通过测量细胞内荧光信号的变化来判断其对抗生素是否产生了耐药性。

这种方法具有高通量和快速的优势，但需要对样本进行前期处理以获得单个菌落。

4.质谱法质谱法利用MALDI-TOF质谱仪检测结核菌代谢产物图谱与数据库匹配，从而快速确定结核分枝杆菌的耐药类型。

多药耐药基因的临床意义与检测方法

多药耐药基因的临床意义与检测方法1MDR概念肿瘤细胞耐药性可分为内在性耐药(intrinsic drug resistance)和获得性耐药(acquired drug resistance)两类，既原发地存在于某些肿瘤中，称内在性耐药；继发于化疗后，称获得性耐药。

根据耐药谱可分为原药耐药(primary drug resistance,PDR)和多药耐药(multidrug resistance,MDR)。

PDR只对诱导原药产生耐药，而对其它药物不产生交叉耐药。

而MDR是一种药物诱发，而同时对其它多种结构和作用机制完全不同抗癌药物产生交叉耐药。

内在性耐药原因仍不清楚，而获得性耐药是由于变异耐药肿瘤细胞亚群过渡生长所致。

内在性耐药与获得性耐药作为一种独特耐药现象是成功地治疗肿瘤关键性难题，因而成为近几年国内外研究和探索热点。

2MDR耐药机制1970年Biedler和Riehm首先描述了MDR表型：一种药物诱导产生耐药细胞株可用对其它多种化学结构和功能完全不同化疗药物产生耐药。

他们发现对放线菌D耐药细胞，同时也对多种抗肿瘤抗生素如柔红霉素等，以及结构与作用机制迥异植物碱类抗肿瘤药如长春新碱等交叉耐药。

1976年，Juliano等最先在耐药中国苍鼠卵巢细胞中发现一种新与耐药程度呈数量关系高分子量细胞膜糖蛋白，命名为P糖蛋白(p-glycopratain,p-gp)。

因其分子量为170kda，又名pgp170，认为此蛋白可降低细胞膜对药物通透性而引起耐药。

后来又陆续研究发现在不同来源多药耐药细胞中这种P糖蛋白分子量范围在130～180kda，主要集中在150～180kda，它由多药耐药基因MDR编码。

近十几年，国外已从耐药肿瘤细胞株中分离出耐药基因MDR1和它表达P糖蛋白。

1986年chen等克隆了编码P糖蛋白cDNA［2］。

2.1MDR基因家族在哺乳动物，MDR基因是一较小相对保守基因家族。

在人类基因组中，它含有两个基因MDR1和MDR2，在啮齿类由三个基因组成：MDR1，MD R2，MDR3。

MDR1、PEDF、LRP在宫颈癌中的表达及意义

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中国现代医学杂志
第 31 卷
宫颈癌是女性第 4 大常见恶性肿瘤，占全球女性癌症死亡人数的 7.5%，持续的人乳头瘤病毒（human papilloma virus, HPV）感染是宫颈癌发生的主要原因[1]。我国近年宫颈癌的发生率逐年升高，且呈年轻化趋势[2-3]。多药耐药基因 1（multidrug resistance gene 1, MDR1）是一种高度多态性的基因，是人体内主要的药物转运蛋白 P-糖蛋白的编码基因。包括顺铂在内的亲脂性抗肿瘤药可以诱导 MDR1 的表达。色素上皮源性因子（pigment epithelium-derived factor, PEDF）是一种内源性糖蛋白，具有促进肿瘤细胞凋亡、分化、抑制增殖和血管生成的作用。肺耐药蛋白（lung resistance-related protein, LRP）是与 MDR1 呈正相关的药物外排转运蛋白，在药物抵抗中有重要作用[4]。本研究采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）及免疫组织化学法检测 MDR1、PEDF 和 LRP 在宫颈癌组织和正常宫颈组织的表达，探讨其表达水平与宫颈癌临床特征和预后的关系，为宫颈癌的治疗提供新的思路。
表达的宫颈癌患者5年总生存率低于MDR1和LRP低表达的宫颈癌患者（P <0.05）；PEDF 高表达的宫颈癌患者
5年生存率高于PEDF低表达的宫颈癌患者（P <0.05）。结论 MDR1和LRP在宫颈癌中高表达，PEDF在宫颈癌

全年多重耐药菌监测与分析

多重耐药菌（MDR）是指对多种抗生素耐药的细菌，其对抗生素的敏感性大大减弱。

由于MDR菌株的出现，给临床治疗和公共卫生带来了挑战。

为了全面了解MDR菌株的分布和变化趋势，进行全年多重耐药菌监测与分析是必要的。

在全年多重耐药菌监测中，首先需要选择合适的监测对象。

常见的MDR菌株包括金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、大肠杆菌等。

在每个季度的监测中，可以根据不同地区和临床科室的需求，选择不同的细菌种类进行监测。

其次，需要建立一个完善的监测体系。

监测体系应包括标准化的取样方法和标准化的实验流程。

取样时应注意避免交叉感染，同时要确保取样的准确性和完整性。

实验流程中的每个步骤都要按照国家标准执行，以保证实验结果的可靠性。

在监测过程中，需要对不同地区、不同临床科室的MDR菌株进行分类和统计。

可以按照细菌种类、抗生素耐药性状、临床科室等因素进行分类。

同时，还可以对不同季度的监测结果进行比较和分析，以了解MDR菌株的变化趋势。

对于MDR菌株的分析应包括抗生素敏感性测试和耐药机制的研究。

抗生素敏感性测试可以通过药敏试验或股巧板法进行。

通过这些方法可以确定不同MDR菌株对不同抗生素的敏感性，从而为临床治疗提供参考。

耐药机制的研究可以通过分子生物学方法进行。

通过检测MDR菌株中的耐药基因、耐药突变等，可以了解MDR菌株的耐药机制，并为预防和控制提供重要依据。

综上所述，全年多重耐药菌监测与分析对于了解MDR菌株的分布和变化趋势具有重要意义。

通过建立完善的监测体系，选择合适的监测对象，进行抗生素敏感性测试和耐药机制的研究，可以为MDR菌株的预防和控制提供科学依据。

靶向多药耐药基因mdr1 RNA干扰载体的构建及鉴定

由ｓＮｉＡ及ｍｃｏＮｍｉＮ两种形式的小ＲＡＲｉＲＡ（ＲＡ）ｒＮ
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根据Ｇｎａｋ中人ｍｄｌｍＮ序列，Ｉ— ｅＢｎｒＲＡ用ｎ
ｖｒｇｎ公司网站在线设计软件设计并经ＢＡＴ序ｉｏｅｔＬＳ列比对软件进行同源性分析，中筛选出４对编码从ｍｒｐｅｍｉＮ的单链寡核苷酸并交由上海生工ｄｌｒ— ＲＡ
ｏｉｇｅｓｒｄｄｏｉｏｕｌｏｉｅｎｏｉｇｍｄｌｐｅｍｉＡｅｕｎｅｗｒｅｉｎｄａｄｓｎｈｓｅ．Ａｔｒａｎａｉｇｉｆｓｎｌ— ｔｎａｅｌｎｃｅｔｓｅｃｄｎｒｒ — ＲＮｓｑｅｃｅｅｄｓｇｅｎｙｔｅｉｄｇｄｚｆｅｌ，ｓｅｎｎｔ
ＹＮＧＫｕＡｅ— ｕＡｎ，ＧＯＭｉａ，ＬＵＸｉｎ－ｉｇ，ＳＩＡ — ｕｈＩａｇｐｎＵｉａｈ
（ｆｌｔｏｉｌＭｅｉｌｏｌｅｉｇａ１ＡｉｅＨｓｔ，ｄｃｌｇ，ＱｎｄｏｉｆａｄｐａａＣｅ
维普资讯
山东医药２００８年第４８卷第ｌ８期
靶向多药耐药基因ｍｒＲＡ干扰ｄｌＮ载体的构建及鉴定
杨垄高美华，相萍隋爱华。刘，（１青岛大学医学院附属医院，山东青岛２６０；６０３２青岛大学医学院）
ｗｒｎｅｔｄｉｔＲＮＡｉｔｒｒｎｅｖｃｏｅｅｅｉｓｒｎｏｍｉｅｎｅｅｅｃｅｔｒＤＮＡ．－ｆｐ６２ＧＷ／ｍＧＦｍｉＥＰ— Ｒ，ｃｎｔｃｅｅＩｉａｔｅｔｒｎｈｎｗｅｅｏｓｒｔｄｒｃｍｂｎｎｃｏｓａｄｔｅｒｕ￣ｖ

多药耐药基因MDR1转染胎盘源间充质干细胞的研究

１０４，ｈａ２ＤｐｒｅｔｆＰｅｓ，ｔａｏｙＨｓｉｌＪｉＵｖｓｙＪｉＣａｃｕ３０１Ｃｉ）３０１Ｃｉ；．ｅａｔｎｏｌｏｉＳｍｗｌｏｔｉｎｎｅｉ，ｉｈｎｈｎ１０４，ｎｎｍｒｓｏｇｐａｏｌｉｒｔｌｆｎｇｈａ
王博蔚刘志辉郑万平，，，孙连英。
（．１吉林大学第二医院妇产科，吉林长春１０４；．３０１２吉林大学口腔医院修复科；．３长春市高新区生殖保健院）摘要：目的将全长外源多药耐药基因转入间充质干细胞使其外源基因得以表达。方法从胎盘组织中分离培
ＡｓａｔＯｊｃｖｂｔｃ：ｂｅｔｅｒｉ
绿色荧光显微镜可观测到转染后间充质干细胞ｍｄｌｒ逆转录病毒载
有绿色荧光蛋白的表达，ｅｔｌｔｗｓｒｂｏ检测到全长多药耐药基因编码的Ｐｅｅｉｎ￣ｃｌｙＴｅｅｏｏｉｌＪｉＵｉｒｔ，ｉｈｎｃｕｆＯｓｔｃａｄＣｅｎ，ｈｃｎＨｓｔｉｎｎｖｓｙＪｉＣａｈｎｔｒｓ４ｏｇＳｄｐａｏｌｅｉｌｆｎｇ
ＫｅｒｓｍｅｅｅｙｌｔｍｅｌＭＤＲ；ｅｅｔｎｆｔｙｗｏｄ：ｓｎｈｍａｅｃｌ；ｓｇｎ；ａｓｅｒｃ
（ｈｂ脚ＣｉＪＬｎａ
，０８１：８７２０，２０５）
间充质干细胞（ｅｅｃｙａｓｍｃｎＭＳ）一类具有ｍｓｈｍｌｔｅ，Ｃ是ｎｅ多向分化潜能的组织干细胞，内外的实验证实，相关供体不

多耐药基因(MDR1)在宫颈癌组织中的表达及临床意义

多耐药基因（MDR1）在宫颈癌组织中的表达及临床意义目的探讨多耐药基因（MDR1）在宫颈癌组织中的表达及临床意义。

方法免疫组化法检测78例中、晚期宫颈癌组织微阵列芯片标本中MDR1表达，探讨其与宫颈癌临床病理特征的关系。

结果78例宫颈癌组织中MDR1阳性表达率为85.6%，随着FIGO分期的变晚、淋巴转移的出现、分化程度的降低，MDR1的表达逐渐增高。

结论MDR1在宫颈癌组织中表达可能与宫颈癌的侵袭、转移和进展密切相关。

标签：子宫颈癌；MDR1基因；耐药；表达宫颈癌是全球女性第二高发癌症，每年有52.9万例新发病例，50%发生于发展中国家[1]，发病率仅次于乳腺癌，严重危害着女性的身心健康，近27.4万女性死于该病[2-3]。

其中侵袭、转移被认为是宫颈癌患者死亡的重要原因，是影响患者预后的独立因素。

因此研究与宫颈癌侵袭、转移的相关因素具有重要意义。

多药耐药（muhidrugresistance，MDR）指的是腫瘤细胞对一种抗肿瘤药物产生耐药性的同时，对结构和作用机制完全不同的抗肿瘤药物产生交叉耐药性[4]。

本研究采用免疫组织化学方法检测MDR1在中、晚期宫颈癌组织中的表达，分析MDR与中晚期宫颈癌临床病理之间的关系，探讨MDR1在宫颈癌侵袭、转移和进展中的作用。

1 资料与方法1.1一般资料宫颈癌组织微阵列芯片购自西安艾丽娜生物科技有限公司，组织芯片的病理学诊断由两个独立的病理科医师一致得出。

芯片组织标本由宫颈活检病理确诊，按照国际妇产科联盟（FIGO）2009年修订的宫颈肿瘤分期标准，Ⅱ期43例，Ⅲ期22例，Ⅳ期13例（含淋巴结转移癌8例）。

1例正常宫颈腺体作为阴性对照，年龄为47岁。

另有一例粘液表皮样癌，不进入统计。

有1例标本无组织学分级资料。

山羊血清、HRP-山羊抗兔二抗均购自康为世纪、兔抗人MDR、DAB显色试剂盒、苏木素染色剂、中性树胶均够自博士德。

1.2免疫组化法检测MDR在宫颈癌组织中的表达切片常规烘烤、脱蜡、水化、抗原修复、山羊血清室温封闭1h，每张切片分别滴加0.01M PBS按1：100稀释的兔抗人MDR一抗，4℃过夜，滴加生物素标记的二抗300μl，室温避光孵育30min，滴加DAB显色液液300μl，苏木素复染、常规脱水、透明、中性树胶封片、读片。