总胆红素测定试剂盒(重氮盐法)产品技术要求jiuqiang

总胆红素(TBIL)测定试剂盒(重氮法)产品技术要求百奥泰康

总胆红素（TBIL）测定试剂盒（重氮法）适用范围：该试剂盒用于体外定量测定人血清中总胆红素的浓度。

1.1 产品规格1.2 组成成分该试剂盒由试剂1（R1）、试剂2（R2）和校准品（选配）组成。

1.2.1试剂组成试剂1: 对氨基苯磺酸≥10.0mmol/L 十六烷基三甲基溴化铵≥5.0mmol/L试剂2: 亚硝酸钠≥1.0mmol/L 1.2.2 校准品组成牛血清总胆红素目标浓度：200μmol/L该校准品为牛血清基质冻干品2.1 外观a) R1应为无色溶液，无混浊，无未溶解物。

b) R2应为无色溶液，无混浊，无未溶解物。

c) 校准品应为白色至淡黄色固体。

2.2 净含量液体组分不少于标示值。

2.3 试剂空白2.3.1试剂空白吸光度应不大于0.050。

2.4 分析灵敏度TBIL试剂盒测定浓度100.0μmol/L的被测物时，吸光度差值（ΔA）应不小于0.050。

2.5 准确度用纯品测定回收率，应在85%-115%之间。

2.6 精密度2.6.1重复性变异系数应不大于5%。

2.6.2批间差批间相对极差（R）应不大于10%。

2.6.3校准品批内瓶间差测试校准品，所得结果的批内瓶间差应不大于5%。

2.7 线性在（0,427.0]μmol/L范围内，TBIL试剂盒的线性相关系数r应不低于0.9900；在（0,50.0]范围内绝对偏差应不超过5.0μmol/L，在(50.0,427.0]范围内相对偏差应不超过±10%。

2.8校准品溯源性依据GB/T21415-2008《体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品控制物质赋值的计量学溯源性》及有关规定提供总胆红素校准品的来源、赋值过程以及测量不确定度等内容。

校准品溯源至国家参考物质GBW(E)090002。

2.9稳定性2.9.1校准品复溶稳定性校准品复溶后，在2℃～8℃密封保存24小时，测试试剂盒准确度，应符合2.5的要求。

2.9.2 试剂盒稳定性原包装的TBIL试剂盒在2℃～8℃避光保存，有效期为18个月。

总胆红素(T—BIL)测定试剂盒(化学氧化法)产品技术要求深圳锦瑞

医疗器械产品技术要求编号：
总胆红素（T-BIL）测定试剂盒
（化学氧化法）
2.性能指标
2.1外观和性状
试剂R1应为无色澄清液体，R2应为无色澄清液体，均无沉淀、悬浮物和絮状物。

2.2装量
液体试剂的净含量应不少于试剂盒上的标示值。

2.3试剂空白度
<0.1A。

试剂以蒸馏水为空白时，在37 ℃ 1 ℃下，吸光度A
450 nm(光径1cm)
2.4分析灵敏度
试剂（盒）测试15 μmol/L被测物时，吸光度值差值（△A）应不小于0.02A。

2.5线性范围
2.5.1试剂盒在（2～685.0）μmol/L范围内，其回归系数r≥0.990。

2.5.2线性的相对偏差或绝对偏差应符合表 2 要求。

表1 相对偏差或绝对偏差
2.6测量精密度
2.6.1试剂重复性的变异系数：CV ≤ 4%。

2.6.2试剂盒批间差相对偏差（R）≤ 5%。

2.7准确度
相对偏差应≤±10%。

— 1 —。

总胆红素测定试剂盒(重氮法)

总胆红素测定试剂盒（重氮法）一、胆红素的代谢正常人血中胆红素来源有以下几种（1）大部分来自于衰老RBC破坏后的Hb衍化而成（2）小部分来自于非Hb的血红素蛋白质的血红素辅基分解，即分路胆红素（3）极少部分来自于骨髓无效造血所产生的胆红素胆红素与ALB结合后为肝细胞摄取并转变为水溶性的结合胆红素，排至胆汁中，结合胆红素在肠道中被细菌作用还原成尿胆原，在肠道被吸收入门静脉，大部分肠肝循环，另一部分入体循环，经肾排泄入尿。

因此，在胆红素代谢的上述途径中有任一环节受阻，均可导致结合或非结合胆红素升高而产生黄疸。

二、胆红素测定的意义测定胆红素有助于鉴别溶血性黄疸，肝细胞性黄疸及梗阻性黄疸联合其它检测项目还可鉴别肝内淤胆和肝外梗阻性黄疸溶血性黄疸肝细胞性黄疸梗阻性黄疸血浆总胆红素（mg/dl）＜5 1-70 不完全梗阻10~15，完全梗阻20~30未结合胆红素高度增加增加增加结合胆红素正常增加高度增加尿胆素定性阴性阳性强阳性尿中胆素原增多不定或升高减少或消失粪中胆素原增多减少减少或消失三、测定原理血清中结合胆红素可直接与重氮试剂反应产生偶氮胆红素，所以称为直胆，又称1min胆红素测定，非结合胆红素测定时要以咖啡因、苯甲酸钠为加速剂破坏胆红素氢键再与重氮试剂反应，抗坏血酸破坏剩余重氮试剂，加入碱性酒石酸钠使最大吸光度由530nm转到598nm，非胆红素的黄色色素及其它红色与棕色色素产生的吸光度降至可忽略不计，使灵敏度和特异性升高，最后形成的绿色是由兰色的碱性偶氮胆红素和咖啡因与对氨基苯磺酸之间形成的黄色色素混合而成。

试剂：（1）咖啡因（2）碱性酒石酸钠液（3）亚硝酸钠液（4）对氨基苯磺酸溶液（5）重氮试剂（将3、4混合）（6）5g/L NaN3 （7）胆红素标准液操作：总胆管结合管对照管血清（ml） 0.2 0.2 0.2咖啡因-苯甲酸钠试剂（ml） 1.6 1.6对氨基苯磺酸溶液（ml） 0.4重氮试剂（ml） 0.4 0.4混匀后，总胆管置室温10min，结胆管置37℃1minNaN3（ml） 0.05咖啡因-苯甲酸钠试剂（ml） 1.55碱性酒石酸钠溶液 1.2 1.2 1.2以对照调零，测各管A600，查标准曲线正常参考值：血总胆红素 5.1~19umol/L(0.3~1.1mg/dl)血清结合胆红素 1.7~6.8umol/L(0.1~0.4mg/dl)四、方法与评价本法稳定性好、灵敏度高、轻度溶血无影响胆红素对光敏感，标本与标准品应避光，血脂会干扰测定，因此应取空腹血。

生化类复合质控品产品技术要求中生北控

生化类复合质控品适用范围：本产品在临床医学上用于临床检验实验室中生化检测项目的室内质量控制，检测临床化学分析仪测定的准确度和精密度。

具体项目为：α1-酸性糖蛋白（AAG）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、白蛋白（ALB）、碱性磷酸酶（ALP）、α-淀粉酶（AMY）、胰淀粉酶（P-AMY）、载脂蛋白A1（APOA1）、载脂蛋白B （APOB）、抗链球菌溶血素O（ASO）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、钙（Ca）、C-反应蛋白（CRP）、超敏C-反应蛋白（HS-CRP）、氯（Cl）、胆碱酯酶（CHE）、胆固醇（CHO）、补体C3（C3）、补体C4（C4）、肌酸激酶（CK）、肌酸激酶MB同工酶（CK-MB）、酶法肌酐（CreE）、苦味酸法肌酐（CreK）、重氮盐法直接胆红素（D.Bili）、钒酸盐法直接胆红素（D.Bili）、铁蛋白（Ferritin）、葡萄糖（Glu-GOD）、葡萄糖（Glu-HK）、谷氨酸脱氢酶（GLDH）、γ-谷氨酰基转移酶（GGT）、a-羟丁酸脱氢酶（HBDH）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、结合珠蛋白（HP）、免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白M （IgM）、铁（Iron）、乳酸脱氢酶（LDH）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、锂（Li）、脂肪酶（Lip）、镁（Mg）、磷（P）、钾（K）、前白蛋白（PA）、钠（Na）、重氮盐法总胆红素（T.Bili）、钒酸盐法总胆红素（T.Bili）、总蛋白（TP）、转铁蛋白（TF）、甘油三酯（TG）、尿素（Urea）、尿酸（UA）。

1.1规格冻干粉型5mL×1（水平1）；3mL×1（水平1）；5mL×1（水平2）；3mL×1（水平2）；5mL×2(水平1,水平2)；5mL×6(水平1,水平2)；3mL×2(水平1,水平2)；3mL×6(水平1,水平2)。

总胆汁酸测定试纸(干化学法)产品技术要求参考

医疗器械产品技术要求编号
总胆汁酸测定试纸（干化学法）
1.产品型号/规格及其划分说明
1.1组成成分
产品由试纸、ID芯片和说明书组成。

试纸由手持区、加样孔、扩散层、试剂层、显色层组成。

试纸主要成分包括3α-HSD、DI、Thio-NAD。

ID芯片含试纸批号信息及校准曲线信息。

1.2型号规格
铝箔袋单人份包装：10人份/盒、20人份/盒、25人份/盒、30人
份/盒、40人份/盒、50人份/盒和100人份/盒。

密封筒包装：
100人份/盒（25人份/筒×4筒、20人份/筒×5筒）；200人份/
盒（25人份/筒×8筒、20人份/筒×10筒）。

1.3适用范围
用于定量检测血清、血浆中总胆汁酸(TBA)的浓度。

临床上
主要用于肝胆系统疾病的辅助诊断。

2.性能指标
2.1外观检查
2.1.1试纸外观：试纸上下支持层粘贴紧密，测试孔位置正确，显色孔光洁
无划痕。

2.1.2试剂盒外观：印刷准确，完好无损。

试纸筒、ID卡及说明书齐全。

2.2物理检查
试纸宽度为10mm±0.2mm。

2.3精密度
2.3.1批内精密度≤15%。

2.3.2批间精密度≤15%。

2.4准确度
相对偏差在±15%内。

2.5线性范围
在8μmol/L～300μmol/L范围内，线性相关系数r≥0.975；
2.6空白限
不高于4μmol/L。

1。

三种总胆红素常规检测方法的比较

基础医学B a s i c M e d i c i n e35正常人体胆红素主要来自血中衰老的红细胞。

红细胞平均寿命为120天，衰老的红细胞所释放的血红蛋白在体内经过一系列的代谢，最后变成胆红素，分为非结合胆红素与结合胆红素，分别从大、小便中排出。

正常时血液中只含有微量的胆红素。

胆红素的研究是临床医学中古老而又重要的课题。

血清胆红素测定是肝、胆功能检查中的一项重要检测项目。

重氮盐法检测胆红素被临床实验室广泛采用，但该法易受许多因素的干扰、试剂无法长期稳定，在疾病诊断中受到一定的影响。

随着全自动生化分析仪的普及和应用，要求不断推出新的胆红素测定方法[1]。

钒酸氧化法容易污染仪器，对别的测试产生影响[2]。

总胆红素的酶法测定早有报道，其方法学较为成熟，操作简便，快速准确，试剂可以长期稳定，特异性好，干扰少，但因为酶的来源、纯度、稳定性及一个波长测定不同胆红素成分等问题，应用具有局限性，在临床实际应用中未能得到推广。

提高酶法胆红素测定特异性的关键是选择BO D 对胆红素特异性氧化的反应条件，尽可能地加快B O D 对直接胆红素和间接胆红素的氧化。

复星长征公司研究出的产品跟重氮试剂的临床相关性较好。

1材料和方法1.1材料1.1.1重氮盐法检测试剂盒（罗氏公司）；钒酸氧化法检测试剂盒（北京利德曼生化技术有限公司）；酶法检测试剂盒（复星长征公司）。

1.1.2仪器A U 400全自动生化分析仪。

1.1.3标准与质控品标准品采用试剂配套校准品定值质控液（R A N D O X ）cl i nqa 定值血清。

1.2方法1.2.1测定方法几种总胆红素测定方法按试剂说明书进行操作。

1.2.2干扰液的制备脂肪乳干扰液：临床用50%的脂肪乳剂，以生理盐水10倍稀释到5%。

血红蛋白干扰液的制备：抽取4m l 新鲜血液置于生理盐水试管中，用生理盐水反复洗涤数次后，加入蒸馏水反复摇匀，使红细胞完全溶解（镜下瑞氏染色检查），离心沉淀后吸取上清液。

总胆红素检测试剂盒

◆许可证号：浙食药监械生产许20090029号 ◆产品注册号： ◆产品标准号: -20093.4~21.7μmol/L（参照《全国临床检验操作规程》，建议各实验室建立自己的参考范围）检验结果的解释本法的检测范围为0~400μmol/L ，当样品测定值超过上限，应将样品用生理盐水进行稀释，重新测定，结果乘以稀释倍数。

检验结果的局限性1、当样品中抗坏血酸浓度≥1704μmol/L ，血红蛋白浓度≥4.0g/L ，甘油三酯浓度≥20mmol/L 时对测定结果又干扰。

2、血清中TBIL 的测定只是临床医师对患者进行诊断的指标之一，临床医师还要根据患者的体症、病史以及其他诊断项目、诊断手段进行综合判断。

产品性能指标1、线性范围：0~400μmol/L （相关系数r ≥0.99）2、重复性：测量精密度CV ≤4%、批间差≤8%3、准确度：相对偏差＜10%注意事项1、试剂盒样品用量可因仪器要求不同，按比例增减，计算公式不变。

2、本试剂仅供体外诊断用，试剂产生的废液及使用后难以降解的包装材料应集中收集后交当地废物处理站处理。

3、试剂使用后立即盖紧瓶盖，避免污染。

4、不同方法学试剂的质量控制结果之间会存在差异，使用时请确保质控选择与试剂的方法学保持一致。

5、不同批号的试剂不建议混用，如混用应重新校准。

参考文献1、叶应妩,王毓三.全国临床检验操作规程[M],3版.南京:东南大学出版社.,2006:452-457.2、德田邦明，古本和仁：临床化学22（2），116-122（1993）。

总胆红素检测试剂盒说明书（氧化法）企业名称：温州市维日康生物科技有限公司生产地址：温州市瓯海区娄桥工业园园一路邮政编码：325000 电话：0577- 86585999 86585666 传真：0577- 86581858 网址：邮箱：weirikan@感谢您使用我们的产品，使用前请仔细阅读此说明书总胆红素检测试剂盒说明书（氧化法）产品名称1、中文名称：总胆红素检测试剂盒（氧化法）2、英文名称：Total Bilirubin Determine Reagent Kit(Oxidation method)3、英文缩写：TBIL或TB包装规格预期用途本试剂盒用于体外定量检测人血清中总胆红素（TBIL）的含量。

检验科生化总胆红素测定的标准操作规程

总胆红素测定的标准操作规程【目的】体外检测血清总胆红素(DBIL)的含量。

【职责】1.实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP，室负责人监督落实。

2.本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：室负责人、科主任。

【标本类型及实验前准备】1.受检者的准备病人空腹12h，不饮酒24h后采集血样。

体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。

注意有无应用影响测试项目的药物。

此外，对于体检者，采血的季节都应做相关记录，因为样本中各项目的含量有季节性变动，为了前后比较应在每年同一季节检验。

对于体检对象抽血前应有2周时间保持平时的饮食习惯，应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。

2.静脉采血除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。

体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。

在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带。

【仪器设备】东芝TBA-FX8全自动生化分析仪，低速离心机一、检测原理钒酸盐胆红素胆绿素PH3.0测定钒酸盐作用前后吸光度差异，可求得标本中总胆红素的浓度。

二、试剂1.试剂本科使用北京利德曼生化股份有限公司TBiL试剂盒，为液体双试剂，各组分如下：1.校准要求使用去离子水与校准品两点定标，详见说明书；正常情况下，应每两周对测定进行一次校准。

三、操作1.测定（试剂准备液体试剂，直接使用，无需配制。

）四、计算TBIL=校准液浓度（△A=A2-A1）X CA标准/AA校准）五、质控程序1.建议采用朗道水平2（正常范围质控）和水平3 （病理范围质控）两个水平的血清进行室内质控。

2.可接受性判断质控物的检测值应在给定质控范围，或可以通过参加卫生部室间质评对实验室的运作情况进行系统评估。

3.质控操作每日进行样本检测之前首先应进行质控操作，以考察系统的在控情况。

如果检测结果符合质控要求则进行样本操作；如果不符合质控要求，则应重复质控操作，以排除可能发生的偶然误差；如果仍不符合质控要求，则应考虑质控品的重新准备、试剂的重新校准或更新、仪器的维护等。

直接胆红素测定试剂盒(重氮盐法)产品技术要求中生北控

直接胆红素测定试剂盒（重氮盐法）适用范围：用于体外定量测定人血清中直接胆红素的浓度。

1.1 包装规格试剂1（R1）：65mL×2，试剂2（R2）：8mL×4，试剂2a（R2a）：5mL×1；试剂1（R1）：40mL×1，试剂2（R2）：10mL×1，试剂2a（R2a）：2mL ×1；试剂1（R1）：18mL×4，试剂2（R2）：18mL×1，试剂2a（R2a）：3mL ×1；校准品（选配）：2mL×1。

1.2 主要组成成分1.2.1 试剂1（R1）（液体）EDTA 1.0mmol/L 1.2.2 试剂2（R2）（液体）对氨基苯磺酸 2.6mmol/L盐酸 17mmol/L1.2.3 试剂2a（R2a）（液体）亚硝酸钠25mmol/L1.2.4 校准品（冻干粉）磷酸盐缓冲液10mmol/L、二牛磺酸胆红素，目标浓度：26.0μmol/L。

（每批定值，值有批特异性，详见值单）2.1 外观试剂盒中各组件的外观应满足：2.1.1 试剂1（R1）应为无色透明溶液，无杂质、无絮状物，外包装完整无破损；2.1.2 试剂2（R2）应为无色透明溶液，无杂质、无絮状物，外包装完整无破损；2.1.3 试剂2a（R2a）应为无色透明溶液，无杂质、无絮状物，外包装完整无破损；2.1.4 校准品为浅黄色冻干粉，复溶后应为黄色透明溶液，无混浊、无未溶解物，外包装完整无破损。

2.2 净含量液体试剂净含量应不少于标示值。

2.3 试剂空白吸光度在波长546nm（540nm～560nm）处（光径1cm），试剂空白吸光度（A）应≤0.080。

2.4 准确度用本产品和已上市同类产品分别测定40个在线性范围内不同浓度的样本，在[0.85，171.00]μmol/L的检测范围内，比对两组数据的相关系数（r）及测值的偏差，要求r≥0.975；在[0.85，5.00]μmol/L区间内，绝对偏差应不超过±1.00μmol/L；在（5.00，171.00] μmol/L区间内，相对偏差应不超过±20%。

血清总胆红素重氮盐法和钒酸盐氧化法测定方法的比较

科学研究创新血清总胆红素重氮盐法和钒酸盐氧化法测定方法的比较郭晶晶孟超刘茜（江苏省医疗器械检验所江苏南京210019）摘要：胆红素是血红蛋白的代谢产物，主要涉及肝脏代谢，血清胆红素水平是肝胆疾病的重要诊断指标。

体内的胆红素包括直接胆红素、间接胆红素，二者之和称为总胆红素，临床对胆红素的生化检测有多种方法。

本文使用重氮盐法和钒酸盐法对血清总胆红素进行测定，比较两种方法检测结果的差异。

实验结果发现，两种方法的重复性和准确度均能满足临床要求，钒酸盐法的准确度高于重氮盐法。

关键词：胆红素代谢胆红素测定方法重氮盐法钒酸盐法方法比较中图分类号：R446.1文献标识码：A文章编号：1674-098X(2022)02(a)-0004-03肝脏是人体最大的实质性器官，具有复杂而重要的生理功能，参与代谢是肝脏最主要的功能。

肝脏参与三大营养物质的代谢过程：肝脏可以合成蛋白质，亦可以分解蛋白质。

人体有超过40%的蛋白质是在肝脏合成的，血浆白蛋白则完全由肝脏合成。

肝脏细胞含有蛋白质脱氨酶和转氨酶，从而分解蛋白质，氨进一步转变成尿素排泄。

人体摄入的糖类在肝脏转变为葡萄糖，当血糖浓度升高时，血糖可转变成葡萄糖聚合物以糖原的形式贮存于肝脏；当血糖浓度降低时，肝糖原可以迅速分解成葡萄糖，向人体供能，从而保持血糖的稳定。

当人体摄入的糖类物质较少时，肝脏可以将氨基酸、丙酮酸等非糖类物质转变成肝糖原，以满足机体对葡萄糖的消耗。

肝脏可以合成胆固醇，胆固醇转变成胆汁酸盐，胆汁酸盐使脂肪乳化成微粒，脂肪微粒可被身体吸收。

脂类物质可直接与肝脏中的蛋白质结合成脂蛋白。

肝脏参与维生素的代谢。

一些脂溶性维生素可长期大量储存于肝脏中，如维生素A、维生素D、维生素B12的储存量可满足几个月甚至是一两年的使用。

肝脏中可形成有多种凝血因子，如凝血因子I，同时，肝脏可形成抗凝血因子，如肝素。

由于肝脏的体积大，可以贮存的血量多，因此肝脏也是主要的贮血器官［1］。

生化类复合质控品产品技术要求中生北控

生化类复合质控品适用范围：本产品在临床医学上用于临床检验实验室中生化检测项目的室内质量控制，检测临床化学分析仪测定的准确度和精密度。

具体项目为：α1-酸性糖蛋白（AAG）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、白蛋白（ALB）、碱性磷酸酶（ALP）、α-淀粉酶（AMY）、胰淀粉酶（P-AMY）、载脂蛋白A1（APOA1）、载脂蛋白B （APOB）、抗链球菌溶血素O（ASO）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、钙（Ca）、C-反应蛋白（CRP）、超敏C-反应蛋白（HS-CRP）、氯（Cl）、胆碱酯酶（CHE）、胆固醇（CHO）、补体C3（C3）、补体C4（C4）、肌酸激酶（CK）、肌酸激酶MB同工酶（CK-MB）、酶法肌酐（CreE）、苦味酸法肌酐（CreK）、重氮盐法直接胆红素（D.Bili）、钒酸盐法直接胆红素（D.Bili）、铁蛋白（Ferritin）、葡萄糖（Glu-GOD）、葡萄糖（Glu-HK）、谷氨酸脱氢酶（GLDH）、γ-谷氨酰基转移酶（GGT）、a-羟丁酸脱氢酶（HBDH）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、结合珠蛋白（HP）、免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白M （IgM）、铁（Iron）、乳酸脱氢酶（LDH）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、锂（Li）、脂肪酶（Lip）、镁（Mg）、磷（P）、钾（K）、前白蛋白（PA）、钠（Na）、重氮盐法总胆红素（T.Bili）、钒酸盐法总胆红素（T.Bili）、总蛋白（TP）、转铁蛋白（TF）、甘油三酯（TG）、尿素（Urea）、尿酸（UA）。

1.1规格冻干粉型5mL×1（水平1）；3mL×1（水平1）；5mL×1（水平2）；3mL×1（水平2）；5mL×2(水平1,水平2)；5mL×6(水平1,水平2)；3mL×2(水平1,水平2)；3mL×6(水平1,水平2)。

总胆红素(TBIL)测定的标准操作程序

总胆红素（TBIL）测定的标准操作程序【应用范围】体外检测血清、血浆总胆红素浓度测定。

【适用仪器】Olympus AU-2700全自动生化分析仪。

【程序改变】严格遵循仪器、试剂说明书及校准品使用说明。

【方法学原理】在PH2.9环境中,表面活性剂和偏钒酸盐与胆红素作用形成胆绿素，胆红素的减少引起在波长450nm处吸光度的下降,吸光度的变化与总胆红素的含量成正比。

【试剂】1.在测定时各组分和浓度试剂1（R1）：L-丙氨酸、LDH（乳酸脱氢酶）试剂2（R2）：α-酮戊二酸、NADH试剂稳定性与贮存试剂避光保存于2-8℃，若无污染，可稳定至失效期。

试剂不可冰冻。

2.校准品：DiaSys TruCal U。

3. 质控品：Randox Assayed Multiseral Level 1 and Level 2。

【标本收集与准备】1.血清或血浆标本根据实验室标准采集程序采集标本，适用标本为血清或肝素抗凝血浆（肝素钠抗凝结果高0.5mmol/l），不可从正在静脉滴注手臂上采血，上机标本不能有凝块，样品采集后2天内离心标本，分离血清，血清或血浆标本室温保存4天，冷藏7天，冷冻保存6个月。

血清或血浆钠结果高于线性不建议稀释。

【操作步骤】1.仪器测定参数设置Test Name:Sample: Volume L Dilutio LL Dilutio L Min OD Max ODLSec. ODMethod: First LLast LReaction Slope:Measuring Last LMeasuring LastLinearity ANo-Lag-Time:2.试剂准备：将准备好的试剂置仪器试剂盘中（8℃）。

3.校准校准物的准备：将校准物从冰箱取出，冻干校准物按说明书加入蒸馏水复溶，轻轻颠倒混匀3次，不可用力震摇，室温放置30分钟至完全溶解；液体校准物从冰箱取出，室温放置15分钟以平衡至室温。

校准物的选择尽可能选择配套仪器厂家校准品。

总胆红素重氮法检测操作规程

总胆红素重氮法检测操作规程产品注册号：国食药监械（准）字2004第3400400号产品执行标准：YZB/国2221-2003原理：总胆红素在二甲亚砜等加速剂作用下，在酸性溶液中与重氮苯磺酸作用生成紫色的偶氮胆红素，与经过同样处理的校准液比较，即可计算出样品中总胆红素的含量。

样品准备：样品为新鲜空腹无溶血的血清或血浆。

样品应在低温条件下运输保存，样品中总胆红素2-8℃密闭避光保存可稳定3天，冰冻保存可稳定3个月。

测定步骤：1.基本参数：方法：终点法波长：560nm 反应温度：37℃光径：10mm 反应时间：5min2.操作：根据测定所需试剂量，取R1和R2按50：1比例混合，即为工作液。

根据以上参数按下表操计算：1. 因素法：用本试剂盒操作，测得偶氮胆红素参考摩尔吸光系数为74290（波长=560nm，光径=10mm，样品/试剂=1/15），其相应的F值为215.经严格检定标化的仪器，可按以下公式计算结果：样品Tbil含量（umol/L）=(Au-AuB)×215例：Au=0.080 AuB=0.040 则样品Tbil含量（umol/L）=（0.080-0.040）×215=8.62. 比例终点法：样品Tbil含量（umol/L）=Au-AuB/Ac-AcB×Cc例：Au=0.040 Ac=1.095 AcB=0.030 Cc=230umol/L则样品Tbil含量（umol/L）=【（0.090-0.040）÷（1.095-0.030）】×230=10.8校准及质控：1.建议使用本公司的胆红素校准血清进行校准。

2.推荐使用本公司的生化质控血清进行室内质控。

性能指标：1.线性范围：0.4～342.0umol/L,r≥0.992.精密度：批内CV≤3.8%、批间相对极差≤5.8%。

3.准确度：不准确度≤10%。

4.空白吸光度：空白管在560nm波长处，10mm光径下，以蒸馏水调零，吸光度值≤0.150，注意事项：1.如果样品中Tbil含量超过342.0umol/L，则用蒸馏水稀释后测定，结果乘以稀释倍数。

总胆红素检测标准操作规程

9.4使用方法
每日做标本之前从冰箱中取出复温至室温，轻轻颠倒混匀数次。每个浓度质控品取5-6滴加入日立杯中上机检测。每日标本量超过150加做一次质控。
9.5质控结果判断
利用Westgard多规则质控方法（12s,13s,22s,R4s,41s,10x)判断是否失控。
10.参考区间
3.42-20.5umol/l
13.性能指标
线性范围：在（3.4-684）umol/L范围内：a)线性相关系数（r）应>0.995;b)（3.4-100）umol/L范围内，线性偏差应≦10umol/L;（100-684）umol/L范围内，线性偏差应该≦10.0%。
准确度：相对偏差≦10.0%。
精密度：批内CV≦4.0%;批间相对极差<5.0%。
8.校准程序
8.1校准品来源
美康生物
8.2校准品名称
多项生化校准品
8.3校准品规格：
1×5ml
8.4用途
校准品与宁波美康生物科技有限公司生产的总胆红素检测试剂盒及全自动生化分析仪配套使用，用于上述检测系统进行项目的校准。
8.5主要组成成分
校准品组成成分为非人源性。
校准品中总胆红素的活性成分浓度具有批特异性，准确浓度见随附的数值表或说明书反面。
分析灵敏度：样本浓度为90umol/L时，吸光度差值不小于0.0400。
14.参考文献
14.1《全国临床检验操作规程》
14.2《试剂使用说明书》
14.3《校准品使用说明书》
14.4《临床生物化学检验质量管理与操作规程》
辅助波长
546nm
反应方法
终点法
反应温度
37℃
反应方向
向下
试剂1
180ul

总胆红素化学氧化法和重氮法-概述说明以及解释

总胆红素化学氧化法和重氮法-概述说明以及解释1.引言1.1 概述总胆红素是一种重要的生化指标，其测定方法多种多样。

其中，总胆红素化学氧化法和重氮法是常用的两种方法。

总胆红素化学氧化法通过将总胆红素氧化为胆红素氧化物，再进行光度测定来确定总胆红素含量。

相比之下，重氮法则是通过将总胆红素转化为双重氮化合物，然后进行比色测量来确定总胆红素的含量。

总胆红素化学氧化法在医学、生物化学和临床诊断中有着广泛的应用。

它具有操作简单、结果准确、灵敏度高等优点。

通过这种方法可以快速、准确地检测出总胆红素含量，为疾病的早期诊断和治疗提供重要依据。

然而，总胆红素化学氧化法也存在一些缺点，例如对样品准备要求高、耗时较长、需要使用特定的试剂等。

重氮法是另一种常用的测定总胆红素含量的方法。

它具有操作简单、结果可靠、灵敏度高等特点。

重氮法适用于各种类型的样品，包括血液、尿液和胆汁等。

与总胆红素化学氧化法相比，重氮法更加灵敏，并且可以检测出低浓度的总胆红素。

然而，重氮法也存在一些不足，例如对pH值和温度的要求较高，以及有一定的毒性和危险性。

通过比较总胆红素化学氧化法和重氮法，可以发现它们各自具有一定的优点和局限性。

总的来说，总胆红素化学氧化法在操作简单、结果准确方面具有一定优势；而重氮法则在灵敏度高、适用范围广方面具有一定优势。

根据具体的需求和实际情况，选择不同的方法进行总胆红素的测定，能够更好地满足实验要求和研究需要。

综上所述，总胆红素化学氧化法和重氮法是两种常用的测定总胆红素含量的方法。

它们各自具有一定的优缺点，适用于不同的实验需求。

通过综合评估和比较，可以选择合适的方法进行总胆红素的测定，为相关领域的研究和应用提供可靠的数据支持。

随着科学技术的不断发展，这两种方法仍有进一步改进和完善的空间，有望在未来取得更加广泛的应用。

文章结构部分的内容如下：1.2 文章结构本文将分为5个主要部分来论述总胆红素化学氧化法和重氮法这两种方法。

生化类复合质控品产品技术要求zhongshengbeikong

生化类复合质控品适用范围：本产品在临床医学上用于临床检验实验室中生化检测项目的室内质量控制，检测临床化学分析仪测定的准确度和精密度。

具体项目为：α1-酸性糖蛋白（AAG）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、白蛋白（ALB）、碱性磷酸酶（ALP）、α-淀粉酶（AMY）、胰淀粉酶（P-AMY）、载脂蛋白A1（APOA1）、载脂蛋白B （APOB）、抗链球菌溶血素O（ASO）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、钙（Ca）、C-反应蛋白（CRP）、超敏C-反应蛋白（HS-CRP）、氯（Cl）、胆碱酯酶（CHE）、胆固醇（CHO）、补体C3（C3）、补体C4（C4）、肌酸激酶（CK）、肌酸激酶MB同工酶（CK-MB）、酶法肌酐（CreE）、苦味酸法肌酐（CreK）、重氮盐法直接胆红素（D.Bili）、钒酸盐法直接胆红素（D.Bili）、铁蛋白（Ferritin）、葡萄糖（Glu-GOD）、葡萄糖（Glu-HK）、谷氨酸脱氢酶（GLDH）、γ-谷氨酰基转移酶（GGT）、a-羟丁酸脱氢酶（HBDH）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、结合珠蛋白（HP）、免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白M （IgM）、铁（Iron）、乳酸脱氢酶（LDH）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、锂（Li）、脂肪酶（Lip）、镁（Mg）、磷（P）、钾（K）、前白蛋白（PA）、钠（Na）、重氮盐法总胆红素（T.Bili）、钒酸盐法总胆红素（T.Bili）、总蛋白（TP）、转铁蛋白（TF）、甘油三酯（TG）、尿素（Urea）、尿酸（UA）。

1.1规格冻干粉型5mL×1（水平1）；3mL×1（水平1）；5mL×1（水平2）；3mL×1（水平2）；5mL×2(水平1,水平2)；5mL×6(水平1,水平2)；3mL×2(水平1,水平2)；3mL×6(水平1,水平2)。

总结总、直接胆红素的检测方法

血清总胆红素和直接（结合）胆红素测定目前测定血清胆红素的方法主要有重氮试剂法（包括改良J-G法、二甲亚砜法、二氯苯重氮盐法和2，5二氯苯重氮四氟硼酸盐法等）、胆红素氧化酶法、钒酸盐氧化法、高效液相色谱法、导数分光光度法、经皮胆红素测定法以及直接分光光度法等。

改良咖啡因（J-G）法：一、实验原理血清中结合胆红素可直接与重氮试剂反应，生成紫色的偶氮胆红素；在同样条件下，未结合胆红素须有加速剂破坏胆红素氢键后才能与重氮试剂反应。

咖啡因、苯甲酸钠作为加速剂，醋酸钠缓冲液可维持反应的PH值同时兼有加速作用。

叠氮钠破坏剩余重氮试剂，终止结合胆红素测定管的偶氮反应。

最后加入碱性酒石酸钠，在碱性条件下，紫色偶氮胆红素转变为蓝色偶氮胆红素，使最大吸光度由530nm转移到598nm，此时，非胆红素的黄色色素及其它红色与棕色色素产生的吸光度可忽略不计，使测定的灵敏度和特异性增加。

最后形成的绿色是由蓝色的碱性偶氮胆红素和咖啡因与对氨基苯磺酸之间形成的黄色色素混合而成。

二、实验方法（一）器材试管，刻度吸管，分光光度计，37℃水浴箱。

（二）试剂1．咖啡因-苯甲酸钠试剂无水醋酸钠41g，苯甲酸钠37.5g，乙二胺四乙酸二钠EDTANa2 0.5g，溶于约500mL 的蒸馏水中，再加入咖啡因25g，搅拌至完全溶解(不可加热)，然后加蒸馏水稀释至1000mL，混匀，过滤后放置棕色试剂瓶中，室温保存可稳定6个月。

2. 5g/L 亚硝酸钠溶液：亚硝酸钠5.0g，加蒸馏水溶解并稀释至100mL，若发现溶液呈淡黄色时，应丢弃重配。

3. 5g/L 对氨基苯磺酸溶液：对氨基苯磺酸（NH2C6H4SO3H·H20）5.0g，加于约800mL 蒸馏水中，加浓盐酸15mL，待完全溶解后，加蒸馏水至1000mL。

4. 重氮试剂临用前，取5g/L 亚硝酸钠溶液（试剂2）0.5mL 与5g/L 对氨基苯磺酸溶液（试剂3）20mL 混合。

5. 5g/L 叠氮钠溶液：叠氮钠0.5g，用蒸馏水溶解并稀释至100mL。

血清总胆红素测定标准操作规程

血清总胆红素测定标准操作规程1检验原理：（钒酸盐法）pH 值接近3时，在钒酸盐和表面活性剂的作用下，胆红素被氧化成胆绿素。

此时，胆红素特有的黄色减少，在波长450nm 处通过测定钒酸作用前后的吸光度的差可以求得样品中总胆红素的浓度。

胆红素−−−−−→−表面活性剂钒酸盐/胆绿素 2.试剂主要组成成分3.样本要求新鲜无溶血血清、勿使用肝素抗凝血浆。

22～25℃保存8小时，2～8℃保48小时，-20℃保存7天，样本不可反复冻融！4.检验方法：仪器法（详见DF-603/DI-600标准操作规程）5.参考范围：6检验结果的解释6.1样本含量超出线性范围时，建议用0.9%（W/V ）的氯化钠溶液稀释样本。

通常稀释2倍，当样本浓度较大时提高稀释倍数。

6.2单位换算：mg/dL=umol/L ×0.05857检验方法的局限性7.1结果的准确性依赖于仪器的校正和测定温度、时间的控制。

7.2若试剂浑浊或以水空白在450nm 处吸光度大于0.500时不能使用。

8.产品性能指标8.1线性范围：在给定的样本/试剂比例和条件下测定时，本世纪线性范围可达0-300umol/L 。

8.2试剂空白吸光度：在450nm 处，光径1cm 时，空白吸光度A ≤0.500，△A 空白/分钟≤0.002.8.3准确度：相对偏差≤10%。

8.4精密度8.4.1批内精密度CV≤3%8.4.2批间精密度：R≤10%8.5分析灵敏度：在给定的样本/试剂比例和条件下测定时，1umol/L的总胆红素对应的△A不低于1.5×3108.6干扰试验无明显干扰：添加干扰物后的测定值与初始测定值的相对偏差处于±10%以内。

8.7方法比较：本试剂盒与商品化试剂盒测定40个样本测定结果相关性如下：y=0.997x＋1.051；r=0.997。

9.临床意义：胆红素是红细胞正常或非正常降解后在内皮系统形成的有机复合物，检测胆红素有利于监测肝脏疾病以及发现溶血性贫血以及评估黄疸的程度。

总胆红素重氮盐法作业指导书

总胆红素（重氮盐法）作业指导书1：概述血清中的[胆红素大部分来源于衰老红细胞被破坏后产生出来的血红蛋白衍化而成，在肝内经过葡萄糖醛酸化的叫做直接胆红素，未在肝内经过葡萄糖醛酸化的叫做间接胆红素，二者的和就是总胆红素。

2标本的收集新鲜无溶血标本，血清或血浆样本均不溶血。

血浆样本只能采用肝素或EDTA抗凝。

样本在4摄氏度可稳定7天。

采血前病人应禁食12小时，采集静脉3ml,待凝固后（最好放在37摄氏度水浴箱内45分钟）通常为加抗凝剂的血液在30-60分钟凝血析出血清。

3000r/min离心5-10分钟，分离出血清备用。

不建议采用血浆标本。

3：方法原理本试剂采用表面活性剂作为增溶剂，样品中结合胆红素和经增溶的未结合胆红素与重氮对氨基苯磺酸反应，生成酸性偶氮胆红素，其在570nm处吸收值的增加与样品中胆红素的浓度成正比，通过测定570nm处吸光度值的变化，即可计算出样品中总胆红素的浓度。

4剂来源，配置及储存试剂来源：迪瑞试剂配置：。

试剂一和试剂二按100:1的比例。

即10ml 试剂一加0.1ml试剂二，混合后即成工作液试剂储存：试剂避光储存2-8摄氏度可稳定至标签所示失效期。

5分析仪器CS-600B全自动生化分析仪分析参数：样品量25 u/l 试剂量：250 u/l测光点0--41 测定模式：1点终点法正反应分析波长：570nm/660nm(主波长/副波长)6计算方法总胆红素浓度（μmol/L）=样本管吸光度×校准液浓度（μmol/L）校正管吸光度7 线性范围：本实验的线性范围：0---300μmol/L8参考范围成人1.7—21μmol/L新生儿20—200μmol/L9 失控控理1：立即重测同一质控品，如重测后结果仍不再允许范围，请进行下一步。

2：新开一瓶质控品，重测失控项目，如新开的质控血清结果正常，那么原来质控血清可能过期或在室温防止时间过长而变质，如结果仍不再允许范围，则进行下一步。