SPE方法开发从此不再复杂-Waters
SPE(固相萃取法)的介绍
硅酸镁 75-150u m 氧化铝 130u m
100 A 0
离子交换及其他类型SPE填料
离子交换 基质 交换容量 保留化合物 强阴离子S A X 8% 交联聚苯乙烯- 0. 200m g 带负电荷化合物 30/ 二乙烯基苯 强阳离子S C X 8% 交联聚苯乙烯- 0. 200m g 带正电荷化合物 48/ 二乙烯基苯 其他类型填料 D VB 100% 二乙烯基苯 40u m 环境污染物如酚 、酸性农药；极 性药物代谢物、 核酸等 水中极性有机物 ，尤其是分离开 酸性及中性/ 碱性 农药
分子量少于2000
可溶于水样品 离子性样品 阳离子型 阴离子型 反相 (压 抑 离 子 化 ) C2,C8,C18, 苯基、环己基 非离子性样品 反相萃取
强阳离子交换 SCX
强阴离子交换 SAX
C2,C8,C18, 苯基、环己基
溶剂极性图
反相溶剂洗脱强度
己烷 异辛烷 四氯化碳 氯仿 二氯甲烷 四氢呋喃 乙醚 乙酸乙酯 丙酮 乙腈 异丙醇 甲醇 水
正相溶剂洗脱强度
萃取小柱填料规格(反相)
官能团 C 18 高流速C 18 高容量C 18 C8 高容量C 8 乙基C 2 苯基 环己基 基质 硅胶 硅胶 硅胶 硅胶 硅胶 硅胶 硅胶 硅胶 平均颗粒度 孔径 50u m 100u m 50u m 50u m 50u m 50u m 50u m 50u m 60 A 60 A 60 A 60 A 60 A 60 A 60 A 60 A 碳覆盖率 6. 0% 8. 0% 17. 0% 4. 5% 8. 5% 5. 5% 3. 8% 3. 5% 封尾 有 有 有 有 有 有 有 有
萃取小柱填料规格(正相)
官能团 硅胶 氨丙基 氰丙基 二醇基 弗罗里土 氧化铝 (酸性、中性 、碱性) 基质 硅胶 硅胶 硅胶 硅胶 平均颗粒度 孔径 50u m 50u m 50u m 50u m 60 A 60 A 60 A 60 A 60 A 碳覆盖率 0 5. 0% 6. 0% 4. 0% 0 封尾 没有 没有 有 没有 没有 没有
固相微萃取SPME技术
（2）萃取时间
萃取时间主要是指达到平衡所需要 的时间。而平衡时间往往取决于多种因 素，如分配系数，物质的扩散速度、样 品基体、样品体积、萃取膜厚、样品的 温度等。实际上，为缩短萃取时间没有 必要等到完全平衡。通常萃取时间为520min即可。但萃取时间要保持一致， 以提高分析的重现性。
二、固相微萃取（SPME）和固相萃取（SPE）
固相微萃取（Solid Phase Microextraction，SPME）是在 固相萃取（Solid Phase Extraction，SPE） 基础上发展起来的 一种新型萃取分离技术。
★固相微萃取（SPME）是由加拿大Waterloo大学Pawliszyn 于1990年提出（Arthur C l, Pawliszyn J. Anal. Chem. , 1990, 62: 2145）。
设固定相所吸附的待测物的量为WS，因待测物总 量在萃取前后不变 ，固得到：
C0•V2=C1 •V1+C2 •V2
（1）
式中， C0是待测物在水样中的原始浓度； C1 、 C2 分别为待测物达到平衡后在固定相和水相中的浓度； V1 、 V2分别为固定相液膜和水样的体积。
吸附达到平衡时，待测物在固定相与水样间的分配 系数K有如下关系：
固相微萃取技术
固相萃取（SPE）及固相微萃取 （SPME）技术简介
一、背景
环境样品分析中所涉及的环境和生物等样品基体复杂， 且待测元素和物质在样品中的含量一般都很低，所以往往 需要对样品进行分离预富集，其要求一般为：
★高的富集效率
★分离富集过程中需保持真实样品中各物质之间的平 衡
★尽可能消除杂质或溶剂的影响，减小基体效应
SPE技术电解纯水制氢与传统电解的
大，大电流发热量高。
电解槽结构不同
电解槽内两级室的集电器结构紧密且有弹性。使电解槽重量轻、体积小。
优点:槽内阻小。
电解槽内极室的集电器没有弹性。
缺点：电能热损失高，转换效率低。
电解液不同
电解纯水
优点：无污染、无腐蚀、氢气纯度高
电解15%的NaOH
缺点：腐蚀性强，易产生冲液污染负载管路。
电解槽内电传导不同
氢离子活性基移动
正、负离子在水溶液中运动
氢气出口
无碱性
有碱性
SPE技术电解纯水制氢与传统电解的
区别
SPE技术
传统电解
两级室的分隔物不同
离子膜：分子级微孔，厚度0.175-0.2mm。
优点：不易产生氢反渗透。
隔膜：不是分子级ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ孔。
缺点：易产生氢反渗透。
电极不同
分子级微孔催化电极，紧贴于离子膜两面及其内部孔道间，是一种零极距催化电极。
优点：反应面积大，转换效率高
SPE-通过固相萃取进行样品富集和纯化-waters
SPE——通过固相萃取进行样品富集和纯化为何使用固相萃取（SPE）技术1. 您需要从样品中去除特定干扰物，以免它们在目标分析物的检测和定量过程中影响实验结果。
在此处所示的示例中，不适当的样品制备方案未能去除干扰物，导致提取物呈现出残留的黄色干扰物，色谱图中目标分析物与多个干扰峰发生了重叠。
2. 您需要提高初始样品中目标分析物的浓度，以便所用的分析技术能够更轻松地对其进行检测和准确定量。
如果目标分析物可被较强地保留，那么可能需要在SPE色谱柱上加载较大的样品量，随后仅以极小体积的洗脱液将此分析物洗脱下来，由此提高样品中分析物的浓度。
3. 您需要去除样品中的干扰物（即使不可见），这些干扰物会在质谱检测中抑制目标分析物的信号。
在此处的示例中，蛋白沉淀法无法去除血浆提取物中的磷脂，从而造成严重的离子抑制。
优化的复合模式SPE方案可获取最纯净的提取物，并可在最大程度上降低离子抑制效应。
What is Solid-Phase Extraction (SPE)?Don't be confused by the term solid-phase extraction [SPE]. A typical SPE device has 50 times more separation power than a simple, single liquid-liquid extraction. SPE is actually column liquid-solid chromatography. Since SPE is liquid chromatography [LC], its practice isgoverned by LC principles. A sample is introduced into a column or a cartridge device containing a bed of appropriate particles, or other form, of a chromatographic packing material [stationary phase]. Solvent [mobile phase] flows through the bed. By choosing an appropriate combination of mobile and stationary phases, sample components may pass directly through the column bed, or they may be selectively retained.Individual compounds in the sample each typically appear to travel at different speeds through the device. Using a weaker solvent causes them to move slowly and/or be strongly retained. A stronger solvent speeds up their passage through the bed and elutes the analyte(s) in a more concentrated volume. Elution from an SPE device is usually done by increasing the strength of the mobile phase in a series of discrete, rather than continuous, steps during which selected analytes or interferences are either fully retained or rapidly eluted-this variation of gradient elution called a step gradient.Most commonly, SPE is practiced using miniature column or cartridge devices. An example is shown here. A mixture of three dyes is loaded onto the cartridge in a weak solvent, causing strong sample retention in a narrow band that appears black at the column inlet. Subsequent gradient steps, each with a successively stronger solvent, are used to elute the dyes individually [yellow, red, then blue].Typical SPE cartridges are low-pressure devices-constructed of solvent-resistant plastic or glass-filled with particles ≥30 µm in diameter. Suitable flow rates may be achieved by gravity or with the assistance of vacuum or low positive pressure. [The latter requires putting a cap on the open inlet of a column or using a sealed device with inlet and outlet fittings.]Importance of Sample PreparationIn the last two decades, dramatic advances in analytical instrumentation and laboratory information management systems shifted the analyst's predominant tasks from assaymeasurements to sample preparation and data processing. As the stringency of requirements for higher sensitivity, selectivity, accuracy, precision, and number of samples to be processed has escalated, the corresponding increases in speed and sophistication of analysis and data collection have outpaced improvements in the many traditional techniques of samplecollection and preparation. By some estimates, 75 to 80% of the work activity and operating cost in a contemporary analytical lab is spent processing and preparing samples forintroduction or injection into an analytical separation and/or measurement device. Clearly, efforts directed and products designed to streamline sample preparation protocols are essential to future progress in analytical science.Goals of Sample PreparationSuccessful sample preparation for most analytical techniques [HPLC, GC, spectrophotometry, RIA, etc.] has a threefold objective: namely, to provide the sample component of interest▪in solution▪free from interfering matrix elements▪at a concentration appropriate for detection or measurement.To accomplish these goals, a sample, or a representative portion thereof [not always easy to obtain], is prepared via traditional methods of dissolution, homogenization, extraction[liquid- or solid-phase], filtration, concentration, evaporation, separation, chemicalderivatization, standardization [internal or external], etc.Usually such methods are used in combinations of multiple steps, which form a sample prep protocol. The fewer steps and methods used in any given protocol, the simpler, moreconvenient, cost effective, and less time consuming it is. Simpler protocols lend themselves more readily to automation and also lead to increased accuracy, reliability, reproducibility, and safety.Innovation in Sample Preparation MethodsThere are many ways to combine standard tools and techniques to accomplish the goals of sample prep. However, it is best to seek innovative means to streamline sample prepprotocols:▪to combine the functions of several steps, if possible, into one operation;▪to eliminate needless sample transfers and manipulations;▪to reduce the scale as much as practicable [gaining economies of time, labor, and cost];▪to use new tools in creative ways.Benefits of Solid-Phase Extraction [SPE] CartridgesWhen compared to other sample preparation processes, solid-phase extraction using SPE cartridges offers:Lower Cost • lower solvent consumption• lower reagent consumption• less apparatusGreater Recoveries • min imal sample transferFaster Protocol • fewer stepsGreater Safety • less exposure to toxic agentsGreater Accuracy • no cross contaminationNo Emulsion Problems • less sample handling• fewer stepsNo Transporting of Samples to Lab • direct field samplingReduced Harm to Labile Samples • minimal evaporationMinimal Glass Breakage • less glassware used, less to washAchieving Sample Preparation Objectives with Solid-Phase Extraction [SPE]▪To remove sample constituents that elute after the analytes of interest or are strongly adsorbed:▪use solid-phase extraction with sorbent surface chemistry that is the same as that in the analytical HPLC column.▪tailor the gradient steps to elute analytes selectively.▪To remove sample constituents that coelute with an analyte of interest:▪use solid-phase extraction with sorbent surface chemistry and/or separation mode different from that in the analytical column.▪tailor the gradient steps to elute analytes selectively.▪To enrich sample components present in low concentration:▪tailor the gradient steps to elute analytes selectively.▪use "large" sample volumes in adsorption-promoting solvent.▪use "small" collection volume in desorption-promoting solvent.▪use sorbent chemistry tailored to the analyte, independent of that in analytical column.▪carefully choose chemistry of solid-phase extraction column so further sample prep will be unnecessary.▪To desalt samples:▪first, adsorb analytes on reversed-phase sorbent while salt breaks through unretained.▪then, after using water to wash away residual salt, desorb analytes using water-miscible organic solvent.▪To exchange solvents:▪adsorb the sample completely onto a strongly retentive sorbent and flush away the original solvent with a weaker eluent.▪elute the analyte with the desired solvent.▪To fractionate classes of compounds:▪use a step-gradient sequence to divide a sample-on the basis of hydrophobicity, polarity, or charge-into fractions containing groups of analytes that share common properties.▪To derivatize analytes using solid-phase reagents:▪adsorb a derivatization reagent on the surface of the sorbent; then, collect the sample (usually a gas) under conditions that favor complete adsorption of the analyte; wait for the reaction to occur and then selectively elute the derivative.SPE is ChromatographyKeep in mind that solid-phase extraction has the same fundamental basis as HPLC. Any knowledge of the chromatographic behavior of the analytes of interest, and of other matrix components, can help in choosing the proper sorbent and eluents. If, for example, you know that certain chromatographic conditions provide excellent separation of your analyte from interferences, then you may choose a similar SPE sorbent and solvent combination. Similarly, if you are trying to remove an interference that coelutes in HPLC, then you know a priori that similar SPE conditions will not be successful.General Elution ProtocolsThere are two general strategies for isolating and cleaning up sample components of interest:▪adsorb matrix interferences while components of interest pass through the cartridge unretained.▪adsorb components of interest while matrix interferences pass through the cartridge unretained.The first strategy is usually chosen when the desired sample component is present in high concentration. When components of interest are present at low levels, or multiplecomponents of widely differing polarities need to be isolated, then the second strategy is generally employed. Trace enrichment of compounds present at extremely low levels and concentration of dilute samples are also achieved by the second strategy.Steps of a Solid-Phase Extraction ProcedureThe following section describes the steps involved in a complete solid-phase extraction procedure. In many applications, one or more of the steps, listed below and subsequently described by general examples, can be omitted, thereby simplifying the procedure. The procedures illustrated here use samples containing dyes so that separations may be easily visualized. Keep in mind that most samples contain colorless components that require some type of detector or test to locate them in the collected fractions. Use the following information as a guideline in the development of your own procedure or when modifying procedures published in the literature.1.Pretreatment of the sample2.Conditioning of the cartridge3.Loading the sample4.Elution of the fractionsPrincipal Separation Modes in Solid-Phase Extraction [SPE]Normal-Phase ChromatographyThis mode is classically used to separate neutral organic compounds whose chemical nature ranges from hydrophobic to moderately polar.To perform normal-phase chromatography with SPE cartridges, use a step gradient of nonpolar solvents with a polar packing material.1.Condition the cartridge with six to ten hold-up volumes of non-polar solvent, usually thesame solvent in which the sample is dissolved.2.Load the sample solution onto the cartridge bed.3.Elute unwanted components with a non-polar solvent.4.Elute the first component of interest with a more polar solvent.5.Elute remaining components of interest with progressively more polar [stronger]solvents.6.When you recover all of your components, discard the used cartridge in a safe andappropriate manner.This procedure is illustrated in the figure below for a sample containing a mixture of three neutral, relatively non-polar organic dyes [yellow, red, and blue] that appears black when initially loaded onto the cartridge bed.Illustration of a General Elution Protocol for Normal-Phase Chromatography on SPECartridges(Silica, Florisil, Alumina, Diol, CN, NH2)Reversed-Phase ChromatographyBecause of the multiplicity of aqueous samples spanning a breadth of applications from environmental water to fruits and vegetables, from beverages to biological fluids, reversed-phase chromatography has become the predominant mode of SPE.To perform reversed-phase chromatography with SPE cartridges, use a gradient of strongly to weakly polar solvents [from weak to strong solvent elution strength] with a non-polar packing material.1.Solvate the silica-bonded phase or polymer packing with six to ten hold-up volumes ofmethanol or acetonitrile. Flush the cartridge with six to ten hold-up volumes of water or buffer. Do not allow the cartridge to dry out [unless using HLB].2.Load the sample dissolved in a strongly polar [weak] solvent [typically water].3.Elute unwanted components with a strongly polar solvent.4.Elute weakly retained components of interest with a less polar solvent.5.Elute more tightly bound components with progressively more non-polar [stronger]solvents.6.When you recover all the components of interest, discard the used cartridge in a safe andappropriate manner.This procedure is illustrated in the figure below for a sample of an aqueous grape drink containing two polar food dyes [red and blue], as well as sugar and artificial flavor [but no real grape juice!]. As prepared, this drink appears light purple in a glass, since the dye concentration is dilute. When a portion is loaded onto a prepared SPE cartridge, the strongly retained dyes become concentrated near the inlet in a dark purple band.Illustration of a General Elution Protocol for Reversed-Phase Chromatography on SPECartridges(C18, tC18, C8, CN, Diol, HLB, Porapak RDX, NH2)Ion-Exchange ChromatographyCompounds that are ionic or ionizable are often best isolated using some form ofion-exchange chromatography. This separation mode is orthogonal to the more widely used normal-phase and reversed-phase modes and provides a powerful, selective second dimension to sample preparation protocols.Illustration of the Two Major Types of Phases—Anion and Cation Exchange—and How They Selectively Attract and Retain Molecules of Opposite ChargeTo perform ion-exchange chromatography with SPE cartridges, use a gradient of pH or ionic strength with an ion exchange packing material.1.Condition the cartridge with six to ten hold-up volumes of deionized water or weak buffer.2.Load the sample dissolved in a solution of deionized water or buffer.3.Elute unwanted, weakly bound components with a weak buffer.4.Elute the first component of interest with a stronger buffer (change the pH or ionicstrength).5.Elute other components with progressively stronger buffers.6.When you recover all of your components, discard the used cartridge in an appropriatemanner.This procedure is illustrated in the figure below for a sample of an aqueous mixture of two ionic dyes with different pK a values. When loaded onto the cartridge, both are strongly retained, and the combination of blue and yellow components appears as a green band near the inlet.Illustration of General Elution Protocol for Ion-Exchange Chromatography on SPE Cartridges (NH2, Accell™ Plus QMA, Accell Plus CM, SCX, SAX, WCX, WAX)Cation and anion exchangers are further categorized as either weak or strong exchangers, depending upon the type of ionic group on their surface. Strong cation exchangers possess an acidic surface moiety such as a sulfonic acid that is always ionized [negatively charged] over the whole pH range. Weak cation exchangers possess an acidic surface moiety such as a carboxylic acid that is negatively charged at high pH but neutral at low pH. Similarly, strong anion exchangers typically bear quaternary ammonium groups that are always positively charged, while weak anion exchangers possess primary, secondary, or tertiary amine groups that may be positively charged at low pH but neutral at high pH.Use the following table as a guideline to choose the appropriate SPE ion-exchange cartridgetype for your particular analyte.Mixed-mode ion exchange chromatography combines the use of reversed-phase andion-exchange modes into a single protocol on a single SPE cartridge. It can be used to isolate and separate neutral, acidic, and basic compounds from a single complex matrix. An ideal mixed-mode SPE sorbent substrate remains water-wettable while exhibiting strong reversed-phase retention of hydrophobic compounds. On its surface are ion-exchange functionalities of one of the four general types just described above. Intermediate washes with organic solvent mixtures of appropriate elution strength may be used to isolate neutral compounds [including ionizable analytes in their neutral state]. Selective elution of ionically bound analytes may be attained by manipulating the charge of either the analyte [when bound to strong ion exchangers] or of the sorbent [for analytes bound to weak ion exchangers].下表汇总了各种SPE模式，为方法开发工作的开展提供了一个良好的起点：固相萃取选择色谱模式及吸附剂分析物中-低极性低-高极性/中性带电荷、可电离分离机制基于疏水性的分离基于极性的分离基于电荷的分离样品基质水溶液非极性有机溶剂水溶液/低离子强度SPE吸附剂的活化/平衡1. 用极性有机溶剂得到的溶剂化物2. 水非极性有机溶剂低离子强度缓冲液初步冲洗步骤水溶液/缓冲液非极性有机溶剂低离子强度缓冲液洗脱步骤增加极性有机溶剂的含量增加混合有机溶剂的洗脱强度更强的缓冲液——通过调节离子强度或pH值而中和电荷AX[阴离子交换]CX[阳离子交换]吸附剂官能团C18, tC18, C8, tC2,CN, NH2, HLB, RDX,Rxn RPSilica, Alumina,Florisil, Diol, CN,NH2Accell Plus QMA,NH2, SAX, MAX,WAXAccell Plus CM,SCX, MCX, WCX,Rxn CX吸附剂表面极性低至中等高至中等高高典型溶剂的极性范围高至中等低至中等高高典型的上样溶剂水、低强度缓冲液正己烷、氯仿、二氯甲烷水、低强度缓冲液水、低强度缓冲液典型的洗脱溶剂MeOH/水、CH3CN/水乙酸乙酯、丙酮、CH3CN缓冲液、高离子强度的盐类，提高pH缓冲液、高离子强度的盐类，降低pH样品洗脱顺序最大极性样品组分最先洗脱出来最弱极性样品组分最先洗脱出来最弱电离样品组分最先洗脱出来最弱电离样品组分最先洗脱出来为洗脱化合物而做的流动相溶剂改变减弱溶剂极性增强溶剂极性增加离子强度或提高pH值增加离子强度或降低pH值This has been a brief introduction to sample enrichment and purification using solid-phase extraction [SPE]. The best way to start using SPE is to first learn what others have done with analytes and/or matrices similar to those of interest to you. You will find > 7,700 references to the use of SPE in the Resource Library on . Fill in the blank with a partial compound or matrix name in the following search phrase:“Sep-Pak” OR “Oasis” AND ______*NOTE: Rather than risk a spelling error, use an asterisk [*] with a root name for best results. Using this same search string, even more references [> 60,000] may be found on GOOGLE Scholar.Further reading:J.C. Arsenault and P.D. McDonald, Beginners Guide to Liquid Chromatography, Waters [2007]; Order P/N 715001531on P.D. McDonald and E.S.P. Bouvier, A Sample Preparation Primer and Guide to Solid-Phase Extraction Methods Development, Waters [2001] Search for WA20300 on Waters, Purity by SPE [2008]; Search for 720001692en on U.D. Neue, P.D. McDonald, Topics in Solid-Phase Extraction. Part 1. Ion Suppression inLC/MS Analysis: A Review. Strategies for its elimination by well-designed, multidimensional solid-phase extraction [SPE] protocols and methods for its quantitative assessment [2005]; Search for 720001273en on 。
固相微萃取(SPME)技术
4、主要结论 A 在对水样中的三类农药的处理过程中， 从回收率看，GDX-403柱和C18柱比较并无 差异，可任意选择。 B 在GDX-403柱的情况下，水样中对有机 磷类农药，比较了6种洗脱剂，苯最差，其 余5种均可以，但以氯仿效果最好。 C 方法适合于水样和血样中上述三类农药 的检测
多氯有机化物 以往分析环境水样中微量有机物时，根据 污染物的极性、挥发性和高温稳定性等选择GC 或HPLC进行分析，但水样必须经过分离、富集、 纯化等前处理。例如，常采用液-液萃取、蒸馏、 结晶、过滤、预沉淀、离心等方法。这些步骤 烦琐、耗时，约占整个分析过程的三分之二时 间，也是不同实验室间误差的主要来源。使用 固相萃取技术则克服了上述前处理的缺点，该 技术设备简单、价廉、使用溶剂少，可高效率、 有选择性地分离和富集不同的样品。
多环芳烃 多环芳烃是在自然界中广泛存在的一类 有机污染物，其中某些化合物具有相当强的 致畸、致癌或致突变作用。它们现在水体中 都广泛存在，而且含量低、种类多。对其进 行快速、准确的定性定量一直是分析化学及 环境分析化学的前沿研究领域。与经典的液 -液萃取（LLE）相比，固相萃取具有节省时 间、溶剂用量少，不易乳化等特点。
农药 有机磷类、氨基甲酸酯类和拟除虫菊 酯类农药是目前国内常用的三大类农药， 在生产、运输和使用过程中可能引起中毒 或环境污染、中毒事件也屡有发生。建立 多类农药同时通过固相萃取和气相色谱进 行分析，对于毒物分析、临床急救都具有 实际意义，为系统分析有机农药提供一种 简便、快速的固相提取方法。
例2. 固相萃取法提取净化生物检材中三类农药的实验研 究（孙静等，环境化学，1995，14（3）：221-225） 1、固相萃取柱：GDX-403（PT系列小柱，500mg）， C18固相柱（MT型样品净化富集柱，250mg） 2、样品：四种氨基甲酸酯类农药、六种有机磷类农药、 五种拟除虫菊酯类农药分别在水样和血清样中。
如何优化 SPE方法
Varian SPE Technology
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泉岛公司－－－－色谱消耗品专家
分析物、吸附剂和基质三者之间的相互关系
技术小贴士
样品预处理
样品的预处理同样很重要，如果使用像 C18 这样的非极性吸附剂，而分析物含有带电的官能团，在预处理 过程，需要升高或者降低样品溶液的 pH 值，以中合分析物上的电荷。通过中合电荷，来增加对分析物的保 留效果。
在这个步骤，可以使柱床完全干燥，以确保去除多余的淋洗溶剂，这些残留溶剂中可能包含有一定的干扰 物质。操作时，要擦掉萃取装置中各部件中残留的淋洗溶剂。
洗脱
当从 SPE 柱上洗脱目标分析物时，需要实施几个操作步骤以保证更好的回收率。如果你知道目标分析物被 保留的一般机理，则可以选择一种溶剂或者混合溶剂，以有效打破这种保留机理。
泉岛公司－－－－色谱消耗品专家
技术小贴士
如何优化 SPE 方法
固相萃取是一个相对比较简单的萃取过程，但是为了获得更好回收率和净化效果，我们需要对每个方法进 行全面分析，只有依靠最佳方法论，分步去分析，从而很容易地达到提高您的回收率和净化效果的目的。
把净化方法分为几个步骤分别考虑，才能则更容解决问题。
相反，如果使用离子交换吸附剂，可以调节样品的 pH 值以保证分析物中的重要成份带有合适的电荷，从而 达到最佳保留效果。
活化
对 SPE 柱进行活化，使得吸附相可以更好地接受并保留预处理过的样品。一般首先用有机溶剂（例如甲醇 和乙腈）淋洗，随后用水或者与样品溶液相同 pH 的缓冲溶液淋洗，以确保分析物在上样到 SPE 柱中时，处 于相同的 pH 环境中，从而使其在吸附剂上的保留效果最佳。
如果选择离子交换吸附剂，则有更多的选项可供参考：
z 可以调整洗脱溶剂的 PH 值，以中和分析物或者吸附剂离子交换位点上的电荷（要注意不能超过吸附 剂的 PH 限制范围）
SPE初学者指南
痕量目标物的浓缩（富集）
正如我们所看到的，带有色谱床的SPE装置可以执行四项 关键功能，从而提高样品分析的成功率。 在本书中，我们努力提供来自世界各地科学家的所有SPE 基础知识和成功运用方法，这些科学家在过去30年来一 直依赖这项技术。如今，科学家们发现SPE在解决棘手的 样品前处理和分析问题方面比以往任何时候都更有用。 希望本书能够让您了解和掌握SPE的能力，并将这项技术 的强大功能应用于您的实验室中。
SPE的四大优势
使用SPE有诸多优势，其中有四大优势值得特别关注。
复杂样品基质的简化以及化合物纯化
对于分析化学家而言，最棘手的问题之一，就是目标化合物包含在复杂的样品基质中，例如谷物中的真菌 毒素、虾中的抗生素残留，或者血浆、血清或尿液中的药物代谢物。样品基质中的大量干扰成分或物质和 目标化合物在一起，导致分析极其困难。 首先要解决的问题是分析本身的复杂性，因为存在如此之多的成分，必须分离之后才能鉴定和定量目标化 合物。请参见图2。 分析的稳定性可能不足，因为任何细微变化都可能影响一对关键分析物的分离度。 另一个考虑因素是，原始样品基质中存在的所有干扰物都有可能导致仪器停机，因为每次进样都会积聚污 染。如果在样品前处理过程中去除了干扰物，则可以使用更简单、更稳定的方法来分析目标化合物。如图 3所示，图中比较了原始样品（上图）与使用SPE方法制备的新样品（下图）。
谢谢
SPE初学者指南
演讲人
目录
分析科学家在确定最好使用哪些工具来获得所需的结果时面临许多挑战。确定样品 前处理工具和方法是可能显著影响成败的重要考虑因素。
如果不必进行任何样品前处理工作，就再好不过了。但在现实中，样品前处理往往 是不可或缺的一环。您可能需要针对现有样品优化方法，以提高通量或降低每次分 析的成本。或者，您可能需要分析各种不同类型的样品以报告新的目标化合物。每 种新的样品类型都会带来不同的分析挑战。此外，当今的科学家需要分析比以往浓 度更低的物质，并且不能牺牲准确度和精密度，面临着巨大挑战。
SPE
SPE定义SPE，固相萃取( Solid Phase Extraction,简称SPE)是1 种用途广泛而且越来越受欢迎的样品前处理技术。
SPE 是利用固体吸附剂将液体样品中的目标化合物吸附, 与样品的基体和干扰化合物分离, 然后再用洗脱液洗脱或加热解吸附, 达到分离和富集目标化合物的目的。
与传统的液液萃取法相比较可以提高分析物的回收率，更有效的将分析物与干扰组分分离，减少样品预处理过程，操作简单、省时、省力。
广泛的应用在医药、食品、环境、商检、化工等领域。
因其具有安全、回收率高, 重现性好、操作简便、快速、应用范围广、易实现自动化操作[等特点, 从而显示出良好的发展前景, 在相关领域的应用越来越多[。
从1978 年美国Waters 公司首先将一次性SPE 商品柱投放到市场以来,据不完全统计, SPE 商品柱一直以每年10%的增长速度。
SPE装置SPE 装置一般由柱管、烧结垫, 固定相3 部分组成,其中固定相是SPE 柱中最重要的部分。
最常见的固定相是键合的硅胶材料, 也有很多非硅胶基的固定相被广泛应用。
工作原理固相萃取是一个包括液相和固相的物理萃取过程,主要适用于水中组分的处理。
吸附剂是固相,而液相是萃取过程中的水样或解析过程的有机溶剂。
当水样通过装有合适吸附剂的SPE 柱时,其中某些痕量待测物质被保留在固定相当中,然后再用少量的选择性溶剂浏兑,因此, SpE 是同时进行萃取和浓缩的有效方法。
由于其工作原理、固定相、溶剂的选择等方面与高效液相色谱有许多相似之处，SPE也可以近似的看成是一个简单的柱色谱过程。
固相萃取(SPE) 技术基于液-固相色谱理论，采用选择性吸附、选择性洗脱的方式对样品进行富集、分离、纯化，是一种包括液相和固相的物理萃取过程；也可以将其近似的看作一种简单的色谱过程。
SPE是利用选择性吸附与选择性洗脱的液相色谱法分离原理。
较常用的方法是使液体样品通过一吸附剂，保留其中被测物质，再选用适当强度溶剂冲去杂质，然后用少量良溶剂洗脱被测物质，从而达到快速分离净化与浓缩的目的。
Waters 液相色谱化学品
2004 Waters Corporation
常用规格选择参考
药物分析 环境科学 食品安全
血浆样品：去除杂质
水体：富集痕量污染物 土壤、沉积物： 去除杂质和富集痕量污染物
动物、饲料及植物样品： 去除杂质
1cc/30mg(WAT094225) 1cc/10mg(186000383) 3cc/60mg(WAT094226)
6cc/200mg(WAT106202) 6cc/500mg(186000115) 3cc/60mg(WAT094226)
6cc/200mg (WAT106202) 6cc/500mg (186000115) 3cc/60mg (WAT094226)
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Oasis 阳离子交换吸附剂： 阳离子交换吸附剂：
Oasis HLB 填料
物理特性
比表面积： 比表面积：810m2/g 平均孔径： 平均孔径：80 总孔体积： 总孔体积：1.3cm3/g 平均粒径： 或者60 平均粒径：30m或者 m 或者
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Oasis HLB 填料
特征一： 特征一：水浸润性
优势 即使小柱在固相提取过程中干涸，也能够吸附分析物质 即使小柱在固相提取过程中干涸， 益处 – 获得一致性极好的高回收率 – 操作简单、快速 操作简单、
正 压
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固相提取技术操作方式
负压（真空提取装置） 负压（真空提取装置） Vacuum Manifolds
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20孔真空提取装置的配置 孔真空提取装置的配置
带试管架的提取装置 – 每套装置包含20个needle tips, 25个plugs及1个injector tool。用
WATERS液相色谱教程三四七(最全)
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液相色谱对流动相的要求
液相色谱仪器对流动相的要求∶
– 与检测器匹配 – 脱气 – 避免用含卤素离子的缓冲盐（不锈钢系统） – 溶剂的粘度
– 防止细菌的生长
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流动相的脱气
流动相脱气的目的
– 使色谱泵的输液准确
样品预处理的重要性
是影响实验成败的决定性步骤
占样品分析时间的比例最大
– 样品预处理所用时间远多于色谱分离的时间
占分析消耗总成本的比重最大
– 消耗大量的溶剂及其它化学品
对分析结果的重现性及准确性影响最大的环节
– 影响实验结果好坏的最重要因素
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关于色谱系统的反压
什么是反压(back pressure)
–流动相流经管路及色谱柱时会有阻力,即所谓的反压,
又称系统反压或系统压力
–Waters习惯用的压力单位是Psi(磅/平方英吋) –其它单位有:Bar,Mpa
影响系统反压的主要因素:
–流动相的溶剂组成 –温度 –流速
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色谱泵的排气操作
色谱泵实验前，应先确认泵头内没有气体，如有 气体要按以下步骤排气：
– – – – – – 将泵入口管吸滤头放入脱过气的流动相中 打开泵及在线脱气机电源开关 将排液阀打开，或断开与色谱柱连接的管路 设置流速到6-9ml/min,排液阀出口有液流连续流出 必要时(600泵)用10ml注射器从泵入口注入流动相 对于600,2695四元梯度泵,分别对所用各路溶剂进行 排气操作 – 停止泵流速,关闭排液阀,恢复断开的管路,备用
06)SPE基础原理及应用
17
SPE的操作模式： 的操作模式：
用单支固相萃取小柱进行手动SPE (正压驱动)
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SPE的操作模式： 的操作模式：
在20-位真空固相萃取装置上进行多柱SPE实验(真空驱动SPE)
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SPE填料的类型 正相填料
复合模式
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溶剂极性图
溶剂极性图
反相溶剂洗脱强度 己烷 异辛烷 四氯化碳 氯仿 二氯甲烷 四氢呋喃 乙醚 乙酸乙酯 丙酮 乙腈 异丙醇 甲醇 水 正相溶剂洗脱强度
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Oasis® 系列固相萃取吸附剂的演变: 从纯反相保留模式到复合保留模式 (IEX+RP) Oasis® HLB
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概要
一
样品前处理的重要性及原则
二
样品前处理方法及比较
三 固相萃取技术
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概 念
固相萃取（ 固相萃取（Solid Phase Extraction，SPE)是一 种重要的样品前处理技术， 种重要的样品前处理技术，由液固萃取和柱液相色谱技术 相结合发展起来的。 相结合发展起来的。利用固相吸附剂将液体样品中的目标 化合物吸附， 化合物吸附，与样品的基体和干扰化合物分离， 与样品的基体和Байду номын сангаас扰化合物分离，然后再用 洗脱液洗脱， 洗脱液洗脱，达到分离和和富集的目的。 达到分离和和富集的目的。
Oasis HLB Oasis MCX Oasis MAX Oasis WCX, WAX
SPE-GC／MS法检测鱼塘水中微量毒物
SPE-GC／MS法检测鱼塘水中微量毒物李晓民;杨崇俊;曲筱静;崔文;张璟【摘要】目的：建立固相萃取－气质联用法检测（SPE‐GC／MS／SIM ）分析方法，检测鱼塘水中微量敌敌畏、氯氰菊酯、硫丹和五氯酚含量。
方法取1000ml 鱼塘水进行固相萃取，洗脱后浓缩进行GC／MS／SIM 定性定量测定。
结果固相萃取对4种毒物浓缩提取后，各项定量参数符合分析要求。
鱼塘水中敌敌畏农药的最低检测限为0．1ng／ml ，氯氰菊酯的最低检出限为5ng／ml ，硫丹和五氯酚的最低检出限为1ng／mm。
结论SPE‐GC／M S法简单、灵活、经济、快速、无溶剂，适用于鱼塘水中微量毒物分析。
%Objective To establish an analysis method of detection of trace dichlorvos (DDVP) ,cypermethrin , endosulfan and pentachlorophenol (PCP) in fishpond water by gas chromatography‐mass spectrometry in selected ion monitoring (GC/MS/SIM ) with solid phase extraction (SPE) .Methods 1000ml fishpond water was treated with SPE .After being eluted and concentrated ,the water sample was treated with qualitative and quantitative anal‐ysis by GC/MS/SIM .Results After concentration and extraction of four toxicants with SPE ,the quantitative pa‐rameters for the fishpond sample conformed to the requirements of analysis .The detection limit for DDVP in fish‐pond water was 0 .1 ng/ml ,5 ng/ml for cypermethrin ,1 ng/ml for endosulfan and PCP .Conclusion The SPE‐GC/MS was simple ,flexible ,economic ,fast ,solvent‐free ,which was suitable for traces analysis of poison in fishpond water .【期刊名称】《济宁医学院学报》【年(卷),期】2014(000)006【总页数】3页(P425-426,429)【关键词】法医毒物分析;固相萃取;气质联用【作者】李晓民;杨崇俊;曲筱静;崔文;张璟【作者单位】菏泽市公安局刑事科学技术研究所，山东菏泽 274099;济宁市公安局刑事侦查支队;济宁市公安局刑事侦查支队;济宁医学院司法鉴定中心，山东济宁272067;济宁医学院司法鉴定中心，山东济宁 272067【正文语种】中文【中图分类】DF795.4近年来鱼塘投毒案件骤增，鱼塘水中毒物是投毒案的最直接证据。
SPE_方法运行指南2
建议体积为 6 mL,流 速为: 30 mL/min (0.5 mL/sec)
在每天运行样品前，先运行灌注管线程序 （PURGE.SPE）,如果更换了新的试剂，也需 要运行灌注管线程序 编写一个灌注程序，同时清洗进样针.
左侧的程序就是试剂管线 1-4 的灌注程序 注意: 为避免缓冲液盐析—确保有机溶剂和缓 冲液先于去离子水灌柱
淋洗后接着吹干，如果手动 SPE 方法没有，你也可以
设置 VENT(排空)为气源，排到废液口。
Purge-Cannulstep 8 清洗进样针（正常使用乙醇或洗提剂），让残 留的样品从进样针口排出。
Collect - step 9
收集组分请用低流速。
建议 Collect（收
RapidTrace 自动 SPE 仪器使用简要手册
RapidTrace Workstation 1
完善自动 SPE 方法，保证正常样品的高回收 以下的内容为编写完善的自动化固相萃取方 率，优化运行条件，不同实验室的条件适用 法，请按以下指南进行：
性，不同样品的适用性。
1 SPE 样品准备技巧。 2 正确的试剂设置 3 编写 RapidTrace 方法步骤 4 检查步骤合理性，样品试运行。 5 故障排除。 6 清洗管路
集） 流速: 2
Purge-Cannula - step 10
mL/min (0.03 mL/sec)
每个方法的最后步骤一定用是去离子水洗针. 这
样保证进样针和注射泵清洗，为下个样品备
用。
P.N.63076 rev.0
4 检查方法合理性，试运行样品
一个标准方法的运行总是包括以下要求：
9 废液瓶是空的（有足够的空间）。 9 试剂管插入液面，试剂已是准备好的 9 所有的试剂量足够运行所需。 9 灌注所有的试剂管（运行灌注方法），检查
SPE——精选推荐
一、固相萃取基本原理与操作1、固相萃取吸附剂与目标化合物之间的作用机理固相萃取主要通过目标物与吸附剂之间的以下作用力来保留/吸附的1）疏水作用力：如C18、C8、Silica、苯基柱等2）离子交换作用：SAX, SCX，COOH、NH2等3）物理吸附：Florsil、Alumina等2、p H值对固相萃取的影响pH值可以改变目标物/吸附剂的离子化或质子化程度。
对于强阳/阴离子交换柱来讲，因为吸附剂本身是完全离子化的状态，目标物必须完全离子化才可以保证其被吸附剂完全吸附保留。
而目标物的离子化程度则与pH值有关。
如对于弱碱性化合物来讲，其pH值必须小于其pKa 值两个单位才可以保证目标物完全离子化，而对于弱酸性化合物，其p H值必须大于其pKa值两个单位才能保证其完全离子化。
对于弱阴/阳离子交换柱来讲，必须要保证吸附剂完全离子化才保证目标物的完全吸附，而溶液的pH值必须满足一定的条件才能保证其完全离子化。
3、固相萃取操作步骤及注意事项针对填料保留机理的不同（填料保留目标化合物或保留杂质），操作稍有不同。
1）填料保留目标化合物固相萃取操作一般有四步（见图1）：Ø 活化---- 除去小柱内的杂质并创造一定的溶剂环境。
（注意整个过程不要使小柱干涸）Ø 上样---- 将样品用一定的溶剂溶解，转移入柱并使组分保留在柱上。
（注意流速不要过快，以1ml/min为宜，最大不超过5ml/min）Ø 淋洗---- 最大程度除去干扰物。
（建议此过程结束后把小柱完全抽干）Ø 洗脱---- 用小体积的溶剂将被测物质洗脱下来并收集。
（注意流速不要过快，以1ml/min为宜）此主题相关图片如下11.jpg：2）填料保留杂质固相萃取操作一般有三步（见图2）：Ø 活化--除去柱子内的杂质并创造一定的溶剂环境。
（注意整个过程不要使小柱干涸）Ø 上样--将样品转移入柱，此时大部分目标化合物会随样品基液流出，杂质被保留在柱上，故此步骤要开始收集（注意流速不要过快）Ø 洗脱---用小体积的溶剂将组分淋洗下来并收集，合并收集液。
液相色谱基础知识(waters)
色谱柱的联接
各种锥箍和管路接头长度示意图:
色谱柱的联接
在同样情况下保留行为也有差异
因此：
需要对色谱化学品(色谱柱)有更多的了解 需要不同品牌，即各个因素有较大差异的色
谱柱，以得到更多种选择性
Waters拥有众多不同品牌的色谱柱，目的 就是：供不同应用的要求
用不同品牌的色谱柱时，色谱方法有时可 能需要重新开发
Waters各种硅胶基质的色谱柱
C1 C4 C6 C8 C18 Phenyl CN NH2
mBandaPak
Resolve
Nova-Pak
Delta-Pak
Symmetry
Spherisorb
Waters不同品牌的色谱柱
m-BondaPak
文献背景强, 是工业标准 平均孔径125Å，10mm高活性、无定形硅胶 中等疏水性表面，端基封口。有独特选择性
对HPLC柱填料的了解（二）
平均孔径/孔体积 孔径/孔体积分布
大的孔径可分析高分 子量的分子
对HPLC柱填料的了解（三）
键合相化学
影响化合物的分离度：a
不同键合相对不同种类的化合物分离不同 可能导致色谱的分离机理不同 如：C18、C8、CN
硅胶表面及键合相
H 3 C
H 3 C
注意在用文献方法时转换流速,即:降低流速,以 保持线速度相同。
SPE 方法开发和问题解决
5. 以上几种洗脱技术相结合。
附剂不可避免地会发生降解。
SPE Technology
-2-
1. 用比分析物的 pKa 值高 2 个 pH 单位的缓冲液，
去中和分析物上的电荷。
注意：常见的硅胶基体的吸附剂填料的 HPLC 色谱柱，
2. 用高离子强度（＞0.1M）的缓冲液进行洗脱。 所能耐受的 pH 值的范围为 2-8 ，与此相比，Bond
3. 用带有少量酸或者碱的溶剂洗脱分析物，例如： Elut SPE 柱可适用的 pH 值范围要宽的多。在 pH＜2
3. 淋洗/去除干扰物
从弱的阳离子交换吸附剂上洗脱
用合适 pH 的缓冲液淋洗柱管，去除基质干扰物，同 时要维持目标分析物的保留
对下面的洗脱技术和方法进行评估，从而找到一个 可以得到最高回收率的萃取方法。
4. 洗脱
将传输针头插入 Vac Elut 真空装置，并放入贴上标 签的收集管，关闭真空，在柱管中加入洗脱溶剂。 打开真空，收集目标分析物。 洗脱溶剂的流速不超过 4ml/min。常用的洗脱溶剂 有： z 改变洗脱缓冲液的 pH 值 z 高离子强度的洗脱缓冲液 z 在洗脱缓冲液中使用更高选择性的离子对 z 在洗脱溶剂中加入 50%的有机改性剂，常用的
物的回收率。
子强度应小于 0.1M，才会得到最佳保留。
6. 分析物在强离子交换吸附剂上无法洗脱时，可
从强阳离子交换吸附剂上洗脱
对下面的洗脱技术和方法进行评估，从而找到一个 可以得到最高回收率的萃取方法。
以使用弱离子交换吸附剂。注意：离子交换作 用是比极性和非极性相互作用慢的作用过程， 因此，为了保证可靠的萃取结果，流速的控制 至关重要。
4.8
分析物
带有可载正电荷的官能团的化合物，包括：
Waters液相分析方法开发
©2011 Waters Corporation 20
甲醇、乙腈作流动相溶剂时的分离选择性差异
低 pH
2 1 34
10 11 XBridge™ Shield RP18
5 6
8
12
100% 乙腈
9 7
2 1 34
10 11 12
5,7 8 6
1:1 乙腈:甲醇
9
2
1 34
10,11
8,9
12 100% 甲醇
内容
介绍
— 进行方法开发的途径 — 系统性方法开发
影响选择性的主要因素
— 固定相 — 有机溶剂 — 流动相pH值 — 流动相pH值应用实例：林可霉素杂质分析方法
系统性方法开发策略
— 雷尼替汀强迫降解产物分析HPLC方法开发实例
沃特世HPLC色谱柱产品
©2011 Waters Corporation 3
ACQUITY CSH™ XSelect CSH™ C18
ACQUITY UPLC® HSS C18 HSS HPLC C18
YMC-Pack™ PolymerC18™
-0.5
Hy0.d5rophobicity 1.5
(ln [k] acenaphthene)
2.5
3.5 062010
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5. 1-Pyrenesulfonic acid (A) MW 304.3
O
O
8. Flavone (N) MW 222.2
12. Octanophenone (N) MW 204.3
©2011 Waters Corporation 14
参考化合物的结构: II.碱性物质
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SPE吸附剂选择
怎样才是最理想的SPE方法？
P 操作简单 P 稳定、 可重现
[ 从这里开始 ]
P 快速
P 达到纯化目标
Oasis HLB 首选
适用情形： 要求针对强极性化合物 的超高载量
所有基质
Oasis混合模式
在常规分析中对样品进行反相 SPE净化
所有基质
所有基质
适用情形： 对分析物专一性、 灵敏度和/ 或净化 程度的要求较高
Oasis系列产品采用独特的水浸润性聚合物吸附剂， 省去了其他家聚合物吸附剂和硅胶基质吸附剂必需的活化和平衡步骤， 直接使用即可。 过去， 我们必须执行这两个步骤才能使反相SPE有效保留分析物。 得益于Oasis独具的水浸润性， 水性样品可直接上样而不损失回收率。
Oasis MCX
适用于碱性化合物的混合模式 阳离子交换吸附剂
清洗
5%甲醇
收集
分析物直接通过， 不会被保留
清洗
90/10 *乙腈/甲醇
专属性最高的SPE方法
Oasis混合模式吸附剂
如需更多信息，请访问： /oasis
Oasis混合模式产品能为分析人员带来最高水平的洁净度和分析物专属性。 您可以为酸性、 碱性、 中性或两性化合物选择适用的Oasis吸附剂， 结合 反相保留机制与离子交换保留机制设计靶向SPE方法。 这些吸附剂还适用于未知混合物的方法开发， 帮助您快速确定最适合目标化合物的吸附剂和方案。
如需更多信息，请访问： /oasis
玻璃材质 小柱 在线色谱柱和 小柱
注射针筒式 小柱
96 孔 提取板
µElution 板
带有Teflon ®筛板的超洁净玻璃注射器。 适用于ppt级的痕量检测和分析。 提供含200 mg吸附剂的5 cc配置。 可进行稳定、 可重现、 超快速的在线分析。 多种配置、 粒径和吸附剂填料可供选择。 六种获专利的Oasis ®吸附剂 — HLB、 PRiME HLB、 MCX、 MAX、 WCX和WAX。 对多种化合物的回收率极高， 且具有出色的结果重现性。 另有配合Spark Holland Prospekt-2™/Symbiosis™系统使用的小柱规格。
最简单
Oasis PRiME HLB兼具 两方面优势
最洁净
固相萃取
降低色谱分析的复杂性 提高信噪比/优化检测限 最大限度减少基质效应的影响 浓缩目标分析物 减少分析结果差异/ 提升分析稳定性 延长色谱柱使用寿命 缩短系统停机时间
Oasis SPE系列吸附剂
SPE方法开发 从此不再复杂
本文档包括关于以下内容的指南：
P SPE 规格选择 P SPE吸附剂选择 P SPE方法 P SPE 上样量指南 P 实验室常用的换算与溶液计算 P 回收率和基质效应计算 P 实验设置 P 磷脂监测 P SPE故障排除 P 样品预处理
选择最适用的SPE规格
规格
获专利的μElution板设计。 非常适用于10~375 µL样品的SPE净化和分析物富集。 洗脱体积仅25 µL， 无需蒸发和复溶步骤。 可将分析物浓缩高达15倍。 可兼容大多数自动化液体处理系统， 实现可靠的自动化高通量SPE(HT-SPE )。 备受赞誉的创新型两级式孔设计。 高通量、 高回收率。 提供每孔容纳5 mg、 10 mg、 30 mg和60 mg吸附剂的多种规格。 可兼容大多数自动化液体处理系统， 实现可靠的自动化高通量SPE(HT-SPE )。 超洁净针筒和筛板。 1cc/10 mg~35 cc/6 g的不同小柱尺寸。 1 cc、 3 cc和6 cc配置的无边沿注射针筒式小柱。 装填有225 mg吸附剂的Plus型小柱且带有Luer接头。
去除95%的常见基质干扰物， 例如盐类、 蛋白质和磷脂等 可浓缩分析物 分析速度更快， 节约分析时间 样品经预处理后即可直接上样， 无需活化和平衡
3步方案 上样
经预处理的样品
2步 通过策略 上样
含高浓度有机溶剂(例如乙腈)的 样品基质干扰物被保留
可通过调整清洗和 洗脱步骤优化结果 (*高浓度乙腈对于 获得纯净的洗脱物 至关重要。) 可通过调整通过式 方案所用的溶液优 化结果
Oasis MAX
适用于酸性化合物的混合模式 阴离子交换吸附剂
Oasis HLB
适用于酸、碱和中性化合物的亲水-亲脂平衡 反相吸附剂
Oasis PRiME HLB* 为您提供一种简单 且通用的方法， 能够去除95%的常见 基质干扰物(例如磷脂、 脂肪、 盐和 蛋白质)， 让用户能够将固相萃取轻 松应用于实验室的常规分析。 通过简 单的2步或3步方案即可得到极为纯 净的样品洗脱物。 Oasis HLB 是所有Oasis吸附剂的主要 成分。 这种多功能反相吸附剂对许多 化合物都具有较高的载量。
适用于强碱性和季胺类化合物的 混合模式弱阳离子交换吸附剂 水可浸润 在pH 0~14范围内稳 定，无硅醇相互作用
pKa约为5
pKa约为6
三步或步骤更少的 样品制备方案？
P 更简单 P 更快速 P 更洁净
如需更多信息，请访问： /prime
Oasis PRiME HLB方案
pKa < 1
Oasis WCX
亲水 保留极性 化合物
pKa > 18
亲脂 反相保留
Oasis WAX
适用于强酸性化合物的 混合模式弱阴离子交换吸附剂
混合模式Oasis吸附剂兼具反相保留 和离子交换功能， 可进行混合模式的 样品制备，提升分析物专属性和灵
*Oasis PRiME HLB为专利型吸附剂 （专利申请中） 。
Oasis 2 x 4方法开发策略
碱性化合物 pK a 2–10
OASIS MCX
强酸性化合物 பைடு நூலகம்K a <1.0
OASIS WAX
强碱性化合物 pK a >10
OASIS WCX
酸性化合物 pK a 2–8
OASIS MAX
4步方案 上样
经预处理的样品
4步方案 上样
经预处理的样品
上样、 清洗和洗脱溶液可根据目标分析 物的性质或具体分析需要进行调整。 例 如， 弱碱性化合物可以酸性水溶液的形 式上样至Oasis MCX 吸附剂中， 这样可确 保此弱碱性分析物带电(电离)， 同时实 现反相保留和离子交换保留。 此外， 分 析人员还可通过调整各步骤中有机溶 剂的浓度进一步优化方法。 如需更多信息， 请访问我们的网站： /oasis