血栓与止血的检验操作规程

血栓与止血的检验操作规程

血管壁与内皮细胞检验

出血时间（BT）

出血时间检测是指皮肤受特定条件的外伤后，出血自行停止所需的时间。此过程反映皮肤毛细血管与血小板相互作用，包括血小板粘附，血小板活化和释放以及血小板聚集等反应。

1. 出血时间“测定器法”自肘前窝凹下二横指处，经常规消毒后，使刀片由“测定器”内刺入皮肤，启动秒表，每隔半分钟用干净滤纸吸干流出的血液，直至出血自然停止，按停秒表，记录出血时间。

2. Duke法，自耳垂或指尖取血。

【方法与操作】

见《全国临床检验操作规程》（第二版）

【注意事项】

测定器法：

1. 采取部位应保暖，血液应自动流出。

2. 由于刺入皮肤的刀片长度和深度均固定，故“测定器法”的结果较为准确。

3. 滤纸吸干流出血液时，应避免与伤口接触。

4. 试验前1周内不能服用抗血小板药物，如阿司匹林等，以免影响结果。

血小板数量和功能检验

血小板计数和平均血小板体积测定

血小板计数：

目视计数法。

【标本】

末梢血或抗凝静脉血。

【方法与操作】

见《全国临床检验操作规程》（第二版）。

【试剂】

1. 草酸铵法稀释液。

2. 许汝和稀释液。

【附注】

1. 血小板稀释液要清洁。防微粒和细菌污染。试管和吸管也应清洁、干净。

2. 针刺应稍深，使血流通畅。拭去第一滴血后，首先采血作血小板检测，动作要快，防止血小板聚集和破坏。采取标本后尽快计数。

3. 血液稀释液充分混匀后，滴入计数池内后，要静置10~15min。室温高时注意保持计数池周围的湿度，以免水分蒸发。

4. 计数时光线要适中，注意有折光性的血小板与杂质灰尘相区别，附在血细胞旁边的血小板也要注意，不要漏掉。

血小板计数仪计数

【标本】

末梢血。

【方法与操作】

使用血小板计数仪及与其相匹配的稀释液。操作详见仪器使用说明书。

平均血小板体积（MPV）测定

【标本】

根据仪器的要求用末稍血或静脉取血注入抗凝管（EDTA.Na2或肝素）

【方法与操作】

自动化血细胞计数仪均可检测

血小板功能检验

血小板粘附试验

【标本】

自静脉取血1.0~1.5ml。

【方法】

1. 玻珠柱法：

（1）操作：见《全国临床检验操作规程》（第二版）。

（2）注意事项：

1）取血过程必须顺利，掌握血液通过玻珠柱的速度，流速太快，粘附率降低，流速太慢会使粘附率增高。 2）玻珠柱为一次性用具，用后即弃去。

3）待用玻珠柱应置于干燥器中贮存，受潮后粘附率下降。

2. 玻璃滤器法：

【标本】

自静脉取血1.5ml。

【方法与操作】

见《全国临床检验操作规程》（第二版）。

血小板聚集试验（PAgT）

【标本】

自肘静脉取血4.5ml注入于含0.5ml 109mmol/L枸椽酸钠的硅化离心管内，充分混匀。

【试剂】

1. 富含血小板血浆（PRP）及贫含血小板血浆（PPP）。

2. 血小板聚集诱导剂ADP、肾上腺素、胶原、瑞斯托霉素（Ristocetin）等。

【方法与操作】

PAgT比浊法，按《全国临床检验操作规程》（第二版）步骤操作。

【注意事项】

1. 血标本中pH6.8~8.5之间时，可测得最佳结果。pH ＜6.4或＞10.0时，可使聚集抑制或消失。

2. 阿司匹林、潘生丁、肝素、双香豆素等可抑制聚集，尤其阿司匹林抑制聚集作用时间可持续1周。

3. 采血后标本应放在15~25℃下，切忌冰箱内保存，并在3h内作完实验。

凝血因子检验

全血凝固时间检验（CT）

【标本】

静脉取血3ml。

【方法与操作】

试管法、硅管法操作参见《全国临床检验操作规程》（第二版）。

【附注】

1. 静脉取血要一针见血，尽量减少组织液和空气混入。

2. 水浴箱温度要恒定，过高或过低，可影响结果。

活化部分凝血活酶时间测定（APTT）

【标本】

自静脉取血，用109mmol/L枸椽酸钠作1:9抗凝。

【试剂】

市售成套试剂。

【方法与操作】

按试剂及有关仪器说明书要求进行。

【附注】

1. 标本应及时检测，最迟不超过2h。

2. 分离血浆应在3000r/min，离心10min。

3. 本试验较试管法全血凝血时间敏感，能检出因子Ⅷ：C＜25％轻型血友病。

血浆凝血酶原时间测定（PT，一期法）

【标本】

静脉血1.8ml，用109mmol/L枸椽酸钠0.2ml抗凝。

【试剂】

1. 组织凝血活酶浸出液；

2. 0.025mol/L CaCl2液；

【方法与操作】

见《全国临床检验操作规程》（第二版）。

【附注】

1. 采血后宜在1h内完成，置冰箱4℃保存,不应超过4h，-20℃下可放置2周，-70℃可放置6个月。

2. 水温箱控制在37℃±1℃，过高过低均影响结果。

简易凝血活酶生成试验（STGT）

【标本】

取全血0.04ml加5ml蒸馏水，混匀，即成溶血液，备用。

【方法与操作】

见《全国临床检验操作规程》（第二版）

循环抗凝物质检验

凝血酶时间测定（TT）

【标本】

自静脉取血1~1.5ml，注入枸橼酸钠抗凝管内，混匀。

【方法与操作】

见《全国临床检验操作规程》（第二版）

【试剂】

1. 109mmol/L枸橼酸钠液

2. 凝血酶溶液

【附注】

1. 采血后宜在1h内完成，置冰箱内保存不应超过4h。