CAIVD蓝皮书血栓与止血诊断

CAIVD蓝皮书血栓与止血诊断

【CAIVD蓝皮书】血栓与止血诊断

编者按：作者：谢永华上海太阳生物技术有限公司总经理《中国体外诊断产业发展蓝皮书》编委中国医学装备协会检验医学分会血栓组副组长2021-2021年度上海医疗器械行业领军人物第一章血栓与止血诊断的发展历程及趋势第一节概述

血栓与止血诊断是通过对各种因子的检测，从不同方面、不同环节了解其发病原因及病理过程，对血栓性疾病和出血性疾病的病因进行分析。近年来，随着血栓性疾病与出血性疾病在人类疾病谱中地位的变化，以及基础医学，临床医学和实验技术的发展，血栓与止血实验室检测出现了许多新的研究热点和发展趋势，并在全国逐步普及。

血栓与止血实验室检测的新技术和新方法不断涌现，用于血栓病和出血病的实验诊断项目日新月异，从筛选试验、确诊试验到分子生物学的基因检测、突变基因和异常蛋白的功能研究等，趋向更加简便、特异、系统和全面。第二节发展历史

血栓与止血是一门新兴的边缘交叉学科，涉及基础医学、生物化学、免疫学、分子生物学以及临床医学研究领域。在20世纪上半叶，血液学家主要研究方向为出血及出血性疾病。随着研究的深入，发现血栓形成及其理论似乎较出血及出血

性疾病更为重要，因为它在许多非血液疾病，尤其在严重危害人类健康和生命的一些疾病的发展中起重要作用。50年代取得了绝大多数血栓形成机制和血栓性疾病的实验室诊断技术的过程重要研究成果，于同时期提出了著名的内源性和外源性血液凝固通道理论，并将肝素和维生素K拮抗剂用于临床，其它口服抗凝剂也随后应用于静脉血栓和肺动脉血栓的治疗。到70年代，各种临床凝血测试方法的应用使大多数出血性疾病得以诊断和分类，对基础理论和临床实践的研究发展使血栓与止血形成了一门独立的学科，国际血栓与止血学会因此成立，进一步促进了学科的发展。80年代到90年代期间，分子生物学和人类基因组学、蛋白质生物化学、细胞生物学、分子药理学的迅猛发展带动了血栓与止血学科的深入研究与临床应用。许多出血性疾病和血栓性疾病的分子病理机制得到阐明，研制成功不少止血、抗凝和溶栓新药，并出现了许多新的诊断技术，在出血性疾病和血栓性疾病的治疗领域上取得了显著的进步。

第三节血栓与止血诊断技术发展与应用

随着血栓与止血的基础理论及其应用研究的日益深入和现代生物医学技术的进步，血栓与止血的检测技术和手段日趋先进和自动化，在临床血栓与止血疾病诊断中更加简便、快速、特异。现将血栓与止血诊断技术的发展现状和临床应用总结如下：一、血栓与止血检测技术1、物理学方法利用物

理学原理构造的特殊仪器对血栓与止血相关的血液成分进行直接或间接检测的方法，

通常有三大类：显微镜法、血液流变学法和流式细胞术。目前常用的方法包括手工进行的

血清、血浆粘度玻璃管检测法；仪器对全血、血浆、血清黏度测定的锥板法、旋转法，仪

器模拟血栓形成的体外血栓测定仪；手工及仪器进行的血小板和红细胞电泳等。流式细胞

术则可方便进行血小板糖蛋白及其抗体的检测，以判断血小板功能改变对血栓与止血作用

的影响。其它还有以光电比浊为原理的血小板聚集仪和利用血小板在玻璃表面具粘附特性

的血小板粘附测定仪。

2、生物学方法生物学方法亦称凝固法，即将凝血因子激活剂加入待检血浆中，使血

浆发生体外凝固。手工法，可凭肉眼观察到试管中出现纤维蛋白丝或血浆流动停止。凝血

分析仪则可连续记录血浆凝固过程中的一系列变化如光、电及机械运动等，并将这些变化

信号转变成数据，用计算机收集、处理数据后得出检测结果。这类方法发展最早，使用最

广泛。目前，手工检测的凝固法主要有全血法、带部分凝血因子的缓冲液法和血浆法等，

后者是现有手工法使用最多的一种检测方法；凝血分析仪使用的凝固法大致可分为三种：

电流法、黏度法（亦称磁珠法）和光学法，后者是现有凝血分析仪使用最多的一种检测方法，其包括投射和散射比浊法。3、生物化学法生物化学方法主要是通过测定产色物质的

吸光度

变化，以推算待测物的含量。这类方法以酶学方法为基础，可直接定量，所需样品量小，测定结果准确、重复性好，便于标准化和自动化，可对止血与血栓过程中起作用的多

种酶原活性进行检测，如凝血酶原、纤溶酶原、蛋白C、蛋白S及抗凝血酶等。手工的生

物化学法是指人工配制各种缓冲液和工作液或以各种试剂盒中的试剂直接配成测定液在酶

标仪上读出吸光度值，通过标准曲线来计算待测物的含量。凝血分析仪目前使用产色物质

检测的指标大致可分为两种模式，即对酶原和酶抑制物进行测定，其特点是快速、稳定和

节约试剂。4、免疫学方法以被检物作为抗原，制备相应的多克隆或单克隆抗体，利用抗

原抗体的特异结合反应来对被检物进行定性和定量检测。其包括免疫扩散法、免疫比浊法、免疫电泳法、酶联免疫吸附试验和放射免疫测定等。全自动凝血分析仪多采用免疫比浊法，其可通过透射或散射比浊分析来完成。此法的基本原理是当一定波长的光线通过反应混合

液时，被其中抗原抗体反应形成的免疫复合物（IC）吸收而减弱。在一定范围内，透射光

被吸收的量与IC量呈正相关，而IC的量则与相应抗原和抗体的量呈函数关系。手工法

应用更广泛，免疫扩散、免疫电泳、酶联免疫吸附试验和放射免疫测定在血浆止血与血栓

相关蛋白检测中都使用。

5、干化学技术干化学技术主要用于床旁凝血分析仪，其分

析原理是将惰性顺磁铁氧化颗粒（PIOP）均匀分布并结合于可产生凝固或纤溶反应的

干试剂中，PIOP可在一固定垂直磁场作用下移动。当血标本通过毛细管作用进入反应层后，可溶解干试剂，并发生相应的凝固和纤溶反应，同时与试剂结合的PIOP在反应过程中通

过其移动或摆动幅度的大小改变而提供纤维蛋白形成或溶解的动力学特征，PIOP摆动所产生的光量变化可通过光电检测器记录，然后通过信号放大、转换、计算而得到检测结果。6、分子生物学技术利用分子生物学技术对各种出血性、血栓性和血栓前状态疾病进行分