最新不规则抗体筛选分析教学讲义PPT
合集下载
ABO血型鉴定不规则抗体筛选
为什么这次试验没有安排玻片法 的反定型？
因为存在于病人或献血者血清中的抗 Ａ及抗Ｂ，个体差异很大，如果效价较 弱，在玻片上不足以凝集大量抗原阳性 的红细胞，造成假阴牲的结果所以采用 玻片法作反定型的结果常不可靠。而用 试管离心法作反定型，则促进抗原抗体 反应，形成肉眼可见的凝块，使结果更 为可靠
谢谢
ＡＢＯ正反定型结果不一致的常 见原因有哪些？
（１）人为因素：①试剂不标准、失效或污染； ③操作中加错样本或试剂、离心速度不足或过 度、细胞与血清比例不当、结果判断错误等。 （２）客观因素：①因某些疾病导致抗原减弱 如：白血病，MDS（骨髓增生异常综合征）患 者血型抗原减弱导致误定血型。②受检者抗体 效价低（如婴幼儿、老年人、大量输液的患者， 血浆蛋白低下等）③某些药物干扰如输注右旋 糖酐后会干扰血型检定。
四 实验步骤.swf
1. 玻片法
（1） 取双凹玻片一块，用干净纱布轻拭使之洁净，在玻片两端 用记号笔标明A及B，并分别各滴入A及B标准血清一滴。 （2） 用滴管吸取红细胞悬液，分别各滴一滴于玻片两端的血清 上，注意勿使滴管与血清相接触。 （3） 竹签两头分别混合，搅匀。用两根 分别用来混合A型和B型标准
二 实验原理
血型就是红细胞膜上特异抗原的类型。在 ABO血型系统中，红细胞膜上抗原分A和B两种 抗原，而血清抗体分抗A和抗B两种抗体。血型 鉴定是将受试者的红细胞加入标准A型血清 （含有抗B抗体）与标准B型血清（含有抗A抗 体）中，观察有无凝集现象，从而测知受试者 红细胞膜上有无A或/和B抗原。在ABO血型系 统，根据红细胞膜上是否含A、B抗原而分为A、 B、AB、O四型。 见下表
A标准血清 B标准血清 2滴 受试者的红细胞悬液 1滴 1滴 混匀后1000rpm离心1min或3000rpm离心15秒。 。 取出观察结果。完全凝集的管底部有红细胞的凝块， 管底细胞边缘呈花边状，轻弹试管凝块不散；完全不 凝的试管，血细胞均匀的沉到管底，边缘整齐，用手 轻弹试管，红细胞像一缕烟似的立即上升，随即成为 均匀的悬液;轻微凝集的，必须将液体转到载玻片上镜 检后判定凝集程度。
不规则抗体筛查和鉴定培训课件
2.加入聚凝胺，缩短红细 胞之间的距离，不完全抗 体同时与两个红细胞结合 使其特异性凝集
聚凝胺
枸橼酸钠
3.加入枸橼酸钠中和聚凝胺
4.不完全抗体的结合， 特异性凝集不消失
不完全抗体
本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之
抗人球蛋白介质法 处，请联系网站或本人删除。
1.红细胞彼此之间有一定的间 距 2.不完全抗体结合在红细胞表
产生：免疫刺激； 免疫抗体 分类：IgG类抗体为主； IgM类抗体少
本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之
IgM抗体处，请联系网站或本人删除。
多以五聚体形式存在，分子最大
在盐水介质中能直接连接相应的红细胞， 使之发生肉眼可见的凝集反应，又称为完全 抗体
IgG 抗体 本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之 处，请联系网站或本人删除。
本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之
思考题处，请联系网站或本人删除。
1.不规则抗体筛选为何先在盐水介质中进行？ 2.能否只选择聚凝胺介质法或抗人球蛋白介 质法一种方法进行不规则抗体的筛查？
参考资料 本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之 处，请联系网站或本人删除。
本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之
教学目标 处，请联系网站或本人删除。
1.掌握不规则抗体筛查方法 2.熟悉不规则抗体筛查的概念、方法学评价
及临床意义
本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之
不规则抗体 处，请联系网站或本人删除。
聚凝胺
枸橼酸钠
3.加入枸橼酸钠中和聚凝胺
4.不完全抗体的结合， 特异性凝集不消失
不完全抗体
本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之
抗人球蛋白介质法 处，请联系网站或本人删除。
1.红细胞彼此之间有一定的间 距 2.不完全抗体结合在红细胞表
产生：免疫刺激； 免疫抗体 分类：IgG类抗体为主； IgM类抗体少
本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之
IgM抗体处，请联系网站或本人删除。
多以五聚体形式存在，分子最大
在盐水介质中能直接连接相应的红细胞， 使之发生肉眼可见的凝集反应，又称为完全 抗体
IgG 抗体 本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之 处，请联系网站或本人删除。
本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之
思考题处，请联系网站或本人删除。
1.不规则抗体筛选为何先在盐水介质中进行？ 2.能否只选择聚凝胺介质法或抗人球蛋白介 质法一种方法进行不规则抗体的筛查？
参考资料 本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之 处，请联系网站或本人删除。
本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之
教学目标 处，请联系网站或本人删除。
1.掌握不规则抗体筛查方法 2.熟悉不规则抗体筛查的概念、方法学评价
及临床意义
本文档所提供的信息仅供参考之用，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之
不规则抗体 处，请联系网站或本人删除。
不规则抗体筛查与鉴定 PPT
抗人球蛋白介质法：检测IgG型血型抗体最为经典方法， 步骤繁琐，耗时较多
临床意义
献血者：防止含有不规则抗体的血液输注给病 人，避免溶血性输血反应
受血者：有助于血液选择，充分的时间选择相合 的血液
孕妇：早发现，孕期进行新生儿溶血病的预防和 治疗，减少不规则抗体对胎儿或新生儿带来的伤 害
小结
1.不规则抗体两类：IgG型、 IgM型
面,但是不能和两个红细胞同 时结合（致敏） 3.加入抗人球蛋白
4.抗人球蛋白同时和两个 不完全抗体的Fc段结合， 从而把红细胞连接在一起
方法学评价
盐水介质法：最基本，检测IgM型血型抗体
聚凝胺介质法：速度快，实验时间5分钟左右 ； 不适合于Kell系统抗体的检测，但汉 族人群至今无Kell系统抗体检出报道
产生：免疫刺激； 免疫抗体 分类：IgG类抗体为主； IgM类抗体少
IgM抗体
多以五聚体形式存在，分子最大
在盐水介质中能直接连接相应的红细胞， 使之发生肉眼可见的凝集反应，又称为完全 抗体
IgG 抗体
单体形式存在，分子量较小 盐水介质中只能致敏相应抗原的红细胞，而不能
使之凝集，又称为不完全抗体 必须通过特定的方法使致敏红细胞发生凝集
35.7nm
不规则抗体检测原理
14nm
聚凝胺介质法
1.红细胞上已有不完全 抗体致敏
2.加入聚凝胺，缩短红细 胞之间的距离，不完全抗 体同时与两个红细胞结合 使其特异性凝集
聚凝胺
枸橼酸钠
3.加入枸橼酸钠中和聚凝胺
4.不完全抗体的结合， 特异性凝集不消失
不完全抗体
抗人球蛋白介质法
1.红细胞彼此之间有一定的间 距 2.不完全抗体结合在红细胞表
不规则抗体筛查
临床意义
献血者：防止含有不规则抗体的血液输注给病 人，避免溶血性输血反应
受血者：有助于血液选择，充分的时间选择相合 的血液
孕妇：早发现，孕期进行新生儿溶血病的预防和 治疗，减少不规则抗体对胎儿或新生儿带来的伤 害
小结
1.不规则抗体两类：IgG型、 IgM型
面,但是不能和两个红细胞同 时结合（致敏） 3.加入抗人球蛋白
4.抗人球蛋白同时和两个 不完全抗体的Fc段结合， 从而把红细胞连接在一起
方法学评价
盐水介质法：最基本，检测IgM型血型抗体
聚凝胺介质法：速度快，实验时间5分钟左右 ； 不适合于Kell系统抗体的检测，但汉 族人群至今无Kell系统抗体检出报道
产生：免疫刺激； 免疫抗体 分类：IgG类抗体为主； IgM类抗体少
IgM抗体
多以五聚体形式存在，分子最大
在盐水介质中能直接连接相应的红细胞， 使之发生肉眼可见的凝集反应，又称为完全 抗体
IgG 抗体
单体形式存在，分子量较小 盐水介质中只能致敏相应抗原的红细胞，而不能
使之凝集，又称为不完全抗体 必须通过特定的方法使致敏红细胞发生凝集
35.7nm
不规则抗体检测原理
14nm
聚凝胺介质法
1.红细胞上已有不完全 抗体致敏
2.加入聚凝胺，缩短红细 胞之间的距离，不完全抗 体同时与两个红细胞结合 使其特异性凝集
聚凝胺
枸橼酸钠
3.加入枸橼酸钠中和聚凝胺
4.不完全抗体的结合， 特异性凝集不消失
不完全抗体
抗人球蛋白介质法
1.红细胞彼此之间有一定的间 距 2.不完全抗体结合在红细胞表
不规则抗体筛查
不规则抗体筛选
不规则抗体筛选一、试验原理：利用不规则抗体筛选红细胞试剂对血清进行血型不规则抗体检测。
在任何介质中，只要任何单组或多组筛选红细胞产生凝集或溶血反应，则试验为阳性，表明血清中存在与筛选细胞中抗原相对应的抗体。
若抗筛试验为阳性，建议用谱细胞来检测抗体特异性。
一、注意事项：1. 建议在使用血型卡前重新离心后再应用。
2. 若凝胶卡封口开裂、孔中凝胶干涸或有气泡时，不可使用。
3. 撕开凝胶卡的封口膜时，不能用力过猛，以免造成凝胶微孔间的交叉污染。
4. 红细胞悬液的浓度为0.5~0.8%，浓度过高或过低会影响检测结果。
5. 血浆标本必须充分离心去除纤维蛋白，否则会在微柱凝胶中阻止红细胞沉淀，呈现假阳性反应。
6. 如在微柱凝胶管中出现溶血现象，强烈提示为红细胞抗原抗体阳性反应，也不排除其他原因所致溶血，一定要认真分析并向上级主管技术人员报告并讨论。
7. 某些药物、疾病可导致正定型结果弱阳性反应或正反定型不相符，应进一步检查以明确原因。
8. 溶血性疾病、巨球蛋白血症、输注大分子血浆扩容剂如右旋糖酐等可能会影响实验结果。
9. 人源血液样本存在潜在的传染性，凝胶卡使用后按医疗生物垃圾废弃物处理。
二、设备及材料试剂：1、LB-3000医用低速离心机2、LB-C02-1免疫微柱孵育器3、加样枪：10μl, 25μl, 50μl 和 1000μl4、广谱抗人球蛋白卡（抗-IgG+C3d）5、不规则抗体筛选红细胞试剂三、操作流程：1、取广谱抗人球蛋白卡（抗-IgG+C3d）一张，按规定检查符合要求后，进行标记（Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ，受检者姓名或编码）。
2、红细胞悬液配制：不规则抗体筛选红细胞悬液：取不规则抗体筛选红细胞试剂中的I号、II号、III号红细胞，稀释4倍（1份红细胞和3份生理盐水）。
3、加样：①第1,2,3及第6孔加入受检者红细胞悬液50μl。
②第4孔加入A1型反定型试剂红细胞悬液50μl③第5孔加入B型反定型试剂红细胞悬液50μl。
凝聚胺方法不规则抗体 PPT课件
疗效判定标准
1.取试管3支，各加被检血清（或血浆）100ul，分别加入 3-5%筛检红细胞各50ul。 2. 各加 LIM0.65ml，混匀后，再加入 Polybrene 溶液 100ul， 并混合均匀。
3.用输血科专用离心机3400rpm/min离心10秒，然后倒掉 上清液，不要沥干，让管底残留约0.1ml液体。
技术路线
（包括总体安排和进度步骤及其可行性论证）
不规则抗体筛选试验（凝聚胺法）是在凝聚胺试验法的
辅助作用下让受检者血清与特殊试剂红细胞 ---筛选红细 胞发生免疫反应，以发现在 37℃下有活性抗体的试验方 法。
抗体筛选试验（凝聚胺法）不一定能检验出所有有临床
意义的抗体，一些低频率抗原产生的抗体或者剂量效应 的抗体，可能被漏检，这时需选择抗原性更完全和特异 性更敏感的筛选细胞做试验，或用更高敏感度的技术作
一、献血者的血清或血浆进行抗体筛查，可以防止 含有不规则抗体的血液输注给病人，避免由于献血者血 液中的不规则抗体引起病人红细胞的破坏而引起的溶血
性输血反应，同时可以减少血液浪费，可将有不规则抗
体的血液制备成抗体血清，用于稀有血型的检测。 二、对需要输血治疗的患者，进行不规则抗体筛查， 有利于血液的选择，从而有充分的时间来选择不含有针 对某抗体的相应抗原的血液，从而防止因为输注含有某 抗体相应抗原的血液而引起溶血性输血反应，保证输血 安全。
适应症
适应症：禁忌症来自不良反应不规则抗体筛选试验（凝聚胺法）
第一类产前病人：测定非典型抗体以排除新生儿溶血病
发生的可能。
第二类输血前病人：确定供应相应抗原阴性血液，供血
者、受血者之间相容性评估。
第三类献血员：避免有阳性抗体阳性血，发现稀有血型
不规则抗体筛查与分析(1)
01抗筛的基本问 题
02抗体的筛查与 分析
03抗体的鉴定与 分析
01凡遇有下列情况必须按《全国临床检验操 作规程》有关规定作抗体筛选实验：交叉 配血不合时；对有输血史、妊娠史或短期 内需要接收多次输血者。
02不做抗筛直接盲配有风险，对于弱抗体， 若供血者为杂合子（剂量效应）则有可能 为阴性结果。所以筛选（鉴定）对抗体的 检测比交叉配血更敏感和可靠。
抗筛的目的是通过受检的血清和已知的带有
不同抗原的三人份O型筛选红细胞反应，来 测定血清中有无抗A和抗B以外的意外抗体 （也称不规则抗体）
对疑难交叉配血有重要的指导意义，降低盲 配风险
补体依赖性抗体 补体非依赖性抗
体
完全抗体 不完全抗体
天然抗体 免疫抗体
冷抗体 温抗体
自身抗体 同种抗体
临床有意义抗体：一般为免疫性抗体，在体 温条件（37度）具有反应性的同种抗体。
+ （抗-E/-cE约占1/3，此类患者筛选相合的血液 是很容易的）
+ Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ全部阳性，且强度一致；自c阳 性：结合病情，优先考虑自身抗体
+ Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ全部阳性，自c阴性：考虑同种 抗体，如病人血型为Rh阴性，优先考虑抗-D
+
+ 抗筛结果排除假阴性，一定是阴性结果吗？
+ 解答：“抗筛阴性”并不能代表“同种抗体阴性”。 + 筛选细胞和谱细胞有人种差异，如Mia，
+ 抗人球蛋白试剂：IgG抗体通过抗人IgG类免 疫球蛋白抗体（简称抗人球）“搭桥”，使已 致敏了不完全抗体的RBC发生凝集。
+ 抗筛要求用抗IgG+C3的多特异性抗人球蛋白 试剂，若用单抗IgG的单特异性抗人球蛋白 试剂，可能对某些抗体造成漏检。
02抗体的筛查与 分析
03抗体的鉴定与 分析
01凡遇有下列情况必须按《全国临床检验操 作规程》有关规定作抗体筛选实验：交叉 配血不合时；对有输血史、妊娠史或短期 内需要接收多次输血者。
02不做抗筛直接盲配有风险，对于弱抗体， 若供血者为杂合子（剂量效应）则有可能 为阴性结果。所以筛选（鉴定）对抗体的 检测比交叉配血更敏感和可靠。
抗筛的目的是通过受检的血清和已知的带有
不同抗原的三人份O型筛选红细胞反应，来 测定血清中有无抗A和抗B以外的意外抗体 （也称不规则抗体）
对疑难交叉配血有重要的指导意义，降低盲 配风险
补体依赖性抗体 补体非依赖性抗
体
完全抗体 不完全抗体
天然抗体 免疫抗体
冷抗体 温抗体
自身抗体 同种抗体
临床有意义抗体：一般为免疫性抗体，在体 温条件（37度）具有反应性的同种抗体。
+ （抗-E/-cE约占1/3，此类患者筛选相合的血液 是很容易的）
+ Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ全部阳性，且强度一致；自c阳 性：结合病情，优先考虑自身抗体
+ Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ全部阳性，自c阴性：考虑同种 抗体，如病人血型为Rh阴性，优先考虑抗-D
+
+ 抗筛结果排除假阴性，一定是阴性结果吗？
+ 解答：“抗筛阴性”并不能代表“同种抗体阴性”。 + 筛选细胞和谱细胞有人种差异，如Mia，
+ 抗人球蛋白试剂：IgG抗体通过抗人IgG类免 疫球蛋白抗体（简称抗人球）“搭桥”，使已 致敏了不完全抗体的RBC发生凝集。
+ 抗筛要求用抗IgG+C3的多特异性抗人球蛋白 试剂，若用单抗IgG的单特异性抗人球蛋白 试剂，可能对某些抗体造成漏检。
实验三 不规则抗体
【标本、试剂与器材】
• 1. 标本 被检者不抗凝全血； • 2. 试剂 符合国家标准的1-10号鉴定 谱细胞、凝胶微柱卡； • 3. 器材 台式离心机、37℃水浴箱、血 液细胞洗涤离心机。
谱细胞（Panel Cell）
• 由8～12个人份的已知血型 表现型的O型RBC配套组成 • 具有各种不同的抗原成分， 分布各具特点，与抗体反应 出现不同的格局 • 能检出常见抗体和稀有抗体 • 每种抗原在谱细胞上保持一 定为1 个以上
• 4. 凝胶微柱出现凝集，而盐水介质无凝集，则提示 不规则抗体为IgG性质。
【操作步骤】
• 1. 向凝胶卡内依次加0.8-1% 1～10 号鉴定谱细胞50ul, • 2. 每孔加被检者血清25ul, • 3. 37℃温15min, • 4. 专用离心机离心10min,观察结果．
【结果判断】
【方法评价与注意事项】
• 1. 被检者自身血清加自身红细胞管应无凝集；若出 现凝集则提示存在自身免疫性抗体； • 2. ±～4+凝集为阳性结果，表示待检血清中有不规 则抗体，结合谱红细胞反应格局，确定抗体特异性； • 3. 无凝集，表示被检者血清中无不规则抗体。
【操作步骤】
待捡血清 2～5% 1号筛选谱细胞 2～5% 2号筛选谱细胞 2～5% 3号筛选谱细胞
表 一 1 1滴 1滴 2 1滴 1滴 3 1滴
1滴
1. 盐水法 按表一加样后,1000×g离心15s，轻轻摇动试管，肉眼观 察有无凝集结果，记录结果.
2. 凝聚胺 按表一加样后,依次加入低离子介质溶液、凝聚胺溶液, 1000×g离心15s，弃上清夜,摇动试管,看是否形成凝集(如没有凝集 形成需重做),加悬浮液,观察凝集是否散开,记录结果
• 3. 无凝集，表示被检者血清中不存在不规则抗体。
最新不规则抗体及抗体效价PPT课件
分娩后10天复查 • 有不良产史，抗体效价（-） 28周复查1次/月
分娩后10天复查 • 抗体效价（+） 治疗中动态监测 1次/月
分娩后10天复查
Rh抗体效价临床意义
• 由于Rh血型抗体只能由人类红细胞产生，故测
定Rh抗体对诊断围产儿溶血症意义较大 • 一般抗体效价在1：32-1：64说明胎儿有溶血危 险
抗体特异性鉴定（了解）
• 使用谱细胞确定抗体的特异性，谱细胞一 般由8-16种含有不同抗原的O型红细胞配 套组成，根据谱细胞的反应格局一般可以 鉴定常见的抗体。
• 实验方法和抗体筛选实验相同
抗球蛋白试验
• 原理：抗体分子和补体成分都是球蛋白， 用这些球蛋白免疫动物使之产生抗体即抗 人球蛋白，抗球蛋白试剂可以和致敏在红 细胞上的人球蛋白（抗体分子和补体分子 ）反应，通过架桥作用使致敏红细胞出现 凝集。见图
每种方法都有自己的特点，适应于不同范围及情况
• 盐水法：可以用于检测干扰ABO定型的盐水反应活性
抗体，如：MN、P血型抗体。但此方法会检查出无临 床意义的抗体，如冷凝集素抗－I及抗－IH等，而且 会漏检IgG性质的抗体。 • 低离子聚凝胺法（LIP-IAT）：所需试验时间少（3～ 5分钟）、方法灵敏度高，准确性高，但无法排除无 临床意义抗体的干扰。 • 间接抗人球方法：是很灵敏且有效的检测抗体的方法 ，同时此方法可以有效的避免无临床意义抗体的干扰 。缺点：耗时间长，步骤多。
2、“抗体筛选”的含义： 用具备有临床意义的血型抗原的O型 红细胞，检测病人血清（含多种抗 体）；如果出现聚集现象，
则提示病人有不规则抗体存在，可 判为“抗体筛选”阳性。
抗体筛选技术要求
• 尽可能多的检测出有临床意义的抗体。 • 尽可能少的检测出无临床意义的抗体。 • 尽可能快的完成抗体检测
分娩后10天复查 • 抗体效价（+） 治疗中动态监测 1次/月
分娩后10天复查
Rh抗体效价临床意义
• 由于Rh血型抗体只能由人类红细胞产生，故测
定Rh抗体对诊断围产儿溶血症意义较大 • 一般抗体效价在1：32-1：64说明胎儿有溶血危 险
抗体特异性鉴定（了解）
• 使用谱细胞确定抗体的特异性，谱细胞一 般由8-16种含有不同抗原的O型红细胞配 套组成，根据谱细胞的反应格局一般可以 鉴定常见的抗体。
• 实验方法和抗体筛选实验相同
抗球蛋白试验
• 原理：抗体分子和补体成分都是球蛋白， 用这些球蛋白免疫动物使之产生抗体即抗 人球蛋白，抗球蛋白试剂可以和致敏在红 细胞上的人球蛋白（抗体分子和补体分子 ）反应，通过架桥作用使致敏红细胞出现 凝集。见图
每种方法都有自己的特点，适应于不同范围及情况
• 盐水法：可以用于检测干扰ABO定型的盐水反应活性
抗体，如：MN、P血型抗体。但此方法会检查出无临 床意义的抗体，如冷凝集素抗－I及抗－IH等，而且 会漏检IgG性质的抗体。 • 低离子聚凝胺法（LIP-IAT）：所需试验时间少（3～ 5分钟）、方法灵敏度高，准确性高，但无法排除无 临床意义抗体的干扰。 • 间接抗人球方法：是很灵敏且有效的检测抗体的方法 ，同时此方法可以有效的避免无临床意义抗体的干扰 。缺点：耗时间长，步骤多。
2、“抗体筛选”的含义： 用具备有临床意义的血型抗原的O型 红细胞，检测病人血清（含多种抗 体）；如果出现聚集现象，
则提示病人有不规则抗体存在，可 判为“抗体筛选”阳性。
抗体筛选技术要求
• 尽可能多的检测出有临床意义的抗体。 • 尽可能少的检测出无临床意义的抗体。 • 尽可能快的完成抗体检测
《不规则抗体筛选》课件
பைடு நூலகம்
需要不断改进和创新不规 则抗体筛选技术，以适应 不同的研究需求和应用场 景。
希望本课件能够为不规则 抗体筛选领域的研究者提 供参考和思路，推动该领 域的进一步发展。
参考文献
- 引用的文献列表
当前的研究现状
不规则抗体筛选技术在科学研究 和工业应用中取得了显著的进展 和创新。
未来的发展方向
加强对不规则抗体筛选技术的研 究，进一步完善技术方法，推动 其在更多领域的应用。
结论
1 不规则抗体筛选的重 2 筛选技术的进一步完 3 期望对不规则抗体筛
要性
善和创新的必要性
选研究的贡献
不规则抗体筛选在生物医 学领域和生物技术领域具 有重要的理论意义和实际 应用价值。
《不规则抗体筛选》PPT 课件
本课件介绍了不规则抗体筛选的重要性和筛选技术的发展。通过丰富的内容 和精美的布局，旨在提供易于理解和引人入胜的知识。
不规则抗体筛选介绍
不规则抗体是指形态、结构、性质上与普通抗体不完全一致的抗体，有着独特的特征和优势。了解不规则抗体 及筛选意义。
不规则抗体筛选的基本原理
不规则抗体筛选的基本原理是通过特定的方法，从混合溶液或反应体系中筛 选出目标抗体，以获得纯化和高亲和力的抗体。
直接筛选法
1 亲和层析法
利用不规则抗体与目标分子的特异性相互作用进行层析分离。
2 免疫法
通过不规则抗体与目标分子的特异性反应来检测和筛选抗体。
间接筛选法
吸附剂法
通过将目标抗原吸附在固相载体上，间接筛选出与抗原特异结合的不规则抗体。
非吸附剂法
利用可溶性载体或晶体结合剂介导的间接筛选方法，实现不规则抗体的高效筛选。
应用举例
1
需要不断改进和创新不规 则抗体筛选技术，以适应 不同的研究需求和应用场 景。
希望本课件能够为不规则 抗体筛选领域的研究者提 供参考和思路，推动该领 域的进一步发展。
参考文献
- 引用的文献列表
当前的研究现状
不规则抗体筛选技术在科学研究 和工业应用中取得了显著的进展 和创新。
未来的发展方向
加强对不规则抗体筛选技术的研 究，进一步完善技术方法，推动 其在更多领域的应用。
结论
1 不规则抗体筛选的重 2 筛选技术的进一步完 3 期望对不规则抗体筛
要性
善和创新的必要性
选研究的贡献
不规则抗体筛选在生物医 学领域和生物技术领域具 有重要的理论意义和实际 应用价值。
《不规则抗体筛选》PPT 课件
本课件介绍了不规则抗体筛选的重要性和筛选技术的发展。通过丰富的内容 和精美的布局，旨在提供易于理解和引人入胜的知识。
不规则抗体筛选介绍
不规则抗体是指形态、结构、性质上与普通抗体不完全一致的抗体，有着独特的特征和优势。了解不规则抗体 及筛选意义。
不规则抗体筛选的基本原理
不规则抗体筛选的基本原理是通过特定的方法，从混合溶液或反应体系中筛 选出目标抗体，以获得纯化和高亲和力的抗体。
直接筛选法
1 亲和层析法
利用不规则抗体与目标分子的特异性相互作用进行层析分离。
2 免疫法
通过不规则抗体与目标分子的特异性反应来检测和筛选抗体。
间接筛选法
吸附剂法
通过将目标抗原吸附在固相载体上，间接筛选出与抗原特异结合的不规则抗体。
非吸附剂法
利用可溶性载体或晶体结合剂介导的间接筛选方法，实现不规则抗体的高效筛选。
应用举例
1
不规则抗体及抗体效价 PPT
微柱凝集
• 灵敏度高 • 操作简便，时间较少 • 准确性较高 • 成本较高
上海市血液中心 朱自严
• 抗体筛选是无法检测出血清中的所有抗体 ，比如抗体是针对低频抗原的，而筛选细 胞中并不含低频抗原
• 如果抗体在37℃或抗球蛋白介质中不反应 ，单用间接抗球蛋白方法的抗体筛选也会 漏检这些抗体。
上海市血液中心 朱自严
0型产妇是发生溶血症的独立危险因子！！
其他血型的孕妇需要检测抗体效价吗？
ABO血型不合系统
➢A型人的抗B 和B 型人的抗A主要由IgM分 子组成,只有少量IgG分子,故A型或B型母亲 所生婴儿很少因母子血型不合引起新生儿 溶血病。
ABO抗体效价临床意义
• 由于ABO血型有天然抗体，故母亲血中的抗体效价 需很高才对新生儿溶血症的诊断有意义
为什么要开展输血前的“抗体筛选”检查
3、有利于早期发现和确认具有临床意义的抗体， 获得充足的时间来选择相配合的血，避免由于 寻找不到相合的血液而造成患者病情的延误。
抗体筛选检查
一、什么叫“抗体筛选”检查 1、不规则抗体的含义：通常把抗A、抗B以外的所有红
细胞血型抗体称为不规则抗体。如抗D、抗N、抗M、jk-抗 体。
• 一般抗体效价在1：128-1：256要警惕胎儿可能有 溶血，抗体效价≥1：512说明胎儿有溶血危险
• 有学者报告观察几例抗体效价≥1：512的孕妇产后 无新生儿溶血发生。所以母体血中有ABO抗体临床 意义较小，但结合其它检验结果综合分析，仍有一 定的临床意义。
ห้องสมุดไป่ตู้
Rh抗体效价测定
• 妊娠20周测抗体效价 • 无不良产史，抗体效价（-）32-34周复查
为什么要开展输血前的“抗体筛选”检查
抗体筛选试验PPT课件
酶法等当中的至少一种，第一步盐水法必须要离心判断结果。 • 3、患者红细胞、供者红细胞必须至少用生理盐水洗涤一遍以上。
第37页/共66页
配血中出现问题的解决方法
• 1、调查患者的年龄、性别、种族、疾病诊断、用药史、家族史、输血史、输血 反应史、妊娠史、生育史等（非常重要，对于后续的配血给血方案有很重要的意 义）。
谱细胞 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 自身
IS
- -- - - - -- - - -
I AT
2+ - 2+ 3+S 2+ - - - - 1+S -
• 结果判断：IgG型抗-E抗体
第31页/共66页
四、交叉配血的作用
• 1、确认受血者和供血者ABO血型的相合性。 • 2、可检测出受血者血清中不规则抗体，此抗体可能在抗体筛选试验中，由于筛
抗体筛选试验 （试管法）
• 抗体筛选试验患者两滴血清+筛选细胞（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ）、三洗的自身细胞各一滴 立即离心看结果。
• 结果分析： • 阳性：IgM型抗体、冷抗体、蛋白凝集、自身抗体等情况。 • 阴性：需要进一步鉴定
第26页/共66页
盐水介质中阳性如何处理
1、IgM型抗体：患者血清+谱细胞进行特异性 检查，一般以抗-M、抗-Lea、抗-Leb、抗-P1、 早期形成的抗-D、E等抗体。
选试剂红细胞缺乏相应的抗原而漏检。
第32页/共66页
• 交叉配血试验是保障临床输血安全、及时、有效的重要手段，其方法主要有盐水 法、凝聚胺法或抗人球蛋白法等，使用安全、有效的方法进行交叉配血试验，分 析确定交叉配血不合的原因，并采取相应的处理方法对预防输血反应发生和解决 临床疑难输血有重要意义。交叉配血试验，也称为配合性试验。要使患者与献血 员血液间没有相对应的抗原、抗体存在 。
第37页/共66页
配血中出现问题的解决方法
• 1、调查患者的年龄、性别、种族、疾病诊断、用药史、家族史、输血史、输血 反应史、妊娠史、生育史等（非常重要，对于后续的配血给血方案有很重要的意 义）。
谱细胞 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 自身
IS
- -- - - - -- - - -
I AT
2+ - 2+ 3+S 2+ - - - - 1+S -
• 结果判断：IgG型抗-E抗体
第31页/共66页
四、交叉配血的作用
• 1、确认受血者和供血者ABO血型的相合性。 • 2、可检测出受血者血清中不规则抗体，此抗体可能在抗体筛选试验中，由于筛
抗体筛选试验 （试管法）
• 抗体筛选试验患者两滴血清+筛选细胞（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ）、三洗的自身细胞各一滴 立即离心看结果。
• 结果分析： • 阳性：IgM型抗体、冷抗体、蛋白凝集、自身抗体等情况。 • 阴性：需要进一步鉴定
第26页/共66页
盐水介质中阳性如何处理
1、IgM型抗体：患者血清+谱细胞进行特异性 检查，一般以抗-M、抗-Lea、抗-Leb、抗-P1、 早期形成的抗-D、E等抗体。
选试剂红细胞缺乏相应的抗原而漏检。
第32页/共66页
• 交叉配血试验是保障临床输血安全、及时、有效的重要手段，其方法主要有盐水 法、凝聚胺法或抗人球蛋白法等，使用安全、有效的方法进行交叉配血试验，分 析确定交叉配血不合的原因，并采取相应的处理方法对预防输血反应发生和解决 临床疑难输血有重要意义。交叉配血试验，也称为配合性试验。要使患者与献血 员血液间没有相对应的抗原、抗体存在 。
不规则抗体筛选
使用谱细胞确定抗体的特异性，谱细胞 一般由8-16种含有不同抗原的O型红细胞 配套组成，根据谱细胞的反应格局一般 可以鉴定常见的抗体。
实验方法和抗体筛选实验相同
携手共进，齐创精品工程
Thank You
世界触手可及
抗球蛋白试验
抗球蛋 白
实验步骤
1# 2#
3#
受检者血清
2滴 2滴 2滴
筛选用红细胞悬液1# 1滴
筛选用红细胞悬液2#
1滴
筛选用红细胞悬液3#
1滴
自身 2滴
受检者5%红细胞悬液
1滴
混匀后置37℃水浴30分钟后，用生理盐水洗
涤3次（怎么洗）最后1次用吸水纸吸尽盐水， 然后加1滴抗球蛋白血清，混匀后以3400rpm 离心15秒钟，轻摇，观察结果。
不规则抗体筛选
《临床输血技术规范》
明确规定部分病人应做“抗体筛选” 检测，第四章第17条：“凡遇以下情况 必须按《全国临床检验操作规程》有关 规定做抗体筛选试验：1、交叉配血不 合的； 2、对有输血史、妊娠史或短期 内需接受多次输血者。
为什么要开展输血前的“抗体筛 选”检查
1、目前已知红细胞有26个抗原系统（确认21 个，如ABO、Rh、MN、LW、MNS、JK等），500 多种抗原（确认200多种）。红细胞抗原的多 样性决定了抗体的多样性，检测抗A、抗B、抗 D（ABO血型、Rh血型）可确保绝大多数病人的 输血安全，但仍不能避免因血型不合（ABO、 Rh血型以外）而引发的溶血。
抗体筛选技术要求
尽可能多的检测出有临床意义的抗体。 尽可能少的检测出无临床意义的抗体。 尽可能快的完成抗体检测
方法选择：每种方法都有自己的 特点，适应于不同范围及情况
盐水法：可以用于检测干扰ABO定型的盐水反 应活性抗体，如：MN、P血型抗体。但此方法 会检查出无临床意义的抗体，如冷凝集素抗 －I及抗－IH等，而且会漏检IgG性质的抗体。
实验方法和抗体筛选实验相同
携手共进，齐创精品工程
Thank You
世界触手可及
抗球蛋白试验
抗球蛋 白
实验步骤
1# 2#
3#
受检者血清
2滴 2滴 2滴
筛选用红细胞悬液1# 1滴
筛选用红细胞悬液2#
1滴
筛选用红细胞悬液3#
1滴
自身 2滴
受检者5%红细胞悬液
1滴
混匀后置37℃水浴30分钟后，用生理盐水洗
涤3次（怎么洗）最后1次用吸水纸吸尽盐水， 然后加1滴抗球蛋白血清，混匀后以3400rpm 离心15秒钟，轻摇，观察结果。
不规则抗体筛选
《临床输血技术规范》
明确规定部分病人应做“抗体筛选” 检测，第四章第17条：“凡遇以下情况 必须按《全国临床检验操作规程》有关 规定做抗体筛选试验：1、交叉配血不 合的； 2、对有输血史、妊娠史或短期 内需接受多次输血者。
为什么要开展输血前的“抗体筛 选”检查
1、目前已知红细胞有26个抗原系统（确认21 个，如ABO、Rh、MN、LW、MNS、JK等），500 多种抗原（确认200多种）。红细胞抗原的多 样性决定了抗体的多样性，检测抗A、抗B、抗 D（ABO血型、Rh血型）可确保绝大多数病人的 输血安全，但仍不能避免因血型不合（ABO、 Rh血型以外）而引发的溶血。
抗体筛选技术要求
尽可能多的检测出有临床意义的抗体。 尽可能少的检测出无临床意义的抗体。 尽可能快的完成抗体检测
方法选择：每种方法都有自己的 特点，适应于不同范围及情况
盐水法：可以用于检测干扰ABO定型的盐水反 应活性抗体，如：MN、P血型抗体。但此方法 会检查出无临床意义的抗体，如冷凝集素抗 －I及抗－IH等，而且会漏检IgG性质的抗体。
不规则抗体筛选红细胞试剂简介ppt课件
不规则抗体反应引起的危害
• 轻者引起寒战、发热，影响治疗效果； • 重者破坏输入的不配合的红细胞或缩短其寿命，产生 溶血性输血反应，危机病人生命； • 对孕妇而言，不规则抗体会引起新生儿溶血病，影响 新生儿脏器的发育，并使其智力发育受到伤害，严重 者则会危及新生儿的生命安全。
法规要求
• 美国输血技术指南（American Association of Blood Banks，aaBB）中规定献血员、受血者均要筛查不规 则抗体。 • 日本、澳大利亚等国家和我国的香港地区均已将不规 则抗体筛查列入常规检测。
不规则抗体检测试剂（人红细胞）特点
•严格按照《中国输血技术操作规程》（血站部分，1997版）、《献 血者健康检查要求》和《全血及成分血质量要求》进行抗原筛选。 •应用领先的生物制品技术、优质的保存液，有效期可达3个月。 •标准化血型试剂的制备方法，根据客户需求准确调节红细胞试剂的 浓度，保证试剂稳定。 •人类红细胞血型系统庞大而复杂，任何一套抗体筛选细胞都不可能 覆盖所有的红细胞血型抗原，我们的抗原覆盖格局较其他厂家多3 个。
血红蛋白试剂盒（硫酸铜比重法）
• • • • 【检验方法的局限性】 本试验仅做为采供血机构对献血者全血血红蛋白的定性初筛。 【产品性能指标】 1.比重：男用Hb试剂比重为1.052±0.0005；女用Hb试剂比重为 1.050±0.0005。
• 2.批间差：用同一比重计或液体比重天平分别测量相同环境连续3 批生产相应使用温度的男用和女用血红蛋白试剂的比重，应分别 满足1.052±0.0005和1.050±0.0005。 • 3.稳定性：Hb试剂盒贮存于10℃－40℃的干燥环境中，有效期为 12个月，在有效期满后一个月以内，分别检测试剂外观、比重， 应符合标准规定要求。
不规则抗体筛选
谢谢
Polybrene法
原理： 原理：聚凝胺是一种多价阳离子聚合物，在溶 液中有多个阳离子集团，能中和红细胞表面的 负电荷，并借助正负电荷的作用，引起红细胞 的非特异性凝聚，这种凝聚是可逆的。当红细 胞与血清在低离子介质中孵育，IgG抗体与红 细胞上相应抗原结合后，在聚凝胺的作用下发 生凝集，凝聚和凝集外表上不能区分，加入枸 橼酸钠重悬液后，枸橼酸根的负电荷中和了聚 凝胺上的正电荷，使红细胞凝聚现象消失，而 真正的凝集不消失。(见图).
混匀后置37℃水浴30分钟后，用生理盐水洗 涤3次（怎么洗）最后1次用吸水纸吸尽盐水， 然后加1滴抗球蛋白血清，混匀后以3400rpm 离心15秒钟，轻摇，观察结果。
结果意义
筛选红细胞1、2、3 自身红细胞 血清中存在的抗体
+ +
— +
同种抗体
自身抗体，或自身抗 体和同种抗体同时存 在
—
+
自身抗体
抗体筛选检查
一、什么叫“抗体筛选”检查 1、不规则抗体的含义：通常把抗A、抗B以 外的所有红细胞血型抗体称为不规则抗体。如 抗D、抗N、抗M、jk-抗体。 2、“抗体筛选”的含义：用具备有临床意 义的血型抗原的O型红细胞，检测病人血清 （含多种抗体）；如果出现聚集现象，则提示 病人有不规则抗体存在，可判为“抗体筛选” 阳性。
2、临床有的病人出现慢性（迟缓性）溶血反应，易忽视或引不起临 床医师重视。 （理论上讲，成年人每输1U的浓缩红细胞，在不丢失、 不被破坏（溶血）的前提下，应能提升Hb5-10g/L (0.5-1g/dl), 保持15-30天。如果输3-4U RBC，病人Hb上升不到10g/L，或几天 后（1周内）Hb仍旧下降到原来水平，甚至更低。这种情况，就要 考虑是否有慢性溶血反应存在。） 3、有利于早期发现和确认具有临床意义的抗体，获得充足的时间来 选择相配合的血，避免由于寻找不到相合的血液而造成患者病情 的延误。
相关主题
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
低离子聚凝胺法（LIP-IAT）：所需试验时间 少（3～5分钟）、方法灵敏度高，准确性高， 但无法排除无临床意义抗体的干扰。
间接抗人球方法：是很灵敏且有效的检测抗 体的方法，同时此方法可以有效的避免无临 床意义抗体的干扰。缺点：耗时间长，步骤多。
试剂
抗体筛选用红细胞悬液（1#、2#、3#） 试剂红细胞必须含有下列抗原：
3、有利于早期发现和确认具有临床意义的抗体，获得充足的时间来 选择相配合的血，避免由于寻找不到相合的血液而造成患者病情 的延误。
抗体筛选检查
一、什么叫“抗体筛选”检查 1、不规则抗体的含义：通常把抗A、抗B以
外的所有红细胞血型抗体称为不规则抗体。如 抗D、抗N、抗M、jk-抗体。
2、“抗体筛选”的含义：用具备有临床意 义的血型抗原的O型红细胞，检测病人血清 （含多种抗体）；如果出现聚集现象，则提示 病人有不规则抗体存在，可判为“抗体筛选” 阳性。
1#
2# 3# 自 身
受检者血清
2滴 2滴 2滴 2滴
筛选用红细胞悬液1# 1滴
筛选用红细胞悬液2#
1滴
筛选用红细胞悬液3#
1滴
受检者5%红细胞悬液
1滴
混匀后3400rpm离心15秒，立即观察结果 同前
注意事项
标本编号清楚！！ 试剂红细胞是保存在保存液中，一旦用生理盐
水或Liss液洗涤后则应该在24小时内使用，否 则会因污染、抗原丢失导致试验错误。 加血清和红细胞悬液的量必须准确不能多加， 少加,以免引起前带和后带效应 转速不能太快或太慢、时间不能过长或过短， 以免引起假阳性或假阴性。
Polybrene法
原理：聚凝胺是一种多价阳离子聚合物，在溶 液中有多个阳离子集团，能中和红细胞表面的 负电荷，并借助正负电荷的作用，引起红细胞 的非特异性凝聚，这种凝聚是可逆的。当红细 胞与血清在低离子介质中孵育，IgG抗体与红 细胞上相应抗原结合后，在聚凝胺的作用下发 生凝集，凝聚和凝集外表上不能区分，加入枸 橼酸钠重悬液后，枸橼酸根的负电荷中和了聚 凝胺上的正电荷，使红细胞凝聚现象消失，而 真正的凝集不消失。(见图).
D,C,E,c,e,M,N,S,s,P1,Lea,Leb,K,k,Fya,Fyb ,Jka,和Jkb
LIM 液、Polybrene及重悬液 抗球蛋白血清 受检者血清 受检者5%红细胞悬液
盐水法
原理：盐水介质中的红细胞膜上的抗原 与相应抗体结合，交叉联结形成肉眼可 见的凝集块。
实验步骤
取4支小试管，按表标记及加入相应试剂。
不规则抗体筛选分析
《临床输血技术规范》
明确规定部分病人应做“抗体筛选” 检测，第四章第17条：“凡遇以下情况 必须按《全国临床检验操作规程》有关 规定做抗体筛选试验：1、交叉配血不 合的； 2、对有输血史、妊娠史或短期 内需接受多次输血者。
为什么要开展输血前的“抗体筛 选”检查
1、目前已知红细胞有26个抗原系统（确认21 个，如ABO、Rh、MN、LW、MNS、JK等），500 多种抗原（确认200多种）。红细胞抗原的多 样性决定了抗体的多样性，检测抗A、抗B、抗 D（ABO血型、Rh血型）可确保绝大多数病人的 输血安全，但仍不能避免因血型不合（ABO、 Rh血型以外）而引发的溶血。
弱或消失，因此以立即看的结果为准。 转速不能太快或太慢、时间不能过长或过短，以免引起假阳性或假阴性。
抗球蛋白试验
原理：抗体分子和补体成分都是球蛋白， 用这些球蛋白免疫动物使之产生抗体即 抗人球蛋白，抗球蛋白试剂可以和致敏 在红细胞上的人球蛋白（抗体分子和补 体分子）反应，通过架桥作用使致敏红 细胞出现凝集。见图
抗体筛选技术要求
尽可能多的检测出有临床意义的抗体。 尽可能少的检测出无临床意义的抗体。 尽可能快的完成抗体检测
方法选择：每种方法都有自己的 特点，适应于不同范围及情况
盐水法：可以用于检测干扰ABO定型的盐水反 应活性抗体，如：MN、P血型抗体。但此方法 会检查出无临床意义的抗体，如冷凝集素抗 －I及抗－IH等，而且会漏检IgG性质的抗体。
2、临床有的病人出现慢性（迟缓性）溶血反应，易忽视或引不起临 床医师重视。
（理论上讲，成年人每输1U的浓缩红细胞，在不丢失、 不被破坏（溶血）的前提下，应能提升Hb5-10g/L (0.5-1g/dl), 保持15-30天。如果输3-4U RBC，病人Hb上升不到10g/L，或几天 后（1周内）Hb仍旧下降到原来水平，甚至更低。这种情况，就要 考虑是否有慢性溶血反应存在。）
加血清量不能多加，否则会提高致敏过程中的离子强度，降低致敏效果。 加聚凝胺，只需加1滴，多加可能导致重悬液无法充分解散非特异性凝集，
出现假凝集，导致假阳性。 看结果：阴性结果---红细胞迅速散开，并在1分钟内完全散开。可在镜
下观察。 阳性结果---红细胞不完全散开，弱凝集可能在30分钟内明显减
实验步骤
取4支小试管，按表标记及加入相应试剂。
1#
2#
3#
自身
受检者血清
2滴 2滴
2滴
2滴
筛选用红细胞悬液1#
1滴Βιβλιοθήκη 筛选用红细胞悬液2#1滴
筛选用红细胞悬液3#
1滴
受检者5%红细胞悬液
1滴
LIM液 （12滴）
0.6ml 0.6ml
0.6ml 0.6ml
混匀后室温静置1分钟。然后各加入Polybrene试剂1滴，混匀 后3400rpm 离心 15秒，轻扣观察有无凝集。
抗球蛋白试验
抗球蛋 白
实验步骤
1# 2#
3#
受检者血清
2滴 2滴 2滴
筛选用红细胞悬液1# 1滴
筛选用红细胞悬液2#
1滴
筛选用红细胞悬液3#
1滴
自身 2滴
受检者5%红细胞悬液
1滴
混匀后置37℃水浴30分钟后，用生理盐水洗
涤3次（怎么洗）最后1次用吸水纸吸尽盐水， 然后加1滴抗球蛋白血清，混匀后以3400rpm 离心15秒钟，轻摇，观察结果。
向试管中各加入重悬液 1滴，轻摇观察凝集是否散开。
注意事项
标本尽可能不用肝素抗凝血，如果用需要多加1滴聚凝胺。肝素是 大分子的阴离子物质,可以中和凝聚胺的阳离子，导致假阴性。
在接收标本时，要询问抽血时是否正在输液或者刚输过液，如果有这种 情况则要咨询临床医师液体中是否含有止血敏 ， KCL，VitC ，这些药 品会干扰聚凝胺的作用导致假阴性，引起事故。
间接抗人球方法：是很灵敏且有效的检测抗 体的方法，同时此方法可以有效的避免无临 床意义抗体的干扰。缺点：耗时间长，步骤多。
试剂
抗体筛选用红细胞悬液（1#、2#、3#） 试剂红细胞必须含有下列抗原：
3、有利于早期发现和确认具有临床意义的抗体，获得充足的时间来 选择相配合的血，避免由于寻找不到相合的血液而造成患者病情 的延误。
抗体筛选检查
一、什么叫“抗体筛选”检查 1、不规则抗体的含义：通常把抗A、抗B以
外的所有红细胞血型抗体称为不规则抗体。如 抗D、抗N、抗M、jk-抗体。
2、“抗体筛选”的含义：用具备有临床意 义的血型抗原的O型红细胞，检测病人血清 （含多种抗体）；如果出现聚集现象，则提示 病人有不规则抗体存在，可判为“抗体筛选” 阳性。
1#
2# 3# 自 身
受检者血清
2滴 2滴 2滴 2滴
筛选用红细胞悬液1# 1滴
筛选用红细胞悬液2#
1滴
筛选用红细胞悬液3#
1滴
受检者5%红细胞悬液
1滴
混匀后3400rpm离心15秒，立即观察结果 同前
注意事项
标本编号清楚！！ 试剂红细胞是保存在保存液中，一旦用生理盐
水或Liss液洗涤后则应该在24小时内使用，否 则会因污染、抗原丢失导致试验错误。 加血清和红细胞悬液的量必须准确不能多加， 少加,以免引起前带和后带效应 转速不能太快或太慢、时间不能过长或过短， 以免引起假阳性或假阴性。
Polybrene法
原理：聚凝胺是一种多价阳离子聚合物，在溶 液中有多个阳离子集团，能中和红细胞表面的 负电荷，并借助正负电荷的作用，引起红细胞 的非特异性凝聚，这种凝聚是可逆的。当红细 胞与血清在低离子介质中孵育，IgG抗体与红 细胞上相应抗原结合后，在聚凝胺的作用下发 生凝集，凝聚和凝集外表上不能区分，加入枸 橼酸钠重悬液后，枸橼酸根的负电荷中和了聚 凝胺上的正电荷，使红细胞凝聚现象消失，而 真正的凝集不消失。(见图).
D,C,E,c,e,M,N,S,s,P1,Lea,Leb,K,k,Fya,Fyb ,Jka,和Jkb
LIM 液、Polybrene及重悬液 抗球蛋白血清 受检者血清 受检者5%红细胞悬液
盐水法
原理：盐水介质中的红细胞膜上的抗原 与相应抗体结合，交叉联结形成肉眼可 见的凝集块。
实验步骤
取4支小试管，按表标记及加入相应试剂。
不规则抗体筛选分析
《临床输血技术规范》
明确规定部分病人应做“抗体筛选” 检测，第四章第17条：“凡遇以下情况 必须按《全国临床检验操作规程》有关 规定做抗体筛选试验：1、交叉配血不 合的； 2、对有输血史、妊娠史或短期 内需接受多次输血者。
为什么要开展输血前的“抗体筛 选”检查
1、目前已知红细胞有26个抗原系统（确认21 个，如ABO、Rh、MN、LW、MNS、JK等），500 多种抗原（确认200多种）。红细胞抗原的多 样性决定了抗体的多样性，检测抗A、抗B、抗 D（ABO血型、Rh血型）可确保绝大多数病人的 输血安全，但仍不能避免因血型不合（ABO、 Rh血型以外）而引发的溶血。
弱或消失，因此以立即看的结果为准。 转速不能太快或太慢、时间不能过长或过短，以免引起假阳性或假阴性。
抗球蛋白试验
原理：抗体分子和补体成分都是球蛋白， 用这些球蛋白免疫动物使之产生抗体即 抗人球蛋白，抗球蛋白试剂可以和致敏 在红细胞上的人球蛋白（抗体分子和补 体分子）反应，通过架桥作用使致敏红 细胞出现凝集。见图
抗体筛选技术要求
尽可能多的检测出有临床意义的抗体。 尽可能少的检测出无临床意义的抗体。 尽可能快的完成抗体检测
方法选择：每种方法都有自己的 特点，适应于不同范围及情况
盐水法：可以用于检测干扰ABO定型的盐水反 应活性抗体，如：MN、P血型抗体。但此方法 会检查出无临床意义的抗体，如冷凝集素抗 －I及抗－IH等，而且会漏检IgG性质的抗体。
2、临床有的病人出现慢性（迟缓性）溶血反应，易忽视或引不起临 床医师重视。
（理论上讲，成年人每输1U的浓缩红细胞，在不丢失、 不被破坏（溶血）的前提下，应能提升Hb5-10g/L (0.5-1g/dl), 保持15-30天。如果输3-4U RBC，病人Hb上升不到10g/L，或几天 后（1周内）Hb仍旧下降到原来水平，甚至更低。这种情况，就要 考虑是否有慢性溶血反应存在。）
加血清量不能多加，否则会提高致敏过程中的离子强度，降低致敏效果。 加聚凝胺，只需加1滴，多加可能导致重悬液无法充分解散非特异性凝集，
出现假凝集，导致假阳性。 看结果：阴性结果---红细胞迅速散开，并在1分钟内完全散开。可在镜
下观察。 阳性结果---红细胞不完全散开，弱凝集可能在30分钟内明显减
实验步骤
取4支小试管，按表标记及加入相应试剂。
1#
2#
3#
自身
受检者血清
2滴 2滴
2滴
2滴
筛选用红细胞悬液1#
1滴Βιβλιοθήκη 筛选用红细胞悬液2#1滴
筛选用红细胞悬液3#
1滴
受检者5%红细胞悬液
1滴
LIM液 （12滴）
0.6ml 0.6ml
0.6ml 0.6ml
混匀后室温静置1分钟。然后各加入Polybrene试剂1滴，混匀 后3400rpm 离心 15秒，轻扣观察有无凝集。
抗球蛋白试验
抗球蛋 白
实验步骤
1# 2#
3#
受检者血清
2滴 2滴 2滴
筛选用红细胞悬液1# 1滴
筛选用红细胞悬液2#
1滴
筛选用红细胞悬液3#
1滴
自身 2滴
受检者5%红细胞悬液
1滴
混匀后置37℃水浴30分钟后，用生理盐水洗
涤3次（怎么洗）最后1次用吸水纸吸尽盐水， 然后加1滴抗球蛋白血清，混匀后以3400rpm 离心15秒钟，轻摇，观察结果。
向试管中各加入重悬液 1滴，轻摇观察凝集是否散开。
注意事项
标本尽可能不用肝素抗凝血，如果用需要多加1滴聚凝胺。肝素是 大分子的阴离子物质,可以中和凝聚胺的阳离子，导致假阴性。
在接收标本时，要询问抽血时是否正在输液或者刚输过液，如果有这种 情况则要咨询临床医师液体中是否含有止血敏 ， KCL，VitC ，这些药 品会干扰聚凝胺的作用导致假阴性，引起事故。