基因工程教学大纲
《基因工程》教学大纲
《基因工程》教学大纲课程名称：课程英文名称：课程性质：授课对象：学时数：执笔人：审核人：编写单位：编写日期：基因工程选修课各专业硕士研究生学时（理论学时，实验学时）杨明、谢渊等杨明分子生物学重点实验室年月一、教学目的和要求通过《基因工程》理论学习及实验操作，使选修者掌握基因工程的基本原理、基础知识和基本的研究技能，重点培养选修者在课题研究、临床实验研究中运用基因重组技术的能力。
二、选用教材及主要参考书（一）教材杨吉成，缪竞诚. 医用基因工程. 化学工业出版社. 年（二）主要参考书．何水林. 基因工程. 科学出版社. 年.. 李立家, 肖庚富. 基因工程（世纪高等院校教材）. 科学出版社. 年.．吴乃虎. 基因工程原理. 科学出版社. 年.三、教学形式理论部分：集中授课。
实验部分：学生每人操作份、人为一组协同完成实验操作。
四、考试的形式与办法理论课内容为闭卷考试，题型灵活并注重考察理论联系实际的能力。
实验课内容采取实验报告和平时表现相结合的考核办法，注重综合素质与动手能力的考核。
总评成绩中，理论课考试成绩占，实验成绩占。
五、学时分配六、理论课教学大纲第一章绪论【目的要求】掌握：基因工程概念；基因工程技术的基本环节熟悉：基因工程如何改变生物性状了解：基因工程简史；基因工程的理论基础重点：基因工程概念；基因工程技术的基本环节难点：（无）自学：基因工程简史【授课学时】学时【教学内容】第一节基因工程的定义第二节基因工程简史第三节基因工程技术的基本环节第四节基因工程改变生物性状第五节基因工程的理论基础第二章基因工程中常用的工具酶【目的要求】掌握：、限制性核酸内切酶的定义，细菌限制与修饰系统包括的酶种类及作用。
、基因工程中常用的限制性核酸内切酶的类型，型限制性核酸内切酶的识别及切割特性。
熟悉：、连接酶的定义及作用。
、分子的体外连接。
、聚合酶及酶的特性与用途。
、各种酶对核酸探针的标记方法了解：、聚合酶作用、末端脱氧核苷酰转移酶作用、核酸酶作用、多聚核苷酸激酶自学：、核酸酶 3L、外切核酸酶重点：限制性核酸内切酶定义，特性及在基因工程中的应用。
《基因工程》教学大纲
《基因工程》教学大纲课程名称（中文/英文）：基因工程(Genetic Engineering)课程编号：1807127学分：2学时：总学时32讲授学时：32开设学期：第7学期授课对象：食品科学与工程专业课程级别：一、课程性质与目的基因工程是生物工程的核心技术，这项技术的广泛应用必将导致人类社会的一次重大变革。
本课程以微生物学、生物化学、分子生物学为基础，重点论述基因工程的基本原理及其单元操作，内容涉及DNA重组技术、分子克隆技术、外源基因的稳定高效表达技术、国内外与转基因食品相关的法律法规等，以拓宽学生生命科学的知识面，能了解基因工程产品的生产及相关的国内外政策，为以后熟练驾驭这项技术服务于科学研究及国民经济打下坚实的基础。
二、课程简介本课程主要讲授与基因工程的主要环节相关的知识，以基本原理、操作技术为支撑，将基本教学内容分为基因工程的载体、基因工程所需的条件、基因的分离与化学合成、外源基因的导入和转化子的筛选、克隆基因的表达及分离纯化等。
通过全面的讲授，使学生掌握基因工程的基本知识和基本技术，为进一步学习其他生物技术奠定基础。
三、教学内容第一章绪论（3学时）主要内容：重点介绍基因工程的概念、主要环节、发展历史及其在生产实践中的应用。
学习要求：掌握基因工程概念，了解基因工程的发展历史及在生产实践的应用。
第二章基因工程工具酶（6学时）主要内容：重点介绍用于核酸操作的工具酶种类，工具酶的功能。
、用于基因工程的载体和用于基因转移的受体菌或细胞。
学习要求：掌握核酸内切酶的功能和基因工程中常用的载体，了解用于基因转移的受体细胞种类。
第三章基因工程载体（4学时）主要内容：介绍用于基因工程的载体和用于基因转移的受体菌或细胞。
学习要求：掌握基因工程中常用的载体，了解用于基因转移的受体细胞种类。
第四章目的基因的分离与克隆（4学时）主要内容：重点介绍原核与真核生物的基因分离方法。
学习要求：掌握目的基因的分离方法。
第五章基因的体外重组和转化（4学时）主要内容：重点介绍目的片断与载体的连接方式以及重组载体的转化方法。
《基因工程》教学大纲
《基因工程》教学大纲课程编号：233204课程名称：基因工程总学时数：48实验学时：0先修课及后续课：先修课为遗传学，分子生物学；后续课为酶工程考核方式：“N+2”，其中“N”包括课程综述（10%）、期中测验（15%）、课程实验设计（10%），“2”为课堂笔记（10%）和期末考试（40%，闭卷）。
一、说明部分1. 课程性质：生物技术专业课，必修2. 教学目标及意义基因工程技术是现代生物技术的核心技术。
以分子遗传学、微生物学、分子生物学等学科为基础，引入工程学的概念，通过周密的设计，进行精确的实验操作，高效率地达到目的。
通过对基因工程原理的系统学习，使本科生对这门已经对社会经济发展产生了巨大影响，并已被誉为本世纪最具发展潜力的学科之一的新兴起的学科有所了解，弄通它的基本原理和工作思路，适应社会对高新技术的要求，为毕业生走向社会参加相关领域的生产和科研或报考研究生进行相关课题研究打下基础。
3. 教学内容及教学要求基因工程是建立在分子遗传学、生物化学、微生物学、细胞生物学的基本原理和知识的基础之上的应用性科学。
本课程主要为本科生讲述基因工程技术中的基本原理和设计思路以及一些常用的实验方法。
另外还介绍了基因工程技术在医药卫生和工农业生产中的应用，以及基因工程应用的安全性问题。
所以要求学生有扎实的上述课程基础。
在听课的过程中随时复习所涉及的分子遗传学基本原理，对没有听懂的知识点及时提问，以免影响对后面知识点的理解与掌握。
在课程结束前要求每位学生在课余查阅相关的文献资料，并写一篇专题报告。
对讲述本门课程的教师要求有比较丰富的基因工程研究实践经验和阅读大量的相关参考书和科研文献，认真备课，根据基因工程技术的发展及时更新讲稿或课件。
4. 教学重点，难点重点：基因的重组；重组体的鉴定；克隆基因的表达调控难点：克隆基因的表达调控5. 教学方法与手段多媒体，实物投影仪等。
6. 教材及主要参考书：教材：马建岗主编《基因工程学原理》（第三版），西安交通大学出版社，2013.参考书：楼士林等编著《基因工程》（第一版），科学出版社2001.（21世纪高等院校教材，国家理科基地教材）吴乃虎《基因工程原理》上下册（第二版），科学出版社，2002.二、正文部分第一章绪论（introduction to genetic engineering）一、教学要求了解：基因工程的发展和在社会生产中的应用。
《基因工程》教学大纲
《基因工程》教学大纲一、课程基本信息二、课程的性质、地位和任务基因工程（Genetic Engineering）是指重组DNA技术或基因转移技术，是在遗传学和分子生物学等课程的基础上而开设的专业课。
本课程的目的和任务是使学生通过本课程的学习，进行有关基因工程基本原理、基本知识和基本技能的考察和训练，并了解基因工程的现代进展，为以后的工作打下良好的基础。
三、课程教学的基本要求通过本课程的学习使学生掌握基因工程的一些基本原理和实验操作方法，掌握基因操作的基本技术、基因克隆的酶学基础、基因克隆的载体的构建及克隆载体系统的选择、原核与真核生物基因分离与鉴定的基本原理和方法、体外重组技术以及植物基因工程的操作方法等。
四、教学内容及学时分配五、课程的主要内容与教学要求第一章基因工程的概念与发展（一）教学目的与要求通过教学使学生了解基因工程的诞生、发展及应用前景；掌握基因工程的概念、基因工程诞生的理论基础和技术基础、基因工程的研究内容。
（二）教学的重点与难点分析重点：基因工程的概念，基因工程诞生的理论基础和技术基础，基因工程的研究内容。
难点：基因工程诞生的理论基础。
（三）教学内容：第一节基因工程的概念1、基因工程的概念；2、基因工程的四要素；3、基因工程分类。
第二节基因工程的诞生和发展1、DNA遗传功能的阐明；2、基因工程的诞生：理论基础、技术基础；3、基因工程的建立；4、基因工程的成熟与腾飞。
第三节基因工程的研究内容第四节基因工程的应用1、基因工程的应用领域；2、基因工程取得的成就。
第二章基因工程的酶学基础（一）教学目的与要求了解常用工具酶的种类、星号活性、影响限制性内切酶活性的因素；掌握工具酶定义、限制性核酸内切酶的命名原则、同尾酶（Isocaudamers）、同裂酶（Isoschizomers）、DNA聚合酶、DNA连接酶的概念、DNA连接酶的种类、影响连接反应的因素；熟悉限制性核酸内切酶的识别序列特点、II 型限制性核酸内切酶的识别序列特点、II型限制性内切酶的切割方式、DNA片段连接的各种方法；使学生具有使用分子生物学软件DNAClub的能力、具有将任意DNA分子连接的分析和应用能力、具有在分子克隆研究中，灵活应用各种DNA聚合酶的能力。
大学《基因工程学》教学大纲
《基因工程学》课程教学大纲（Genetic Engineering）一、课程说明课程编码：02200200课程总学时（理论总学时/实践总学时）：48（48/0）周学时（理论学时/实践学时）：4（4/0）学分：31．课程性质：专业必修课。
2．适用专业与学时分配：适用生物技术专业。
教学内容与学时分配3．课程教学目的与要求：本课程的授课对象是生物技术专业的本科生。
课程简介：《基因工程》是生物技术专业的专业必修课程。
其以分子遗传学理论为基础，以分子生物学和微生物学的现代方法为手段而建立起来的一门技术学科。
基因工程兴起于20世纪70年代初，它的问世带动了生物技术的兴起和发展，是现代生物技术的核心内容。
基因工程课程的主要内容包括基因的分离、基因的克隆、基因的表达、植物基因工程、动物基因工程、药物基因工程和基因治疗等。
它是生命科学学院生物技术专业本科生的主干专业课程之一，它是生物工程（包括基因工程、细胞工程、酶工程、发酵工程）中最重要的课程，其它三大工程是建立在基因工程基础之上的，同时也为生物技术制药等后继学科奠定了重要的理论基础。
课程目标：设置本课程是为了让生物技术专业的学生理解和掌握基因工程的技术原理，通过本课程学习，掌握基因操作的工具酶，基因克隆常用载体，目的基因的分离与合成，重组体的构建，重组体向宿主细胞的导入，重组体克隆的筛选与鉴定以及克隆基因的表达，同时了解基因工程在生物学领域中的应用与发展前景。
对学生达到毕业要求贡献如下：1）了解基因工程学的历史、发展和前沿知识。
2）掌握基因工程学的基础理论、基本知识和基本技能；教学要求：学完基因工程学后，学生将具备以下能力：1）具有良好的自学能力；2）综合运用所掌握的基因工程学理论知识和技能、从事生物科学及其相关领域科学研究的能力。
4．本门课程与其它课程关系：先修课程为生物化学、微生物学、分子生物学、细胞学等，具备基础理论知识及实验能力是基因工程学课程的基础。
基因工程 教学大纲
基因工程理论课教学大纲基因工程理论课共39学时，教学内容、结构、知识点和教学课时安排如下：第一章基因工程概述（3学时）第一节基因工程的概念与基本流程（1学时）一、基因工程的概念二、基因工程的基本流程重点讲述基因工程的概念和基因工程的基本流程。
第二节基因工程的发展简史（1学时）一、基因工程诞生的背景二、基因工程的诞生三、基因工程的发展简单介绍基因工程的诞生背景、诞生过程和发展简史。
第三节基因工程的研究意义和应用（1学时）一、基因工程在基因功能研究中的应用二、基因工程在工业领域的应用三、基因工程在农业领域的应用四、基因工程在医药领域的应用分别介绍基因工程在基础生命科学研究、工农业生产和医学研究及临床实践中的应用，以学生讨论的方式进行。
第二章基因工程的工具酶和载体（8学时）第一节基因工程的工具酶（2学时）一、限制性核酸内切酶二、DNA连接酶三、DNA聚合酶四、碱性磷酸酶五、末端脱氧核苷酸转移酶六、其他工具酶本节内容是重点。
重点介绍基因工程常用的工具酶，包括限制性核酸内切酶，DNA 连接酶，DNA聚合酶，碱性磷酸酶和末端转移酶。
让学生熟悉和掌握这些工具酶的用途，以学生课堂的形式讲述。
第二节克隆载体（3学时一、质粒载体二、噬菌体载体三、黏粒载体四、人工微小染色体主要介绍基因工程常用的克隆载体的概念和类型，包括质粒载体、噬菌体载体、粘粒载体和人工微小染色体。
重点是质粒和噬菌体载体。
结合学生课堂的形式进行。
第三节表达载体（3学时）一、原核细胞表达载体二、真核细胞表达载体主要介绍表达载体构成的基本条件以及常用的高效表达系统，包括T7启动子系统，融合蛋白表达系统和真核质粒表达系统。
本节内容是难点也是重点。
以老师讲解为主，结合讨论和例题分析的形式帮助同学们理解和掌握。
第三章目的基因的制备与鉴定（8学时）第一节从基因文库获取目的基因（2学时）一、基因组文库的构建与筛选二、cDNA文库的构建与筛选主要介绍基因组文库和cDNA文库的概念和构建过程。
基因工程教学大纲
基因工程教学大纲一、前言基因工程是现代生物技术领域的重要学科之一，通过对基因的分析、操作和调控，实现了许多前所未有的生物学研究和应用。
本教学大纲将系统介绍基因工程的基本概念、原理、方法和应用，旨在帮助学生全面了解基因工程领域的知识，为他们将来从事相关研究和工作奠定坚实基础。
二、课程目标1. 熟悉基因工程的基本概念和发展历史；2. 掌握基因工程的主要原理和技术方法；3. 理解基因工程在农业、医学、工业等领域的应用；4. 培养学生的团队合作、实验设计和科学研究能力。
三、主要内容1. 基因工程概论1.1 基因工程的定义和基本原理1.2 基因工程的发展历史和意义1.3 基因工程与传统遗传学的区别和联系2. 基因工程技术2.1 重组DNA技术2.1.1 限制性内切酶和DNA连接酶的作用2.1.2 DNA片段的电泳分离和纯化2.2 基因克隆技术2.2.1 质粒载体的构建和筛选2.2.2 载体DNA的转染和表达2.3 基因编辑技术2.3.1 CRISPR/Cas9系统原理和应用2.3.2 基因组编辑的伦理和风险3. 基因工程应用3.1 农业领域的基因工程3.1.1 转基因作物的开发和安全性评价3.1.2 基因编辑技术在植物育种中的应用3.2 医学领域的基因工程3.2.1 基因治疗和基因诊断技术3.2.2 个性化医疗和基因组学研究3.3 工业领域的基因工程3.3.1 酶工程和微生物发酵技术3.3.2 基因工程产品的生产和市场应用四、教学方法1. 理论授课：介绍基因工程的基本概念和原理；2. 实验操作：进行重组DNA、基因克隆和基因编辑等实验；3. 论文研讨：就基因工程的最新研究成果展开讨论；4. 课外阅读：推荐相关文献和资料供学生深入学习。
五、评价方式1. 平时表现：包括出勤、课堂参与和实验操作等；2. 作业成绩：包括理论作业和实验报告成绩；3. 期末考核：进行知识的笔试和实践技能测试。
六、参考教材1. 《基因工程导论》常晓燕，高等教育出版社，2015；2. 《基因工程原理与技术》周志刚，科学出版社，2018；3. 《基因工程应用手册》张三，人民军医出版社，2019。
基因工程教学大纲
基因工程教学大纲引言：基因工程是近年来迅速发展的学科领域，它对人类社会的发展产生了重要影响。
为了适应时代的需求，设计一份全面而系统的基因工程教学大纲是至关重要的。
本文将按照科学规范和教学需求，为基因工程课程设计一份教学大纲。
一、课程概述1.1 课程名称：基因工程1.2 学分：3学分1.3 先修课程：生物学、遗传学1.4 课程性质：必修课程二、课程目标2.1 理论目标：2.1.1 了解基因工程的发展历程和主要研究领域。
2.1.2 理解重要基因工程技术的原理和应用。
2.1.3 掌握基因工程实验技术和数据分析方法。
2.2 实践目标：2.2.1 培养科学研究和实验操作的能力。
2.2.2 提高信息搜索与科学写作的能力。
2.2.3 培养团队合作和项目管理能力。
三、教学内容和安排3.1 基因工程概述3.1.1 定义和发展历程3.1.2 基因工程在农业、医学和环境领域中的应用3.1.3 基因工程伦理与法律问题3.1.4 基因工程与社会发展3.2 DNA重组技术3.2.1 DNA结构与功能3.2.2 基因克隆技术3.2.3 DNA测序和合成技术3.2.4 基因组编辑技术3.3 基因工程应用3.3.1 转基因植物和转基因动物3.3.2 基因治疗和基因诊断3.3.3 基因工程在环境修复中的应用3.3.4 基因工程在能源生产中的应用3.4 基因工程实验技术3.4.1 DNA提取和纯化技术3.4.2 PCR技术3.4.3 DNA凝胶电泳3.4.4 基因组分析技术3.5 数据分析与文献检索3.5.1 基因数据分析软件的使用与比对3.5.2 基因数据库检索与利用3.5.3 资料整理与科学写作方法四、教学方法4.1 理论授课4.1.1 知识点讲解与示范4.1.2 案例分析与讨论4.1.3 学生主动学习与互动交流4.2 实验操作和实践训练4.2.1 实验指导与操作规范4.2.2 实验数据分析与报告撰写4.2.3 团队合作与交流4.3 课堂讨论与辩论4.3.1 学生主题报告4.3.2 学术论文讨论与评论4.3.3 伦理与法律问题辩论五、评价方式5.1 学生的平时表现（占总评成绩的30%）5.2 实验报告与成果展示（占总评成绩的30%）5.3 期末考试（占总评成绩的40%）六、教材和参考资源6.1 教材：-《基因工程导论》-《基因工程与生物技术实验教程》-《基因工程实验指导与操作手册》6.2 参考资源：-学术期刊论文-基因工程相关网站-教学实验室设备和工具书籍结语：通过本教学大纲的实施，学生将全面了解基因工程的理论与实践，掌握基础的实验技术和科学研究方法。
基因工程课程教学大纲
基因工程课程教学大纲1. 课程简介- 介绍基因工程的定义和目的- 阐述基因工程在现代生物科技中的重要性- 引发学生对基因工程的兴趣和好奇2. 基本概念与原理- 分子生物学相关基础知识回顾- DNA的组成和结构- 基因的转录与翻译- DNA复制与修复3. 基因工程技术- DNA分离与纯化技术- PCR扩增技术及其应用- 基因测序技术及其原理- 基因克隆技术与融合蛋白表达4. 基因工程在医学领域的应用- 基因检测和诊断技术- 基因治疗和基因药物- 基因编辑和CRISPR-Cas9技术5. 基因工程在农业领域的应用- 转基因作物及其意义- 抗虫、抗病基因的导入- 增强作物产量和耐逆性的基因改造6. 基因工程的伦理与安全性问题- 基因工程与生物安全- 基因编辑的道德和伦理问题- 法律法规对基因工程的限制和监管7. 实践与实验- 分子生物学实验技术的学习和操作 - 基因工程实验的设计和执行- 数据分析和实验结果的报告8. 开展学术论文研究- 学术论文写作规范- 文献检索和资料整理- 研究课题的选择和设计9. 课程评估与考核- 平时成绩与课程参与度的评估- 实验报告的撰写和口头报告- 期末考试或综合评估的方式10. 参考资料- 书籍：《基因工程原理与应用》- 文献：相关研究论文- 网站：国际生命科学研究中心官方网站以上是基因工程课程教学大纲的主要内容，通过本课程的学习，学生将了解基因工程的基本概念和原理，掌握基因工程技术的操作方法和应用领域，并能够深入思考基因工程所涉及的伦理和安全性问题。
同时，通过实践与实验的环节，学生将锻炼实验技能和科研思维，培养论文写作和研究能力。
希望通过这门课程的学习，学生们能够全面了解基因工程，为未来的科学研究和职业发展打下坚实的基础。
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基因工程教学大纲
课程简介：基因工程技术是现代生物技术的核心技术。
以生物化学、微生物学、细胞生物学、遗传学、分子生物学等学科为基础，引入工程学的概念，通过周密的设计，进行精确的实验操作，高效率地达到目的。
本课程主要为本科生讲述基因工程技术中的基本原理和设计思路以及一些常用的实验方法。
教学目的：通过对基因工程的系统学习，使本科生对这门已经对社会经济发展产生了巨大影响，并已被誉为本世纪最具发展潜力的学科之一的新兴起的学科有所了解，清楚它的基本原理和工作思路，适应社会对高新技术的要求，为毕业生走向社会参加相关领域的生产和科研或报考研究生进行相关课题研究打下基础。
教学基本要求：基因工程是建立在生物化学、微生物学、细胞生物学、遗传学；分子生物学的基本原理和知识的基础之上的应用性科学。
所以要求学生有扎实的上述课程基础。
在听课的过程中随时复习所涉及的分子生物学基本原理，对没有听懂的知识点及时提问，以免影响对后面知识点的理解与掌握。
在课程结束前要求每位学生在课余查阅相关的文献资料，并写一篇专题报告。
对讲述本门课程的教师要求有比较丰富的基因工程研究实践经验和阅读大量的相关参考书和科研文献，认真备课，根据基因工程技术的发展及时更新讲稿或课件。
课程基本内容及学时分配：
绪论（introduction to genetic engineering ）（2 学时）
本章要点：掌握基因工程的含义和基因工程诞生的理论基础与技术突破。
了解基因工程的发展和在社会生产中的应用。
第一节基因工程的诞生
一、基因工程的定义
二、基因工程诞生的理论基础
三、基因工程诞生的技术突破
四、基因工程的诞生
五、基因工程的特征
六、基因工程的主要操作内容
第二节基因工程的安全性
一、基因工程的安全隐患
二、重组DNA 研究的安全准则
第三节基因工程的应用
一、基因工程在农业生产中的应用
二、基因工程在工业中的应用
三、基因工程在医药上的应用
四、基因工程在环境保护中的应用第四节基因工程技术的商业化发展
一、商业投资支持现代生物技术研究
二、基因工程商业化特点
第一章基因操作的主要技术原理（4 学时）
本章要点：掌握DNA 提取、DNA 电泳、分子杂交、PCR 扩增和DNA 序列测定的技术原理。
了解酵母双杂交系统的原理。
第一节DNA 的提取与纯化
一、质粒DNA 的提取
二、基因组或其他DNA 的提取
三、DNA 的定量和纯度测定
四、DNA 分子量的估计
第二节DNA 的凝胶电泳
一、电泳的基本原理
二、琼脂糖凝胶电泳
三、聚丙烯酰胺凝胶电泳
四、凝胶染色
第三节核酸的分子杂交
一、Southern blot
二、Northern blot
三、原位杂交
第四节基因扩增技术---PCR
一、基因扩增( gene amplification)
二、PCR技术
第五节DNA 序列分析
一、双脱氧链终止法
二、Maxam-Gilbert 化学修饰法
三、DNA 杂交测序
四、DNA 自动化测序第六
节酵母双杂交系统
一、酵母双杂交系统的作用
二、酵母双杂交系统的原理
三、构建双杂交体系的宿主菌
四、构建报告基因( reporter gene)
五、构建双杂交体系的穿梭质粒
六、酵母双杂交的实验过程
第二章基因工程的酶学基础 (3 学时) 本章要点：掌握限II 型制性核酸内切酶的切割原理和部
分常用的限制性核酸内切酶的识别位点与切割末端。
掌握常用的DNA 聚合酶的特性和用途以
及探针的标记原理。
了解DNA 连接酶和修饰酶在基因操作中的用途。
第一节限制性核酸内切酶
一、限制性核酸内切酶
二、限制性内切酶的类型
三、限制酶的命名
四、影响限制性内切酶活性的因素
五、限制性内切酶对DNA 的消化第二节DNA 连接酶
一、DNA连接酶(ligase)的发现
二、DNA ligase 的特点
三、连接反应的机理
四、连接反应的温度
五、影响连接反应的因素
第三节DNA 聚合酶
一、基因工程中常用的DNA 聚合酶
二、常用的DNA 聚合酶的特点
三、DNA 聚合酶在基因工程中的用途第四节DNA 修饰酶
一、末端脱氧核苷酸转移酶( terminal transferase)
二、T4 多核苷酸激酶
三、碱性磷酸酶第五节核酸外切酶
一、单链DNA 外切酶
二、双链DNA 外切酶
第六节单链核酸内切酶
一、S1 核酸酶
二、Bal 31 核酸酶
第三章基因工程载体（3 学时）
本章要点：掌握载体的基本结构和质粒载体、噬菌体载体的特点、构建原理。
人
了解酵母工染色体和细菌人工染色体的结构和工作原理。
第一节质粒（plasmid ）载体
一、质粒
二、质粒的类型
三、质粒的复制类型
四、质粒载体的构建
五、经典的大肠杆菌质粒载体
六、质粒载体的不稳定性第二节噬菌体载体
一、噬菌体的一般特性
二、噬菌体的生活周期
三、单链噬菌体载体
四、双链噬菌体载体—载体第三节大分子DNA 克隆载体
一、酵母人工染色体（YAC）
二、细菌人工染色体（BAC）第四节病毒载体
一、反转录病毒载体
二、DNA 病毒载体第五节基因打靶载体（Targeting vector ）
一、基因打靶（gene targeting）
二、基因打靶载体的要求
三、基因打靶载体组成
四、基因打靶载体的整合方式
五、转染细胞的选择
第四章目的基因的获取（1 学时）本章要点：掌握化学合成DNA 的原理和DNA 文库的构建原理。
第一节基因组DNA 片断化一、限制性内切酶法二、随机片断化
第二节化学合成目的基因一、目前常用的化学合成方法二、化学合成DNA 片断的组装
三、寡聚核苷酸化学合成的优点第三节目的基因的保存和扩增一、基因文库的构建二、
cDNA 文库的构建
三、PCR扩增获得目的DNA
第四节目的基因的分离和扩增
一、目的基因的分离
二、PCR 扩增获得目的基因
第五章基因的体外重组和转化（1 学时）
本章要点：掌握在体育外源DNA 连接的方式和原理以及感受态菌的制备原理。
第一节DNA 片段的体外连接一、粘性末端的连接二、齐平末端（blunt end ）的连接
三、PCR产物的连接
四、DNA 体外连接应注意的事项
五、载体分子和外源DNA 插入片段的连接结果
第二节重组体导入细菌细胞
一、感受态大肠杆菌的制备
二、重组DNA 导入大肠杆菌
第六章重组体的选择和鉴定（2 学时）
本章要点：掌握常用的抗菌素抗性筛选、酶切筛选、酶联免疫吸附测定（ELISA ）、免疫印迹（western blotting ）法的原理。
了解转译筛选法和真核生物的报道基因筛选
法。
第一节载体表型选择法一、抗药性标记插入失活选择法二、-半乳糖苷酶显色反应选择法第二节根据插入序列的表型特征选择第三节DNA 电泳检测法
一、直接电泳检测法
二、酶切电泳筛选法
三、PCR 扩增检测法
第四节核酸杂交检测法一、原理二、核酸杂交检测方法第五节免疫化学检测法一、放射性抗体检测法二、免疫沉淀检测法
三、酶联免疫吸附测定（ELISA ）
四、免疫印迹（western blotting ）法第六节转译筛选法
一、无细胞翻译系统二、转译筛选
三、杂交抑制转译法
四、杂交释放转译法
五、DNA- 蛋白质相互作用筛选法第七节几种常用的真核生物重组基因选择方法
一、哺乳动物基因转移的选择标记
二、植物转化体报道基因筛选法
第七章克隆基因的表达（1 学时）
本章要点：掌握原核生物表达系统的结构和工作原理。
了解外源基因在真核生物中的表达方法。
第一节外源基因在原核细胞中的表达
一、原核生物基因表达的特点
二、原核表达系统的注意事项
三、原核生物基因表达的调控
四、外源蛋白在大肠杆菌中的表达部位
五、几种类型的原核表达载体
六、影响外源基因表达效率的因素
七、提高表达水平常用的方法
八、外源蛋白质表达后的正确修饰第二节外源基因在真核细胞中的表达
一、在酵母中表达
二、昆虫培养细胞表达系统
三、外源基因在植物中表达
四、在哺乳动物细胞中表达
教材及主要参考书：
教材：楼士林等编著《基因工程》，科学出版社2002 年第一版（21 世纪高等院校教材，国家理科基地教材）
参考书：吴乃虎《基因工程原理》上下册，科学出版社2002 年第二版齐义鹏《基因工程原理和方法》武汉大学出版社1989 年第一版。