《基因工程》教学大纲
基因工程课程教学大纲
《基因工程》课程教学大纲一、课程基本信息课程代码：250380课程名称：基因工程英文名称：Gene Engineering课程类别：专业课（必修课）学时：45学时，27学时理论讲授，18学时实验，开课学期第五学期。
学分：2.0适用对象: 生物技术专业考核方式：考试（平时成绩占总成绩的30%）先修课程：生物化学，分子生物学，遗传学，细胞工程。
二、课程简介“基因工程”是生命科学的重要学科，课程的主要内容包括基因工程的基本原理和方法：目的基因的获得，基因克隆的工具酶、载体，重组分子、重组子的鉴定与表达。
课程的主要目的在于使学生掌握基因工程的意义、基因工程操作的基本理论，技术和应用，为今后开展基因工程研究打下理论基础。
Gene Engineering is one of the most important courses for life science students. The main content includes general theories and techniques: obtainment of the target gene, tool enzymes and vectors, molecule recombination, and its expression and test. The main purpose of the course is let students know significant, general theories, techniques and applications of Gene Engineering, so to make solidity knowledge base for further research.三、课程性质与教学目的基因工程是4年制生物技术专业的专业课。
本课程是现代生物技术中最主要的一门技术，同时与其他工程技术相辅相成。
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《基因工程》课程教学大纲课程类别：专业课课程性质：必修英文名称：Gene Engineering总学时：48 讲授学时：48学分：3先修课程：生物化学、分子生物学、微生物学、细胞生物学适用专业：生物工程、生物技术开课单位：医学院生物化学与分子生物学教研室一、课程简介本课程是生物工程专业必修的专业主干课程，它是生物工程（包括基因工程、细胞工程、酶工程、发酵工程）中最重要的课程之一，它是以分子遗传学理论为基础，以分子生物学和微生物学的现代方法为手段而建立起来的一门技术学科。
基因工程就是在生物体外，通过对DNA分子进行人工剪切和拼接，对生物的基因进行改造和重新组合，然后导入受体细胞内进行无性繁殖，使重组基因在受体细胞内表达，产生出人类所需要的基因产物或定向的创造生物的新性状，使之稳定地遗传给子代。
要求学生掌握基因工程中的基础知识和基本理论，掌握基因工程中的基本研究手段和实验方法，了解基因工程中的最新研究进展和动态，能够灵活运用基因工程的基本理论知识和实验方法，对整个生物工程有一个更新的认识，使学生受到基本科学思维和科学实验能力训练，同时使学生学会学习，具有自我开拓可获得知识和利用信息的能力，以达到融知识传授、能力培养和素质提高于一体的教学目的。
二、教学内容及基本要求（一）绪论（2学时）教学内容：基因工程概况；基因工程研究内容；基因工程展望。
教学要求：1.掌握基因工程的概念。
2.了解基因工程的主要研究内容、发展简史。
3.了解当前基因工程研究的总趋势与重点领域。
授课方式：讲授、自学（-）分子克隆工具酶（6学时）教学内容：限制性内切酶；甲基化酶；DNA聚合酶；依赖于DNA的RNA聚合酶；连接酶；T4多核昔酸激酶；碱性磷酸酶；核酸酶。
教学要求：1.掌握限制性核酸内切酶的概念、功能、影响酶活性的因素及操作注意事项、限制性核酸内切酶的星活性概念及产生的原因。
2.掌握同裂酶和同尾酶的概念。
3.掌握DNA连接酶、DNA聚合酶、反转录酶和碱性磷酸酶的功能。
大学《基因工程学》教学大纲
《基因工程学》课程教学大纲（Genetic Engineering）一、课程说明课程编码：02200200课程总学时（理论总学时/实践总学时）：48（48/0）周学时（理论学时/实践学时）：4（4/0）学分：31．课程性质：专业必修课。
2．适用专业与学时分配：适用生物技术专业。
教学内容与学时分配3．课程教学目的与要求：本课程的授课对象是生物技术专业的本科生。
课程简介：《基因工程》是生物技术专业的专业必修课程。
其以分子遗传学理论为基础，以分子生物学和微生物学的现代方法为手段而建立起来的一门技术学科。
基因工程兴起于20世纪70年代初，它的问世带动了生物技术的兴起和发展，是现代生物技术的核心内容。
基因工程课程的主要内容包括基因的分离、基因的克隆、基因的表达、植物基因工程、动物基因工程、药物基因工程和基因治疗等。
它是生命科学学院生物技术专业本科生的主干专业课程之一，它是生物工程（包括基因工程、细胞工程、酶工程、发酵工程）中最重要的课程，其它三大工程是建立在基因工程基础之上的，同时也为生物技术制药等后继学科奠定了重要的理论基础。
课程目标：设置本课程是为了让生物技术专业的学生理解和掌握基因工程的技术原理，通过本课程学习，掌握基因操作的工具酶，基因克隆常用载体，目的基因的分离与合成，重组体的构建，重组体向宿主细胞的导入，重组体克隆的筛选与鉴定以及克隆基因的表达，同时了解基因工程在生物学领域中的应用与发展前景。
对学生达到毕业要求贡献如下：1）了解基因工程学的历史、发展和前沿知识。
2）掌握基因工程学的基础理论、基本知识和基本技能；教学要求：学完基因工程学后，学生将具备以下能力：1）具有良好的自学能力；2）综合运用所掌握的基因工程学理论知识和技能、从事生物科学及其相关领域科学研究的能力。
4．本门课程与其它课程关系：先修课程为生物化学、微生物学、分子生物学、细胞学等，具备基础理论知识及实验能力是基因工程学课程的基础。
基因工程 教学大纲
基因工程理论课教学大纲基因工程理论课共39学时，教学内容、结构、知识点和教学课时安排如下：第一章基因工程概述（3学时）第一节基因工程的概念与基本流程（1学时）一、基因工程的概念二、基因工程的基本流程重点讲述基因工程的概念和基因工程的基本流程。
第二节基因工程的发展简史（1学时）一、基因工程诞生的背景二、基因工程的诞生三、基因工程的发展简单介绍基因工程的诞生背景、诞生过程和发展简史。
第三节基因工程的研究意义和应用（1学时）一、基因工程在基因功能研究中的应用二、基因工程在工业领域的应用三、基因工程在农业领域的应用四、基因工程在医药领域的应用分别介绍基因工程在基础生命科学研究、工农业生产和医学研究及临床实践中的应用，以学生讨论的方式进行。
第二章基因工程的工具酶和载体（8学时）第一节基因工程的工具酶（2学时）一、限制性核酸内切酶二、DNA连接酶三、DNA聚合酶四、碱性磷酸酶五、末端脱氧核苷酸转移酶六、其他工具酶本节内容是重点。
重点介绍基因工程常用的工具酶，包括限制性核酸内切酶，DNA 连接酶，DNA聚合酶，碱性磷酸酶和末端转移酶。
让学生熟悉和掌握这些工具酶的用途，以学生课堂的形式讲述。
第二节克隆载体（3学时一、质粒载体二、噬菌体载体三、黏粒载体四、人工微小染色体主要介绍基因工程常用的克隆载体的概念和类型，包括质粒载体、噬菌体载体、粘粒载体和人工微小染色体。
重点是质粒和噬菌体载体。
结合学生课堂的形式进行。
第三节表达载体（3学时）一、原核细胞表达载体二、真核细胞表达载体主要介绍表达载体构成的基本条件以及常用的高效表达系统，包括T7启动子系统，融合蛋白表达系统和真核质粒表达系统。
本节内容是难点也是重点。
以老师讲解为主，结合讨论和例题分析的形式帮助同学们理解和掌握。
第三章目的基因的制备与鉴定（8学时）第一节从基因文库获取目的基因（2学时）一、基因组文库的构建与筛选二、cDNA文库的构建与筛选主要介绍基因组文库和cDNA文库的概念和构建过程。
《基因工程》课程教学大纲
《基因工程》课程教学大纲课程名称：基因工程课程类别：专业主干课适用专业：生物技术考核方式：考试总学时、学分：32 学时 2 学分其中实验学时：0 学时一、课程教学目的通过对本门课程的学习，使学生掌握基因工程技术的基本原理、常用技术和工作思路，了解基因工程技术的应用及发展趋势，为进一步学习有关专业课及参加相关领域的生产和科研工作奠定基础。
二、课程教学要求本门课是以遗传学、生物化学、微生物学、细胞生物学、分子生物学等学科为基础的学科，要求学生有扎实的上述课程基础。
本课程的主要内容包括: 基因工程载体、基因工程的酶学基础、目的基因的克隆、ＤＮＡ连接和转化、转化子的筛选与重组子的鉴定、大肠杆菌基因工程、酵母菌基因工程、高等动物基因工程、高等植物基因工程等。
要求学生掌握基因工程的基本原理和常用方法与技术，了解该领域的研究动态与发展方向。
课程的基本内容随着本学科的发展而调整并限定其广度和深度，在保证达到一定培养规格的前提下，考虑学生的接受能力和学习负担，同时注意本课程和其它相关课程的相互联系与衔接，防止疏漏和不必要的重复。
三、先修课程生物化学、微生物学、遗传学、细胞生物学、分子生物学。
四、课程教学重、难点教学重点：基因工程载体、基因工程的酶学基础、目的基因的克隆、ＤＮＡ连接和转化、转化子的筛选与重组子的鉴定。
教学难点：目的基因的克隆、ＤＮＡ连接和转化、转化子的筛选与重组子的鉴定。
五、课程教学方法与教学手段以教师讲授为主，要求教师认真备课，熟悉本课程的基本内容以及该学科的最新发展趋势，以合适的形式进行教学，提倡采用多媒体作为辅助教学手段；学生可以通过阅读相关的英文资料了解本学科的研究状况与发展方向，也可以阅读一些感兴趣的参考资料，训练其针对所感兴趣的问题进行深入探讨的能力。
六、课程教学内容第一章概述（1学时）1．教学内容（1）基因工程的概念；（2）基因工程的发展和历史；（3）基因工程的研究意义。
2．重、难点提示（1）重点：基因工程的概念；（2）难点：基因工程的基因原理及在生物工程中的地位。
基因工程教学大纲
基因工程教学大纲一、前言基因工程是现代生物技术领域的重要学科之一，通过对基因的分析、操作和调控，实现了许多前所未有的生物学研究和应用。
本教学大纲将系统介绍基因工程的基本概念、原理、方法和应用，旨在帮助学生全面了解基因工程领域的知识，为他们将来从事相关研究和工作奠定坚实基础。
二、课程目标1. 熟悉基因工程的基本概念和发展历史；2. 掌握基因工程的主要原理和技术方法；3. 理解基因工程在农业、医学、工业等领域的应用；4. 培养学生的团队合作、实验设计和科学研究能力。
三、主要内容1. 基因工程概论1.1 基因工程的定义和基本原理1.2 基因工程的发展历史和意义1.3 基因工程与传统遗传学的区别和联系2. 基因工程技术2.1 重组DNA技术2.1.1 限制性内切酶和DNA连接酶的作用2.1.2 DNA片段的电泳分离和纯化2.2 基因克隆技术2.2.1 质粒载体的构建和筛选2.2.2 载体DNA的转染和表达2.3 基因编辑技术2.3.1 CRISPR/Cas9系统原理和应用2.3.2 基因组编辑的伦理和风险3. 基因工程应用3.1 农业领域的基因工程3.1.1 转基因作物的开发和安全性评价3.1.2 基因编辑技术在植物育种中的应用3.2 医学领域的基因工程3.2.1 基因治疗和基因诊断技术3.2.2 个性化医疗和基因组学研究3.3 工业领域的基因工程3.3.1 酶工程和微生物发酵技术3.3.2 基因工程产品的生产和市场应用四、教学方法1. 理论授课：介绍基因工程的基本概念和原理；2. 实验操作：进行重组DNA、基因克隆和基因编辑等实验；3. 论文研讨：就基因工程的最新研究成果展开讨论；4. 课外阅读：推荐相关文献和资料供学生深入学习。
五、评价方式1. 平时表现：包括出勤、课堂参与和实验操作等；2. 作业成绩：包括理论作业和实验报告成绩；3. 期末考核：进行知识的笔试和实践技能测试。
六、参考教材1. 《基因工程导论》常晓燕，高等教育出版社，2015；2. 《基因工程原理与技术》周志刚，科学出版社，2018；3. 《基因工程应用手册》张三，人民军医出版社，2019。
基因工程教学大纲
基因工程教学大纲引言：基因工程是近年来迅速发展的学科领域，它对人类社会的发展产生了重要影响。
为了适应时代的需求，设计一份全面而系统的基因工程教学大纲是至关重要的。
本文将按照科学规范和教学需求，为基因工程课程设计一份教学大纲。
一、课程概述1.1 课程名称：基因工程1.2 学分：3学分1.3 先修课程：生物学、遗传学1.4 课程性质：必修课程二、课程目标2.1 理论目标：2.1.1 了解基因工程的发展历程和主要研究领域。
2.1.2 理解重要基因工程技术的原理和应用。
2.1.3 掌握基因工程实验技术和数据分析方法。
2.2 实践目标：2.2.1 培养科学研究和实验操作的能力。
2.2.2 提高信息搜索与科学写作的能力。
2.2.3 培养团队合作和项目管理能力。
三、教学内容和安排3.1 基因工程概述3.1.1 定义和发展历程3.1.2 基因工程在农业、医学和环境领域中的应用3.1.3 基因工程伦理与法律问题3.1.4 基因工程与社会发展3.2 DNA重组技术3.2.1 DNA结构与功能3.2.2 基因克隆技术3.2.3 DNA测序和合成技术3.2.4 基因组编辑技术3.3 基因工程应用3.3.1 转基因植物和转基因动物3.3.2 基因治疗和基因诊断3.3.3 基因工程在环境修复中的应用3.3.4 基因工程在能源生产中的应用3.4 基因工程实验技术3.4.1 DNA提取和纯化技术3.4.2 PCR技术3.4.3 DNA凝胶电泳3.4.4 基因组分析技术3.5 数据分析与文献检索3.5.1 基因数据分析软件的使用与比对3.5.2 基因数据库检索与利用3.5.3 资料整理与科学写作方法四、教学方法4.1 理论授课4.1.1 知识点讲解与示范4.1.2 案例分析与讨论4.1.3 学生主动学习与互动交流4.2 实验操作和实践训练4.2.1 实验指导与操作规范4.2.2 实验数据分析与报告撰写4.2.3 团队合作与交流4.3 课堂讨论与辩论4.3.1 学生主题报告4.3.2 学术论文讨论与评论4.3.3 伦理与法律问题辩论五、评价方式5.1 学生的平时表现（占总评成绩的30%）5.2 实验报告与成果展示（占总评成绩的30%）5.3 期末考试（占总评成绩的40%）六、教材和参考资源6.1 教材：-《基因工程导论》-《基因工程与生物技术实验教程》-《基因工程实验指导与操作手册》6.2 参考资源：-学术期刊论文-基因工程相关网站-教学实验室设备和工具书籍结语：通过本教学大纲的实施，学生将全面了解基因工程的理论与实践，掌握基础的实验技术和科学研究方法。
基因工程课程教学大纲
基因工程课程教学大纲1. 课程简介- 介绍基因工程的定义和目的- 阐述基因工程在现代生物科技中的重要性- 引发学生对基因工程的兴趣和好奇2. 基本概念与原理- 分子生物学相关基础知识回顾- DNA的组成和结构- 基因的转录与翻译- DNA复制与修复3. 基因工程技术- DNA分离与纯化技术- PCR扩增技术及其应用- 基因测序技术及其原理- 基因克隆技术与融合蛋白表达4. 基因工程在医学领域的应用- 基因检测和诊断技术- 基因治疗和基因药物- 基因编辑和CRISPR-Cas9技术5. 基因工程在农业领域的应用- 转基因作物及其意义- 抗虫、抗病基因的导入- 增强作物产量和耐逆性的基因改造6. 基因工程的伦理与安全性问题- 基因工程与生物安全- 基因编辑的道德和伦理问题- 法律法规对基因工程的限制和监管7. 实践与实验- 分子生物学实验技术的学习和操作 - 基因工程实验的设计和执行- 数据分析和实验结果的报告8. 开展学术论文研究- 学术论文写作规范- 文献检索和资料整理- 研究课题的选择和设计9. 课程评估与考核- 平时成绩与课程参与度的评估- 实验报告的撰写和口头报告- 期末考试或综合评估的方式10. 参考资料- 书籍：《基因工程原理与应用》- 文献：相关研究论文- 网站：国际生命科学研究中心官方网站以上是基因工程课程教学大纲的主要内容，通过本课程的学习，学生将了解基因工程的基本概念和原理，掌握基因工程技术的操作方法和应用领域，并能够深入思考基因工程所涉及的伦理和安全性问题。
同时，通过实践与实验的环节，学生将锻炼实验技能和科研思维，培养论文写作和研究能力。
希望通过这门课程的学习，学生们能够全面了解基因工程，为未来的科学研究和职业发展打下坚实的基础。
335-基因工程教学大纲
335-基因工程教学大纲基因工程教学大纲genetic engineering《基因工程》教学大纲课程名称：基因工程课程类型：范围选修学时：48学时适用对象：生命类专业先修课程：《生物化学》、《分子生物学》、《遗传学》、《微生物学》一、课程性质、目的与任务以及对先修课程要求基因工程技术是现代生物技术的核心技术，系统学习作为生物工程核心的基因工程可为众多课程的学习打下良好的基础，是生命学科的一门专业选修课。
要求学生能较全面和深入理解基因工程原理，并了解生命科学研究的设计思路和基因操作技术平台的应用策略。
以求为以后的学习和科研工作打下良好和扎实的理论基础。
本课程涉及到生物学的一些重要课程，如：普通生物学、生物化学、微生物学、遗传学和分子生物学，因此要学生选修这些课程之后，再选修本课程。
二、教学重点、难点教学重点：本课程的理论课程的讲授侧重于基因工程操作的基本原理，而不是基因操作的实验，这是本课程内容安排的基本准则。
课程主要是基因操作的基本原理，包括基因概念的发展、工具酶、载体、体外重组、外源基因的导入和筛选鉴定等。
教学难点：在讲授基因工程原理的同时，竭力与分子遗传学、细胞生物学、生物化学、分子生物学等赖以发展的学科和相关原理有机地结合起来，开阔学生视野，对生命科学的的基础知识融会贯通，做到理论与应用相结合。
三、与其他课程关系基因工程是在《生物化学》，《分子生物学》等课程基础上开设的一门专业课；同时为后续的《功能基因组》、《生物芯片》、《生物信息学》打下基础。
本课程的学习对全面掌握生物技术各专业基础课的内容具有重要作用，为进一步了解现代生物技术领域的内容具有重要促进作用。
四、教学内容、学时分配及基本要求第一章绪论（4学时）基本要求：掌握基因工程技术的基本概念、基本原理以及基本过程，了解基因工程的发展历史以及研究意义，主要是基因工程的诞生和成熟；掌握基因的现代概念，并理解基因与基因工程之间的关系。
重点：遗传工程、基因工程的概念；基因工程理论上的三大发现和技术上的三大发现；基因工程的基本步骤；基因工程的意义。
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《基因工程》教学大纲
课程编号：233204
课程名称：基因工程
总学时数：48
实验学时：0
先修课及后续课：先修课为遗传学，分子生物学；后续课为酶工程
考核方式：“N+2”，其中“N”包括课程综述（10%）、期中测验（15%）、课程实验设计（10%），“2”为课堂笔记（10%）和期末考试（40%，闭卷）。
一、说明部分
1. 课程性质：生物技术专业课，必修
2. 教学目标及意义
基因工程技术是现代生物技术的核心技术。
以分子遗传学、微生物学、分子生物学等学科为基础，引入工程学的概念，通过周密的设计，进行精确的实验操作，高效率地达到目的。
通过对基因工程原理的系统学习，使本科生对这门已经对社会经济发展产生了巨大影响，并已被誉为本世纪最具发展潜力的学科之一的新兴起的学科有所了解，弄通它的基本原理和工作思路，适应社会对高新技术的要求，为毕业生走向社会参加相关领域的生产和科研或报考研究生进行相关课题研究打下基础。
3. 教学内容及教学要求
基因工程是建立在分子遗传学、生物化学、微生物学、细胞生物学的基本原理和知识的基础之上的应用性科学。
本课程主要为本科生讲述基因工程技术中的基本原理和设计思路以及一些常用的实验方法。
另外还介绍了基因工程技术在医药卫生和工农业生产中的应用，以及基因工程应用的安全性问题。
所以要求学生有扎实的上述课程基础。
在听课的过程中随时复习所涉及的分子遗传学基本原理，对没有听懂的知识点及时提问，以免影响对后面知识点的理解与掌握。
在课程结束前要求每位学生在课余查阅相关的文献资料，并写一篇专题报告。
对讲述本门课程的教师要求有比较丰富的基因工程研究实践经验和阅读大量的相关参考书和科研文献，认真备课，根据基因工程技术的发展及时更新讲稿或课件。
4. 教学重点，难点
重点：基因的重组；重组体的鉴定；克隆基因的表达调控
难点：克隆基因的表达调控
5. 教学方法与手段
多媒体，实物投影仪等。
6. 教材及主要参考书：
教材：马建岗主编《基因工程学原理》（第三版），西安交通大学出版社，2013.
参考书：楼士林等编著《基因工程》（第一版），科学出版社2001.（21世纪高等院校教材，国家理科基地教材）
吴乃虎《基因工程原理》上下册（第二版），科学出版社，2002.
二、正文部分
第一章绪论（introduction to genetic engineering）
一、教学要求
了解：基因工程的发展和在社会生产中的应用。
掌握：基因工程的含义和基因工程诞生的理论与技术基础。
二、教学内容：
第一节基因工程的诞生
一、基因工程的定义
二、基因工程诞生的理论基础
三、基因工程诞生的技术突破
四、基因工程的诞生
五、基因工程的特征
六、基因工程的主要操作内容
第二节基因工程的应用
一、基因工程在生命科学研究中的应用
二、基因工程在农业生产中的应用
三、基因工程在工业中的应用
四、基因工程在医药上的应用
五、基因工程在环境保护中的应用
第三节基因工程的安全性
一、基因工程的安全隐患
二、重组DNA研究的安全准则
三、本章学时数：2
第二章基因工程的酶学基础
一、教学要求：
了解：DNA连接酶和修饰酶在基因操作中的用途。
掌握：限II型制性核酸内切酶的切割原理和部分常用的限制性核酸内切酶的识别位点与切割末端；常用的DNA聚合酶的特性和用途以及探针的标记原理。
二、教学内容：
第一节限制性核酸内切酶
一、限制性核酸内切酶
二、限制性内切酶的类型
三、限制酶的命名
四、影响限制性内切酶活性的因素
五、限制性内切酶对DNA的消化
第二节DNA连接酶
一、DNA连接酶（ligase)的发现
二、DNA ligase的特点
三、连接反应的机理
四、连接反应的温度
五、影响连接反应的因素
第三节DNA聚合酶
一、基因工程中常用的DNA聚合酶
二、常用的DNA聚合酶的特点
三、DNA聚合酶在基因工程中的用途
第四节DNA修饰酶
一、末端脱氧核苷酸转移酶（terminal transferase）
二、T4多核苷酸激酶
三、碱性磷酸酶
第五节核酸外切酶
一、单链DNA外切酶
二、双链DNA外切酶
第六节单链核酸内切酶
一、S1核酸酶
二、Bal 31核酸酶
三、本章学时数：8
第三章基因工程载体
一、教学要求
了解：酵母人工染色体和细菌人工染色体的结构和工作原理。
掌握：载体的基本结构和质粒载体、噬菌体载体的特点、构建原理。
二、教学内容
第一节质粒（plasmid）载体
一、质粒
二、质粒的类型
三、质粒的复制类型
四、质粒载体的构建
五、经典的大肠杆菌质粒载体
六、质粒载体的不稳定性
第二节噬菌体载体
一、噬菌体的一般特性
二、噬菌体的生活周期
三、单链噬菌体载体
四、双链噬菌体载体— 载体
第三节人工染色体载体
一、酵母人工染色体（YAC)
二、细菌人工染色体（BAC)
第四节病毒载体
一、反转录病毒载体
二、DNA病毒载体
第五节基因打靶载体（Targeting vector）
一、基因打靶（gene targeting）
二、基因打靶载体的要求
三、基因打靶载体组成
四、基因打靶载体的整合方式
五、转染细胞的选择
三、本章学时数：10
第四章目的基因的获取
一、教学要求
掌握：化学合成DNA的原理和DNA文库的构建原理。
二、教学内容：
第一节基因文库法获得目的基因
一、基因文库的基本概念
二、基因组文库的构建程序
三、cDNA文库的构建程序
第二节化学法合成目的基因
一、目前常用的化学合成方法
二、化学合成DNA片断的组装
三、寡聚核苷酸化学合成的优点
第三节PCR扩增法获得目的基因
一、PCR法定向扩增目的基因的基本原理
二、PCR克隆目的基因的基本程序
三、本章学时数：4
第五章基因的体外重组、转化以及重组体的选择和鉴定
一、教学要求
了解：转译筛选法和真核生物的报道基因筛选法。
掌握：在体外DNA连接的方式和原理以及感受态菌的制备原理，常用的抗菌素抗性筛选、酶切筛选、酶联免疫吸附测定（ELISA）、免疫印迹（western blotting）
法的原理。
二、教学内容：
第一节DNA片段的体外连接
一、粘性末端的连接
二、齐平末端（blunt end）的连接
三、PCR产物的连接
四、DNA体外连接应注意的事项
五、载体分子和外源DNA插入片段的连接结果
第二节重组体导入细菌细胞
一、感受态大肠杆菌的制备
二、重组DNA导入大肠杆菌
第三节重组体的选择和鉴定
一、载体表型选择法
二、根据插入序列的表型特征选择
三、DNA电泳检测法
四、核酸杂交检测法
五、免疫化学检测法
六、转译筛选法
七、几种常用的真核生物重组基因选择方法
三、本章学时数：8
第六章克隆基因的表达
一、教学要求
了解：外源基因在真核生物中的表达方法。
掌握：原核生物表达系统的结构和工作原理。
二、教学内容
第一节外源基因在原核细胞中的表达
一、原核生物基因表达的特点
二、原核表达系统的注意事项
三、原核生物基因表达的调控
四、外源蛋白在大肠杆菌中的表达部位
五、几种类型的原核表达载体
六、影响外源基因表达效率的因素
七、提高表达水平常用的方法
八、外源蛋白质表达后的正确修饰
第二节外源基因在真核细胞中的表达
一、在酵母中表达
二、外源基因在植物中表达
三、在哺乳动物细胞中表达
三、本章学时数：8
第七章基因工程的常用技术
一、教学要求
掌握：分子杂交、PCR扩增和DNA序列测定的技术原理。
了解：酵母双杂交系统的原理。
二、教学内容：
第一节DNA的提取与纯化
一、质粒DNA的提取
二、基因组或其他DNA的提取
三、DNA的定量和纯度测定
四、DNA分子量的估计
第二节DNA的凝胶电泳
一、电泳的基本原理
二、琼脂糖凝胶电泳
三、聚丙烯酰胺凝胶电泳
四、凝胶染色
第三节核酸的分子杂交
一、核酸杂交的原理
二、核酸探针的种类
三、核酸分子杂交技术
第四节基因扩增技术---PCR
一、基因扩增（gene amplification)
二、PCR技术
三、PCR延伸技术
第五节DNA序列分析
一、双脱氧链终止法
二、Maxam-Gilbert化学修饰法
三、DNA杂交测序
四、DNA自动化测序
第六节酵母双杂交系统
一、酵母双杂交系统的作用
二、酵母双杂交系统的原理
三、构建双杂交体系的宿主菌
四、构建报告基因（reporter gene）
五、构建双杂交体系的穿梭质粒
六、酵母双杂交的实验过程
三、本章学时数：8
教研室：执笔人：李玉晖系主任审核签名：。