普洱茶中茶多酚和茶多糖的提取工艺研究
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Key words: Puer t ea; t ea poly pheno ls; t ea poly sacchar ides ( 责任编辑 游 俊)
( 上接第 272 页)
Studies of some initiators in graft polymerization of acrylic acid onto konjac glucomannan
2 78
湖 北大学学报( 自然科学版)
第 29 卷
表 L9 ( 34 ) [ 7] 进行浸提, 合并浸提液, 减压浓缩至浸膏, 真空冷冻干燥至粉末. 检测浸提物产率及其茶多
酚和茶多糖的含量, 结果见表 2.
表 2 正交实验设计及结果
因素
实验 1 实验 2
浸提温度 A 1 1
浸提时间 B 1 2
溶剂用量 C 1 2
50 65 80
B 浸提时间/ h
1. 00 1. 25 1. 50
C 溶剂用量( 固液比)
16 18 1 10
D 浸提次数
1 2 3
收稿日期: 2006 12 26 基金项目: 湖北省教育厅技术创新项目( 080 094124) ; 武汉市科技局晨光计划( 080 093406) 作者简介: 王恒松( 1981 ) , 男, 硕士生; 陈勇, 通讯作者, 027- 88663590
1 材料与仪器
1. 1 原料与试剂 普洱茶购于武汉健民药业集团股份有限公司; 硫酸亚铁、酒石酸钾钠、磷酸氢二钠、 磷酸二氢钾、葡萄糖、浓硫酸和苯酚等均为分析纯, 水为去离子水. 1. 2 主要设备与仪器 日本岛津公司 U V 1601 型紫外 可见分光光度计, 上海亚荣生化仪器厂 RE 52AA 型旋转蒸发器, 北京博医康实验仪器有限公司 F D- 1A 型真空冷冻干燥机组, 索氏提取器, 恒温 水浴箱, 减压过滤装置.
参考文献:
[ 1] 吴礼辉. 普洱茶概述[ J] . 茶叶科学技术, 2005, ( 3) : 44 45.
第3期
王恒松等: 普洱茶中茶多酚和茶多糖的提取工艺研究
27 9
[ 2] 赵龙飞, 周红杰, 安文杰. 云南普洱茶保健功效的研究[ J] . 食品研究与开发, 2005, 26( 2) : 114 117. [ 3] 蒋勤. 茶多酚的药理作用[ J] . 中国药师, 2006, 9( 1) : 63 64. [ 4] 陈建国. 茶多糖的提取工艺及其保健功能的研究进展[ J] . 浙江省医学科学院学报, 2000, 11( 1) : 34 36. [ 5] 刘亚林, 孙志良, 张冬英, 等. 醇沉法提取普洱茶茶多糖的研究[ J] . 福建茶叶, 2005( 4) : 6 7. [ 6] 许旋, 冼文彪, 罗一帆, 等. 正交试验法优化绿茶中茶多酚的提取工艺 研究[ J] . 特产研究, 2005, 27( 2) : 30 33. [ 7] 邓国栋, 郁建平. 正交实验优选茶多糖提取工艺[ J] . 食品 研究与开发, 2004, 25( 4) : 84 85. [ 8] 陈旭红. 安全快速对茶叶中茶多酚的提取和含量的测定[ J] . 食品研究与开发, 2004, 25( 4) : 135 137. [ 9] 陈建国, 胡欣, 梅松. 茶叶中茶多糖的提取和测定方法[ J] . 中国卫生检验杂志, 2004, 14( 4) : 432 433. [ 10] 王伟 华, 韩占江, 陈晓静. 普洱茶茶多糖的提取及其含量测定[ J] . 安徽农业科学, 2006, 34( 6) : 1 115 1 116. [ 11] 陈荣 义, 张新申, 申金山, 等. 茶叶中有效成分综合提取的研究[ J] . 食品科学, 2005, 26( 4) : 174 177.
关键词: 普洱茶; 茶多酚; 茶多糖
中图分类号: Q 503; T Q 028 文献标志码: A
普洱茶是以云南省一定区域内的云南大叶种晒青毛茶为原料, 经过后发酵加工成的散茶和紧压茶, 其外形色泽褐红内质汤色红浓明亮, 香气独特陈香, 滋味醇厚回甘, 叶底褐红[ 1] . 普洱茶具有降血糖、降 血脂、杀死癌细胞、抗突变、防癌等功能[ 2] . 其中具有药理作用的主要成分是茶多酚、茶多糖等. 茶多酚有 降血糖、延缓衰老、抑制动脉粥样硬化、防癌抗癌等作用[ 3] ; 茶多糖有降血糖、降血脂、降血压、增强免疫、 减慢心率、增加冠脉流量等功效[ 4] . 关于普洱茶中的茶多酚和茶多糖的单独提取分离已有相关研究[ 5] , 但对普洱茶中这两种主要保健成分综合提取的研究还少见报道. 本文中以普洱茶多酚、多糖含量以及提 取物得率为指标, 通过正交实验设计, 优选出了普洱茶中茶多酚和茶多糖综合提取的最优工艺条件, 且 该提取物作用于高脂饮食小鼠效果显著.
实验 8
3
2
1
3
85. 01
12. 654
实验 9
3
3
2
1
87. 34
15. 658
总含量/ %
k1
50. 200
77. 083
76. 277
76. 117
k2
84. 950
71. 847
71. 747
75. 353
k3
88. 407
74. 627
75. 583
72. 087
R 产率/ %
38. 207
5. 236
4. 480
4. 030
k1
4. 019
8. 403
8. 357
10. 059
k2
10. 251
9. 602
9. 507
9. 341
k3
14. 096
10. 361
10. 502
8. 965
R
10. 077
1. 958
2. 145
1. 094
2. 2 茶多酚的含量测定[ 8] 准确称取所制得的干燥粉末 0. 1 g, 定容至 100 mL 水溶液备用. 准确吸取 1. 00 mL 上述备用溶液置于 25 mL 的容量瓶中, 加水 4 m L, 酒石酸亚铁溶液 5 mL , 然后加 pH 7. 5 的磷 酸盐缓冲液稀释至刻度. 用蒸馏水做空白对照, 在波长 540 nm 的条件下, 用分光光度计测出其吸光度, 计算出茶多酚的含量. 2. 3 茶多糖的含量测定[ 9, 10] 取 1 m g/ m L 的标准葡萄糖溶液 4 mL 于 100 m L 容量瓶中, 定容后摇匀 置 4 冰箱备用. 精密吸取标准溶液 0, 0. 4, 0. 6, 0. 8, 1. 0, 1. 2, 1. 4 mL 置 20 m L 具塞试管中, 各加蒸馏 水至 2. 0 mL , 依次加入 6% 苯酚溶液 1. 0 mL 、浓硫酸 5. 0 mL , 静置 10 min 后摇匀, 室温放置 20 min 后 在 490 nm 波长下测吸光度, 制作标准曲线. 准确吸取 1. 00 mL 2. 3 中的备用溶液, 按照标准曲线制备的 操作方法, 测定并计算出茶多糖的含量.
Studies on the extract technology of tea polyphenols and tea polysacFra Baidu bibliotekharide from Puer tea
WANG H eng song, LV Xin y ong, YU Shi t ao , CH EN Yong
( H ubei Pro vince Key L ab o f Bio T echno log y o f T r adit ional Chinese M edicine, H ubei U niversity, Wuhan 430062, China)
Abstract: T he ext raction technique of t ea polyphenols and t ea po lysaccharides w as inv est ig ated in the hig h gr at e t ea named as P uer. In t he t echnics, H 2 O w as used as t he solvent , and f our f act ors such as ext ractio n t emperat ur e, rat io o f mat erials and liquid, ext raction t ime and number of ex tr act io n w ere select ed at t hree lev els t o inv est ig ate. T he result s show ed t hat the o pt imum technique w as that ex t ract ion t emperat ur e w as 80 , ex t ract ion t ime w as 1h, t he rat io of material and liquid w as one t o ten and the num ber of ext raction w as one t ime. And the rat io o f t he ex t ract ion w as 20. 65% , t he rat e of picking t ea poly pheno ls can be up t o 30. 47% , and tea poly saccharide up t o 57. 26% .
2 实验部分
2. 1 正交实验方案 根据不同溶剂浸提试验和单因素初筛试验结果, 分别确定浸提温度、浸提时间、溶 剂用量及浸提次数作为试验因素, 每个因素备选 3 个水平, 见表 1[ 6] . 精确称取普洱茶粉末 10 g, 按正交
表 1 正交实验因素 水 平表( 实验条件)
水平
1 2 3
A 浸提温度/
第 29 卷第 3 期 2007 年 9 月
湖北大学学 报( 自然科学版) Jo ur nal of H ubei U niversit y( Natura l Science)
文章编号: 1000 2375( 2007) 03 0277 03
V ol. 29 N o. 3 Sep. , 2007
普洱茶中茶多酚和茶多糖的提取工艺研究
浸提次数 D 1 2
实验结果 总含量/ % 产率/ %
56. 07
2. 472
45. 59
4. 104
实验 3
1
3
3
3
48. 94
5. 482
实验 4
2
1
2
3
82. 31
8. 760
实验 5
2
2
3
1
84. 94
12. 048
实验 6
2
3
1
2
87. 60
9. 944
实验 7
3
1
3
2
92. 87
13. 976
王恒松, 吕新勇, 喻世涛, 陈 勇
( 湖北大学 中药生物技术湖北省重点实验室, 湖北 武汉 430062)
摘 要: 以普洱茶为材料、水为提取溶剂, 通过正交设 计考察了 浸提温度、浸 提时间、溶剂 用量、浸提次 数 4 个因素对其所含茶多酚和 茶多糖提取得率的影响, 优化茶多酚和茶多 糖综合提取 工艺. 结果表明, 最佳提 取 工艺条件为浸提温度 80 , 浸提时间 1 h, 溶 剂用量 ( 固 液比) 1 10, 浸 提次数 1 次. 在优化 的提取 工艺条 件 下, 提取物干物质得率为 20. 65% , 其中茶多酚含 量为 30. 47% , 茶多 糖含量为 57. 26% , 且该提取物作用于 高 脂饮食小鼠降脂效果显著.
3 结果与讨论
由表 2 可知, 影响提取物中茶多酚和茶多糖的总含量的因素排序为: A> B> C> D, 其中 A 的影响 最大, D 的影响最小; 影响提取物产率的因素排序为: A> C> B> D, A 的影响同样最大, D 的影响也同 样最小. 综合各因素和直观比较, 且考虑到实际产率及生产周期等因素, 得出普洱茶中茶多酚和茶多糖 的综合提取的最佳工艺为: A 3B1C3D1, 即: 以普洱茶 10 倍的水量, 80 下浸提 1 h, 提取 1 次. 在此最佳 工艺条件下所得的提取物中, 茶多酚和茶多糖的总含量在 87% 以上, 且茶多糖含量为 57. 26% , 高于已 有的相关报道[ 11] , 且该提取物作用于高脂饮食小鼠其血清中甘油三酯含量( T G 值) 显著低于高脂对照 组( 另文报道) . 普洱茶显著的保健功效来源于其茶多酚和茶多糖的综合作用, 本研究优选了普洱茶的综 合提取工艺, 充分利用了原材料, 节约了成本, 为普洱茶提取物的药理药效研究及其保健食品应用打下 了基础.
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Studies of some initiators in graft polymerization of acrylic acid onto konjac glucomannan
2 78
湖 北大学学报( 自然科学版)
第 29 卷
表 L9 ( 34 ) [ 7] 进行浸提, 合并浸提液, 减压浓缩至浸膏, 真空冷冻干燥至粉末. 检测浸提物产率及其茶多
酚和茶多糖的含量, 结果见表 2.
表 2 正交实验设计及结果
因素
实验 1 实验 2
浸提温度 A 1 1
浸提时间 B 1 2
溶剂用量 C 1 2
50 65 80
B 浸提时间/ h
1. 00 1. 25 1. 50
C 溶剂用量( 固液比)
16 18 1 10
D 浸提次数
1 2 3
收稿日期: 2006 12 26 基金项目: 湖北省教育厅技术创新项目( 080 094124) ; 武汉市科技局晨光计划( 080 093406) 作者简介: 王恒松( 1981 ) , 男, 硕士生; 陈勇, 通讯作者, 027- 88663590
1 材料与仪器
1. 1 原料与试剂 普洱茶购于武汉健民药业集团股份有限公司; 硫酸亚铁、酒石酸钾钠、磷酸氢二钠、 磷酸二氢钾、葡萄糖、浓硫酸和苯酚等均为分析纯, 水为去离子水. 1. 2 主要设备与仪器 日本岛津公司 U V 1601 型紫外 可见分光光度计, 上海亚荣生化仪器厂 RE 52AA 型旋转蒸发器, 北京博医康实验仪器有限公司 F D- 1A 型真空冷冻干燥机组, 索氏提取器, 恒温 水浴箱, 减压过滤装置.
参考文献:
[ 1] 吴礼辉. 普洱茶概述[ J] . 茶叶科学技术, 2005, ( 3) : 44 45.
第3期
王恒松等: 普洱茶中茶多酚和茶多糖的提取工艺研究
27 9
[ 2] 赵龙飞, 周红杰, 安文杰. 云南普洱茶保健功效的研究[ J] . 食品研究与开发, 2005, 26( 2) : 114 117. [ 3] 蒋勤. 茶多酚的药理作用[ J] . 中国药师, 2006, 9( 1) : 63 64. [ 4] 陈建国. 茶多糖的提取工艺及其保健功能的研究进展[ J] . 浙江省医学科学院学报, 2000, 11( 1) : 34 36. [ 5] 刘亚林, 孙志良, 张冬英, 等. 醇沉法提取普洱茶茶多糖的研究[ J] . 福建茶叶, 2005( 4) : 6 7. [ 6] 许旋, 冼文彪, 罗一帆, 等. 正交试验法优化绿茶中茶多酚的提取工艺 研究[ J] . 特产研究, 2005, 27( 2) : 30 33. [ 7] 邓国栋, 郁建平. 正交实验优选茶多糖提取工艺[ J] . 食品 研究与开发, 2004, 25( 4) : 84 85. [ 8] 陈旭红. 安全快速对茶叶中茶多酚的提取和含量的测定[ J] . 食品研究与开发, 2004, 25( 4) : 135 137. [ 9] 陈建国, 胡欣, 梅松. 茶叶中茶多糖的提取和测定方法[ J] . 中国卫生检验杂志, 2004, 14( 4) : 432 433. [ 10] 王伟 华, 韩占江, 陈晓静. 普洱茶茶多糖的提取及其含量测定[ J] . 安徽农业科学, 2006, 34( 6) : 1 115 1 116. [ 11] 陈荣 义, 张新申, 申金山, 等. 茶叶中有效成分综合提取的研究[ J] . 食品科学, 2005, 26( 4) : 174 177.
关键词: 普洱茶; 茶多酚; 茶多糖
中图分类号: Q 503; T Q 028 文献标志码: A
普洱茶是以云南省一定区域内的云南大叶种晒青毛茶为原料, 经过后发酵加工成的散茶和紧压茶, 其外形色泽褐红内质汤色红浓明亮, 香气独特陈香, 滋味醇厚回甘, 叶底褐红[ 1] . 普洱茶具有降血糖、降 血脂、杀死癌细胞、抗突变、防癌等功能[ 2] . 其中具有药理作用的主要成分是茶多酚、茶多糖等. 茶多酚有 降血糖、延缓衰老、抑制动脉粥样硬化、防癌抗癌等作用[ 3] ; 茶多糖有降血糖、降血脂、降血压、增强免疫、 减慢心率、增加冠脉流量等功效[ 4] . 关于普洱茶中的茶多酚和茶多糖的单独提取分离已有相关研究[ 5] , 但对普洱茶中这两种主要保健成分综合提取的研究还少见报道. 本文中以普洱茶多酚、多糖含量以及提 取物得率为指标, 通过正交实验设计, 优选出了普洱茶中茶多酚和茶多糖综合提取的最优工艺条件, 且 该提取物作用于高脂饮食小鼠效果显著.
实验 8
3
2
1
3
85. 01
12. 654
实验 9
3
3
2
1
87. 34
15. 658
总含量/ %
k1
50. 200
77. 083
76. 277
76. 117
k2
84. 950
71. 847
71. 747
75. 353
k3
88. 407
74. 627
75. 583
72. 087
R 产率/ %
38. 207
5. 236
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10. 059
k2
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9. 602
9. 507
9. 341
k3
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10. 361
10. 502
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R
10. 077
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2. 145
1. 094
2. 2 茶多酚的含量测定[ 8] 准确称取所制得的干燥粉末 0. 1 g, 定容至 100 mL 水溶液备用. 准确吸取 1. 00 mL 上述备用溶液置于 25 mL 的容量瓶中, 加水 4 m L, 酒石酸亚铁溶液 5 mL , 然后加 pH 7. 5 的磷 酸盐缓冲液稀释至刻度. 用蒸馏水做空白对照, 在波长 540 nm 的条件下, 用分光光度计测出其吸光度, 计算出茶多酚的含量. 2. 3 茶多糖的含量测定[ 9, 10] 取 1 m g/ m L 的标准葡萄糖溶液 4 mL 于 100 m L 容量瓶中, 定容后摇匀 置 4 冰箱备用. 精密吸取标准溶液 0, 0. 4, 0. 6, 0. 8, 1. 0, 1. 2, 1. 4 mL 置 20 m L 具塞试管中, 各加蒸馏 水至 2. 0 mL , 依次加入 6% 苯酚溶液 1. 0 mL 、浓硫酸 5. 0 mL , 静置 10 min 后摇匀, 室温放置 20 min 后 在 490 nm 波长下测吸光度, 制作标准曲线. 准确吸取 1. 00 mL 2. 3 中的备用溶液, 按照标准曲线制备的 操作方法, 测定并计算出茶多糖的含量.
Studies on the extract technology of tea polyphenols and tea polysacFra Baidu bibliotekharide from Puer tea
WANG H eng song, LV Xin y ong, YU Shi t ao , CH EN Yong
( H ubei Pro vince Key L ab o f Bio T echno log y o f T r adit ional Chinese M edicine, H ubei U niversity, Wuhan 430062, China)
Abstract: T he ext raction technique of t ea polyphenols and t ea po lysaccharides w as inv est ig ated in the hig h gr at e t ea named as P uer. In t he t echnics, H 2 O w as used as t he solvent , and f our f act ors such as ext ractio n t emperat ur e, rat io o f mat erials and liquid, ext raction t ime and number of ex tr act io n w ere select ed at t hree lev els t o inv est ig ate. T he result s show ed t hat the o pt imum technique w as that ex t ract ion t emperat ur e w as 80 , ex t ract ion t ime w as 1h, t he rat io of material and liquid w as one t o ten and the num ber of ext raction w as one t ime. And the rat io o f t he ex t ract ion w as 20. 65% , t he rat e of picking t ea poly pheno ls can be up t o 30. 47% , and tea poly saccharide up t o 57. 26% .
2 实验部分
2. 1 正交实验方案 根据不同溶剂浸提试验和单因素初筛试验结果, 分别确定浸提温度、浸提时间、溶 剂用量及浸提次数作为试验因素, 每个因素备选 3 个水平, 见表 1[ 6] . 精确称取普洱茶粉末 10 g, 按正交
表 1 正交实验因素 水 平表( 实验条件)
水平
1 2 3
A 浸提温度/
第 29 卷第 3 期 2007 年 9 月
湖北大学学 报( 自然科学版) Jo ur nal of H ubei U niversit y( Natura l Science)
文章编号: 1000 2375( 2007) 03 0277 03
V ol. 29 N o. 3 Sep. , 2007
普洱茶中茶多酚和茶多糖的提取工艺研究
浸提次数 D 1 2
实验结果 总含量/ % 产率/ %
56. 07
2. 472
45. 59
4. 104
实验 3
1
3
3
3
48. 94
5. 482
实验 4
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2
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实验 5
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2
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实验 6
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1
2
87. 60
9. 944
实验 7
3
1
3
2
92. 87
13. 976
王恒松, 吕新勇, 喻世涛, 陈 勇
( 湖北大学 中药生物技术湖北省重点实验室, 湖北 武汉 430062)
摘 要: 以普洱茶为材料、水为提取溶剂, 通过正交设 计考察了 浸提温度、浸 提时间、溶剂 用量、浸提次 数 4 个因素对其所含茶多酚和 茶多糖提取得率的影响, 优化茶多酚和茶多 糖综合提取 工艺. 结果表明, 最佳提 取 工艺条件为浸提温度 80 , 浸提时间 1 h, 溶 剂用量 ( 固 液比) 1 10, 浸 提次数 1 次. 在优化 的提取 工艺条 件 下, 提取物干物质得率为 20. 65% , 其中茶多酚含 量为 30. 47% , 茶多 糖含量为 57. 26% , 且该提取物作用于 高 脂饮食小鼠降脂效果显著.
3 结果与讨论
由表 2 可知, 影响提取物中茶多酚和茶多糖的总含量的因素排序为: A> B> C> D, 其中 A 的影响 最大, D 的影响最小; 影响提取物产率的因素排序为: A> C> B> D, A 的影响同样最大, D 的影响也同 样最小. 综合各因素和直观比较, 且考虑到实际产率及生产周期等因素, 得出普洱茶中茶多酚和茶多糖 的综合提取的最佳工艺为: A 3B1C3D1, 即: 以普洱茶 10 倍的水量, 80 下浸提 1 h, 提取 1 次. 在此最佳 工艺条件下所得的提取物中, 茶多酚和茶多糖的总含量在 87% 以上, 且茶多糖含量为 57. 26% , 高于已 有的相关报道[ 11] , 且该提取物作用于高脂饮食小鼠其血清中甘油三酯含量( T G 值) 显著低于高脂对照 组( 另文报道) . 普洱茶显著的保健功效来源于其茶多酚和茶多糖的综合作用, 本研究优选了普洱茶的综 合提取工艺, 充分利用了原材料, 节约了成本, 为普洱茶提取物的药理药效研究及其保健食品应用打下 了基础.