动物生物化学第三章蛋白质 王镜岩 邹思湘
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三字母缩写 Gly Ala Val Leu Ile Pro Phe Tyr Trp Ser Thr Cys Met Asn Gln Asp Glu Lys Arg His
单字母符号 G A V L I P F Y W S T C M N Q D E K R H
2.2.3 氨基酸的分类
在中性pH条件下 按其R侧链极性和所带电荷的不同,分为四大类,
H-
H 或 His
155.141
N=CH-NH-CH=C-CH2|____________|
I 或 Ile
131.160
CH3-CH2-CH(CH3)-
亮氨酸
Leucine
L 或 Leu
131.160
(CH3)2-CH-CH2-
赖氨酸
Lysine
K 或 Lys
146.17
H2N-(CH2)4-
蛋氨酸
|___________|
酪氨酸 Tyrosine
Y 或 Tyr 181.176
4-OH-Phenyl-CH2-
缬氨酸
Valine
V 或 Val 117.133
CH3-CH(CH2)-
亚氨基酸 羟基类 羟基类 芳香族类 芳香族类 脂肪族类
中文名称 甘氨酸 丙氨酸 缬氨酸 亮氨酸
异亮氨酸 脯氨酸
苯丙氨酸 酪氨酸 色氨酸 丝氨酸 苏氨酸
(1)非共价键 氢键 离子键 范德瓦尔力 疏水作用
(2) S-S键
3.4.1 蛋白质结构层次
蛋白质结构极其复杂,但具有明显的结构层次
一级结构(多肽链上的氨基酸排列顺序) 二级结构(多肽链主链骨架的局部空间结构) 超二级结构(二级结构单位的集合体) 结构域(多肽链上可以明显区分的球状区域) 三级结构(多肽链上所有原子和基团的空间排布) 四级结构(由球状亚基或分子缔合而成的集合体)
不带电荷极性氨基酸 :Gly, Ser, Thr, Cys,Thr,Asn,Gln 带负电荷极性氨基酸 : Asp, Glu 带正电荷极性氨基酸 : His, Arg, Lys 非极性氨基酸:Ala, Val, Leu, Ile, Pro, Phe, Trp, Met
含非极性侧链基团
含极性侧链基团
氨基酸的等电点
对某一种氨基酸而言,当溶液在某一个特定的pH,氨基酸以 两性离子的形式存在,并且其所带的正电荷数与负电荷数相等, 即净电荷为零。在直流电场中,它既不向正极,也不向负极移动。 此时溶液的pH称为这种氨基酸的等电点(pI)。
例如,甘氨酸的羧基的pK1为2.34,氨基的pK2为9.60,其pI为5.97。
二面角(dihedral angle):肽 平面的连接处为α碳原子。它与 相邻的两个参与肽键形成的C和 N原子之间的单键可以在一定范 围内转动,Cα-N之间称φ角, 在Cα-C之间称ψ角,这就是α碳原子上的一对二面角。这对 二面角决定了相邻肽平面的相 对位置。
相邻二个肽平面上的二面角
3.3 蛋白质的一级结构
指蛋白质的肽链中没有确 定规律性的那部分肽段构 象。
两种主要类型的β-转角
3.4.3 超二级结构 超二级结构(super secondary structure):在蛋白质中经常存在由若 干相邻的二级结构单元按一定规律组合在一起,形成有规则的二级结 构集合体,超二级结构又称基序或模体(motif)
Gly, G Ala, A Val, V Leu, L Met, M Ile, I
Ser, S Thr, T Cys, C Pro, P Asn, N Gln, Q
含芳香基团
含碱性侧链基团(带正电荷)
Phe, F; Tyr, Y; Trp, W
Lys, K; Arg, R; His, H
含酸性侧链基团(带负电荷)
3.4 蛋白质的高级结构
指一条或数条多肽链上所有原子和基团在三维空间上的排布,即 构象(conformation)或空间结构。
构象由单键旋转产生的各种立体结构,而构型(configuration ) 是通过改变共价键形成的结构。
蛋白质的高级结构由明显的结构层次。
一级结构是空间结构的基础。
维持蛋白质空间结构中重要的化学键
蛋白质的主要结构层次
3.4.2 二级结构
二级结构(secondary structure):指多肽链主链在一级结构的基础上 进一步的盘旋或折叠,形成的周期性构象,维系二级结构的力是氢键。
二级结构主要形式有: α-螺旋、β-折叠、β-转角、无规卷曲
α-螺旋( α-helix)
是在角蛋白中最常见的 构象,为右手螺旋。每 圈螺旋3.6个氨基酸残 基。侧链基团R在螺旋 外侧。主链内部形成H键,不涉及侧链R。
蛋白质中N的平均含量约16%,因此食物与饲料中蛋白质的含 量可以通过凯氏定N(Kjeldahl法)进行大致估计。
2.2 蛋白质的基本结构单位——氨基酸
2.2.1 氨基酸的基本结构和构型
存在于自然界的氨基酸有300种。动物机体的蛋白质经强酸水解之后 可以得到20种氨基酸,并且均为L-氨基酸(除了甘氨酸),含不对 称的α-碳原子。它们之间的差别在于有不同的侧链基团 R。
第3章 蛋白质
Prot源自文库ins
本章主要内容
蛋白质在生命活动中的重要作用 蛋白质的组成单位——氨基酸 蛋白质的化学结构和高级结构 多肽、蛋白质结构与功能的关系 蛋白质的理化性质和分离与鉴定
1.蛋白质在生命活动中的重要作用
1.1 蛋白质在机体内的生物学功能
生物催化作用: 酶 运输作用:如血红蛋白、转铁蛋白 调节作用:如胰岛素、生长激素 运动作用:如肌动蛋白和肌球蛋白 防御功能:如免疫球蛋白、凝血因子 营养功能:如卵清蛋白、酪蛋白 结构蛋白:如胶原蛋白、角蛋白 能量转换蛋白:如细胞色素 基因调节蛋白:如阻遏蛋白
A 或 Ala
89.079
CH3-
精氨酸
Arginine
R 或 Arg
174.188 HN=C(NH2)-NH-(CH2)3-
天冬酰胺
Asparagine
N 或 Asn
132.104
H2N-CO-CH2-
天冬氨酸
Aspartic acid
D 或 Asp
133.089
HOOC-CH2-
半胱氨酸
Cysteine
5
10
15
S
21 S
B
S
S
Phe Val Asn Gln His Leu Cys Gly Ser His Leu Val Glu Ala Leu Tyr Leu Val Cys Gly Glu Arg Gly Phe Phe Tyr Thr Pro Lys Ala
5
10
15
20
25
30
牛胰岛素的一级结构: 51个氨基酸,A(21肽)、B(30肽)两条肽 链,A链内一对S-S,A和B链间2对S-S
Methionine
M 或 Met
149.199
CH3-S-(CH2)2-
苯丙氨酸 Phenylalanine
F 或 Phe
165.177
Phenyl-CH2-
脂肪族类 碱性氨基酸类
酰胺类 酸性氨基酸类
含硫类 酰胺类 酸性氨基酸类 脂肪族类 碱性氨基酸类 脂肪族类 脂肪族类 碱性氨基酸类 含硫类 芳香族类
C 或 Cys
121.145
HS-CH2-
谷氨酰胺 谷氨酸 甘氨酸
Glutamine
Glutamic acid
Glycine
组氨酸
Histidine
异亮氨酸
Isoleucine
Q 或 Gln
146.131
H2N-CO-(CH2)2-
E 或 Glu
147.116
HOOC-(CH2)2-
G 或 Gly
75.052
四种类型的超二级结构
3.4.4 结构域
结构域(domain):在较大的蛋白质分子里,多肽链的空间折叠常常 形成两个或多个近似球状的三维实体,它们之间连接松散。
丙酮酸激酶 的一个结构 域
免疫球蛋白 的一个结构 域
由β-折叠、 α-螺旋形成的结构域
3.4.5 三级结构
三级结构(tertiary structure):指一条多肽链在二级结构(超二 级结构及结构域)的基础上,进一步盘绕、折叠而成的具有特定肽 链走向的紧密球状结构, 或者说三级结构是指多肽链中所有原子和 基团在三维空间的排布。
(N-端)
(C-端)
在多肽链中,氨基酸残基按一定的顺序排列,这种排列顺序称为 氨基酸序列,多肽链上不完整的氨基酸,称为氨基酸残基(amino acid residue)
上图为: 丝氨酰-甘氨酰-酪氨酰-丙氨酰-异亮氨酸
3.2 肽单位平面与二面角
肽平面(peptide plane):肽链主链的肽键C-N具有双键的性质, 因而不能自由的旋转,使连接在肽键上的六个原子共处于一个平面 上,此平面称为肽单位平面,又称酰胺平面。通常是反式的。
脯氨酸 Proline
P 或 Pro 115.117
-N-(CH2)3-CH|_________|
丝氨酸
Serine
S 或 Ser 105.078
HO-CH2-
苏氨酸 Threonine
T 或 Thr 119.105
CH3-CH(OH)-
色氨酸 Tryptophan
W 或 Trp
Phenyl-NH-CH=C-CH2204.213
三级结构的稳定主要靠非 共价相互作用 氨基酸亲水的基团倾向于 分布在分子的表面,疏水 的基团在分子的内部。
半胱氨酸 蛋氨酸
天冬酰胺 谷氨酰胺 天冬氨酸
谷氨酸 赖氨酸 精氨酸 组氨酸
英文名称 Glycine Alanine Valine Leucine Isoleucine Proline Phenylalanine Tyrosine Tryptophan Serine Threonine Cystine Methionine Asparagine Glutarnine Asparticacid Glutamicacid Lysine Arginine Histidine
分外,还要有其他的成分的存在,才能保证其正常生物活性的蛋白质。 分子中包含蛋白质和非蛋白质两部分。
2.蛋白质的化学组成
2.1 蛋白质的元素组成
所有蛋白质均含有 : C 50%-55% H 6%-8% O 20%-23% N 15%-17%
某些蛋白质含有: S 0.3%-2.5% 以及P
少数蛋白质含有:Fe, Cu,Zn,Mo和I等元素
H R Cα COOH
NH2
氨基酸的结构通式
镜面
镜面
OO C
H3N C H CH2OH
L-丝氨酸
OO C
H C NH3 CH2OH
OH C
HO C H CH2OH
D-丝氨酸
L-甘油醛
氨基酸与甘油醛的构型
OH C
H C OH CH2OH
D-甘油醛
2.2.2 组成蛋白质的20种氨基酸
丙氨酸
Alanine
1.2 蛋白质的分类
按形状可将蛋白质分为: 纤维状蛋白质:多为结构蛋白。 球状蛋白质: 具有广泛的生物学功能。如酶、蛋白类激素等。
按结构和功能可将蛋白质分为: 简单蛋白(simple protein):仅有蛋白质组成的、结构简单的蛋白质。 结合蛋白(conjugated protein):在蛋白质分子中除了含有氨基酸成
典型的α-螺旋是3.613螺 旋,一周螺旋3.6个氨 基酸,跨越13个原子。
β-折叠( β-sheet)
存在于丝心蛋白、角蛋白。呈平行的和反平行的比较伸展的构象。主链之间 形成H键,侧链基团R交替地位于片层的上、下。
平
行
结
反
构
平
行
结
构
β-转角( β-turn)
肽链1800的回折
无规卷曲(random coil)
Asp, D; Glu, E
2.2.4 氨基酸的主要理化性质
光吸收特性
各种氨基酸在可见区都没有 光吸收。
在紫外光区芳香族氨基酸在 280nm处有最大吸收峰(色氨 酸、酪氨酸、苯丙氨酸的最大 吸收波长分别为279、278、 259nm )
氨基酸的两性解离
氨基酸分子在水溶液中呈两性离子状态,在其 等电点时,氨基酸所带的正、负电荷相等,净 电荷为零。
3.蛋白质的化学结构和高级结构
3.1 肽键(peptide bond)和肽(peptide ) 肽键:指蛋白质分子中,由一个氨基酸的α-COOH和另一个氨基酸的αNH2之间脱水缩合而成的酰胺键,它是蛋白质结构中的主要共价键。
肽:由肽键形成的化合物(二肽、三肽、寡肽、多肽)
多肽(polypeptide)和多肽链(polypeptide chain)
一级结构(primary structure):即蛋白质的化学结构,是指多肽链 上各种氨基酸残基的种类和排列顺序,也包括二硫键的数目。
S
S
A
Gly Ile Val Glu Gln Cys Cys Ala Ser Val Cys Ser Leu Tyr Gln Leu Glu Asn Tyr Cys Asn