基因组学3
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大肠杆菌基因组物理图
原理：一个方向不断变换的电场取代简单的电场，
使电泳中受阻的DNA分子在电场改变时扭转迁移
方向，达到分离的目的
质粒载体
-克隆片段小：3 kb左右
-独立复制能力强：5-200 拷贝
T3,
12
细菌人工染色体（Bacterial artificial chromosomes, BAC）
1992年Shizuya 等以大肠杆菌F因子为基础构建了BAC载体pBAC108L。在构建基因组文库时，BAC载体容量不如YAC载体，一般小于
pBAC
生质粒
oriS
复制
ParA
定复制
CosN
切割位点，
白作用位点，均可将环状
BAC
CM
TAC载体
Transformation-competent Artificial Chromosome
染色体步移（chromosome walking）
限制性带型（restriction patterns）指纹指纹作图
克隆指纹是指DNA样品所具有的特定DNA片段组
成，一个克隆的指纹表示了该克隆所具有的特定
限制性片段指纹作图原理限制性片段指纹电泳图
37
指纹作图
探针标记：兼顾敏感性与分辨力
染色体可被某些染料染色，各染色体可由大小及染色体条带区分开来，称为染色体组型分析。
STS目录作图（STS content mapping）
辐射杂种连锁分析
辐射杂种的作图单位为厘镭（centiRay, cR
DNA分子暴露在N拉德X射线剂量下两个分子标记
之间发生1％断裂的频率
Somatic cell hybrid mapping
• It is easy to identify the human chromosomes in
any hybrid cell line
• Assign genes or markers to chromosomes
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