为什么不能用甲基绿来鉴定DNA

为什么"在'DNA粗提取与鉴定’实验中,可用甲基绿代替二苯胺鉴定"这句话不正确？

本科修读生物专业的同学一定不会忘记“DNA粗提取与鉴定”、“利用甲基绿-吡罗红观察DNA和RNA在细胞中的分布”两个实验。这两个实验的原理都很简单：DNA与二苯胺试剂仪器加热可以产生蓝色化合物；甲基绿可以使DNA 呈绿色。所以在粗看标题中的那句陈述时，大多数学生一定会觉得这是正确的，因为这两种试剂都能使DNA产生颜色反应。

而标准答案却给这句话判了死刑，这令众多学生不解（其实最初我也有些不解）。想要弄清楚这句话到底错在哪里，还是必须先复习一下“DNA粗提取与鉴定”、“观察DNA和RNA在细胞中的分布”两个实验的原理以及过程。

首先来说说看“DNA的粗提取与鉴定”。根据DNA在0.14 mol/ L的NaCl溶液中溶解度最低的原理，可以析出NaCl溶液中的DNA，再利用DNA不溶于酒精溶液而细胞中某些物质可以溶于酒精的原理，进一步提取出杂志较少的DNA。最后将缠绕在玻璃棒上的白色丝状物（DNA易吸附于玻璃容器上)加入含0.015 mol/ L的NaCl溶液中，加入二苯胺试剂，沸水浴后可观察到溶液呈蓝色。

再来比较“观察DNA和RNA在细胞中的分布”。主要是运用了甲基绿与吡罗红分别对DNA与RNA的亲和力不同的原理，来观察DNA（与甲基绿结合呈绿色）与RNA（与吡罗红结合呈红色）在细胞中的分布。

到这里为止依然看不出为什么不能用甲基绿替代二苯胺吗？提示一下，关键就在于这两个实验中使用试剂测定的方法不同。有些眉目了吗？“观察DNA分布”里，我们是将待观察物质置于载玻片上，使用甲基绿与吡罗红染色后，吸去多余染色剂再观察；而在“DNA鉴定”里，我们能够将二苯胺直接加入含DNA 的溶液中加热观察。为什么不能使用甲基绿代替二苯胺，答案应该呼之欲出了。

不同于二苯胺溶液的无色，甲基绿多为淡绿色粉末，溶于水后呈蓝绿色，如果我们也将它直接加入DNA溶液中来鉴定DNA的存在，无疑是不可得出结论的。因为这整瓶溶液都会呈现绿色，即使DNA被染色，这“万绿丛中一点绿”也是观察不出来的。

这就是题目的陷阱。