Han原子荧光测硒2015-11-7

氢化物原子荧光测硒实验方案

1. 主要仪器和试剂：

1.1主要仪器：A FS-922 型氢化物发生双道原子荧光光谱仪（北京吉天仪器有限公司）；硒空心阴极灯(北京真空电子技术研究所)、SH220石墨消解仪（型号SH220；济南海能仪器有限公司）、优普超纯水机、电子天平（赛多利斯；Sartorious BS2245）、数显鼓风干燥箱（上海博迅实业有限公司医疗设备厂）、25ml容量瓶、消解管、小烧杯、漏斗、移液枪、离心管等常用实验仪器。

1.2主要试剂：盐酸（优级纯；武汉市中天化工有限公司）、硝酸（优级纯；国药集团化学试剂有限公司）、30%过氧化氢（优级纯；天津市光复科技发展有限公司）；氢氧化钾（优级纯）、硼氢化钾（优级纯）；硒标准储备液（100ug/ml）(GSB07 – 1253)(由国家环境保护总局标准样品研究所研制)。实验用水为超纯水。

1.3仪器工作条件（仪器设置及药品）

B道硒灯；

光电倍增管负高压：300V;

原子化器高度：10mm;

灯电流：80mA

载气流量：400ml/min

屏蔽气流量：8000mL/min

分析信号：峰面积

读数时间：12s

延迟时间：1.2s

注入量：1.5ml

测定次数：3次

载流：5%HCl；还原剂：1%硼氢化钾（钠）

2、实验步骤：本次实验共有7个样品，14分血样，一份空白对照，分别做两个重复。分1次消解定容，每次消解16个。

2.1. 药品准备（注意：配制药品所用到的所有器皿均需要用1：1的硝酸浸泡过夜，第二天，将侵泡好了的仪器用清水冲洗，再用超纯水润洗三遍，烘干备用。）所需器皿：1000ml容量瓶1个，烧杯，离心管，25ml容量瓶，枪头，500ml容量瓶，移液管，玻璃棒，量筒，集气瓶）

2.1.1配制6ml/L的盐酸溶液200ml。

配方：量取50ml盐酸缓慢加入40ml水中，冷却后定容至100ml。（配制200ml）（※注意：盐酸的配制循序，先加水，再加盐酸，防止盐酸溅出受伤）

2.1.2 配制5%盐酸溶液

配方：50ml定容至1000ml（配2L）

2.1.3 配制标准硒溶液（硒标准溶液最好手工配制，其剃度为40ug/L、20 ug/L、10 ug/L、5 ug/L、2.5 ug/L）

配方：吸取0.025ml 40ug/mL 硒标准溶液，以5%盐酸溶液定容至25mL。制成20ug/L 储备液。再吸取12.25ml硒标准溶液，以5%盐酸溶液定容至25mL，同理配制10 ug/L、5 ug/L、2.5 ug/L硒标准溶液。（仪器可测定的最高浓度为20-30ug/L）

2.1.4配制1%硼氰化钾溶液

配方：将1.0g KBH4(优级纯)溶于100ml 0.5% KOH（优级纯）溶液中，混匀。该溶液易失效，所以需用前配制，放冰箱内可保存10天。（配200ml）

2.2样品处理

2.2.1取20支消解管、20个10ml容量瓶，20个15ml离心管，置于1：1的硝酸液中侵泡(至少一夜)。第二天，将侵泡好了的仪器用清水冲洗，再用超纯水润洗三遍，烘干备用。

2.2.2微波消解

⑴浸酸：取5ml鳝鱼鲜血于消解管中，加8mL的浓硝酸，2mL的双氧水，浸酸一小时，每个土洋做两个个重复，分别记为A1、A2、并做一组对照

⑵消解：至微波消解仪中，按下列表格设置好程序，

步骤保持时间（min）温度（℃）达到时间（min）

1 10 120 2

2 10 150 5

3 5 160 9

415 180 30

5 20 100 10

1-1血液微波消解程序设置表

至澄清透明，然后取出。

⑶赶酸：消解完成后，转移至变热板，继续加热（<140度）至液体为2ml左右（次步骤是为了赶走NOx，注意不能烧干）。

⑷还原：冷却，再加入5ml 6ml/LHCl，继续加热至溶液变为清亮（约5min，次步是使六价的硒还原为四价硒）。

⑸定容：冷却，将消化液用纯水转移到25ml的容量瓶中，用纯水定容。

※同时做不加样品的空白实验（两个平行），同样品一样，同时操作。

⑹配制载流液，5%HCl、1%硼氢化钾。（配方见上述）

⑺将备好的空白样（不加样品的空白样）和标准硒溶液以及待测样移至离心管中备用。

3原子荧光光谱仪的操作流程

⑴打开电脑，进入WINDOWS桌面。

⑵打开氩气瓶，调节分压表压力为0.3MPa。

Note：开氩气（总压力开关逆时针打开；顺时针拧紧分压力表，使分压力处于

0.2-0.3MPa之间）；关氩气（总压力开关顺时针拧紧；使总的压力表回到零位，然

后将分压表逆时针拧松）。

⑶换上所用的元素灯。

⑷打开仪器主机电源和顺序注射电源，若元素灯不亮可用点火枪激发。

⑸用调光器检查元素灯光斑是否对正。

⑹检查二级气液分离器（水封）中是否有水。

⑺双击桌面上AFS-9X系列原子荧光光度计图标，今天进入工作站。

⑻出现自检测画面后，点检测，全部正常后，点返回。

⑼点击点火图标，原子化器炉丝点亮。

⑽单击元素表，A、B道自动识别元素灯。（若单道测量，则点击另一道手工设置，选成None），然后点确定。

⑾单击仪器条件，设置仪器参数，然后点确定。

⑿点击标准系列，在自动配制前打上对勾（此方法用于自动配制曲线），双击S1-S5输入A,B道所测做元素标准曲线各点浓度和码放置位置号，点击确定。

Note：因本实验配制标准硒溶液浓度为1ug/mL，因此S1-S5浓度分别为：0.10、0.20、0.40、0.80、1.0。

⒀单击样品参考，单击样品空白，有几个样品空白，则在序号后面的方框里打几个对勾，并设定好各个空白的码放位置号，点击确定。点击添加样品，依次输入样品的

个数、样品的名称、稀释因子（前框为取样量，后框为定容体积）、位置号，并选

定所需扣除的样品空白号。点击确定。

⒁单击测量窗口，出现测量画面。

⒂点击预热，仪器需要预热30分钟以上（测汞预热1小时以上）。

⒃点击检测，出现另存为画面，输入新建文件名，（新建一个文件，当前所做数据全部保存在这个文件当中，不要与以前的文件同名否则会替换以前的文件）。文件名

例如：“水05-11-25As&Hg”。然后点保存。

⒄确定载流，还原剂，标准系列，样品都已码放好，压紧泵压块，先选中标准空白（5%HCl，荧光值应在70~100左右），标准曲线S1~S5→点击检测→检测完成后，

点击工作曲线→查看相关系数（注意：要在三个9以上；RSD要在0.04左右有效），完成后，再选中样品空白，样品，点击检测。

⒅单击数据，报告，工作曲线，根据需要进行打印。

⒆使用后清洗，点击清洗程序，把载流、还原剂毛细管放入超纯水中，点清洗（或者是选择标准空白一栏，点击检测，从而完成清洗效果）。

⒇点熄火，然后关闭软件，关主机电源和顺序注射电源，关气，松开泵压块。

21点击“我要下机”，关电脑。

22处理废液并将实验台面清理干净。