微生物检验第十四章 肠杆菌科及检验讲义

第十四章肠杆菌科及检验

概述和通性——分类

根据细菌的形态、生化反应、抗原性质以及核酸相关性进行分类。大多数属于正常菌群（条件致病菌）。

引起腹泻和肠道感染：埃希菌属、志贺菌属、沙门菌属、耶尔森菌属等。

导致院内感染：枸橼酸杆菌属、克雷伯菌属、肠杆菌属、多源菌属、沙雷菌属、变形杆菌属、普罗威登菌属和摩根菌属等。

概述和通性——生物学特性

形态与结构

形态：杆菌。

染色：G-。

特殊结构：

多数有周鞭毛，能运动。

志贺菌属和克雷伯菌属无鞭毛。

均不形成芽胞，少数菌属（埃希菌属和克雷伯菌属）可形成荚膜。

培养特性

营养要求：不高。

气体环境：需氧或兼性厌氧。

菌落特征：普通琼脂培养基和麦康凯培养基上均能生长，并形成中等大小的菌落，湿润光滑。

抗原

变异：

包括菌落S-R变异和鞭毛H-O变异。

表现为耐药性或生化反应性质的改变。

抵抗力：

不强。加热60℃，30分钟即被杀死。

不耐干燥，对一般化学消毒剂敏感。

对低温有耐受力，能耐胆盐。

概述和通性——微生物检验及鉴定

标本采集

形态学检查：革兰阴性杆菌。

分离培养：

将粪便或肛拭标本立即接种在肠道菌选择培养基上或先增菌后再分离。

克氏双糖铁琼脂（KIA）培养基：葡萄糖/乳糖发酵；产气；硫化氢试验。

动力-吲哚-尿素（MIU）培养基

生化反应：

①用葡萄糖氧化-发酵试验及氧化酶试验与弧菌科和非发酵菌鉴别；

②用苯丙氨酸脱氨酶和葡萄糖酸盐试验，分为苯丙氨酸脱氨酶阳性、葡萄糖酸盐利用试验阳性和两者均为阴性反应三个类群；

③选择生化反应进行属种鉴别；

④用诊断血清做凝集反应。

埃希菌属——分类

包括5个种，即大肠埃希菌、蟑螂埃希菌、弗格森埃希菌、赫尔曼埃希菌和伤口埃希菌。

临床最常见的是大肠埃希菌，俗称大肠杆菌，是人类和动物肠道正常菌群。

埃希菌属——生物学特性

形态与结构

形态：短杆菌。

染色：G-。

特殊结构：多数有周鞭毛，能运动，

有菌毛、荚膜或微荚膜。

培养特性

营养要求：不高。

气体环境：兼性厌氧。

菌落特征：营养琼脂上呈圆形，凸起，边缘整齐，灰白色的光滑型菌落，直径2～3mm，少数菌株产生β-溶血环。

伊红亚甲蓝琼脂上，由于发酵乳糖，菌落呈蓝紫色并有金属光泽。

麦康凯和SS琼脂上，胆盐对其有抑制作用，耐受菌株能生长并形成粉红色菌落。

抗原由菌体抗原（O）、表面抗原（K）和鞭毛抗原（H）三种构成。

埃希菌属——微生物检验及鉴定

标本采集：肠道感染采集粪便；肠道外感染可采集中段尿液、血液、脓汁、胆汁、脑脊液、痰、分泌液等。

形态学检查：脓汁及增菌培养物发现单一革兰阴性短杆菌。

分离培养：

粪便标本可用弱选择鉴别培养基进行分离，脓汁等可用血平板分离，得到典型菌落。生化反应：

药敏试验：超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）产酶株。

肠道内感染：血清学鉴定、毒素测定或毒力试验。

埃希菌属——致病性及临床意义

致病因素：侵袭力、内毒素、肠毒素。

肠道外感染：泌尿系统感染最常见。

还有菌血症，胆囊炎，腹腔脓肿，肺炎、新生儿脑膜炎、伤口感染、腹泻。

内毒素还可引起发热、休克、DIC等。

肠道感染

志贺菌属——分类

细菌性痢疾最常见的病原菌，通称痢疾杆菌。

根据生化反应与血清学试验分为痢疾、福氏、鲍氏和宋内志贺菌四群。

我国以福氏和宋内志贺菌引起的菌痢最为常见。

志贺菌属——生物学特性

形态与结构

形态：短小杆菌。

染色：G-。

特殊结构：无荚膜，无芽胞，无鞭毛，有菌毛。

培养特性

气体环境：需氧或兼性厌氧。

菌落特征：

普通琼脂平板和SS培养基上培养18～24h形成中等大小、半透明的光滑型菌落，宋内志贺菌可形成扁平、粗糙的菌落。

抗原：

只有O抗原无鞭毛（H）抗原，个别菌型及新分离菌株有K抗原。

O抗原分群特异性抗原和型特异性抗原两类。

根据抗原构造可将志贺菌分为四个血清群，40余种血清型（包括亚型）。

加热100℃、60min可破坏K抗原。

志贺菌属——微生物检验及鉴定

标本采集：发病早期及治疗前采集新鲜粪便（脓血便或黏液便）。

形态学检查：革兰阴性短小杆菌。

分离培养：

同时接种强弱选择性不同的两个平板。

强选择鉴别培养基可用沙门、志贺菌选择培养基（SS）；弱选择培养基可用麦康凯或中国蓝培养基。志贺菌属——微生物检验及鉴定

生化反应：

志贺菌属——微生物检验及鉴定

鉴别反应

志贺菌属——致病性及临床意义

致病因素：侵袭力、内毒素及外毒素（A群产生志贺毒素，具有细胞毒素、肠毒素、神经毒素）。

所致疾病：

1.急性菌痢。

2.慢性菌痢：人-人传播，可引起暴发流行。

3.中毒性菌痢：小儿多见。

4.一般不入血，不引起败血症。

形态与结构

形态：直杆菌。

染色：G-。

特殊结构：

无芽胞、无荚膜；

大多有周身鞭毛，能运动；

多数有菌毛。

沙门菌属——生物学特性

培养特性

营养要求：不高。

气体环境：兼性厌氧。

温度环境：35～37℃。

菌落特征：

SS琼脂和麦康凯琼脂培养基上35～37℃24h可形成直径约2～4mm的透明或半透明菌落，对胆盐耐受。产H2S者在SS琼脂上形成黑色中心菌落。