肠杆菌科细菌检验课件
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肠杆菌科细菌ppt课件
第十六节 其他肠杆菌科细菌
2
Contents
1 2 3
: introduction
Escherichia, Shigella, and Salmonella
Yersinia Citrobacter, Klebsiella, Enterobacter
4
5
Serratia, Plesiomonas
Other
报告细菌种名 报告细菌血清型
16
Antibiotic Susceptibility
概 When antibiotics were first introduced, there
was only slight resistance among the species of . 述 Today, antibiotic resistance is much more common among strains isolated from humans and animals. Resistance patterns vary depending on the organism and its origin.
Strains of are associated with abscesses, pneumonia, meningitis, and infection of wounds, the urinary tract, and the intestine.
They are a major component of the normal intestinal flora of humans but are relatively uncommon as normal flora of other body sites. may account for 80% of clinical significant isolates of gram-negative bacilli and 50% of clinically significant bacteria in clinical microbiology laboratories. They account for nearly 50% of septicemia cases, more than 70% of urinary tract infections, and a significant percentage of intestinal infections.
肠杆菌科细菌的鉴定PPT课件
#43;
20
实验结果
表 肠杆菌科部分细菌重要生物学特征
细
糖发酵试验
吲哚 甲基 VP
菌
红
编 号
葡 萄 糖
乳 糖
麦 芽 糖
甘 露 醇
蔗 糖
B3 ⊕ ⊕ ⊕ ⊕ - + +
-
B4 ⊕ - - ⊕ - - -
-
B5 ⊕ ⊕ ⊕ ⊕ - + +
-
枸 动 志贺 沙门
橼 力 菌属 菌属
酸
多价 多价
17
实验结果
❖萄发酵管——甘露醇 三支葡萄糖发酵管依次分别接种培
养了可疑大肠杆菌、可疑沙门杆菌、可 疑志贺杆菌。
✓试管均从原来蓝色变为黄色, ✓并且小试管均有小气泡, ✓所以三种可疑菌均有产气产酸。 ✓其中沙门菌颜色较浅,产酸较少。
18
实验结果
❖萄发酵管——乳糖 三支葡萄糖发酵管依次分别接种培
养了可疑大肠杆菌、可疑沙门杆菌、可 疑志贺杆菌。
料
单糖发酵管
硫酸亚铁半固体培养基
普通肉汤培养基
西蒙枸櫞酸盐培养基
4
实验方法
配置 培养基
分离菌 株
纯化培 养
血清学 鉴定
生化反 应鉴别
❖紫黑色的单个菌落,可初步定为可疑大肠埃希菌
菌不号落发。,酵编 乳❖清❖取待号糖放洁环;的在净冷光,玻载却滑可片玻后无疑上片用❖麦水色志,,环每透贺然,2支平❖以在明菌后株甘,取灭菌板的属烧可,西菌种肠单 或环分疑蔗接斜蒙个沙。杆离菌)种面菌门枸菌法落各环菌落菌櫞混分接1取苔可属支酸合离种上1初菌,盐~溶菌以蘸2步落环琼蛋液株取下定,志脂白涂:少为编培贺斜胨布量养菌面水细于基属菌一1E:多支M与支B价糖,平血,诊发硫板清葡断酵酸混培萄血管亚养糖(铁基蛋葡琼白,脂胨乳半, ❖编❖录取 观号。双察的(糖可可 用合❖观铁疑轻疑酸,察高细轻菌碱先凝层 菌摇落指在集琼在动,示血现脂双载送剂清象斜糖玻固❖养检3边。7面铁片接测℃缘体24上❖待培琼,双恒处种培-4挑养脂一,用糖温将完8养小基斜边选铁箱细3。毕基7,面摇时琼培菌菌℃后1无的动脂养研支候落恒,菌生,斜2磨,观形温4试操长一面-开普察态4箱管作现边和8,通记小、倒置接象将琼然时肉录颜置种并载于脂后。汤于色培已记玻高再试琼表不片养混管脂格稍一匀2架4微半中。致h上倾固。的后,斜体菌。送对培落3光7养保℃基存恒1温支箱。培
20
实验结果
表 肠杆菌科部分细菌重要生物学特征
细
糖发酵试验
吲哚 甲基 VP
菌
红
编 号
葡 萄 糖
乳 糖
麦 芽 糖
甘 露 醇
蔗 糖
B3 ⊕ ⊕ ⊕ ⊕ - + +
-
B4 ⊕ - - ⊕ - - -
-
B5 ⊕ ⊕ ⊕ ⊕ - + +
-
枸 动 志贺 沙门
橼 力 菌属 菌属
酸
多价 多价
17
实验结果
❖萄发酵管——甘露醇 三支葡萄糖发酵管依次分别接种培
养了可疑大肠杆菌、可疑沙门杆菌、可 疑志贺杆菌。
✓试管均从原来蓝色变为黄色, ✓并且小试管均有小气泡, ✓所以三种可疑菌均有产气产酸。 ✓其中沙门菌颜色较浅,产酸较少。
18
实验结果
❖萄发酵管——乳糖 三支葡萄糖发酵管依次分别接种培
养了可疑大肠杆菌、可疑沙门杆菌、可 疑志贺杆菌。
料
单糖发酵管
硫酸亚铁半固体培养基
普通肉汤培养基
西蒙枸櫞酸盐培养基
4
实验方法
配置 培养基
分离菌 株
纯化培 养
血清学 鉴定
生化反 应鉴别
❖紫黑色的单个菌落,可初步定为可疑大肠埃希菌
菌不号落发。,酵编 乳❖清❖取待号糖放洁环;的在净冷光,玻载却滑可片玻后无疑上片用❖麦水色志,,环每透贺然,2支平❖以在明菌后株甘,取灭菌板的属烧可,西菌种肠单 或环分疑蔗接斜蒙个沙。杆离菌)种面菌门枸菌法落各环菌落菌櫞混分接1取苔可属支酸合离种上1初菌,盐~溶菌以蘸2步落环琼蛋液株取下定,志脂白涂:少为编培贺斜胨布量养菌面水细于基属菌一1E:多支M与支B价糖,平血,诊发硫板清葡断酵酸混培萄血管亚养糖(铁基蛋葡琼白,脂胨乳半, ❖编❖录取 观号。双察的(糖可可 用合❖观铁疑轻疑酸,察高细轻菌碱先凝层 菌摇落指在集琼在动,示血现脂双载送剂清象斜糖玻固❖养检3边。7面铁片接测℃缘体24上❖待培琼,双恒处种培-4挑养脂一,用糖温将完8养小基斜边选铁箱细3。毕基7,面摇时琼培菌菌℃后1无的动脂养研支候落恒,菌生,斜2磨,观形温4试操长一面-开普察态4箱管作现边和8,通记小、倒置接象将琼然时肉录颜置种并载于脂后。汤于色培已记玻高再试琼表不片养混管脂格稍一匀2架4微半中。致h上倾固。的后,斜体菌。送对培落3光7养保℃基存恒1温支箱。培
第二十一章-肠杆菌科细菌PPT课件
3
.
肠杆菌科中与医学有关的常见菌属
菌属
代表种
埃希菌属
大肠杆菌
志贺菌属
痢疾志贺菌
爱德华菌属
迟钝爱德华菌
沙门菌属
伤寒沙门菌
枸橼酸菌属
佛劳第枸橼酸菌
克雷伯菌属
肺炎克氏菌
肠杆菌属
产气杆菌
哈夫尼亚菌属
蜂窝哈夫尼亚菌
沙雷菌属
粘质沙雷菌
变形杆菌属
普通变形杆菌
摩根菌属
摩氏摩根菌
普罗威登斯菌属
雷氏普罗威登斯菌
耶尔森菌属
(包括肥达试验) 4、志贺菌的致病性与微生物学检查特点
44
.
1. 肠道致病菌与非致病的鉴别可用() A 葡萄糖发酵实验 B 乳糖发酵实验 C 靛基质实验 D 硫化氢实验 2.检出( )可作为食品被粪便污染的指标 A 大肠杆菌 B 志贺菌 C 沙门菌 D 变形杆菌 3.肥大反应可辅助诊断() A 肠热症 B风湿病 C 猩红热 D 波浪热 4.志贺菌主要引起() A 食物中毒 B 痢疾阿米巴病 C 细菌性痢疾 D 肠热症
.
34
第四节 志贺菌属 shigella
是人类细菌性痢疾最为常见的病原菌, 通称痢疾杆菌
35
.
(一)生物学性状
形态特点:
多数有菌毛,无鞭毛,动力(-)
培养与生化反应:
营养要求不高,能分解葡萄糖,产酸不产气, 不分解乳糖,除宋内志贺菌
对理化因素的抵抗力:
低于其他肠道杆菌,对酸敏感
36
.
抗原与分类
痊愈
慢性感染、带菌者(传染源) 40
.
所致疾病
急性细菌性痢疾 发热、腹痛、脓血粘液便、里急后重
中毒性痢疾:多见于小儿。内毒素入血导致 全身中毒。
肠杆菌PPT课件
2.H抗原 沙门菌属的H抗原有两种,称第1相(特异相)和 第2相(非特异相)。具有两种相抗原的细菌叫双相菌;仅有其中 一相者称单相菌。
按O抗原分组后,每一组沙门菌再根据H抗原分成不同 的种或血清型。
3.Vi抗原 Vi抗原有抗吞噬作用,并保护菌体不受抗体和补 体的作用。Vi抗原的抗原性弱,刺激机体产生的抗体效价低。细菌 在体内不断地刺激机体才有抗体产生;如果细菌消失则抗体也随之 消失。
1.正常凝集价 一般情况下,伤寒沙门菌O抗体的凝集价应在1: 80以上,H抗体凝集价在1:160以上,甲、乙型副伤寒沙门菌H抗体 凝集价在1:80以上有诊断意义。
2.病程 。
3.H抗体与O抗体的性质及其消长的意义 1)若0与H凝集价均超 过正常值,则伤寒的可能性很大;2)若二者均低于正常值,则可 能性甚小;3)若O凝集价高而H低于正常值,则可能是感染早期或 沙门菌属中其他的细菌感染引起的O凝集的交叉反应;4)若O凝集 价低而H高于正常值,则可能是以往预防接种的结果或非特异性回 忆反应。
返回
.
.
细菌特性
形态特征 培养特性 生化反应 抗原结构
.
伤寒Байду номын сангаас门菌革兰染色
.
伤寒沙门菌菌落特征(MAC)
.
伤寒沙门菌菌落特征(SS)
.
伤寒沙门菌菌落特征(血平板)
.
伤寒沙门菌KIA(K A-+)MIU(+--)
.
沙门菌IMViC试验(-+--)
.
➢抗原构造和分类
生物学性状
1.O抗原 O抗原有许多组成成分,每组细菌带有数种O抗原; 不同种的细菌可有共同的O抗原。将具有共同抗原的沙门菌归为一 组(group),现有42个O组。引起人类沙门菌病的细菌多属A—F组
细菌学检验-10-肠杆菌科
在一定条件下可引起肠道外感染 某些血清型菌株的致病性强,引起腹泻,统称致病
性大肠杆菌
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二、生物学性状
形态与染色
– 革兰染色阴性 (G-),中等大小,两端钝圆 – 大多有周鞭毛、菌毛,无芽胞。少数有荚膜
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二、生物学性状
培养特性
– 需氧或兼性厌氧菌 – 在普通琼脂平板上可形成中等大小的圆形、凸起、表面光
肠杆菌科中与医学有关的常见菌属
属
代表种
致病性Leabharlann 埃希氏菌属 (Escherichia) 大肠埃希氏菌 (E.coli)
肠道外感染, 急性腹泻
志贺氏菌属 (Shigella) 痢疾志贺氏菌 (Sh.dysenteriae)
细菌性痢疾
爱德华氏菌属 (Edwardsiella)
迟纯爱德华氏菌 (E.tarda)
❖与致病性有关,可阻断O抗原与相应抗体之间的凝集 ❖加热处理能消除其阻断作用,恢复O抗原凝集
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肠道杆菌科的共同特性
抵抗力
– 不强,加热60℃经30分钟即死亡 – 胆盐、煌绿等对大肠杆菌等非致病菌有选择性作用,可制
备肠道杆菌选择性培养基以分离肠道致病菌
变异性
– 易出现变异菌株,如S-R变异,H-O变异 – 最常见的是耐药性转移、毒素产生和生化反应等的改变。
这在致病力、细菌学诊断、治疗与预防中均有重要意义
致病菌传播方式
– 污染的饮水及食物、经消化道传播,粪-口途径
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第一节 埃希氏菌 (Escherichia)
一、概述
性大肠杆菌
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二、生物学性状
形态与染色
– 革兰染色阴性 (G-),中等大小,两端钝圆 – 大多有周鞭毛、菌毛,无芽胞。少数有荚膜
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二、生物学性状
培养特性
– 需氧或兼性厌氧菌 – 在普通琼脂平板上可形成中等大小的圆形、凸起、表面光
肠杆菌科中与医学有关的常见菌属
属
代表种
致病性Leabharlann 埃希氏菌属 (Escherichia) 大肠埃希氏菌 (E.coli)
肠道外感染, 急性腹泻
志贺氏菌属 (Shigella) 痢疾志贺氏菌 (Sh.dysenteriae)
细菌性痢疾
爱德华氏菌属 (Edwardsiella)
迟纯爱德华氏菌 (E.tarda)
❖与致病性有关,可阻断O抗原与相应抗体之间的凝集 ❖加热处理能消除其阻断作用,恢复O抗原凝集
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肠道杆菌科的共同特性
抵抗力
– 不强,加热60℃经30分钟即死亡 – 胆盐、煌绿等对大肠杆菌等非致病菌有选择性作用,可制
备肠道杆菌选择性培养基以分离肠道致病菌
变异性
– 易出现变异菌株,如S-R变异,H-O变异 – 最常见的是耐药性转移、毒素产生和生化反应等的改变。
这在致病力、细菌学诊断、治疗与预防中均有重要意义
致病菌传播方式
– 污染的饮水及食物、经消化道传播,粪-口途径
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第一节 埃希氏菌 (Escherichia)
一、概述
《肠杆菌科细菌》PPT课件
轻度感染
发热、咳嗽、流涕等类似感冒症状。
中度感染
肺炎、心脏疾病等,需要住院治疗。
严重感染
败血症、感染性休克等,危及生命。
肠杆菌科细菌感染的传播途径
直接接触
人与人之间通过飞沫、接触等途径传 播。
间接接触
动物传人
某些肠杆菌科细菌能在动物间传播, 再传给人。
通过污染的水、食物、物品等传播。
03
肠杆菌科细菌的检测与诊断
《肠杆菌科细菌》ppt课件
汇报人:可编辑
2024-01-11
CONTENTS
• 肠杆菌科细菌简介 • 肠杆菌科细菌的致病性 • 肠杆菌科细菌的检测与诊断 • 肠杆菌科细菌的抗药性 • 肠杆菌科细菌的治疗与预防
01
肠杆菌科细菌简介
肠杆菌科细菌的定义与分类
定义
肠杆菌科细菌是一类革兰氏阴性 杆菌,属于变形菌门,肠杆菌目 ,肠杆菌科。
05
肠杆菌科细菌的治疗与预防
肠杆菌科细菌感染的治疗方法
抗生素治疗
根据病菌类型和感染程度,选择 适当的抗生素进行治疗,如头孢
菌素、氨基糖苷类等。
支持性治疗
针对患者症状进行对症治疗,如 补液、纠正电解质紊乱等,以维
持生命体征稳定。
手术治疗
对于严重感染或并发症,如脓肿 形成、器官功能衰竭等,可能需
要进行手术治疗。
临床表现
患者出现发热、腹泻、腹 痛等症状,可能伴随有恶 心、呕吐等症状。
实验室检查
粪便、血液等标本中分离 出肠杆菌科细ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ,且药敏 试验显示对该细菌敏感。
流行病学调查
患者近期有与肠杆菌科细 菌感染者接触史或旅行史 等。
肠杆菌科细菌感染的鉴别诊断
其他细菌感染
发热、咳嗽、流涕等类似感冒症状。
中度感染
肺炎、心脏疾病等,需要住院治疗。
严重感染
败血症、感染性休克等,危及生命。
肠杆菌科细菌感染的传播途径
直接接触
人与人之间通过飞沫、接触等途径传 播。
间接接触
动物传人
某些肠杆菌科细菌能在动物间传播, 再传给人。
通过污染的水、食物、物品等传播。
03
肠杆菌科细菌的检测与诊断
《肠杆菌科细菌》ppt课件
汇报人:可编辑
2024-01-11
CONTENTS
• 肠杆菌科细菌简介 • 肠杆菌科细菌的致病性 • 肠杆菌科细菌的检测与诊断 • 肠杆菌科细菌的抗药性 • 肠杆菌科细菌的治疗与预防
01
肠杆菌科细菌简介
肠杆菌科细菌的定义与分类
定义
肠杆菌科细菌是一类革兰氏阴性 杆菌,属于变形菌门,肠杆菌目 ,肠杆菌科。
05
肠杆菌科细菌的治疗与预防
肠杆菌科细菌感染的治疗方法
抗生素治疗
根据病菌类型和感染程度,选择 适当的抗生素进行治疗,如头孢
菌素、氨基糖苷类等。
支持性治疗
针对患者症状进行对症治疗,如 补液、纠正电解质紊乱等,以维
持生命体征稳定。
手术治疗
对于严重感染或并发症,如脓肿 形成、器官功能衰竭等,可能需
要进行手术治疗。
临床表现
患者出现发热、腹泻、腹 痛等症状,可能伴随有恶 心、呕吐等症状。
实验室检查
粪便、血液等标本中分离 出肠杆菌科细ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ,且药敏 试验显示对该细菌敏感。
流行病学调查
患者近期有与肠杆菌科细 菌感染者接触史或旅行史 等。
肠杆菌科细菌感染的鉴别诊断
其他细菌感染
肠杆菌科细菌检验PPT课件
实验三 肠杆菌科细菌检验
1
目的要求
• 掌握常见肠杆菌科细菌的培养特性和形态染色特征 • 掌握常见肠杆菌科细菌的鉴定技术 • 掌握肠杆菌科微量生化管编码鉴定技术 • 掌握肠杆菌科临床常见致病菌的血清学凝集技术
2
实验材料
一、菌种: 大肠埃希菌、沙门菌、普通变形杆菌、肺炎克雷伯菌(BAP、 MAC、SS) 二、生化管: KIA、半固体、肠杆菌科微量生化管编码鉴定管(1套/2人) 三、诊断血清: 沙门菌多价 四、其他: 玻片、盐水、接种环(针)、革兰染液、3%H2O2、氧化酶试 剂、液体石蜡
5
检验程序
粪便
肠道外标本
肠道选择培养基
血平板、弱选择平板
可疑菌落
血清学实验 生化反应 药敏试验
结果报告
6
肠道杆菌的生化反应鉴定
1. 肠杆菌科与其它革兰阴性杆菌区别
7
2. 初步分三组
苯丙氨酸(-) 苯丙氨酸(+) 苯丙氨酸(-)
VP(-)
VP(-)
VP(+)
埃希菌属
变形杆菌属
克雷伯菌属
沙门菌属 普罗威登斯菌属 肠杆菌属
MACC
SS
12
大肠埃希杆菌呈典型粉红色,乳糖发酵菌落。福氏 痢疾杆菌 菌落小,无色透明,非乳糖发酵菌。 (18hr,37℃)
13
双糖铁培养基(KIA)
蛋白胨 10g
氯化钠 5 g
牛肉膏 3 g
琼 脂 16g
水
1000ml
葡 萄 糖 1g 乳 糖 10g 硫代硫酸钠 0.2g 硫酸亚铁 0.2g 0.4%酚红 6ml
克雷伯菌属 A
A
+ - - d+
9
麦康凯琼脂(MACC)
1
目的要求
• 掌握常见肠杆菌科细菌的培养特性和形态染色特征 • 掌握常见肠杆菌科细菌的鉴定技术 • 掌握肠杆菌科微量生化管编码鉴定技术 • 掌握肠杆菌科临床常见致病菌的血清学凝集技术
2
实验材料
一、菌种: 大肠埃希菌、沙门菌、普通变形杆菌、肺炎克雷伯菌(BAP、 MAC、SS) 二、生化管: KIA、半固体、肠杆菌科微量生化管编码鉴定管(1套/2人) 三、诊断血清: 沙门菌多价 四、其他: 玻片、盐水、接种环(针)、革兰染液、3%H2O2、氧化酶试 剂、液体石蜡
5
检验程序
粪便
肠道外标本
肠道选择培养基
血平板、弱选择平板
可疑菌落
血清学实验 生化反应 药敏试验
结果报告
6
肠道杆菌的生化反应鉴定
1. 肠杆菌科与其它革兰阴性杆菌区别
7
2. 初步分三组
苯丙氨酸(-) 苯丙氨酸(+) 苯丙氨酸(-)
VP(-)
VP(-)
VP(+)
埃希菌属
变形杆菌属
克雷伯菌属
沙门菌属 普罗威登斯菌属 肠杆菌属
MACC
SS
12
大肠埃希杆菌呈典型粉红色,乳糖发酵菌落。福氏 痢疾杆菌 菌落小,无色透明,非乳糖发酵菌。 (18hr,37℃)
13
双糖铁培养基(KIA)
蛋白胨 10g
氯化钠 5 g
牛肉膏 3 g
琼 脂 16g
水
1000ml
葡 萄 糖 1g 乳 糖 10g 硫代硫酸钠 0.2g 硫酸亚铁 0.2g 0.4%酚红 6ml
克雷伯菌属 A
A
+ - - d+
9
麦康凯琼脂(MACC)
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10g
1%中性红水溶液
胆盐
5ml
5g
SS琼脂
牛肉膏 牛心浸液 肉膏液
胨 乳糖 配方一 5
(四种配方 )
配方二 配方三 配方四 5
1000
850 5 7.5(胨) 5 10
8.5(混合)
10
10 ( 粗 制 )
15
10 ( 透 析 )
10
150 ( ml )(牛 胆汁)
胆盐
硫代硫酸钠
12
12 0.5
观察指标:葡萄糖、乳糖发酵、H2S
细菌在半固体培养基中的生长现象
• 观察穿刺线边缘是否清晰及培养基混浊度 有鞭毛细菌:在培养基中沿穿刺线并向外扩散生长,穿刺
线边缘模糊。培养基混浊。
无鞭毛细菌:只沿穿刺线生长,穿刺线边缘清晰。培养基
透明度无变化。
无动力 现象
有动力 现象
双糖铁培养基(KIA)
蛋白胨 氯化钠 10g 5 g 葡 萄 糖 乳 糖 1g 10g
牛肉膏
琼 脂 水
3 g
16g 1000ml
硫代硫酸钠
硫酸亚铁 0.4%酚红
0.2g
0.2g 6ml
细菌在KIA中的生长现象
• 观察高层与斜面颜色变化情况以及培养基是否变黑
上层固体斜面:乳糖+指示剂
下层固体:葡萄糖+指示剂+FeSO4
实验内容(2人/组)
三、生化实验:
1. 触酶试验:
2. 氧化酶试验: 3. KIA试验(1支): 4.半固体试验(1支):
5. 肠杆菌科微量生化编码管(1支)
6.沙门菌血清学玻片凝集试验
检验程序
粪便
肠道外标本
肠道选择培养基
血平板、弱选择平板
可疑菌落
血清学实验
生化反应
药敏试验
结果报告
肠道杆菌的生化反应鉴定
实验三 肠杆菌科细菌检验
目的要求
• 掌握常见肠杆菌科细菌的培养特性和形态染色特征 • 掌握常见肠杆菌科细菌的鉴定技术 • 掌握肠杆菌科微量生化管编码鉴定技术 • 掌握肠杆菌科临床常见致病菌的血清学凝集技术
实验材料
一、菌种: 大肠埃希菌、沙门菌、普通变形杆菌、肺炎克雷伯菌(BAP、 MAC、SS) 二、生化管: KIA、半固体、肠杆菌科微量生化管编码鉴定管(1套/2人)
三、诊断血清:
沙门菌多价 四、其他:
玻片、盐水、接种环(针)、革兰染液、3%H2O2、氧化酶试剂、
液体石蜡
实验内容
一、菌落观察:
大肠埃希菌、沙门菌、普通变形杆菌、肺炎克雷伯菌 (BAP、MAC、SS)
菌落形态、颜色、溶血现象、迁徙生长现象观察与描述
二、形态观察:
所有细菌革兰染色 显微镜下细菌形态、染色性观察与描述
1. 肠杆菌科与其它革兰阴性杆菌区别
2. 初步分三组
苯丙氨酸(-) 苯丙氨酸(+) 苯丙氨酸(-) VP(-) VP(-) VP(+) 埃希菌属 变形杆菌属 克雷伯菌属 沙门菌属 普罗威登斯菌属 肠杆菌属
志贺菌属
枸橼酸菌属 爱德华菌属
摩根菌属
沙雷菌属
哈夫尼亚菌属 耶尔森菌属
3. 肠道杆菌属间鉴定
枸橼酸钠 枸橼酸铁
枸橼酸铁铵 磷酸氢二钠 琼脂
5 15
1
11
11 4
8.5
8.5 1
5
25 0.33 22.5 1000 18 0.33
பைடு நூலகம்
4
20 1.0 70 13.5 0.33 25
1000
煌绿
中性红 水
37
MACC
SS
大肠埃希杆菌呈典型粉红色,乳糖发酵菌落。福氏 痢疾杆菌 菌落小,无色透明,非乳糖发酵菌。 (18hr,37℃)
KIA 菌属 埃希菌属
志贺菌属 沙门菌属 变形杆菌属 克雷伯菌属 斜面 底层 气体 H2S 动力
MIU
吲 哚 + +/ /+ d 脲酶
A
K K K A
A
A A A A
+
+ + +
-
- D/+ +/ - -
+/+ + -
+ +
麦康凯琼脂(MACC)
蛋白胨 20g
氯化钠
琼脂
5g
20-25g
蒸馏水
乳糖
1000ml
1%中性红水溶液
胆盐
5ml
5g
SS琼脂
牛肉膏 牛心浸液 肉膏液
胨 乳糖 配方一 5
(四种配方 )
配方二 配方三 配方四 5
1000
850 5 7.5(胨) 5 10
8.5(混合)
10
10 ( 粗 制 )
15
10 ( 透 析 )
10
150 ( ml )(牛 胆汁)
胆盐
硫代硫酸钠
12
12 0.5
观察指标:葡萄糖、乳糖发酵、H2S
细菌在半固体培养基中的生长现象
• 观察穿刺线边缘是否清晰及培养基混浊度 有鞭毛细菌:在培养基中沿穿刺线并向外扩散生长,穿刺
线边缘模糊。培养基混浊。
无鞭毛细菌:只沿穿刺线生长,穿刺线边缘清晰。培养基
透明度无变化。
无动力 现象
有动力 现象
双糖铁培养基(KIA)
蛋白胨 氯化钠 10g 5 g 葡 萄 糖 乳 糖 1g 10g
牛肉膏
琼 脂 水
3 g
16g 1000ml
硫代硫酸钠
硫酸亚铁 0.4%酚红
0.2g
0.2g 6ml
细菌在KIA中的生长现象
• 观察高层与斜面颜色变化情况以及培养基是否变黑
上层固体斜面:乳糖+指示剂
下层固体:葡萄糖+指示剂+FeSO4
实验内容(2人/组)
三、生化实验:
1. 触酶试验:
2. 氧化酶试验: 3. KIA试验(1支): 4.半固体试验(1支):
5. 肠杆菌科微量生化编码管(1支)
6.沙门菌血清学玻片凝集试验
检验程序
粪便
肠道外标本
肠道选择培养基
血平板、弱选择平板
可疑菌落
血清学实验
生化反应
药敏试验
结果报告
肠道杆菌的生化反应鉴定
实验三 肠杆菌科细菌检验
目的要求
• 掌握常见肠杆菌科细菌的培养特性和形态染色特征 • 掌握常见肠杆菌科细菌的鉴定技术 • 掌握肠杆菌科微量生化管编码鉴定技术 • 掌握肠杆菌科临床常见致病菌的血清学凝集技术
实验材料
一、菌种: 大肠埃希菌、沙门菌、普通变形杆菌、肺炎克雷伯菌(BAP、 MAC、SS) 二、生化管: KIA、半固体、肠杆菌科微量生化管编码鉴定管(1套/2人)
三、诊断血清:
沙门菌多价 四、其他:
玻片、盐水、接种环(针)、革兰染液、3%H2O2、氧化酶试剂、
液体石蜡
实验内容
一、菌落观察:
大肠埃希菌、沙门菌、普通变形杆菌、肺炎克雷伯菌 (BAP、MAC、SS)
菌落形态、颜色、溶血现象、迁徙生长现象观察与描述
二、形态观察:
所有细菌革兰染色 显微镜下细菌形态、染色性观察与描述
1. 肠杆菌科与其它革兰阴性杆菌区别
2. 初步分三组
苯丙氨酸(-) 苯丙氨酸(+) 苯丙氨酸(-) VP(-) VP(-) VP(+) 埃希菌属 变形杆菌属 克雷伯菌属 沙门菌属 普罗威登斯菌属 肠杆菌属
志贺菌属
枸橼酸菌属 爱德华菌属
摩根菌属
沙雷菌属
哈夫尼亚菌属 耶尔森菌属
3. 肠道杆菌属间鉴定
枸橼酸钠 枸橼酸铁
枸橼酸铁铵 磷酸氢二钠 琼脂
5 15
1
11
11 4
8.5
8.5 1
5
25 0.33 22.5 1000 18 0.33
பைடு நூலகம்
4
20 1.0 70 13.5 0.33 25
1000
煌绿
中性红 水
37
MACC
SS
大肠埃希杆菌呈典型粉红色,乳糖发酵菌落。福氏 痢疾杆菌 菌落小,无色透明,非乳糖发酵菌。 (18hr,37℃)
KIA 菌属 埃希菌属
志贺菌属 沙门菌属 变形杆菌属 克雷伯菌属 斜面 底层 气体 H2S 动力
MIU
吲 哚 + +/ /+ d 脲酶
A
K K K A
A
A A A A
+
+ + +
-
- D/+ +/ - -
+/+ + -
+ +
麦康凯琼脂(MACC)
蛋白胨 20g
氯化钠
琼脂
5g
20-25g
蒸馏水
乳糖
1000ml