戊二醛-银染法

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戊二醛-银染法

(基于Heukeshoven和Dernick的方法,根据以下方案,用戊二醛作为敏化剂进行硝酸银染色)

1.固定

凝胶电泳后,将凝胶在125mL 固定液中固定30分钟(固定液配方:40%EtOH / 10%HAc)

2.敏化

使凝胶在125mL敏化液中反应30分钟(敏化液配方:0.125%戊二醛/0.2%硫代硫酸钠/6.8%乙酸钠溶)

3.洗涤

用125mL去离子水洗涤三次,每次5分钟

4.银染

将凝胶用125mL银染液浸渍20分钟(0.015%甲醛和0.25%硝酸银溶液)

5.洗涤

随后用125mL去离子水洗涤两次,每次1分钟

6.显色

加入125ml显色液还原银离子(显示液配方:0.008%甲醛/3%碳酸钠溶)

7.终止

完成银离子还原后,将凝胶浸入125mL 1.5%EDTA中以停止显影

8.洗涤

用去离子水洗涤。

9.保藏

将染色的凝胶储存在去离子水中或在滤纸上在真空下在65℃下干燥40分钟。

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