Gendre固定液使用说明

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特殊染色和组织化学

特殊染色和组织化学

⒉粘蛋白
在同一种上皮和腺体内常可同时分泌2种 粘液物质,而在同部位的分泌物中两者 的比例和含量都有所不同。
⒉粘蛋白
粘液物质一般具有下列性质: ①对异染性染料具有异染性; ②对碱性染料具有很强的亲和力; ③除胃粘蛋白外,其他粘液遇醋酸时 都会发生沉淀; ④可溶于弱碱性溶液。
2.在心肌病变及其他心血管疾病的研究 用显示糖原的特殊染色,可以观察到由缺 血缺氧所致急性早期心肌坏死病灶内的糖 原明显减少甚至消失,呈均质的浓染状态, 而病灶周围则出现反应性异常糖原增多; 已愈合的心肌梗死灶周围的心肌纤维内可 有糖原颗粒浸润;心肌的横纹肌瘤也有大 量糖原存在。
3.糖原累积病的诊断及研究 用显示糖原的 特染方法可观察到由先天性遗传缺陷引起的 糖原累积病时,心、肝、肾、骨骼肌、单核 吞噬系统等器官内均有大量的糖原堆积。
1、有学者认为从物理学角度看,染色剂和组织 细胞的结合是“溶解”或“吸收”。例如苏丹类染 色剂使脂质着色,就是利用染色剂在脂质中的溶解 度大于在酒精等溶剂中的溶解度这一特性。有些染 色剂是染色剂分子通过渗透和毛细血管作用而被吸 收或沉淀到组织、细胞的小孔中去而着色的‘这种 机制的染色是很少的。
2、另有学者认为染色是染色剂与组织、细胞之间 的化学性结合。如显示含铁血黄素的普鲁士反 应是最典型的例子。
5)蒸馏水洗涤数次。
6)用Schiff试剂浸染5一 10min,如温度低时 可延长浸染时间。
7)倾去Schiff试剂,直 接流水冲洗10min。
8)用明砚苏木素染液浅 染胞核2—3min,过 染时可用o5%盐酸乙 醇液稍分化。
9)流水冲洗5一l0min。
10)乙醇脱水,二甲苯运 明,中性树胶封固。
注意事项
2、类化学方法 有少数方法的染色反应有特 殊性,但机制不明。

4%组织细胞固定液说明书

4%组织细胞固定液说明书

第1页共1页4%组织细胞固定液说明书货号:P1110规格:100mL/500mL保存:常温,有效期1年。

产品说明:该固定液是免疫组织化学(IHC)和免疫细胞化学(ICC)研究中最常用的固定剂之一。

较为温和,能很好地保存组织的抗原性和细微结构,适于组织标本和细胞片的较长期保存,非常适合组织和细胞的光镜免疫化学研究。

本产品是用PBS 配置的组织细胞固定液,可直接用于组织和细胞固定。

若需使用其他低浓度的固定液,可使用0.01M PBS 按比例稀释。

使用说明(仅供参考):组织固定:室温或4℃浸泡固定2-24h ,用缓冲液漂洗后即可石蜡或碳蜡或塑封包埋用于组织切片。

切片固定:室温或4℃固定10min-2h ,视切片厚度而定,用缓冲液漂洗后即可用于染色。

细胞固定:室温或4℃固定10-30min ,用缓冲液漂洗后即可用于染色。

注意事项:为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

相关产品:C1010柠檬酸钠缓冲液0.01mol/L ,pH6.0C1050ELISA 包被液DA1010DAB 显色试剂盒(20×)G1120HE 染色试剂盒P10100.01M PBS 干粉,PH7.2-7.4S2100抗荧光衰减封片剂X10200.1%胰蛋白酶液消化液相关文献:[1]Jingcai Liu,Lan Li,Hongchen Yan,et al.Identification of oxidative stress-related Xdh gene as a di(2-ethylhexyl)phthalate (DEHP)target and the use of melatonin to alleviate the DEHP-induced impairments in newborn mouse ovaries.Journal of Pineal Research.April 2019.(IF 15.221)[2]Tengjiao Ma,Zhiwei Zhang,Yilu Lu,et al.CLOCK and BMAL1stabilize and activate RHOA to promote F-actin formation in cancer cells.Experimental &molecular Medicine.October 2018.(IF 5.584)[3]Chengya Wang,Youyang Qu,Di Wang,et al.The Proangiogenic Roles of Long NonCoding RNAs Revealed by RNA-Sequencing.Cellular Physiology and Biochemistry.(IF 5.500)[4]Zhaoqing Li,Tingting Zhu,Yini Xu,et al.A novel STAT3inhibitor,HJC0152,exerts potent antitumor activity in glioblastoma.American Journal of Cancer Research.April 2019.(IF 4.737)注:更多使用本产品的文献请参考索莱宝官网。

戊二醛固定液(0.25%,电镜专用)

戊二醛固定液(0.25%,电镜专用)

北京雷根生物技术有限公司 戊二醛固定液(0.25%,电镜专用)简介:固定的目的在于保存细胞和组织的原有形态结构,固定剂能阻止内源性溶酶体酶对自身组织和细胞的自溶、抑制细菌和霉菌的生长。

固定剂通过凝固、生成添加化合物等使蛋白质内部结构发生改变,从而使酶失活。

固定剂对细胞核细胞外成分发生物理改变。

固定液主要分为醛类固定液、汞类固定液、醇类固定液、氧化剂类固定液、苦味酸盐类固定液等,较为常用的是醛类中的福尔马林、醇类中的乙醇。

戊二醛固定液会引起蛋白质α-螺旋结构变形,不利于过氧化物酶染色。

戊二醛固定液固定速度快,渗透力差。

Leagene 戊二醛固定液(0.25%,电镜专用)由戊二醛、磷酸盐、去离子水等组成,pH7.2~7.4,该固定液对细胞核、细胞浆的细微结构固定效果好,经常用于电镜标本固定。

组成:操作步骤(仅供参考):1、 根据实验具体要求操作。

2、 取新鲜标本,立即入戊二醛固定液固定,稍大标本应适当延长固定时间。

3、 送检或保存。

注意事项:1、 Leagene 戊二醛固定液有一定腐蚀性,请在通风较好的环境下小心操作, 避免吸入。

2、 组织取材的厚度不同,固定时间也不同。

常规活检组织比较适合的厚度为2~4mm ,一般不超过6mm 。

对组织恰当的选材有利于固定液的渗透。

3、 固定液的容量应足够,一般固定液与组织块的体积比率应大于10:1。

如果容积不够大,可以在固定期间更换1~3次固定液。

4、 温度对固定的影响很明显,提高温度可以加速固定作用,但本固定液最好不要提高温度。

5、 取出新鲜组织后,应及时固定。

无法及时固定时,应保存于生理盐水中及时送检。

6、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

有效期: 12个月有效。

编号 名称 DF0159 Storage 戊二醛固定液(0.25%,电镜专用) 100ml 4℃ 避光 使用说明书 1份。

GENMED 柠檬酸化学法冰冻组织抗原修复处理试剂盒 产品说明书(中文版)

GENMED 柠檬酸化学法冰冻组织抗原修复处理试剂盒 产品说明书(中文版)

GENMED SCIENTIFICS INC. U.S.A GMS40039.3 v.A GENMED柠檬酸化学法冰冻组织抗原修复处理试剂盒产品说明书(中文版)主要用途GENMED柠檬酸化学法冰冻组织抗原修复处理试剂是一种旨在通过柠檬酸缓冲系统,辅以物理加热的强化处理,进行醛类固定的冰冻组织块的抗原修复和暴露,增强免疫化学的染色强度,降低背景噪音的权威而经典的技术方法。

该技术由大师级科学家精心改良、成功实验证明的。

主要适用于醛类处理的冰冻动物组织块的各种抗原的修复,尤其是核蛋白的修复。

产品即到即用,操作简捷,性能稳定,修复显著,敏感可靠。

技术背景组织制片固定时,使用醛类固定剂(例如福尔马林等),会导致醛类分子与组织蛋白产生分子交联,遮蔽了组织抗原。

其原理是在组织蛋白的反应部位(胺、氨类基团、巯基、氢氧基团、芳香环等)形成了亚甲基桥(methylene bridges)。

通过物理热处理和化学处理方法,破坏醛类分子交联,暴露和修复抗原。

产品内容GENMED清理液(Reagent A)XX毫升GENMED固着液(Reagent A)XX毫升GENMED修复液(Reagent B)XX毫升GENMED保护液(Reagent B)XX毫升产品说明书1份保存方式保存在4℃冰箱里,有效保证6月用户自备小型染色缸:用于清理的容器200毫升烧杯:用于修复操作的容器实验步骤1.准备1个6孔细胞培养板2.放进新鲜切除的或冰冻保存的动物组织样本(注意:建议组织大小为0.5厘米厚,1厘米长;如果过大,最好刀切处理一下)3.将组织压平4.小心加入XX毫升GENMED清理液(Reagent A),清洗组织样本5.小心抽去清理液6.小心加入XX毫升GENMED固定液(Reagent B),浸没整个组织7.在4℃条件下孵育2小时8.小心抽去固定液9.小心加入XX毫升GENMED清理液(Reagent A),清洗组织样本10.小心抽去清理液11.小心加入XX毫升GENMED修复液(Reagent C),浸没整个组织12.在4℃条件下孵育16小时13.准备一个200毫升的烧杯14.加入XX毫升GENMED修复液(Reagent C)15.煮沸16.用镊子取出组织,放入到煮沸的GENMED修复液(Reagent C)中17.孵育5分钟18.用镊子取出组织,放入到预冷的XX毫升GENMED保护液(Reagent D)里,浸没整个组织19.在4℃条件下孵育,直至组织块沉入底部20.即刻包埋和冰冻21.放进-80℃冰箱保存22.进行冰冻切片23.继续后续免疫化学染色操作注意事项1.本产品为20次操作2.操作时,须戴手套3.操作时,避免污染母液,尤其是GENMED保护液(Reagent D)4.本公司提供系列组织抗原修复试剂产品质量标准1.本产品经鉴定性能稳定2.本产品经鉴定修复效果显著使用承诺杰美基因秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。

EDTA溶液(0.25molL,pH8.0)

EDTA溶液(0.25molL,pH8.0)

北京雷根生物技术有限公司
EDTA 溶液(0.25mol/L,pH8.0)
简介:
EDTA 溶液(0.25mol/L,pH8.0)是用EDTA.2Na 配制,调pH 至8.0,只有其pH 接近8.0,才能完全溶解。

Leagene EDTA 溶液经高压灭菌处理,用于螯合金属离子等,是常用分子生物学试剂。

组成:
操作步骤(仅供参考):
1、按实验具体要求操作。

注意事项:
1、 实验要求无菌时,应注意无菌操作。

2、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

有效期: 12个月有效。

相关:
编号 名称 ND0080 Storage EDTA 溶液(0.25mol/L,pH8.0) 500ml RT 使用说明书 1份
编号 名称 DH0006 苏木素伊红(HE)染色液 PE0080 Tris-HCl 缓冲液(1mol/L,pH6.8) PE0103 Acr-Bis(30%,29:1) PS0013 RIPA 裂解液(强) R00195 Tris-EDTA 缓冲液(10×TE,pH8.0) R00300
X-gal(20mg/ml) TC1213 总胆固醇(TC)检测试剂盒(COD-PAP 单试剂比色法)。

FAA固定液使用说明

FAA固定液使用说明

FAA固定液编号名称北京派瑞金LB9429FAA固定液FAA固定液简介:固定液主要分为醛类固定液、汞类固定液、醇类固定液、氧化剂类固定液、苦味酸盐类固定液等,较为常用的是醛类中的福尔马林、醇类中的乙醇。

FAA固定液又称酒精醋酸福尔马林混合固定液或AAF、AAF固定液,主要由乙醇(A)、乙酸(A)、甲醛(F)组成,兼有脱水作用。

AAF固定液常用于快速脱水和固定以及冷冻切片的快速固定。

FAA固定液操作步骤(仅供参考):1、取新鲜组织入AFA固定液,置于冰箱内低温固定。

2、常规石蜡切片因固定不佳导致染色效果不满意时,可在染色前再用AAF固定液固定,染色效果会有明显提高。

FAA固定液注意事项:1、AAF固定液对人体有一定的损害,请在通风好的环境下小心操作,避免吸入。

2、固定液pH最好接近用中性,pH范围6~8。

3、组织取材的厚度不同,固定时间也不同,对组织恰当的选材有利于固定液的渗透。

常规活检组织比较适合的厚度为2~4mm,一般不超过6mm。

4、温度对固定的影响很明显,提高温度可以加速固定作用,但温度不宜过高。

5、取出新鲜组织后,应及时固定,无法及时固定时,应保存于生理盐水中及时送检。

保存条件:RT避光,12个月有效。

FAA固定液相关的固定液:乙醇-甲醛固定液Altmann固定液Maximov固定液甲醛-生理盐水固定液Allen B-15固定液Lillie甲醛中性固定液铬-醋酸固定液乙醇-甲醛固定液,A-F固定液Lichent's固定液多聚甲醛-磷酸缓冲固定液Picric acid-硫酸固定液Kolmer固定液Zirkle-Erliki固定液甲醛-乙酸-乙醇固定液Kleinenberg's(克来宁堡氏)固定液Susa固定液多聚甲醛-氢氧化钠固定液Karnovsky固定液Schaudinn(绍丁)固定液对苯醌固定液Hollande固定液Marchi固定液Zetterqvist固定液Helly固定液Karnovsky改良固定液Zenker固定液Gendre固定液Houseby固定液Zamboni固定液Flemming固定液Heidenhain(海登汉)固定液Verhoeff固定液ECD-G固定液Goldsmith固定液Rossman固定液Champy固定液Gilson固定液Romeis固定液Carnoy固定液Davidson固定液PLP固定液Carnoy-LeBrun固定液Dafano固定液PLPD固定液Champy固定液,Champy’s Fluid Carl固定液,卡尔固定液PFG固定液Helly固定液,Helly SolutionCajal甲醛-溴化铵固定液(FAB)Orth固定液AAF固定液Brasil固定液Nawaschin’s固定液卡诺氏固定液,Carnoy Fluid Bouin固定液Muller固定液Bouin固定液,Bouin氏固定液B-5固定液Mirsky's固定液Zetterqvist固定液Aoyama固定液Methacarn固定液组织细胞固定液。

石蜡包埋切片技术

石蜡包埋切片技术

石蜡包埋切片技术实验目的:1、学习石蜡包埋切片技术的基本原理和基本步骤;2、掌握石蜡包埋切片技术。

实验原理:大家在生物学实验时,曾经观察过动物组织和植物组织的切片。

通过光学显微镜,我们可以观察到细胞内部的结构(例如细胞核、细胞质、肌肉组织的横纹等)、细胞相互间的联系以及组织的构成等。

那么,如何来制作这种切片呢?其过程是比较复杂的,我们利用3—4次实验来学习组织切片的制作。

大家知道,我们要在显微镜下研究生物体的内部结构,在自然状态下是无法观察的,因为整个动、植物体大部分都是不透明的,不能直接在显微镜下观察,一定要经过特殊的处理,使要观察的材料先减少它的厚度和体积,使光线能透过才能用显微镜观察。

通常应用的有两种方法:一种是非切片法,即用物理或化学的方法将生物体组织分离成为单个细胞或薄片,例如我们在生物学实验曾做过口腔上皮的观察、洋葱鳞茎表皮的观察。

这种方法的不足之处在于细胞彼此间相互的联系不一定观察到。

另外一种为切片法,即用刀将标本切成薄片。

非切片法比较简单,一学就会,我们这里不作介绍。

切片法也分徒手切片法和切片机切片法。

最简单的切片法是将新鲜植物材料直接用刀切成薄片,称之为徒手切片法。

切片机切片法是用特殊的切片机来切片,切片的厚度可薄到几个微米。

因此,切片机的发明与应用也是细胞学诞生的重要因素。

切片机切组织用的也是刀(切片刀),所要切的组织要有一定的软硬度,如刀切肉(新鲜、冷冻)。

但大部分生物材料比较柔软,所以为了能切出薄片,必须先使所切材料有一定的软硬度。

一些包埋剂可以达到这个目的,如石蜡,它融化时可渗入到组织内部;凝固时,使整个组织有一定的软硬度,正好能切出很薄的切片,故称为石蜡包埋切片法。

另外还有火棉胶包埋切片法(火棉胶做包埋剂)、冰冻切片法(使组织冷冻到一定的硬度)等。

其中最常用的切片方法还是石蜡包埋切片法,我们这里重点学习石蜡包埋切片技术。

实验器材:(一)小鼠、小广口瓶、标签、量筒、烧杯、95%酒精、无水酒精、蒸馏水、手术刀、剪刀、镊子、平皿、石蜡块、滤纸、甲醛液、苦味酸、冰醋酸、移液管、洗耳球。

多聚甲醛-氢氧化钠固定液使用说明

多聚甲醛-氢氧化钠固定液使用说明

多聚甲醛-氢氧化钠固定液Paraformaldehyde-Sodium hydroxide Fixative Solution编号名称规格单位北京华越洋WG00590多聚甲醛-氢氧化钠固定液250ml瓶多聚甲醛-氢氧化钠固定液用途:多聚甲醛-氢氧化钠固定液为甲醛,磷酸二氢钠,氢氧化钠混合液,pH为7.2-7.4。

多聚甲醛-氢氧化钠固定液适用于光镜和电镜免疫细胞化学研究,用于免疫电镜时最好加入少量新鲜配制的戊二醛。

多聚甲醛-氢氧化钠固定液条件温和,组织固定于该液中,4℃保存数月,仍可以获得满意的染色效果。

多聚甲醛-氢氧化钠固定液固定时间:15分钟-2小时。

保存条件:4℃,有效期1年。

多聚甲醛-氢氧化钠固定液固定时的注意事项:(1)固定液量:20倍于材料的体积,以免固定液被稀释。

(2)选择合适的固定液:渗透力强的固定液既可以迅速进入组织中,又不使组织过度收缩或膨胀。

(3)固定的时间要合适:与材料的大小和温度有关:材料大则时间长,材料小则时间短;温度高则时间短,温度低则时间长。

经固定的材料如不及时使用,可以经过90%酒精换到70%酒精中各半小时,再换入一次70%酒精,在0-4℃冰箱内可保存半年。

经过较长时间保存的材料进行观察前可以换新的固定液再处理一次,效果较好。

多聚甲醛-氢氧化钠固定液固定的条件:(1)迅速渗入组织,杀死原生质。

在杀死的短时期中,细胞形态不致有所变化。

(2)必须具有渗透力,对组织各部分的渗透力相等,可使组织内外完全固定。

(3)尽可能避免使组织膨胀或收缩。

(4)使细胞内的成分凝固或沉淀。

(5)增加细胞内含物的折光程度,易于鉴别。

(6)增加媒染作用和染色能力。

(7)使组织变硬,具有一定的硬度。

(8)固定以后能起到保存的作用。

(9)在凝固原生质以后,增加细胞对于各种穿透的抵抗力,不致于因以后的处理而使固定的原生质变形。

华越洋多聚甲醛-氢氧化钠固定液其他相关固定液:通用组织细胞固定液Champy固定液Helly固定液AAF固定液Bouin固定液戊二醛固定液Zetterqvist固定液多聚甲醛-氢氧化钠固定液Brasil固定液Dafano固定液Gendre固定液Methacarn固定液A-F固定液。

EDTA抗原修复液(1×)使用方法及注意事项

EDTA抗原修复液(1×)使用方法及注意事项

EDTA抗原修复液(1×)使用方法及注意事项EDTA抗原修复液(1×)使用方法及注意事项货号:C1033规格:100ml/500ml保存:室温密封保存,有效期12个月。

产品说明:细胞或组织用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后,会导致细胞内抗原形成醛键、羧甲键而被封闭了部分抗原决定簇,同时蛋白之间发生交联而使抗原决定簇隐蔽,导致免疫染色时染色信号减弱,甚至出现一些假阴性染色结果。

所以要求在进行免疫组化染色时,需要先进行抗原修复或暴露,即将固定时分子之间所形成的交联破坏,而恢复抗原的原有空间形态。

从而提高抗原的检出率,降低背景染色,提高检测的准确性。

EDTA抗原修复液(EDTA Antigen Retrieval solution,1×)是一种常用的抗原修复液,可以用于石蜡切片、冰冻切片等样品使用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后的抗原修复。

可以有效去除醛类固定试剂导致的蛋白之间的交联,充分暴露石蜡切片等样品中的抗原表位,从而大大改善免疫染色效果。

通常石蜡切片都需进行抗原修复处理,而冰冻切片可以不进行抗原修复处理。

抗原修复可以提高石蜡切片的免疫染色效果,亦可以不同程度的提高冰冻切片的染色效果。

当冰冻切片免疫染色效果不理想时,考虑进行抗原修复。

按照每个片子需要10ml抗原修复液(1×)计算,100ml抗原修复液(1×)可以用于10个样本的抗原修复。

使用方法:1.对于石蜡切片:a.脱蜡:二甲苯3次,每次3-5min→无水乙醇2次,每次3-5min →95%乙醇1次,3-5min→90%乙醇1次,3-5min→75%乙醇1次,3-5min→蒸馏水洗2次,每次3-5min。

b.抗原修复:将切片浸泡在抗原修复液(1×)中,95-100℃加热约15 min(加热时间可以控制在10-20min内,最佳的加热时间需根据不同的样品和目的蛋白自行摸索)。

抗原修复液(1×)使用前需预热到95-100℃。

4、PAS反应法显示糖原及其它多糖

4、PAS反应法显示糖原及其它多糖
PAS反应法显示糖原及其它多糖
• 实验目的:
1、了解PAS反应法显示糖原及多糖的原理;
2、掌握PAS反应法。
实 验 原 理
• 多糖:是单糖分子以糖苷键结合成大分子的化 合物。 • 凡是化学结构上含有多糖分子的物质都被称为 多糖类。包括:糖原、粘多糖、糖蛋白和糖脂 类。 • 多糖类物质存在于机体内很多组织和细胞,比 如肝细胞、肌肉细胞、消化道和呼吸道的粘液 细胞、软骨基质、基底膜、胶原纤维等。 • 多糖分子一般含有乙二醇基(-CHOH-CHOH-)
实验步骤
• 组织块用Gendre氏液固定,石蜡包埋切片。 1、取两张连续切片,分别记作A、B片。把B片 脱蜡、复水; 2、把B片用预热至37℃的唾液于37℃温箱消化 30 min; 3、取出B片稍水洗; 4、在B片消化过程中,把A片脱蜡、复水;
实验步骤
5、A、B片同时滴加0.5%过碘酸液5~8 min; 6、流水冲洗2 min,再用蒸馏水洗1次;
7、滴加Schiff氏液,置于暗处、并加盖作用10~20 min;
8、滴加0.5%偏重亚硫酸钠液2次,每次约1 min;
9、流水冲洗5 min;
10、苏木精液复染细胞核2~3 min; 11、稍水洗; 12、擦干载玻片,从95%酒精开始脱水,透明,树胶 封片;
13、显微镜观察,判断结果。
• 糖原——可以被淀粉酶消化,但其他多糖— —不被淀粉酶消化。
• 因此,如果结合同时用淀粉酶消化,将消化 的与未消化的切片做比较,即可鉴定糖原。
实 验 原 理
• 糖原仅存于动物体内,主要在肝细胞和骨骼 肌细胞内合成,一般位于细胞质基质内。 • 糖原易溶于水,所以若想检测糖原,一般应 避免用水溶性的固定液(如福尔马林液、 Bouin氏液等)进行固定。 • 用于固定糖原的固定液有无水乙醇、Gendre 氏液等。 • 但这几种固定液都有使糖原流动到细胞一侧 的 原 理

病理科操作规范及流程

病理科操作规范及流程

病理标本的验收标准及流程病理科应有专人验收普通活体组织病理学检查(常规活检)申请单和送检的标本。

(二)病理科验收人员必须:1.同时承受同一患者的申请单和标本。

2.认真核对每例申请单与送检标本及其标志〔联号条或其他写明患者姓名、送检单位和送检日期等的标记〕是否一致;对于送检的微小标本,必须认真核对送检容器内或滤纸上是否确有组织及其数量。

发现疑问时,应立即向送检方提出并在申请单上注明情况。

3.认真检查标本的标志是否牢附于放置标本的容器上。

4.认真查阅申请单的各工程是否填写清楚,包括:①患者根本情况[、性别、年龄,送检单位〔医院、科室〕、床位、门诊号/住院号、送检日期、取材部位、标本数量等],②患者临床情况[病史〔病症和体征〕、化验/影象学检查结果、手术〔包括内镜检查〕所见、既往病理学检查情况〔包括原病理号和诊断〕和临床诊断等]。

5.在申请单上详细记录患者或患方有关人员的号码,以便必要时进展联络,并有助于随访患者。

(三)验收标本人员不得对申请单中由临床医师填写的各项内容进展改动。

不合格标本的处理标准与程序1.申请单与相关标本未同时送达病理科;2.申请单中填写的内容与送检标本不符合;3.标本上无有关患者姓名、科室等标志;4.申请单内填写的字迹潦草不清;5.申请单中漏填重要工程;6.标本严重自溶、腐败、干涸等;7.标本过小,不能或难以制做切片;8.其他可能影响病理检查可行性和诊断准确性的情况。

病理科不能接收的申请单和标本一律当即退回申请医师,不予存放,并记录。

病理标本检查和取材标准及程序1.取材前阅读申请单中的内容,初步判断病变的性质。

2.核对申请单的编号与标本的编号、标本的份数是否相符。

3.对于核对无误的标本应按以下程序取材:3.1小标本和不完整的标本通常为活检标本,应按如下标准取材。

3.1.1应描述和记录送检标本的数量〔少量时准确计算,多量时进展估计〕、大小〔假设干mm或cm;多量时聚拢测量〕、形状、色泽和质地等。

组织固定液的使用

组织固定液的使用

谈谈固定液的使用作者: liza3(站内联系TA)发布: 2013-01-11当前,应用于固定试剂的种类较多,它们对于固定不同的组织成分起着不同的作用,因此我们在使用时应该了解不同固定剂的效能,才能合理的固定组织。

根据Bencroft的分类法,将不同的固定剂分为四种类型:Ⅰ类:醛类,甲醛,戊二醛,多聚甲醛,丙烯醛,已二醛,丙二醛等。

Ⅱ类:氧化剂类,四氧化锇(奥酸),高锰酸钾,重铬酸钾等。

Ⅲ类:蛋白变性类,甲醇,乙醇,醋酸等。

Ⅳ类:其他,氯化汞,苦味酸等。

上述四种类型的固定剂,最常使用的是甲醛,其余的也在其它病理技术方面中用到。

下面根据使用的需要,将着重介绍几种常用的固定剂。

(1)甲醛甲醛商品名为福尔马林,一般市售的含甲醛37—40%,由甲醛气体饱和于水而成,比重为1.12。

它也可以稳定的固体形式存在,它的成分为高分子量的聚合体,称为多聚甲醛。

甲醛溶液较难纯化,在每批市售商品中,都含有不少的杂质如甲醇,这种在组织化学方法当中,能使酶钝化,影响其反应。

甲酸,它可使固定液变酸,在陈列标本或长时间固定的组织,由于酸的作用,往往细胞核染色欠佳。

甲醛有效固定作用的要点是,在蛋白质末端基团之间形成交联链。

参与甲醛固定蛋白质的基团,主要为氨基,亚氨基及酰氨基,肽,胍基,羟基,SH和芳香环。

甲醛与组织蛋白类的反应是多样和复杂的,因为它能和多种不同的功能基团结合,在多数情况下在其间形成桥键。

甲醛有这种交联的功能,也是它的缺点,在用甲醛固定过的组织中,需要做免疫组化的,往往提倡用酶消化或热抗原修复法来使蛋白与甲醛交联的醛键断裂开,以利于后来的染色。

甲醛可配成简单的或混合的固定液,最简单和最容易掌握的方法,就是取10ml甲醛液,加水90ml,这就是10%的福尔马林.当然,现在使用的固定液要求较为严格些,最好是使用缓冲福尔马林固定液,这将有利于后来的免疫组化染色的需要.从组织学的观点来说,甲醛是一种良好的固定剂,它有很多的优点:1. 组织收缩较少,损伤少,保存固有物质好.2. 固定均匀,穿透力强.3. 能使组织硬化,增进组织弹性,有利于切片.4. 能保存脂肪及脂类物质.5. 成本较低.虽然甲醛有上述的优点,但这都是相对而言,任何物质都不可能十全十美的,它也有许多缺点:1. 杂质含量较多,如甲醇,可钝化酶类,影响反应.2. 含有微量甲酸,导致固定液酸变,影响染色.3. 可产生福尔马林色素,影响观察.4. 不能固定尿酸和糖类物质.5. 容易挥发,污染环境,可导致标本干涸.6. 可长期存在于固定过的组织上.有人做过实验,组织用甲醛固定后在流水中冲洗5小时后,仍留有相当多的甲醛与蛋白质相结合,但需要经过长时间的流水冲洗(24天的冲洗)方能除去.可见存在于组织上的甲醛是不可能除去的.因为临床活检不可能有这么长的时间来冲洗组织.因此要特别指出的是,在其后的各种技术操作中,要特别注意到甲醛的存在,必须要想办法除去它,否则将会给各种染色造成影响,甚至导致失败。

组织固定液

组织固定液

组织固定液北京华越洋生物------------------------------------------------------AAF固定液500ml 固定液40% 室温,避光,12个月组织化学中细胞或组织切片的固定。

主要由乙醇、冰乙酸、甲醛等组成。

常用于快速脱水和固定以及冷冻切片的快速固定。

AAF固定液5L 固定液40% 室温,避光,12个月组织化学中细胞或组织切片的固定。

主要由乙醇、冰乙酸、甲醛等组成。

常用于快速脱水和固定以及冷冻切片的快速固定。

Davidson's fixative 100ml 固定液40% 室温,避光,12个月Davidson's fixative 500ml 固定液40% 室温,避光,12个月Bouin's固定液100ml 固定液40% 室温,避光,6个月活检标本的固定、媒染剂、适用于脂肪较多的组织标本。

主要由PA溶液、甲醛、乙酸组成。

Bouin's固定液500ml 固定液40% 室温,避光,6个月活检标本的固定、媒染剂、适用于脂肪较多的组织标本。

主要由PA溶液、甲醛、乙酸组成。

改良乙醇Bouin固定液 100ml 固定液40% 室温,避光,12个月固定肾活检组织,组织学制备固定液,亦可以很好的保存糖原主要由乙醇、甲醛、乙酸乙酯等组成。

改良乙醇Bouin固定液 500ml 固定液40% 室温,避光,12个月固定肾活检组织,组织学制备固定液,亦可以很好的保存糖原主要由乙醇、甲醛、乙酸乙酯等组成。

Carnoy固定液100ml 固定液40% 室温,避光,12个月又称卡诺氏固定液,RNA\DNA染色的固定,糖原的固定,能清除血性标本,可以用于细胞学固定Carnoy固定液500ml 固定液40% 室温,避光,12个月又称卡诺氏固定液,RNA\DNA染色的固定,糖原的固定,能清除血性标本,可以用于细胞学固定Carnoy固定液Ⅱ100ml 固定液40% 室温,避光,12个月又称卡诺氏固定液,RNA\DNA染色的固定,糖原的固定,能清除血性标本,可以用于细胞学固定Carnoy固定液Ⅱ500ml 固定液40% 室温,避光,12个月又称卡诺氏固定液,RNA\DNA染色的固定,糖原的固定,能清除血性标本,可以用于细胞学固定BS固定液500ml 固定液40% 室温,6个月细胞核染色固定,尤其适用于DNA染色。

一些固定液及方法介绍

一些固定液及方法介绍

一些固定液及方法介绍前,免疫细胞化学研究中常用的固定剂仍为醛类固定剂,其中以甲醛类和戊二醛最为常用。

在此,简要介绍几种目前较为常用和推荐的固定剂,以供读者选用。

1.4%多聚甲醛-0.1mol/L磷酸缓冲液(pH7.3)试剂:多聚甲醛40g0.1mol/L磷酸缓冲液至1000ml配制方法:称取40g多聚甲醛,置于三角烧瓶中,加入500~800ml 0.1mol/L磷酸缓冲液(Phosphate Buffer以下简称PB),加热至60℃左右,持续搅拌(或磁力搅拌)使粉末完全溶解,通常需滴加少许1N NaOH才能使溶液清亮,最后补足0.1mol/L的PB于1000ml,充分混匀。

该固定剂较适于光镜免疫细胞化学研究,最好是动物经灌注固定取材后,继续浸泡固定2~24h。

另外,该固定剂较为温和,适于组织标本的较长期保存。

2.4%多聚甲醛-磷酸二氢钠/氢氧化钠试剂:A液:多聚甲醛40g蒸馏水400mlB液:Na2HPO4•2H2O16.88g蒸馏水300mlC液:NaOH 3.86g蒸馏水200m配制方法:A液最好在500ml的三角烧瓶中配制(方法同前),至多聚甲醛完全溶解后冷却待用。

注意,在溶解多聚甲醛时,要尽量避免吸入气体或溅入眼内。

B液和C液配制好后,将B液倒入C液中,混合后再加入A液,以1N NaOH或1N HCl 将pH调至7.2~7.4,最后,补充蒸馏水至1000ml充分混合,4℃冰箱保存备用。

该固定剂适于光镜和电镜免疫细胞化学研究,用于免疫电镜时,最好加入少量新鲜配制的戊二醛,使其终浓度为0.5%~1%。

该固定剂较温和,适于组织的长期保存。

组织标本于该固定液中,4℃冰箱保存数月仍可获得满意的染色效果。

3.Bouin's液及改良Bouin's液试剂:饱和苦味酸40%甲醛250ml冰醋酸50ml配制方法:先将饱苦味酸过滤,加入甲醛(有沉淀者禁用),最后加入冰醋酸,混合后存于4℃冰箱中备用。

Regaud固定液

Regaud固定液

北京雷根生物技术有限公司
Regaud 固定液
简介:
固定液主要分为醛类固定液、汞类固定液、醇类固定液、氧化剂类固定液、苦味酸盐类固定液等,较为常用的是醛类中的福尔马林、醇类中的乙醇。

Leagene Regaud 固定液(Regaud Fluid )又称Möller 液,由重铬酸盐溶液和福尔马林组成,是骨组织的特殊固定剂,其他组织很少用该固定液,在某些情况下不能用含汞的骨组织染色。

组成:
操作步骤(仅供参考):
1、 按实验具体要求操作,临用前按试剂(A):试剂(B)=4:1充分混合,即配即用。

注意事项:
1、 组织取材的厚度不同,固定时间也不同,对组织恰当的选材有利于固定液的渗透。

常规活检组织比较适合的厚度为2~4mm ,一般不超过6mm 。

2、 固定液的容量应足够,一般固定液与组织块的体积比率应大于10:1。

3、 温度对固定的影响很明显,提高温度可以加速固定作用,但温度不宜过高。

4、 取出新鲜组织后,应及时固定,无法及时固定时,应保存于生理盐水中及时送检。

编号 名称 DF0075 Storage 试剂(A): Regaud 溶液 400ml RT 避光 试剂(B): 福尔马林溶液 100ml RT 避光 使用说明书 1份。

Gendre固定液使用说明

Gendre固定液使用说明

Gendre固定液使用说明Gendre固定液Gendre Fixative Solution编号名称规格单位北京华越洋WG03593Gendre固定液100ml,500ml瓶Gendre固定液用途:固定的目的在于保存细胞和组织的原有形态结构,固定剂能阻止内源性溶酶体酶对自身组织和细胞的自溶、抑制细菌和霉菌的生长。

Gendre固定液(Gendre Fixative Solution)类似于Bouin's固定液,主要由PA、甲醛、乙醇、乙酸混合而成,PA可沉淀蛋白引起组织收缩,但不会使组织硬化,其与甲醛和乙酸混合后,穿透度加快,固定均匀,组织收缩轻微,对细胞的微细结构显示的很清晰,为一种良好的固定液。

该固定液主要用于保存糖原,保存的糖原呈粗大颗粒状,小块组织细胞固定数小时至过夜后直接转入95%的乙醇脱水,其缺点是易把糖原推向细胞的一端,造成人为的“极化现象”。

Gendre固定液固定时的注意事项:1、Gendre Fixative Solution对人体有一定的损害,请在通风好的环境下小心操作,避免吸入。

2、2、组织取材的厚度不同,固定时间也不同,对组织恰当的选材有利于固定液的渗透。

常规活检组织比较适合的厚度为2~4mm,一般不超过6mm。

3、固定液的容量应足够,一般固定液与组织块的体积比率应大于10:1。

如果容积不够大,可以在固定期间更换1~3次固定液。

4、温度对固定的影响很明显,提高温度可以加速固定作用,但温度不宜过高。

5、取出新鲜组织后,应及时固定,无法及时固定时,应保存于生理盐水中及时送检。

Gendre固定液固定的条件:1、一般需固定4h至整夜。

如果组织块大,可适当延长固定时间,但不宜超过24h。

2、固定后,组织可稍微流水冲洗或不冲洗直接转入70%的乙醇脱水,经乙醇脱水时可除去大部分PA,组织留有一点黄色,对染色也无影响。

Gendre固定液保存条件:RT,避光。

有效期半年。

华越洋Gendre固定液其他相关固定液:Bouin固定液,Bouin氏固定液:特别适用于睾丸活检组织的固定。

组织固定液的使用之欧阳美创编

组织固定液的使用之欧阳美创编

作者: liza3(站内联系TA)发布: 2013-01-11当前,应用于固定试剂的种类较多,它们对于固定不同的组织成分起着不同的作用,因此我们在使用时应该了解不同固定剂的效能,才能合理的固定组织。

根据Bencroft的分类法,将不同的固定剂分为四种类型:Ⅰ类:醛类,甲醛,戊二醛,多聚甲醛,丙烯醛,已二醛,丙二醛等。

Ⅱ类:氧化剂类,四氧化锇(奥酸),高锰酸钾,重铬酸钾等。

Ⅲ类:蛋白变性类,甲醇,乙醇,醋酸等。

Ⅳ类:其他,氯化汞,苦味酸等。

上述四种类型的固定剂,最常使用的是甲醛,其余的也在其它病理技术方面中用到。

下面根据使用的需要,将着重介绍几种常用的固定剂。

(1)甲醛甲醛商品名为福尔马林,一般市售的含甲醛37—40%,由甲醛气体饱和于水而成,比重为1.12。

它也可以稳定的固体形式存在,它的成分为高分子量的聚合体,称为多聚甲醛。

甲醛溶液较难纯化,在每批市售商品中,都含有不少的杂质如甲醇,这种在组织化学方法当中,能使酶钝化,影响其反应。

甲酸,它可使固定液变酸,在陈列标本或长时间固定的组织,由于酸的作用,往往细胞核染色欠佳。

甲醛有效固定作用的要点是,在蛋白质末端基团之间形成交联链。

参与甲醛固定蛋白质的基团,主要为氨基,亚氨基及酰氨基,肽,胍基,羟基,SH和芳香环。

甲醛与组织蛋白类的反应是多样和复杂的,因为它能和多种不同的功能基团结合,在多数情况下在其间形成桥键。

甲醛有这种交联的功能,也是它的缺点,在用甲醛固定过的组织中,需要做免疫组化的,往往提倡用酶消化或热抗原修复法来使蛋白与甲醛交联的醛键断裂开,以利于后来的染色。

甲醛可配成简单的或混合的固定液,最简单和最容易掌握的方法,就是取10ml甲醛液,加水90ml,这就是10%的福尔马林.当然,现在使用的固定液要求较为严格些,最好是使用缓冲福尔马林固定液,这将有利于后来的免疫组化染色的需要.从组织学的观点来说,甲醛是一种良好的固定剂,它有很多的优点:1. 组织收缩较少,损伤少,保存固有物质好.2. 固定均匀,穿透力强.3. 能使组织硬化,增进组织弹性,有利于切片.4. 能保存脂肪及脂类物质.5. 成本较低.虽然甲醛有上述的优点,但这都是相对而言,任何物质都不可能十全十美的,它也有许多缺点:1. 杂质含量较多,如甲醇,可钝化酶类,影响反应.2. 含有微量甲酸,导致固定液酸变,影响染色.3. 可产生福尔马林色素,影响观察.4. 不能固定尿酸和糖类物质.5. 容易挥发,污染环境,可导致标本干涸.6. 可长期存在于固定过的组织上.有人做过实验,组织用甲醛固定后在流水中冲洗5小时后,仍留有相当多的甲醛与蛋白质相结合,但需要经过长时间的流水冲洗(24天的冲洗)方能除去.可见存在于组织上的甲醛是不可能除去的.因为临床活检不可能有这么长的时间来冲洗组织.因此要特别指出的是,在其后的各种技术操作中,要特别注意到甲醛的存在,必须要想办法除去它,否则将会给各种染色造成影响,甚至导致失败。

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Gendre固定液
Gendre Fixative Solution
编号名称规格单位
北京华越洋WG03593Gendre固定液100ml,500ml瓶
Gendre固定液用途:
固定的目的在于保存细胞和组织的原有形态结构,固定剂能阻止内源性溶酶体酶对自身组织和细胞的自溶、抑制细菌和霉菌的生长。

Gendre固定液(Gendre Fixative Solution)类似于Bouin's固定液,主要由PA、甲醛、乙醇、乙酸混合而成,PA可沉淀蛋白引起组织收缩,但不会使组织硬化,其与甲醛和乙酸混合后,穿透度加快,固定均匀,组织收缩轻微,对细胞的微细结构显示的很清晰,为一种良好的固定液。

该固定液主要用于保存糖原,保存的糖原呈粗大颗粒状,小块组织细胞固定数小时至过夜后直接转入95%的乙醇脱水,其缺点是易把糖原推向细胞的一端,造成人为的“极化现象”。

Gendre固定液固定时的注意事项:
1、Gendre Fixative Solution对人体有一定的损害,请在通风好的环境下小心操作,避免吸入。

2、2、组织取材的厚度不同,固定时间也不同,对组织恰当的选材有利于固定液的渗透。

常规活检组织比较适合的厚度为2~4mm,一般不超过6mm。

3、固定液的容量应足够,一般固定液与组织块的体积比率应大于10:1。

如果容积不够大,可以在固定期间更换1~3次固定液。

4、温度对固定的影响很明显,提高温度可以加速固定作用,但温度不宜过高。

5、取出新鲜组织后,应及时固定,无法及时固定时,应保存于生理盐水中及时送检。

Gendre固定液固定的条件:
1、一般需固定4h至整夜。

如果组织块大,可适当延长固定时间,但不宜超过24h。

2、固定后,组织可稍微流水冲洗或不冲洗直接转入70%的乙醇脱水,经乙醇脱水时可除去大部分PA,组织留有一点黄色,对染色也无影响。

Gendre固定液保存条件:RT,避光。

有效期半年。

华越洋Gendre固定液其他相关固定液:
Bouin固定液,Bouin氏固定液:特别适用于睾丸活检组织的固定。

戊二醛固定液
Zetterqvist固定液
组织细胞固定液
AAF固定液:广泛用于动植物组织的固定和各种实验检测,植物固定则是首选.固定液渗透均一,速度很快.固定时间一般为
4~24h.此液处理后,染色结果细腻,但酸性染料着色力下降.本液配制后可以短时间放置.
卡诺氏固定液,CarnoyFluid:穿透能力强,可很好的固定细胞质和细胞核,特别适合于固定外膜致密的组织,亦适用于糖原及尼氏小体的固定。

Zenker固定液:经此液固定的标本,细胞核和细胞质染色颇为清晰,但成本较昂贵且需特殊处理汞。

该固定液要避免接触阳光,以免引起化学变化而失效。

B5固定液:多用于固定淋巴组织。

乙醇-甲醛(乙醇-福尔马林,AF)固定液:适用于皮下组织中肥大细胞的固定。

该固定液有固定兼脱水作用,固定后的标本可直接入95%乙醇脱水。

Schaffer氏甲醛—酒精固定液:此液对固定肥大细胞颗粒及粘液效果良好。

Zamboni固定液:用于免疫组化和免疫电镜的首选固定液,保存细微结构和抗原特性最好的固定液之一。

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