组织固定液
固定液和组织的比例依据
固定液和组织的比例依据
固定液和组织的比例是根据所需固定的组织的大小和类型来确定的。
一般而言，常用的固定液和组织的比例是10:1，即10部分的固定液与1部分的组织混合。
然而，不同的组织类型可能需要不同的比例。
以下是一些常用的组织固定液比例：
1. 大体组织：对于较大的器官或动物组织，通常使用10%缓冲福尔马林溶液（10% buffered formalin）固定。
这意味着将10部分的缓冲福尔马林溶液和1部分的组织混合。
2. 细胞和细胞簇：对于大部分细胞和细胞簇的固定，一般使用4%缓冲福尔马林溶液。
这意味着将4部分的缓冲福尔马林溶液和1部分的细胞或细胞簇混合。
3. 骨骼组织：对于骨骼组织的固定，常用的固定液是10%缓冲福尔马林溶液或中性缓冲福尔马林溶液。
需要较长的固定时间。
除了以上常用的固定液比例外，还有其他特殊组织和细胞类型可能需要不同的固定液比例。
此外，固定时间和固定温度也会影响固定效果，需要根据具体实验要求进行调整。
因此，最好根据实验需要和参考相关文献确定合适的固定液和组织比例。
组织固定液说明书
组织固定液说明书【产品名称】通用名称：组织固定液商品名称：10%中性缓冲福尔马林固定液-即用型【包装规格】3ml、5ml、10ml、15ml、30ml、50ml、10L、20L【型号】ANBF01【预期用途】用于新鲜组织样本的固定。
【作用原理】固定是将组织浸入化学溶剂，使细胞内的物质尽量保持其生活状态时的结构和位置，并尽量保存组织中的抗原，使其不被破坏或扩散。
醛类固定液是一种交联性组织固定剂，主要通过使蛋白质分子发生交联而产生固定作用，中性福尔马林固定液采用磷酸氢二钠、磷酸二氢钠调节其pH值至中性，能最大限度地保护组织抗原，固定效果及对组织抗原性的保存均优于一般的甲醛溶液，是生物组织最常用的固定液。
【主要组成成分】主要由甲醛、磷酸氢二钠，磷酸二氢钾组成。
【储存条件及有效期】室温、防潮、防晒、阴凉处密封保存，储存条件下有效期24个月。
【适用仪器】染色结果适用于光学显微镜观察【样本要求】本试剂盒适用于新鲜生物组织。
【检验方法】1、将组织标本固定液编号、写上姓名等；2、组织标本的体积与组织固定液体积的比例为1：4，将离体组织及时浸入组织固定液中，一般不超过5分钟，固定时间为2至12小时。
【检验方法的局限性】1、含有微量甲酸,导致固定液酸变,影响染色。
2、不能固定尿酸和糖类物质。
3、容易挥发,污染环境,可导致标本干涸。
【产品性能指标】1、PH值：6.8～7.5，且瓶间差异不大于0.2，批间差异不大于0.2。
2、甲醛含量：4%～4.2%。
3、常温下，经固定液固定3h后的组织，经切片后在显微镜下观察，应细胞核清晰，无收缩现象。
【注意事项】1、注意使用时通风；2、忌新旧液混合使用；3、避免使用时接触皮肤、粘膜；4、本品仅用于体外诊断。
组织固定液是什么
安徽雷根生物技术有限公司 组织固定液说明书【产品名称】组织固定液【包装规格】货号：DF0111包装规格分别为：500ml、5000ml。
【预期用途】用于新鲜组织标本的固定。
【检验原理】固定的目的在于保护细胞和组织的原有形态结构，固定剂能阻止内源性溶酶体酶对自身组织和细胞的自溶、抑制细菌和霉菌的生长，通过凝固、生成添加化合物等使蛋白质内部结构发生改变，从而使酶失活。
固定液主要分为醛类固定液、汞类固定液、醇类固定液、氧化剂类固定液、苦味酸盐类固定液等，较为常用的是醛类中的福尔马林、醇类中的乙醇。
本组织固定液主要由甲醛、磷酸盐组成，该固定液适合于绝大多数组织的固定，属于中性福尔马林固定液，pH接近于中性。
【主要组成成分】试剂组成主要成分组织固定液甲醛、磷酸盐【储存条件及有效期】5℃～35℃保存，原包装未开封固定液的有效期为24个月，在有效期内的已开封固定液建议在开封后6个月内使用完，每次用后及时拧紧瓶盖，以免挥发或变质。
【样本要求】组织尽量新鲜。
【检验方法】l、一般标本固定时间控制在1～4小时/mm，大标本应适当延长固定时间；2、固定好的组织，可在10%福尔马林固定液或70%乙醇中长期保存。
【检验方法的局限性】仅限于病理组织内容物固定。
【注意事项】l、避免过度延长固定时间，否则引起生物大分子过度交联，取材厚度不同，固定时间也不同。
2、固定液的容量应足够，一般固定液与组织块的体积比率应大于10:1。
3、温度对固定的影响很明显，提高温度可以加速固定作用，但温度不宜过高。
4、本产品仅用于体外诊断，应由专业人士使用及进行结果的判读。
5、使用前应详细阅读说明书，并做好个人卫生防护，在有效期内使用，生产日期、生产批号和失效日期见包装。
6、用后应按医院或环保部门要求处置废弃物。
【基本信息】备案人/生产企业名称：安徽雷根生物技术有限公司住所：淮北凤凰山经济开发区凤冠路三期标准化厂房三号厂房。
福尔马林固定液
磷酸缓冲中性福尔马林固定液济南百博生物技术股份有限公司【预期用途】磷酸缓冲中性福尔马林固定液主要用于适用于常规标本的组织固定。
福尔马林固定液作为一种样本处理液，主要是通过对组织标本的固定，以方便医院检验人员进行后续的染色、免疫组化等操作。
该固定液主要是用于对病人进行治疗的初步阶段，用于固定组织切片标本。
由于该种固定液是用于固定病理组织标本使用的，所以该种固定液的目标用户是各医院的手术室、病理科以及肿瘤医院等。
【检验原理】甲醛能与蛋白质的氨基结合，使蛋白质凝固，因此可做为检验时的组织固定剂。
【主要组成成份】甲醛、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠。
【适用范围】用于大多数组织标本的固定，能较好地保存组织的抗原性和细微结构，具有较强的渗透力和较好的固定效果，能满足常规HE及免疫组化、原位杂交等检测工作。
【使用方法】根据组织类型及试验目的选择合适的固定液浓度，按标本的5—10的用量将组织标本在室温条件下浸泡固定2-72h，（固定时间依组织块大小和实验目的而定）,自来水或缓冲液充分漂洗后即可用于组织切片。
【固定的作用】固定的作用，从组织学的角度讲是，使之尽量保持细胞、组织的固有形态和结构，而从免疫组化技术的角度，固定的作用不仅是使细胞内蛋白质凝固，尽量减少或终止外源性酶和内源性酶的反应；防止细胞的自溶，以免使抗原扩散至组织间质；以保持组织的固有形态和结构；更重要的是保持组织或细胞的抗原性，不但要使抗原不导致失活，而且不使抗原发生弥散的现象，才能在免疫组化染色时，不产生过深的背景，影响对阳性物的判断。
【成分特点】1 .采用优质进口原料配制，确保产品质量优良2 .添加独特增固剂，增强组织固定效果3 .添加复合磷酸盐，形成一个中性缓冲环境（pH：7.0±0.2）4 .添加挥发抑制剂，减少甲醛挥发，气味小且安全5 .添加独特抗聚合反应成分，防止有效成分聚合【固定特点效果】1. 固定效果均匀，穿透力强，完整保存细胞组织形态结构2. 增进组织弹性，利于切片3. 完整保存组织细胞形态结构，特别适用于免疫组化染色的组织，能最大程度保存组织细胞的蛋白抗原和核酸分子，使抗原定位更加清晰，利于特殊染色、免疫组化染色及分子生物学检验4. 有效保存脂肪及脂类物质，使免疫组化的染色与鉴定效果更佳5. 适用于血红素与含铁血红素的固定，抑制福尔马林色素的生成6. 特別适用于黏多糖染色与鉴定。
病理制片中固定液的选择-2019年精选文档
病理制片中固定液的选择由于病理学诊断是诊断的金标准，是辅助临床诊断的主要把关口，也是最后的宣判性诊断。
做好病理诊断，层层步骤就显得尤为重要，包括组织的取材，固定，脱水，浸蜡，包埋及染色。
组织的固定是一个关键的过程，因为没有好的固定就没有好的制片，没有好的制片就不会有好的成品，一张好的切片与固定有着密切的关系。
1固定的目的固定的概念是将采取的活体组织置于化学性溶媒（固定液）中，使其不发生自溶与腐败，保持被采取时的形态。
固定的目的是在于尽量使组织和细胞保持与生活时相仿的成分和形态，迅速防止组织、细胞的死后变化，防止自溶与腐败，使细胞内的蛋白质、脂肪、糖、酶等各种成分转变成不溶性物质，使组织中的各种物质沉淀和凝固起来，而产生不同的折射率，成光学上的差异，以便染色后易于鉴别和观察。
因此，固定的组织愈新鲜愈好，固定组织时，应使用足量的固定液。
其固定液的量一般小于组织块总体积的4 倍以上。
2固定液的选择固定液必需要有较强的渗透能力，能迅速地渗入组织内部，不会使组织过度收缩或膨胀，并且能使组织内易观察的成分可以凝固为不溶性物质，能使组织达到一定的硬度，获得较佳的折光率和对染料具有较强的亲和力。
组织细胞中不至于因固定引起人为的改变，因为在凝固原生质以后，增加了细胞对于各种穿透的抵抗力，不至于因以后的处理而使固定后的原生质变形，并尽可能地避免使组织膨胀或收缩，使细胞内的成分（蛋白质）凝固沉淀下来，由正常的半液体状（胶体）变为半固体状（凝胶），增加媒染作用和染色能力，使组织能够得到充分的固定，便于以后的蜡块保存。
固定液的种类很多，分为单纯固定液和混合固定液，其中混合固定液比较常用。
2.1 常用单纯固定液2.1.1 甲醛（formaldehyde）为非沉淀性固定剂，是一种约有40％重量溶于水的气体，易挥发，市售的为40％的甲醛水溶液，也称为福尔马林液（formalin）。
此液久存自行分解，形成白色沉淀为副醛（三聚甲醛或多聚甲醛）。
几种常用病理组织固定液的比较
用 甲醛 固定 的组 织 ． 细胞 结 构清 晰 ， 且 能保 持 与
生活 时形 态相 似 。 甲醛 为病 理科 组 织 固定 的常规 固
定液 ， 这是 因为其有以下优 ￣［ １ ｏ ， １ １ １ ： ① 甲醛有较强 的
分子 生 物学 的发展 ． Ｎ Ｂ Ｆ已经 不 能满 足 现代 病 理 学 组织渗透力 ； ②可 以有效且均匀地 固定标本 ； ③固 的要求 。最新 的生 物 医学 和病理 学研 究及 诊 断依赖 定 所引 起 的回缩 力较小 ， 对 标本 的 形态 保存 较完 整 ；
１ 单 纯 固定 液分 类及 其优缺 点
的发 展 ， 但 是 病理 检 测依 然 是诊 断 很 多疾 病 的金 标 定 液及 复 合 固定 液 都 已经 被研 发 处 理 应用 于 临床 ， 术要求 的不 断提 高 ， 组 织 固定 效果越 来 越重 要 。 这既
与疾 病 的病 理 学诊 断 息息 相 关 ． 又直 接 关 系 到疾 病 后续 的分 子检 测指 标及治 疗方 式 的选择圈 。 病理 切 片
癌物 ” 嘲 。 此外 ， 利用 甲醛 进行 长时 间的组 织 固定 将 引 起核 酸 的广泛 降解 ． 这 既损 害 了核酸 的完 整性 ， 又 降 嗜碱 性强 ， 细 胞 核 染色 深 ， 组 织 收缩 大 ， 细 胞 形 态 与 生活 时相 比明显 缩小 ； 混合 固定 液 的 固定速 度较 快 ，
制作 技 术 的质 量涉 及 多 个环 节 ． 组织 固定 是 最基 本 １ ． １交联 固定 液 理 切片及 免疫 组织 化学技 术 的制作 质量等 级 。
交 联 固定剂包 含 甲醛 和戊二 醛 。 它
最 重要 的一个 步骤 。组 织 固定 的质量 可直 接评 定病 们 通过 与蛋 白质 的氨 基酸 ， 相邻 蛋 白质 之 间 。 氨基 酸 和核 酸之 间形成 的亚 甲基 桥 与组 织相 互作 用 。这种 却 阻 碍 了核 固定 指利 用一 些化 学试 剂处 理组 织 以保存 组 织 交联 机 制 虽然 保 持 了组 织 的 良好 形 态 ，
缓冲液及组织固定液的配制
缓冲液及组织固定液的配制1、磷酸盐缓冲液的配制关于缓冲溶液PB的配制，好多参考书如生物技术实验的后面均附有缓冲溶液的配制配方，可以根据需要配制pH5.7～8.0的磷酸盐缓冲。
磷酸盐缓冲液称简PB，加NaCl（氯化钠）的称PBS，加KCl（氯化钾）、NaCl（氯化钠）的称KPBS。
S就是指氯化钠的含量，一般为0.85％，即是100ml里面加0.85克，这个时候的PBS的浓度是0.1M的。
一般在免疫组化洗涤中采用0.01M的PBS，pH7.0～7.4。
我们在实验中直接将0.1M的稀释十倍，即可。
最好能现配现用。
母液4℃可以保持1～2周，影响不大。
成份分子量（MW）浓度（g/1000mL）0.01M PBS①0.1M PBS0.1M PBNa2HPO4·12H2O 358.14 2.684 29.009 29.009NaH2PO4·2H2O 156.01 0.39 2.964 2.964NaCl 58.44 8.5 8.5~9 /pH值/ 7.4 7.4 7.4注：①配方来自网上。
2、组织固定液的配制2.1、4%多聚甲醛-0.1M磷酸缓冲液[1]（pH=7.3）：多聚甲醛40g，置于三角烧瓶中，加入500~800mL 0.1M的磷酸缓冲液（PB），加热至60℃左右，持续搅拌（或磁力搅拌）至粉末完全溶解，通常需要滴加少许1N NaOH才能使溶液澄清，最后补足0.1M PB至1000mL，充分混匀。
该固定试剂适用于光镜免疫细胞化学研究，因较温和，适用于组织标本的较长期保存。
2.2、10%中性缓冲福尔马林固定液[2]：甲醛溶液（37~40%）100mL，蒸馏水900mL，NaH2PO4（磷酸二氢钠）4g，Na2HPO4（磷酸氢二钠）6.5g，混合摇匀后调pH至7.2~7.4。
2.3、10%福尔马林固定液配制[2]：甲醛溶液（37~40%）100mL，自来水900mL，混合后在溶液中加入碳酸钙使溶液呈中性或偏碱性。
组织固定液的使用
谈谈固定液得使用作者: ｌiza3(站内联系TA)发布:２013-01-11当前,应用于固定试剂得种类较多,它们对于固定不同得组织成分起着不同得作用,因此我们在使用时应该了解不同固定剂得效能,才能合理得固定组织。
根据Bｅncroft得分类法,将不同得固定剂分为四种类型:ﻫⅠ类:醛类,甲醛,戊二醛,多聚甲醛,丙烯醛,已二醛,丙二醛等。
ﻫⅡ类:氧化剂类,四氧化锇(奥酸),高锰酸钾,重铬酸钾等、Ⅲ类:蛋白变性类,甲醇,乙醇,醋酸等。
Ⅳ类:其她,氯化汞,苦味酸等。
上述四种类型得固定剂,最常使用得就是甲醛,其余得也在其它病理技术方面中用到。
下面根据使用得需要,将着重介绍几种常用得固定剂。
ﻫ(1)甲醛ﻫ甲醛商品名为福尔马林,一般市售得含甲醛３7—4 0%,由甲醛气体饱与于水而成,比重为1。
12。
它也可以稳定得固体形式存在,它得成分为高分子量得聚合体,称为多聚甲醛。
ﻫ甲醛溶液较难纯化,在每批市售商品中,都含有不少得杂质如甲醇,这种在组织化学方法当中,能使酶钝化,影响其反应。
甲酸,它可使固定液变酸,在陈列标本或长时间固定得组织,由于酸得作用,往往细胞核染色欠佳。
ﻫ甲醛有效固定作用得要点就是,在蛋白质末端基团之间形成交联链。
参与甲醛固定蛋白质得基团,主要为氨基,亚氨基及酰氨基,肽,胍基,羟基,SH与芳香环。
甲醛与组织蛋白类得反应就是多样与复杂得,因为它能与多种不同得功能基团结合,在多数情况下在其间形成桥键、甲醛有这种交联得功能,也就是它得缺点,在用甲醛固定过得组织中,需要做免疫组化得,往往提倡用酶消化或热抗原修复法来使蛋白与甲醛交联得醛键断裂开,以利于后来得染色。
甲醛可配成简单得或混合得固定液,最简单与最容易掌握得方法,就就是取10ml甲醛液,加水9０ml,这就就是10％得福尔马林、当然,现在使用得固定液要求较为严格些,最好就是使用缓冲福尔马林固定液,这将有利于后来得免疫组化染色得需要。
1。
组织收缩较少,损伤少,保存从组织学得观点来说,甲醛就是一种良好得固定剂,它有很多得优点:ﻫ固有物质好、2。
脂肪组织固定液
Leagene 。
com 北京雷根生物技术有限公司
脂肪组织固定液
简介：
脂肪组织固定液由Bouin's 固定液和乙醇组成，实际上其成分为PA 、甲醛、乙酸、乙醇等。
PA 可沉淀蛋白引起组织收缩，但不会使组织硬化, 其与甲醛和乙酸混合后，穿透速度加快，是一种良好的脂肪瘤和脂肪肉瘤的固定液。
组成：
操作步骤(仅供参考)：
1、 按实验具体要求操作。
2、 一般脂肪瘤和脂肪肉瘤需要固定48h 。
如果组织块大，可适当延长固定时间，但不宜超
过36h 。
注意事项：
1、 脂肪组织固定液对人体有一定的损害，请在通风好的环境下小心操作， 避免吸入。
2、 组织取材的厚度不同，固定时间也不同，对组织恰当的选材有利于固定液的渗透。
3、 温度对固定的影响很明显，提高温度可以加速固定作用，但温度不宜过高。
4、 取出新鲜组织后，应及时固定，无法及时固定时，应保存于生理盐水中及时送检。
5、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期： 6个月有效。
编号 名称 DF0190 Storage 脂肪组织固定液 500ml RT 避光 使用说明书 1份。
组织固定液的类型
组织固定液的类型
组织固定液的类型有很多，主要包括以下几种：
1.福尔马林固定液：福尔马林是一种广泛使用的固定剂，可以固定细胞和组织的结构，同时起到杀菌的作用。
2.酒精固定液：酒精固定液是一种常用的组织固定液。
酒精具有良好的杀菌作用，可以使组织保持良好的形态结构。
3.缓冲福尔马林固定液：缓冲福尔马林固定液是在福尔马林固定液中添加缓冲剂，使其pH值接近细胞内液，更适合某些特定的实验和研究。
4.寡聚肽固定液：寡聚肽固定液是一种对蛋白质固定效果较好的固定液，可以保持细胞和组织的蛋白质结构。
5.甲醛固定液：甲醛是一种常用的固定剂，可以使细胞和组织固定并保持其形态结构。
它有很好的杀菌作用，并且可以使细胞和组织保持较好的染色性能。
以上是几种常见的组织固定液类型，不同类型的固定液具有不同的特点和适用范围，根据不同的实验目的和要求选择合适的固定液非常重要。
常用的组织固定液
常用的组织固定液1．单纯固定液(1)4％中性甲醛固定液：最常用的固定液，能满足常规HE及免疫组化、PCR等工作。
一般无特殊要求的病理标本均适用。
尤其值得注意的是，中性甲醛是以 pH 7.2～7.4的磷酸缓冲液为溶剂配制的，其固定效果及对组织抗原性的保存均优于一般的4％甲醛固定液。
此固定液配制后应密封并保存在阴凉处，保存时间不超过一个月。
甲醛(40%) 100 ml无水磷酸氢二钠 6.5 g磷酸二氢钠 4.0g蒸馏水900 ml(2)乙醇固定液：使用时以80％～95％的浓度为宜，具有硬化、固定、脱水等作用，对组织渗透力较弱，因此很少单独使用，但其保存组织中的核酸强于中性甲醛，故常用于有核酸操作的实验或检查，如果用于证明尿酸结晶和保存糖原，可用100%乙醇固定组织。
(3)4％的多聚甲醛：主要用于培养细胞的固定。
2．混合固定液(1)乙醇一甲醛(乙醇－福尔马林，AF)固定液：适用于皮下组织中肥大细胞的固定。
该固定液有固定兼脱水作用，固定后的标本可直接入95％乙醇脱水。
甲醛(40％) 100 ml95％乙醇900 ml(2)B5(醋酸钠一升汞一甲醛)固定液：多用于固定淋巴组织。
染色前应进行脱汞沉淀处理。
无水醋酸钠 1.25 g升汞 6.0 g蒸馏水90 ml使用前加入甲醛10 ml(3)Bouin固定液：特别适用于睾丸活检组织的固定。
Bouin液对组织固定较均匀，收缩很少，不会使组织变硬变脆。
需现配现用。
饱和苦味酸水溶液(约1.22%) 75 ml甲醛25 ml冰醋酸 5 ml(4)Carnoy固定液：穿透能力强，可很好的固定细胞质和细胞核，特别适合于固定外膜致密的组织，亦适用于糖原及尼氏小体的固定。
无水乙醇60 ml氯仿30 ml冰醋酸10 ml(5)Zenker固定液：经此液固定的标本，细胞核和细胞质染色颇为清晰，但成本较昂贵且需特殊处理汞。
该固定液要避免接触阳光，以免引起化学变化而失效。
升汞 5.0 g重铬酸钾 2.5 g硫酸钠 1.0g蒸馏水(加至) 100 ml。
组织固定液的使用
谈谈固定液的使用作者: liza3(站内联系TA)发布: 2013-01-11当前，应用于固定试剂的种类较多，它们对于固定不同的组织成分起着不同的作用，因此我们在使用时应该了解不同固定剂的效能，才能合理的固定组织。
根据Bencroft的分类法，将不同的固定剂分为四种类型：Ⅰ类：醛类，甲醛，戊二醛，多聚甲醛，丙烯醛，已二醛，丙二醛等。
Ⅱ类：氧化剂类，四氧化锇（奥酸），高锰酸钾，重铬酸钾等。
Ⅲ类：蛋白变性类，甲醇，乙醇，醋酸等。
Ⅳ类：其他，氯化汞，苦味酸等。
上述四种类型的固定剂，最常使用的是甲醛，其余的也在其它病理技术方面中用到。
下面根据使用的需要，将着重介绍几种常用的固定剂。
（1）甲醛甲醛商品名为福尔马林，一般市售的含甲醛37—40%，由甲醛气体饱和于水而成，比重为1.12。
它也可以稳定的固体形式存在，它的成分为高分子量的聚合体，称为多聚甲醛。
甲醛溶液较难纯化，在每批市售商品中，都含有不少的杂质如甲醇，这种在组织化学方法当中，能使酶钝化，影响其反应。
甲酸，它可使固定液变酸，在陈列标本或长时间固定的组织，由于酸的作用，往往细胞核染色欠佳。
甲醛有效固定作用的要点是，在蛋白质末端基团之间形成交联链。
参与甲醛固定蛋白质的基团，主要为氨基，亚氨基及酰氨基，肽，胍基，羟基，SH和芳香环。
甲醛与组织蛋白类的反应是多样和复杂的，因为它能和多种不同的功能基团结合，在多数情况下在其间形成桥键。
甲醛有这种交联的功能，也是它的缺点，在用甲醛固定过的组织中，需要做免疫组化的，往往提倡用酶消化或热抗原修复法来使蛋白与甲醛交联的醛键断裂开，以利于后来的染色。
甲醛可配成简单的或混合的固定液，最简单和最容易掌握的方法，就是取10ml甲醛液，加水90ml，这就是10%的福尔马林.当然,现在使用的固定液要求较为严格些,最好是使用缓冲福尔马林固定液,这将有利于后来的免疫组化染色的需要.从组织学的观点来说,甲醛是一种良好的固定剂,它有很多的优点:1. 组织收缩较少,损伤少,保存固有物质好.2. 固定均匀,穿透力强.3. 能使组织硬化,增进组织弹性,有利于切片.4. 能保存脂肪及脂类物质.5. 成本较低.虽然甲醛有上述的优点,但这都是相对而言,任何物质都不可能十全十美的,它也有许多缺点:1. 杂质含量较多,如甲醇,可钝化酶类,影响反应.2. 含有微量甲酸,导致固定液酸变,影响染色.3. 可产生福尔马林色素,影响观察.4. 不能固定尿酸和糖类物质.5. 容易挥发,污染环境,可导致标本干涸.6. 可长期存在于固定过的组织上.有人做过实验,组织用甲醛固定后在流水中冲洗5小时后,仍留有相当多的甲醛与蛋白质相结合,但需要经过长时间的流水冲洗(24天的冲洗)方能除去.可见存在于组织上的甲醛是不可能除去的.因为临床活检不可能有这么长的时间来冲洗组织.因此要特别指出的是,在其后的各种技术操作中,要特别注意到甲醛的存在,必须要想办法除去它,否则将会给各种染色造成影响,甚至导致失败。
常用的组织固定液及配制
常用固定液及其配制固定液分单纯固定液和混合固定液。
1甲醛（formal dehyd e）是无色气体，易溶于水成为甲醛溶液。
易挥发，且有强烈刺激气味，常用得是37％～40％得甲醛溶液，商品名为福尔马林（formal in）。
用作固定的浓度习惯为10％福尔马林（即1份甲醛溶液加9份水配制而成），实际含甲醛4％。
10％福尔马林渗透力强，固定均匀，对组织收缩少。
对脂肪、神经及髓鞘、糖等固定效果好，是最常用的固定剂。
经福尔马林固定时间长的组织，易产生黑色的沉淀，称福尔马林色素。
2 乙醇无色液体，易溶于水，它除可作为固定剂外，还可作为脱水剂，对组织有硬化作用。
固定用一般是80%~95%浓度，乙醇渗透力校弱，它能溶解脂肪，核蛋白被沉淀后，仍能溶于水，因此核的着色不良。
3 中性甲醛液（混合固定液）甲醛（浓）120ml，加蒸馏水880ml,磷酸二氢钠（NaH2PO4?H2O）4g，磷酸氢二纳（Na2HPO4）13g。
此液固定效果比单纯10％福尔马林要好。
4 AF液（混合固定液）95％乙醇90ml，甲醛(浓)10ml。
也有配方是95％乙醇85ml，甲醛（浓）10ml，冰醋酸5ml。
此液除有固定作用外，兼有脱水作用，因此，固定后可直接入95％乙醇脱水。
以上4种固定液中，以中性甲醛为首选，其次为10％福尔马林，乙醇应尽量不用。
yzbaiwrote:（1）10%甲醛：对组织渗透性强，固定均匀。
对组织膨胀约5%，经酒精脱水时有较大的收缩。
能保存脂肪，不能沉淀核蛋白及白蛋白，长期用其固定的组织使组织变为酸性，不利于染色，特别是细胞核的着色。
经自来水冲洗6~24小时后，可以使其酸碱中和，并减少结晶。
（2）4%多聚甲醛：对组织穿透性好，组织收缩小，对大多数抗原物质保存较好，特别是对脂肪和各种酶的固定效果更好。
固定液的种类和功能
固定液的种类和功能1．单纯固定液(1)4％中性福尔马林固定液：最常用的固定液，能满足常规HE及免疫组化、PCR等工作。
一般无特殊要求的病理标本均适用。
尤其值得注意的是，中性福尔马林是以pH7.2～7.4的磷酸缓冲液为溶剂配制的，其固定效果及对组织抗原性的保存均优于一般的4％福尔马林固定液。
此固定液配制后应密封并保存在阴凉处，保存时间不超过一个月。
福尔马林(40%)100ml无水磷酸氢二钠6.5g磷酸二氢钠4.0g蒸馏水900ml(2)乙醇固定液：使用时以80％～95％的浓度为宜，具有硬化、固定、脱水等作用，对组织渗透力较弱，因此很少单独使用，但其保存组织中的核酸强于中性福尔马林，故常用于有核酸操作的实验或检查，如果用于证明尿酸结晶和保存糖原，可用100%乙醇固定组织。
(3)4％的多聚福尔马林：主要用于培养细胞的固定。
2．混合固定液(1)乙醇一福尔马林(乙醇－福尔马林，AF)固定液：适用于皮下组织中肥大细胞的固定。
该固定液有固定兼脱水作用，固定后的标本可直接入95％乙醇脱水。
福尔马林(40％)100ml95％乙醇900ml(2)B5(醋酸钠一升汞一福尔马林)固定液：多用于固定淋巴组织。
染色前应进行脱汞沉淀处理。
无水醋酸钠1.25g升汞6.0g蒸馏水90ml使用前加入福尔马林10ml(3)Bouin固定液：特别适用于睾丸活检组织的固定。
Bouin液对组织固定较均匀，收缩很少，不会使组织变硬变脆。
需现配现用。
饱和苦味酸水溶液(约1.22%)75ml福尔马林25ml冰醋酸5ml(4)Carnoy固定液：穿透能力强，可很好的固定细胞质和细胞核，特别适合于固定外膜致密的组织，亦适用于糖原及尼氏小体的固定。
无水乙醇60ml氯仿30ml冰醋酸10ml(5)Zenker固定液：经此液固定的标本，细胞核和细胞质染色颇为清晰，但成本较昂贵且需特殊处理汞。
该固定液要避免接触阳光，以免引起化学变化而失效。
升汞5.0g重铬酸钾2.5g硫酸钠1.0g蒸馏水(加至)100ml。
组织固定液与固定方法选择的探讨
“固定”是指将组织浸入适当的化学试剂中，使组织细胞内的物质尽量接近其取材时的形态结构和位置的过程［1］。
固定能使组织中的各种物质沉淀和凝固起来，终止或抑制外源性和内源性酶的活性，防止细胞自溶，保持细胞形态［2］。
固定是制作大体标本和显微镜切片标本的关键，良好的固定有利于切片标本的制作和染色，使组织产生不同的折射率，造成光学上的差异，以便观察、鉴别和硬化组织［3-4］。
固定液可以抑制组织自溶，保持离体组织细胞与生活时的形态相似，使细胞内一些蛋白质等沉淀或凝固，有利于固定后物质的确切定位，是保存组织器官用于病理诊断的必需过程［5-6］。
不同固定液对组织细胞的穿透力不同，可导致细胞内黏多糖、蛋白质、核酸、脂类和低分子质量物质等不同程度的丢失，由固定液因素导致组织细胞形态的改变，对病理诊断产生很大影响，比其他技术操作因素引起的组织细胞形态改变更难把握。
而选取良好的固定液可使组织固定均匀、收缩小、结构清晰，利于保存组织细胞的抗原性，为免疫组化、电镜观察等奠定坚实的基础［7-8］。
本研究就组织固定液和固定方法的选择作如下探讨。
1固定液1.1固定液成分甲醇：为沉淀类固定剂，对组织渗透性强，能迅速沉淀清蛋白、球蛋白和核蛋白［9］。
可以固定核染色质及其部分内容物、核膜、细胞质及胶质等［10］，且固定后核浆对比鲜明，组织结构清晰，能基本保持细胞的正常形态［11］。
乙醇：是一种可溶解脂肪和类脂的脂溶剂，穿透力缓慢，长时间浸泡可使组织硬化，细胞核变形，细胞质收缩，蛋白质变性，糖原沉淀［12］。
乙醇对组织细胞既有固定作用又有脱水作用，一般固定组织以80%～95%浓度为好［13］。
丙酮：是一种易燃易挥发的无色液体，对组织渗透力强，能使蛋白质沉淀，但不能很好地保存糖原，且在部分组织中对核的固定效果欠佳［14-16］。
戊二醛：是一种具有双重作用的醛类。
对糖原、糖蛋白、微管内质网和细胞基质等有较好的固定作用可使组织保存良好，适合电镜和酶组织标本的固定，但其穿透力较弱［12，17］。
塞维尔组织固定液成分_概述及解释说明
塞维尔组织固定液成分概述及解释说明1. 引言1.1 概述塞维尔组织固定液是一种常用于生物学和医学领域的试剂，它具有固定、保存组织样本以及提供结构信息的重要功能。
通过将其滴于组织样本上，塞维尔组织固定液能够使细胞蛋白质和核酸变得稳定，并能够保持组织原有的形态和结构。
因此，塞维尔组织固定液被广泛应用于病理学研究、免疫组化分析以及其他相关领域。
1.2 文章结构本文将首先介绍塞维尔组织固定液的概述和背景，包括其定义、历史及发展背景等方面内容。
随后，文章将详细探讨塞维尔组织固定液的成分组成，包括各个成分及其作用机制。
最后，我们将进一步阐述塞维尔组织固定液在实际应用中的用途和应用领域。
通过对这些主题的全面介绍和讨论，旨在深入了解该试剂并促进相关领域的发展。
1.3 目的本文的目的是为读者提供关于塞维尔组织固定液成分的全面了解。
通过对其成分和作用机制的详细解释，希望读者能够掌握该试剂的原理和优势，并能够在实际研究中合理应用。
同时，本文也将探讨进一步研究塞维尔组织固定液的方向，以期在未来改进和拓展该试剂的应用。
2. 塞维尔组织固定液成分概述2.1 定义和背景塞维尔组织固定液是一种常见的化学试剂，用于在医学和生物学研究中对组织样本进行处理和保存。
它具有特殊的成分组合，可以使细胞结构保持在固定状态，并防止其腐败和坏死。
组织固定是一项关键的实验步骤，它允许科学家长时间保存组织样本，并可在后续实验中进行分析。
塞维尔组织固定液的开发旨在解决传统方法所面临的各种问题，例如使组织硬化、减少变性等。
2.2 成分组成塞维尔组织固定液由多种化学物质混合而成。
主要成分包括：a) 缓冲剂：缓冲剂具有调节溶液pH值和稳定性的作用。
常用的缓冲剂有磷酸盐缓冲液、乙酸/醋酸缓冲液等。
b) 固定剂：这些化合物能够与细胞蛋白质和核酸结合，使其固定在组织中，防止其进一步降解。
常见的固定剂有甲醛、戊二醛等。
c) 渗透剂：渗透剂可增加溶液对细胞的渗透性，促使固定剂较好地进入组织内部，确保更好的固定效果。
Bouin固定液配制及使用方法
Bouin固定液Bouin氏液是组织化学中最常用的混合型固定液之一，由苦味酸饱和液（1.22%）、甲醛和冰醋酸按15:5:1的比例混合而成。
此固定液对大多数组织固定效果良好。
它具有下列特点：1.其渗透能力强，固定均匀，组织收缩小，染色效果好。
2.适用范围广，特别适合于富含结缔组织的标本和胚胎标本。
能够软化皮肤角质，并可以用于植物组织的固定。
3.因为本产品含有苦味酸，会溶解火棉胶，所以如果用于火棉胶包埋，必须进行洗脱苦味酸处理。
标本尺寸不可太大，一般窄边不大于5 mm。
使用方法：1.标本修块，厚度一般不超过5 mm，置入本产品内固定8 ~ 24 h（根据样品材料、大小不同，固定时间可能会有较大差异）。
2固定后用70%-80%乙醇洗涤。
Bouin氏液是常用的混合固定液配方：苦味酸饱和液（1.22%）75ml福尔马林25ml冰醋酸5mlBouin固定液使用方法1.标本修块，厚度一般不超过5 mm，置入本产品内固定8 ~ 24 h（根据样品材料、大小不同，固定时间可能会有较大差异）。
2.固定后用70%-80%乙醇洗涤。
Bouin固定液关联产品Zenker固定液；Helly固定液；Carnoy固定液；Karnovsky固定液此液一般在临床用时配制，对皮肤及肌腱有软化作用。
没有很好的固定就无法染色，所以，一种好的固定液是细胞观察的重点。
当前国内外基本上都还是要用甲醛来固定组织。
从免疫组织化学的角度来说，甲醛固定的组织大部分都可以用免疫组化的手段来检测，据多人认为，它对lgA ，lgM，J链，K链和λ链的标记效果较好，且背景清晰。
但美中不足的是：经它固定的组织，可与蛋白形成醛交联蛋白，这种醛键可封闭抗原。
固此，在免疫组化实际检测中，应根据不同的要求和需要，采用酶消化或者其它抗原修复如微波、高压等的方法，以便破坏醛键重新暴露抗原。
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组织固定液
【产品名称】
组织固定液
【包装规格】
货号：DF0111
装规格分别为：500ml、5000ml。
【预期用途】
用于新鲜组织标本的固定。
【检验原理】
固定的目的在于保护细胞和组织的原有形态结构，固定剂能阻止内源性溶酶体酶对自身组织和细胞的自溶、抑制细菌和霉菌的生长，通过凝固、生成添加化合物等使蛋白质内部结构发生改变，从而使酶失活。
固定液主要分为醛类固定液、汞类固定液、醇类固定液、氧化剂类固定液、苦味酸盐类固定液等，较为常用的是醛类中的福尔马林、醇类中的乙醇。
本组织固定液主要由甲醛、磷酸盐组成，该固定液适合于绝大多数组织的固定，属于中性福尔马林固定液，pH接近于中性。
【主要组成成分】
试剂组成主要成分
组织固定液甲醛、磷酸盐
【储存条件及有效期】
5℃～35℃保存，原包装未开封固定液的有效期为24个月，在有效期内的已开封固定液建议在开封后6个月内使用完，每次用后及时拧紧瓶盖，以免挥发或变质。
【样本要求】
组织尽量新鲜。
【检验方法】
l、一般标本固定时间控制在1～4小时/mm，大标本应适当延长固定时间；
2、固定好的组织，可在10%福尔马林固定液或70%乙醇中长期保存。
【检验方法的局限性】
仅限于病理组织内容物固定。
【注意事项】
l、避免过度延长固定时间，否则引起生物大分子过度交联，取材厚度不同，固定时间也不同。
2、固定液的容量应足够，一般固定液与组织块的体积比率应大于10:1。
3、温度对固定的影响很明显，提高温度可以加速固定作用，但温度不宜过高。
4、本产品仅用于体外诊断，应由专业人士使用及进行结果的判读。
5、使用前应详细阅读说明书，并做好个人卫生防护，在有效期内使用，生产日期、生产批号和失效日期见包装。
6、用后应按医院或环保部门要求处置废弃物。
【基本信息】
备案人/生产企业名称：安徽雷根生物技术有限公司
住所：淮北凤凰山经济开发区凤冠路三期标准化厂房三号厂房。