病理科常用脱水剂的种类
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病理科常用脱水剂的种类
(1)乙醇最常用的脱水剂,脱水能力强,并能使组织硬化,与二甲苯能混合。其缺点是在高浓度乙醇,特别是无水乙醇中停留时间长会引起组织收缩、变脆而影响后续的切片。尤其是应用全自动脱水机,因是加压抽真空并加温脱水,在高浓度乙醇中停留时间更不能太长,应经试验摸索出适合自己单位脱水需要的时间,不能盲目从书本上套用脱水时间。脱水时,应从低浓度向高浓度梯度进行。一般是人体组织从?5%乙醇开始,对于小动物、胚胎及柔软的组织可从30%乙醇开始脱水。只有脱水充分,才能在透明剂中透明。若是人工脱水,必须在加盖的容器内进行,尤其是高浓度乙醇很易吸收空气中的水分,阴雨天更应注意。在透明前最好将组织取出,用滤纸吸干后再透明。(2)丙酮脱水作用比乙醇强,但对组织的收缩也大,毒性强,价格高,因此一般不用于常规组织的脱水,主要用于快速脱水及固定兼脱水。此时应注意个人防护,最好在带有抽风功能的装置中进行,脱水时间1~3h左右。丙酮还可作为染色后的脱水剂,用于甲基绿—派洛宁显示DNA及RNA。
(3)正丁醇为五色液体,微溶于水,在100ml水中只能溶解8.3g,故脱水能力较弱,但能与水、乙醇及石蜡混合,因此经正丁醇脱水的组织可直接浸蜡。它的优点是很少引起组织的收缩及变脆。一般用法为:组织经固定及冲洗后,依次人50%、70%、80%乙醇中脱水,然后人正丁醇,12~24h后浸蜡。使用时也应注意防护。
(4)叔丁醇异丁醇的一种,可与水、乙醇、二甲苯混合,可以单用或与乙醇混合使用,是一种使用较广的脱水剂,它不会使组织收缩或变硬,不必经过透明而直接浸蜡。电镜上为常用的中间脱水剂。
(5)环己酮沸点为140~C,冰点为一40~C,密度与水相似,无毒,可与苯、二甲苯、氯仿等有机溶剂混合,也是石蜡溶剂,可代替纯乙醇脱水后直接浸蜡,组织不会变硬,不需经二甲苯透明。
(6)松脂醇组织固定后按常规经各浓度乙醇至95%乙醇中,按下列顺序进行脱水和透明处理:
①浸入等份95%乙醇和松脂醇的混合液中,待组织块下沉后转入下步处理;
②95%乙醇1份加松脂醇2份的混合液中浸泡1h;
③95%乙醇1份加松脂醇3份的混合液中浸泡1h;
④松脂醇I、Ⅱ、Ⅲ中各浸泡1h;⑤松脂醇5份加石蜡1份的混合液中浸泡lh,然后浸蜡包埋。多用于经乙醇或Carnoy液固定的组织。经松脂醇处理的组织收缩较小,发生硬化也少。