花粉活力测定的3种办法
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精心整理
实验16?花粉活力的测定
在作物杂交育种、作物结实机理和花粉生理的研究中,常涉及花粉活力的鉴定。掌握花粉活力快速测定的方法,是进行雄性不育株的选育、杂交技术的改良以及揭示内外因素对花粉育性和结实率影响的基础。
一、花粉萌发测定法
【原理】
水放???????1.用。
2.20℃条???????1.不同种类植物的花粉萌发所需温度、蔗糖和硼酸浓度不同,应依植物种类而改变培养条件。 ???2.此法也可用于观察花粉管在培养基上的生长速度以及不同蔗糖浓度,离体时间,环境条件等因素对花粉活力的影响。
3.不是所有植物的花粉都能在此培养基上萌发,本法适用于易于萌发的葫芦科等植物花粉活力的测定。
二、碘-碘化钾染色测定法
多数植物正常的成熟花粉粒呈球形,积累较多的淀粉,I2-KI溶液可将其染成蓝色。发育不良的花粉常呈畸形,往往不含淀粉或积累淀粉较少,I2-KI溶液染色呈黄褐色。因此,可用I2-KI溶液染色来测定花粉活力。
【器材与用具】
???显微镜;载玻片与盖玻片;镊子;棕色试剂瓶;烧杯;量筒;天平。
???【试剂】
-KI300ml。???I
2
~3张片??
基四氮唑)还原成红色的TTF(三苯基甲??)而使其本身着色,无活力的花粉呼吸作用较弱,TTC 的颜色变化不明显,故可根据花粉吸收TTC后的颜色变化判断花粉的生活力。
【器材与用具】
显微镜;载玻片与盖玻片;镊子;恒温箱;棕色试剂瓶;烧杯;量筒;天平。
【试剂】
0.5%TTC溶液:称取0.5gTTC放入烧杯中,加入少许95%酒精使其溶解,然后用蒸馏水稀释至100ml。溶液避光保存,若发红时,则不能再用。
采集任何植物的花粉,取少许放在干洁的载玻片上,加1~2滴0.5%TTC溶液,搅匀后盖上盖玻片,置35℃恒温箱中,10~15min后镜检,凡被染为红色的花粉活力强,淡红次之,无色者为没有活力或不育花粉。观察2~3张片子,每片取5个视野,统计花粉的染色率,以染色率表示花粉的活力百分率。