铜皂法

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脂肪酶活力测定方法及其比较

万方数据苯萃取后进行比色测定．酶的活力单位定义同平板法．酶活计算同铜皂法．１．３．３对硝基苯酚法对硝基苯酚法是以对硝基苯酚酯作为底物，脂肪酶水解底物产生具有颜色的对硝基苯酚，在４２０ｎｍ波长下测出其吸光光度值，再对照对硝基苯酚吸光度工作曲线得出脂肪酶活力．这样可以使操作更加简单同时可以避免金属离子的干扰［２．１８｜．酶的活力单位定义为检测条件下每分钟产生１ｂｔｍｏｌ对硝基苯酚所需的脂肪酶量，其计算公式为：脂肪酶活力一ＶＮ（Ｃ（样）一Ｃ（空白））／丁／Ｖ（稀释酶液）．式中。

Ｖ反应总体积，Ｎ稀释倍数，Ｃ根据吸光度Ａ求出的对硝基苯酚的浓度，ｔ反应时间，ｙ（稀释酶液）稀释酶液的体积．２３种方法的比较２．１实验仪器和操作难易程度的比较平板法所使用的主要仪器是超净工作台，微量注射器。

培养皿，恒温培养箱，价格便宜，操作简单Ｌ２·１３］；滴定法仅需要酸碱滴定管、试管、恒温水浴锅、酸度计、高速组织捣碎机等一些比较常见，操作简单［”］；比色法包括铜皂法、微乳液法和对硝基苯酚法．铜皂法使用的主要仪器是分光光度计。

超声波装置，仪器较常见，但操作繁琐［１５］；微乳液法使用的仪器主要是分光光度计，操作简单。

精确度高Ｌ１６—１７］；对硝基苯酚法所使用的仪器主要是分光光度计。

操作简单［２·１８］（表１）．２．２实验试剂及精确度的比较平板法使用的试剂主要有维多利亚蓝、三丁酸甘油脂、罗丹明Ｂ等，该实验反应时间长且精确度差［１１］．滴定法所使用的主要试剂有氢氧化钠、酸碱指示剂、聚乙烯醇、橄榄油等［１３｜．滴定中酸碱指示剂不能很好地指示反应终点，即使用酸度计代替酸碱指示剂控制反应终点，产物中丙酮酸的干扰使实验的结果偏大［１ｌ’１９］．铜皂法中的底物有３种：榄橄油，三油酸甘油脂和三丁酸甘油脂［１５］．其中榄橄油作为底物，精确度不高，当用三油酸甘油脂和三丁酸甘油脂作为底物检测脂肪酶的活性。

精确度较高．微乳液法使用的试剂有三油酸甘油脂，吐温一８０和正己烷，实验重复性好，精确度高Ｌ１６。

脂肪酶

显色剂，均匀搅拌3min，油酸分子与Cu2+
生成绿色的络合物，4000r/min离心10min
后取上层有机相在710nm处测定吸光度。
（三）、对硝基苯酚法
1、溶液配制准备
底物溶液配制:量取对硝基苯酚棕榈酸酯(pNPP)0.0378g，加入Triton X-100 1mL，用50mmoL/L Tris-HCL缓冲液（pH值8.0）定容100mmL。
8
9
10
10
20
14
38
33
五、结果与讨论
测定速度：滴定法稳定性：铜皂法铜皂法对硝基苯酚法对硝基苯酚法滴定法
灵敏度：
对硝基苯酚法
铜皂法
滴定法
实际应用中，可根据不同需要选择测定方法。
酶相互间无法进行正常的活力比较。本实验就酸
碱ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ定法、铜皂法、对硝基苯酚法三种常用方法进行了比较。
二、实验材料
脂肪酶，生物工程研究室提供
榨汁机，分析天平，碱性滴定管，分光光度计，pH计，离心机，恒温水浴锅
脂肪酶活力单位
脂肪酶活力单位定义：在一定条件下，
每分钟释放出1μmoL脂肪酸的酶的量定义为
一个脂肪酶活力单位（U）。
三、实验方法
（一）、滴定法
底物溶液（乳化液）配制:量取4%PVA溶液150mL, 加入橄榄油50mL，用榨汁机处理3min，现配现用。
脂肪酶溶液配制:配制pH值为7.38的0.5mg/mL脂
肪酶溶液。
(二)、铜皂法
1、脂肪酸吸光度标准曲线的绘制
配制一系列不同浓度的油酸溶液，分别取4mL油酸溶液置于锥形瓶中，加入1mL
18.32
16.98
19.23

脂肪酶

第一章概述脂肪酶(Lipase，E C．3.1.1.3)是指分解或合成高级脂肪酸与丙三醇形成甘油三酸酯酯键的酶。

198年,Klibanov A M 等用脂肪酶粉或其固定化酶在有机溶剂体系中成功地催化合成了一系列有机物, 开始了脂肪酶非水相酶学的研究[1]。

随着研究的深入, 发现脂肪酶具有良好的醇解、胺解、酯化和转酯等特性, 可被广泛地应用于有机合成、精细化工、药物中间体合成、手性化合物拆分以及生物能源等诸多领域。

近年来,通过对界面酶学和非水相酶学的研究，从而进一步拓展了脂肪酶的应用领域，利用脂肪酶在有机相催化的各种反应可以合成大量高价值的产物，此外，脂肪酶在食品、医药、皮革和洗涤剂等许多工业领域中也有广泛的应用，充分显示了其巨大的应用潜力。

产脂肪酶的微生物种类很多，大约65个属微生物可产脂肪酶，其中细菌28个属、放线菌4个属、酵母菌10个属、其它真菌23个属，而实际上可能更多。

脂肪酶产生菌中得到深入研究的主要集中在根霉、曲霉、青霉、毛霉、假单胞菌等具有工业应用价值的菌种以及与医学相关的金黄色葡萄球菌、钩端螺旋体、粉刺状杆菌等。

脂肪酶的筛选方法着眼于快速、简捷、准确、选择性强及易于自动化。

脂肪酶产生菌主要从自然界中寻找，而脂肪酶高产菌的筛选通常采用含甘油三酯的琼脂平板法，并通过在培养基中添加指示剂如罗丹明B、溴甲酚紫、维多利亚蓝等作为筛选标记，然后采用不同的方法对培养条件进行优化。

其筛选的一般过程是：样品分离→富集培养→平板初筛→摇瓶复筛。

不同微生物合成脂肪酶的能力不同，因此，要达到工业用脂肪酶生产微生物的要求，首先要筛选和诱导出与所需酶学性质相符的高产菌株，或者构建高表达量的重组基因工程株。

第二章方案论证2.1脂肪酶的简介脂肪酶广泛的存在于动植物和微生物中。

植物中含脂肪酶较多的是油料作物的种子，如蓖麻籽、油菜籽，当油料种子发芽时，脂肪酶能与其他的酶协同发挥作用催化分解油脂类物质生成糖类，提供种子生根发芽所必需的养料和能量；动物体内含脂肪酶较多的是高等动物的胰脏和脂肪组织，在肠液中含有少量的脂肪酶，用于补充胰脂肪酶对脂肪消化的不足，在肉食动物的胃液中含有少量的丁酸甘油酯酶。

脂肪酶的微生物生产技术综述

脂肪酶的微生物生产技术综述By 夏远川脂肪酶是一种普遍存在于动植物和微生物体内的酶，也是最早研究的酶类之一，早在1834年就有关于兔胰腺脂肪酶活性的报道。

[1]脂肪酶是一类特殊酯键水解酶，一般用于催化水解和合成反应，在油水界面上，它催化三酰甘油的酯键的水解，生成甘油一酯、甘油二酯或直接生成甘油和脂肪酸。

[2]脂肪酶还可催化酯类化合物的醇解、酯化、酯交换等反应，且不需要辅酶，在工业生产和研究工作中均有广泛应用。

[3]脂肪酶按作用时的适应温度可分为高温脂肪酶、中温脂肪酶、低温脂肪酶；按适宜pH可分为碱性脂肪酶、中性脂肪酶、酸性脂肪酶。

脂肪酶的主要工业应用方向：1、洗涤工业：在洗涤剂中添加脂肪酶可使洗涤剂对脂质类污渍的去除效果大大提高，并可减少表面活性剂及无机助剂（尤其是三聚磷酸钠）的用量，大大减少洗涤剂带来的环境污染。

用于洗涤剂的脂肪酶为碱性脂肪酶，在碱性范围内有活性、活性不受表面活性剂影响、对氧系漂白剂稳定、热稳定性好，并且由于大多数加酶洗涤剂都适当配有蛋白酶，因此用于洗涤剂的脂肪酶还应具抗蛋白酶降解的能力。

[4]1988年，丹麦NOVO公司将碱性脂肪酶应用于洗涤剂中并推向市场。

1992年，这家公司构建了商业上第一株产脂肪酶菌株。

[1]2、食品工业：油脂改性是食品加工过程中的一个重要环节，脂肪酶可通过催化酯交换、酯转移、水解等反应，改变油脂的的物理化学性质，使便宜的、营养价值低的油脂升级为昂贵的、营养价值高的油脂；此外脂肪酶还可用于合成广泛应用于食品工业的糖酯类产品、合成不带副产物或毒性物质的芳香味酯类化合物、合成抗坏血酸酯类抗氧化剂如异抗坏血酸等。

[5]3、造纸工业：使用脂肪酶处理纸浆可减少胶黏物（绝大多数胶黏物都含有大量酯键）对造纸毛毯网间空隙的堵塞，提高纸机的运行效率和成纸品质，并降低环境污染，减少废水处理的负荷。

此外脂肪酶脱墨技术在废纸利用方面也起到非常大的作用，与传统脱墨技术相比脱墨效果更好环境污染更低，具有很大的优势。

手工香皂各式制作方法

手工香皂各式制作方法红酒香皂工具玻璃杯：用于搅拌原料。

制作中由于发热，最好选择耐热的玻璃器皿。

切忌使用铝制品。

汤勺：用于溶解烧碱，也可以用搅拌器代替，同样忌讳铝制品。

搅拌器：用于搅拌原料，可用大的汤勺代替，回避铝制品。

模具牛奶盒、土豆片的包装，塑料盒等均可水50ml \红葡萄酒50ml名牌产品中的任何一种均可。

喝剩下的也可以再把它有效地利用起来。

食用油250g橄榄油等植物油均可做好使用新的油。

这样对皮肤有好处。

烧碱30g在药房可以买到由于属于有毒物品购买时需要单位介绍信。

注意不要用手直接接触。

制作时的安全措施烧碱与水发生化学反应时将产生泡沫，制作香皂时应在室外，带上手套、口罩和眼镜。

避免使用铝、铜、铁及聚乙烯制品，应使用耐热玻璃、塑料和不锈钢制品，以防止烧碱变质。

制作步骤\ 1•用水将烧碱溶解开，将水和烧碱放在容器中，一直搅拌到水变得透明为止。

应该注意的是，搅拌过程中将出现泡沫和发热现象。

2•一边放入油，一边搅拌，待烧碱完全溶解以后，一边搅拌一边将油逐渐地放进去。

用搅拌器搅拌10分钟左右。

3.倒入红葡萄酒。

4.继续仔细搅拌，继续仔细搅拌10分钟左右，直至红葡萄酒彻底均匀地分布开来。

这时，液体开始逐渐变稠。

5.注入模具中，停止搅拌，两三分钟以后，将其注入模具之中。

6 .原封不动地放上1~2天，在温暖的地方放置1~2天。

这时，液体在模具中产生化学反应，请不要用手触摸。

7.从模具中取出，从模具中将香皂取出，可以将刀子或剪子插入模具中以便于顺利取出。

8 •最后的完成，切成适当大小的方块，放在通风处，避开日光直晒，放一个多月以后，制作完成。

绝对简单，绝对安全以普通肥皂原料粉为基础的速成制作方法，4天可以完成。

1 •准备物品：肥皂原料粉100g，红葡萄酒70ml。

2.将红葡萄酒倒入肥皂原料粉中，将红葡萄酒倒入放有肥皂原料粉的容器中，肥皂原料粉较细，注意不要飞散。

3•仔细地和在一起，就像和粘土泥一样，仔细地把两者和在一起。

降血脂功能测定方法的研究进展

降血脂功能测定方法的研究进展董亚婷;杨远帆【摘要】随着高血脂人群的增加,降血脂产品的研究与开发日益受到重视,如何快速准确地检测原料及产品的降血脂功能是降血脂产品开发及降血脂机理研究的重要前提.通过综合对比国内外常用的胆酸盐含量测定、脂肪酶活性测定等评价降血脂功能方法的应用及特点,以期为降血脂功能测定方法的深入研究及相关产品的开发提供参考.【期刊名称】《北京联合大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2014(028)002【总页数】5页(P18-21,25)【关键词】降血脂;测定方法;进展【作者】董亚婷;杨远帆【作者单位】集美大学生物工程学院,福建厦门361021;集美大学生物工程学院,福建厦门361021;厦门市食品生物工程研究中心,福建厦门361021【正文语种】中文【中图分类】R4460 引言脂质是生物体内一大类重要的有机化合物，包括甘油三酯、磷脂、糖脂、固醇等，不仅可以为机体提供能量、构成生物膜，而且具有细胞识别、组织免疫等功能［1］。

但过多地摄取脂质，会使血中脂肪代谢不正常而引起高血脂症，过多的脂质在血管壁上堆积，阻碍血液流动，引起动脉粥样硬化(AS)及心脑血管疾病并严重危害人类健康，甚至还会导致高血压、糖尿病和冠心病等疾病［2］。

随着高脂血症等相关疾病发病率的逐年递增，他汀类降血脂药物应运而生。

相关临床报告指出，长期使用他汀类药物会产生不良反应［3］，因此降血脂保健食品的开发近年来成为国内外的研究热点，而如何快速准确地检测原料及产品的降血脂功能是降血脂产品开发及降血脂机理研究的必要前提。

反映人体血脂的指标通常包括胆固醇、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白以及甘油三酯等，另外，体内胆酸盐含量的变化也能在某种程度上反映血液中胆固醇的水平。

因衡量血脂的指标不同，评价降血脂功能的测定方法也不尽相同。

动物实验方法可直接准确地反应原料和产品的降脂功能，但其成本较高、操作较难、实验周期长、容易引发社会道德等问题。

注射用盐酸法舒地尔与6种常用输液的配伍稳定性研究

股份有限公司，批号Ｏ１０）５Ｓ（９２８；％Ｇ四平巨能药业有限公司，批号００３８；０Ｓ（８８６）１％Ｇ四平巨能药业有限公司，批号Ｃ９１２）０９Ｎ（四平巨能药业有限公司，批号０１００；．％Ｓ
脂肪酶活力单位定义为：在一定条件下。每分钟释放出１ｍｍｌｏ脂肪酸的酶量定义为１个脂肪酶活力单位（。ｕ）按下式计算酶活力：＝Ｖ・０（ｖ・Ｘｃｖ／ｔＭ）式中：ｘ为脂肪酶活力（／）ｃ为脂肪酸浓度（，ｏｍ）ｖｇ；ｐ］１；ｍ］
（０Ｇ）木糖醇注射液、ｔ％Ｓ、复方氯化钠注射液（Ｎ）ＣＳ和复方氨基酸注射液（８Ａ Ⅱ）种输液中的配伍稳定性，１Ａ一６为临床合理用药提供参考。
１仪器与试药
批号１０１—０４１；０６４２００）盐酸法舒地尔注射液（天津红日药业
注射用盐酸法舒地尔与６种常用输液的配伍稳定性研究
朱大胜刘玉梅付秀娟都晓辉荆午慧
循证医学表明，盐酸法舒地尔治疗急性脑梗死疗效显
仪器有限公司）ｐｓ＿ｃ型酸度计（海雷磁仪器厂）；Ｈ＿３上；ｚ＿Ｊ激光注射液微粒分析仪（ＷＦ＿６天津市天河医疗仪器研制
的质量（）ｇ。
３讨论
［］江慧芳，３王雅琴，刘春国．三种脂肪酶活力测定方法的比较及
改进．化学与生物工程，０．４８：２７．２７２（）７－５０
（收稿日期：０１０ — ３２１－５ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ２）

铜皂络合比色法

铜皂络合比色法铜皂络合比色法是一种常用的分析化学定量测定铜离子的方法。

它以铜离子与巴氏液B和皂液S络合形成稳定的络合离子，通过比色测定络合物的吸光度来确定铜的含量。

铜是一种重要的金属元素，广泛应用于电子、建筑、化工等行业。

精确测定铜离子的含量对于保证产品质量以及环境监测具有重要意义。

铜皂络合比色法不仅可以快速准确地测定铜的含量，还具有操作简便、结果稳定可靠等优点，因此被广泛应用于实验室和工业生产中。

使用铜皂络合比色法测定铜离子的步骤如下：首先，准备样品溶液。

将待测样品溶解于适量的稀酸中，注意控制酸的浓度以避免与络合物产生干扰。

在稀酸溶液中，铜离子释放出，并与加入的巴氏液B和皂液S络合反应生成稳定的络合物。

接下来，进行比色测定。

将样品溶液与纯净水以及巴氏液B和皂液S按一定比例混合均匀。

注意控制比例，使样品浓度适中，以保证结果的准确性。

然后，将混合液转移到比色皿中，利用分光光度计测定络合物的吸光度。

根据铜离子与络合物的浓度之间的线性关系，可以通过测定吸光度来计算出铜的含量。

在操作过程中，需要注意以下几点：首先，要保证所有试剂和仪器设备的纯净度。

使用高纯试剂，并注意消除任何可能引入的杂质污染。

其次，要严格控制实验条件。

比如，温度、pH值等环境因素都会对反应的进行产生影响，必须加以控制。

此外，还需要注意样品的预处理。

有些样品可能需要预处理，如稀释、过滤等操作，以去除可能干扰的物质。

最后，要进行方法的验证和修正。

可以使用标准溶液进行回收试验，确保测定结果准确可靠。

如果发现明显的偏差，应及时调整方法参数或重新检验。

综上所述，铜皂络合比色法是一种简单有效的测定铜离子含量的方法。

通过正确使用此方法，并注意操作细节和技巧，我们可以准确地测定铜的含量，保证产品质量，并为环境监测提供有效的数据依据。

皂片的化学实验方法有哪些

皂片的化学实验方法有哪些
皂片的化学实验方法主要有以下几种：
1. 稀溶液法：将皂片加入一定量的水中搅拌溶解，得到稀溶液。

该方法适用于需要皂片溶液的实验。

2. 溶液制备法：将皂片切碎，加入一定量的溶剂（如水、酒精等）中加热搅拌，使其溶解均匀得到溶液。

该方法适用于皂片的溶解实验。

3. 气体产生法：将皂片切碎，与盐酸等强酸反应，产生气体（如二氧化碳）。

该方法适用于气体的产生实验。

4. 氧化还原法：将皂片与过氧化氢等氧化剂反应，产生气泡。

该方法适用于氧化还原反应的实验。

5. 酸碱滴定法：将皂片溶液与酸碱指示剂（如酚酞、溴酚蓝等）反应，进行滴定分析。

该方法适用于酸碱滴定实验。

6. 沉淀法：将皂片溶液与金属盐（如硫酸铜、硝酸银等）混合反应，观察沉淀的形成情况。

该方法适用于沉淀实验。

7. 燃烧法：将皂片点燃，观察其燃烧特性（如火焰颜色、燃烧产物等）。

该方法
适用于燃烧实验。

需要注意的是，在进行皂片的化学实验时，应严格按照实验室安全操作规范进行，避免产生危险和污染。

铜洗法氨合成

铜洗法氨合成
摘要：
1.铜洗法氨合成的背景和意义
2.铜洗法氨合成的原理和过程
3.铜洗法氨合成的优缺点
4.铜洗法氨合成在我国的发展现状和前景
正文：
一、铜洗法氨合成的背景和意义
铜洗法氨合成是一种重要的化工技术，主要用于生产氨。

氨作为工业生产的重要原料，被广泛应用于化肥、化工、能源等多个领域。

因此，铜洗法氨合成在国民经济中具有举足轻重的地位。

二、铜洗法氨合成的原理和过程
铜洗法氨合成的原理是利用铜的还原性，在加热条件下与空气中的氮气反应生成氨。

具体过程如下：
1.将铜放入反应釜中，并加热至高温。

2.向反应釜中通入氮气，使铜与氮气发生反应。

3.在反应过程中，铜逐渐被氮气还原成氧化铜，并生成氨。

4.反应产生的氨通过冷却和凝结，最终得到高纯度的氨产品。

三、铜洗法氨合成的优缺点
1.优点：铜洗法氨合成具有反应条件温和、原料利用率高、产品纯度高等优点，是一种较为理想的氨合成方法。

2.缺点：铜洗法氨合成的缺点是能耗较高，对设备和工艺要求较高，而且产生的氧化铜需要进行处理，增加了生产成本。

四、铜洗法氨合成在我国的发展现状和前景
我国是氨生产和消费大国，铜洗法氨合成在我国有着广泛的应用。

近年来，随着环保政策的加强和技术的不断创新，铜洗法氨合成在我国的发展前景十分广阔。

植物源脂肪酶抑制剂研究进展

植物源脂肪酶抑制剂研究进展李强;任虹;王友升【摘要】脂肪酶抑制剂通过抑制脂肪酶的活性,减少食物中脂类物质的消化和吸收,达到控制和治疗肥胖的目的.植物来源的天然产物化合物具有来源广泛、结构多样、特异性高、毒性低等特点,因而从植物中筛选安全有效的脂肪酶抑制剂成为研究热点.本文综述了脂肪酶活性测定方法以及植物来源的不同结构类型的脂肪酶抑制剂研究进展.【期刊名称】《天然产物研究与开发》【年(卷),期】2015(027)002【总页数】7页(P360-366)【关键词】脂肪酶活性测定;脂肪酶抑制剂;植物源化合物【作者】李强;任虹;王友升【作者单位】北京工商大学食品学院北京市食品风味化学重点实验室食品添加剂与配料北京高校工程研究中心食品质量与安全北京实验室,北京100048;北京工商大学食品学院北京市食品风味化学重点实验室食品添加剂与配料北京高校工程研究中心食品质量与安全北京实验室,北京100048;北京工商大学食品学院北京市食品风味化学重点实验室食品添加剂与配料北京高校工程研究中心食品质量与安全北京实验室,北京100048【正文语种】中文【中图分类】Q814.9肥胖症(obesity)是指体内脂肪积聚过多和(或)分布异常、体重增加，是由遗传、环境等因素共同作用的慢性代谢性疾病。

肥胖会引起高血压、高血脂、糖尿病等并发症，严重威胁人类的健康。

脂肪酶抑制剂可抑制脂肪水解过程的关键酶胰脂肪酶的活性，减少食物中脂类物质的消化和吸收，从而达到控制和治疗肥胖的目的，目前，开发和应用脂肪酶抑制剂作为减肥药备受关注。

目前脂肪酶抑制剂的主要来源是化学合成、微生物代谢产物和植物提取物。

化学合成的脂肪酶抑制剂对身体有不同程度的损伤，而天然来源的脂肪酶抑制剂具有结构多样、毒性低等特点。

本文从脂肪酶活性的测定方法及脂肪酶抑制剂的结构类型进行综述，为高效低毒植物来源脂肪酶抑制剂开发提供理论基础。

1 脂肪酶活性测定方法1.1 对硝基苯酚法对硝基苯酚法［1］是利用脂肪酶水解对硝基苯酚酯的产物对硝基苯酚在420 nm 波长下有最大吸收值，通过对照对硝基苯酚吸光度标准曲线得出对硝基苯酚浓度，计算出脂肪酶活力，对硝基苯酚法稳定性好、精确度高。

血脂各个项目的不同测定方法

血清脂类测定血浆中的脂类包括胆固醇、胆固醇脂、甘油三酯、磷脂和非酯化脂肪酸等。

目前，对有关脂类代谢疾患的诊断和治疗过程，均必须检测血浆（清）中的脂类，通过其含量的变化，对临床疾患提供协助诊断的依据。

有关医学科研工作，脂类的定量检测也是一项必备的研究项目。

1．胆固醇测定血浆中胆固醇及其酯的含量检测，从方法学上可分为两大类：一类是化学法包括抽提法和直接测定法，这类方法目前仍在沿用；另一类是酶法测定，方法敏感特异快速，并能自动化分析，已常规应用。

化学测定法种类多，由于显色反应的特异性不同，其结果有一定的差异。

目前公认的参考方法是Abell-Kendall(L-B反应)法。

另外，三氯化铁-硫酸反应法（Zak法）具有显色稳定法、操作简便、灵敏度约5倍于L-B反应法，胆固醇酯与游离胆固醇显色程度比较接近等优点，缺点是特异性差，干扰因素比L-B法多，如冰醋酸中含有的乙醛酸，血清样品中的血红蛋白，胆红素以及硫酸的质量等因素均可影响Zak方法的准确性，Zak法更适合于科研使用。

酶法测定血清胆固醇的方法已被广泛采用，国产试剂已能满足临床的需要。

胆固醇测定用的标准品，按美国国家标准局（NBS）出品纯度达99.8%,是国际公认的参考物，国内李健斋等已纯化制成符合这一要求的胆固醇纯品，已供临床检测血清胆固醇使用。

2．甘油三酯测定血浆甘油三酯的测定，目前多以化学法和酶法定量。

化学法测定甘油三酯是以脂蛋白变性，水解成甘油，并以甘油为计算依据。

酶法是以特异酶水解甘油三酯，除去脂肪酸，再测定甘油，方法特异，准确而快速，临床广为应用。

目前甘油三酯测定的方法主要以定量甘油为依据，然而血清样品中存在有游离甘油，如何从反应过程中的总甘油中减去游离甘油，多年来一直在研究讨论这一问题。

若不减去，其测定值将会高于血清样品中的真值，如果要减去，就必须先测出血清样品中的游离甘油，甘油三酯的测定方法将增加一个繁杂的步骤，实际工作中难以做到。

有报道血清样品中的游离甘油实际量是0.07～0.13mmol/L，相当于甘油三酯的0.5～6.0mmol/L，为此建议，实测的甘油三酯量减去一个校正系数即：甘油三酯（mmol/L）=[0.98×总甘油（mmol/L）]-0.07（mmol/L）。