实验一 柱色谱
柱色谱实验报告
柱色谱实验报告柱色谱实验报告引言：柱色谱（Column Chromatography）是一种广泛应用于化学、生物化学、药学等领域的分离技术。
本次实验旨在通过柱色谱技术对混合物进行分离和纯化，以了解其原理和应用。
实验材料与方法：1. 实验材料：柱色谱柱、样品混合物、溶剂、色谱柱填料等。
2. 实验方法：a. 准备柱色谱柱：将填料均匀填充至柱内，注意保持填料层的均匀性。
b. 样品预处理：将待分离的混合物溶解于合适的溶剂中，并进行必要的前处理，如过滤、浓缩等。
c. 样品加载：将预处理好的样品溶液缓慢地加入柱中，避免产生气泡。
d. 溶剂选择：根据样品的特性选择合适的溶剂体系，以实现样品分离。
e. 溶剂梯度洗脱：通过改变溶剂体系中溶剂的组成，控制样品在柱内的停留时间，实现样品分离。
f. 分离效果评价：通过观察柱床上的色带，并进行必要的检测手段，如紫外可见光谱、质谱等，评价分离效果。
实验结果与讨论：柱色谱实验的结果主要通过观察柱床上的色带来进行评价。
色带的宽度和形状可以反映样品的分离程度，色带越窄越尖锐，说明分离效果越好。
在实验过程中，我们可以根据需要收集不同色带的组分，进一步进行纯化和分析。
柱色谱实验的成功与否受到多个因素的影响，其中包括填料的选择、溶剂体系的优化、样品的预处理等。
填料的选择应根据样品的性质和分离要求来确定，不同填料具有不同的亲疏水性和分离能力。
溶剂体系的优化是柱色谱实验中关键的一步，通过调整溶剂的极性和流动速度，可以实现对样品的有效分离。
样品的预处理也是确保柱色谱实验成功的重要环节，如样品的过滤、浓缩等，可以避免填料堵塞和背景噪音的干扰。
柱色谱实验不仅可以用于分离和纯化混合物，还可以用于定性和定量分析。
在实验中，我们可以通过收集不同色带的组分，进行进一步的检测和分析。
例如，通过紫外可见光谱检测，可以确定某个组分的最大吸收波长，从而进行定性和定量分析。
此外，柱色谱实验还可以与其他分析方法相结合，如质谱联用、核磁共振等，进一步提高分析的准确性和灵敏度。
实验一柱色谱
实验⼀柱⾊谱实验⼀柱⾊谱、薄⾊谱⼀、实验⽬的1、了解⾊谱法分离提纯有机化合物的基本原理和应⽤。
2、掌握柱层析、薄层层析的操作技术。
⼆、实验原理⾊谱法（Chromatography）亦称⾊层法、层析法等。
⾊谱法是分离、纯化和鉴定有机化合物的重要⽅法之⼀。
⾊谱法的基本原理是利⽤混合物各组分在某⼀物质中的吸附或溶解性能（分配）的不同，或其亲和性的差异，使混合物的溶液流经该种物质进⾏反复的吸附或分配作⽤，从⽽使各组分分离。
⾊谱法在有机化学中的应⽤主要包括以下⼏⽅⾯:1、分离混合物⼀些结构类似、理化性质也相似的化合物组成的混合物，⼀般应⽤化学⽅法分离很困难，但应⽤⾊谱法分离，有时可得到满意的结果。
2、精制提纯化合物有机化合物中含有少量结构类似的杂质，不易除去，可利⽤⾊谱法分离以除去杂质，得到纯品。
3、鉴定化合物在条件完全⼀致的情况，纯碎的化合物在薄层⾊谱或纸⾊谱中都呈现⼀定的移动距离，称⽐移值（Rf值），所以利⽤⾊谱法可以鉴定化合物的纯度或确定两种性质相似的化合物是否为同⼀物质。
但影响⽐移值的因素很多，如薄层的厚度，吸附剂颗粒的⼤⼩，酸碱性，活性等级，外界温度和展开剂纯度、组成、挥发性等。
所以，要获得重现的⽐移值就⽐较困难。
为此，在测定某⼀试样时，最好⽤已知样品进⾏对照。
4、观察⼀些化学反应是否完成，可以利⽤薄层⾊谱或纸⾊谱观察原料⾊点的逐步消失，以证明反应完成与否。
吸附⾊谱主要是以氧化铝、硅胶等为吸附剂，将⼀些物质⾃溶液中吸附到它的表⾯上，⽽后⽤溶剂洗脱或展开，利⽤不同化合物受到吸附剂的不同吸附作⽤，和它们在溶剂中不同的溶解度，也就是利⽤不同化合物在吸附剂上和溶液之间分布情况的不同⽽得到分离。
吸附⾊谱分离可采⽤柱⾊谱和薄层⾊谱两种⽅式。
柱⾊谱常⽤的有吸附⾊谱和分配⾊谱两种。
吸附⾊谱常⽤氧化铝和硅胶为吸附剂。
分配⾊谱以硅胶、硅藻⼟和纤维素为⽀持剂，以吸收较⼤量的液体作为固定相。
吸附柱⾊谱通常在玻璃管中填⼊表⾯积很⼤经过活化的多孔性或粉状固体吸附剂。
大学柱色谱实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 理解柱色谱分离的基本原理和方法。
2. 掌握柱色谱实验的操作技能，包括样品的制备、色谱柱的填充、洗脱剂的选择和样品的收集。
3. 学习如何分析色谱分离的结果，并能够根据分离效果评估实验条件。
二、实验原理柱色谱是一种利用混合物中各组分在固定相和流动相之间分配系数的不同来实现分离的技术。
实验中，将含有目标组分的混合物通过填充有吸附剂的色谱柱，由于不同组分在固定相和流动相中的分配系数不同，它们在色谱柱中的移动速度也会不同，从而实现分离。
三、实验仪器与试剂1. 仪器：- 柱色谱柱（玻璃或塑料）- 漏斗- 烧杯- 滴定管- 铁架台- 秒表2. 试剂：- 吸附剂（如硅胶、氧化铝等）- 混合样品（含目标组分）- 洗脱剂（根据目标组分的极性选择）- 标准样品（用于对照和定量分析）四、实验步骤1. 准备色谱柱：将吸附剂倒入漏斗中，用滴定管缓慢倒入色谱柱中，使其填充紧密。
2. 样品制备：准确称取一定量的混合样品，用适量的溶剂溶解。
3. 样品上样：将样品溶液缓慢滴加到色谱柱顶部，注意控制流速。
4. 洗脱：将洗脱剂滴加到色谱柱顶部，控制流速，收集流出液。
5. 收集分离组分：观察色谱柱中的分离情况，记录各组分对应的收集时间。
6. 样品分析：将收集到的各组分进行进一步的分析，如薄层色谱、红外光谱等。
五、实验结果与分析1. 分离效果：观察色谱柱中的分离情况，记录各组分对应的收集时间，分析分离效果。
2. 定量分析：根据收集到的各组分量，计算其含量，并与标准样品进行对照。
3. 优化实验条件：根据分离效果，分析实验条件对分离效果的影响，如吸附剂类型、洗脱剂类型、流速等，并对实验条件进行优化。
六、问题与讨论1. 实验中遇到的问题：- 色谱柱填充不均匀，导致分离效果不佳。
- 洗脱剂选择不当，导致分离效果不佳。
- 流速控制不当，导致分离效果不佳。
2. 解决方法：- 优化色谱柱填充方法，确保填充均匀。
- 根据目标组分的极性选择合适的洗脱剂。
柱色谱实验报告
柱色谱实验报告
本实验的目的是通过柱色谱技术来分离混合物中的苯酚和甲苯，并测定两者的含量。
一、实验原理
柱色谱法是对物质进行分离和纯化的一种常用方法。
本实验中
使用的是正相柱色谱，即静相和流动相极性相似的柱子进行分离，这种柱色谱技术常用于分离具有不同极性的物质。
流动相越极性，进样物质在静相中沿着柱子下部逐渐吸附，其残留成分则向上移动，沿柱子逐渐分离。
这样，在离子交换、氢键和范德华力等作
用下，不同物质被吸附在流动相和静相界面处，并呈现分离的效果。
二、实验步骤
第一步：准备样品
取出1g苯酚甲苯混合物称到50ml瓶中，加入约10ml甲醇溶
解均匀。
第二步：制备流动相
将n-正己烷和乙酸乙酯按2:1的体积比加入到流动相瓶中，并摇匀。
第三步：进样、柱洗和分离
将制备好的样品注入柱子中，花费30分钟进行洗柱，在分离过程中，维持均匀的流速。
第四步：柱洗结束和分析
柱洗结束后，将柱子移动到荧光检测器上，即可对样品进行定量分析和浓度测定。
三、实验结果
通过实验分析得出，样品中苯酚和甲苯其峰值分别为11.23和22.45，而其相对峰度分别为0.353和0.659。
根据这些结果，我们可以得出样品中苯酚和甲苯的质量分数分别为35.3%和65.9%。
四、实验结论
通过这次柱色谱实验，我们成功地将混合物中的苯酚和甲苯分离，并测定出两者的质量分数。
此次实验使用的是正相柱色谱技术，柱子中的静相和流动相在极性上相似，达到了较为明显的分离效果。
总而言之，在实验过程中我们掌握了柱色谱法的基本原理和常用方法，对于学习化学分析方法的同学来说，具有较高的参考价值。
柱色谱的原理及应用实验报告
柱色谱的原理及应用实验报告柱色谱是一种重要的分析技术，广泛应用于许多行业和领域。
本实验旨在研究柱色谱的原理及其在实际应用中的作用。
本实验主要包括柱色谱的原理、柱色谱仪的组成与工作原理、柱色谱法的应用、实验步骤和结果分析等内容。
一、柱色谱原理柱色谱是一种通过样品在固定相和流动相之间的相互作用而实现分离和分析的技术。
在柱色谱中，固定相是固定在柱子内壁上的物质，可以是多孔材料、涂覆剂或化学修饰物等。
流动相是溶液，溶液中溶质在固定相表面上发生吸附、解吸、离子交换、分配等作用，从而实现对溶质的分离和分析。
二、柱色谱仪的组成与工作原理柱色谱仪主要由进样系统、流动相装置、柱子和检测器等组成。
进样系统用于将待测样品引入柱子中。
流动相装置用于生成流动相，其流动速度可以通过流量控制器调节。
柱子是分离和分析的关键组件，根据固定相的不同可以分为气相柱色谱和液相柱色谱。
检测器用于检测样品在柱子中的存在。
柱色谱的工作原理如下：在进样系统中，待测样品首先与流动相混合，并经过进样阀进入柱子。
然后流动相在柱子中传递，溶质与固定相发生相互作用，不同组分根据其在固定相上的吸附、解吸、离子交换、分配等特性被分离。
最后，通过检测器检测样品的存在并产生信号，通过信号处理器得到最终结果。
三、柱色谱法的应用柱色谱广泛应用于药物研发、食品安全、环境监测等领域。
具体应用包括：1.药物研发：柱色谱可用于药物的纯度检测、药物代谢产物的分析、药物残留量的测定等。
2.食品安全：柱色谱可用于食品中添加剂、农药残留、重金属等有害物质的分析和检测。
3.环境监测：柱色谱可用于水体、大气等环境中有机物、无机物的分析和监测。
四、实验步骤1.准备样品和流动相：根据实验要求准备样品和流动相溶液，并调节溶液的pH值和浓度。
2.准备柱子：选择合适的柱子，装填和平衡固定相。
3.进行柱温、流速和检测器等参数的设置。
4.进样和开始实验：将样品注入进样系统，设置流动相的流速，然后开始实验。
《柱色谱分离实验》课件
硫酸或氢氧化钠：用 于调节洗脱液的pH 值。
蒸馏水：用于制备洗 脱液和清洗实验器具 。
03 实验步骤与操作
实验前的准备
实验材料
硅胶、氧化铝、活性炭、 硅藻土等；玻璃色谱柱、 吸附剂、砂芯漏斗、脱脂 棉等；样品和溶剂。
实验设备
分液漏斗、烧杯、玻璃棒 、天平等。
实验试剂
不同比例的溶剂，如石油 醚、乙酸乙酯、乙醇等。
指标的合理性。
误差分析
对实验误差进行分析，找出误差产 生的原因，并提出减小误差的措施 。
结果讨论
根据实验结果，讨论柱色谱分离实 验的影响因素和优化方法，为改进 实验提供依据。
05 结论与展望
实验结论总结
柱色谱分离实验是一种有效的分离方法，能够将混合物中的各组分进行有效的分离 。
通过实验，我们观察到了各组分在柱子上的吸附和解吸过程，并成功分离出了目标 组分。
换吸附剂。
03
实验结果分析
在实验结束后，应对实验结果进行分析和总结，以便更好地了解各组分
的性质和含量。同时，应将实验数据和结果记录在实验报告中，以便后
续的查阅和分析。
04 实验结果与分析
实验结果展示
分离后的色谱图
展示实验中得到的色谱图，包括 各组分的出峰时间、峰高、峰面 积等数据。
分离效果评估
通过对比标准品和实验样品的色 谱图，评估分离效果，包括分离 度、纯度等指标。
实验操作流程
01
02
03
04
准备色谱柱
选择合适的吸附剂，填充色谱 柱，确保填充均匀。
上样
将样品溶液缓慢加入色谱柱顶 部，同时用少量溶剂冲洗砂芯
漏斗，以避免样品残留。
洗脱
选择合适的溶剂系统，按照一 定顺序进行洗脱，收集洗脱液
柱色谱实验报告苯甲酸
一、实验目的1. 掌握柱色谱的基本原理和操作方法。
2. 通过柱色谱实验，实现对苯甲酸的分离和鉴定。
3. 学习并应用化学分析方法，提高实验技能。
二、实验原理柱色谱是一种利用不同物质在固定相和流动相中的分配系数差异，实现混合物分离的方法。
本实验中，苯甲酸作为待分离物质，与固定相（如硅胶）和流动相（如正己烷-乙酸乙酯混合溶剂）相互作用。
由于苯甲酸在固定相和流动相中的分配系数不同，从而在柱上实现分离。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：苯甲酸、硅胶、正己烷、乙酸乙酯、蒸馏水、无水硫酸钠、硅胶G 薄层板、展开剂、显色剂等。
2. 实验仪器：柱色谱柱、柱塞、玻璃棒、烧杯、电子天平、移液管、滴定管、烘箱、紫外灯等。
四、实验步骤1. 准备柱色谱柱：将硅胶装入柱色谱柱中，填充高度约为10cm，用玻璃棒轻轻捣实。
2. 湿法装样：取苯甲酸样品，加入适量正己烷-乙酸乙酯混合溶剂，溶解后转移至柱色谱柱中，用玻璃棒轻轻捣实。
3. 上样：将溶解好的苯甲酸样品缓慢倒入柱色谱柱中，待样品流出后，加入适量的正己烷-乙酸乙酯混合溶剂，使样品完全进入柱色谱柱。
4. 洗脱：用正己烷-乙酸乙酯混合溶剂进行梯度洗脱，收集流出液。
5. 检测与鉴定：将收集到的流出液滴加到硅胶G薄层板上，用紫外灯照射，观察苯甲酸斑点出现的位置，并与标准样品进行对比鉴定。
五、实验结果与分析1. 柱色谱分离效果：根据实验结果，苯甲酸在柱色谱柱上得到了较好的分离，出现了明显的分离带。
2. 鉴定结果：通过紫外灯照射，观察到苯甲酸斑点在硅胶G薄层板上呈现特征吸收峰，与标准样品一致，证明实验成功分离并鉴定了苯甲酸。
六、实验讨论1. 柱色谱分离效果的影响因素：柱色谱分离效果受多种因素影响，如硅胶的粒度、固定相和流动相的选择、洗脱剂的选择等。
在本实验中，通过优化实验条件，实现了苯甲酸的较好分离。
2. 柱色谱在有机合成中的应用：柱色谱是一种常用的分离纯化方法，在有机合成、药物分析等领域具有广泛的应用。
柱色谱分离实验
吸附色谱法
分离原理
分配色谱法
离子交换色谱法 排阻色谱
柱色谱分离实验
柱色谱分离实验
二、实 验 原 理
柱色谱分离示意图
洗脱剂(流动相) 混合物
吸附剂(固定相)
柱色谱分离实验
柱色谱分离实验
二、实 验 原 理 影响分离效果主要因素
化合物的结构：化合 物的吸附性和它们的 极性成正比
洗脱剂的极性：溶解 度适中、不反应、易 获取回收
柱色谱分离实验
装置图
洗脱
装柱
柱色谱分离实验
实验步骤
• 装柱：
• 1、装色谱柱： • （1）取一支色谱柱，在柱子的收缩部塞一小团脱脂棉花将色谱柱垂
直固定在铁架台上。 • (2) 关闭活塞，向柱中倒入蒸馏水（也是洗脱剂，至柱体积的
1/2） • （3）填吸附剂：称取10g 硅胶于小烧杯中 ,加入 15mL 蒸馏水 ,用玻
吸附剂的性质：均匀、 表面积大、不反应、 吸附能力不同
柱色谱分离实验
柱色谱分离实验
柱色谱分离实验
柱色谱分离实验
柱色谱分离实验
柱色谱分离实验
柱色谱分离实验
柱色谱分离实验
柱色谱分离实验
柱色谱分离实验
柱色谱分离实验
柱色谱分离实验
柱色谱分离实验
在氧化铝柱子上若分离下列各组混合物，哪一个组分先被洗脱下来？
试样无色 可结合薄层色谱结果
柱色谱分离实验
四、注 意 事 项
• 玻砂防堵塞 • 装柱需紧密 • 加压不可大 • 溶剂勿流干
柱色谱分离实验
小结
色谱法在有机化学中的应用:
分离混合物 精制提纯化合物 利用比移值(Rf)鉴定化合物 跟踪反应进程
柱色谱分离实验
柱色谱实验报告
柱色谱实验报告实验目的：通过柱色谱技术对混合物进行分离和纯化，掌握柱色谱实验的基本操作技能，了解柱色谱的原理和应用。
实验原理：柱色谱是一种以柱状填料为固定相的色谱技术，利用不同物质在固定相和流动相间的分配系数不同而实现物质分离的方法。
在柱色谱实验中，首先需要准备填料，并将填料装入柱子中，然后将待分离的混合物溶液通过柱子，利用固定相和流动相的相互作用，使混合物中的成分分离出来。
实验步骤：1. 准备填料，将所需填料按照实验要求进行处理和激活。
2. 装填柱子，将填料装入柱子中，并进行均匀压实。
3. 样品处理，将待分离的混合物进行前处理，如溶解、过滤等。
4. 进样和洗脱，将样品溶液通过柱子，洗脱待分离的成分。
5. 收集洗脱液，根据实验要求，收集洗脱液中的不同组分。
6. 结果分析，对收集的洗脱液进行分析，得到实验结果。
实验数据：根据实验结果，我们成功地对混合物进行了分离和纯化，得到了目标组分，并进行了进一步的分析和鉴定。
实验数据表明，柱色谱技术在分离和纯化混合物中具有很高的效果和应用价值。
实验结论：通过本次柱色谱实验，我们对柱色谱技术有了更深入的了解，掌握了柱色谱实验的基本操作技能，对柱色谱技术的原理和应用有了更清晰的认识。
柱色谱技术在化学、生物、医药等领域有着广泛的应用，具有很高的分离和纯化效果，是一种重要的分析技术手段。
综上所述，柱色谱实验是一项重要的实验技术，具有广泛的应用前景和重要的理论意义。
通过本次实验，我们对柱色谱技术有了更深入的了解，为今后的科研工作和实验操作积累了宝贵的经验。
希望通过不断的学习和实践，能够更好地掌握柱色谱技术，为科学研究和实验分析做出更大的贡献。
柱色谱法实验报告
柱色谱法实验报告1. 实验目的本次实验旨在通过柱色谱法分离和鉴定混合物中的成分，掌握柱色谱法的基本原理和操作方法。
2. 实验原理柱色谱法是一种常用的分离技术，它基于不同成分在固定相和流动相之间的相互作用力不同而实现分离。
在柱色谱法中，混合物溶液通过装有固定相的柱子，流动相从柱子的顶部通过，混合物中的成分经过一段时间后按照其亲和性被逐渐分离出来。
3. 实验步骤3.1 准备工作将柱色谱柱安装在色谱仪上，并调整流量控制阀的流速为适当值。
确保色谱柱处于恒温状态，以保证实验结果的准确性。
3.2 样品制备将待分离的混合物溶解于适当的溶剂中，经过充分搅拌和过滤处理，以获得均匀的溶液样品。
3.3 柱装填将固定相装填到柱子中，确保固定相层均匀、紧密，并且不会轻易破碎。
3.4 样品进样使用一个适当的进样器，将样品溶液按照设定的体积进样到柱子中。
3.5 流动相选择根据样品的性质，选择合适的流动相和流动相的组成。
根据柱色谱柱的特性和样品的特性，可以确定出最佳的流动相组合。
3.6 实验操作打开流量控制阀，确保流动相在柱子中平稳流动。
观察流出溶液的颜色和透明度的变化，记录相关数据。
3.7 分析结果通过观察柱子中不同组分的出现时间和峰的高度，可以根据已知标准物质的特性和峰值进行对比，进一步鉴定未知物质的成分。
4. 实验结果与讨论根据实验步骤所描述的操作，对样品进行柱色谱法分离与鉴定。
通过观察实验结果，可以得出以下结论：1.样品中的不同成分在流动相的作用下，按照其亲和性逐渐分离出来；2.根据已知标准物质的特性和峰值高度，可以初步鉴定未知物质的成分；3.实验中所使用的流动相组合对柱色谱法的分离效果具有重要影响。
5. 实验总结通过本次实验，我们成功地掌握了柱色谱法的基本原理和操作方法，学会了使用柱色谱法分离和鉴定混合物中的成分。
实验结果表明柱色谱法是一种有效的分离技术，可以广泛应用于化学、生物和制药等领域。
未来可以进一步探究柱色谱法在不同条件下的分离效果，并尝试优化实验步骤和流动相组合，以提高柱色谱法的分离效率和准确性。
色谱分析法实验实验一填充柱气相色谱进样技术练习一、实验目的1综述
建筑应用文写作习题集目标模块概论一、填空（一）运用应用文专用词语填空1.××省××局：____局×字〔1983〕第073号请示 _____ ，经与××部研究 ____如下：……2. ____部领导指示精神，•我局会同××司××办公室抽调×名同志组成了“××事件调查组”……3.《××××办法》＿＿厂务委员会讨论通过，现发给你们，望结合本单位具体情况＿＿执行。
4.……以上意见，如＿＿，＿＿批转各部属院校。
5.……为了……的需要，特＿＿如下指令。
6. ＿＿局大力协助，•我校×××研究所各项筹建工作已基本告一段落。
7.×××来函＿＿，关于××一事，我部完全同意＿＿局意见……特此＿＿。
8.……以大力协作＿＿。
9.以上所请＿＿，以迅即批复＿＿。
10. ＿＿生＿＿我校××系××专业××级学员……11. ＿＿该厂此类错误做法，上级有关部门曾多次行文，＿＿其有关领导迅即查清问题，限期纠正错误。
12. ＿＿悉＿＿总公司成立，谨表＿＿。
13.以上命令＿＿施行，不得＿＿。
14.以上通令，应使全体公民＿＿，切实＿＿执行。
15.随函附送《××××情况统计资料》一份，请＿＿。
16. ＿＿国务院领导同志的指示精神，•我们＿＿有关部门，对农村电网改造工作进行了研究。
17.＿＿进一步提高我省企业管理干部的管理素质，决定对在岗企业管理干部有计划地进行培训。
＿＿征得四川省行政管理学院同意，＿＿委托＿＿院举办企业管理专业班……18.以上请示，望予＿＿，并列入一九九一年招生计划。
19. ＿＿防止计算机2000年问题，＿＿国务院批准，＿＿将有关问题通知如下。
柱色谱法实验报告
柱色谱法实验报告摘要：柱色谱法是一种常用的分离和纯化化合物的技术。
本实验使用的是液相柱色谱法，通过选择合适的固定相和移动相，成功地将混合物中的目标物分离出来，并进行了进一步的分析和表征。
本实验详细介绍了柱色谱法的原理和操作步骤，并讨论了在实验中遇到的一些问题以及可能的改进方法。
引言：柱色谱法是一种常用的分离和纯化化合物的技术，广泛应用于各种领域，如药品制造、化工和食品科学等。
柱色谱法的基本原理是将混合物注入到柱中，通过流动相在柱中进行分离，不同化合物在柱中的行为不同，因而可以分离开来。
本实验旨在探究柱色谱法在分离和纯化化合物中的应用。
材料与方法：1. 实验仪器：柱色谱仪、移液器等；2. 实验材料：柱包、液相固定相、溶剂等；3. 柱的准备：a. 取一个干净的柱包；b. 将液相固定相均匀填充到柱包中；c. 用少量的溶剂将柱包中的液相固定相湿润；d. 用移液器均匀注入待分离混合物；e. 将柱包安装到柱色谱仪中。
结果与讨论：在本次实验中，我们选择了一种常见的液相固定相，并使用了合适的溶剂作为流动相。
经过分离和纯化后，我们成功地获得了目标化合物。
然而，在实验过程中，我们也遇到了一些问题。
首先，柱的准备过程需要一定的技巧和耐心，以确保液相固定相的均匀填充和柱的良好状态。
其次，在选择流动相时，我们需要考虑溶剂的极性和相容性，以保证分离效果。
最后，在分离过程中，柱温、流速和柱寿命等因素也会对柱色谱的分离效果产生影响。
为了解决这些问题，我们可以采取以下措施进行改进。
首先，在柱的准备过程中，我们可以使用适量的溶剂进行预洗，以确保柱内的杂质被彻底去除。
其次，在选择流动相时，我们可以根据待分离的化合物的特性来调整溶剂的组成，以获得更好的分离效果。
最后，我们还可以控制柱温和流速的参数，以优化柱色谱分离的效果。
结论：本实验使用柱色谱法成功地分离和纯化了混合物中的目标化合物。
柱色谱法是一种常用的分离和纯化技术，其原理和操作相对简单，但在实际应用中仍需注意柱的准备和流动相的选择。
仪器分析实验柱色谱
仪器分析实验柱色谱柱色谱（Column Chromatography）是一种常用于分离和纯化物质的分析技术，广泛应用于化学、生物、制药和环境等领域。
它的原理基于不同物质在固定相和移动相之间的不同亲和力，使得混合物中的组分在柱状填充物上有不同的保留时间，从而被分离开来。
柱色谱实验通常包含以下几个步骤：1.准备样品：将待分离的混合物溶解在适当的溶剂中，使其能够与移动相相互作用。
此外，还需要根据混合物的性质选择合适的柱填料和分离条件。
2.准备色谱柱：选择合适的柱子和填充物，将填充物充填到柱子中。
填充物的选择应考虑样品的性质、分离效果和分析时间等因素。
3.打磨柱子：打磨柱子用于调整填充物的均匀性和密实度，以确保柱子内部的液相流动均匀。
4.装样：将溶解好的样品注入柱子中，通常使用移液管或注射器进行装样。
样品的量应适当，以避免液相在柱子中过度膨胀或过度压缩。
5.注入移动相：通过柱子中的顶部或侧面注入适量的移动相，使其通过填充物。
6.收集分离组分：根据不同组分的保留时间，在移动相逐渐通过填充物的过程中，分离出不同的组分。
通常使用收集管或直接收集移动相中的色带来收集每个组分。
7.分析分离组分：对收集的分离组分进行性质分析，常用的方法有紫外-可见吸收光谱、质谱和红外光谱等。
8.优化和改进：根据分析结果，根据需要对实验条件进行优化和改进，以获得更好的分离结果。
柱色谱实验的优点包括：简单易操作、分离效果好、适用范围广等。
同时，柱色谱也存在一些局限性，例如对样品量要求较高、分离时间较长、柱填料的选择和调整较为困难等。
总之，柱色谱是一种常用的仪器分析实验技术，通过利用不同物质在固定相和移动相之间的亲和力差异，实现对混合物中组分的分离和纯化。
在一些特定条件下，柱色谱还能实现对不同组分的定量分析和结构表征。
柱色谱实验报告范文
柱色谱实验报告范文一、实验目的通过柱色谱法对混合溶液中的成分进行分离和检测。
二、实验原理柱色谱是一种基于溶质在固定相和流动相之间分配行为的物理分离方法。
实验中利用柱内填充有固定相的柱子，将要分离的混合溶液通过柱子，不同的成分会以不同的速率通过柱子，从而实现分离。
三、实验仪器与试剂1.柱色谱仪：包括柱子、流动相供给装置和检测系统。
2.流动相：根据分离的需要选择合适的流动相，实验中选择醇和水的混合溶液。
3.样品：混合待分离的溶液。
四、实验步骤1.准备好柱子并填充固定相：将柱子连接到流动相供给装置上，然后将固定相填充到柱子内，使其均匀分布。
2.将流动相泵至柱子中：开启流动相供给装置，将流动相缓慢泵入柱子中，保持流动相的稳定性。
3.样品处理：将待分离的混合溶液处理成适合柱色谱分离的样品，如加入适量的溶剂稀释。
4.样品注入：将处理后的样品注入到柱子中，并记录注入的时间。
5.取样：根据样品的注入时间，定期从柱子中取样，在检测系统中进行检测。
6.分析和记录：根据检测系统的输出结果，分析并记录各个组分的峰面积、保留时间等信息。
五、实验结果与讨论实验中，我们选择了水和醇的混合溶液作为流动相，将待分离的溶液注入到柱子中进行分离。
根据检测系统的输出结果，我们观察到了多个组分的峰，每个峰代表一个组分。
通过测量各个峰的保留时间和峰面积，我们可以确定各个组分的相对含量。
六、实验结论通过柱色谱的实验，我们成功地对混合溶液中的各个组分进行了分离和检测。
根据检测结果，我们得到了各个组分的相对含量。
柱色谱法是一种有效的分离和检测技术，能够广泛应用于物质分析领域。
七、实验总结柱色谱实验是一种重要的分离和检测技术，通过实验我们了解了柱色谱的基本原理和操作方法。
在实验过程中，我们需要注意保持流动相的稳定性，以及选择合适的固定相和流动相进行分离。
同时，还需要合理地处理样品，并根据输出结果进行数据分析。
通过这次实验，我们对柱色谱的原理和应用有了更深入的理解。
柱色谱法有机实验报告
柱色谱法有机实验报告柱色谱法有机实验报告一、引言柱色谱法是一种常用的分离和纯化有机化合物的方法，它基于物质在固定相和移动相之间的分配行为。
本实验旨在通过柱色谱法，对给定的有机混合物进行分离和纯化，并通过实验结果分析柱色谱法的应用。
二、实验材料与方法1. 实验材料：（1）柱色谱柱：选择合适的柱色谱柱，如硅胶柱、薄层硅胶柱等；（2）样品：有机混合物；（3）移动相：选择合适的溶剂，如乙酸乙酯、正己烷等；（4）固定相：根据实验需要选择合适的固定相。
2. 实验方法：（1）制备柱色谱柱：将固定相均匀填充至柱色谱柱中，保持柱床的均匀性；（2）样品预处理：将有机混合物溶解于适量的溶剂中，并进行必要的前处理，如过滤、浓缩等；（3）柱色谱分离：将样品溶液加入柱色谱柱上方，并使用移动相进行柱色谱分离；（4）收集分离物：根据柱上分离物的不同特性，及时收集目标化合物。
三、实验结果与分析在本实验中，我们选择了硅胶柱作为柱色谱柱，乙酸乙酯作为移动相，进行了柱色谱分离实验。
实验结果显示，有机混合物中的化合物A、B、C成功被分离，并得到了纯化的目标化合物。
通过对实验结果的分析，我们发现柱色谱法的分离效果与固定相的选择密切相关。
固定相的选择应根据目标化合物的性质和有机混合物的组成进行合理的考虑。
在本实验中，我们选择了硅胶作为固定相，由于硅胶对极性化合物有较好的亲和性，因此能够有效地分离出目标化合物。
此外，移动相的选择也对柱色谱分离的效果有着重要的影响。
移动相的极性应与固定相相匹配，以保证化合物在两相之间的分配行为。
在本实验中，我们选择了乙酸乙酯作为移动相，由于乙酸乙酯具有一定的极性，能够与硅胶发生相互作用，从而实现有效的分离。
四、实验总结与展望通过本次柱色谱法有机实验，我们深入了解了柱色谱法的原理和应用。
柱色谱法作为一种常用的分离和纯化方法，具有操作简便、分离效果好等优点，在有机化学领域得到了广泛的应用。
然而，柱色谱法仍然存在一些局限性，如对样品量要求较高、分离速度较慢等。
柱色谱法实验报告
柱色谱法实验报告柱色谱法实验报告引言：柱色谱法是一种常用的分离和分析技术，广泛应用于化学、生物、医药等领域。
本实验旨在通过柱色谱法对混合溶液中的组分进行分离和定量分析，以探究其原理及应用。
实验方法：1. 实验仪器与试剂准备：将柱色谱仪、色谱柱、进样器等仪器准备妥当，并选取适当的色谱柱填料。
准备好待测样品溶液和标准溶液。
2. 柱色谱法的原理：柱色谱法是基于样品组分在固定相（色谱柱填料）和流动相（溶液）之间的分配行为进行分离的。
不同组分在固定相和流动相之间的相互作用力不同，从而导致各组分在柱中的停留时间不同。
3. 样品进样与分离：将待测样品溶液通过进样器进入色谱柱，样品组分在色谱柱中进行分离。
通过调节流动相的流速、组成和温度等条件，可以影响样品组分的分离效果。
4. 检测与分析：通过检测器检测样品组分的信号，并通过计算机或数据采集系统进行数据处理和分析，得到各组分的峰面积或峰高等参数。
结果与讨论：在实验中，我们选取了一种常用的色谱柱填料，并通过调节流动相的组成和流速等条件，成功地将待测样品溶液中的组分进行了分离。
通过检测器检测到的信号，我们可以得到各组分的峰面积或峰高，并进一步进行定量分析。
柱色谱法具有分离效果好、分析速度快、灵敏度高等优点。
通过选择不同的色谱柱填料和优化分离条件，可以实现对不同样品的高效分离和分析。
此外，柱色谱法还可以与其他分析技术结合使用，如质谱联用、紫外可见光谱检测等，进一步提高分析的准确性和灵敏度。
然而，柱色谱法也存在一些局限性。
首先，色谱柱填料的选择和样品预处理等步骤对分离效果有较大影响，需要进行合理的优化。
其次，柱色谱法对样品的纯度要求较高，可能需要进行前处理步骤，如固相萃取、液液萃取等。
此外，柱色谱法在分离非极性化合物方面相对较弱，对极性化合物的分离效果较好。
结论：柱色谱法是一种常用的分离和分析技术，通过调节色谱柱填料和流动相等条件，可以实现对样品组分的高效分离和定量分析。
柱色谱分离实验报告
柱色谱分离实验报告柱色谱分离实验报告引言：柱色谱是一种常用的分离技术，广泛应用于化学、生物、环境等领域。
本次实验旨在通过柱色谱技术，对混合物进行分离和纯化，以便进一步研究和分析。
实验方法：1. 实验材料准备：实验所需的柱色谱装置、溶剂、混合物样品等材料准备充分，确保实验进行的顺利和准确。
2. 样品制备：将待分离的混合物样品溶解于适当的溶剂中，确保溶解度良好，避免产生沉淀或结晶。
3. 柱填充：选择合适的填充剂，将其装填到柱中，并进行适当的压实，以确保填充剂的均匀分布和固定。
4. 柱平衡：在进行样品进样前，先进行柱平衡，以保证柱内的平衡相稳定。
可以使用适当的缓冲溶液或溶剂进行柱平衡。
5. 样品进样：将样品通过进样口缓慢地注入柱中，避免产生气泡或溶剂流失。
进样量要适当，以避免柱内压力过高或过低。
6. 色谱分离：打开流动相泵，使流动相缓慢地通过柱床，进行色谱分离。
可以根据需要调节流速和流动相的组成。
7. 分离效果评估：观察色谱图，根据峰的形状、峰面积和峰高等指标，评估分离效果的好坏，并进行定性和定量分析。
实验结果：通过柱色谱分离实验，成功地将混合物样品分离为若干个组分，并得到了相应的色谱图。
根据色谱图的分析，可以得到每个组分的相对含量和纯度。
实验讨论：柱色谱分离实验的结果受到多种因素的影响，如填充剂的选择、流动相的组成、柱床的长度和直径等。
在实际操作中，需要根据具体情况进行调整和优化，以获得最佳的分离效果。
实验结论：柱色谱分离是一种有效的分离技术，能够将混合物样品分离为不同的组分，并进行纯化和分析。
通过本次实验，我们成功地利用柱色谱技术对混合物进行了分离，并得到了满意的结果。
总结：柱色谱分离是一项重要的实验技术，在科学研究和工业生产中具有广泛的应用。
通过不断地实践和探索，我们可以进一步完善和优化柱色谱分离技术，为科学研究和实际应用提供更好的支持。
柱色谱分离实验报告
柱色谱分离实验报告柱色谱是现代化学分析技术中常用的分离方法之一。
本次实验旨在通过柱色谱分离技术，对复杂混合物中的成分进行分离和鉴定。
本文将分为三个部分，分别介绍柱色谱的原理、实验过程和结果分析。
一、柱色谱的原理柱色谱是一种基于物质在固定相和流动相之间分配和迁移的现象，根据不同物质在这两相中的相对亲疏程度，实现样品中组分的分离。
具体而言，分离是通过样品在固定相中的溶解和吸附以及流动相的推动实现的。
柱色谱实验中，首先需要准备好色谱柱，一般由填充剂和柱壁组成。
填充剂具有较大的比表面积，可以提供足够多的吸附位点，这样有利于样品组分在柱中的分离。
流动相则是承载样品和携带样品迁移的介质。
在柱色谱实验中，样品经过预处理后，注入到柱中，流经固定相层，不同成分根据其亲疏程度，在固定相中以不同速度迁移。
这样，就能实现样品中不同组分的分离。
二、实验过程1. 实验准备首先，我们需要准备好色谱柱和填充剂。
柱的选择要考虑到样品的性质和分离目标，填充剂的选择要基于柱的性质和柱色谱实验特点。
2. 样品预处理样品预处理是柱色谱实验的重要步骤之一。
其中，样品的提取、浓缩和去杂质处理是关键环节。
通过适当的提取和浓缩过程，可以提高分析的灵敏度。
去杂质处理有助于降低背景干扰，提高信号的准确性。
3. 柱色谱条件设定确定合适的柱色谱条件对于实验的成功至关重要。
其中，选择合适的流动相、固定相和流速是关键因素。
流动相的选择要综合考虑样品的特性和分离目标。
固定相的选择则需要考虑样品的亲疏程度和填充剂的特性。
流速的设定对于分离的效果和实验时间有重要影响。
4. 样品注入和柱温控制样品注入是柱色谱实验的关键步骤之一。
注入样品时要注意采用合适的容积和速度，以避免样品溢出和漏失。
柱温控制是实验中不容忽视的因素。
温度的变化会影响样品的分配行为和固定相的吸附行为。
三、结果分析通过柱色谱分离实验，我们可以得到不同组分的峰图。
根据峰面积的大小和峰高的时间差异，可以推断不同成分的相对含量和在柱中的迁移速率。
柱色谱实验报告范文
柱色谱实验报告范文一、实验目的1.了解柱色谱的原理和工作原理；2.学习柱色谱的操作步骤和实验技巧；3.熟悉色谱柱的选择和条件优化方法；4.掌握柱色谱在分析中的应用。
二、实验原理柱色谱是一种重要的分离和分析技术，它利用样品分离成分在固定相和流动相之间的分配行为，实现对复杂混合物的有选择地分离。
在柱色谱中，固定相常用的有吸附剂、分离树脂和硅胶三种类型。
在实验中，我们使用了分离树脂做为固定相。
柱色谱的工作原理是：样品在进样口进入柱内，与固定相发生相互作用，根据各成分在固定相和流动相之间的相对亲和力的大小，进行分离。
分离过程中，样品成分依次通过色谱柱，最终被分离出来，并在检测器中进行检测。
三、实验步骤1.准备实验材料和仪器，包括柱色谱仪、色谱柱、流动相、样品等；2.将色谱柱装配好，并使用流动相将柱子预除杂；3.进行柱平衡，将柱子与流动相连接，开启流速，等待柱子平衡；4.进样，将待测样品通过进样口进入柱内，注意保持流速恒定；5.记录峰面积和保留时间，并进行峰面积积分计算。
四、实验结果在实验中，我们利用柱色谱分离了一种食品添加剂混合物，并进行了峰面积和保留时间的记录和计算。
结果如下：添加剂，保留时间（min），峰面积（mm2）--------------，----------------，---------------添加剂1，2.5，150添加剂2，3.2，180添加剂3，4.1，220添加剂4，5.2，280五、实验讨论和结论根据实验结果可知，在柱色谱实验中，我们成功地分离了食品添加剂混合物，并得到了各成分的保留时间和峰面积。
根据保留时间和峰面积的不同，我们可以定量地分析样品中各成分的含量。
在实验过程中，我们注意到保留时间和峰形是柱色谱分析中两个重要的参数。
保留时间较长的物质在流动相和固定相之间的相亲和力较强，较短的物质则相亲和力较弱。
峰面积则与样品中物质的浓度有关，浓度越高，峰面积越大。
通过本实验，我们对柱色谱的原理和应用有了更深入的了解，并学会了柱色谱的操作步骤和实验技巧。
实验-柱色谱
实验 10 柱色谱分离实验报告--亚甲基蓝与荧光黄的分离一实验目的学习并掌握色谱法的原理及其应用。
学习并掌握柱色谱的实验操作技能。
二实验原理色谱法亦称色层法，层析法等，是分离，纯化和鉴定有机化合物的重要方法之一。
色谱法的基本原理是利用混合物各组分在某一物质中的吸附或溶解性能（即分配）的不同，或其它亲和作用性能的差异，混合物的溶液流经该种物质，进行反复的吸附或分配等作用，从而将各组分分开。
色谱分离法的分类（按操作条件的不同）色谱分离法的分类（按组分在固定相中的作用原理不同）色谱法的应用色谱法在有机化学中的应用主要包括以下几个方面：（1）分离混合物（2）精致提纯化合物（3）利用比移值（Rf）鉴定化合物(4)跟踪反应进程柱色谱常用的有吸附色谱和分配色谱两类。
前者常用氧化铝或硅胶为吸附剂。
后者以硅胶，硅藻土和纤维素为支持剂，以吸收大量的液体为固定相。
当加入的洗脱剂流下时，由于不同化合物吸附能力不同，因而以不同的速度沿柱向下流动，继续洗脱时，吸附能力弱的组分随溶剂首先流出。
在连续洗脱过程中，不同组分或不同色带就能分别收集，从而达到分离纯化的目的。
1 吸附剂常用的吸附剂：氧化铝，硅胶，氧化镁，碳酸钙，活性炭或纤维素粉。
选择吸附剂的首要条件：不与被分离物或展开剂发生化学反应。
吸附能力与以下几点有关：（1）吸附剂颗粒大小（2）吸附剂含水量柱色谱2 溶剂通常根据被分离物中各组分的极性、溶解度和吸附活性等来考虑。
先将带分离的样品溶于尽量少的非极性溶剂中，从柱顶流入柱中，依次增大溶剂的极性，将不同化合物依次洗脱。
常用洗脱剂的极性：石油醚＜环己烷＜四氯化碳＜甲苯＜苯＜二氯甲烷＜氯仿＜乙醚＜乙酸乙酯＜丙酮＜乙醇＜甲醇＜水＜乙酸三实验步骤及注意事项（1）取一支色谱柱，在柱子的收缩部塞一小团脱脂棉花，注意松紧要适度。
然后在棉花上铺一层粗硅胶或石英砂。
（2）将色谱柱垂直固定在铁架台上，往柱内加适量70%乙醇溶液，打开活塞，赶走气泡。
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实验一柱色谱、薄色谱
一、实验目的
1、了解色谱法分离提纯有机化合物的基本原理和应用。
2、掌握柱层析、薄层层析的操作技术。
二、实验原理
色谱法（Chromatography）亦称色层法、层析法等。
色谱法是分离、纯化和鉴定有机化合物的重要方法之一。
色谱法的基本原理是利用混合物各组分在某一物质中的吸附或溶解性能（分配）的不同，或其亲和性的差异，使混合物的溶液流经该种物质进行反复的吸附或分配作用，从而使各组分分离。
色谱法在有机化学中的应用主要包括以下几方面:
1、分离混合物一些结构类似、理化性质也相似的化合物组成的混合物，一般应用化学方法分离很困难，但应用色谱法分离，有时可得到满意的结果。
2、精制提纯化合物有机化合物中含有少量结构类似的杂质，不易除去，可利用色谱法分离以除去杂质，得到纯品。
3、鉴定化合物在条件完全一致的情况，纯碎的化合物在薄层色谱或纸色谱中都呈现一定的移动距离，称比移值（Rf值），所以利用色谱法可以鉴定化合物的纯度或确定两种性质相似的化合物是否为同一物质。
但影响比移值的因素很多，如薄层的厚度，吸附剂颗粒的大小，酸碱性，活性等级，外界温度和展开剂纯度、组成、挥发性等。
所以，要获得重现的比移值就比较困难。
为此，在测定某一试样时，最好用已知样品进行对照。
4、观察一些化学反应是否完成，可以利用薄层色谱或纸色谱观察原料色点的逐步消失，以证明反应完成与否。
吸附色谱主要是以氧化铝、硅胶等为吸附剂，将一些物质自溶液中吸附到它的表面上，而后用溶剂洗脱或展开，利用不同化合物受到吸附剂的不同吸附作用，和它们在溶剂中不同的溶解度，也就是利用不同化合物在吸附剂上和溶液之
间分布情况的不同而得到分离。
吸附色谱分离可采用柱色谱和薄层色谱两种方式。
柱色谱常用的有吸附色谱和分配色谱两种。
吸附色谱常用氧化铝和硅胶为吸附剂。
分配色谱以硅胶、硅藻土和纤维素为支持剂，以吸收较大量的液体作为固定相。
吸附柱色谱通常在玻璃管中填入表面积很大经过活化的多孔性或粉状固体吸附剂。
当待分离的混合物溶液流过吸附柱时，各种成分同时被吸附在柱的上端。
当洗脱剂流下时，由于不同化合物吸附能力不同，往下洗脱的速度也不同，于是形成了不同层次，即溶质在柱中自上而下按对吸附剂的亲和力大小分别形成若干色带，再用溶剂洗脱时，已经分开的溶质可以从柱上分别洗出收集；或将柱吸干，挤出后按色带分割开，再用溶剂将各色带中的溶质萃取出来
薄层色谱又叫薄板层析，是色谱法中的一种，是快速分离和定性分析少量物质的一种很重要的实验技术，属固-液吸附色谱，它兼备了柱色谱和纸色谱的优点，一方面适用于少量样品（几到几微克，甚至0.01微克）的分离；另一方面在制作薄层板时，把吸附层加厚加大，又可用来精制样品，此法特别适用于挥发性较小或较高温度易发生变化而不能用气相色谱分析的物质。
此外，薄层色谱法还可用来跟踪有机反应及进行柱色谱之前的一种“预试”。
二、基本操作训练：（含仪器装置和主要流程图）
正确装柱、制板、点样及分离操作
（1） （2）
（3）
柱层析薄层板在不同的层析缸中展开的方式【操作步骤】
薄层色谱
1、薄层板的制备（湿板的制备）
薄层板制备的好坏直接影响色谱的结果。
薄层应尽量均匀且厚度要固定。
否则，在展开时前沿不齐，色谱结果也不易重复。
在烧杯中放入2g硅胶，加入5—6ml蒸馏水，调成糊状。
将配制好的浆料倾注到清洁干燥的载玻片上，拿在手中轻轻的左右摇晃，使其表面均匀平滑，在室温下晾干后进行活化。
也可买市售的硅胶板切割成适宜大小备用。
本实验用此法制备薄层板5片：吸附剂为硅胶G，用0.5%的羧甲基纤维素钠水溶液调成浆料。
2、点样
先用铅笔在距薄层板一端1cm处轻轻划一横线作为起始线，然后用毛细管吸取样品，在起始线上小心点样，斑点直径一般不超过2mm。
若因样品溶液太稀，可重复点样，但应待前次点样的溶剂挥发后方可重新点样，以防样点过大，造成拖尾、扩散等现象，而影响分离效果。
若在同一板上点几个样，样点间距离应为1。
点样要轻，不可刺破薄层。
3、展开
薄层色谱的展开，需要在密闭容器中进行。
为使溶剂蒸气迅速达到平衡，可在展开槽内衬一滤纸。
在层析缸中加入配好的展开溶剂，使其高度不超过1cm。
将点好的薄层板小心放入层析缸中，点样一端朝下，浸入展开剂中。
盖好瓶盖，观察展开剂前沿上升到一定高度时取出，尽快在板上标上展开剂前沿位置。
晾干，观察斑点位置，计算Rf值。
4、显色
凡可用于纸色谱的显色剂都可用于薄层色谱。
薄层色谱还可使用腐蚀性的显色剂如浓硫酸、浓盐酸和浓磷酸等。
对于含有荧光剂（硫化锌镉、硅酸锌、荧光黄）的薄层板在紫外光下观察，展开后的有机化合物在亮的荧光背景上呈有色斑点。
也可用卤素斑点试验法来使薄层色谱斑点显色。
本实验样品本身具有颜色，不必在荧光灯下观察。
柱色谱
1、装柱（湿法）
用镊子取少许脱脂棉放于干净的色谱柱底部，轻轻塞紧，关闭活塞，向柱中倒入溶剂至约为柱高的3/4处，通过一干燥的玻璃漏斗慢慢加入色谱柱用中性氧化铝，打开活塞，控制流出速度为1滴/秒；并用橡皮塞轻轻敲打色谱柱下部，使填装紧密，当装柱至3/4时，再在上面加一片小圆滤纸或脱脂棉。
操作时一直保持上述流速注意不能使液面低于氧化铝的上层。
2、上样
当溶剂液面刚好流至滤纸面时，立即沿柱壁加入待分离样品溶液，当此溶液流至接近滤纸面时，立即用少量溶剂洗下管壁的有色物质，如此连续2—3次，直至洗净为止。
3、洗脱
用已配好的溶剂（学生自己配制）洗脱，控制流出速度。
整个过程都应有洗脱剂覆盖吸附剂。
极性小的色带首先向下移动，极性较大的留在柱的上端，形成不同的色带。
观察色带的出现，并用锥形瓶收集洗脱液。
三、实验关键及注意事项：
1、薄层层析时，薄层板的制备要厚薄均匀，表面平整光洁。
2、点样时，各样点间距1—1.5cm，样点直径应不超过2mm，
3、柱层析时，柱子要致密紧实，无气泡。
四、主要试剂及产品的物理常数：（文献值）
五、提问纲要
1、为什么极性大的组分要用极性较大的溶剂洗脱？
2、柱子中若有气泡或装填不均匀，将给分离造成什么样的结果？如何避免？
值来鉴定化合物？
3、如何利用R
f
六、主要试剂用量、规格
1%偶氮苯、1%间硝基苯胺、荧光黄(95%乙醇, 1mg/1ml)、次甲基蓝、环己烷:乙酸9:1
七、时间分配及控制
计划安排４h。