肝素钠生产工艺

一、肝素分类

肝素是哺乳动物体内含的一种粘多糖，它与蛋白质结合在一起存在于肠粘膜、肺、肝等器官内，肝素与蛋白质分离提取后，具有抗凝血、抗血栓、降血脂等多种生理活性，是防止动脉粥样硬化，心脑血管疾病的显效药物。

(1) 普通(标准)肝素是由猪或羊黏膜提取，平均分子量为15000，相当稳定。

(2) 通常把分子量小于6000的称为低分子肝素。低分子肝素与普通肝素比较，其半衰期较长，抗血栓效果好，而抗凝出血倾向较弱，有取代普通肝素的趋势。近年临床常用的有：达肝素钠(法安明)、依诺肝素钠(克赛)、低分子肝素钙(速避凝、那屈肝素钙)。

(3) 目前正在深入研究的肝素制剂中还有低抗凝活性肝素、改构型肝素、类肝素等, 这些药物特点是具有低抗凝、高抗栓、作用时间长和出血作用少的优点，很有开发前途。

二、肝素钠简介

拼音名：Gansuna 英文名：Heparin Sodium

本品系自猪的肠黏膜中提取的硫酸氨基葡萄糖的钠盐，属粘多糖类物质，通过激活抗凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ)而发挥抗凝作用。它对凝血过程的三个阶段均有影响，在体内外均有抗凝作用，可延长凝血时间、凝血酶原时间和凝血酶时间。口服不吸收，皮下、肌肉或静脉给药均吸收良好。

三、肝素钠检测（药典版）

拼音名：Gansuna 英文名：Heparin Sodium

本品系自猪或牛的肠黏膜中提取的硫酸氨基葡聚糖的钠盐，属黏多糖类物质，具有延长血凝时间的作用。按干燥品计算，每1mg 的效价不得少于150 单位。

【性状】本品为白色或类白色的粉末；有引湿性。本品在水中易溶。【比旋度】取本品，精密称定，加水溶解并稀释制成每1ml 中含40mg 的溶液，依法测定（附录Ⅵ E），比旋度应不小于＋35°。

【鉴别】 (1) 取本品与肝素标准品，分别加水制成每1ml 中含2.5mg 的溶液，照电泳法（附录Ⅴ F第三法）试验，供试品和标准品所显斑点的迁移距离之比应为0.9 ～1.1 。 (2) 本品的水溶液显钠盐的鉴别反应（附录Ⅲ）。

【检查】酸碱度取本品0.10g ，加水10ml溶解后，依法测定（附录Ⅵ H），pH 值应为5.0 ～7.5 。

溶液的澄清度与颜色取本品0.50g ，加水10ml溶解后，溶液应澄清无色；如显浑浊，照分光光度法（附录Ⅳ A），在640nm 的波长处测定，吸收度不得大于 0.018；如显色，与黄色1 号标准比色液（附录Ⅸ A 第一法）比较，不得更深。

吸收度取本品，加水制成每1ml 中含4mg 的溶液，照分光光度法（附录Ⅳ A）测定，在260nm 的波长处，其吸收度不得大于0.20；在280nm 的波长处，其吸收度不得大于0.15。

黏度精密称取本品（按实际测得的单位计算相当于40万单位），加水

适量研细，移入干燥并称定重量的10ml量瓶中，研钵用水冲洗并移入量瓶中，将量瓶置25℃水浴内，俟温度平衡后，加25℃水至刻度，摇匀，称定重量，计算供试品溶液的密度。取溶液，必要时用0.45μm 的滤膜过滤，照黏度测定法（附录Ⅵ G第一法），用内径约为 1 mm的毛细管，在25℃±0.1 ℃测定其动力黏度，不得大于0.030Pa.s 。

总氮量取本品，照氮测定法（附录Ⅶ D第二法）测定，按干燥品计算，含总氮量应为1.3％～2.5 ％。

硫取本品约25mg，精密称定，照氧瓶燃烧法（附录Ⅶ C）进行有机破坏，选用 1000ml燃烧瓶，以浓过氧化氢溶液0.1ml 与水10ml为吸收液，俟生成的烟雾完全吸收后，置冰浴中15分钟后，加热缓缓煮沸2 分钟，冷却，加乙醇－醋酸铵缓冲液 (pH3.7)50 ml，乙醇30ml，0.1 ％茜素红溶液0.3ml 为指示液，用高氯酸钡滴定液(0.05mol/L) 滴定至淡橙红色。每1ml高氯酸钡滴定液(0.05mol/L) 相当于1.603mg 的S，按干燥品计算，含硫量不得少于10.0％。

干燥失重取本品，置五氧化二磷干燥器内，在60℃减压干燥至恒重，减失重量不得过 5.0%（附录Ⅷ L）。

炽灼残渣取本品0.50g ，依法检查（附录Ⅷ N），遗留残渣应为28.0％～41.0％。

钾盐取本品0.10g ，置100ml 量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液（B）；另量取标准氯化钾溶液（精密称取在150℃干燥1 小时的分析纯氯化钾 191mg ，置1000ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀） 5.0ml，置50ml量瓶中，加（B）溶液稀释至刻度，摇匀，

作为对照溶液（A）。照原子吸收分光光度法（附录Ⅳ D杂质检查法）在766.5nm 的波长处分别测定，应符合规定。

重金属取本品0.50g ，依法检查（附录Ⅷ H第二法），含重金属不得过百万分之三十。

热原取本品，加氯化钠注射液制成每1ml 中含1000单位的溶液，依法检查（附录Ⅺ D），剂量按家兔体重每1kg 注射2ml ，应符合规定。【效价测定】照肝素生物检定法（附录Ⅻ D）测定，应符合规定；测得的结果应

为标示量的91％～110 ％。

【类别】抗凝血药。

【贮藏】密封，在凉暗处保存。

【制剂】肝素钠注射液

四、肝素钠生产工艺流程

1、盐解：将刮好的新鲜肠粘膜，每100斤肠粘膜加入清水100斤，按肠粘膜和水的总重量，加入4%的工业盐，搅拌均匀，再加烧碱液调PH 值为8--9，缓慢升温50--55度，加温时每10--20分钟加水搅拌一次，恒温2小时，注意要间隔搅拌。恒温结束后，要快速升温到96--98度，恒温10分钟，趁热捞出上层的渣子。用100目尼龙布过滤。

注意：

加盐过多会使下一步交换吸附含量超过规定，加盐过少，肝素和蛋白质分离不完全，碱性过强，会使肝素降解破坏，收率下降。同时还能使一

些蛋白质溶解度增大，造成过滤困难。碱性不足造成提取液偏酸，则在高温的情况下，肝素迅速破坏，升温过急会使蛋白质早凝固，影响肝素的分解和溶出。

2、吸附：待提取液温度冷至50--55度，应检测盐浓度为3。5--5%时，即可加入5%已处理号的树脂。如树脂上含有盐水，需用清水将树脂洗净控干，方可使用。搅拌吸附6--8小时，转速60--80转/分钟为宜，搅拌须使树脂上下翻动，否则吸附效果差，收率低。吸附完毕，弃去上层吸附液，然后用100目的尼龙布过滤出树脂。加入提取液的树脂量：新树脂可按提取液的5--6%加入，旧树脂可按提取液的8--10％。

3、洗涤：过滤后的树脂用40度左右的温水，漂洗干净。再放入与树脂重量相等的盐溶液中(盐溶液的浓度为5%左右)洗涤10--20分钟，除去低分子肝素和一些蛋白质，然后将树脂过滤。

4、洗脱：第一次洗脱将过滤号的树脂放入浓度为20--22%的盐溶液中搅拌洗脱5--6小时，树脂和盐水的比例为1：0。7。过滤后将树脂控干进行第二次洗脱，调盐溶液浓度为16--18%，搅拌3小时以上，树脂和盐水的比例与第一次相同，过滤后的水即是药液。

5、除杂：将稀碱水加入洗脱后的药液里，要快搅慢加，调PH值为10--12搅拌2分钟，静止沉淀20小时后，抽出上层药液，下沉的是杂质，且渣子放另外桶内过滤。过滤后的药液和下次药液除杂时合并待用。