肺癌精准医学的「后起之秀」——MET 14 号外显子跳跃突变

肺癌精准医学的「后起之秀」——MET 14 号外显子跳跃突变导语：作为在NSCLC 中的突变类型之一，MET 14 号外显子跳跃突变引起了人们的注意。

作为新发现的肺癌独立致癌驱动基因，针对MET 14 号外显子跳跃突变的检测和治疗成为NSCLC 精准治疗中的「后起之秀」而备受关注。

本文将深入解析NSCLC 中的MET 14 号外显子跳跃突变，揭示它备受关注的背后原因。

2014 年美国癌症基因研究组（The Cancer Genome Atlas，TCGA）通过对230 例肺腺癌的mRNA 和 DNA 高通量测序结果进行序列比对分析，发现约4% 的肺腺癌存在MET 14 号外显子跳跃突变（MET exon14 skipping mutation），从此作为一种新发现的 MET 突变引起了人们注意。

之后的研究发现，在所有NSCLC 中，MET 14 号外显子的剪接位点突变率为3%～4%，而在肺肉瘤样癌（pulmonary sarcomatoid carcinoma，PSC）中，其突变率更是高达 4.9%～31.8% [1]（PSC 是一类相对罕见的属于NSCLC 的一类肿瘤类型，恶性程度高、预后极差，对传统化疗不敏感，因此有「NSCLC 中的癌王」之称）。

同时，有越来越多的证据表明，MET 抑制剂在 MET 14 号外显子跳跃突变患者中显示出了积极的抗肿瘤作用，这提示MET 14 号外显子跳跃突变可以被考虑作为治疗NSCLC 患者的新靶点，从而进一步引起了人们极大的兴趣和研究热情。

MET 14 号外显子跳跃突变通过何种机制致癌？MET 基因，全名间质上皮转化因子，其编码合成的蛋白c-MET 是可以与肝细胞生长因子（HGF）结合的一种受体酪氨酸激酶。

HGF 是目前发现的c-MET 的唯一配体，主要表达于间质细胞，也可表达于肿瘤细胞，通过自分泌机制发挥作用。

HGF 与 c-MET 的 Sema 域结合使c-MET 发生二聚化激活，进而磷酸化多种下游蛋白的酪氨酸残基，激活众多下游信号通路，如 PI3K-Akt、Ras-MAPK、STAT 和Wnt/β-catenin 等，从而产生促细胞增殖、细胞生长、细胞迁移、侵袭血管及血管生成等效应，在组织正常发育和肿瘤进展中发挥关键作用。

c-MET 通路正常表达时促进组织的分化与修复，当调节异常时则促进肿瘤细胞的增殖与转移[1]。

c-MET 通路异常激活主要包括MET 14 号外显子跳跃突变、MET 扩增和 MET 蛋白过表达 3 种类型，那么 MET 14 号外显子跳跃突变是通过何种机制导致 MET 信号激活并参与致癌过程的呢？MET 14 号外显子编码的近膜结构域是 MET 的关键负性调控区，这一区域包含一段半胱天冬酶裂解序列（ESVD1002）和一个E3 泛[2]。

正常情况下，素连接酶c-CbI 酪氨酸结合位点（Y1003）MET 14 号外显子侧翼的内含子在前 mRNA 中被剪接出来，使得含MET 14 号外显子的 mRNA 被翻译成为功能性 MET 受体。

而事实上，有超过 160 种不同的突变影响着 MET 14 号外显子，包括碱基对的点突变、删除、插入或复杂突变（插入缺失），它们都会影响14 号外显子周围的内含子剪接连接点的供体或受体位点的保守序列[3]。

在MET 基因14 号外显子的基因上游端（即5' 端），大多数改变为影响剪接受体序列和分枝点的碱基对删除、插入和插入缺失突变；在下游端，主要发生影响剪接供体位点的点突变（图 1）。

图 1. MET 14 号外显子周围剪接位点的突变类型。

14 号外显子全长 141 个碱基对，对应编码 47 个氨基酸序列；其上游端（c.2888）突变主要影响剪接受体位点，下游端（c.3088）突变影响剪接供体位点[3]。

所有的这些MET 14 号外显子两侧剪接供体及受体位点的突变都可能导致MET 基因转录后前mRNA 的剪接过程中14 号外显子随其两端的内含子一同被剪接，从而产生缺少MET 14 号外显子的成熟mRNA，通过核糖体翻译产生缺少近膜结构域的47 个氨基酸序列的c-MET 蛋白[3]（图 1），即 Y1003 和 c-Cbl 结合位点缺失的截短型MET 受体[2]（图 2），也即 MET 14 号外显子跳跃突变。

而该突变使得 c-Cbl 无法结合 c-MET 蛋白，将导致 c-MET 蛋白的泛素化和蛋白降解受限，增加c-MET 蛋白的稳定性，引起MET 下游信号的持续激活，最终成为致癌因子，导致肿瘤发生（图 2）[2]。

[2]图 2. MET 14 号外显子跳跃突变的发生机制示意图综上所述，MET 14 号外显子两侧剪接位点的点突变、缺失、插入或复杂突变都可能导致外显子被错误剪接，发生MET 14 号外显子的跳跃突变，而正是这种突变阻止了c-MET 蛋白的降解，「驱动」了MET 信号通路的持续激活，促进肿瘤增殖、侵袭性生长、导致转移扩散和抗凋亡的发生，进而致癌。

MET 14 号外显子跳跃突变是独立的致癌驱动基因，意味着对这一靶点进行精准治疗有改善生存的趋势多项研究证实，MET 14 号外显子跳跃突变与EGFR/ALK 等一样，是一种能够独立致癌的驱动基因，且与预后不良相关。

Awad 等[2]在一项纳入933 例非鳞NSCLC 的研究中，利用二代测序的方法检测，发现28 例（3%）为MET 14 号外显子突变，28 例患者中，24 例有足够的样本进行基于qRT-PCR 的分析，其中23 例（96%）为MET 14 号外显子跳跃突变，这些患者均无EGFR 或KRAS 突变。

后续有研究[4]也发现 MET 14 号外显子跳跃突变患者均未发现 ALK 或 ROS1 基因重排。

此外，在对 687 个 NSCLC 患者标本的 MET 14 号外显子剪接位点突变、DNA 拷贝数改变和蛋白表达的多因素分析结果显示，MET 14 号外显子跳跃突变也是一项独立的预后不良指标。

因此，MET 14 号外显子跳跃突变不仅是独立的致癌驱动基因，也是一项独立的肿瘤不良预后指标。

传统治疗和免疫治疗效果有限，MET 抑制剂前景可期现有的用于检测MET 14 号外显子跳跃突变的方法主要包括实时定量逆转录PCR，以及二代基因测序（next-generation sequencing，NGS）。

由于MET 14 号外显子跳跃突变的发生位置多变、具有较高分子多样性等原因，长期以来，对于MET 14 号外显子跳跃突变的检测率较低，CSCO 指南也并无针对这种突变的检测与治疗相关的推荐，很多具有MET 14 号外显子跳跃突变的患者得不到有针对性的检测，或者被比较笼统地混杂在野生型群体中，与靶向治疗「擦肩而过」。

Eun Kyung Kim[5]对414 例经手术切除的EGFR/KRAS/ALK/OS1 阴性（四阴性）的NSCLC 标本利用NGS 进行了MET 14 号外显子跳跃突变的检测，发现这类患者中就有在13 例（3.1%）具有MET 14 号外显子跳跃突变。

这类患者如果作为驱动基因野生型来治疗，经典化疗效果非常有限，PD-1/PD-L1 免疫治疗也并不理想。

靶向治疗——我国暂无 MET 靶向药物上市，但前期研究结果初见曙光依据HGF/c-MET 信号通路中作用位点的不同，可将靶向治疗药物分为抗 HGF 单克隆抗体、抗 c-MET 单克隆抗体和小分子抑制剂 3 类。

抗 HGF 单克隆抗体、抗 c-MET 单克隆抗体分别与 HGF 和 c-MET 结合，从而阻止HGF 与c-MET 的结合及受体磷酸化，阻止信号传导；小分子抑制剂主要指c-MET 酪氨酸激酶抑制剂，作用于膜内激酶域，从而阻止蛋白磷酸化，阻断信号传导。

其中酪氨酸激酶抑制剂又可分为选择性和泛靶点两类，选择性抑制剂主要作用于c-MET，泛靶点抑制剂可作用于包括 c-MET 在内的多种酪氨酸激酶受体。

目前，有一些临床个案报道MET 14 号外显子跳跃突变患者经MET-TKI 治疗取得了一定疗效。

但这些数据的来源存在样本量小、有选择偏倚等问题，仍需大样本量的临床研究来证实。

虽然这些研究样本量较少，但是研究结果令人期待，随着新药物的开发和进一步增大样本量的临床试验迅速开展，MET 靶向治疗药物在我国上市指日可待。

总之，MET 14 号外显子跳跃突变是 NSCLC 的一项独立的预后不良指标，并且是NSCLC 的一项独立致癌因素。

目前对于MET 14 号外显子跳跃突变的检测还需要进一步普及，具有这种突变的患者采用经典化疗和免疫疗法效果不佳。

MET 靶向治疗会为MET 14 号外显子跳跃突变阳性的 NSCLC 患者带来新的希望。

参考文献1. Huang C, et al. Management of Non-small Cell Lung Cancer Patients with MET Exon 14 Skipping Mutations. Curr Treat Options Oncol. 2020;21(4): 33.2. Awad MM. Impaired c-Met Receptor Degradation Mediated by MET Exon 14 Mutations in Non-Small-Cell Lung Cancer. J Clin Oncol. 2016;34(8): 879-881.3. Cortot AB, et al. Exon 14 Deleted MET Receptor as a New Biomarker and Target in Cancers. J Natl Cancer Inst. 2017;109(5).4. Tong JH, et al. MET Amplification and Exon 14 Splice Site Mutation Define Unique Molecular Subgroups of Non-Small Cell Lung Carcinoma with Poor Prognosis. Clin Cancer Res, 2016, 22(12): 3048-3056.5. Kim EK, et al. Molecular diagnostic assays and clinicopathologic implications of MET exon 14 skipping mutation in non–small-cell lung cancer. Clinical lung cancer. 2019;20(1): e123-e132.CN-54734声明：本文仅供医疗专业人士参考责任编辑丨刘晔、梁思题图来源丨站酷海洛配图来源丨参考文献。