实验九徒手切片法制片技术

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徒手切片技术

徒手切片技术
徒手切片法（临时装片）徒手切片法（临时装片）
1、准备工作：、准备工作：刀具：安全第一! 刀具：安全第一切片维持物：胡萝卜片、切片维持物：胡萝卜片、土豆片
– 规格：2cm×1cm×0.3cm胡萝卜片规格： × × 胡萝卜片培养皿：清水培养皿：
– 将欲切材料断面和刀口附近刀面蘸上水 – 切面，刀面保持润湿，以减小摩擦阻力切面，刀面保持润湿，
5、夹竹桃叶的横切面、叶的表皮细胞壁厚，叶的表皮细胞壁厚，角质层发达，质层发达，栅栏组织层数往往较多，栏组织层数往往较多，海绵组织和细胞间隙却不发达
6、鸭跖草叶横切面（后含物）、鸭跖草叶横切面（后含物）
7、花柱横切、
2、选材选材：选材
叶片：叶片：长、宽约1cm 宽约叶柄：－叶柄：1－2cm长的小段长的小段
徒手切片法——实验步骤实验步骤徒手切片法
3、切片、（1）夹取：）夹取：
样品不宜太厚，样品不宜太厚，否则难以夹取
（2）持刀：）持刀：
– 左手的大拇指、食指和中指：拿住材料左手的大拇指食指和中指：的大拇指、要求：材料突出在指尖上面，要求：材料突出在指尖上面，以免误伤 – 右手拿刀片，平放在左手食指上，刀口向内右手拿刀片平放在左手食指上，刀口向内
徒手切片法——实验步骤实验步骤徒手切片法
（3）运刀：）运刀：
• 刀法要领：从刀片刀口下方起，斜向后拉切，刀法要领：从刀片刀口下方起，斜向后拉切由左前方向右后方一次切下 • 用力诀窍：臂力，非腕力，用力诀窍：臂力，非腕力， • 忌：用力太猛；反复拉锯式切割用力太猛； • 宜：常用水湿润切面
徒手切片法——实验步骤实验步骤徒手切片法

徒手切片制作方法

、目的要求徒手切片法是观察植物内部结构的简易制片法。

所需的仪器用具简单，药品经济，操作方便，费时较短，且易于保持材料的天然色泽和活体结构，必要时，也可经过脱水、染色制成永久制片而保存。

但是徒手制片对于体积过小，质地太软或太硬的材料，则难于处理，同时，也不能制成连续切片，这些均为不足之处。

二、材料、用品1、用品显微镜、剃头刀（或刀片）、毛笔、镊子、培养皿、染色皿（或小酒杯）、吸管、载玻片、盖玻片、吸水纸。

1%番红水溶液（或50%酒精溶液），0.5%固绿95%酒精溶液，70%、85%、95%酒精，纯酒精、二甲苯和中性树胶或加拿大树胶等。

三、方法与步骤1、选材所用材料不宜太软或太硬。

一般植物幼嫩的根茎或一些植物的叶片、叶柄等均可使用此法。

质地较薄的材料，如叶片，可沿主脉两侧切成宽约5〜6毫米，长1〜1.5 厘米的小块，夹在夹持物（如胡萝卜根或马铃薯块茎等）中进行切片。

使用夹持物时，先将夹持物的中央切成两半，然后将切好的材料夹入，合拢夹持物进行切片，也可将叶片卷成筒状再切。

2、切片（1 ）盛清洁的水于培养皿中。

然后用左手的拇指及食指、中指夹住材料，拇指的位置要低于食指，并使材料的上端伸出指外2〜3毫米，材料的切面必须保持水平方向。

(2) 右手执刀(剃头刀或刀片)，平放在左手食指之上，刀口向内，自左前方向右后方滑行切割，要用臂力，不要用腕力，不可向内平切。

(3) 拉切的速度宜快，一次切下，不要中途停顿或似拉锯式，以免损伤材料或切得不平。

(4) 切片过程中，如发现由于用力不均而使材料表面倾斜时，必须立即削平。

(5) 刀片或剃刀必须锋利，材料及切片均需经常沾水，以保持材料湿润、润滑。

(6) 切下的薄片可随时涮入培养皿的水中，以备观察;等切到相当数量后;再选择其中最薄的透明度最大的做成临时玻片观察。

如想短期保存，可用水或甘油封藏。

如希望长期保存所切的材料，则还要经过以下几个步骤做成永久玻片标本。

3、固定挑选出符合要求的切片，用毛笔移入盛有70%酒精的染色皿中进行固定。

生物实验临时装片及徒手切片方法

临时装片及徒手切片方法一、目的与要求1、学习并掌握临时装片的制作方法和步骤。

2、学习徒手切片技术。

3、了解细胞基本结构和厚角组织的特点。

二、材料和用品1、自备材料：解剖器（镊子、解剖针、单面刀片或双面刀片）；洋葱鳞茎、青红椒、芹菜叶柄、女贞叶片或其它植物的叶片、胡萝卜块等。

2、其它材料和用品：显微镜、盖玻片、载玻片、纱布、蒸馏水、吸水纸、10%甘油水溶液、50%甘油水溶液、纯甘油、碘—碘化钾稀溶液、培养皿、吸管。

三、实验内容1、临时装片的制作方法2、徒手切片方法四、实验方法要观察、研究植物细胞、组织和器官的微细结构，以及一些很微小的藻、菌植物等，这些用肉眼是无法看到的，必须借助于显微镜来观察，要用显微镜观察，首先必须制成各种制片，放在显微镜下才能观察。

制片的方法很多，这里着重介绍临时装片法和徒手切片的方法技术。

1、临时装片的制作方法临时装片法是用少量的新鲜植物材料，如单个细胞、薄的表皮或切成的薄片以及其它小的或扁平的材料（如丝状或叶状的藻类、菌类、蕨类的原叶体和孢子囊、纤细的苔藓植物等等），把这些材料放在载玻片的水滴中，再盖上盖玻片做成玻片标本的方法。

这种方法制成的标本，可以保持材料的生活状态和天然的色彩。

此法一般多做为临时观察使用，也可根据需要选择适宜的染料染色，制成永久制片或用某些化学试剂作组织化学反应。

临时装片的制作方法和步骤如下：（1）清洁玻片：将盖玻片和载玻片用清水洗净，再用纱布擦干，擦玻片时用左手食指和拇指夹住玻片的两边，右手食指和拇指包住纱布，同时擦到的玻片的两面，用力要均匀。

注意：由于盖玻片很薄，所以擦盖玻片时要特别小心，用力要轻，右手食指和拇指要轻轻捻动，以免把盖玻片捏破。

（2）放置材料：先将载玻片平放在桌面上，于载玻片中央滴一滴蒸馏水或稀甘油，然后用镊子镊取或吸管吸取少量要观察的材料（如洋葱鳞叶表皮或水绵……），放在载玻片中央的水滴或甘油中，再用镊子和解剖针将材料展平或分散开，勿使材料折叠或干燥。

徒手切片实验报告

徒手切片实验报告
《徒手切片实验报告》
在这个快节奏的社会里，人们对于食物的要求越来越高，追求健康、美味和新奇。

而徒手切片成为了一种备受关注的烹饪技巧。

徒手切片不仅可以展现厨师
的高超技艺，更能够保持食材的原汁原味，让食物更加美味可口。

为了验证徒手切片的效果，我们进行了一次实验。

我们选取了一些常见的食材，包括西红柿、黄瓜、土豆和胡萝卜。

首先，我们使用传统的切片工具对这些食
材进行了切片，然后再使用徒手切片的方式进行了对比。

在实验过程中，我们
发现使用徒手切片的食材更加均匀、薄而且保持了更多的汁水，而且切片的形
状更加美观。

接着，我们邀请了一些志愿者来品尝我们制作的食物。

他们一致认为，使用徒
手切片的食材更加美味，口感更加细腻，而且更加新鲜。

这些结果表明，徒手
切片不仅可以提高食材的口感和美观度，还可以保持更多的营养成分。

通过这次实验，我们得出结论：徒手切片是一种非常有效的烹饪技巧，可以提
高食材的口感和美观度，保持更多的营养成分。

我们相信，徒手切片将会成为
未来烹饪中的一种重要技术，为人们带来更加美味和健康的食物。

徒手切片实验报告.doc

徒手切片实验报告.doc
实验概要：
在本次实验中，我们将学习如何使用徒手切片技术，手工制备出薄片材料，以供显微观察。

我们以洋葱为例，通过手工制备薄片，并使用显微镜观察洋葱细胞结构与特征。

实验步骤：
1、在实验室选取新鲜洋葱，取下其外层叶片，同时剪掉它的根部。

2、将洋葱放入冷水中，静置5分钟，以软化细胞质量。

3、将洋葱切成适当大小的块，然后使用切片刀切割成薄片（约为1mm-2mm），不能切太薄，否则会使细胞破碎。

4、取出洋葱薄片，将其放入盛有75%酒精的试管中，用镊子将其搅拌1分钟，使得洋葱细胞浸泡至酒精液中。

5、取出洋葱薄片，倒入热染色液瓶中，加热4-6分钟（注意：不要让染色液温度超过60摄氏度，否则会破坏细胞组织）。

6、将洋葱薄片安放在载玻片上，用取片钳夹住，再用刮刀将多余的染色液擦干。

7、放入显微镜，观察细胞结构并拍照。

实验结果：
在显微镜下，我们可以清楚地观察到洋葱细胞的各种结构和特征。

洋葱细胞壁呈现六边形或长方形几何形状，由薄膜和细胞质组成，细胞质包含细胞核、叶绿体、线粒体等细胞器。

各个细胞器之间合作，共同完成各项功能，形成洋葱细胞完整的生物体。

总结：
本次实验是一次简单而重要的生物制片实验。

通过手工制备出洋葱细胞薄片，我们可以清楚地观察到洋葱细胞的结构与特征。

制片过程中，我们需要注意保护样本，掌握好制片的力度和厚度，同时在染色时也需要控制染色温度和时间，这样才能获得清晰的细胞图片。

徒手切片法

徒手切片法用光学显微镜观察的样品必须是透明的，因此，无论是临时装片还是永久制片的玻片标本，制作前都必须先将材料切成薄片。

徒手切片法简称手切片法，即以手持刀片将材料切成能在显微镜下观察其内部结构的薄片的方法。

是植物形态解剖学实验及研究中最简单和最常用的切片方法，也是最重要的基本技能之一。

这种切片方法简便易行，节省时间；而且所需工具简单，只要有一把锋利的剃刀或双面刀片就可以操作。

还有一个独特的优点，就是可以看到组织细胞内的自然结构和天然颜色。

其缺点是不易做到将整个切面切得薄而完整，往往厚薄不一；过软过硬的材料比较难切。

徒手切片一般处理的是新鲜材料，有时也可将材料预先固定好。

一般材料的徒手切片的方法如下：1.材料的准备：一般选择正常、软硬适中的植物器官或组织为材料，直接切成长约2〜3厘米的小段，削平切面。

所取的新鲜材料应及时放入水中，以免萎蔫。

取材的大小，一般直径不超过5mm,长度以15-25mm为宜。

过于柔软或微小的材料，难以直接执握手切，可夹入坚固而易切的夹持物中切。

常用的夹持物有去除木质部的胡萝卜根、土豆块茎、接骨木的髓部等。

切前先将夹持物切成长方小体,上端削平。

对于较薄的叶状体材料,可将夹持物纵切一缝,材料夹于其中即可；如不是叶状体,即将材料夹于其中,或在缝里挖一个和材料形状相似、大小相同的凹陷,把材料夹在凹陷里。

然后用手握住夹持物,采用上述方法将夹持物和其中的材料一齐切成薄片,除去夹持物的薄片,便得到材料的薄片。

坚硬的材料要经软化处理后再切。

软化的方法：对于比较硬的材料，切成小块煮沸3〜4 h,再浸入软化剂（50%酒精：甘油 =1 : 1）中数天至更长些时间，而后再切。

对于已干或含有矿物质，更为坚硬的材料,要先在15%氢氟酸的水溶液中浸渍数周,充分浸洗后,再置入甘油里软化后再切。

2.执握刀片和材料的方法：左手大拇指和食指的第一关节指弯夹住材料，使之固定不动。

为防止刀伤，拇指应略低于食指，并使材料上端超出手指2〜3毫米，不可高出过多，否则切片时材料容易弯折，也不容易切薄。

徒手切片法和临时装片的制作方法以及植物细胞和组织观察

临时装片的制作方法和徒手切片法以及植物细胞、组织观察一、实验目的1、掌握临时装片的制片方法、掌握徒手切片的方法2、了解植物细胞结构。

二、实验材料显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、刀片、吸水纸、解剖针、培养皿、毛笔、滴管、纱布、0.9%的NaCl溶液；洋葱、马铃薯、芹菜、番茄三、实验内容和实验方法（一）临时装片的制作1、擦净载玻片和盖玻片（1）擦载玻片用左手的拇指和食指捏信载玻片的边缘，右手用纱布将载玻片上下两面包住，然后反复擦拭，擦好后放在干净处备用。

（2）擦盖玻片先用左手拇指和食指轻轻捏住盖玻片的一角，再将右手拇指和食指用纱布把盖玻片包住，然后从上下两面隔着纱布慢慢地进行擦试。

2、取样用滴管滴一点水或其他溶液（根据需要）于载玻片的中央，把观察物放于载玻片上的液滴中，展开或摇匀。

3、盖盖玻片右手持镊子，轻轻夹住盖玻片的一角，使盖玻片的边缘与液滴的边缘接触，然后慢慢倾斜下落，最后平放于载玻片上，避免气泡的产生。

如盖玻片下的液体过多，可用吸水纸将多余的液体吸掉。

（二）徒手切片法徒手切片法不需要任何的机械设备，只需要一把锋利的刀片就可以完成切片的制作，方法简单，也容易保持物的生活状态，有很大的实用价值。

1、选材选择软适度的材料，先截成适当的段块。

一般直径大小以3~5mm、长度以20~30mm为宜。

若材料太软，如幼叶等，不能直接拿在手中进行切片，可用适当大小的马铃薯块茎或萝卜块根等作支持物，将材料夹入其中，一起切片。

2、切片用左手拇指、食品指和中指夹住材料，使其稍突出在手指之上，拇指略低于食指，以免刀口损伤手指。

材料和刀刃上蘸水，使其湿润。

右手拇指和食指横向平握刀片，刀片要与材料断面平行，刀刃放在材料左前方稍低于材料断面的位置，以均匀的力量和平稳的动作从左前方向向右后方拉切。

切片时要用臂力而不用腕力，手腕不要动，靠肘、肩关节的屈伸来切片，拉切要快，中途不要停顿，更不能用拉锯方式进行切片。

每切2~3片就要把刀片上的薄片用湿毛笔移入盛有清水的培养皿中暂存备用。

徒手制作叶片横切的临时切片

徒手制作叶片横切的临时切片步骤一：准备工作1.需要的材料包括：新鲜的叶片、刀片、毛细管、显微镜片、盖玻片、甘油或蒸馏水、显微镜。

2.将所有实验器材清洗干净，尤其是显微镜片和盖玻片，以确保无尘和污染。

步骤二：取样1.选择一个新鲜、健康的叶片，尽可能避免受伤或变色的叶片。

2.使用剪刀或手指轻轻取下一片叶片。

小心不要太用力，以免造成叶片组织损伤。

步骤三：固定样品1.将取下的叶片放入甘油或蒸馏水中，以保持叶片的湿润并避免组织干燥或变形。

2.如果使用甘油，将叶片放入甘油中浸泡2-3分钟，以提高透明度。

如果使用蒸馏水，则直接将叶片放入蒸馏水中。

步骤四：切片1.将刀片用火烤热，然后用镊子夹住刀片，用酒精擦拭刀片，以确保刀片的清洁和无菌。

2.将叶片取出，用镊子夹住叶片的边缘，将叶片在刀片上水平切割约1-2毫米的厚度。

要保持手稳定，尽量用均匀的力度进行切割。

3.将切下的叶片放入显微镜片上，轻轻按压叶片，使其展平并在显微镜片上固定。

步骤五：加盖玻片1.用镊子夹住盖玻片，将玻片垂直放在显微镜片上，轻轻地从一侧放下，以避免形成气泡和切片变形。

2.缓慢而均匀地按压盖玻片，使其与显微镜片上的切片充分接触，同时确保没有空气被困在切片下。

步骤六：观察和分析1.将装有切片的显微镜片放到显微镜的载物台上。

2.将显微镜调整到适当的倍数，并使用聚焦轮来调整切片的清晰度。

3.通过目镜观察并记录切片中的形态、结构和细胞组织特征。

最后，完成实验后，要小心处理显微镜片和盖玻片，清洗并保存好实验器材，以便下次使用。

总结：徒手制作叶片横切的临时切片是一种简便快速的实验技术，既可以用于学术研究，也可以用于教学实验。

通过这种方法，可以观察到叶片的细胞结构、细胞器和组织特征，有助于对植物的生理功能和结构的理解。

但需要注意的是，这种制作方法适用于较为便捷和简单的实验，对于一些复杂和特殊的研究，可能需要更加专业的切片设备和技术。

徒手切片技术

植物病理徒手制片技术徒手制片的方法有整体封藏法、徒手切片法、组织透明制片法和涂抹制片法等多种。

限于时间本实验实践最为常用的整体封藏法和徒手切片法两种。

(一)整体封藏法对于生长在植物病部表面或培基上的菌丝体、分生孢子、分生孢子梗和其他孢子器官以及线虫等，可直接择取少许封藏在适当的浮载剂中，在显微镜下观察，根据材料的特点和观察的目的可采用不同的方法封藏制片。

常用方法的概括为挑、刮、拨、撕四种。

1挑：对于在植物受病部位或基质表面生长繁茂的霉状病原体(如霜霉菌)粉状病原体(如锈菌、白粉菌)以及培养基上的许多培养菌，可用尖细的解剖针等直接挑取封埋制片，挑取病原体的量，在保证选材典型的前提下，越少越好，以免互相重叠，分辨不清。

2刮：对病部病原体稀少，或用放大镜也难辩认霉层的病害标本，可采用两侧具刀的三角刮针(或可用刀片代替)刮取病原物制片。

刮的方法是，用刮针的一刃，蘸浮载剂少许，在病部顺同一个方向刮取2—3次，将刮得的病原体蘸在载玻片的浮载剂中封片镜检。

浮载剂在保证浮载质量的前提下要尽量少，否则少量的病原体在大滴的浮载剂中极易分散漂流，在显微镜下难以寻找。

3拨：对于产生在植物表皮下或半埋生于基物内的病原体孢子器官。

如子囊壳、分生孢子器、闭囊壳等，可将病原体连同寄主组织一同拨下，放入浮载剂中，用两支解剖针，一支稳定材料，另一支拨出植物组织，使病原体外露制片。

4撕：对于寄生在植物表皮细胞上的病原真菌，也可以将此有病原物的表皮撕下来制片镜检，这种方法不仅能看到病原物形态，而且可以观察病原物与寄主的解剖学关系。

用刀片割破叶背表皮再用小镊子轻轻撕下，放在浮载剂中制片镜检白粉病菌分生孢子梗、分生孢子和吸器形态。

(二)徒手切片法欲观察受病组织病变，病菌侵入和寄主体内扩展过程，以及埋生在基物内真菌子实体的形态结构等，都需将有关材料切成薄片，进行镜检，徒手切片是最常用的简便易行的方法，不需要特殊的设备，而且节省时间，切成的片子不仅可作临时观察，也可进一步制成永久性玻片标本。

切片制片技术在植物科学研究中的应用

切片制片技术在植物科学研究中的应用切片法顾名思义就是要对植物进行切割处理，一般有徒手切片法、石蜡切片法、半薄切片法、冰冻切片法、振动切片法、滑走切片法、超薄切片法等。

这里仅以几个为例:1、徒手切片法：徒手切片法是指手持刀片将新鲜的或固定的实验材料切成薄片的制作方法，所作的切片通常不经染色或经简单染色后，制成临时的水装片用于观察，也可以通过脱水与染色制成永久制片。

徒手切片的优点是简单、方便，不需要复杂的设备，不经过化学药物的处理，基本上保留了植物活体的状态。

要点：实验材料软硬适中，便于手持。

用左手拇指、食指和中指拿住材料，拇指略低于食指与中指，并使材料略为突出在指尖上面，以免切伤手指。

右手持刀，将刀片平稳地放在左手食指之上，与材料切面平行，然后以均匀的动作，自左前方向右后方，斜着向后拉切，切时用臂力而不用腕力。

切下许多薄片后，用湿毛笔将这些薄片放人培养皿中。

用毛笔挑选透明的薄片，放在载玻片上，用滴管滴一滴水在载玻片上，盖上盖玻片，制成临时装片进行观察。

注意：在切片前，要不断地用水湿润材料和刀片。

切片时，两只手应该保持活动状态，，且用力不要过猛，不能用刀片挤压材料或来回切割材料。

动作要敏捷，材料要一次切下。

用于观察到植物组织的自然色泽和活体结构，常研究植物解剖结构、细胞组织化学成分，植物资源鉴定等。

2、滑走切片法是利用滑走切片机切新鲜的或保存的材料。

此法切出的切片厚薄均匀、结构完整，适用于一些比较坚硬的材料。

滑走切片机由机身、升降夹物装置、切片刀的夹刀滑行部分等组成。

先把切片刀固定在夹刀上，然后将材料固定在切片机的夹物装置上。

调好材料的高度，使刀刃靠近材料的切面，并使材料与刀刃尽力平行。

用毛笔将材料沾湿。

切片时用左手扶切片刀的夹刀滑行部分，均匀用力往自己方向移动，刚开始由于材料平面不均匀，所以要多切几次直到得到较完整的切面。

将刀片擦干净，再次沾湿材料。

转柄转一圈，向内推动刀片，切片便被切下并粘在刀的表面上。

徒手切片方法(精品)

---------------------------------------------------------------最新资料推荐------------------------------------------------------徒手切片方法（精品）徒手切片法特特点化学学、、生点不不需需要要机机械械设设备备，，能能保保持持活活体体的的情情况况。

主主要要用用在在组组织织化生药药鉴鉴定定、、石石蜡蜡切切片片选选材材等等。

方方法法要茎的的横横切要领切面面，，无领切切片片最最要要紧紧是是平平而而薄薄，，无无需需切切成成完完整整的的。

例例如如茎无须须切切成成整整圆圆形形，，只只需需一一角角就就足足够够了了。

步步骤材料料，，使骤①①一一般般用用左左手手的的大大拇拇指指、、食食指指和和中中指指这这三三个个手手指指拿拿住住材使材材料料突突出出在在指指尖尖上上面面，，使使刀刀片片不不会会割割伤伤它它们们。

用用右右手手拿拿刀刀片片。

两两只只手手应应该该可可以以自自由由活活动动，，不不1 / 5要要使使它它们们靠靠紧紧身身体体，，或或压压在在桌桌子子上上。

②②刀刀片片刀刀口口放放在在切切面面上上，，从从刀刀片片刀刀口口下下方方起起，，斜斜向向后后拉拉切切，，切切时时要要用用臂臂力力，，不不用用腕腕力力。

不不必必太太用用力力，，否否则则就就不不易易切切薄薄。

③③连连续续切切几几片片后后，，取取下下切切片片，，转转移移到到载载玻玻片片上上的的一一滴滴水水中中，，放放在在低低倍倍显显微微镜镜下下检检查查。

假假如如切切片片充充分分透透明明，，细细胞胞重重叠叠不不明明显显，，就就可可使使用用。

否否则则得得重重切切。

④④过过于于柔柔嫩嫩的的植植物物器器官官，，如如叶叶片片，，难难以以直直接接拿拿住住，，可可以以用用坚坚固固而而易易切切的的材材料料夹夹后后再再切切，，如如胡胡萝萝卜卜片片。

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徒手切片实验报告

徒手切片实验报告徒手切片实验报告导言：切片是生物学研究中常见的操作，通过切片可以观察细胞、组织的结构和功能。

本实验旨在通过徒手切片的方式，探索细胞结构和组织构成的奥秘，并了解切片技术的应用。

材料与方法：1. 实验材料：新鲜动物组织（如鸟翅膀、鱼嘴等）、显微镜、切片刀、载玻片、显微镜玻璃盖片、生理盐水、染色剂（如甲苯胺蓝）等。

2. 实验步骤：a. 准备工作：将显微镜调至适当倍数，准备好切片刀、载玻片和显微镜玻璃盖片。

b. 取得组织样本：选择新鲜的动物组织，如鸟翅膀或鱼嘴，用生理盐水清洗干净。

c. 切片操作：将组织样本放在切片刀上，用另一只手稳定组织，用适当的力度和角度进行切片。

d. 制备载玻片：将切下的组织片放在载玻片上，加入适量的生理盐水，轻轻摇晃使组织片均匀分布。

e. 染色处理：如果需要染色，可以将载玻片浸入染色剂中，根据需要的染色时间进行处理。

f. 封片与观察：将显微镜玻璃盖片放在载玻片上，用手指轻轻压紧，然后将载玻片放在显微镜下观察。

结果与讨论：通过徒手切片实验，我们可以观察到细胞的结构和组织的构成。

在切片过程中，我们需要注意力度和角度的掌握，以避免组织片的破坏或变形。

同时，在制备载玻片时，加入适量的生理盐水可以保持组织片的湿润，有助于观察。

在观察过程中，我们可以发现组织中的细胞呈现出不同的形态和排列方式。

细胞的结构包括细胞核、细胞质和细胞膜等，通过显微镜的放大，我们可以清晰地观察到这些细胞结构。

此外，不同组织之间的差异也可以通过切片来展示，比如肌肉组织和神经组织的差异。

切片技术在生物学研究中起到了重要的作用。

通过切片，我们可以观察到细胞和组织的微观结构，了解其功能和特性。

同时，切片也为疾病的诊断和治疗提供了重要的依据。

例如，在病理学中，医生可以通过切片观察组织的异常变化，以确定疾病的类型和程度，从而制定相应的治疗方案。

然而，徒手切片也存在一些限制。

首先，徒手操作容易造成组织片的损伤或变形，影响观察结果的准确性。

《徒手制作叶片横切的临时切片》

• 选切叶片用镊子取一片新鲜的植物叶片，平展在载玻片上。
• 切取材料用左手压住材料一端，右手捏紧两个并排的双面刀片，从另一端沿和主叶脉垂直方向，迅速切割载玻片上的叶片。
• 每切一次刀片要沾水一次，以便将切下的叶片薄片放入盛有清水的培养皿中。
• 选材制片用毛笔蘸取最薄的一片，将切面展放在滴有清水的载玻片上，盖上盖玻片，用吸水纸吸去多余水分，制成临时切片。
徒手制作叶片横切的临时切片
齐齐哈尔阳光学校
王Hale Waihona Puke 珠目的要求:1.练习徒手切片的制作；
2.尝试用徒手切片的方法制作临时玻片
材料用具：新鲜叶片（菠菜、蚕豆叶或槐树叶）、双面刀片（两片，并排在一起，一侧用胶布粘牢）、载玻片、盖玻片、镊子、胶头滴管、吸水纸、毛笔、纱布、盛有清水的培养皿等。
实验步骤
观察叶片结构
上表皮
叶肉叶脉
下表皮
在显微镜下观察到较完整清晰的叶片横切面结构

实验九徒手切片法制片技术

实验九徒手切片法制片技术实验九徒手切片法制片技术一、目的要求徒手切片法是观察植物内部结构的简易制片法。

所需的仪器用具简单，药品经济，操作方便，费时较短，且易于保持材料的天然色泽和活体结构，必要时，也可经过脱水、染色制成永久制片而保存。

但是徒手制片对于体积过小，质地太软或太硬的材料，则难于处理，同时，也不能制成连续切片，这些均为不足之处。

二、材料、用品1、用品显微镜、剃头刀（或刀片）、毛笔、镊子、培养皿、染色皿（或小酒杯）、吸管、载玻片、盖玻片、吸水纸。

1%番红水溶液（或50%酒精溶液），0.5%固绿95%酒精溶液，70%、85%、95%酒精，纯酒精、二甲苯和中性树胶或加拿大树胶等。

三、方法与步骤1、选材所用材料不宜太软或太硬。

一般植物幼嫩的根茎或一些植物的叶片、叶柄等均可使用此法。

质地较薄的材料，如叶片，可沿主脉两侧切成宽约5～6毫米，长1～1.5厘米的小块，夹在夹持物(如胡萝卜根或马铃薯块茎等)中进行切片。

使用夹持物时，先将夹持物的中央切成两半，然后将切好的材料夹入，合拢夹持物进行切片，也可将叶片卷成筒状再切。

2、切片（1）盛清洁的水于培养皿中。

然后用左手的拇指及食指、中指夹住材料，拇指的位置要低于食指，并使材料的上端伸出指外2～3毫米，材料的切面必须保持水平方向。

(2)右手执刀(剃头刀或刀片)，平放在左手食指之上，刀口向内，自左前方向右后方滑行切割，要用臂力，不要用腕力，不可向内平切。

(3)拉切的速度宜快，一次切下，不要中途停顿或似拉锯式，以免损伤材料或切得不平。

(4)切片过程中，如发现由于用力不均而使材料表面倾斜时，必须立即削平。

(5)刀片或剃刀必须锋利，材料及切片均需经常沾水，以保持材料湿润、润滑。

(6)切下的薄片可随时涮入培养皿的水中，以备观察;等切到相当数量后;再选择其中最薄的透明度最大的做成临时玻片观察。

如想短期保存，可用水或甘油封藏。

如希望长期保存所切的材料，则还要经过以下几个步骤做成永久玻片标本。

显微镜的使用、徒手切片法及绘图法

显微镜的使用、徒手切片法及绘图法一．实验目的⑴掌握徒手切片、表面制片方法⑵熟悉显微镜使用方法及作图要领二．实验内容1．显微镜的使用生物显微镜由光学部分和机械部分组成⑴光学部分——目镜、物镜、聚光器、可变光栏、反射镜※两次放大，即物镜将标本做第一次放大，目镜将第一次放大的像做第二次放大，两者相乘即是观察到的放大倍数⑵机械部分包括镜坐、镜臂、镜筒、载物台、粗细调节手轮及推动器⑶操作：①将显微镜防置离桌缘约10厘米处②对光：上升聚光镜至载物台水平，打开光栏，将低倍镜转至镜筒的正下放（用转盘听到“得”一声）转动反光镜，同时从接目镜向下看，直至明亮均匀在视野。

③装片：将观察的标本片从镜前方横置于载物台上④调节焦距：向外旋转粗调节手轮，使镜筒慢慢下降，注意镜头与标本的距离，自目镜向下观察直至物像清楚为止。

（向外物镜下降，向内物镜上升）另外：高倍镜应先在低倍镜下选择物像，移至视野中心，转动转盘使高倍镜转至镜筒正下方，应能看到欲观察之物像，用细调节手轮使之图象清晰。

⑷注意点：①取拿显微镜时，一手握镜臂，一手托镜坐，轻取轻放。

②先用低倍镜观察，看清物象后再换高倍镜，③在用高倍镜观察时，注意物镜与所观察标本的间距，以防错误操作，而损坏镜头，压碎标本片④注意保持显微镜的干燥和清洁，不得随意拆卸镜头，镜头要用擦镜纸擦拂，要防止水或药液外溢而污染镜头及其他部位。

2．徒手切片法系用刀片或徒手切片器将材料切成薄片，可在显微镜下观察组织构造、细胞特征的制片法。

材料：新鲜应除净泥沙、干燥须经软化，优点：简便快速能保持植物原有结构的真像，色彩和内含物缺点：厚薄不一，不利于长期保存。

①方法a：取材，固定与切片：选取易软化的中药材适当部位，切成2-3厘米的小段，用拇指及食指和中指夹住材料，下端用无名指托住，另手持刀片自左向右移动手腕，牵拽切片，动作要轻要快，切禁不能是拉锯式，在切的同时经常用水湿润，对于叶或柔软的材料，须用材料夹住。

（如用胡萝卜、马铃薯等）b：装片：将切好的薄片用毛笔小心移入盛有清水的培养皿中，取载玻片滴加甘油和试液，用镊子或毛笔将切片移于其上。

徒手切片的制作

徒手切片的制作用光学显微镜观察的样品必须是透明的薄片，因此待观察的植物材料只有被切成很薄的切片后，才能在显微镜下观察。

显微镜的制片分永久制片和临时制片，永久制片的制作方法和步骤．比较复杂，有兴趣者可查阅有关植物制片技术的书籍，在植物学实验教学过程中，指导教师已预先准备了所需用的永久制片。

在教学过程中，要求同学做的主要是临时制片。

临时制片种类很多，包括涂片、压片等等，这里主要介绍用新鲜材料制作切片的徒手切片法。

作徒手切片不需要复杂的设备，只需要一把锋利的剃刀或一片刀片就可以进行，方法简单，而且易于保持细胞的生活状态。

徒手切片法所作的切片通常不经染色或经简易染色后，封藏于水中即可观察。

用剃刀切片，材料不能太大，一般以表面不超过3-5mm为宜。

切片最要紧的是平而薄，无需很完整，比如茎的横切面，无需切片整圆形，只需一角就够了。

所有切片前的准备工作，如截取材料、削平切面，都应使用解剖刀或用过的刀片，不可用剃刀，以保持剃刀的锋利。

为了成功地切片，应掌握正确的用刀方法。

一般用左手的大拇指、食指和中指3个手指捏住材料，使材料突出在指尖之上，避免切片时割伤手指；用右手平稳地拿住剃刀，把刀口放在经解剖刀削平的材料平面中间，轻轻地压住它，以均匀的动作，从剃刀刀口下方起，斜着向后拉切。

切时要用臂力而不是腕力，并且不必太用力，否则就不易切薄。

在切的过程中，决不能以剃刀直接挤压材料，或以剃刀来回拉割材料，并且要始终保持材料与剃刀在水平状态，否则会由于切面偏斜而影响观察。

切下的切片应该薄而透明，形状则不要求非常完整，可以用刀不同的部位一次作几个切片，然后用蘸水的毛笔取下切片，置于盛水的培养皿中。

有些较柔嫩的器官，例如幼叶，难以直接拿住进行切片，因而需借助一些维持物，一般用胡萝卜根或土豆块茎作为维持物，把要切的材料夹于其中，进行切片，以利于把握操作。

将切下的薄片放在载玻片上时，要先在玻片中央加一滴水，把材料放到水滴中，然后用镊子夹住盖片，将盖片的一侧先接触到载玻片中央的水滴，然后用镊子顶住盖片的另一侧，慢慢放下，使盖玻片与载玻片之间充满水，如有气泡，要掀起盖片，重新放置。

徒手切片制作

制片
用毛笔挑选透明的薄片，制临时装片。
注意事项
1、在切片前，要不断地用水湿润材料和刀片。 2、夹持物上端要保持表面平整。
3、切片时，双手应该保持活动状态，不要
使它们紧靠身体或实验台。 4、用力不要过猛，不能用刀片挤压材料或来回切割材料。 5、动作要敏捷，材料要一次切下，不要追求切片形状的完整。速度要快，才能切得又薄又平。
握夹持物和持刀
用左手的拇指和食指捏紧夹有叶片的夹持物，并使其劈缝与自己本身平行，拇指要稍低于食指，以免被刀割破。夹持物上端要略高于手指，但勿过高，以防切割时夹持物和刀摇动。右手拿刀将刀片平稳地放在左手食指上，与材料切面平行。
拉切
这是切片的关键阶段。沾水的刀口保持水平对着夹持物, 自左前方向右后方，以均匀、快捷的动作，斜着向后进行连续拉切。切时用臂力而不用腕力。如此循环多次，切下许多薄片后，把切下的薄片，迅速用毛笔刷入清水中备用。
Hale Waihona Puke 徒手切片的制作一、实验材料及器材的准备二、实验材料的处理三、握夹持物和持刀四、拉切五、制片六、注意事项
实验器材的准备
1、锋利的刀片 2、洁净的载玻片、盖玻片 3、盛清水的培养皿 4、毛笔、镊子等
实验材料的处理
1、软硬适中、便于手持的材料，一般截成小块（长2～3cm，切片断面不超过3～5 mm2）。 2、过于柔嫩的器官，可选用胡萝卜根或土豆块茎作为夹持物。夹持物截成规范的小块，再用刀从一端的中线纵向劈开（不要劈到底），以夹住材料。如新鲜蚕豆叶片，切去叶柄、叶尖和叶缘后，切成长度和宽度都小于夹持物劈缝的长方块，再放入夹持物劈缝中。 3、有些叶片可以卷成圆筒再进行切片。

第三章徒手切片法

第三章徒手切片法徒手切片法是指用手拿刀片（或剃刀）把新鲜材料切成薄片，徒手切片法所作的切片通常不经染色或经简易染色后，封藏于水中即可观察，但也可制成永久制片。

观察但也可制成永久制片优点不需用切片机等贵重仪器有一刀片或剃刀就可不需用切片机等贵重仪器，有一刀片或剃刀就可以进行切片；制片简单迅速能及时观察植物生活组织结构制片简单、迅速，能及时观察植物生活组织结构和颜色。

缺点微小、柔嫩、含水过多以及坚硬的材料，很难用此法切成薄片。

此法切成薄片不经过严格的操作训练，易切成薄厚不均或不完整的切片。

切出的片子厚于切片机切片，也不适合对植物子房及胚胎等材料做连续切片。

操作步骤选取待观察的植物材料初步切取大约3长的小块1.取材选取待观察的植物材料，初步切取大约3cm长的小块，再依切片的具体要求，将组织块修整为0.5cm的材料块。

2.切片以左手夹住材料，用右手平稳地握住刀片。

切片时，使刀片与材料的断面保持平行刀口自左上方斜向使刀片与材料的断面保持平行，刀口自左上方斜向右下方，动作要均匀有力。

材料与刀片须常以水湿润。

切下的薄片立即用毛笔蘸水后粘取移入盛有清水的培养内培养皿内。

胡萝卜木髓观察材料剃刀双面刀片切片33.选片切片完整，在培养皿中选择薄而均匀且切面完整的组织切片，捞在载玻片上作临时水装片，然后置于显微镜下观察，如结构能被清晰地显示出来，则可制成永久保存封片。

4.固定与染色FAA中固定15分钟至1小时，取镜检合格的切片投入小时将切片移入蒸发皿或小培养皿中，依次用50%、0%浓度乙醇脱水然后60%、70%各级浓度乙醇脱水，然后放入含1%番红的70%乙醇溶液中染色30min以上。

5. 脱水染好色的切片移入70%、80% 、90%、95%乙醇各级脱水5min 。

滴加含1%固绿的95%乙醇溶液染色30s 。

再换入95%乙醇中分色，最后进入无水乙醇脱水5min 。

切片移入1二甲苯混合溶液6. 透明1 ：1的无水乙醇：二甲苯混合溶液4min ，再移入纯二甲苯5min ，组织切片呈透明状。

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