南中医生物制药工艺学复习资料

第一章

药物：用于预防、治疗或诊断疾病或调节机体生理功能、促进机体康复保健的物质。4大类：预防药、治疗药、诊断药和康复保健药。

药品:直接用于临床的药物产品，是特殊商品。药品应规定有适应症、用法语用量和疗程，说明毒副反应。还要有使用有效期，过期商品不准使用。

生物药物：是指生物体、生物组织或其成分为原料（包括组织、细胞、细胞器、细胞成分、代谢、排泄物，综合应用生物学、物理化学与现代药学的原理与方法加工制成的药物。

4大类：重组DNA药物（基因工程药物）、基因药物、天然生物药物、合成与部分合成的生物药物。

生物制品：用微生物、微生物代谢产物、动物毒素、人或动物的血液或组织等加工制成的预防、治疗和诊断特定传染病或其他有关疾病的免疫制剂，主要指菌苗、疫苗、毒素、应变原与血液制品。

生物技术药物(基因工程药物):采用DNA重组技术或单克隆抗体技术或其他生物技术制造的蛋白质抗体或核酸类药物。

生物药物的特性：1.药理学特性：（1）药理活性高、（2）治疗正对性强，治疗的生理、生化机制合理，疗效可靠、（3）毒副作用较少，营养价值高。（4）生理副作用常有发生（免疫原性反应和过敏反应。

2.理化特性：（1）生物材料中的有效物质含量低，杂质种类多且含量相对较高。(2)生物活性物质组成结构复杂，稳定性差。（3）生物材料易染菌、腐败（4）生物药物制剂的特殊要求。P8生物药物分类

一．基因工程药物：1.细胞因子干扰素2.细胞因子白介素和肿瘤坏死因子3.造血系统生长因子类4.生长因子类5重组多肽与蛋白质类激素6心血管病治疗剂与酶制剂7重组疫苗与单抗制品

二．基因药物：以基因物质作为治疗的物质基础，包括基因治疗用的重组目的DNA片段

重组疫苗、反义药物、干扰核酸RNAi和核酶等。

三．天然生物药物：

1.微生物药物（1）抗生素类药物（2）维生素类药物（3）氨基酸类药物（4）核苷酸类药物（5）酶与辅酶类药物（6）酶抑制剂（7）免疫调节剂（8）受体拮抗剂

2．天然生物药物（1）氨基酸类药物（2）多肽和蛋白质类药物(3)酶类药物（4）核酸及其降解物和衍生物类药物（5）多糖类药物（6）酯类药物

3.海洋生物药物

四．医学生物制品

第二章

一.生化制药的生物材料的来源：1.动物脏器2.血液、分泌物和其他代谢物3.海洋生物4植物

5.微生物

二．生物材料的准备

1.生物材料的选择

（1）有效成分的含量（选择富含有效成分的生物制品）

(2)合适的组织器官（注意生物的生长期）

(3)杂质情况（避免与目的物相似的杂志对纯化过程的干扰）

(4)来源丰富

2.生物材料的采集、预处理与保存

采摘迅速，及时冻存、低温保存。

保存方法：1冷冻法2有机溶剂脱水法(丙酮)适用于原料稀少而价值高的材料,并且有机溶剂

对活性物质不起破坏作用的原料,如脑垂体.3防腐剂保鲜法,常用乙醇、苯酚等。适用于液体原料。

三．生化活性物质的提取。

1．酸、碱、盐水溶液提取法（水溶性、盐溶性的生化物质）如胰蛋白酶用稀硫酸提取，肝素用pH9的3%氯化钠提取，某些与细胞结构结合牢固的生物高分子，采用高浓度盐溶液提取，这种方法称“盐解”

2．表面活性剂（去垢剂）提取法(SDS)

3.有机溶剂提取：有毒，但去除容易，脂溶性物质的提取。

影响提取效率的因素(1).温度耐热50-90度，不耐热0-10度，在活力允许的条件下，温度尽量高。

(2)酸碱度pH4-9

(3)盐浓度稀盐：助溶NACL PBS AC-

提取方法的选择,目的：尽量增加目的物的溶出，减少杂质的溶出。

对于一些生物大分子采用下列保护措施

(1)采用缓冲系统PBS、TRIS-HCL等（2）添加保护剂B-巯基乙醇、DTT（3）抑制水解酶的作用，加酶抑制剂（4）尽量采用温和条件（避免紫外线、强烈搅拌、过酸、过碱或高温、高频振荡等）

四生物活性物质的浓缩与干燥

1.生活活性物质的浓缩（浓度增加，体积减小）：

液体变固体(1)盐析（2）有机溶剂沉淀法（乙醇、丙酮）

还是液体(3)葡聚糖凝胶浓缩（4）用聚乙二醇浓缩（5）超滤浓缩（6）真空减压浓缩与薄膜浓缩

2.干燥：缩小体积，增加稳定性（1）减压干燥（2）喷雾干燥（3）冷冻干燥

五．生化活性物质的分离与纯化（液相中进行）

生物制药工艺中分离制备方法的特点(1)生物材料组成非常复杂，杂质多，数量大（2）有些化合物在生物材料中的含量极低（3）生物活性成分分离后，易变性破坏（4）分离在溶液中进行，各种参数对溶液中各种组分的综合影响常常无法固定（5）多采用温和的”多阶式”方法进行，“逐级分离”（6）生物产品最后均一性的证明与化学上纯度的概念不完全相同。根据分子形状和大小不同进行分离：差速离心与超离心、膜分离（透析、电渗析）、凝胶过滤法

根据分子电离性质的差异进行分离：离子交换法、电泳法、等电聚焦发

根据分子极性大小及溶解度不同进行分离：溶剂提取法、盐析法、等电点沉淀法及有机溶剂沉淀法。

根据物质吸附性质不同：选择性吸附和吸附层析法。

根据配体特异性进行分离：亲和层析法。

分离纯化的基本程序和实验设计

(1)建立分析鉴定方法（分析目的物是否还在）

(2)理化性质和稳定性的预备实验

(3)材料处理与抽提方法的选择

(4)分离纯化方法的摸索

(5)产物的均一性测定

分离纯化早期选择原则：从低分辨率到高分辨率且负荷量较大地方法。不宜选择分辨能力较高的纯化方法。特点：缓和、步骤多、层层剥皮。常用手段：提取、沉淀、吸附、离子交换(1)交叉使用原则（2）先后顺序合理安排