抗生素类药物的分析PPT课件

2. 沉淀反应 （1）在稀盐酸中生成白色沉淀
在过量HCl或 有机溶剂中溶解
青霉素钠、青霉素钾 Ch.P（2000） 【鉴别】（2）取本品约0.1g，加水5ml
溶解后，加稀盐酸2滴，即生成白色 沉淀；此沉淀能在乙醇、醋酸戊酯、 氯仿、乙醚或过量的盐酸中溶解。
（2）有机胺盐的特殊反应 普鲁卡因青霉素可发生重氮化—偶 合反应
抗生素类药物的分析
第一节 概述
一、抗生素药物的特点
抗生素是指在低微浓度下即 可对某些生物的生命活动有特异 抑制作用的化学物质的总称。
（一）抗生素的来源 1. 微生物发酵 （主要） 2. 化学合成或半合成
（二）抗生素类药物的特点
1. 化学纯度较低 同系物多 三多 异构体多 降解物多
2. 活性组分易发生变异 3. 稳定性差
优点 1. 准确度高 2. 简单、快速
缺点 1. 不一定代表生物效价 2. 易受杂质干扰
三、分类
1. 按产生菌分类
2. 按抗菌谱分类
3. 按作用机制分类
4. 按化学结构和性质分类
β－内酰胺类 多烯大环类
氨基糖苷类
多肽类
四环素类
苯烃胺类
大环内酯类
蒽环类
第二节 -内酰胺类抗生素的分析
青霉素类
RCO 侧链
HN *6
7
O
*5
S
1
2
CH3 CH3
N4
3
*
COOH
母核（6-氨基青霉烷酸）
H N OO
S N
CH3
CH3 COONa
青霉素钠?
H
S CH3
HO
C C NH
CH3
NH2 O
N
COOH
O
阿莫西林?
氨苄西林（钠）
普鲁卡因青霉素
头孢菌素类
RCO NH * * S
侧链 O N
CH2R1
COOH
母核（7-氨基头孢菌烷酸）?
谱图中，供试品溶液主峰的保留时间应 与对照品溶液主峰的保留时间一致。
【检查】
酸度
溶液的澄清度
有关物质
干燥失重
杂质吸光度 热原
无菌
（三）含量测定方法
1. 抗生素微生物检定法 药典附录 测定抗生素抑菌或杀菌的能力
优点 与临床要求一致 灵敏度高、用量少 适用范围广，可用于未知药物
缺点 操作繁琐、测定时间长、 测定误差大
2. 化学及物理化学方法
以理化方法测定抗生素的效价 适用于纯度较高的结构确定的抗生素
（1）与重氮苯磺酸反应 酚羟基
头孢哌酮 羟氨苄西林 头孢羟氨苄
例 头孢哌酮 Ch.P（1995） 【鉴别】 取本品约10mg，加水20ml
使溶 解，取4ml，加1%碳酸钠溶液与 重氮苯磺 酸试液各1ml，摇匀，溶液显 橙黄色。
Ch.P（2005） 羟肟酸铁反应、HPLC
（2）与H2SO4 - HNO3反应 头孢菌素类（活泼-CH2-、S2-）
Ch.P（2005） HPLC、IR
（二）各种盐的鉴别
1. K+、Na+的反应 Na+ 焰色→鲜黄色
+ 醋酸氧铀锌→↓黄 焰色→紫色 K+ + 0.1%四苯硼钠 + Ac-→↓白
青霉素钠 Ch.P（2005） 【鉴别】（3）本品显钠盐的火焰反 应（附录 Ⅲ）。
青霉素钾 Ch.P（2005） 【鉴别】（3）本品显钾盐的火焰 反应（附录 Ⅲ）。
H
C CONH
NH2 O
头孢氨苄
HS
N CH3
COOH
S CH2CONH
HS
N O
CH2OCOCH3
头孢噻吩钠 COONa
一、结构与性质
（一）结构 RCO HN 6
S CH3
1
5
2 CH3
1. 青霉素类
7 N4 O
3 COOH
（1）侧链（RCO-）+母核（6-APA） （2）分子中含三个手性碳原子（C3、 C5、C6）
例 头孢噻吩钠 Ch.P（1995） 【鉴别】（1）取本品约10mg，加硫
酸4滴与硝酸1滴，即显红棕色。
Ch.P（2005） HPLC、IR、Na+
（3） 与变色酸-硫酸反应 分解产物的反应
例 阿莫西林 Ch.P（1995） 【鉴别】（1）取本品约2mg，加变
色酸 2mg，硫酸2ml，在150℃加热2~3 分钟， 即显深褐色。
NH2 O
S
N CH3
COOH
例 阿莫西林 Ch.P（1995） 【鉴别】（2）取本品约10mg，加
水6ml溶解后，加碱性酒石酸铜试液 0.5ml，即显紫色。
例 阿莫西林
Leabharlann Baidu
Ch.P（2000）
【鉴别】（4）TLC法
显色剂 ： 0.3%茚三酮-乙醇溶液
Ch.P（2005） HPLC、IR
3. 其它呈色反应
2. 旋光性 3. 紫外吸收特性 （1）青霉素分子的母核无吸收，侧 链有吸收 （2）头孢菌素分子的母核有吸收
4. -内酰胺环的不稳定性 -内酰胺环不稳定，与酸、碱、
青霉素酶、羟胺及某些金属离子等作 用，易发生水解和分子重排，导致失 去抗菌活性
二、鉴别试验
（一）显色反应 1. 羟肟酸铁反应 β-内酰胺类
普鲁卡因青霉素 Ch.P（2000） 【鉴别】（3）本品显芳香第一胺类的 鉴别反应（附录Ⅲ）
（三）光谱法 1. UV 2. IR β－内酰胺环环张力较大，所
以羰基的伸缩振动增强而且向高波 数位移
CO1750 ～1800cm -1
（四）色谱法 1. TLC 2. HPLC
阿莫西林 Ch.P（2005） 【鉴别】（1）在含量测定项下记录的色
Fe3+ H+
呈色
例 磺苄西林钠 Ch.P（2005） 【鉴别】（1）取本品约20mg，加
水15ml溶 解后，加盐酸羟胺试液与 氢氧化钠试液各2 ml，放置5分钟后， 加盐酸溶液（1→100） 3ml与三氯化 铁试液1ml，随即摇匀，即显 赤褐色。
2. 类似肽键的反应 茚三酮反应 双缩脲反应
CH COHN
（3）C3位有游离羧基
2. 头孢菌素类
（1）侧链（RCO-）+母核（7-ACA）
（2）分子中含二个手性碳原子（C6、
C7）
RCO NH
S
侧链 O
N CH2R1
COOH
（3）C4位有游离羧基
（二）性质
1. 酸性及溶解性 青霉素和头孢菌素分子中有游离
羧基有酸性，大多数青霉素类药物的 pKa在2.5～2.8之间，能与碱反应形成 盐。其碱金属盐易溶于水，有机碱盐 难溶于水，易溶于有机溶剂。
二、抗生素类药物分析的特点
（一）鉴别试验 1. 理化法 （1）化学法 （2）仪器分析法 2. 生物学法
对照品法
（二）检查 1. 产品稳定性 2. 有机、无机杂质 3．安全性 异常毒性、热原或细 菌内毒素、降压物质、无菌 4．其它指标 硫酸庆大霉素的“庆大霉素C 组分的测定”
例 盐酸四环素 Ch.P（2005）