需氧革兰阳性杆菌及检验 PPT课件
临床检验技师-微生物检验(2019)讲义第十八章需氧兼性厌氧革兰阳性杆菌及检验-(1008)
菌落特征：普通培养基上生长不良，形态不典型。
吕氏血清斜面培养基：生长迅速，10～18h形成灰白色、湿润、S型菌落。 异染颗粒明显。
亚碲酸钾血琼脂：菌落呈黑色。
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白喉棒状杆菌——微生物检验及鉴定
·标本采集：若需培养，应在使用抗生素或其他抗菌药物前用无菌长棉拭子，从可疑的伪膜边缘采集
炭疽芽胞杆菌——微生物检验及鉴定
·标本采集：根据不同感染部位取材；各型炭疽均可采取血液。专门防护的实验室，并对用过的器具、
检材等进行严格的消毒处理。
·形态学检查： 革兰染色和荚膜染色。镜检发现有荚膜的革兰阳性竹节状大杆菌。荚膜荧光抗体染色，链状或竹节状大杆菌周围有发荧光的荚膜者为阳性。
·分离培养：污染严重的标本可预先加热至65℃30min杀灭杂菌，或接种炭疽杆菌选择培养基-喷他脒（戊烷脒）血琼脂平板，菌落特征与血平板培养基的生长相似，但菌落较小。
第十八章需氧/兼性厌氧革兰阳性杆菌及检验
本章内容
一、棒状杆菌属
（一）白喉棒状杆菌
（二）其他棒状杆菌（类白喉棒状杆菌）
二、芽胞杆菌属
（一）炭疽芽胞杆菌
（二）蜡样芽胞杆菌
三、产单核李斯特菌
四、丹毒丝菌属（红斑丹毒丝菌）
五、阴道加特纳菌
标题记忆
图像记忆
对比记忆
棒状杆菌属
·G+杆菌，菌体一端或两端膨大呈棒状，故名棒状杆菌。
A.只能引起食草动物患炭疽病
B.是致病菌中最大的革兰阴性杆菌
C.菌体两端齐平，呈竹节状
D.在所有培养基中均形成荚膜
E.不易形成芽胞
『正确答案』C
『答案解析』炭疽芽胞杆菌菌体两端齐平，呈竹节状。
实验十五：需氧革兰阳性杆菌
contents
目录
• 实验目的 • 实验原理 • 实验步骤 • 结果分析 • 结论
01
实验目的
掌握需氧革兰阳性杆菌的形态特征
总结词
了解需氧革兰阳性杆菌的形态特点，如细胞壁结构、染色特 性等。
详细描述
需氧革兰阳性杆菌是一类具有革兰氏染色阳性特性的需氧菌 ，其细胞壁结构较为特殊，通常由肽聚糖和磷壁酸组成。在 显微镜下观察，需氧革兰阳性杆菌呈现为细长的杆状或球状 ，直径较小，染色后呈紫黑色。
在染色过程中，可以尝试使用其他染色方法或试剂，以提高染色效果和准确性。
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01
需氧革兰阳性杆菌是一类需氧生长的革兰氏阳性菌， 具有较高的代谢活性和生长速度。
02
这类细菌通常具有较厚的细胞壁和丰富的胞内物质， 对某些抗菌药物具有一定的抵抗力。
03
需氧革兰阳性杆菌在人体内可引起多种感染，如肺 炎、伤口感染和肠道感染等。
需氧革兰阳性杆菌的分离培养方法
选择适当的培养基
需氧革兰阳性杆菌需要选择适合 其生长的培养基，如血琼脂培养
05
结论
实验总结
实验目的
本实验旨在观察需氧革兰阳性杆菌的形态、染色特性以及 培养特性，进一步了解该菌种的生物学特性。
实验材料
需氧革兰阳性杆菌菌种、显微镜、培养基、染色剂等。
实验步骤
将需氧革兰阳性杆菌接种在培养基上，在需氧条件下培养 ；观察菌落形态，并进行革兰染色；显微镜下观察染色后 的细菌形态。
实验结果
实验结果显示，需氧革兰阳性杆菌呈圆形或椭圆形，单个 或成双排列，菌落较小，表面光滑湿润。染色后呈紫色， 为革兰阳性菌。
需氧革兰阳性杆菌检验
指导抗生素治疗
抗生素是治疗细菌感染的主要手段， 但不同种类的细菌对不同抗生素的敏 感性不同，通过需氧革兰阳性杆菌检 验可了解细菌对抗生素的敏感性，指 导临床医生选择合适的抗生素。
VS
需氧革兰阳性杆菌的耐药性不断增强， 通过检验可了解细菌的耐药性情况， 有助于预防和控制耐药菌株的传播。
流行病学调查与监测
获得性耐药
细菌通过基因交换或获得 外源基因，获得对药物的 抗药性。
传播途径
耐药菌可通过患者之间的 接触、医院环境、动物和 食品等多种途径传播。
耐药性的检测与监测
实验室检测
通过细菌培养、药敏试验 等方法检测细菌的耐药性。
监测系统
建立全国性的耐药性监测 系统，收集和分析耐药菌 的数据，为防控提供依据。
需氧革兰阳性杆菌检验在流行病学调查中具有重要意义，通过对病原菌的分布和流行趋势进行监测，有助于了解疾病的传播 途径和流行规律。
通过需氧革兰阳性杆菌检验可监测细菌的变异和进化情况，及时发现新发和突发的病原菌，为防控措施提供科学依据。
04
需氧革兰阳性杆菌检验的注意事项
实验室安全与防护
实验操作应在生物安 全柜中进行，确保空 气流通，防止交叉污 染。
生化反应鉴定
生化反应鉴定是通过检测细菌对不同 底物的代谢反应来鉴别细菌种类的。 需氧革兰阳性杆菌在生化反应中表现 出一定的特异性，如分解葡萄糖、果 糖、甘露醇等。
生化反应鉴定的方法有多种，如纸片 法、试管法等。通过观察生化反应的 结果，可以初步确定细菌的种类和亚 种。
血清学鉴定
血清学鉴定是通过检测细菌表面抗原与特异性抗体结合的 反应来鉴别细菌的。需氧革兰阳性杆菌的表面抗原不同， 与特异性抗体的结合反应也不同。
需氧革兰阳性杆菌检验
14第十四章 需氧革兰阳性杆菌检验 (1)
第十四章需氧革兰阳性杆菌检验一、名词解释1.炭疽毒素2.侵袭因子3.BV (bacterial voyinosis)4.串珠试验5.Ascoli试验6.需氧芽胞杆菌属7.PA (protective antigen)8.EF (edema factor)9.线索细胞二、选择题【A1型题】1.下列细菌中不能引起人畜共患病的是A、炭疽芽胞杆菌B、腊样芽胞杆菌C、产单核细胞李斯特菌D、红斑丹毒丝菌E、结核分枝杆菌2.革兰阳性需氧杆菌中致病力最强的是A、腊样芽胞杆菌B、产单核李斯特菌C、炭疽芽胞杆菌D、阴道加特纳菌E、红斑丹毒丝菌3.下列哪种不是人感染炭疽芽胞杆菌的方式A、接触或摄食病畜B、接触或摄食畜产品C、吸入干燥菌粉D、吸入气溶胶E、接触饲料4.炭疽芽胞杆菌引起的炭疽病不会引起哪项并发症A、败血症B、菌血症C、脑膜炎D、内毒素血症E、毒血症5.不是炭疽芽胞杆菌形态特征的是A、两端平切，无鞭毛B、常单个存在或呈短链C、培养后形成长链，呈竹节排列D、在有氧条件下可形成芽胞E、芽胞位于菌体的头部6.炭疽芽胞杆菌的生化反应中不能分解的糖是A、葡萄糖B、半乳糖C、麦芽糖D、蔗糖E、蕈糖7.不是炭疽芽胞杆菌抗原的是A、菌体多糖抗原B、荚膜多肽抗原C、鞭毛抗原D、芽胞抗原E、炭疽芽胞杆菌8.以下细菌可引起败血症，除外的是A、表皮葡萄球菌B、脑膜炎奈瑟菌C、大肠埃希菌D、炭疽杆菌E、痢疾志贺菌9.可用荚膜肿胀试验鉴定的是A、大肠埃希菌B、金黄色葡萄球菌C、奇异变形杆菌D、结核杆菌E、炭疽杆菌10.下列既有荚膜又有芽胞的细菌是A、普通变形杆菌B、铜绿假单胞菌C、炭疽芽胞杆菌D、脂肪芽胞杆菌E、肺炎克雷伯菌11.对炭疽芽胞杆菌鉴定没有意义的实验是A、串珠试验B、毒力试验C、荚膜染色D、噬菌体裂解试验E、亚碲酸钾血平板生长12.炭疽毒素具有A、B片段结构，具有A 片段功能的是A、致死因子（PA）B、保护抗原（LF）C、水肿因子（EF）D、LF+EFE、PA+LF13.在青霉素作用下，可出现串珠现象的细菌是A、枯草芽胞杆菌B、嗜热脂肪芽胞杆菌C、炭疽芽胞杆菌D、腊样芽胞杆菌E、苏云金芽胞杆菌14.均为革兰阳性杆菌的是A、白喉棒状杆菌、炭疽芽胞杆菌、产单核细胞李斯特菌B、结核分枝杆菌、鼠疫耶尔森菌、腊样芽胞杆菌C、枯草芽胞杆菌、产气肠杆菌、产单核细胞李斯特菌D、产气荚膜梭菌、百日咳鲍特菌、白喉棒状杆菌E、红斑丹毒丝菌、腊样芽胞杆菌、铜绿假单胞菌15.下列细菌中可用来“冷增菌”的是A、淋病耐瑟菌B、炭疽芽胞杆菌C、产单核李斯特菌D、红斑丹毒丝菌E、流感嗜血杆菌16. 下列细菌中属于需氧芽胞杆菌的是A、破伤风芽胞梭菌B、肉毒梭菌C、炭疽芽胞杆菌D、葡萄球菌E、白喉棒状杆菌17.人类历史上第一个被发现的病原菌是A、破伤风芽胞梭菌B、肉毒梭菌C、炭疽芽胞杆菌D、产气荚膜梭菌E、白喉棒状杆菌18.控制炭疽芽胞杆菌毒力的物质是A、染色体B、噬菌体C、质粒D、侵袭性酶E、毒素19.主要引起食草动物传染病的细菌是A、炭疽芽胞杆菌B、结核分枝杆菌C、鼠疫杆菌D、枯草芽胞杆菌E、小肠结肠炎耶氏杆菌20.关于炭疽芽胞杆菌致病性的叙述，错误的是A、荚膜的抗吞噬作用使该菌易于在体内生长B、水肿因子激活后可独立发挥毒性作用C、炭疽毒素各成分可独立发挥毒性作用D、致死因子可抑制细胞的生长E、炭疽毒素主要损害微血管的内皮细胞21.炭疽毒素毒性作用主要是直接损伤A、白细胞B、红细胞C、微血管内皮细胞D、肝细胞E、脾细胞22.炭疽微生物学检查采集标本,下列方式中不正确的是A、无菌割取兽尸耳朵或舌尖组织B、人皮肤炭疽无菌取病灶渗出液C、人肺炭疽无菌取痰及血液D、人肠炭疽无菌取畜肉及血液E、兽尸剖检并取血液23.结合临床症状可作为炭疽初步诊断的直接镜检结果是A、找到革兰阳性芽胞大杆菌B、找到有荚膜的竹节状革兰阳性大杆菌C、找到有芽胞链状革兰阳性大杆菌D、找到有荚膜的革兰阳性大杆菌E、找到革兰阳性大杆菌24.关于炭疽杆菌的叙述，错误的是A、引起人畜共患病B、主要引起草食动物炭疽病C、对人畜危害最大的病原体D、可传染给肉食动物E、可通过多种途径传染给人25.炭疽杆菌与类炭疽杆菌的鉴别试验中，炭疽杆菌阴性的一项是A、荚膜B、动力C、串珠试验D、噬菌体裂解试验E、动物致病试验【A2型题】26.某女性患者，38岁，喝牛奶后出现食物中毒症状，取剩余牛奶分离培养出革兰阳性小杆菌，37℃无动力，在半固体培养基上生长呈倒立伞状，CAMP试验阳性，触酶阳性，耐盐耐碱，据此判断最可能是何种细菌？A、群链球菌B、鼠伤寒沙门菌C、产单核细胞李斯特菌D、腊样芽胞杆菌E、金黄色葡萄球菌27.某男性患者，32岁，屠宰工，高热，寒战，右臂外侧皮肤有一1×3cm的坏死，初起时为丘疹，后转为水疱，周围组织水肿，继之中心区出血性坏死并有焦痂。
革兰阳性需氧杆菌PPT课件
2021
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•荚膜多肽抗原：
--与毒力有关，有抗吞噬作用，有利于细 菌生长和扩散
--荚膜肿胀试验，对本菌鉴定有意义
•芽胞抗原：
有免疫原性和血清学诊断价值
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炭疽毒素：
--保护性抗原（PA)、致死因子（LF）、水肿 因子（EF）三个组分
--单独皆无致病性，与PA结合才显示出致病性 --具有抗吞噬和免疫原性
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二、 微生物特性
形态染色:
致病菌中最大的G+杆菌， 两端平切、竹节状 有毒株可有明显荚膜
炭疽芽胞杆菌 亚甲基蓝染色 ×1000
革兰染色 ×1000
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芽胞——椭圆形，小于菌体，位于菌体中央 多在有氧条件下形成，25～30℃，在培养基
中、土壤内、动物尸体解剖后暴露在空气中， 都易形成芽胞
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检验程序
皮毛、腐败脏器等
血液
Ascoli试验 以NG制成悬液 经加温或饱和 尿素处理
肉汤增 菌培养
BAP或戊 烷脒平板
2%兔血清肉汤4-8h G染色镜检
菌落特征
动 生 串 噬 荚青 毒
力 化 珠 菌 膜霉 力 观 反 试 体 肿素 试
确定报告
察 应 验 裂 胀抑 验
解 试制
验
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分解葡萄糖、麦芽糖、蔗糖、蕈糖， 有些菌能迟缓发酵甘油和水杨素产酸不产气 水解淀粉、还原硝酸盐 不产生吲哚和硫化氢、不利用柠檬酸盐、不
分解尿素 在牛乳中生长2～4天牛乳凝固→缓慢胨化 触酶（+）、卵磷脂酶弱（+）
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抗原构造：
菌体多糖抗原：
【精编】需氧革兰阳性杆菌及检验PPT课件
生物学特性
病毒无细胞结构，不能独立生长 繁殖，与需氧革兰阳性杆菌的生
物学特性存在显著差异。
检测方法
病毒的检测通常采用分子生物学 方法，如核酸检测，与需氧革兰
阳性杆菌的检测方法不同。
04
需氧革兰阳性杆菌的治疗与预 防
抗菌药物选择
根据病菌种类选择
针对不同种类的需氧革兰阳性杆菌，应选择不同的抗菌药物，以 确保治疗效果。
结果的准确性。
血清学试验
血清学试验是通过检测细菌对特 异性抗体的反应来判断细菌种类
的检验方法。
凝集试验是血清学试验中的一种 常用方法，通过将特异性抗体与 细菌细胞壁结合，观察是否发生
凝集反应来判断菌种。
血清学试验具有较高的特异性， 但操作较为繁琐，且需要已知抗 体作为对照，限制了其在临床上
的广泛应用。
案例二：表皮葡萄球菌感染的预防措施
总结词
表皮葡萄球菌感染的传播途径、预防措施及控制方法
详细描述
表皮葡萄球菌可通过直接接触或环境污染传播，预防措施包括加强手卫生、消 毒隔离、减少人员流动等。控制方法包括及时发现并隔离患者、加强环境清洁 和消毒工作等。
案例三：肠球菌感染的鉴别诊断
总结词
肠球菌感染与其他感染的鉴别诊断要点、诊断方法及治疗方案
与真菌的鉴别
形态学特征
真菌的形态学特征与需氧革兰阳 性杆菌存在明显差异，如菌丝、
孢子等结构。
培养特性
真菌与需氧革兰阳性杆菌在培养特 性上存在差异，如生长速度、菌落 形态等。
抗原结构
真菌与需氧革兰阳性杆菌的抗原结 构不同，可通过免疫学方法进行鉴 别。
与病毒的鉴别
大小形态
病毒的大小远小于需氧革兰阳性 杆菌，形态也不同。
临床常见病原菌检验—需氧G+球菌检验(微生物检验课件)
3、鉴定试验
（2）菌属内种鉴定试验：表3-8、表3-9 临床主要鉴定粪肠球菌、屎肠球菌。
第一节 葡萄球菌属
(Staphylococcus)
45种，21个亚种，最常见、最重要的致病菌是 金黄色葡萄球菌
一、生 物 学 性状
（一）形态与染色
G+，球形，无鞭毛、无芽孢， 固体培养基：呈葡萄串状排列 液体培养基：成单、成双或
短链状排列（链球菌）
（二）培养特性
金黄色葡萄球菌金黄色脂溶性色素
表皮葡萄球菌在普通琼 脂平皿上的白色色素
其他鉴定试验
报告
（三）检验方法
1、直接涂片
适用于：正常情况下无菌的标本（如脑脊液） 伴有炎症细胞的其他体液标本、脓液等
初步报告： “查见革兰阳性球菌,葡萄状排列，疑为
葡萄球菌”
2、分离培养
血液标本5ml
脑脊液、脓液、
穿刺液、咽拭、
50ml葡萄糖肉汤（增菌）
尿液
粪便、 呕吐物
无菌（7天）
浑浊
血平板
表皮葡萄球菌在血 平板上的白色色素
中等大小，圆形凸起，
不透明、有色、S型菌落。
葡萄球菌菌落形态 （普通琼脂平板）
液体：均匀浑浊生长
表皮葡萄球菌无 溶血环。
金黄色葡萄球菌 有透明溶血环。
耐盐：
10-15% g/L NaCl培养基中生长
选择性平板：
高盐甘露醇平板，致病菌可
分解甘露醇产酸使指示剂
呈淡黄色。
G-菌在此平板上不生长。
《需氧革兰阳性杆菌》课件
易感人群
人群普遍易感，尤其是儿 童、老年人、身体虚弱者 等免疫力较低的人群。
季节性流行
需氧革兰阳性杆菌感染的 流行具有一定的季节性， 冬季和春季为高发季节。
02
需氧革兰阳性杆菌的致病性
致病机制
黏附和侵入
需氧革兰阳性杆菌通过黏 附素与宿主细胞表面受体 结合，侵入细胞内繁殖， 引发感染。
大环内酯类
糖肽类
如红霉素、阿奇霉素等，对某些需氧革兰 阳性杆菌如链球菌属、肺炎球菌等有较好 的抗菌作用。
如万古霉素、替考拉宁等，主要用于耐甲 氧西林金黄色葡萄球菌等对其他抗菌药物 耐药的革兰阳性菌的治疗。
治疗方案
01
根据病原菌种类和药敏试验结果选择合适的抗菌药物，并根据 患者的病情制定个性化的治疗方案。
避免接触感染源
避免接触可能携带需氧革兰阳性杆菌的人群和动 物，特别是那些已经患病的人。
控制策略
及时隔离和治疗
一旦发现感染病例，应立即采取隔离和治疗措施，以防止疾病传 播。
加强环境清洁和消毒
对可能存在细菌的场所进行定期清洁和消毒，特别是医疗机构和公 共场所。
提高公众认识
通过宣传和教育，提高公众对需氧革兰阳性杆菌的认识和预防意识 。
需氧革兰阳性杆菌
目 录
• 需氧革兰阳性杆菌概述 • 需氧革兰阳性杆菌的致病性 • 需氧革兰阳性杆菌的治疗 • 需氧革兰阳性杆菌的预防和控制 • 需氧革兰阳性杆菌研究进展
01
需氧革兰阳性杆菌概述
定义与分类
定义
需氧革兰阳性杆菌是一类在需氧 环境下生长，通过革兰染色呈现 阳性的细菌。
分类
需氧革兰阳性杆菌主要包括链球 菌属、葡萄球菌属、微球菌属等 ，这些细菌在形态、染色反应、 培养特性等方面存在差异。
《需氧革兰阳性杆菌》PPT课件
检验方法
涂片染色：革兰阳性大杆菌、竹节状排列、 有明显荚膜和芽胞—初步报告
荚膜荧光抗体染色或荚膜肿胀试验 核酸性
培养基。 2%兔血清肉汤增菌→别离培养
鉴定试验
菌落特征 形态染色 生化试验:表13－1 串珠试验: 接种于含青霉素(0.05～0.5U/ml)
荚膜多肽抗原：抗吞噬，与毒力有关
芽胞抗原：
炭疽毒素Anthrax toxin： 由保护性抗原、 致死因子、水肿因子形成。
抵抗力
耐热、耐枯燥 对氧化剂敏感 对青霉素、磺胺类抗生素敏感
微生物学检查
标本的采集：分泌物、痰、血液、粪便、 呕吐物、脑脊液等，严禁宰杀解剖死蓄。
标本的处理：液体标本取沉渣别离培养； 固体标本用生理盐水浸泡，水浴杀死非 芽胞菌；血液、脏器、渗出液增菌或直 接别离培养
致病因子： – 荚膜：抗吞噬，有利于细菌在组织内繁殖扩散 – 炭疽毒素：保护性抗原、致死因子、水肿因子
病后可获得持久免疫力
炭疽芽胞杆菌
炭疽芽胞杆菌
革兰阳性大杆菌，两端截平，竹节状排列，有芽胞、 无鞭毛、可有毒株有荚膜，芽胞椭圆形，小于菌体， 位于菌体中央，多在有氧条件下形成，25～30℃，在 培养基中、土壤内、动物尸体解剖后暴露在空气中， 都易形成芽胞在活体或完整未解剖尸体内不形成芽胞， 尸体严禁解剖
形态：革兰阳性大杆菌、两端钝圆、 有芽胞、周鞭毛、无荚膜
培养特性：需氧或兼性厌氧，最适 温度30~35℃，营养要求不高。
普通琼脂平板：菌落较大，灰白 色，外表粗糙似毛玻璃状或融蜡状， 有蜡样光泽
BAP 有β溶血
卵黄平板—生长迅速，培养3h 后，虽看不到菌落，但该菌可分解 卵磷脂而形成白色的混浊环，称乳 光反响或卵黄反响
临床意义