基因工程(第二章答案)
基因工程习题+答案
第一章绪论名词解释：1.基因操作：将在细胞外产生的核酸（物质）分子插入到病毒，质粒或其它载体系统中，再整合到特定的宿主中，从而形成一种新的可连续繁殖的有机体。
2.间断基因：序列中间插入有与氨基酸编码无关的DNA间隔区，使一个基因分隔成不连续的若干区段。
我们称这种编码序列不连续的基因为间断基因。
3.启动子：DNA分子可以与RNA聚合酶特异结合的部位，也就是使转录开始的部位。
4.亚克隆：当初始克隆中的外源DNA片段较长，含有许多目的基因以外的DNA片段时，在诸如表达、序列分析和突变等操作中不便进行，将目的基因所对应的一小段DNA找出来，这个过程叫“亚克隆”。
填空题：1.基因操作的核心部分是基因克隆，基因克隆的基本要点有（克隆基因的类型），（受体的选择）和（载体的选择）。
2.（基因）是遗传物质的基本单位,也是作为遗传物质的核酸分子上的一段片段。
它可以是连续的，也可以是（不连续的）；可以是（DNA），也可以是RNA；可以存在于染色体上，也可以（存在于染色体之外如质粒、噬菌体）。
3.基因操作并不是一个法律概念，除了包括基因克隆外，还包括基因的（表达）、（调控）、（检测）和（改造）等与基因研究相关的内容。
4.启动子是指（基因转录过程中控制起始的部位）。
通常一个基因是否表达，（转录起始）是关键的一步，是起决定作用的。
在转录过程中，启动子还是（RNA聚合酶）的结合位点。
5.原核生物的RNA聚合酶主要由两部分组成：（核心酶）和（σ因子），其中σ-因子并不参与RNA的合成，它的作用主要是（识别要转录的起始位点）。
6.从（启动区）到（终止区）的这一段距离称为一个转录单位，或者一个转录产物，其中可包括一个或者多个基因。
7.转录终止子主要有两种，一种是（依赖ρ因子），另一种是（不依赖ρ因子）。
8.基因的书写方式，通常是写出的DNA序列总是与（mRNA）相同的那条链，方向是从（5'）到（3'）。
对于碱基的位置，一般自转录起始点向两个方向编号，其中转录起始点定为（+1），（在起始点上游第一个碱基）定为-1。
基因工程课后习题答案
2．质粒DNA和病毒（噬菌体）DNA作为载体的主要特征是什么为外源基因提供进入受体细胞的转移能力；为外源基因提供在受体细胞中的复制能力或整合能力；为外源基因提供在受体细胞中的扩增和表达能力；具有多种单一的核酸内切酶识别切割位点，具有合适的选择标记3．如何理解质粒的不相容性及其在DNA重组克隆过程中的运用意义质粒的不相容性：具有相同或相似复制子结构及调控模式的两种不同的质粒不能稳定存在于同一受体细胞内.4．列举表达质粒、穿梭质粒、探针质粒和cos质粒的不同用途表达质粒:在多克隆位点的上下游分别装有两套转录效率较高的启动子、合适的核糖体结合位点序列（SD）序列以及强有力的终止子结构，使得克隆在合适位点上的任何外源基因均能在受体细胞中高效表达。
穿梭质粒：质粒分子上含有两个亲缘关系不同的复制子以及相应的选择性标记，能在两种不同的受体细胞中复制并检测。
探针质粒：用来筛选克隆基因的表达调控元件。
通常含有报告基因，但缺少相应的调控序列（如启动子或终止子），只有含有启动子或终止子的调控序列被克隆进入载体后，报告基因才能别表达，表达量的大小直接反应了克隆进入的调控元件的强弱。
cos质粒：人工构建的含有λDNA的cos位点序列和质粒复制子的特殊类型的质粒载体。
具有大的装载量，可以用于构建基因组文库。
5． II类限制性核酸内切酶的主要酶学特征是什么分子量较小的单体蛋白，双链识别和切割活性仅需Mg2+，识别位点为4-6个bp的回文序列，切割位点在识别序列中或靠近识别序列7． KLenow酶与大肠杆菌DNA聚合酶I在结构和功能上的主要区别DNA聚合酶I包括大片段(klenow片段)和小片段功能上：DNA聚合酶I比klenow酶多了5’→3’核酸外切酶活性，两者都具有5’→3’DNA聚合酶活性和3’→5’核酸外切酶活性。
8．影响限制性核酸内切酶活性的主要因素有哪些？温度、盐度等物理因素，DNA样品纯度，DNA甲基化程度，限制性核酸内切酶的缓冲液性质，甘油和微量的金属离子会抑制限制性内切酶的活性9.如何理解粘性末端比平头末端更容易连接在退火条件下，粘性末端的连接为分子内反应，平头末端是分子间反应，平头末端的连接反应更加复杂，速度也慢。
分子生物学与基因工程智慧树知到课后章节答案2023年下鲁东大学
分子生物学与基因工程智慧树知到课后章节答案2023年下鲁东大学鲁东大学第一章测试1.分子生物学是研究生物体内分子结构及其相互作用规律的科学答案:错2.分子生物学的准备酝酿阶段人们只针对蛋白质进行了研究答案:错3.分子生物学所研究的生物大分子主要是指答案:核酸和蛋白质4.证明基因就是DNA的Avery是美国的答案:微生物学家5.在DNA分子结构研究中，下列哪位科学家被称为“第三人”答案:威尔金斯6.生物化学家是通过（）来破译遗传密码的答案:三联体-核糖体结合实验7.关于DNA复制机理的认识上，Meselson及Stahl用同位素标记和密度梯度离心技术证实了答案:DNA的半保留复制8.1961年Hall和Spiege-lman用RNA-DNA杂交证明mRNA与DNA序列互补这一研究说明了答案:转录与DNA有关9.中心法则中逆转录的完善是通过哪些科学家的贡献而实现的答案:Howard Temin;David Baltimore10.因遗传工程的奠基性工作而获得诺贝尔奖的是答案:Paul Berg第二章测试1.核酸分为两类,分别为DNA和RNA答案:对2.组成核酸的核糖和脱氧核糖的差别是前者2C位上连接的是一个羟基，后者只连一个H答案:对3.通过Ｔ和Ｕ的存在就可判断是ＤＮＡ还是RNA，组成DNA的碱基--是A、T、U、G，组成RNA的碱基是A、T、C、G 。
答案:错4.核酸是由多个核苷酸聚合而成的多聚核苷酸分子，相邻二个核苷酸之间的连接键是3'，5'-磷酸二酯键答案:对5.在高温下，双链DNA核酸变性，破坏的键是（）答案:氢键6.DNA分子少数是以单链形式存在，绝大多数是双链分子由碱基配对形成的氢键维持，碱基互补配对原则A/T,C/G。
答案:对7.Watson-Crick右手双螺旋结构是（）？答案:Ｂ构型8.DNA碱基对间的氢键也会断裂，双螺旋解开，空间结构破坏，这叫DNA的变异。
答案:错9.变性后的DNA都还具有复性功能，只要消除变性条件，二条互补链就会重新结合，恢复成原来的双螺旋结构。
基因工程习题及答案
第二章习题一、单选题1.在基因操作中所用的限制性核酸内切酶是指（ B ）A．I类限制酶 B. II类限制酶 C. III类限制酶 D.核酸内切酶E. RNAase2.下列关于同裂酶的叙述错误的是( B )A. 是从不同菌种分离到的不同的酶,也称异源同工酶。
B. 它们的识别序列完全相同。
C. 它们的切割方式可以相同，也可以不同。
D. 有些同裂酶识别的完整序列不完全一样，但切割位点间的序列一样。
E. 两种同裂酶的切割产物连接后，可能会丢失这两个同裂酶的识别位点。
3. 多数限制酶消化DNA的最佳温度是（ A ）A. 37℃B.30℃C.25℃D.16℃E.33℃4. 下列关于限制酶的叙述错误的是( B )A. I类限制酶反应需要 Mg2+、ATP和S-腺苷蛋氨酸。
B. II类限制酶反应需要Mg2+、ATP。
C. III类限制酶反应需要Mg2+、ATP，S-腺苷蛋氨酸能促进反应，但不是绝对需要。
D. I、III类限制酶对DNA有切割和甲基化活性，II类限制酶对DNA只有切割活性而无甲基化活性。
E. II类限制酶要求严格的识别序列和切割点，具有高度精确性。
5. 如果一个限制酶识别长度为6bp ,则其在DNA上识别6bp的切割概率为( D )A. 1/44B. 1/66C. 1/64D.1/46E. 1/1066. 多数II类限制酶反应最适PH是 ( C )A. PH:2-4B. PH:4-6C. PH:6-8D. PH:8-10E. PH:4-107. 下列关于限制酶反应的说法错误的是 ( D )A. 限制酶识别序列内或其邻近的胞嘧啶、腺嘌呤或尿嘧啶被甲基化后，可能会阻碍限制酶的酶解活性。
B. 许多限制酶对线性DNA和超螺旋DNA底物的切割活性是有明显差异的。
C. 有些限制酶对同一DNA底物上不同酶切位点的切割速率会有差异。
D. 限制酶反应缓冲系统一般不用磷酸缓冲液，是由于磷酸根会抑制限制酶反应。
E. BSA对许多限制酶的切割活性都有促进作用，所以酶切反应中常加入一定量的BSA。
第二章基因工程习题答案
基因工程课程习题选择题001 基因工程操作的三大基本元件是【Ａ】I 供体II 受体III 载体IV 抗体V 配体ＡI + II + IIIＢI + III + IVＣII + III + IVＤII + IV + VＥIII + IV + V002 根据当今生命科学理论，基因工程的用途是【E】I 分离纯化基因 II 大量生产生物分子 III 构建新型物种 IV 提高基因重组效率Ａ I + II + IIIＢ I + II + IVＣ I + III + IVＤ II + III + IVＥ I + II + III + IV003 根据基因工程的定义，下列各名词中不能替代基因工程的是【A】Ａ基因诱变Ｂ分子克隆Ｃ DNA重组Ｄ遗传工程Ｅ基因无性繁殖004 基因工程的单元操作顺序是【B】Ａ增，转，检，切，接Ｂ切，接，转，增，检Ｃ接，转，增，检，切Ｄ检，切，接，增，转Ｅ切，接，增，转，检005 下列有关基因的叙述，错误的是【A】Ａ蛋白质是基因表达的唯一产物Ｂ基因是 DNA 链上具有编码功能的片段Ｃ基因也可以是 RNAＤ基因突变不一定导致其表达产物改变结构Ｅ基因具有方向性006 限制性核酸内切酶是由细菌产生的，其生理意义是【D】Ａ修复自身的遗传缺陷Ｂ促进自身的基因重组Ｃ强化自身的核酸代谢Ｄ提高自身的防御能力Ｅ补充自身的核苷酸消耗007 天然 PstI 限制性内切酶的来源是【D】ＡBacillus amyloliquefaciensＢEscherichia coliＣHaemophilus influenzaeＤProvidencia stuartiiＥStreptomyces lividans008 T 4 -DNA 连接酶是通过形成磷酸二酯键将两段 DNA 片段连接在一起，其底物的关键基团是【D】Ａ 2' -OH 和 5' -PＢ 2' -OH 和 3' -PＣ 3' -OH 和 2' -PＤ 3' -OH 和 5' -PＥ 5' -OH 和 3' -P009若载体 DNA 用 M 酶切开，则下列五种带有 N 酶粘性末端的外源 DNA 片段中，能直接与载体拼接的是【D】M NＡ A/AGCTT T/TCGAAＢ C/CATGG ACATG/TＣ CCC/GGG G/GGCCCＤ G/GATCC A/GATCTＥ GAGCT/C G/AGCTC010下列有关质粒分子生物学的叙述，错误的是【B】Ａ质粒是共价环状的双链 DNA 分子Ｂ天然质粒一般不含有限制性内切酶的识别序列Ｃ质粒在宿主细胞内能独立于染色体 DNA 自主复制Ｄ松弛复制型的质粒可用氯霉素扩增Ｅ质粒并非其宿主细胞生长所必需011带有多个不同种复制起始区的质粒是【A】Ａ穿梭质粒Ｂ表达质粒Ｃ探针质粒Ｄ整合质粒Ｅ多拷贝质粒012 下列各常用载体的装载量排列顺序，正确的是【A】Ａ Cosmid > λ-DNA > PlasmidＢλ-DNA > Cosmid > PlasmidＣ Plasmid >λ-DNA > CosmidＤ Cosmid > Plasmid >λ-DNAＥλ-DNA > Plasmid > Cosmid013 目前在高等动物基因工程中广泛使用的载体是【C】Ａ质粒 DNAＢ噬菌体 DNAＣ病毒 DNAＤ线粒体 DNAＥ叶绿体 DNA014 若某质粒带有lacZ 标记基因，那么与之相匹配的筛选方法是在筛选培养基中加入【D】Ａ半乳糖Ｂ葡萄糖Ｃ蔗糖Ｄ5- 溴-4- 氯-3- 吲哚基- b -D- 半乳糖苷（X-gal ）Ｅ异丙基巯基- b - 半乳糖苷（IPTG ）015质粒是基因工程中最常用的运载体，它的主要特点是【C】①能自主复制②不能自主复制③结构很小④蛋白质⑤环状RNA ⑥环状DNA⑦能“友好”地“借居”A ①③⑤⑦B ②④⑥C ①③⑥⑦D ②③⑥⑦016 双脱氧末端终止法测定DNA 序列是基于【A】ＡDNA 的聚合反应ＢDNA 的连接反应ＣDNA 的降解反应Ｄ特殊的DNA 连接酶Ｅ聚合单体2' 和5' 位的脱氧017 下列三种方法中，能有效区分重组子与非重组子的是【E】I 限制性酶切II PCR 扩增III 抗药性筛选ＡIＢI + IIＣI + IIIＤII + IIIＥI + II + III018鸟枪法克隆目的基因的战略适用于【A】Ａ原核细菌Ｂ酵母菌Ｃ丝状真菌Ｄ植物Ｅ人类019 cDNA 第一链合成所需的引物是【D】ＡPoly AＢPoly CＣPoly GＤPoly TＥ发夹结构020 Taq DNA 聚合酶的发现使得PCR 技术的广泛运用成为可能，这是因为【D】ＡTaq DNA 聚合酶能有效地变性基因扩增产物ＢTaq DNA 聚合酶催化的聚和反应不需要引物ＣTaq DNA 聚合酶具有极强的聚和活性ＤTaq DNA 聚合酶能使多轮扩增反应连续化ＥTaq DNA 聚合酶能使扩增反应在DNA 变性条件下进行021 为了利用PCR 技术扩增下列染色体DNA 片段上的虚线部分，应选用的引物顺序是【D】ＡI + IIＢI + IIIＣI + IVＤII + IIIＥII + IV022 构建基因文库一般使用的载体是【E】I 质粒IIλ-DNA III CosmidＡIＢIIＣIIIＤII + IIIＥI + II + III023 强化基因转录的元件是【C】Ａ密码子Ｂ复制子Ｃ启动子Ｄ内含子Ｅ外显子024 启动子的特征之一是【B】ＡGC 富积区ＢTATA BoxＣ转录起始位点Ｄ长度平均1 kbＥ含有某些稀有碱基025 下列基因调控元件中属于反式调控元件的是【A】Ａ阻遏蛋白Ｂ启动子Ｃ操作子Ｄ终止子Ｅ增强子026包涵体是一种【E】Ａ受体细胞中难溶于水的蛋白颗粒Ｂ大肠杆菌的亚细胞结构Ｃ噬菌体或病毒DNA 的体外包装颗粒Ｄ用于转化动物细胞的脂质体Ｅ外源基因表达产物的混合物027 外源基因在大肠杆菌中以融合蛋白的形式表达的优点是【Ｅ】I 融合基因能稳定扩增II 融合蛋白能抗蛋白酶的降解III 表达产物易于亲和层析分离ＡIIIＢI + IIＣI + IIIＤII + IIIＥI + II + III028 第二代基因工程是指【C】Ａ途径工程Ｂ代谢工程Ｃ蛋白质工程ＤRNA 基因工程Ｅ细胞器基因工程029 基因工程菌中重组质粒的丢失机制是【Ｃ】Ａ重组质粒渗透至细胞外Ｂ重组质粒被细胞内核酸酶降解Ｃ重组质粒在细胞分裂时不均匀分配Ｄ重组质粒杀死受体细胞Ｅ重组质粒刺激受体细胞提高其通透性030利用毛细管作用原理，将凝胶电泳分离后的DNA片段转移至硝酸纤维素膜上并根据核酸杂交原理进行分析的技术是【Ｄ】ＡWestern 印迹转移技术ＢNorthern 印迹转移技术Ｃ基因的表现型分析法ＤSouthern 印迹转移技术031在翻译过程中．mRNA必需首先与核糖体相结合才能进行蛋白质合成。
基因工程考试 质粒的分子生物学与质粒载体
第二章 DNA重组克隆的单元操作练习题质粒的分子生物学与质粒载体（练习题）一、填空题1. 基因工程中有3 种主要类型的载体：、、。
2. 由于不同构型的DNA 插入EB 的量不同，它们在琼脂糖凝胶电泳中的迁移率也不同，SC DNA 的泳动速度，OC DNA 泳动速度，L DNA 居中，通过凝胶电泳和EB 染色的方法可将不同构型的DNA 分别开来。
3. 质粒的复制像染色体的复制一样，是从特定的起始点开始的。
然而，质粒的复制可以是向的、或是向的。
在杂种质粒中，每个复制子斑点都可以有效地加以使用。
但是在正常条件下只有一个起点可能居支配地位。
并认为：当某些具有低拷贝数的严紧型质粒与松弛性质粒融合后，在正常情况下的复制起点可能被关闭。
4. 就克隆一个基因(DNA 片段) 来说，最简单的质粒载体也必需包括三个部分：、、。
另外，一个理想的质粒载体必须具有低分子量。
5. 如果两个质粒不能稳定地共存于同一个寄主细胞中，则属于群，这是因为它们的所致。
6. 质粒拷贝数是指细胞中。
7. 复制子由三部分组成：(1) (2) (3) 。
8. 酵母的2μm 质粒有，可以配对形成哑铃结构。
9. 一个带有质粒的细菌在有EB 的培养液中培养一段时间后，一部分细胞中已测不出质粒，这种现象叫。
10. pBR322 是一种改造型的质粒，它的复制子来源于，它的四环素抗性基因来自于，它的氨苄青霉素抗性基因来自于。
11. 粒的消失同染色体基因的突变是不同的，前者不能恢复，后者可以通过恢复该基因的性状。
12. ColEl 质粒复制的起始需要三种酶，即、和。
13. YAC 的最大容载能力是，BAC 载体的最大容载能力是。
14. pSCl01 是一种复制的质粒。
15. 把那些没有可检测表型的质粒称为。
16. 转座子主要由下列部分组成：(1) (2) (3) 。
17. pUCl8 质粒是目前使用较为广泛的载体。
pUC 系列的载体是通过和两种质粒改造而来。
《基因工程》习题及参考答案
《基因工程》习题及参考答案一、习题：1. What are biotechnology and genetic engineering?2. What is a gene?3. What are genetically engineered medicines?4. What do genome research and human genetics deal with?5. What potentials are held out by genetic diagnosis?6. What options are given by gene therapy?7. What is an embryo - and what is a fetus?8 What is a genetic fingerprint?9 What does the term "therapeutic cloning" mean?10 What are stem cells?11 What is a transgenic organism?12 What does xenotransplantation mean?13 How will genetic engineering be used in agriculture?14 How are genetically modified organisms assessed?15 What does the German Embryo Protection Act regulate?16. What is a genome?17. Is there a risk of bioterrorism?18. How does genetic engineering affect the environment?19. Are genetically engineered crops good for farmers?20.What is the difference between restriction digestion and restriction mapping?21.Can you combine two different restriction enzymes in the same reaction tubes todigest the DNA molecules?22.Why should we need to generate restriction mapping data?23.How many restriction enzymes available now on the market?24.Why do you consider mutagenesis in vitro as one of the most critical techniquesfor us to understand in genetic engineering class?25.How do we choose the methods for DNA modification?26.How do we choose a gene expression system?27.How can we express eukaryotic gene in E.coli?28.What should we consider before we start the recombinant protein expressionexperiment?29.What is the advantage of yeast expression system?30.What is the advantage of insect expression system?31.Why there are so many different types of vectors available for cloning?32.What is the difference between cloning vector and expression vector?33.What is a genetic fingerprint?34. 基因具体分成多少种类？35. 什么叫印记基因？36．什么叫遗传漂变？37．人类基因组图谱和初步分析结果是在哪一年公布的？38．人类基因组共有多少基因?39. 克隆羊成功的技术关键是什么？40. 有人计划将两个不同物种的动植物体细胞进行融合，然后将融合体的核移植到其中一种生物的未受精卵细胞中，进行体细胞克隆。
《基因工程》各章内容及参考答案(42页).docx
复习题1 （包括分子生物学基础知识）（请各位同学将所有题目翻译成英文后再做!）一、解释下列名词1.Gene manipulation2.Promotor3.Cloning:4.Subcloning二、填空题：将下列各题空缺部分的答案填在后面的方框内，两者用“；”隔开。
1.基因操作（Gene manipulation）的核心部分是基因克隆（gene cloning）, gene cloning的基本要点有（），（）和（）。
2.（）是遗传物质的基木单位，也是作为遗传物质的核酸分子上的一段片段。
它可以是连续的，也可以是（）；可以是（），也可以是RNA；可以存在于染色体上，也可以（）3.基因操作并不是一个法律概念，除了包括基因克隆外，还包括基因的（）、（）、（）和（）等与基因研究相关的内容。
4.启动子（Promo（or）是指（）。
通常一个Gene是否表达，（）是关键的一步，是起决定作用的。
在转录过程屮，Promoter还是（）的结合位点。
5.原核生物的RNApolymerase主要由两部分组成：（）和（），其屮。
■因子并不参与RNA 的合成，它的作用主要是（）。
6.从（）到（）的这一段距离称为一个转录单位，或者一个转录产物，其屮可包括一个或者多个Gene。
7.转录终止子主要有两种，一种是（），另一种是（）。
8.重叠基因（Overlapping gene）是指（）,间隔基因（Interrupted gene）是指（）三、选择题：从备选答案中选出正确的结果，正确答案是唯一的。
四、简答题：1.简述基因克隆的两个基本特征？参考答案：基因克隆的两个基本特征是一是强调外源核酸分子（一般情况下都是DNA）在不同宿主屮的繁殖，打破自然种的界限将来自于不相关物种的基因放入一个宿主中是基因操作的一个重要特征，基因操作的另一个重要特征是繁殖。
2.什么是gene cloning ?什么是亚克隆（subcloning） ?参考答案：基因克降：一定程度上等同于基因的分离，即从复杂的生物体基因组中，经过酶切，消化等步骤，分离带有目的基因的DNA片段。
基因工程原理(山东联盟)智慧树知到答案章节测试2023年齐鲁工业大学
第一章测试1.1972年，P. Berg领导的研究小组在世界上第一次成功地实现了DNA体外重组。
( )A:对B:错答案:A2.基因工程诞生的意义毫不逊色于有史以来的任何一次技术革命。
( )A:对B:错答案:A3.基因工程受体只能是单个细胞，而不能是组织、器官、更不能是个体。
( )A:错B:对答案:A4.世界上第一例转基因植物是转基因烟草。
( )A:错B:对答案:B5.世界上第一个转基因动物是转基因小鼠。
( )A:对B:错答案:A第二章测试1.最早分离得到的限制性核酸内切酶是( )型限制性核酸内切酶。
A:ⅢB:ⅣC:ⅠD:Ⅱ答案:C2.分离得到的第一个Ⅱ型限制性核酸内切酶是( )。
A:EcoR IB:BamH ⅠC:Hind ⅡD:Hind Ⅲ答案:C3.进行不完全酶切消化时可采取的方法有( )。
A:增加反应体积B:缩短反应时间C:减少酶的用量D:降低反应温度答案:ABCD4.在大肠杆菌及其它细菌中，DNA连接酶催化的连接反应是利用NAD(或烟酰胺腺嘌呤二核苷酸)作能源。
在动物细胞及噬菌体中，则是利用ATP(或腺苷三磷酸)作能源。
A:对B:错答案:A5.选择在12℃~16℃之间用DNA连接酶进行黏性末端连接反应，是为了达到( )之间的平衡。
A:反应速率B:黏性末端的退火C:酶活性D:产物浓度答案:ABC第三章测试1.基因工程中的质粒载体必须包含哪些组成部分( )。
A:选择标记基因B:启动子序列C:酶切插入位点D:复制必需区答案:ACD2.第一个用于基因克隆的天然质粒是( )质粒。
A:pBR322B:pMB1C:pSC101D:pColE1答案:C3.在λ噬菌体裂解周期的早期，环状的λ DNA分子按( )方式进行复制A:γ型双向B:θ型单向C:θ型双向D:γ型单向答案:C4.在λ噬菌体裂解周期的晚期，环状的λ DNA分子按( )方式进行复制。
A:半保留复制B:γ型双向C:滚环D:θ型双向答案:C5.λ噬菌体头部外壳蛋白只能容纳相当于λ噬菌体基因组大小的( )比例的DNA分子。
基因工程原理练习题及其答案
基因工程复习题题型：名词解释（10个）30分；填空（每空1分） 20分；选择题（每题1分）10分；简答题（4个）20分；论述题（2个）20分。
第一章绪论1.名词解释：基因工程：按照预先设计好的蓝图，利用现代分子生物学技术，特别是酶学技术，对遗传物质DNA直接进行体外重组操作与改造，将一种生物（供体）的基因转移到另外一种生物（受体）中去，从而实现受体生物的定向改造与改良。
遗传工程广义：指以改变生物有机体性状为目标，采用类似工程技术手段而进行的对遗传物质的操作，以改良品质或创造新品种。
包括细胞工程、染色体工程、细胞器工程和基因工程等不同的技术层次。
狭义：基因工程。
克隆：无性(繁殖)系或纯系。
指由同个祖先经过无性繁殖方式得到的一群由遗传上同一的DNA分子、细胞或个体组成的特殊生命群体。
2．什么是基因克隆及基本要点?3.举例说明基因工程发展过程中的三个重大事件。
A) 限制性内切酶和DNA连接酶的发现（标志着DNA重组时代的开始）；B) 载体的使用；C) 1970年，逆转录酶及抗性标记的发现。
4.基因工程研究的主要内容是什么？基础研究：基因工程克隆载体的研究基因工程受体系统的研究目的基因的研究基因工程工具酶的研究基因工程新技术的研究应用研究：基因工程药物研究转基因动植物的研究在食品、化学、能源和环境保护等方面的应用研究第二章基因克隆的工具酶1.名词解释：限制性核酸内切酶：一类能识别双链DNA中特殊核苷酸序列，并使每条链的一个磷酸二酯键断开的内脱氧核糖核酸酶。
回文结构：双链DNA中的一段倒置重复序列，当该序列的双链被打开后，可形成发夹结构。
同尾酶：来源不同、识别序列不同，但产生相同粘性末端的酶。
同裂酶：不同来源的限制酶可切割同一靶序列和具有相同的识别序列黏性末端：DNA末端一条链突出的几个核苷酸能与另一个具有突出单链的DNA末端通过互补配对粘合，这样的DNA末端，称为粘性末端。
平末端：DNA片段的末端是平齐的。
基因工程智慧树知到答案章节测试2023年山东师范大学
第一章测试1.基因是存在于DNA上的核苷酸序列，具有特定的结构、功能以及遗传特征。
（）A:对B:错答案:A2.1944年Avery首次证实了（）是遗传物质。
A:蛋白质B:糖类C:DNAD:脂类答案:C3.Hind Ⅲ是第一个分离到的限制性核酸内切酶。
（）A:错B:对答案:A4.基因组工程的主要优势是能修改一个特定区域的DNA,从而增加了校正或外源基因插入的精度，重现性好，将成为今后基因工程主要的发展方向。
（）A:对B:错答案:B5.基因工程具有（）特征。
A:可在不同物种之间转移基因B:载体起着重要作用C:中心法则是必需遵守的准则D:真核生物基因可在大肠杆菌中表达答案:ABCD第二章测试1.DNA链的Tm值主要取决于核酸分子的（）A:T－C含量B:A－T含量C:G－C含量D:A－G含量答案:C2.用CTAB方法提取植物基因组DNA 时，使用PVP(聚乙烯吡咯烷酮)与多酚结合形成复合物，从而可有效防止DNA降解。
（）A:对B:错答案:B3.在Southern印迹中常用的核酸变性剂是( )A:氢氧化钠B:盐酸C:乙醛D:甲醛答案:A4.具有碱基互补区域的单链又可以重新结合形成双链，这一过程称（）A:复杂性B:复性C:变性D:杂交答案:B5.用碱法分离质粒 DNA时，染色体 DNA之所以可以被除去，是因为：( )A:染色体变性后来不及复性B:染色体未同蛋白质分开而沉淀C:染色体 DNA分子量大，而不能释放D:染色体 DNA断成了碎片答案:A第三章测试1.下列( )酶作用时需要引物?A:末端转移酶B:限制酶C:反转录酶D:DNA连接酶答案:C2.Ⅱ型限制性内切核酸酶具有（）特征。
A:有核酸内切酶和甲基化酶活性,且经常识别回文序列B:有外切核酸酶和甲基化酶活性C:仅有外切核酸酶活性，甲基化酶活性由另外一种酶提供D:仅有内切核酸酶活性，甲基化酶活性由另外一种酶提供答案:D3.末端脱氧核苷酸转移酶是合成酶类，( )。
基因工程原理智慧树知到课后章节答案2023年下宁波大学
基因工程原理智慧树知到课后章节答案2023年下宁波大学宁波大学第一章测试1.从广义上来说，转基因生物可以是基因的“转入”，也可以是基因的“转出”。
（）A:对 B:错答案:对2.基因工程技术诞生的标志通常认为是（）。
A:第一个基因工程药物，生长激素抑制素，的成功生产和上市。
B:限制性核酸内切酶的发现。
C:Berg教授首次成功构建SV40和DNA的重组分子。
D:Cohen教授第一次获得既抗卡那霉素又抗四环素的双重抗性特性的大肠杆菌转化子菌落。
答案:Cohen教授第一次获得既抗卡那霉素又抗四环素的双重抗性特性的大肠杆菌转化子菌落。
3.辨别转基因作物应该根据它们的（）。
A:形状B:颜色C:转入基因所展现的性状D:产量答案:转入基因所展现的性状4.基因工程技术的诞生得益于技术上的几大发明，它们包括：（）。
A:限制性核酸内切酶、DNA连接酶等工具酶的发现。
B:逆转录酶的发现。
C:胚胎干细胞技术的发展。
D:载体DNA分子的获得。
答案:限制性核酸内切酶、DNA连接酶等工具酶的发现。
;逆转录酶的发现。
;载体DNA分子的获得。
5.基因工程的基本流程包括为（）。
A:外源目的基因的表达。
B:重组DNA分子导入受体细胞以及阳性克隆的筛选。
C:核酸分子杂交和DNA测序。
D:目的基因的分离、获取以及重组载体的构建。
答案:外源目的基因的表达。
;重组DNA分子导入受体细胞以及阳性克隆的筛选。
;目的基因的分离、获取以及重组载体的构建。
第二章测试1.基因是遗传的基本单位、突变单位和控制性状的功能单位，是DNA分子中一段编码蛋白质的核苷酸序列。
（）A:对 B:错答案:错2.结构基因转录区的基本结构组成依次为（）。
A:启动子、ORF和3‘-UTR。
B:启动子、5’-UTR和ORF。
C:5’-UTR、ORF和3‘-UTR。
D:启动子、上游启动元件和增强子。
答案:5’-UTR、ORF和3‘-UTR。
3.原核生物的终止子为（）。
A:寡聚U形成的发夹结构。
基因工程原理作业及答案
基因工程原理作业及答案第一章绪论1、请谈谈它的基本步骤？①源DNA 片段与载体连接论和技术两个方面谈谈础？稳定地繁殖。
理论基础：①在40因的分子载体是DNA 传的物质基础问题；②在50递的问题；③在50技术基础：①60年代-70接酶解决了对DNA ④60移杂交技术对DNA 3、基因克隆、基因操作、基因重组、基因工程的概念及其相互联系。
基因克隆（Genecloning）：是指对基因进行分离和扩大繁殖等操作过程，其目的在于获得大量的基因拷贝，在技术上主要包括载体构建、大肠杆菌遗传转化、重组子筛选和扩大繁殖等环节。
基因工程：是通过基因操作，将目的基因或DNA 片段与合适的载体连接转入目标生物细胞，通过复制、转录、翻译外源目的基因以及蛋白质的活性表达，使转基因生物获得新的遗传性状的操作。
基因操作：对基因进行分离、分析、改造、检测、表达、重组和转移等操作的总称。
基因重组：不同来源DNA 分子通过共价连接（磷酸二酯键）而组合成新的DNA 分子的过程。
2、哪些酶可用于DNA 片段的末端标记？Klenow DNA 聚合酶和T4或T7DNA 聚合酶在对DNA 片段进行末端补平反应或末端的置换反应时可引入标记的核苷酸。
3、DNA 聚合酶有哪些类型，各有什么活性？① E.coliDNApolI：5’-3’DNA 聚合酶活性；5’-3’DNA 外切酶活性；3’-5’DNA 外切酶活性。
心相印图文工作室整理luqiu910② E.coliDNApolI大片段（Klenow酶）：5′→3′DNA聚合酶活性；3′→5′DNA外切酶活性；5’-3’DNA外切酶活性。
③T4噬菌体DNApol：5′→3′DNA聚合酶活性（与Ｋlenow酶相似）；3′→5′外切酶活性（Ｋlenow酶×200）：在无dNTP时只有该活性。
（常用于填平dsDNA的3′缩进末端及水解dsDNA的3′突出末端。
）④T7噬菌体DNApol酶活性;1000）。
基因工程智慧树知到课后章节答案2023年下济宁学院
基因工程智慧树知到课后章节答案2023年下济宁学院济宁学院第一章测试1.基因工程操作的四个必要条件是（）①供体② 受体③ 载体④ 抗体⑤ 配体⑥工具酶A:②③④⑤B:①②③⑥C:①③④⑥D:②④⑤⑥答案:①②③⑥2.采用原核细胞表达系统的优点之一是可以与下面什么过程直接相连（）A:发酵工程B:转基因动物C:基因治疗D:转基因植物答案:发酵工程3.外源基因(或DNA片段)插入到某一基因内的位点后，这个基因不再有任何功能。
（）A:对 B:错答案:错4.基因治疗的载体采用下列哪种载体比较合适？（）A:逆转录病毒B:Ti 质粒C:噬菌体D:质粒 pBR322答案:逆转录病毒5.就像对培养中的鼠胚性干细胞进行遗传操作获得突变鼠一样，用DNA转染培养中的单个植物细胞，能够创造转基因植物。
（）A:对 B:错答案:对第二章测试1.提取天然DNA时关系到能否提取到DNA以及DNA得率高低和质量的关键步骤是（）A:裂解细胞B:分离和抽提DNAC:准备生物材料D:DNA纯化与检测分析答案:裂解细胞2.关于碱解法分离质粒DNA，下面说法正确的是（）A:溶液Ⅱ的作用是使DNA变性B:质粒DNA分子小，所以没有变性，染色体变性后不能复性C:溶液l的作用是悬浮菌体D:溶液Ⅲ的作用是使DNA复性答案:溶液Ⅱ的作用是使DNA变性;溶液l的作用是悬浮菌体;溶液Ⅲ的作用是使DNA复性3.用碱法分离质粒DNA时，染色体DNA之所以可以被除去，主要是因为（）A:染色体DNA分子量大，而不能释放B:染色体变性后来不及复性C:染色体DNA断成了碎片D:染色体未同蛋白质分开而沉淀答案:染色体变性后来不及复性4.从细胞或组织中分离DNA时，常用蔗糖溶液，目的是（）A:抑制核酸酶的活性B:加速蛋白质变性C:有利于细胞破碎D:保护DNA，防止断裂答案:保护DNA，防止断裂5.碱法和煮沸法分离质粒DNA的原理是不相同的。
（）A:对 B:错答案:错第三章测试1.Ⅱ型限制性内切核酸酶（）A:限制性识别非甲基化的核苷酸序列B:仅有内切核酸酶活性，甲基化酶活性由另外一种酶提供C:有外切核酸酶和甲基化酶活性D:有内切核酸酶和甲基化酶活性且经常识别回文序列答案:仅有内切核酸酶活性，甲基化酶活性由另外一种酶提供2.迄今所发现的限制性内切核酸酶既能作用于双链DNA，又能作用于单链DNA。
基因工程 考试 重点 噬菌体载体
第二章 DNA重组克隆的单元操作练习题噬菌体载体(练习题)一、填空题1．噬菌体之所以被选为基因工程载体，主要有两方面的原因：一是；二是。
2．第一个报道的全测序的单链DNA 噬菌体是φX174，DNA 长5386 个碱基对，共个基因，为一环状DNA 分子，基因组的最大特点是。
3．λ噬菌体的基因组DNA 为kb，有多个基因。
在体内，它有两种复制方式，扩增时(早期复制)按复制，成熟包装(晚期复制)则是按复制。
它有一个复制起点，进行向复制。
λ噬菌体的DNA 既可以以线性存在又可以环状形式存在，并且能够自然成环。
其原因主要是在λ噬菌体线性DNA 分子的两端各有一个个碱基组成的天然黏性末端。
这种黏性末端可以自然成环。
成环后的黏性末端部位就叫做位点。
4．根据噬菌体的包装能力，将野生型λ噬菌体的基因组DNA 改造成插入型载体，该载体的最小分子大小约为kb，插入的外源片段最大不超过kb。
5．野生型的M13 不适合用作基因工程载体，主要原因是和。
6．黏粒(cosmid)是质粒—噬菌体杂合载体，它的复制子来自、COS 位点序列来自，最大的克隆片段达到kb。
7．有两类改造型的λ噬菌体载体，即插入型和取代型。
从酶切点看，插入型为个，取代型为个。
8．野生型的丸噬菌体DNA 不宜作为基因工程载体，原因是：(1) (2) (3) 。
9．M13 单链噬菌体的复制分为三个阶段：(1) (2) (3) 。
10．噬菌粒是由质粒和噬菌体DNA 共同构成的，其中来自质粒的主要结构是，而来自噬菌体的主要结构是。
11 ．M13 单链噬菌体基因2 和基因4 之间的IG 区有三个最重要的功能，即(1)(2) (3) 。
12．野生型的M13 有10 个基因，分为三个功能集团，其中与复制有关的两个基因是：和。
13．以λ噬菌体载体和黏粒载体构建文库时，起始DNA 的长度是不同的，前者为kb，后者为kb。
14．λ噬菌体载体由于受到包装的限制，插入外源DNA 片段后，总的长度应在噬菌体基因组的的范围内。
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第二章基因工程工具酶一、解释下列名词1.Restriction and modification（限制与修饰）宿主特异性地降解外源遗传物质（DNA）的现象称为限制。
外源遗传物质通过甲基化等作用避免宿主的限制作用称为修饰。
2. Matched ends(or cohesive end)（匹配末端或粘性末端）识别位点为回文对称结构的序列，经限制酶切割后，产生的相同的，互补的末端称为匹配粘端，亦即粘性末端3. Blunt ends平末端。
在回文对称轴上同时切割DNA 的两条链，产生的没有碱基突出的末端称为平末端。
4. Star activity星星活性。
在极端非标准条件下，限制酶能切割与识别序列相似的序列，这个改变的特殊性称星星活性。
5. Klenow fragment Klenow 片段。
Klenow DNA 聚合酶是E.coli DNA polymerase 经蛋白酶（枯草杆菌蛋白酶）裂解而从全酶中除去5'--3' 外切活性的多肽大片段，而聚合活性和3'--5' 外切活性不受影响。
6.Reverse transcriptase反转录酶。
即依赖于RNA 的DNA 聚合酶，它有5'--3' 合成DNA 活性，但是无3'--5' 外切活性。
7.Terminal transferase（末端转移酶）8.Ligase连接酶。
催化DNA 5' 磷酸基与3' 羟基之间形成磷酸二酯键，将两段核酸连接起来的酶。
9.T4 polynucleotide kinase（T4多聚核苷酸激酶）催化ATP 的γ-磷酸基转移至DNA 或RNA 的5' 末端。
10.Alkaline phosphatase（碱性磷酸酶）催化除去DNA 或RNA 5' 磷酸11.S1 nuclease Sl 核酸酶。
可降解单链DNA 或RNA ，产生带5' 磷酸的单核苷酸或寡核苷酸双链；对dsDNA ，dsRNA ，DNA:RNA 杂交体不敏感。
二、填空题1.限制性内切核酸酶（Restriction endonuclease）的命名是按属名和种名相结合的原则的，通常第一个大写字母取自（属名的第一个字母），第二、三个字母取自（种名的前两个字母），第四个字母则用（菌株名）表示。
2.Ⅱ型限制酶识别回文对称序列，在回文序列（内部）或（附近）切割DNA，产生带3'－OH和5'－P基团的DNA的产物，需（Mg2＋）的存在才能发挥活性，相应的修饰酶只需SAM。
3. 识别相同序列的限制酶称（同裂酶）4.DNA载体经HindⅢ切割后产生粘性末端，能发生载体自连，影响载体与外源DNA的连接效率，常用的防止载体自连的方法有（去磷酸化）、（部分补平）。
5.完全的回文序列应具备两个特点即（能够在中间划一个对称轴，两侧的序列两两对称互补配对）和（两条互补链的5'--3' 的序列组成相同，即将一条链旋转180°，则两条链重叠）。
6.限制性内切核酸酶（Restriction endonuclease）通常保存在（50%）浓度的甘油溶液中。
7.载体和外源DNA经酶切，在进行下一步操作前，需消除限制性内切核酸酶（Restriction endonuclease）的影响。
常用的方法有（EDTA 法）、（加热法）、（苯酚抽提法）、（试剂盒除酶法）。
8.对DNA进行双酶切时，酶切缓冲液的选择原则有(1)（）、(2)（）、(3)（）9. Klenow DNA聚合酶是E.coli DNA polymerase经蛋白酶裂解而从全酶中除去( ) 活性的多肽大片断，而其他活性保持不变。
10. E.coli DNA连接酶与T4 DNA连接酶相似，但需（）的参与。
11. T4多核苷酸激酶在高浓度的ATP时发挥最佳活性，（）是其强烈抑制剂。
三、选择题：从备选答案中选出正确的结果，正确答案是唯一的。
1.限制性内切酶一般保存在（C）浓度的甘油溶液中。
A 10%B 20%C 50%D 60%2.迄今为止所发现的限制性内切核酸酶（C）A. 既可以作用于双链DNA，又可以作用于单链DNAB. 只能作用于单链DNAC. 只能作用于双链DNAD. 只能作用于RNA3.已知某一内切酶在一个环状DNA上有4个切点，当用此酶切割该环状DNA，可以得到（B）个片段A. 3B.4C.5D. 64.甘油会使许多限制性内切核酸酶的特异性发生改变，是导致一些酶星星活性的主要原因之一，防止的办法是在酶切反应体系中，将甘油的浓度控制在（A）以下A. 5%B. 10%C. 20%D. 30%5.在下列进行DNA部分酶切的条件中，控制哪一项最好（D）A. 反应体积错误！未找到引用源。
B. 酶反应温度C. 反应时间D.酶量6.下列试剂中，哪一种可以螯合Ca2＋离子（）A. EDTAB. 柠檬酸钠C. SDSD. EGTA7.DNA被某种酶切割后，电泳得到的电泳带有些扩散，下列原因中，哪一项不太可能（C）A. 蛋白质（如BSA）同DNA结合B. 有外切核酸酶污染C. 酶失活D. 酶切条件不适合8. nick与gap的区别在于（A）A. 前者是断开了一个磷酸二酯键，后者是指DNA的单链中有较小的缺失B. 前者是是指DNA的单链中有较小的缺失，后者是指断开了一个磷酸二酯键C. 二者无本质区别D. 前者无法回复，后者可9.Klenow 酶与DNA聚合酶相比，前者丧失了（）活性A. 5'--3'外切酶B. 5'--3'合成酶C. 转移酶D. 3'--5'外切酶10.限制酶的命名遵循一定的原则，涉及来源（宿主），菌株或生物型。
命名时（A）A. 属名第一字母，种名头两个字母，菌株号，然后再加上序号（罗马字）B. 种名第一字母，属名头两个字母，菌株号，然后再加上序号（罗马字）C. 属名第一字母，亚种名头两个字母，菌株号，然后再加上序号（罗马字）D. 种名第一字母，亚种名头两个字母，菌株号，然后再加上序号（罗马字）11.以下对同裂酶的描述中，哪一项是正确的（A）A. 识别相同序列的限制酶称同裂酶B. 可以产生相同的粘性突出末端的限制酶称同裂酶C. 同裂酶的切割位点一定相同D. 同裂酶的切割位点不相同12 .BAP与CIAP的区别在于（）A. BAP 68℃时失活，而CIAP 68℃稳定B. CIAP 68℃时失活，而BAP 68℃稳定C. 二者均耐酚抽D. 二者均不耐酚抽13.下列哪一种酶作用时需要引物（B）A. 末端转移酶B. 反转录酶C. DNA连接酶D. 限制酶14.限制性内切核酸酶可以特异性地识别（C）A. 特定的三联密码B. 双链DNA的特定碱基对C. 双链DNA的特定碱基序列D. 单链DNA的特定碱基序列15.DNA连接酶在体内的主要作用是在DNA复制、修复中封闭缺口，下列对DNA连接酶的描述中，那项是正确的（A）A. 将双链DNA分子中的5'磷酸基团同3'－OH末端重新形成磷酸二酯键B. 作用时不消耗能量C. 需要Mn2+等二价辅助离子D. 也可以是RNA分子16.下列酶中，除（）外都具有磷酸酶的活性A. BamHⅠB. CIAPC. 单核苷酸激酶D. BAP四、简答题1.简述限制性内切核酸酶（Restriction endonuclease）的概念及其生物学功能？定义：指识别DNA 的特异序列，并在识别位点或其周围切割双链DNA 的一类内切酶。
生物学功能：保护宿主不受外来DNA 分子的感染，可降解外来的DNA 分子，从而阻止其复制和整合到细胞中2.PCR引物设计引入酶切位点时，为什么需在酶切位点后加上一些碱基？限制酶切割DNA 时对识别序列两端的非识别序列有长度要求，也就是说在识别序列两端必须要有一定数量的核苷酸，否则限制酶将难以发挥切割活性。
因此，一般需在设计引物时在限制酶切位点外另加3～4 个碱基。
3.试回答影响限制性内切核酸酶（Restriction endonuclease）切割效率的因素？外因：反应条件、底物纯度、反应温度和限制性内切酶本身的活性；内因：位点偏爱性；甲基化；底物的构象。
4.在酶切缓冲液中，一般需加入BSA，请问加入BSA的作用是什么？并简述其原理？5.何谓Star activity？简述Star activity的影响因素及克服方法？在极端非标准条件下，限制酶能切割与识别序列相似的序列，这个改变的特征称为星星活性。
引起星星活性的的因素：①高甘油浓度（>5%）；②酶过量（>100U/ml）；③低离子强度（<25mM）；④高pH (>8.0)；⑤有机溶剂如PMSD （二甲基亚砜）、乙醇、乙二醇、二甲基乙酰胺（dimethylacetamide）、二甲基甲酰胺（dimethylformamide）和sulphalane 等；⑥用其它二价阳离子Mn2+、Cu2+、Co2+ 或Zn2+ 代替Mg2+ 。
星星活性的抑制措施：①减少酶的用量，避免过量酶切，减少甘油浓度；②保证反应体系中无有机溶剂或乙醇；③提高离子强度到100～150mM （在不抑制酶活性的前提下）；④降低反应pH 至7.0 ；⑤使用Mg2+ 作为二价阳离子。
6.某DNA序列中存在DpnI酶切位点，以此DNA为模板，在体外合成DNA序列，当用该酶进行酶切时，发现切割不动，试分析可能原因？生物体内的DNA 序列可能是经过甲基化修饰的，而在体外合成时，缺乏这种修饰作用。
当用依赖于甲基化的限制酶DpnI 来切割非甲基化的序列时，就会出现不能切割的情况。
7.天然的质粒载体（plasmid vectors）通常需经改造后才能应用，包括去除不必要的片段，引入多克隆位点等。
试问在此过程中如何增减酶切位点？在酶切水平上，通过酶切和连接产生新的酶切位点。
①将产生的5' 突出端补平后，再连接以产生新的酶切位点；②同尾末端的连接，不同的同尾酶切割DNA 产生的末端，再相互连接时，可产生新的酶切位点，同时原来的酶切位点却消失；③平末端的连接8.大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ，具有3'--5’外切活性和5'--3'的聚合酶活性以及5'--3'的外切活性，试根据此推测该聚合酶可能具有哪些用途?9.BAP和CIAP有何作用？为何一般采用CIAP而不采用BAP？10.依赖于DNA的RNA聚合酶包括SP6噬菌体RNA聚合酶和T4或T7噬菌体RNA聚合酶，这类聚合酶可用于表达外源基因，阐述常用的构建策略？①将T7 RNA 聚合酶基因置于 E.coli lacUV5 启动子之下，插入到λ噬菌体中，感染E.coli ，建立稳定的溶源菌。