胰液分泌的神经体液调节

胰液分泌的神经体液调节

[实验目的]

了解神经、激素对胰液分泌的调控。

[实验原理]

胰液的分泌受神经和体液两种因素的调节。与神经调节相比较，体液调节更为重要。在稀盐酸和蛋白质分解产物及脂肪的刺激作用下，十二指肠粘膜可以产生胰泌素。胰泌素主要作用于胰腺导管的上皮细胞，引起水和碳酸盐的分泌。

[实验对象]

狗

[实验药品]

3%戊巴比妥钠、稀醋酸、0.5% HCl溶液、粗制胰泌素※10 m1。

[仪器与器械]

计算机生物信号采集处理系统（或二道生理记录仪、电子刺激器）、计滴器、保护电极、狗手术台、常用手术器械、注射器及针头、各种粗细的塑料管（或玻璃套管）、纱布、丝线、秒表。

[方法及步骤]

(1)手术操作

2.胰液与胆汁的分泌

（1）收集胰液的方法

①胰管插管从十二指肠末端找出胰尾，沿胰尾向上将附着于十二指肠的胰液组织用盐水纱布轻轻剥离，约在尾部向上2～3 cm处可看到一个白色小管从胰腺穿入十二指肠，此为胰主导管。待认定胰主导管后，分离胰主导管并在下方穿线，尽量在靠近十二指肠处切开，插入胰管插管，并结扎固定。

④股静脉插管以备输液与注射药物时之用。

（2）连接记录装置

①二道生理记录仪将充满生理盐水的乳胶管分别接到胆管插管和胰管插管上；而后分别连接到两个受滴换能器上，以记录滴数(若胰液分泌量较少时，可将胰管插管连接到毛细玻璃管记录装置上，调节液面至0刻度)。

②计算机生物信号分析处理系统打开计算机，启动生物信号分析处理系统，选择"影响尿生成因素"的模块。将两个受滴换能器连接到计算机上，即可开始实验。

（3）实验项目

①观察胰液和胆汁的基础分泌: 未给予任何刺激情况下纪录每分钟分泌的滴数。胆汁为不间断地少量分泌,而胰液分泌极少或不分泌。

②酸化十二指肠的作用：将十二指肠上端和空肠上段的两端用粗棉线扎紧，而后向十二指肠腔内注入37℃的0.5% HCl 25～40 ml，记录潜伏期，观察胰液和胆汁分泌有何变化（观察时间约10～20 min）。

③股静脉注射粗制胰泌素5～10 ml，记录潜伏期，观察胰液和胆汁的分泌量有何变化。

④股静脉注射胆囊胆汁l ml(胆囊胆汁稀释10倍)，观察胰液和胆汁的变化。

[注意事项]

1.术前应充分熟悉手术部位的解剖结构。

2.手术操作应细心，尽量防止出血，若遇大量出血须完全止血后再行分离手术。

3.电刺激强度要适中，不宜过强。

4.胆囊管要结扎紧，使胆汁的分泌量不受胆囊舒缩的影响。

5.剥离胰液管时要小心谨慎，操作时应轻巧仔细。

6.实验前2～3 h给动物少量喂食，用以提高胰液和胆汁的分泌量。

[实验结果]

剪贴实验记录，做好标记和注释。从对各项结果进行分析讨论中，总结唾液、胰液和胆汁分泌的神经-体液调节特征。

[附]

※ 1.促胰液素粗制品的制备方法将急性动物实验用过的狗，从十二指肠首端开始取70 cm 小肠，将小肠冲洗干净，纵向剪开，用刀柄刮取小肠粘膜放入研钵，加入10～15 m1 0.5%盐酸研磨，将研磨液倒入烧杯中，加入0.5%盐酸100～150 ml，煮沸10～15 min。然后，用10%～20% NaOH趁热中和(用石蕊试纸检查)至中性，用滤纸趁热过滤，即可得到促胰液素的粗制品，将其在低温下保存。

2.迷走神经变性法：

刺激迷走神经可引起胰液和胆汁分泌，但迷走神经中的运动神经纤维发放冲动可使心跳抑制、胰导管收缩，难以观察到胰液流出，故需要将迷走神经的运动纤维变性，而保留传入纤维（传入纤维的变性时间较长）。

使迷走神经变性的方法是：将狗浅麻，无菌操作剖开颈部皮肤，游离一段迷走神经并做双结扎，从中间剪断，将向中端的线头剪短弃去。离中端的线头用缝针引导穿出皮肤，并縛于一小纱布卷固定之，此段神经就被移至皮下，对神经下的肌肉做间断性缝合，再将被切开的皮肤缝合。经过4～5天后，迷走神经的运动纤维便变性，而分泌纤维尚未变性，刺激此变性的迷走神经，将只会出现其分泌效应。实验时拆去皮肤缝线，就暴露出此变性的迷走神经。