21 革兰氏阳性形成芽孢的细菌
炭疽芽孢杆菌
炭疽芽孢杆菌
通化市中心医院感染科 张利环
什么是芽孢杆菌属？ • 芽孢杆菌属有212个种和亚种，是一群需氧、能形成芽孢的革兰氏阳性
大杆菌。包括：枯草芽孢杆菌属、蜡样芽孢杆菌和炭疽芽孢杆菌。
• 炭疽芽孢杆菌，俗称炭疽杆菌，它是人类历史上第一个被发现的病原菌。
• 炭疽其名字来源于希腊词“anthrakos”,因其形成一种特征性的皮肤炭样 焦痂而得名。
蕈状杆菌、嗜热杆菌等），主要有串珠湿片法、特异性荧光抗体（抗菌体、 抗荚膜、抗芽胞、抗噬菌体等）染色法，W噬菌体裂解试验、碳酸氢钠琼 脂平板CO2培养法、青霉素抑制试验、动物致病试验、荚膜肿胀试验、动 力试验、溶血试验、水杨酸苷发酵试验等。
• 6.免疫学试验：有间接血凝法，ELISA（酶联免疫吸附实验）法、酶标SPA法、荧光免疫法等，用以检测血清中的各种抗体，特别是荚膜抗体及 血清抗毒性抗体，一般用于回顾性诊断和流行病学调查之用。阿斯可里沉 淀试验，对已腐败或干涸的标本，作细菌培养有困难时可采用本试验。
血、呕吐、毒血症、感染性休克、DIC（弥散性血管内凝血）等。
致病性和免疫性 • （三）免疫性 • 感染炭疽芽孢杆菌后可获得持续免疫力。 • 一般认为与机体针对炭疽毒素保护性抗原产生的保护性抗体及吞噬功能增
强有关。
环境工程微生物单选题
单项选择题：1．活性污泥中，与污泥活性关系最密切的微生物类群是（）。
A．菌胶团细菌B．放线菌C．原生动物D．藻类2．好氧活性污泥在完全混合式的曝气池内总以（）存在。
A．沉淀状态B．漂浮状态C．悬浮状态D．固着状态3．构成活性污泥的主要微生物是（），在水处理中起主要作用。
A．藻类B．后生动物C．细菌D．放线菌4．1L活性污泥混合液中含有多少mg恒重、干的挥发性固体，即混合液挥发性悬浮固体，用（）表示。
A．MLSSB．MLVSSC．SVD．SVI5．当活性污泥的pH值降低到4．5以下时，（）将完全占优势。
A．菌胶团细菌B．真菌C．原生动物D．藻类6．有关原生动物在水处理中的作用，下列说法错误的是（）。
A．有净化废水中有机物的功能B．可以促进活性污泥的絮凝作用C．可以作为废水生物处理的指示生物D．当水处理效果好时，活性污泥中的原生动物以游泳型纤毛虫为主7．厌氧过程中，下列何种微生物将有机大分子转变为有机酸（）。
A．产氢产乙酸菌B．水解发酵细菌C．甲烷菌D．同型产乙酸菌8．下列关于甲烷菌的生理特征描述，错误的是（）。
A．厌氧菌B．对pH值反应敏感C．对温度反应不敏感D．分离培养比较困难9．同型产乙酸菌将H2和C02或CO2+3通过还原过程转化为乙酸的过程，在厌氧消化过程被称为（）。
A．水解发酵阶段B．产氢产乙酸阶段C．同型产乙酸阶段D．产甲烷阶段10．产氢产乙酸菌把除乙酸、甲酸、甲醇以外的（）产生的中间产物，如丙酸、丁酸等脂肪酸和醇类等转化成乙酸和氢，并有C02产生。
A．水解发酵阶段B．产氢产乙酸阶段C．同型产乙酸阶段D．产甲烷阶段11．下列不是原、后生动物在污水处理中所起的作用是（）。
A．呼吸释放氧气B．指示作用C．促进絮凝、沉淀D．捕食有机物和细菌12．在厌氧消化系统中，非产甲烷细菌和产甲烷细菌之间的关系为（）。
A．互生B．共生C．拮抗D．寄生13．通常，在活性污泥培养和驯化阶段中，原生动物种类的出现和数量的变化往往会按一定的顺序。
革兰氏阳性产芽孢杆菌(1)
热沉淀反应（ Ascoli氏沉淀反应） 被检抗原
3.血清学检查： 间接血凝试验
串珠荧光抗体检查
炭疽芽孢
串珠试验与 荧光抗体法结合11
第二节 梭菌属 (Clostridium)
一、属的特征
* 菌体杆状，两端钝圆或尖锐，常单在，革兰氏染色阳性 * 形成卵圆形或圆形的芽孢，常使菌体膨大，呈梭状
二、梭菌分布
毒素检测 毒素定型 定菌2型7
破伤风梭菌（Cl.tetani)
本菌又名破伤风杆菌，引起人畜破伤风的病原
一.生物学特性
形态特征：菌体两端钝圆、细长、正直杆菌，单在革兰氏阳性菌 体内外均能形成圆形芽胞，位于顶端—鼓槌状 无荚膜，多具周鞭毛而能运动
28
培养特征： 严格厌氧，含有血液、肝汤、庖肉培养基中易生长
炭疽毒素：水肿毒素(edema factor,EF) 致死毒素(lethal factor,LF) 保护性抗原（PA）
三种成分单独无生物学
活性（毒性），三种相结 合时，表现毒性作用
增强微血管的通透性， 改变血液循环， 损害肾功能， 干扰糖代谢
导致动物死亡 具有免疫原性， 有保护作用
7
六、免疫性
患过炭疽的动物，能获得坚强的免疫力。
按
PCBA
键
开关 键
传统机械按键设计要点： 1.合理的选择按键的类型， 尽量选择平头类的按键，以 防按键下陷。 2.开关按键和塑胶按键设计 间隙建议留0.05~0.1mm，以 防按键死键。 3.要考虑成型工艺，合理计 算累积公差，以防按键手感 不良。
四、微生物学诊断
* A型所致气性坏疽及人食物中毒—依靠细菌分离鉴定 * 其余各型所致的各种疾病—肠道内产生毒素所致，靠毒素检测
菌体抗原： 细胞壁及菌体内的半抗原（多糖），与毒力无关 性质稳定（耐腐败、热）—Ascoli反应
原核微生物—细菌的形态结构及应用
G+细菌的细胞壁结构（Staphylococcus aureus）
肽聚糖(Peptidoglycan）
又称粘肽(mucopeptide)、胞壁质 (murein)或粘质复合物 (mucocomplex)，是细菌细胞壁中 的特有成分。
模块二 原核微生物
Prokaryotic microorganisms
任务一 细菌的形态结构及应用
任务内容
1
发酵工业常用的细菌
2
枯草芽孢杆菌
3
大肠杆菌
4
乳酸杆菌
5
丙酮丁醇梭菌
6
醋酸杆菌
7
棒状杆菌
发酵工业常用的细菌
1、枯草芽孢杆菌 革兰氏阳性菌，形成芽孢，无荚膜，周生鞭毛能运动。生长温度30-39℃。 用途：生产中性蛋白酶、α-淀粉酶。可用于酱油、食醋及饴糖的发酵生产。
构造和成分与菌毛相同，但比菌毛长。 数量仅一至少数几根。 性毛一般见于Ｇ-菌的雄性菌珠中。 其功能是向雌性菌珠（受体菌）传递遗传物质。
鞭毛
菌毛
｝性毛 糖被
一.细菌的特殊结构
5、特殊的休眠构造——芽孢
芽孢Bacillus subtilis
一.细菌的特殊结构
5、特殊的休眠构造——芽孢
概念：某些细菌（主要是G+的两个属----好氧性的芽孢杆菌属和厌氧性 的梭菌属）在其生长发育后期，在细胞内形成一个圆形或椭圆形、厚壁、 含水量极低、抗逆性极强的休眠体，称为芽孢（endospore或spore，偶 译“内生孢子”）。
模块二 原核微生物
Prokaryotic microorganisms
任务一 细菌的形态结构及应用
历史皮肤炭疽疫情的专业知识
一、引言炭疽是一种由炭疽芽孢杆菌引起的急性传染病，主要感染草食动物，如牛、羊、鹿等，也可感染人类。
皮肤炭疽是炭疽的三种主要类型之一，其特征为皮肤出现焦痂溃疡、周围脓肿和毒血症。
历史上，炭疽疫情曾多次爆发，给人类社会造成了巨大影响。
本文将回顾历史皮肤炭疽疫情，并探讨相关专业知识。
二、历史皮肤炭疽疫情回顾1. 19世纪中叶至20世纪初：炭疽疫情在全球范围内广泛流行。
1847年，英国爆发了历史上最大的一次炭疽疫情，导致约6000人死亡。
此后，炭疽疫情在欧洲、美洲、亚洲等地不断爆发。
1900年，英国伦敦爆发炭疽疫情，导致数百人死亡。
2. 20世纪中叶：炭疽疫情在非洲和亚洲部分地区持续流行。
1947年，印度爆发炭疽疫情，导致约2000人死亡。
1950年代，非洲多个国家发生炭疽疫情，死亡人数超过1000人。
3. 20世纪末至21世纪初：炭疽疫情在全球范围内逐渐减少，但仍时有发生。
2001年，美国发生炭疽袭击事件，导致5人死亡。
2004年，印度再次爆发炭疽疫情，死亡人数超过200人。
4. 21世纪10年代至今：炭疽疫情在全球范围内保持较低水平。
但仍有一些国家发生炭疽疫情，如2014年南非爆发炭疽疫情，导致数十人死亡。
三、皮肤炭疽专业知识探讨1. 炭疽芽孢杆菌特性炭疽芽孢杆菌是一种革兰氏阳性细菌，具有强大的抵抗力。
在不利环境中，该细菌可形成芽孢，芽孢具有很强的耐热、耐干燥、耐辐射等特性，能够在土壤中存活几十年。
2. 传播途径炭疽主要通过以下途径传播：（1）直接接触：人类通过接触病畜、病畜的血液、皮毛、粪便等感染炭疽。
（2）间接接触：人类通过接触污染的物品，如肉、皮毛、衣物等感染炭疽。
（3）空气传播：炭疽芽孢可通过空气传播，进入人体呼吸道感染。
3. 临床表现皮肤炭疽的临床表现主要包括：（1）潜伏期：一般为1-7天。
（2）症状：初期表现为皮肤出现红斑、丘疹，随后形成水泡、脓疱，最终形成焦痂溃疡。
（3）并发症：严重病例可出现毒血症、败血症等并发症。
微生物试题
微生物试题一、填空题1.患有乳糖不耐症的人群是因为体内缺乏（乳糖分解酶）。
2.正常乳的酸度通常为16-18度，这种酸度与储存过程中因微生物繁殖所产的乳酸无关。
我们称这种酸度为（固有酸度或回答自然酸度）。
3.影响微生物生长的条件有（湿度）、（温度）、（酸碱度）、（气体）、（营养）。
4.鲜乳中的嗜冷菌主要以（革兰氏阴性杆菌）为主，其中（假单胞杆菌）占1/2左右。
5.鲜牛奶检验中酒精试验的目的是检测牛奶的新鲜度与（热稳定性）。
6.细菌生长的条件有:（温度）、（湿度）、（酸碱度）（氧气）（营养）（渗透压）7.细菌的细胞基本结构为：（细胞壁）、（细胞膜）、（细胞质）、（细胞核）等8.细菌的形状可分为（球状）、（杆状）（螺旋状）。
9.细菌生长的四个周期为（延迟期）、（对数期）、（稳定期）、（衰亡期）。
10.微生物的生长条件(湿度) ( 温度)( 酸碱度)( 气体)( 营养)。
11.使用酒精消毒时,应选用( 75% )的酒精,此浓度的酒精能起到最佳消毒作用。
12.酸味感会随着食物温度升高而(增强)。
13.商业无菌的四个环节是(产品无菌)(无菌输送)(包材无菌)(无菌环境下灌注)。
14.乳中的微生物有(细菌)(霉菌)(酵母菌)。
15.去除微生物的方法有：（无菌过滤）、（辐射灭菌）、、（化学灭菌）、（热处理）16.牛乳对热不稳定指的是( 酪 )蛋白变性所致.17.牛奶中的主要细菌有（乳酸菌）（大肠菌）（丁酸菌）（丙酸菌）（腐败菌）18.牛奶嗜冷菌含量应<( 1000个/ml)在此范围内的时侯,防止牛奶的(脂肪上浮)有一定的作用.19.灭菌的热处理方法:（干热灭菌）、（湿热灭菌）20.灭菌的含义（杀灭食品中的所有微生物和芽孢）。
21.微生物的特点（结构简单）、（繁殖快）、（分布广.种类多）、（个体小）、（适应性强，易变异）、（代谢强，转化快）22.大肠菌群是一群能在（37℃），（24小时）内发酵乳糖、产酸产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏（阴性）无芽孢杆菌23.（大肠菌）群主要来源于人畜粪便，故以此作为粪便污染指标来评价食品的卫生质量，24.菌落总数是指样品（经过处理）后，在一定条件下培养后得到的（1ml或1g）样品中的细菌菌落总数。
食品微生物第一,二章复习题
第一、二章部分复习题一、名词解释1.微生物：是个体微小、结构简单、种类众多、肉眼看不到的微小生物的总称。
2.食品：可供人类食用和饮用的物质，包括加工食品，半成品和未加工食品，不包括烟草或只作药品用的物质。
3.原核细胞：组成原核生物的细胞。
这类细胞主要特征是没有明显可见的细胞核，同时也没有核膜和核仁，只有拟核，进化地位较低。
4.古细菌：一类特殊细菌，在系统发育上既不属真核生物，也不属原核生物。
它们具有原核生物的某些特征(如无细胞核及细胞器)，也有真核生物的特征(如以甲硫氨酸起始蛋白质的合成，核糖体对氯霉素不敏感)，还具有它们独有的一些特征(如细胞壁的组成，膜脂质的类型)。
因之有人认为古细菌代表由一共同祖先传来的第三界生物(古细菌，原核生物，真核生物)。
它们包括酸性嗜热菌，极端嗜盐菌及甲烷微生物。
可能代表了活细胞的某些最早期的形式。
5.真细菌：除古细菌以外的所有细菌均称为真细菌。
最初用于表示"真"细菌的名词主要是为了与其他细菌相区别。
6.真核细胞：构成真核生物的细胞称为真核细胞，具有典型的细胞结构，有明显的细胞核、核膜、核仁和核基质; 遗传信息量大，并且有特化的膜相结构。
真核细胞的种类繁多，既包括大量的单细胞生物和原生生物(如原生动物和一些藻类细胞)，又包括全部的多细胞生物(一切动植物)的细胞。
7.烈性噬菌体：能在宿主细菌细胞内增殖，产生大量子噬菌体，并通过裂解细菌细胞而释放出来的噬菌体。
8.朊病毒：是一种很小的、具侵染性并在寄主细胞内复制的蛋白质颗粒。
9.感受态：是指细胞能从环境中接受转化因子的这一生理状态。
10.溶源性细菌：噬菌体与细菌共存的特性称为溶原性，被侵染的细菌被称作溶源性细菌。
11.荚膜：是某些细菌在一定营养条件下向胞外分泌出厚度不定的胶粘状物质包被于细胞壁的外表，形成较厚的和具有一定外形的膜，此称为荚膜。
12.质粒：一般指存在于细菌、真菌等微生物细胞中，独立于染色体以外，能进行自我复制的遗传因子。
芽孢杆菌的分类鉴定及其相关属的分类系统演变的研究(可编辑)
芽孢杆菌的分类鉴定及其相关属的分类系统演变的研究（可编辑）芽孢杆菌的分类鉴定及其相关属的分类系统演变的研究福建农林大学硕士学位论文芽孢杆菌的分类鉴定及其相关属的分类系统演变研究姓名:刘国红申请学位级别:硕士专业:植物检疫指导教师:林乃铨;刘波20090401中文摘要采用稀释涂布法从我国15个省15份土样标本中分离出322株芽孢杆菌。
通过表型特征、脂肪酸成分、ITS测序等手段将322株菌鉴定为3个属，芽孢杆菌属Bacillus11个种，类芽孢杆菌属Paenibacillus属2个种，短短芽孢杆菌属Brevibacillus属2个种。
本文对芽孢杆菌的生物学特性进行了研究，观察了枯草芽孢杆菌、简单芽孢杆菌、多粘类芽孢杆菌的细胞形态，并对几种常见芽孢杆菌的菌落形态进行了描述，也对枯草芽孢杆菌的生长特性做了相关的研究。
根据鉴定结果，统计分析了我国部分省芽孢杆菌的多样性，研究结果表明每个样点分离到芽孢杆菌的数量差异很大，每个采样点的优势种群的种类和数量也有很大差异。
15个采样点土样分离到的芽孢杆菌丰富度在2(8之间。
其中，青海采样点的芽孢杆菌丰富度最小，只分离到2种;新疆、内蒙古和宁夏芽孢杆菌的丰富度最大，为8。
新疆采样点的丰富度和多样性指数最高，其均匀度指数较高，生态优势度指数较低。
西藏的芽孢杆菌丰富度较低，多样性指数和均匀度指数最低，生态优势度指数最高。
因此物种多样性不仅与物种的丰富度有关，还可能与物种间数量差异程度有一定关系。
本文还初步研究了芽孢杆菌对香蕉枯萎病病原菌和青枯雷尔氏菌的拮抗作用，筛选到22株对香蕉枯萎病病原菌有拮抗作用，15株对青枯雷尔氏菌有拮抗作用。
从空间分布来看，具有拮抗作用的菌株大部分是从北方各省分离到的。
(最后，本文讲述了芽孢杆菌属属水平上的分类变化现状，叙述了芽孢杆菌属相关属的分类依据种有112个。
本论文还根据IJSEM上发表的文章对112个芽孢杆菌种的特征进行整理，记录了每个种的特征、16SrRNA序列号和菌株编号。
兽医微生物学-革兰氏阳性产芽胞杆菌+梭菌属
二、梭菌属细菌的微生物学检查
梭菌大多专性厌氧，培养须 采用厌氧培养法。
1、诺维梭菌、溶血梭菌等厌氧要求
十分苛刻，所用培养基必须新鲜制 备或保存于厌氧环境之Байду номын сангаас。
这些细菌对氧极为敏感，仅在空气 中暴露20～30min即遭抑制而不再生 长。因此划线接种后应立即厌氧培 养，培养物解除厌氧状态后应迅速
移植，不能久置于空气之中。
第十一章 G＋产芽胞杆菌
本章仅介绍兽医上具有重要意义的芽 胞杆菌科（Bacillaceae）。 芽胞杆菌科是一大类能形成芽胞的细 菌，大多数为G+菌，且具有运动性。 根据生化特性和形态特征目前主要包 括6个属
属Ⅰ：芽胞杆菌属(Bacillus) 属Ⅱ：芽胞乳杆菌属(Sporolactobacillus) 属Ⅲ：梭状芽胞杆菌属(Clostridium) ，也称为梭菌属 属Ⅳ：脱硫腊肠样芽胞杆菌属(Desulfotomaculum ) 属Ⅴ：芽胞八叠球菌属(Sporocarina) 属Ⅵ：颤螺菌属( Oscillospira)
+ 絮状沉淀，上层清朗，无
菌膜 不溶血或微溶血
— + + + M型菌落 + 强阳性
蜡状芽孢杆菌及其他需氧芽孢杆 菌
蜡样光泽、波纹状、锯齿状
—
均匀浑浊，颗粒状沉淀，有菌膜
蜡状芽孢杆菌呈β型溶血 +（±） — — — R型菌落 —
阴性或阳性
第二节 梭菌属(Clostridium)
该属细菌多数严格厌氧，革兰氏染色阳 性 ，能形成芽孢，芽孢直径往往比菌体粗， 使菌体膨胀成梭状，但并非梭菌属的细菌均 为梭状，如破伤风梭菌，芽孢位于菌体顶端， 菌体呈鼓槌状。 该属细菌能产生多种外毒素和侵袭性酶， 致病性强。 产气荚膜梭菌、腐败梭菌、诺维梭菌、肉 毒梭菌和破伤风梭菌等
芽孢杆菌的分类
芽孢杆菌的分类
芽孢杆菌（Bacillus）是一类革兰氏阳性细菌，属于厚壁芽孢杆菌科（Bacillaceae）和芽孢杆菌属（Bacillus）。
芽孢杆菌属下有许多种类和亚种，它们具有一些共同的特征，同时也存在一定的变异。
根据形态、生理特征和遗传关系，芽孢杆菌可以分为以下几个重要的分类群：
1. 基于形态特征的分类：
芽孢杆菌：具有直杆状或稍弯曲的细胞形态，细胞末端形成孢子。
肠杆菌样芽孢杆菌（Bacillus coli）：细胞形态与大肠杆菌（Escherichia coli）类似，但属于芽孢杆菌属。
2. 基于生理特征的分类：
产芽孢杆菌（Bacillus subtilis）：常见于土壤和自然环境中，可产生多种酶和代谢产物。
肠毒素芽孢杆菌（Bacillus cereus）：能够产生肠毒素，引起食物中毒。
3. 基于遗传关系的分类：
16S rRNA序列分析：通过对芽孢杆菌属不同菌株的16S rRNA基因序列进行比较和分析，可以揭示它们之间的遗传关系和系统发育。
芽孢杆菌属存在广泛的物种多样性，仍在不断发现和研究中。
因此，对于芽孢杆菌的具体分类和命名，可能需要参考最新的分类系统和分类学研究成果。
炭疽芽孢杆菌检测鉴定技术研究进展
RIA 灵敏度高 (可测定 ng 或 pg 量) 、特异性好 、 样品用量少 (011 ml 左右) 、操作方法易标准化 。双 抗体夹心法及生物素亲和素系统的引入 ,既减少了 本底干扰 ,提高了实验灵敏度 ,又能缩短反应时间 , 而且可实现自动连续测定 。
RIA 也分为直接法和间接法 。直接与间接放射 免疫分析法检测固定于多点显微镜玻片的炭疽芽孢 杆菌的对比研究表明〔8〕: 直接检测法的缺点在于一 种标记物只能检测相应的抗原 (或抗体) ,使其使用 效果受到了一定的限制 ;间接法可以利用一种标记 物 ,即标记抗抗体 ,检测多种其它抗体 ,较直接法能 结合的抗体数目多 ,由此可增加敏感性 ,扩大了使用 范围 。间接法并不能增强信号强度 ,但信噪比增加 。 可用于监测超免疫状态实验动物的循环抗体 。 214 免疫荧光检测法
免疫荧光试验 ( IF) 用于炭疽与蜡样芽孢杆菌繁 殖体的鉴别表明〔9〕: 对于吸附反应能否完全消除交 叉反应 ,目前报道不一 。IF 与其他血清学诊断方法 相比优势在于 ,能检测菌群抗原异质性 。遗憾的是 , 人工微量流式记数速度太慢 ,敏感性也随之下降 。 为提高其敏感性 ,采用流式细胞记数仪进行记数 。
产气肠杆菌mfc培养基结果判断
产气肠杆菌mfc培养基结果判断一、介绍产气肠杆菌（Clostridium spp.）是一类革兰氏阳性、芽孢形成的细菌，广泛存在于环境中，包括土壤、水体、动物肠道等。
这类细菌能够在形成芽孢的条件下生存，具有较高的耐受力和耐受性。
一些产气肠杆菌种类对人体健康也有一定的影响，例如产气肠杆菌属中的某些菌种会引起食物中毒和肠道感染等疾病。
由于产气肠杆菌的存在具有一定的危害性，我们需要一种可靠的培养基来判断环境中是否存在该类菌种。
二、产气肠杆菌mfc培养基的构成和原理产气肠杆菌mfc培养基（MFC Medium）是一种常用的选择性培养基，主要用于产气肠杆菌的分离和鉴定。
它的构成如下：1. 成分•蛋白胨：提供氮源和碳源，促进菌落的生长和繁殖。
•谷氨酸：为产气肠杆菌的生长提供必需的氮源和碳源。
•天门冬氨酸：为产气肠杆菌的生长提供必需的氮源和碳源。
•羧甲基纤维素：作为固体基质，有助于培养基的凝胶化。
•生理盐水：调节培养基的渗透压和pH值，提供适宜的环境。
2. 抗生素•氯霉素：通过抑制其他非产气菌的生长来选择性地培养产气肠杆菌。
3. 指示剂•碘化钾：用于检测普通培养基上产生的硫化氢。
三、使用产气肠杆菌mfc培养基的步骤使用产气肠杆菌mfc培养基进行产气肠杆菌的分离和鉴定的具体步骤如下：1. 准备培养基按照上述的成分比例准备好产气肠杆菌mfc培养基，并加入适当浓度的氯霉素。
2. 取样从待检样品中取得一定量的菌落，并用无菌吸管均匀地划取样品。
3. 消毒处理将吸管中的样品用火焰消毒，然后再将吸管尖端在培养基凝胶表面划线，确保样品均匀分布。
4. 培养将划线的样品放置在适宜的温度（通常为37℃）下培养一段时间，以促进产气肠杆菌的生长。
5. 观察和判断观察培养基表面的菌落形态，产气肠杆菌的特征是呈灰黄色或灰绿色的不透明菌落，周围有沉积物。
四、产气肠杆菌mfc培养基的结果判断使用产气肠杆菌mfc培养基进行培养后，观察培养基上的菌落，可以根据以下结果进行判断：1. 阳性结果•初步鉴定：存在呈灰黄色或灰绿色的菌落，周围有沉积物的情况，初步判断为产气肠杆菌阳性。
2021年山东大学微生物学专业《微生物学》期末试卷B(有答案)
2021年山东大学微生物学专业《微生物学》期末试卷B(有答案）一、填空题1、能产芽孢的细菌较少，主要是属于革兰氏______性细菌的______属和______属，前者是好氧菌，其芽孢囊呈______状，后者是厌氧菌，其芽孢囊的外形常呈______状。
2、腺病毒的形状为______，呈______对称；它有______个角、______ 个面和______条棱；存在两种衣壳粒，分别称为______和______；其核心部分为线状______链______。
3、在真核生物中，TCA循环的酶反应在______内进行，在原核生物中，则在______内进行，但______酶是一例外，它在真核生物的线粒体或原核生物细胞中都是结合在______上的。
4、生长因子主要包括______、______和______，它们对微生物所起的作用分别是______、______和______。
5、曲霉分生孢子头的构造为：分生孢子梗的基部有一特征性的______，向上则分化出______、______、______和______，这四种总称为______。
6、1347年的一场由______引起的瘟疫几乎摧毁了整个欧洲，有1/3的人（约2500万人）死于这场灾难。
7、常用的防腐方法有______、______、______和______等。
8、土壤放线菌的数量可占土壤微生物总量的______，且在______丰富和______土壤中这个比例较高。
9、检出营养缺陷型一般有四种方法：① ______，② ______，③ ______和④ ______。
10、人体的白细胞种类很多，它们在免疫防御中具有重要作用，例如，具有吞噬功能的如______、______、______和______；无吞噬功能但在特异性免疫中作用极其重要的有两种，即______与______。
二、判断题11、和动植物一样，细菌细胞也会经历由小长大的过程，因此，在相同情况下应选择成熟的细菌而非幼龄细菌进行显微镜观察，这样可以看得更清楚。
制药人员卫生和微生物基础知识培训
2021/12/12
人员卫生和微生物 根底知识培训
培训的法规依据
一、第二十九条
药品生产质量管理标准 2021年版
所有人员都应当接受卫生要求的培 训，企业应当建立人员卫生操作规 程，最大限度地降低人员对药品生 产造成污染的风险。
2021/12/12
3
二、第二十条
药品生产质量管理标准 2021年版 无菌附录
凡在洁净区工作的人员〔包括清洁工和设 备维修工〕应当定期培训，使无菌药品的操 作符合要求。培训的内容应当包括卫生和微 生物方面的根底知识。未受培训的外部人员 〔如外部施工人员或维修人员〕在生产期间 需进入洁净区时，应当对他们进行特别详细 的指导和监督
法规要求
第三十五条 进入洁净生产区的人 员不得化装和佩带饰物。
2021/12/12
13
摘下个人饰物：耳环、手表、戒 指、项链等 不得留长指甲
提醒：进入洁净区人员不得化装， 否那么需清洗去除化装品
2021/12/12
14
一、人员卫生
人体是一个永不休止的污染媒介。
人是药厂中最不清洁的成份，是最 大的污染源。
2021/12/12
75
真菌：酵母菌
形态：通常有球状、卵圆状、椭圆状、柱 状和香肠状等。
结构：
2021/12/12
76
酵母菌
2021/12/12
77
酵母菌 繁殖方式
无性繁殖——芽殖(主要方式)、 裂殖
有性繁殖——产生子囊孢子
2021/12/12
78
2021/12/12
白色念珠菌
79
霉菌 Mold
41
更衣
头发应完全包在帽子内
贝莱斯芽孢杆菌菌落形态
贝莱斯芽孢杆菌菌落形态贝莱斯芽孢杆菌（Bacillus cereus）是一种常见的革兰氏阳性细菌，属于孢杆菌属。
它是一种环境广泛分布的细菌，可以存在于土壤、水中、食品等多种环境中。
贝莱斯芽孢杆菌的菌落形态独特，通过观察菌落的外观可以对细菌进行初步鉴定。
下面将对贝莱斯芽孢杆菌的菌落形态进行详细描述，以便读者进行更加准确的了解和识别。
贝莱斯芽孢杆菌的菌落通常为边缘整齐、呈圆形或不规则形状的，直径在1-3毫米左右。
菌落的颜色多样，可以是乳白色、灰白色、黄色、鲜黄色或棕色等。
在富含酸性物质的培养基上，菌落的颜色可能更显鲜艳。
贝莱斯芽孢杆菌的菌落表面光滑，质地较松散，有时会产生分叉或较为疏松的纹路。
观察菌落的质地和纹路可以帮助我们初步判断细菌的种类。
在显微镜下观察贝莱斯芽孢杆菌的菌落，可以看到许多细小的点状结构，这些结构就是菌落中的细菌孢子。
贝莱斯芽孢杆菌是革兰氏阳性细菌，细菌孢子呈纵列排列，形状通常为短而粗的杆状。
观察细菌孢子的形状和排列方式，可以进一步确定细菌的属种。
贝莱斯芽孢杆菌的菌落生长速度较快，在适宜的培养条件下，通常只需要24-48小时就能看到明显的菌落形成。
此外，贝莱斯芽孢杆菌对培养基和环境的要求也较宽泛，在常见的富营养培养基上都可以良好地生长。
这使得贝莱斯芽孢杆菌成为了许多食品和环境样品的常见污染源。
通过对贝莱斯芽孢杆菌菌落形态的观察，我们可以初步判断食品或环境样品是否受到了细菌的污染。
然而，菌落形态仅仅是一个初步的指标，如果需要更加准确地鉴定细菌的种类和数量，需要进行进一步的实验和分析。
因此，我们在进行食品安全监测和环境卫生检测时，应该结合菌落形态观察和其他实验方法，共同来评估细菌的存在与污染情况。
总之，贝莱斯芽孢杆菌的菌落形态对于细菌的初步鉴定具有重要意义。
通过观察菌落的外观、颜色、质地以及细菌孢子的形态和排列方式，我们可以对细菌进行初步的判断和鉴定。
然而，菌落形态观察仅仅是一个初步的指标，需要结合其他实验和分析方法来进行细菌的准确鉴定。
枯草芽孢杆菌的发现与特征
枯草芽孢杆菌的发现与特征枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）是一种广泛存在于自然环境中的革兰氏阳性细菌。
本文将介绍枯草芽孢杆菌的发现历史，其特征和在各个领域的应用。
枯草芽孢杆菌的发现可以追溯到19世纪。
最早的研究者是德国科学家Christian Gottfried Ehrenberg，他于1835年首次观察到了这种细菌，其形态较小而具有一定的运动能力。
随后，枯草芽孢杆菌的研究更加深入，许多科学家发现了其在土壤、水、空气和植物表面等环境中的存在。
枯草芽孢杆菌具有多种独特的特征。
首先，它的细胞形态为短而粗壮的杆状。
其次，枯草芽孢杆菌是嗜热菌，适应高温环境，能够在50-60摄氏度温度下存活和繁殖。
此外，该菌属于芽孢杆菌属中的一个重要代表，具有形成耐热芽孢的能力。
这些芽孢可以在不利条件下生存较长时间，即使在高温、干燥、辐射或化学物质暴露等恶劣环境下，也能存活下来，待环境适宜时重新发芽成细菌。
这一特性使得枯草芽孢杆菌成为许多研究领域的热门对象。
枯草芽孢杆菌在许多领域具有广泛的应用价值。
首先，它被广泛用于制备生物农药。
枯草芽孢杆菌产生的一种名为“枯草芽孢杆菌杀虫素”的蛋白质毒素，能够对多种害虫起到杀灭作用，而对人体和有益生物相对安全。
其次，枯草芽孢杆菌也是一种重要的产酶菌株。
它能产生多种酶，如蛋白酶、纤维素酶和淀粉酶等，可广泛应用于生物工程和食品行业等。
此外，该菌的芽孢结构被用于生物材料制备，如芽孢壳膜可用于微胶囊制备和基因工程载体。
最后，枯草芽孢杆菌的遗传和代谢途径研究为生物技术领域的基础研究提供了重要的模型。
除了上述应用，枯草芽孢杆菌还在环境修复、生物防治、营养添加剂等方面具有潜力。
例如，在环境修复方面，枯草芽孢杆菌可以降解多种有机化合物，如石油烃和重金属污染物等，对环境具有重要的净化作用。
在生物防治方面，该菌对一些植物病原菌和真菌具有拮抗作用，可以作为生物农药的替代品。
此外，枯草芽孢杆菌还能够在饲料中作为饲养动物的微生物添加剂，改善动物的消化和健康。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
抵抗力
本菌繁殖体的抵抗力不强，60℃30～60min或 75℃5～15min即可杀死。常用消毒剂均能于短 时间内将其杀死，如1:5000洗必泰或消毒净、 1/10000新洁尔灭、1:50000度米芬在Smin内可 将其杀死。对青霉素、链霉素等多种抗生素及 磺胺类药物高度敏感，可用于临床治疗。在末 解剖的尸体中，细菌可随腐败而迅速崩解死亡。
西南民族大学
西南民族大学
Rod-shaped Bacterium (causes botulism) Clostridium botulinum (SEM x15,400)
西南民族大学
Rod-shaped Bacterium(causes botulism), Clostridium botulinum (SEM x12,800)
3·抗炭疽血清 系以弱毒菌苗对马或牛先进行 基础免疫后，再用强毒炭疽杆菌多次注射而制 成。此血清可用于治疗，或在发生炭疽的疫区 用作紧急预防。
西南民族大学
肉毒梭菌
本菌是一种腐生性细菌，广泛分布于土壤，海洋 和湖泊的沉积物，哺乳动物、鸟类和鱼的肠道， 饲料以及食品中。此菌不能在活的机体内生长繁 殖，即使进入人畜消化道，亦随粪便排出体外。 当有适宜营养且获得厌氧环境时，即可生长繁殖 并产生肉毒毒素。人畜食入含此毒素的食品、饲 料或其他物品，即可中毒而发生肉毒中毒症 。
西南民族大学
西南民族大学
西南民族大学
猪 的 咽 炭 疽
西南民族大学
人类对炭疽杆菌的易感性介于食草动物与猪之间， 一般通过接触病畜尸体材料或污染的畜产品， 经消化道、呼吸道或皮肤创伤感染而发生肠炭 疽、肺炭疽或皮肤炭疽。还可引发人类脑膜炎、 咽喉炭疽和毒血症等。 实验动物中小鼠、琢鼠、家兔和仓鼠均极易感， 大鼠则有抵抗力。
西南民族大学
3、保护性抗原 是一种胞外蛋白质抗原成分，分 子量83000，在人工培养条件下亦可产生，为 炭疽毒素的组成成分之一，具有免疫原性，能 使机体产生抗本菌感染的保护力。
4、芽孢抗原是芽孢的外膜层含有的抗原决定簇， 它与皮质一起组成炭疽芽孢的特异性抗原，具 有免疫原性和血清学诊断价值。
西南民族大学
西南民族大学
芽孢的抵抗力特别强大，在干燥状态下可长期存 活。需经煮沸15～25min，121℃灭菌5～l0min， 或160℃千热灭菌lh方被杀死。
西南民族大学
实验室干燥保存40年以上的炭疽芽孢仍有活力。 干燥皮毛上附着的芽孢，也可存活10年以上。 牧场一旦被其污染，传染性常可保持20～30年。 对于曾经掩埋炭疽兽尸的土地，必须加以 严 格控制。开垦后的头1～2年种植黑麦、三叶草 等植物，其根系能分泌一种杀死炭疽杆菌的物 质，起到净化土壤的作用。
西南民族大学
免疫防治
炭疽痊愈动物可获得坚强的免疫，再次感染者很少。 抗炭疽血清也可用于治疗和紧急预防，我国目前 应用的菌苗有两种。
西南民族大学
1、第Ⅱ号炭疽芽孢苗 系著名微生物学家巴斯德 首创，后经改进。方法是将强毒炭疽杆菌培养 于42.5℃，丧失形成芽抱的能力。再于35C培育 4～7d，使其形成芽孢的能力重新恢氢培育而成。
西南民族大学
低倍镜下炭疽杆菌菌落边缘呈卷发样西南民族大学
无毒或弱毒菌株形成稍小而隆起、表面较为光滑 湿润、边缘比较整齐的光滑 (S)型菌落。在血 液、血清琼脂平板上或在碳酸氢钠琼脂上，置 于5%CO2环境中培养，强毒菌株可形成圆形凸 起、光滑湿润、有光泽的黏液 (M)型菌落，无 毒菌株和类炭疽菌仍保持其粗糙型特点。在血 琼脂上一般不溶血，但个别菌株也可轻微溶血。
西南民族大学
此菌苗系将培养产生的炭疽芽孢，用30%甘油蒸馏 水混悬制成，有效期2年。适用于牛、马、驴、 骡、骆驼、绵羊、山羊和猪，一般不引起接种 反应。注射后14d即可产生坚强免疫力免疫期一 年。
西南民族大学
2、无毒炭疽芽孢苗 是南非兽医研究所选育的 一株弱毒变种，失去了形成荚膜的能力。其残 余毒力较第Ⅱ号炭疽芽孢苗者强，可杀死小鼠 及部分豚鼠，使豚鼠及家兔发生明显水肿，但 不致死家兔。
西南民族大学
形态及染色特性
本菌多呈直杆状，仅解肮菌株有的可略弯曲。不 同代谢群菌株的大小有差异，C型和D型为 0.5～2.4um×3.0～22.0um，G型为1.3～ 1.9um×l.6～9.4um，解肮者为0.6～ 1.4umx3.0～20.2um，非解肮者为0.8～ 1.6um×l.7～15.7um。单在或成双，革兰氏阳 性。着生周鞭毛，能运动。芽孢卵圆，位于菌 体近端，大于菌体直径，使细胞膨大，易于在 液体和固体培养基上形成芽孢，但G型菌罕见 形成芽孢。
西南民族大学
微生物学诊断
1、镜检 2、培养 3、鉴定：生化及血清学
西南民族大学
间接血凝试验 此法系将炭疽抗血清吸附于炭粉 或乳胶，制成炭粉诊断血清或乳胶诊断血清。 然后采用玻片凝集试验的方法 (室温下作用 5min)，检查被检样品中是否含有炭疽芽孢。 当被检样品每毫升含炭疽芽抱7.8万个以上时， 可表现阳性反应。
西南民族大学
协同凝集试验 此法可快速检测炭疽杆菌域病料 中的可溶性抗原，先准备含阳性血清的协同试 验试剂，将炭疽标本的高压灭菌滤液滴于玻片 上，再加1滴此试剂，混匀后，于2min内呈现 肉眼可见凝集者，即为阳性反应。
西南民族大学
串珠荧光抗体检查 Jensen和Kleemyer(1953)将 串珠试验与荧光抗体法结合起来，即将被检材 料接种于含青霉素0.051U/ml的肉汤中培养后， 涂片以荧光抗体染色检查。此法与常规检验的 符合率达到80%～90%，因而具有一定的实用价 值。
西南民族大学
此菌毒力主要与荚膜和毒素有关，它们分别由 PXO1和PX2质粒所调控。在入侵体内生长繁殖 后，形成荚膜，从而增强细菌抗吞噬能力，使
之易于扩散，引起感染乃至败血症。
西南民族大学
炭疽杆菌所产生的毒素称为炭疽毒素，包括水肿毒 素及致死毒素两种，其毒性作用主要是直接损伤 微血管的内皮细胞，增强微血管的通透性，改变 血液循环动力学，损害肾脏功能，干扰糖代谢， 血液呈高凝状态，易形成感染性休克和弥漫性血 管内凝血，最后导致动物死亡。毒素由水肿因 子 、致死因子以及保护性抗原三种亚单位 (或 称因子)构成，三者单独均无毒性作用，只有PA 与EF或与LF结合时，才有致病作用，且EF与LF可 与PA发生竞争性结合。
芽孢椭圆形，位于菌体中央，芽孢囊不大
于菌体。可形成荚膜。DNA的G+Cmol%为
32.2～33.9。在动物组织和血液中，此菌
单在或呈2～5个相连的短链，菌体矢直，
相连的两端平截而呈竹节状，围绕以丰厚
பைடு நூலகம்的荚膜。
西南民族大学
荚膜具有较强的抗腐败能力，当菌体因腐败而消 失后，仍有残留荚膜显示，称为"菌影"。在猪 体内的此菌形态较为特殊，菌体常弯曲或部分 膨大，轮廓不清。动物体内的炭疽杆菌只有当 暴露接触空气中的氧气之后，方能形成芽孢。
西南民族大学
2、 菌体抗原 有两种，一种是存在于本菌细胞 壁及菌体内的半抗原，为d葡萄糖胺、d半乳糖 及乙酸所组成的多糖成分。该抗原与细菌毒力 无关，但性质稳定，即便在腐败的尸体中经过 较长时间，或经加热煮沸甚至高压蒸气处理， 抗原性不被破坏。常用的Asoli反应，加热处理 抗原依据在此。此法特异性不高，其他需氧芽 孢杆菌能发生交叉反应等。
西南民族大学
琼脂扩散试验 用来检查是否有本菌特异的PA产 生。具体方法是将琼脂培养基上生长的单个菌 落，连同周围和其下的琼脂一起切取，移填于 琼脂反应板上事先打好的孔中，与中央孔内早 于16～18h前滴加的抗炭疽免疫血清进行24～ 48h的扩散试验，阳性者有沉淀线。
西南民族大学
西南民族大学
应用酶标葡萄球菌A蛋白间接染色法和荧光抗体 间接染色法等，可检测动物体内的炭疽荚膜抗 体，供作追溯诊断或临床早期诊断。检测证明， 发病3d后即开始产生荚膜抗体，1周后大多数 转呈阳性反应，该抗体通常可持续9个月左右。
西南民族大学
培养特性 此菌为需氧菌，但在厌氧条件下也可生 长。可生长温度范围为15～40℃，最适生长温度 30～37℃。最适pH为7.2～7.6。营养要求不高， 普通培养基中即能生长良好。
西南民族大学
在普通琼脂上培养24h后，强毒菌株形成灰白色不 透明、大而扁平、表面干燥、边缘呈卷发状的粗 糙 (R)型菌落。
西南民族大学
于普通肉汤中培养24h后，上部液体仍清朗透明， 液面无菌膜或菌环形成，管底有白色絮状沉淀， 若轻摇试管，则沉淀物徐徐上升，卷绕成团而 不消散。在明胶穿刺培养中，细菌除沿穿刺线 生长外，四周呈直角放射状生长，整个生长物 好似倒立的雪松状。经培养2～3d后，明胶上 部逐渐液化呈漏斗状。
西南民族大学
西南民族大学
堆肥中的炭疽芽孢，需温度升至72～76℃经过4d 方才死亡。常用的 消毒剂是新配的20%石灰乳 或20%漂白粉作用48h，0.1%升汞作用40min或4% 高锰酸钾 l5min。炭疽芽孢对碘特别敏感 ， 0.04%碘液l0min即将其破坏，但有机物的存在 对其作用有很大影响。
西南民族大学
西南民族大学
西南民族大学
西南民族大学
西南民族大学
电镜下的炭疽芽孢
西南民族大学
在 培 养 基 中 ， 此 菌 常 形 成 长 链 ， 并 于 培 养 18 ～ 24h后开始形成芽孢。在普通培养基中不形成 荚膜，但若在血液、血清琼脂上或在碳酸氢钠 琼脂上，于10%～20%CO2环境中培养则形成荚 膜。在葡萄糖琼脂上生长的此菌，细胞内有不 能被复红着染的球状小体。
西南民族大学
抗原结构
已知本菌有荚膜抗原、菌体抗原、保护性抗原及 芽抱抗原4种主要抗原成分。
1、荚膜抗原 仅见于有毒菌株，与毒力有关。 由D谷氨酷多肤构成，是一种半抗原，可因腐 败而被破坏，失去抗原性。此抗原的抗体无保 护作用，但其反应性较特异，依此建立各种血 清学鉴定方法，如荚膜肿胀试验及免疫荧光抗 体法等，均呈较强的特异性。