半定量分析方法
半定量
半定量又叫半定量PCR半定量是RT-PCR做基因表达分析的一种方法，其操作的方法是在野生型和突变体中用一个看家基因（通常是actin）做参照标准来观察目标基因在各自的表达情况（上调还是下调），所谓半定量的“半”是通俗的说法，即在看电泳图估计参照亮度一致（可看作是表达的细胞数一致）情况下，确定目标基因的表达；这是与更加精确的Q-PCR的相对定量和绝对的量区分。
半定量解释（semi-quantitative interpretation）是介于定性和定量之间的解释。
尽管使用了数学方法对地质目标的空间位置或物性进行了数值计算，也获得了量值，但由于这些方法的使用是有非常严格的前提条件的，而在实际情况下这些条件是不满足的，所以这些定量计算的结果只能从趋势上为解释人员提供参考。
半定量分析定性分析是能区分出是个什么东西。
举个例子来说，你能辨认出这是苹果，但你不能确定是几个苹果。
定量分析是在定性的基础上给出清晰的数量关系。
比如，你确定了这是5个苹果。
而半定量分析是通常实现定量分析非常困难时采取的一种则中办法。
还是举例说明。
这里有一堆苹果，你不知道具体的数量。
但是你能知道的是这一堆苹果能装5麻袋。
这5麻袋的数量估计就是半定量分析。
定量PCR是PCR的一种。
PCR仪目的为了基因扩增。
在基因扩增中最重要的就是升降温过程，最早的PCR就是三个水浴锅,一个机械臂，定时抓出反应槽转换水浴锅。
PCR的结果需要借助其他手段来检测。
后来随着定量技术的发展，将PCR和检测做成一体，就形成了定量PCR仪。
还可以与荧光技术结合，同时在每个扩增过程都能实施监控。
定量PCR（PolymeraseChainReaction）技术有广义概念和狭义概念。
广义概念的定量PCR技术是指以外参或内参为标准，通过对PCR终产物的分析或PCR过程的监测，进行PCR 起始模板量的定量。
广义概念下的定量PCR技术可以分为五种类型：（1）外参法+终产物分析。
所谓“外参法”是指样本与阳性参照在两个反应容器内反应。
光谱半定量分析原理、方法、操作技术知识点解说.
光谱半定量分析原理、方法、操作技术知识要点一、光谱半定量分析原理光谱半定量分析是根据元素的特征谱线确定被测元素的存在，然后根据谱线的黑度估计其含量的光谱分析。
与目视比色法相似，测量试样中元素的大致浓度范围。
光谱半定量分析法应用：用于钢材、合金等的分类、矿石品位分级等大批量试样的快速测定。
二、光谱半定量分析方法光谱半定量分析的方法有三种：谱线呈现法；谱线强度比较法；均称线对法等。
其中谱线强度法最常用。
谱线呈现法：试样中某元素含量低时，摄谱后在感光板上仅出现少数几根灵敏线，随着试样中该元素含量的增加，一些次灵敏线与原本较弱的谱线相继出现，于是可以编成一张谱线出现于含量的关系表，根据某一谱线是否出现来估计试样中该元素的大致含量。
谱线强度比较法：测定一系列不同含量的待测元素标准光谱系列，在完全相同条件下(同时摄谱)，测定试样中待测元素光谱，选择灵敏线，比较标准谱图与试样谱图中灵敏线的黑度，确定含量范围。
三、光谱半定量分析操作技术（一）、仪器与试剂1.摄谱仪：WSP-1型平面光栅摄谱仪2.电极：下电极¢3.5×6×0. 5 mm碳电极；上电极：圆锥形碳电极,端面直径2 mm3.相板：天津紫外Ⅱ型光谱相板4.投影仪：8W型光谱投影仪5．显影液：取水（35～45℃）700mL、无水亚硫酸钠26.0g、无水碳酸钠20.0g、米吐尔1.0g、对苯二酚5.0g、溴化钾1.0g，加水至1000mL溶解，摇匀备用。
6．停影液：冰醋酸（98%）15mL加水至1000mL，摇匀备用。
7．定影液：取水（35～45℃）650mL、无水亚硫酸钠15.0g、硼酸7.5g、海波240.0g、冰醋酸（98%）15mL、钾明矾15.0g，加水至1000mL溶解，摇匀备用。
（二）、操作步骤1.摄谱前的准备工作（1）准备电极：在光谱分析实验时一般用纯的碳棒作为辅助电极。
（2）将粉状样品用小勺加入电极的样品孔中，或直接将电极压在试样中，填满碳电极小孔。
一种XRD半定量分析
一种XRD半定量分析X射线衍射（X-ray diffraction，简称XRD）是一种常用的物质结构分析方法，它基于X射线与物质晶格相互作用而产生的衍射现象，通过对衍射图谱的解析可以了解样品的晶体结构、物相组成、晶体缺陷等信息。
在XRD半定量分析中，我们可以利用标准物质的参考谱与待测样品的衍射谱进行比对，从而估算样品中不同成分的含量。
在进行XRD半定量分析前，首先需要选择一个合适的参考标准物质。
理想情况下，参考物质应该与待测样品具有相同或相似的物相组成、结构和晶胞参数，以保证衍射峰的位置和强度对应的准确性。
同时，为了减小可能的衍射峰重叠，还需要选择具有较少或不出现于待测样品衍射图谱中的参考物质。
确定了参考标准物质后，我们可以在同一实验条件下，对参考物质和待测样品进行X射线衍射实验。
实验中通常以不同的角度或2θ扫描样品，并利用X射线衍射仪器记录样品的衍射图谱（也称为衍射曲线）。
实验得到的衍射图谱可以通过相对强度与2θ角度的关系来表达。
接下来，我们需要对实验得到的衍射图谱进行数据处理。
常用的数据处理方法包括峰识别、背景剪除、峰参数提取等。
在XRD半定量分析中，最重要的数据处理步骤是利用参考物质的衍射谱与待测样品的衍射谱进行比对。
通过计算两个衍射谱的相似度指标，可以得到待测样品中不同成分的含量。
XRD半定量分析的数据处理方法主要有定标法和相对强度法两种。
定标法是利用已知含量的标准物质的衍射峰强度与待测物质的衍射峰强度之间的比值关系，建立一个标准曲线，通过对待测物质的衍射峰强度进行插值或外推，估算其含量。
相对强度法则通过衍射峰强度的相对大小关系，对样品中不同成分的含量进行估算。
相对强度法相对于定标法更加简便，但准确性可能较差。
因此，在进行XRD半定量分析时，应该根据具体情况选择合适的方法。
需要注意的是，XRD半定量分析只能得到样品中不同成分的相对比例关系，并不能直接得到其绝对含量。
如果需要获得绝对含量，通常需要通过与其他分析方法（如化学分析）进行结合。
半定量RT
1 半定量RT－PCR 方法的检测步骤1. 1 提取组织或细胞中的总RNA总RNA 的纯度和完整性关系到后面的cDNA合成及PCR 扩增, 因此所提的总RNA 要求纯度高,完整性好并达到一定的浓度. 要达到这一要求, 必须从取标本开始就进行无RNA 酶操作, 以防RNA 酶对所提总RNA 的降解, 具体做法为: 所用的器械及器皿必须经200 ℃以上的高温烘烤最少5 h; 所用的耗材及试剂必须用0. 1% 的DEPC 水处理12～ 16 h,这样方可保证所提总RNA 的完整; 在选用试剂时最好选用知名品牌公司的试剂, 以保证总RNA 纯度及提取的产量; 另外所用的组织量最少应在100mg、细胞数最少应在107.1. 2 总RNA 的纯度和完整性鉴定总RNA 提取之后, 必须用紫外分光光度计测定其纯度和浓度,A 260?A 280 在1. 8～ 2. 0 之间方可采用; 然后再用1. 5% 左右的琼脂糖凝胶对总RNA 进行电泳, 以鉴定其完整性, 浓度不高, 完整性不好的标本最好不用, 以免影响后面的实验结果.1. 3 cDNA 第一链的合成由总RNA 逆转录成cDNA 时, 所取的各组标本的总RNA 的量必须要一样多, 最好在1ug 以上, 这样才能保证各组标本总RNA 中所需检测的mRNA量的差异.为了使逆转录效益最大, 最好采用含有多个碱基的随机序列引物.1. 4 PCR 扩增以逆转录的cDNA 第一链为模板, 以特异性引物扩增所要检测的mRNA. 在PCR扩增时一定要注意以下两点: ①为了克服不同管间扩增引起的“管效益”, 必须以组成型表达的内参基因如β-actin (或其它的看家基因, 如GA PDH、β-M G 等) 为内标, 在同一管中加入扩增内参基因的引物, 共同扩增所要检测的基因和内参基因, 内参扩增产物的大小最好与目的基因mRNA 扩增产物的大小相差200 bp 以上,这样便于观测结果; ②由于PCR 扩增存在着扩增效率及平台期的问题, 因此必须进行预试验以确定待检测基因与内参基因达到平台期前扩增效率最大的循环数. 对于PCR 反应存在着这样的关系式: N =N 0 (1+ E) n. 其中N 0为起始浓度, E 为扩增效率, n代表扩增周期,N 为产物最终浓度. 那么log N = nlog (1+ E) + log N 0. 通过预试验, 在不同的周期取样进行密度扫描, 以待检测基因与内标比值的对数分别与扩增周期作图, 如在20～ 30 周期内, 它们的线性关系良好, 说明在30 周期内二者的扩增未到达平台期, 最后确定扩增效率最大的循环数, 这样可有效地避免因引物结合效率不同而引起的误差.1. 5 结果的分析根据扩增产物片段的大小配制最适宜浓度的凝胶, 将PCR 扩增产物进行电泳.待检基因与内参基因的扩增条带应相隔一定的距离(最少200 bp 以上) , 以便于观测结果及密度扫描, 且所选用的Marker 应尽量含有与扩增产物相对应的条带. 电泳条带经密度扫描仪扫描, 得到待测基因与内参基因条带各自的峰面积积分值, 计算各组样品两者的比值. 为了使扩增条带密度扫描的峰面积积分值尽量的准确可靠, 电泳条带一定要清晰, 不能有杂带出现. 有杂带出现的标本最好不用, 若有杂带应重新调整PCR 过程中的退火温度, 直至杂带消失, 这样才能保证扫描结果的专一性及可靠性.2 半定量RT -PCR技术的关键因素2. 1 总RNA 和cDNA 的质量只有在总RNA 未被降解的情况下, 才能保证其中mRNA 的完整性和随后反转录的cDNA 的质量,从而真实反映基因的表达.2. 2 总RNA 的定量在反转录之前, 作为起始模板各个样品中的总RNA 量要一样, cDNA 量和电泳PCR 产物量也要一样, 这样才能保证PCR 扩增产物能真实反映基因表达的实际情况.2. 3 引物的选择PCR反应的特异性是由一对上下游引物所决定的, 因此引物的好坏往往是PCR 反应成败的关键. 引物包括扩增目的基因的引物及扩增内参基因的引物, 引物的设计, 要根据基因的非保守序列设计, 以保证扩增的特异性.2. 4 PCR 循环数的确定选择合适的循环数不仅能使扩增产物在琼脂糖凝胶上清晰可见和定量, 也可使扩增反应在到达平台期前的线性范围内进行.在RT-PCR 方法中, 反应的循环数是一个必须分析的参数. PCR 扩增产物的量与循环数之间有一线性关系. 前期的扩增产物量随循环数的递增而成比例增加. 随着DNA 聚合酶活性的下降和溶液中反应底物的消耗, 扩增产物将达到一个平台. 半定量分析的循环数应确定在成比例的线性关系范围内. 表达丰度不同的基因半定量分析的PCR 循环数不同.PCR 扩增反应是酶促反应, 遵循酶促反应定律, 开始的循环内扩增产物呈指数累积, 产物与模板呈线性关系, 半定量RT-PCR 技术正是利用产物与模板的这一线性关系, 通过扩增产物来对比总RNA 中目的基因的表达, 但经过一定的循环后, PCR 产物不再呈指数累积而进入平台期, 在平台期低水平表达的目的RNA 可能会增加到与高水平表达的目的RNA 相同的浓度, 因此, 为避免平台效应的影响, 合适的循环数是PCR 半定量方法的关键因素之2. 5 最佳Mg2+ 浓度的确定M g2+ 浓度对PCR 扩增的特异性和产量有显著的影响, 因为它是影响Taq 酶扩增效率的重要因素,除此之外,M g2+ 还可影响引物的退火和解链温度,影响产物的特异性以及引物二聚体的形成等. 浓度范围多在0. 5～ 5 mmo lPL , 但扩增的效率则主要视序列而定. 在一般的PCR 反应中, 各种dNTP 浓度为200 umo lPL 时,M g2+ 浓度为1. 5～ 2. 0 mmolPL 为宜. M g2+ 浓度过高, 反应特异性降低, 出现非特异性扩增, 浓度过低会降低Taq DNA 聚合酶的活性, 使反应产物减少. 实验过程中可分别取1. 0、1. 5、2. 0mmo lPLMg2+ 进行预实验, PCR 产物经琼脂糖凝胶电泳后, 通过鉴定其亮度和特异性, 来确定最适的M g2+ 浓度.2. 6 合适内参的选择设立内参照可以减少因RNA 定量时产生的误差, 也可消除细胞个数的差别所带来的误差. 为避免RNA 抽提、加样、测量、cDNA 合成及PCR 反应过程中的某些系统误差和人为误差, 实验要选用在生物体内稳定表达且在其它生理条件下不受影响或影响很小的持家基因片段作为内参.传统的半定量RT-PCR 技术多以β-act in 作内参, 另外常用的内参照还有GAPDH, 它是一种细胞内代谢酶, 其基因属于保守性强的“管家基因”, 该基因在生物体内普遍存在且稳定表达. β-M G 也是常用的内参, 研究表明18 S rRNA 具有更强的保守性和更普遍而恒定表达的特性, 因此在很多情况下也常常被用作内参. 不同的生物体其生命过程和生理过程各不相同, 选用何种内参要根据目的基因和实验的具体情况而定.3 半定量RT-PCR 法的应用半定量RT-PCR 是目前研究基因转录水平的有效手段, 可用来检测基因表达及其变化状况, 并可进行定量分析, 万平等以微管蛋白基因(Tubulin) 为对照,利用半定量RT 2PCR 法研究发现小麦锌指蛋白基因(TazF) 属于组成型表达基因. 王维平等以水稻肌动蛋白基因(Actin) 为对照, 利用半定量RT-PCR 研究, 发现水稻RCOI1基因的表达受茉莉酸甲酯(MeJA) 的诱导. 同时半定量RT 2PCR 方法在病原体检测、转基因的安全检测及肿瘤的研究方面也有非常广泛的应用.4 总结与展望半定量RT-PCR 法除了要求反转录和PCR条件完全一致外, 相比较样品之间最好同批进行RT -PCR , 对于用凝胶扫描检测PCR 扩增产物来说, 更适宜在同一块凝胶上进行电泳分离. 如果样品数量多, 由于泳道限制, 就不能同时在一块胶上电泳. 这时可采用Life Technologies 公司的定量Marker, 通过计算分析,得到PCR 扩增产物的含量, 这样就可对同批扩增的样品进行多次重复电泳检测, 以提高定量的准确性和可靠性. 另外采用反转录与PCR分开进行的两步法RT-PCR , 在实验摸索阶段较一步法RT-PCR更为经济和方便, 因为每次提取到的总RNA 立即反转录成cDNA 存放, 可以尽量避免RNA操作中的降解, 而且一次反转录的cDNA 模板可供多次PCR 使用, 不但节约成本还可缩短实验周期,提高实验成功率.若靶基因的模板量大大低于内参基因, 若按常规方法同时加入两种基因的引物进行PCR 扩增, 在同一PCR 体系中, 太高浓度的模板会竞争性地形成优势扩增, 从而使另一模板失去指数扩增. 同时, 由于PCR 扩增中“平台期”的影响, 当靶基因可用EB检测出时, 内参基因已快进入“平台期”. 因此可采用PCR 扩增时内参照引物滞后加入的方法, 使内参照与靶基因同时处于指数增长期, 这样就可避免内参的优势扩增. 另外半定量RT - PCR 检测体系必须防止混在RNA 中的基因组DNA 带来的假阳性. 为排除可能的污染, 在实验中可同时设置两个阴性对照,一是以mRNA 为模板直接进行PCR 反应, 另一组不加任何模板. 若含有基因组DNA , 则会有条带出现.总之, RT-PCR 法是讨论基因转录水平的有效手段, 利用RT 2PCR 法对mRNA 进行半定量分析,最关键的是优化实验条件, 寻求PCR 线性扩增范围, 确定最适M g2+ 浓度和PCR 循环数. 但是要使该法能够较准确地定量, 还有许多要注意的问题, 如在进行目的基因的定量分析过程中尚需考虑目的基因和内对照基因的丰度、大小以及它们的引物长短对扩增反应的影响, 另外就定量分析而言, 要使PCR产物量能够较好地反映起始模板量, 必须对处于指数扩增阶段的产物进行检测, 而它是不能通过EB 染色检测到的, 这是在利用常规PCR 方法分析目的基因表达变化过程中常遇到的难题, 大多数实验室常将定量分析过程中的PCR 扩增循环数提高到30 甚至35 个循环, 但是, 往往导致实验失败, 因此, 寻求一种高灵敏度的检测核酸数量变化的方法是今后需要努力去做的工作.。
光谱半定量分析
光谱半定量分析光谱半定量分析00在实际工作中，有时只需要知道试样中元素的大致含量，不需要知道其准确含量。
例如钢材与合金的分类、矿产品位的大致估计等等，另外，有时在进行光谱定性分析时，需要同时给出元素的大致含量，在这些情况下，可以采用光谱半定量分析。
所以光谱半定量分析的任务就是给出试样中某元素的大致含量。
光谱半定量分析的方法有三种：谱线呈现法；谱线强度比较法谱；均称线对法等。
其中线强度比较法最为常用。
1．谱线呈现法谱线强度与元素的含量有关。
当元素含量的降低时，其谱线强度逐渐减弱，强度较弱的谱线渐次消失，即光谱线的数目逐渐减少。
因此，可以根据谱现出现的条数及其明亮的程度判断该元素的大致含量。
例如：Pb含量（%）谱线λ(nm)0.001 283.3069清晰可见，261.4178和280.200很弱0.003 283.306、261.4178增强，280.200清晰0.01 上述谱线增强，另增266.317和278.332，但不太明显。
0.1 上述谱线增强，无新谱线出现1.0 上述谱线增强，214.095、244.383、244.62出现，241.77模糊3 上述谱线增强，出现322.05、233.242模糊可见10 上述谱线增强，242.664和239.960模糊可见30 上述谱线增强，311.890和269.750c出现2．谱线强度比较法光谱半定量分析常采用摄谱法中比较黑度法，这个方法须配制一个基体与试样组成近似的被测元素的标准系列（如，1%，0.1%，0.01%，0.001%）。
在相同条件下，在同一块感光板上标准系列与试样并列摄谱，然后在映谱仪上用目视法直接比较试样与标准系列中被测元素分析线的黑度。
黑度若相同，则可做出试样中被测元素的含量与标准样品中某一个被测元素含量近似相等的判断。
例如，分析矿石中的铅，即找出试样中灵敏线283.3 nm，再以标准系列中的铅283.3nm线相比较，如果试样中的铅线的黑度介于0.01% ~ 0.001%之间，并接近于0.01%，则可表示为0.01% ~ 0.001%。
半定量
半定量又叫半定量PCR半定量是RT-PCR做基因表达分析的一种方法，其操作的方法是在野生型和突变体中用一个看家基因（通常是actin）做参照标准来观察目标基因在各自的表达情况（上调还是下调），所谓半定量的“半”是通俗的说法，即在看电泳图估计参照亮度一致（可看作是表达的细胞数一致）情况下，确定目标基因的表达；这是与更加精确的Q-PCR的相对定量和绝对的量区分。
半定量解释（semi-quantitative interpretation）是介于定性和定量之间的解释。
尽管使用了数学方法对地质目标的空间位置或物性进行了数值计算，也获得了量值，但由于这些方法的使用是有非常严格的前提条件的，而在实际情况下这些条件是不满足的，所以这些定量计算的结果只能从趋势上为解释人员提供参考。
半定量分析定性分析是能区分出是个什么东西。
举个例子来说，你能辨认出这是苹果，但你不能确定是几个苹果。
定量分析是在定性的基础上给出清晰的数量关系。
比如，你确定了这是5个苹果。
而半定量分析是通常实现定量分析非常困难时采取的一种则中办法。
还是举例说明。
这里有一堆苹果，你不知道具体的数量。
但是你能知道的是这一堆苹果能装5麻袋。
这5麻袋的数量估计就是半定量分析。
定量PCR是PCR的一种。
PCR仪目的为了基因扩增。
在基因扩增中最重要的就是升降温过程，最早的PCR就是三个水浴锅,一个机械臂，定时抓出反应槽转换水浴锅。
PCR的结果需要借助其他手段来检测。
后来随着定量技术的发展，将PCR和检测做成一体，就形成了定量PCR仪。
还可以与荧光技术结合，同时在每个扩增过程都能实施监控。
定量PCR（PolymeraseChainReaction）技术有广义概念和狭义概念。
广义概念的定量PCR技术是指以外参或内参为标准，通过对PCR终产物的分析或PCR过程的监测，进行PCR 起始模板量的定量。
广义概念下的定量PCR技术可以分为五种类型：（1）外参法+终产物分析。
所谓“外参法”是指样本与阳性参照在两个反应容器内反应。
看谱的半定量分析
6.分析合金元素时应由低含量到高含量进行， 以免因为污染电极或干扰而造成误判。
7.看谱分析时应先对谱线范围内旳合金元素 逐一定性再进行半定量分析。
8.考虑预燃时间,因为每种合金元素都有一定 旳“燃烧”特征，所以看谱分析要考虑预 燃时间，因为大多数合金元素必须经过一 定旳燃烧时间谱线强度才稳定，只有这时 进行强度评估时比较可靠
11.光谱色区旳选择 眼睛对5500Å左右旳光谱区域(绿色区) 有最大旳敏捷度，眼睛较敏感旳光谱 区域进行强度评估，其精确度较高。 而对红色和紫色区域，眼睛旳敏捷度 会明显地下降，所以对这些色区中旳 观察鉴定时要尤其注意,工作场地保持 较暗旳光线也是必要旳。
12.进行看谱分析时还要注意表面氧化层 或其他污染物对分析轻易造成旳分析 误差，必要时要将其打磨掉。同步每 测定一种钢材都应更换固定电极（圆 盘电极应更换新旳位置），以预防因 为电极污染而造成份析误差。对轻易 产生成份偏析旳试件、铸件及大致积 试件，均应在一定旳距离内多选几种 分析点进行半定量分析并取平均值， 以确保分析成果尽量精确。
弧焰中边沿部分蒸气原子，一般比弧焰中心原子 处于较低旳能级,因而当辐射经过这段路段时， 将为其本身旳原子所吸收，而使谱线中心强度减 弱，这种现象称为自吸 当元素浓度高时谱线产生严重旳自吸，称为自蚀 伴随原子浓度旳增长，谱线强度逐渐趋于一恒定 （饱和）值，而不再随浓度旳增长而增大
处于高能级原子旳辐射能被处于 低能级旳同类原子所吸收，使谱 线相对强度旳对数与浓度对数间 旳线性关系受到破坏。
11.光谱色区旳选择 对红色和紫色区域，眼睛旳敏捷度会明显 地下降，工作场地保持较暗旳光线也是必 要旳。
原子发射光谱 定量和半定量
原子发射光谱（Atomic Emission Spectrometry，AES）是一种利用物质在热激发或电激发下，每种元素的原子或离子发射特征光谱来判断物质的组成，进行元素的定性与定量分析的方法。
原子发射光谱法具有多元素检测、分析速度快、选择性好、检测限低、准确度高、误差较小、试样消耗少、线性范围大等优点。
然而，它也存在一些局限性，如不能非金属、光谱复杂、价格昂贵等。
在原子发射光谱法中，定量和半定量的分析主要依据以下原理：
1. 定量分析：通过测量待测物质中各元素的发射光谱强度，与标准光谱强度进行比较，从而计算出待测物质中各元素的含量。
常用的定量分析方法有：标准曲线法、标准加入法、内标法等。
2. 半定量分析：通过比较待测物质中某元素的发射光谱与已知浓度的标准物质光谱，对待测物质中该元素的含量进行大致估算。
半定量分析常用的方法有：目视法、比较法等。
在实际应用中，原子发射光谱法可对约70 种元素（包括金属元素及磷、硅、砷、碳、硼等非金属元素）进行分析。
在一般情况下，用于1% 以下含量的组份测定，检出限可达ppm，精密度为10% 左右，线性范围约2 个数量级。
这种方法可有效地用于测量高、中、低含量的元素。
化学计量实验教案：半定量分析的方法和应用
化学计量实验教案：半定量分析的方法和应用半定量分析的方法和应用化学计量实验是化学教育中的重要实验之一，是化学学科中非常重要的一个分支。
化学计量实验是以化学计量基本原理为基础，通过实验技术和方法来进行定量或半定量分析的一种实验方法。
化学计量实验的应用非常广泛，可以用于环境监测、食品检验、药品制造等领域。
本文将重点介绍化学计量实验中的半定量分析方法和应用。
一、半定量分析的方法半定量分析是一种只能得到样品中化学物质约定量的方法。
下面列举几种半定量分析常用的方法：1、滴定法滴定法是一种利用滴定液与被测液体反应生成定量产物的方法。
该方法可以用于计算定量的物质，但是无法得到准确的结果。
因此，它通常是被用于半定量分析。
滴定法的基本原理是利用滴定液中的一种化学物质来与被测液体中的目标化学物质反应，生成定量产物，如常用的KMnO4滴定法、HClO4滴定法等。
2、分光光度法分光光度法是一种可以利用吸收特定波长的光来测定化学物质浓度的方法。
它基于分子吸收光的本质，可用于半定量或使用校准曲线来进行定量分析。
该方法又称分光光度测定法，常用于分析痕量元素。
3、比色法比色法是利用化学物质与某种显色剂反应，使溶液颜色发生变化进行半定量分析的一种方法。
该方法与分光光度法的原理类似，但是常常受到样品矩阵干扰的影响。
二、半定量分析的应用1、环境监测半定量分析在环境监测中应用广泛，可以用于测定水、大气、土壤等中的污染物含量。
如利用滴定法测定水中硬度离子的含量、利用光度法测定大气中氧化物浓度的方法等。
2、食品检验食品安全问题一直是人们所关注的话题，半定量分析方法在食品检测中有着非常重要的应用。
如利用比色法检测食品中的添加剂、利用滴定法测定食品中盐分含量、利用分光光度法测定食品中的微量元素等。
3、药品制造半定量分析方法在药品制造中也应用广泛。
如利用分光光度法检测药品中的杂质、利用滴定法测定药品中有效成分的含量、利用比色法测定药品中添加剂的含量等。
半定量分析方法课件
结果评估和优化：如何
对分析结果进行评估和
优化
• 需要根据具体问题和数据情况进
• 需要建立完善的评估标准和优化
行研究
方法
半定量分析方法的发展趋势
多学科交叉融合：结合统计学、计算
机科学、管理科学等多学科知识
• 促进半定量分析方法的发展和创
新
智能化与自动化：利用
人工智能、大数据等技
术提高分析方法的智能
化和自动化程度
半定量分析方法课件
S M A R T C R E AT E
CREATE TOGETHER
01
半定量分析方法的概述与应用领域
半定量分析方法的定义与特点
半定量分析方法是一种结合定量与定性分析的技术
• 依赖数据收集和统计分析
• 结合专家知识和经验
• 提供近似结果而非精确数值
半定量分析方法的特点
• 灵活性：适应不同场景和需求
• 为生态保护提供支持
环境政策效果评估：评估环境政策和措施的效果
• 为政策调整提供依据
半定量分析方法在交通规划中的应用
交通需求预测：预测未来交通需求和变化趋势
• 为交通网络优化提供依据
道路拥堵分析：分析道路拥堵情况和影响因素
• 为交通政策制定提供依据
交通政策效果评估：评估交通政策和措施的效果
• 为政策调整提供依据
• 缺点：模型构建和求解复杂，需要专业知识
03
基于专家知识的半定量分析方法
• 优点：充分利用专家知识和经验，适用于复杂问题
• 缺点：专家知识获取和表示困难，结果受专家影响较大
03
半定量分析方法的原理与技术
半定量分析方法的基本原理
数据收集与处
理：收集相关
半定量检测名词解释_概述及解释说明
半定量检测名词解释概述及解释说明1. 引言1.1 概述半定量检测是一种常用的分析方法，用于测量分析样品中特定物质的含量。
相比于定量检测，它并不能给出具体的数值结果，但可以通过一系列定性和半定量的方式来判断目标物质的相对含量。
半定量检测在科学研究和工业应用中具有广泛的应用价值，并且随着技术的不断发展，其在医学领域中也扮演着重要角色。
1.2 文章结构本文将以以下结构进行阐述半定量检测名词解释与相关内容。
首先，在引言部分进行概述，并说明本文的目的；然后，在第二部分介绍半定量检测名词解释以及与定量检测之间的区别，并探讨其基本原理和意义；接下来，第三部分将详细介绍半定量检测中常见的技术和方法，包括周期性染色法、尺度分析法和标准曲线法；第四部分将通过实例分析，探讨半定量检测在医学领域中的应用，包括血糖水平、癌症标志物和药物代谢产物的半定量检测方法研究；最后，第五部分将总结大纲中各部分的主要发现，并提出对未来研究方向的建议和展望。
1.3 目的本文旨在全面解释半定量检测这一概念，并介绍其基本原理、常见技术方法以及在医学领域中的应用。
通过对半定量检测的深入了解，读者可以更好地理解该分析方法在实际应用中的significance 并为相关领域的研究提供参考和借鉴。
2. 半定量检测名词解释2.1 定量检测与半定量检测的区别：定量检测是一种可以精确确定样品中物质含量的方法，常用于实验室研究和临床诊断等领域。
它通常使用标准曲线法或其他精确计量方法来确定物质的浓度，结果以具体数值表示。
相比之下，半定量检测采用一些基于相对关系的方法来估计物质含量，结果以相对强度、阳性与阴性判读或者分级等方式进行表示。
半定量检测主要适用于需要对样本进行相对比较或筛查的情况，例如初步评估某种物质在不同样品中的相对水平。
2.2 半定量检测方法的基本原理：半定量检测方法通常利用观察到的信号强度与被测试物质含量之间的关系进行估计。
这些方法往往基于一些可观察到的特征或者指标，如颜色、荧光、尺度分析结果等。
半定量分析法原理
半定量分析法在自然科学研究中的应用
自然科学研究中的半定量分析方法
• 层次分析法：用于评价指标体系构建、影响因素分析等领域 • 模糊综合评价法：用于综合评价、预测等领域 • 信息论方法：用于信息处理、数据挖掘等领域
半定量分析法在自然科学研究中的应用实例
• 生态系统研究：评估生态系统健康状况和影响因素 • 材料科学研究：评价材料性能和应用前景 • 医学研究：分析疾病发生机制和治疗方案
半定量分析法的数据收集与处理策略
半定量分析法的数据收集策略
• 设计合理的问卷和调查表 • 选择合适的调查对象和范围 • 采用多种数据收集方法：如访谈、座谈会、问卷调查等
半定量分析法的数据处理策略
• 数据预处理：筛选、整理和分类数据 • 数据分析：运用半定量分析方法对数据进行处理 • 数据解释：根据分析结果进行解释和评价
SMART CREATE
半定量分析法原理与应用
CREATE TOGETHER
01
半定量分析法的定义与重要性
半定量分析法的概念及发展历程
半定量分析法 是一种定性分 析与定量分析 相结合的研究
方法
01
• 定性分析：依赖于主观判断 和描述 • 定量分析：依赖于数值和统 计
半定量分析法 的起源可以追 溯到20世纪初
提高可靠性
• 严格数据收集和处理：确保数据的真实性和客观性 • 多方法对比和验证：提高分析结果的可靠性和准确性 • 反馈和迭代：根据实际应用效果，不断优化和改进方法
THANK YOU FOR WATCHING
谢谢观看
CREATE TOGETHER
挑战
• 方法创新：如何突破现有方法的局限性 • 数据质量：如何提高数据收集和处理的质量 • 结果验证：如何验证分析结果的准确性和可靠性
一种XRD半定量分析
一种XRD半定量分析XRD（X射线衍射）半定量分析是一种广泛应用于材料科学领域的表征方法。
XRD技术利用X射线与物质相互作用的原理，通过测量物质中晶体的衍射图案来确定晶体的结构和组成。
在XRD半定量分析中，我们将介绍XRD技术的基本原理和半定量分析的步骤、应用以及优缺点。
XRD技术的原理是利用X射线与物质相互作用时的衍射现象。
当入射X射线与晶体中的原子或分子相互作用时，会发生衍射现象，衍射角度与晶体的结构密切相关。
通过测量衍射角度和强度，可以获取晶体的结构信息和组分信息。
XRD仪器一般由X射线源、样品台、光学系统和探测器等组成。
在进行XRD半定量分析时，首先需要制备样品并固定在样品台上。
然后，样品会被暴露在X射线源下，然后通过旋转样品台进行扫描，记录不同角度下的衍射信号。
接下来，对于半定量分析，我们需要将实验数据与标准样品进行比较。
标准样品是已知成分和结构的样品，用于建立反射衍射峰与物质特征的关联关系。
通常，可以使用粉末衍射数据库中的数据进行匹配。
半定量分析的步骤包括峰识别、计算晶体结构参数和定量计算。
在峰识别中，需要根据实验数据中的峰位置和峰强度进行峰的识别和归属。
然后，根据峰的位置、强度和峰型，可以计算出晶体结构的参数，如晶格常数、结晶度等。
最后，通过校正、拟合和配准等操作，可以进行半定量的成分计算。
XRD半定量分析在很多领域都有广泛的应用。
在材料科学中，可以用于材料的结构表征、相变研究、缺陷分析等。
在地质学中，可以用于矿石和岩石的成分分析和鉴定。
在制药行业中，可以用于药物成分和结构的分析。
此外，XRD半定量分析还可以应用于材料的质量控制和改良，以及环境污染物的检测等。
然而，XRD半定量分析也存在一些限制和挑战。
首先，XRD技术对样品的制备要求较高，样品必须是细粉末形式，且无杂质。
此外，对于非晶体材料和无定形材料，由于缺乏晶体结构，XRD分析的结果可能不准确。
此外，随着样品中的相数和晶体的晶粒尺寸减少，XRD分析的灵敏度也会降低。
04-半定量分析方法
在萨蒂设计的1～9尺度法中，bij的取值范围是1，2，„，9及其 互反数。萨蒂这样做的理由是： 1）在进行定性成对比较时，人们头脑中通常有5种明显的等级。 2）心理学家认为，进行成对比较的因素太多，将超出人的判断 能力，最多大致在7±2范围。如以9个为限，用1～9尺度表示它 们之间的差别正合适。 3）萨蒂曾用1～3，1～5，„，1～17，„，（d＋0.1）～（d＋ 0.9）（d=1，2，3，4），1p～9p （p=2，3，4，5）等共27种比 较尺度，对在不同距离处判断某光源的亮度等实例构造成对比 较阵，并算出权向量。把这些权向量与按照光强定律等物理知 识得到的实际的权向量进行对比发现，1～9尺度不仅在较简单 的尺度中最好，而且结果并不劣于较复杂的尺度。
一致性检验
层次分析法判断矩阵的构成具有独特性，任何一个专家 在对复杂系统按层次分析法中判断矩阵的构成进行逐对判断 时，其结果原则上应满足式4-11。但这只是一种理想状态。 由于客观事物的复杂性和人们认识能力的局限性，人们在对 客观事物进行判断时，难免会出现一些或大或小的差错，若 差错很小并且在允许的范围之内，则可以考虑接受所得到的 结论；但是，如果差错太大，超出了允许的范围，则所得到 的结论不能被接受，专家的判断是无效的。为了保证利用层 次分析法得到的结论基本合理，必须对人们对客观事物的定 性分析判断进行严格的“是否一致”的定量检验。
4.1.4 派生的德尔菲法
保持德尔菲法基本特点的派生的德尔菲法 列出预测事件一览表 向专家提供背景材料
减少应答轮数
对预测结果进行自我评价
给出事件的多个可能实现时间的日期
4.1.4 派生的德尔菲法
部分地改变德尔菲法基本特点的派生德尔菲法
部分取消匿名性
部分取消反馈
半定量分析方法(信息分析)
查先进
.
§4 半定量分析方法
.
§4.1 德尔菲法 §4.2 交叉影响分析法 §4.3 层次分析法 §4.4 内容分析法
.
§4.1 德尔菲法
.
4.1.1 德尔菲法的特点
匿名性 反馈性 统计性
.
4.1.2 德尔菲法预测征询的过程 成立预测领导小组
——对预测工作进行组织和指导
明确预测目标
t
3k1 2
n 2k k为奇数
t
3k 2
t
3k 2
1
2
n 2k
k为偶数
.
4.1.2 预测结果的数据处理与表达
对某方案在总体方案中所占最佳比重预测结果的数据处理
与表达
➢这类预测结果一般为百分制形式。 ➢可用直方图表示。直方图横坐标表示专家对该方案应占最佳
比重的评价值，横坐标分成若干个间距相等的区段；纵坐标表 示作出属于某一区段的最佳比重预测结果的专家数与参加预测 的专家总数的比值。
.
.
4.1.4 派生的德尔菲法 保持德尔菲法基本特点的派生的德尔菲法 ➢列出预测事件一览表 ➢向专家提供背景材料 ➢减少应答轮数 ➢对预测结果进行自我评价 ➢给出事件的多个可能实现时间的日期
.
4.1.4 派生的德尔菲法 部分地改变德尔菲法基本特点的派生德尔菲法 ➢部分取消匿名性 ➢部分取消反馈
.
4.1.2 德尔菲法预测征询的过程
编制调查表
➢目标——手段调查表 ➢由专家简要回答的调查表 ➢由专家详细回答的调查表
进行反馈调查和专家意见的汇总、统计分析与预测
➢第一轮调查 ➢第二轮调查 ➢第三轮调查 ➢第四轮调查
编写和提交预测报告
.
4.1.3 预测结果的数据处理与表达
半定量分析方法(信息分析课件)
风险评估：评估项目或决策的风险程度 半定量分析方法：结合定性和定量分析，提高评估准确性 应用领域：金融、工程、环境等领域 应用实例：风险评估模型、风险矩阵等
结合定性与定量分析，提高分析的准确性 适用于复杂、多变的环境，能够更好地反映实际情况 易于理解和应用，便于决策者理解和接受 具有较强的灵活性，可以根据实际情况进行调整和改进
背景：某公司面临市场竞争，需要了解竞争对手的实力和策略
方法：采用半定量分析方法，对竞争对手进行评估
步骤： a. 收集竞争对手的信息，包括市场份额、产品特点、销售渠道等 b. 对竞争对手进行评分， 根据评分结果进行排序 c. 分析竞争对手的优势和劣势，找出自己的机会和威胁
● a. 收集竞争对手的信息，包括市场份额、产品特点、销售渠道等 ● b. 对竞争对手进行评分，根据评分结果进行排序 ● c. 分析竞争对手的优势和劣势，找出自己的机会和威胁
适用于无法进行精确定量分析的情况 适用于需要快速、简便地获取分析结果的情况 适用于需要综合考虑多种因素的情况 适用于需要评估不确定性和风险的情况
信息收集：通过半定量分析方法收集大量信息，包括文本、图像、音频等
信息处理：对收集到的信息进行预处理，包括清洗、去噪、分类等
信息分析：利用半定量分析方法对信息进行深入分析，包括文本挖掘、情感分析、趋势 预测等
准确性有限：半定量分析方法无法提供精确的定量结果，只能给出大致的估计值。
适用范围有限：半定量分析方法只适用于某些特定的问题或领域，无法广泛应用于所有 问题。
主观性较强：半定量分析方法往往需要依赖于专家的经验和判断，因此主观性较强，可 能受到个人偏见的影响。
计算复杂性：半定量分析方法可能需要进行复杂的计算和建模，增加了分析的难度和耗 时。
半定量分析方法
分析各因素的关联、隶属关系，构造
系统的递阶层次结构
• 递阶层次结构
–是关于系统结构的抽象概念，是为研究系统各元素的相互 关系与功能的相互作用而构造的。这些元素按其属性的不 同，分成若干组，形成互不相交的层次。
–上一层次的元素作为准则对相邻的下一层次的全部或部分 元素起支配作用，同时它又受到更上一层元素的支配，这 样就形成了层次间自上而下的逐层支配关系。
t
k 2
tk
2
1
2
n 2k
k为偶数
上四分点
t上
t 3k3
n 2k 1 k为奇数
t
3k 2
2
1
t 3k
2
2
2
n 2k 1 k为偶数
t
3k1 2
n 2k k为奇数
t
3k 2
t 3k
2
1
2
反馈性
组织者要对每一轮咨询的结果进行整理、分析、 综合，并在下一轮咨询中匿名反馈给每个受邀 专家，以便专家们根据新的调查表进一步的发 表意见。经典的特尔菲法一般要经过四轮咨询。
反馈是特尔菲法的核心。在每一轮反馈中，每 个专家都可以参考别人的意见，冷静地分析其 是否有道理，并在没有任何压力的情况下进一 步发表自己的意见。
D1─用煤炭代替石油； D2─降低石油价格；
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• 组织者自始至终都不应发表自己的意见，影响和干 扰专家的独立思考和判断。
2020年4月3日3时26分
16
4.1.3 预测结果的数据处理与表达
对方案相对重要性预测结果的数据处理与表达
➢专家意见的集中程度
算术平均值
M j
1 mj
m
Cij
i 1
满分频率
12
途径
途径a 途径b 途径c
目标 （提高我校学术水平） 子目标A 子目标B 目标C 目标D 发表文章 获得课题 取得成果
2020年4月3日3时26分
13
事件实现时间调查表
预测问题
事件实现时间（某一时间实现该 事件的概率估计）
10%概率
50%概率 90%概率
实现某一事件
达到某一水平 解决某个问题
2020年4月3日3时26分
7
✓ 反馈性
组织者要对每一轮咨询的结果进行整理、分析、 综合，并在下一轮咨询中匿名反馈给每个受邀 专家，以便专家们根据新的调查表进一步的发 表意见。经典的特尔菲法一般要经过四轮咨询。
反馈是特尔菲法的核心。在每一轮反馈中，每 个专家都可以参考别人的意见，冷静地分析其 是否有道理，并在没有任何压力的情况下进一 步发表自己的意见。
– 对于缺乏足够原始数据的军事和技术领域的预测，以及需要根 据众多因素的影响才能作出评价的军事和技术领域的预测；
– 对于那些社会、经济、科学技术的发展在很大程度上取决于政 策和人为的努力，而不是主要取决于该领域本身的预测。
• 特尔菲法主要有以下五个方面的用途：
– 对达到某一目标的条件、途径、手段及它们的相对重要程度作 出估计；
5
4.1.1 德尔菲法的特点
匿名性
反馈性
统计性
2020年4月3日3时26分
6
✓ 匿名性
匿名发函调查，受邀专家之间互不见面， 亦不联系。
专家们可以不 受任何干扰的独立的对调查 表所提问题发表自己的意见，不必作出解 释，甚至不必申述理由，而且有充分的时 间思考和进行调查研究、查阅资料。
匿名性保证了专家意见的充分性和可靠性。
查这件事，以免相互商量，答案雷同
2020年4月3日3时26分
11
4.1.2 德尔菲法预测征询的过程
编制调查表
➢目标——手段调查表 ➢由专家简要回答的调查表 ➢由专家详细回答的调查表
进行反馈调查和专家意见的汇总、统计分析与预测
➢第一轮调查 ➢第二轮调查 ➢第三轮调查 ➢第四轮调查
编写和提交预测报告
2020年4月3日3时26分
2020年4月3日3时26分
14
要求说明的调查表
2020年4月3日3时26分
15
调查表设计：应注意的问题
• 尽可能的表格化、符号化、数字化。
– 咨询答案除必须用文字表述的以外，应尽可 能要求用数 字或符号表述。这样便于后期的数据处理与表达。
– 应在调查表上留有充分的空白，好让专家充分发表自己的 意见，进行阐述或论证。
K
j
m j mj
评价等级和
mj
S j Rij i 1
2020年4月3日3时26分
17
4.1.2 预测结果的数据处理与表达 对方案相对重要性预测结果的数据处理与表达 ➢专家意见的协调程度
——反映专家意见的收敛情况，通常用变异系数来表示
1）计算全部专家对j方案评价的均方差
Dj
1 mj
mj i 1
▲专家个人预测法容易受专 家个人的经历、知识面、时 间和实际占有资料的限制， 有片面性和较大的误差。
▲专家会议预测法，虽然弥 补了个人预测的不足，但是 容易受会议气氛和权威的误 导，或不愿公开表示修正自 己的意见，或没有足够的时 间和资料佐证自己的发言。
2020年4月3日3时26分
4
• 特尔菲法特别适用于：
Cij M j
2
2）计算全部专家对j方案评价的标准差
j
1 mj
2
m j i 1 Cij M j
2020年4月3日3时26分
18
4.1.2 预测结果的数据处理与表达 对方案相对重要性预测结果的数据处理与表达
3）计算全部专家对j方案评价的变异系数
Vj
j
Mj
➢专家积极性系数
Caj
mj m
2020年4月3日3时26分
▲分析和处理结果
明确预测目标
▲最后提出预测报告
——选择和规划预测课题，明确预测项目
2020年4月3日3时26分
10
4.1.2 德尔菲法预测征询的过程
Hale Waihona Puke 选择参加预测的专家➢ 专家的代表面应广泛 ➢ 专家的权威程度要高 ➢ 专家应有足够的时间和耐心填写调查表 ➢ 专家的范围应有所限制 ➢ 专家的人数一般控制在15--50人 ➢ 应事先约请专家不要向外透露参与征询调
– 对未来事件实现的时间进行概率估计； – 对某一方案（技术、产品等）在总体方案（技术、产品等）
中所占的最佳比重作出概率估计； – 对研究对象的动向和在未来某个时间所能达到的状况、性能等
作出估计； – 对方案、技术、产品等作出评价，或对若干备选方案、技术、
产品评价出相对名次，选出最优者。
2020年4月3日3时26分
§4 半定量分析方法
2020年4月3日3时26分
1
§4.1 德尔菲法 §4.2 交叉影响分析法 §4.3 层次分析法 §4.4 内容分析法
2020年4月3日3时26分
2
§4.1 德尔菲法
2020年4月3日3时26分
3
• 德尔菲法是对专家个人预测法和专家会议预测法的 改造和深化，并逐步取代了这两种专家预测法。
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4.1.2 预测结果的数据处理与表达
对事件实现时间预测结果的数据处理与表达
以中位数代表专家意见的协调程度，以上下四分点代表专家意见分散 程度
➢预测结果的中位数和上下四分点的确定
杨奇（E.Jantsch）总结出了中位数与上、下四分点之间近似的数学关系。 即如果设x是中位数时间与进行预测的时间之间的距离，则下四分点位于 进行预测的时间加2x/3处，上四分点位于进行预测的时间加5x/3处。
特尔菲法的统计性特点有利于将一般定性问题 用定量化方法处理，并以定量结果表述。
2020年4月3日3时26分
9
▲负责拟定信息预测的
课题任务书
▲编制函询调查表
4.1.2 德尔菲法预测征询的过程 ▲选择参加的专家
▲寄发和回收调查表
成立预测领导小组
▲对每次回收的意见进
——对预测工作进行组织和行指汇导总整理
多次反馈保证了专家意见的充分性和最终结论 的正确性、可靠性。
2020年4月3日3时26分
8
✓ 统计性
对诸多专家的回答必须进行统计学处理，以概 率的形式出现，它既反映了专家意见的集中程 度，又可反映专家意见的离散程度。
为了便于对应答专家意见的统计处理，对调查 表的设计中多采用表格化、符号化、数字化。