Bcl-2简介
Bcl—2与肿瘤转移的研究进展
Bcl—2与肿瘤转移的研究进展转移是恶性肿瘤最主要的生物学特性之一，是危及患者生命的主要原因。
Bcl-2分子一直以来被认为是抗凋亡的关键因子，但近期研究表明Bcl-2分子在促进肿瘤转移中也发挥重要作用。
本文从细胞水平、动物模型和临床样本三个方面，针对Bcl-2分子在调节细胞迁移、侵袭和肿瘤转移中的作用及相关分子机制进行论述，并对以Bcl-2分子为靶标的治疗策略进行展望，期望为抑制肿瘤转移提供依据。
[Abstract] Metastasis is one of the most important biological characteristics of malignant tumor，and it is the main risk factor to the patient’s life. Bcl-2 is considered as a key factor in anti-apoptosis，but recent studies show that Bcl-2 may play an important role in promoting tumor metastasis. In this paper，review the function of bcl-2 in regulating cell migration，invasion and tumor metastasis and discuss associated molecular mechanism in cellular，animal models and patients levels，and also make a prospect for the therapeutic strategy to target Bcl-2，in order to provide a basis for the inhibition of tumor metastasis.[Key words] Bcl-2；Tumor metastasis；MicroRNA转移是恶性肿瘤最主要的生物学特性之一，是危及患者生命的主要原因。
Bcl-2与细胞凋亡
Bcl-2与细胞凋亡摘要Bcl-2基因是一原癌基因，能抑制细胞凋亡。
但近年研究发现，存在有Bcl-2敏感和不敏感的细胞凋亡现象。
Bcl-2抑制细胞调亡的机制目前仍然不清，大多认为与Bcl-2的细胞内抗氧化作用及抑制钙离子的跨膜运动有关。
最近，Reed提出Bcl-2具有离子通道蛋白和吸附/锚定蛋白的双重特性，并阐述了Bcl-2抑制细胞凋亡的某些机制。
关键词：Bcl-2；细胞凋亡自从1972年Kerr提出细胞凋亡（aoptosis）的概念至今，人们对细胞凋亡现象进行了广泛、深入的研究。
但是，凋亡的分子和生化机制迄今尚未彻底明了；而已形成的初步认识大多源于对Bcl-2基因家族的研究。
已知，调亡进程可分为三个时相：诱导期，效应期和降解期。
在诱导期，细胞接受各种信号从而引发各种不同的效应：进入效应期后，经过一些决定细胞命运（存活/死亡）的分子调控点，细胞进入不可逆的程序化死亡，这些调控分子包括一系列原癌基因和抑制癌基因的产生，其中Bcl-2家族起着决定性的作用；降解期则产生可见的凋亡现象[1]。
Bcl-2基因（即B细胞淋巴瘤/白血病-2基因）是一种原癌基因，它具有抑制凋亡的作用，并用近年来的一些研究已开始揭示这一作用的机制。
目前已经发现的Bcl-2蛋白家族按功能可分为两类，一类是象Bcl-2一样具有抑制凋亡作用，如哺乳动物的Bcl-X1、Bcl-W、Mcl-1、A1、线虫Ced-9、牛痘病毒E1B119kD等，而另一类具有促进凋亡作用，如Bax、Bcl-Xs、Bad、Bak、Bik/k、Bid和Harakiri[2]。
最初在血液淋巴细胞中发现Bcl-2能抑制细胞死亡，随后陆续在其它一些细胞中也发现Bcl-2的这种作用。
但近年来研究发现，除些之外尚存在Bcl-2不敏感的凋亡途径。
本文拟就凋亡与Bcl-2的关系及其研究进展作一综述。
1 Bcl-2敏感的凋亡途径Bcl-2可以抑制由多种细胞毒因素所引起的细胞死亡。
Bcl-2 PCR Primers Set 产品说明书
bcl-2 PCR Primers Set Product No. B9179 Store at –20 ºCProduct DescriptionIn recent years, several genes have been linked to apoptosis. The bcl-2 family of genes regulates PCD either positively or negatively. Bcl-2 and members of its family have been found to block apoptotic cell death. Bcl-2 protein heterodimerizes with Bax (Bcl-2 Associated X protein), which is a potent mediator of programmed cell death. The Bcl-2/Bax ratio appears to determine whether some cells live or die.1-4The bcl-2 PCR Pr imers Set contains both sense and antisense primers for the amplification of the bcl-2αgene. It is designed for PCR† detection of human, rat and mouse cDNA levels (representing mRNA expression) of the bcl-2α apoptotic gene. No ampli-fication of the genomic DNA has been observed.The size of the amplified product resulting from the use of the bcl-2 PCR Primers Set is 127 bp.Component• bcl-2 PCR Primers Set, Product No. B9179 1 vial Equipment and Reagents Required but Not Provided (Sigma product numbers have been given where appropriate)• Thermal cycler• Taq DNA polymerase, Product No. D4545 or equivalent• Deoxynucleotide mix, 10 mM, Product No. D7295 or equivalent• Agarose• Ethidium bromide, 500 µg/ml, Product No. E1385 • PCR 100 bp low ladder, Product No. P1473• Gel loading solutions, Product No. G2526 or G7654• PCR grade water, Product No. W1754• Mineral oil, Product No. M8662• PCR microtubes, Product No. Z37,487-3 or Z37,496-2StorageStore the vial at −20 °C.Preparation InstructionsThe bcl-2 PCR Primers Set contains 1 nmoles of each primer (sense and antisense). Centrifuge the tube briefly in order to collect the tube contents. For the following procedure, resuspend the primers set in100 µl deionized water to a final concentration of10 pmole/µl. Mix until the solution is homogenous. Once suspended, store the solution at –20 °C. To avoid repeated freeze-thaw cycles, aliquot the primer solution for long-term storage.ProcedureNote: Use aseptic techniques and use aerosol barrier tips while performing PCR experiments.1. Thaw the bcl-2 PCR Primers Set on ice, beingsure that the solution is homogenous.2. Add the following reagents to a PCRmicrocentrifuge tube in the following order:Amount for50 µl singlePCRreactionFinalconcentrationin the PCRreaction Water To 50 µl ----10X PCR Buffer 5 µl 1X2 mM dNTP solution 5 µl 0.2 mM ofeach dNTP25 mM MgCl2*solution3 µl 1.5 mMbcl-2 PCR PrimersSet, 10 pmole/µl2 µl 0.4 µM cDNA** 2 µl ~30 ngTaq DNAPolymerase,5 units/µl1 µl 0.1 units/µl Total volume50 µl -* When using the bcl-2 PCR Primers Set for thefirst time, you may set two additional reactiontubes with a higher and a lower MgCl2concentrations (see Note at the end of thissection).** Optimize this parameter with your own cDNA.3. Mix gently by finger tapping and centrifuge briefly to collect the mixture in the bottom of the tube. Overlay the reaction mixture with 2 drops (~30 µl) of mineral oil to cover the surface of the reaction mixture if not using a thermal cycler with a heated lid. Place the tube in the thermal cycler when the thermal cycler reaches 95 oC, and run the following PCR program. 95 oC for 2 min 94 oC for 45 sec 53 oC for 45 sec x 30 cycles 72 oC for 1.5 min 72 oC for 7 min The amplified DNA can be evaluated by agarose gel electrophoresis.Note: Using different thermal cyclers:For a better detection of the amplified product you may increase the number of amplification cycles. In case you do not see differences in the amount of the amplified DNA fragments, decrease the number of cycles to verify your results.In rare cases, some of the parameters should beoptimized for the specific thermal cycler or cDNA samples. The most frequently adjusted factors are MgCl 2 concentration and annealing temperature. You may prepare three different reactions using MgCl 2 at a concentration of 0.5-3 mM (e.g., 0.5-0.8 mM, 1.5 mM and 3 mM). Optimize the MgCl 2 and/or the annealing temperature on your instrument using the positive control cDNA provided before using your own cDNA.Troubleshooting GuideProblem Cause Solution A PCR component may be missing or degraded. Try to isolate the problematic reagent by replacing it with a fresh one. A checklist is also recommended when assembling reactions.No PCR products cDNA or MgCl 2concentration is not optimal .Optimize the cDNA and MgCl 2 concentrations.Highbackground, smearing or nonspecific bandsIncrease the annealing temperature or decrease the MgCl 2concentration. Another solution for avoiding high background is to decrease the amount of cDNA template used for amplification.Contamination with other DNAUse sterile techniques while performing PCR experiments. cDNA quality is not sufficientUse a different cDNA preparation.Amplifiedproducts are not the correct sizeNon-optimal PCR conditions Optimize PCR conditions especially cDNA and MgCl 2 concentrations and annealing temperature. Poor resolution of products in agarose gelUse 2% agarose gel and increase run time.References1. Oltavi, Z.N., et al ., Cell, 74, 609 (1993)2. Korsmeyer, S.J., Cancer Research (Suppl), 59,1693s (1999)3. Agarwal, N. and Metha, K., Biochem. Biophys.Res. Commun., 230, 251 (1997)4. Aggarwal, S. and Gupta, S., J. Immunol., 160,1627 (1998)†The PCR process is covered by patents owned by Hoffman-LaRoche, Inc. Purchase of this product does not convey a license under these patents.ya 6/00Sigma brand products are sold through Sigma -Aldrich, Inc.Sigma-Aldrich, Inc. warrants that its products conform to the information contained in this and other Sigma -Aldrich publications. Purchaser must determine the suitability of the product(s) for their particular use. Additional terms and conditions may apply.Please see reverse side of the invoice or packing slip.。
Bcl_2_Bax比率与细胞_命运_王卫东
内在途径是通过线粒体实现的 。细胞 在应激或受 到细胞毒物 、化疗药物 (凋 亡诱导信 号 )作 用时 , 会导 致线粒体的破坏 , 使线粒体内外膜之 间通透 性转运孔 (mitochondrialpermeabilitytransitionpore, MPT)开放 , 造成线粒体膜的通透性增加 、线粒体肿胀 、线粒体内膜 的跨膜电 位 (■Ym)下降 。 受损的 线粒体 将细 胞凋亡 的 启动 因子 ———细 胞色 素 C释放 到胞质 中 。在 ATP 的 参与下 ,胞质内细胞色素 C(cytochromec, cyto-c)与 Apaf-1 结 合并 使 之 活 化 。后 者 经 其 CARD (caspase recruitmentdomain)结构域与 Caspase-9 前 体的原结构 域结合 , 导致 Caspase-9 的自身剪切和 活化 。细胞色素 C、Apaf-1 和 Caspase-9 前体组成的全酶 (holoenzyme) 复 合物称为 “凋亡体 ” (apoptosome)。活化的 Caspase9 使 Caspase-3 活化 。除了细胞色素 C外 , 线 粒体也释 放其他凋亡诱导分子 , 如 :凋 亡诱导因子 (apoptosis-inducingfactor, AIF)也能 直 接使 Caspase-3 活化 。 MPT 包含了两大部分 :一是在线粒体内膜与 adeninenucleotidetranslocator(ANT)相关 之蛋 白质 ;另一 是在 外膜 的蛋白 [ 包括 了 外 膜 蛋 白 , 电 压 依 赖 性 阴离 子 通 道 (VDAC)] [ 4-6] 。
王卫东 ＊综述 ;陈正堂 审阅 (第三军医大学新桥医院肿瘤科 , 重庆 400037)
[ 摘 要 ] 凋亡过程的启动直接决定了细胞的 “命运 ”。 在细胞凋亡的两个进化保守的信号转导途 径中 , Bcl-2家族 成员的构 成比例是凋亡调控的 关键因素 , 尤其是 Bcl-2/Bax比率是启动细 胞凋亡 的 “分 子开关 ”。 Bax和 Bcl-2 通过形成 同源或 异源二 聚体来调节细胞凋亡 :当 Bax形成同源二聚体时诱导细胞凋亡 ;Bax与 bcl-2形成异源二聚体时则抑制 细胞凋亡 。 当 某细胞系 的所有细胞内异源二 聚体 (Bcl-XL/Bax和 Bcl2/Bax)的含量 ≥ 50%时 , 细 胞耐受 凋亡 ;而当细 胞内 Bax同源二 聚体 >80%时 , 且在适当信号诱导下 则细胞出现凋亡 。 细胞凋亡的数学模型认为 , Bcl-2家 族之促凋 亡和抑凋亡 成员的比 率直接决定 了线粒 体外膜各种通道的开 放程度 , 形成细胞凋亡调控的枢纽 ;故有学者认为 Bcl-2/Bax比率是调控细 胞死亡的 “可变电阻器 ”(rheostat), 在外界因素刺激下 , 细胞的生死最终 取决于 Bc-2和 Bax两种调 控因子 的平衡 结果 。 目 前关 于前 列腺癌 、直 肠癌 、白血 病 、宫颈癌等的临床研究均支持这一理论 。 [ 关键词 ] Bcl-2;Bax;比率 ;细胞凋亡 [ 中图分类号 ] R734 [ 文献标志码 ] A
FBDD+PPI典范：Bcl-2选择性抑制剂维奈克拉的药物设计（下）
FBDD+PPI典范：Bcl-2选择性抑制剂维奈克拉的药物设计（下）前文回顾：Bcl-2选择性抑制剂维奈克拉的药物设计（上）——ABT-263：优化ABT-737的口服利用度——尽管ABT-737单药或与化疗药物联合用药时疗效显著，然而该化合物的口服生物利用度差，且水溶性过低导致静脉给药极其困难。
因此，需要进一步优化分子以提高其口服生物利用度。
根据Lipinski’s rule of five，ABT-737显然不是理想的小分子口服药（MW > 800，logP过大），ABT-737的低水溶性、较差的吸收（渗透）和代谢导致了低口服生物利用度。
由于ABT-737分子量过大且疏水，通过常规的减少非极性表面来提高水溶性显然是不够的。
Site 2苯环上取代基和site 3二甲胺侧链的优化为了平衡口服暴露量和细胞效力，研究人员将AUC/EC50比值作为主要的优化目标。
经过初步的探索，研究人员发现通过调节酰基磺酰胺或胺的p K a值等相对较小的修饰来改变电离态可以显著增强口服吸收（表6）。
当把苯环上的硝基替换为三氟甲基（化合物85），AUC 提高了16倍，但EC50大幅降低。
当把site 3二甲胺侧链去掉（化合物86），AUC提高很明显，但由于会增强与HSA-III的结合而导致EC50降低近400倍，AUC/EC50仅为ABT-737的1/10。
由于N去甲基化是ABT-737的主要代谢路径，所以研究人员尝试把site3的二甲胺侧链（p K a≈10）替换为吗啉环（化合物87，p K a≈7.5），发现AUC提高了4倍且EC50相比85提高了5倍。
表6. ABT-737、85、86和87结构、活性与PK/PD数据接下来，研究人员对site 2苯环上取代基进行了更细致的SAR，发现在系列化合物中，苯环上取代基的Hammett σm值（或者说p K a）与EC50、化合物的PSA（极性表面积）与AUC的相关性都较好（图9）。
Bcl-2蛋白概述--
4 Bcl-2的应用
1、Bcl – 2的抗体可用于免疫组织化学鉴定细胞含有抗
原。 Bcl – 2表达量在滤泡型淋巴瘤，以及其他许多种 类的癌症阳性细胞表面有相当大的增加。在某些情况下， 存在或不存在的Bcl – 2免疫活性检测癌症放疗病人的预 后或复发的可能性的重要参照指标。 2、利用反义药物封闭Bcl-2基因表达，增加肿瘤细胞对 放化疗药物的敏感性。 3、基于BH3-only 蛋白的BH3结构域的结构基础，设 计了的短肽及其修饰物。 4、以Bcl-2家族蛋白为靶点模拟BH3结构小分子抑制剂 成为很有潜力的可用于多种肿瘤治疗的药物。
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6 小结
一个定义 两类功能 三种结构 四个结构域 五条途径
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致谢
敬请各位批评指正 谢谢！
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2、 Bcl-2的研究历史简要回顾
5、1997-2000，由Muchmore研究小 组和Fesik研究分别小组确定了Bcl-XL 蛋白的三维结构，首次揭示几个Bcl - 2 家族成员拥有惊人的相似的成孔细菌毒素 结构域，引发了随后的一系列研究表明， Bcl-XL, Bcl-2, Bax蛋白，具有在人工 合成膜形成离子通道的能力。他们的研究 使接下来一段时间，人们的研究方向聚焦 在Bax在MOM（线粒体外膜）上成孔机 制的研究上。
构稳定性，阻止二聚化反应
④抑制Caspases激活；Bcl-2能结合Apaf-1和caspase 9，
并维持其非活化状态，阻止caspase级联反应，防止细胞凋亡。
⑤维持细胞钙稳态； Bcl-2的其中一个功能为形成离子通道，它
的高表达维持了线粒体内钙稳态，阻止了线粒体膜电位的下降和线 粒体膜通透性转换孔的开放
Caspase和BCL-2两大家族介绍汇总最新+最全,总有一天会用到
Caspase和BCL-2两大家族介绍汇总|最新+最全，总有一天会用到原创2018-06-21 订阅号APExBIO看到“caspase”和“BCL-2”这两个词是不是觉得很眼熟？这两个家族的研究历史悠久，有的人即使不研究这个也或多或少听说过它们；有的人虽然不了解，但是知道它们跟凋亡相关。
这两大家族的成员有很多，搞不清楚的可以了解一下。
（一）Caspases家族Caspase，这是个缩写，英文全称是cysteine-dependent aspartate-specifc proteases，中文名称称为胱天蛋白酶或半胱天冬酶。
Caspases家族成员是一组存在于胞质溶胶中的半胱氨酸蛋白酶。
利用半胱氨酸（Cys）侧链切割含有天冬氨酸（Asp）的多肽底物，caspases可以选择性地对多种信号转导途径中的蛋白质进行高效切割。
Caspases调节多种生物过程，如程序性细胞死亡，炎症，细胞分化、增殖和运动。
启动者和效应者的激活Caspases的功能基于结构和功能，哺乳动物caspases可以分为三大类：（1）促凋亡caspases。
包括caspase-2，8，9，10，3，6，7。
它们以级联的方式切割一系列胞内蛋白，最终导致细胞凋亡。
它们被分为两派，启动者（initiators）和效应者（effectors）。
启动者参与细胞内在（caspase-9）或细胞外在（caspase -8和-10）凋亡途径。
效应者切割数百种细胞蛋白质。
然而，一些促凋亡caspases在诸如淋巴细胞增殖、细胞运动和组织入侵的过程中也具有非凋亡作用。
（2）促炎性caspases。
包括caspase-1，4，5，11，12，13。
在先天性免疫应答激活期间，促炎性caspases介导特异性细胞因子（cytokines）的成熟，但也可能参与一种称为pyroptosis（焦亡）的细胞死亡形式。
（3）角化细胞分化。
Caspase-14参与角化细胞的分化，但不会在炎症或细胞凋亡中发挥重要作用。
Bcl—2蛋白在调控细胞凋亡与自噬中的作用
Bcl—2蛋白在调控细胞凋亡与自噬中的作用标签：Bcl_2；细胞凋亡；自噬细胞凋亡与自噬均属于细胞死亡的形式。
程序性细胞死亡的细胞凋亡，主要依赖一系列蛋白水解，而细胞的残余部分最终被巨噬细胞清除。
自噬被称为Ⅱ型程序性细胞死亡，与凋亡方式不同的是不依附于蛋白的水解，而是以独特的自噬体的结构出现为其特征，此独特结构和其细胞内的成分最终将通过自身溶酶体系统而被消除。
两者紧密联系在哺乳动物发育，维持组织动态平衡中且起着核心作用，并与疾病的发生、发展密切相关。
通过对Bcl_2蛋白构象与功能的不断研究，意识到Bcl_2蛋白不仅具有抗凋亡的功能，也可通过与其他蛋白的相互作用介导细胞自噬，提示其有助于维持细胞的存活，而不单单是促进细胞死亡的双重作用。
新近研究发现，Bcl_2蛋白在脑缺血后的病理机制中起着关键性的作用，但其具体机理还有待进一步研究。
1Bcl_2蛋白及其定位1.1Bcl_2蛋白：是Bcl_2原癌基因的编码产生，是一个促进因素对细胞的存活，为膜整合蛋白，分子质量为26kDa，早期是在人类的滤泡样细胞淋巴瘤中t （14；18）染色易位的断裂点被克隆挖掘出来[1]。
主要定位在线粒体、部分内质网及核周膜，与膜的结合的功能堪为重要的。
在正常的细胞活化、成长过程中可有表达，Bcl_2蛋白可在成熟的组织中表达，并在逐步凋亡的细胞中呈低表达或不表达。
Bcl_2蛋白可存在于正常组织中，然后逐渐发现在免疫Bcl_2蛋白中的表达，也在人体多种形态的肿瘤组织内分泌系统以及神经系统中存在。
Bcl_2蛋白的分子构像变化多端，已知的Bcl_2家族蛋白结构中，其多肽链里含有多个Bcl_2同源保守的螺旋结构域（即：BH1、BH2、BH3、BH4），并且绝大部分含所有其中4个结构域；而促凋亡蛋白中基本上都含有促凋亡作用BH3结构域。
因Bcl_2蛋白处在细胞的不同部位，故其分子构象在不同的因素作用下可发生改变。
而Szegezdi[2]等研究表明Bcl_2对自噬的调节具有细胞器特异性，对自噬起负调节作用。
Caspase ,BCL-2蛋白家族与细胞凋亡调控机制
Caspase ,BCL-2蛋白家族与细胞凋亡调控机制【摘要】细胞凋亡是一种重要的细胞死亡方式，由多种分子调控。
Caspase 和BCL-2蛋白家族在细胞凋亡中起关键作用。
Caspase是主要的凋亡调控蛋白酶，参与凋亡信号传导和执行。
BCL-2蛋白家族调节细胞生存和死亡，其中一些成员促进凋亡，而另一些抑制凋亡。
Caspase与BCL-2蛋白家族之间存在复杂的相互作用，调控细胞凋亡的进行。
研究进展显示，细胞凋亡在各种疾病中起着重要作用，如癌症和神经退行性疾病。
Caspase ,BCL-2蛋白家族与细胞凋亡调控机制对于疾病治疗具有重要意义。
未来的研究应该注重解析这些调控机制，探索潜在的临床应用，为疾病治疗提供新的方向和策略。
【关键词】关键词：Caspase、BCL-2蛋白家族、细胞凋亡、调控机制、相互作用、研究进展、疾病、重要性、未来研究方向、临床应用。
1. 引言1.1 细胞凋亡的定义细胞凋亡是一种程序性死亡形式，是生物体内一种重要的生理现象。
在细胞凋亡中，受到内外部环境刺激的细胞会按照一定的信号传导途径，通过活化特定的蛋白酶（Caspase）而发生程序性死亡。
与坏死不同，凋亡是一种高度有序、规范的细胞死亡过程，其过程可精确调控，不会引起身体的炎症反应。
细胞凋亡在生物体内担负着维持组织稳定、清除异常细胞、调控身体发育和免疫应答等重要功能。
细胞凋亡的过程往往伴随着细胞内外环境的变化，如DNA损伤、细胞内信号分子的改变等。
在接收到适当信号后，细胞会通过内在或外在通路触发凋亡程序。
通过对细胞凋亡调控机制的研究，人们可以深入了解细胞生命活动的调控规律，为疾病的治疗和预防提供新的思路。
细胞凋亡的定义不仅仅是细胞死亡的一种形式，更为我们揭示了生命活动中一种重要的规律和机制。
1.2 Caspase的作用Caspases是一类半胱氨酸蛋白酶，在细胞凋亡中扮演着至关重要的作用。
它们被称为“凋亡酶”，因为它们能够促进或执行细胞凋亡过程。
Bcl-2蛋白小分子抑制剂的研究进展-张淑兰
第25卷第11期2008年11月沈 阳 药 科 大 学 学 报Journal of Shenyang Pharmaceutical U niv ersity Vol .25 No .11 Nov .2008p .856 收稿日期:2008-01-14作者简介:张淑兰(1982-),女(汉族),河北安国人,博士研究生;宫平(1964-),男(汉族),新疆乌鲁木齐人,教授,博士,从事药物化学研究,Tel .024-********,E -mail gongpingg p @ 。
文章编号:1006-2858(2008)11-0919-05Bcl -2蛋白小分子抑制剂的研究进展张淑兰,姚 鹏,宫 平(沈阳药科大学制药工程学院,辽宁沈阳110016)摘要:目的对近年来Bcl -2蛋白小分子抑制剂的研究进展作以综述。
方法根据近期对Bcl -2蛋白小分子抑制剂的21篇相关文献进行整理和归纳。
结果和结论Bcl -2蛋白是很有开发潜力的靶点,依据此靶点而设计出的Bcl -2蛋白小分子抑制剂,可以消除或减弱癌细胞对凋亡的耐药性,有望成为新一代抗癌药物。
关键词:Bcl -2;肿瘤;凋亡;小分子抑制剂中图分类号:R 914 文献标志码:A1 细胞凋亡和Bcl -2家族蛋白细胞凋亡(apoptosis )又称程序性细胞死亡,是生物体细胞受到基因精确调控的主动消亡过程,是多细胞由机体调控机体发育、控制细胞衰老、维持内环境稳定的重要机制。
细胞凋亡发生过程的启动和进行受到精确控制,具有独特而复杂的信号系统。
各种凋亡信号通过信号传导通路传至细胞内,激活靶分子而产生细胞效应,引发细胞凋亡。
Bcl -2(B cell ly mphoma /leukemia -2gene ,B 细胞淋巴瘤/白血病基因2)家族蛋白[1-2]是目前已知的细胞凋亡中最重要的调控因子,在细胞凋亡通路中起着重要的调节作用。
根据其在细胞凋亡中的作用不同,Bcl -2家族分为3大类:一类是抑制细胞凋亡的蛋白,如Bcl -2、Bcl -X L 、Bcl -w 、M cl -1和A1等,它们大部分含有4个BH (Bcl -2homol -ogy domain )结构域,即BH1、BH2、BH3、BH4;第二类是促进细胞凋亡的蛋白,如Bax 和Bak 等,它们含有3个结构域,即BH1、BH2、BH 3;另外,在促凋亡蛋白中,还有一类特殊的成员,如Bid 、Bad 、Bim 、Bik 、PUMA 、NOXA 等,它们只含有一个BH 结构域(即BH3),该结构域是促凋亡作用的最重要的功能区。
bcl-2、bax在膝关节骨性关节炎发生、发展中的作用
性中耳炎患者进行集束化护理对保障手术的顺利实施、减少患者术后的并发症、缩短其术后康复的时间等具有重要的意义。
熊芙蓉等[28]研究发现，与常规护理相比，集束化护理的系统性、科学性和可行性更强。
黄斌英等[29]将接受鼻内镜下鼓膜置管术的患儿分为对照组和观察组，对两组患儿均进行常规护理，在此基础上对观察组患儿进行集束化护理，结果显示，观察组患儿治疗的总有效率明显高于对照组患儿（97.5%VS85.0%），其家长对护理的满意率明显高于对照组患儿家长（97.5%VS87.5%）。
6 小结慢性化脓性中耳炎在临床上较为常见。
通过对此病患者进行乳突切除术、鼓膜成形术、听骨链重建术等手术能有效地缓解其病情[30]。
在对此病患者进行手术期间，对其实施高质量的护理干预尤为重要。
集束化护理是在循证医学的基础上形成的一种护理模式。
对接受手术治疗的慢性化脓性中耳炎患者进行集束化护理能取得良好的效果。
相信未来随着护理学的不断发展和完善，集束化护理在慢性化脓性中耳炎患者围手术期护理中的应用将会更加广泛。
参考文献[1] 巩芝莹.医护一体化快速康复护理在慢性化脓性中耳炎患者围手术期中的应用[J].国际护理学杂志,2018,37(21):2907-2910.[2] 李广洲.耳内窥镜下单纯鼓膜修复术治疗慢性化脓性中耳炎临床疗效[J].实用中西医结合临床,2019,19(5):106-107.[3] 钟来秀.分泌性中耳炎鼓膜穿刺术患者中行针对性护理干预临床研究[J].全科口腔医学电子杂志,2017,4(13):41.[4] 李治美,胡光维,陆波,等.地塞米松不同给药方案治疗慢性分泌性中耳炎的临床效果比较[J].中国基层医药,2018,25(16):2114-2117.[5] 陈久贵.集束化护理在血液透析导管相关性血流感染患者中的应用[J].齐鲁护理杂志,2017,23(15):85-87.[6] Y L Zhu,W X Li,J Li.Screening for effective antibiotics inchronic suppurative otitis media[J].Lin Chung Er Bi Yan Hou Tou Jing Wai Ke Za Zhi,2017,31(16):1243-1246.[7] 张京芬.集束化护理在重症颅脑损伤行机械通气患者中的应用效果[J].中华现代护理杂志,2018,24(20):2452-2455.[8] 顾佳萍.综合性护理干预对慢性化脓性中耳炎患者术后听力恢复及护理满意率的影响[J].心血管外科杂志(电子版),2017,6(3):138.[9] F T Orji,B O Dike.Observations on the Current BacteriologicalProfile of Chronic Suppurative Otitis Media in South Eastern Nigeria[J].Annals of Medical & Health Sciences Research,2015,5(2):124-128.[10] 陈银丽,许谦,黄梅芳.改良式健康教育对慢性化脓性中耳炎患者的影响分析[J].中外医学研究,2017,15(35):157-158.[11] 吕梦颖.开放式乳突改良根治并鼓室成形术治疗慢性化脓性中耳炎的护理[J].检验医学与临床,2016,13(18):2674-2676.[12] Hwang J H,Lee J H,Hwang J H,et parison of Arbekacin andVancomycin in Treatment of Chronic Suppurative Otitis Media by Methicillin Resistant Staphylococcus aureus[J].Journal of Korean Medical Science,2015,30(6):688-693.[13] 高玉莲.集束化护理对急性重度有机磷中毒患者的影响[J].齐鲁护理杂志,2017,23(3):89-90.[14] Amali A,Hosseinzadeh N,Samadi S,et al.Sensorineural hearingloss in patients with chronic suppurative otitis media:Is there a significant correlation?[J].Indian J Otolaryngol Head Neck Surg,2017,9(2):3823-3827.[15] 杨庆丰.浅析综合护理模式在慢性化脓性中耳炎患者围手术期的应用效果[J].世界最新医学信息文摘,2019,19(84):303-306.[16] 沈玲丽,谈晓英.综合护理模式在慢性化脓性中耳炎患者围手术期应用的效果评价[J].中国继续医学教育,2018,10(5):186-187.[17] 王宁.延续性护理干预在预防慢性化脓性中耳炎术后细菌感染的应用研究[J].实用临床医药杂志,2017,21(20):116-118.[18] Cho YS,Chung JH,Lee SH.Prevalence and AssociatedFactors of Chronic Suppurative Otitis Media: Data from the KNHANES 2009-2012[J].Journal of Laryngology & Otology,2016,130(S3):S10.[19] 刘艳秋.舒适护理对慢性化脓性中耳炎乳突根治术患者舒适度的应用与影响[J].临床医药文献电子杂志,2017,12(4):257.[20] 王丽艳.慢性化脓性中耳炎围手术期的临床护理效果观察[J].医学美学美容,2019,28(24):156-157.[21] 乔海娟.临床护理路径对慢性化脓性中耳炎患者护理质量及满意度的影响观察[J].饮食保健,2019,6(48):180-181.[22] 诸燕芳.慢性化脓性中耳炎80例临床护理疗效分析[J].实用临床护理学电子杂志,2019,4(41):153.[23] 柳美华.综合护理与传统护理在慢性化脓性中耳炎患者围术期的应用效果[J].国际护理学杂志,2019,38(23):3972-3974.[24] 李秋蝉,郭巧玲.鼓膜穿刺术治疗分泌性中耳炎的临床护理措施[J].中外医学研究,2019,17(31):114-116.[25] Namit S,Vinay A,Anu C,et al.Central Nervous SystemInflammatory Myofibroblastic Tumor Masquerading as Chronic Suppurative Otitis Media[J].Journal of Pediatric Neurosciences,2017,12(2):188.[26] 刘小媛.慢性化脓性中耳炎患者围手术期的护理与体会[J].中国实用医药,2019,14(29):175-176.[27] Prabhu P,Chandrashekar A,Jose A,et al.Development andAdministration of Chronic Suppurative Otitis Media Questionnaire-12 (COMQ-12) and Chronic Otitis Media Outcome Test-15 (COMOT-15) in Kannada[J].International Archives of Otorhinolaryngology,2017,22(2):108-112.[28] 熊芙蓉,唐晓琴.集束化护理对降低ICU 中心静脉导管相关性血流感染率的效果分析[J].大家健康(上旬版),2017,11(3):243-244.[29] 黄斌英,张婷婷,黄志芳.集束化护理在儿童分泌性中耳炎置管术后的应用效果[J].湘南学院学报(医学版),2019,15(2):56-58.[30] 黄杏珍,万俐,叶松燕.综合性护理干预对慢性化脓性中耳炎患者术后恢复及护理满意度的影响[J].辽宁医学杂志,2019,33(5):73-75.bcl-2、bax 在膝关节骨性关节炎发生、发展中的作用柯俊泉，董 忠 * ，潘廷明，汪伟剑（福建中医药大学附属第二人民医院，福建 福州 350003）[摘要]膝关节骨性关节炎（KOA）是一种以关节腔内的软骨组织退化为特点的骨关节疾病。
小鼠B细胞淋巴瘤因子2 (Bcl-2)-ELISA试剂盒说明书
小鼠B细胞淋巴瘤因子2 (Bcl-2)酶联免疫吸附测定试剂盒使用说明书产品编号：E-EL-M0175（本试剂盒仅供体外研究使用、不用于临床诊断!）声明：尊敬的客户，感谢您选用本公司的产品。
本产品选用世界著名生产厂家的原料，采用专业ELISA kit生产技术制造。
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用抗小鼠Bcl-2抗体包被于酶标板上，实验时标本或标准品中的Bc l-2会与包被抗体结合，游离的成分被洗去。
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标本收集:1.血清：全血标本于室温放置2小时或4℃过夜后于1000×g离心20分钟，取上清即可检测，收集血液的试管应为一次性的无热原，无内毒素试管。
2.血浆：抗凝剂推荐使用EDTA.Na2，标本采集后30分钟内于1000×g离心15分钟，取上清即可检测。
避免使用溶血，高血脂标本。
3.组织匀浆：用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织，以去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将组织剪碎。
将剪碎的组织与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样本对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。
Bcl2与细胞凋亡
Bcl-2与细胞凋亡摘要 Bcl-2基因是一原癌基因，能抑制细胞凋亡。
但近年研究发现，存在有Bcl-2敏感和不敏感的细胞凋亡现象。
Bcl-2抑制细胞调亡的机制目前仍然不清，大多认为与Bcl-2的细胞内抗氧化作用及抑制钙离子的跨膜运动有关。
最近，Reed提出Bcl-2具有离子通道蛋白和吸附/锚定蛋白的双重特性，并阐述了Bcl-2抑制细胞凋亡的某些机制。
关键词：Bcl-2；细胞凋亡自从1972年Kerr提出细胞凋亡（appoptosis）的概念至今，人们对细胞凋亡现象进行了广泛、深入的研究。
但是，凋亡的分子和生化机制迄今尚未彻底明了；而已形成的初步认识大多源于对Bcl-2基因家族的研究。
已知，调亡进程可分为三个时相：诱导期，效应期和降解期。
在诱导期，细胞接受各种信号从而引发各种不同的效应：进入效应期后，经过一些决定细胞命运（存活/死亡）的分子调控点，细胞进入不可逆的程序化死亡，这些调控分子包括一系列原癌基因和抑制癌基因的产生，其中Bcl-2家族起着决定性的作用；降解期则产生可见的凋亡现象[1]。
Bcl-2基因（即B细胞淋巴瘤/白血病-2基因）是一种原癌基因，它具有抑制凋亡的作用，并用近年来的一些研究已开始揭示这一作用的机制。
目前已经发现的Bcl-2蛋白家族按功能可分为两类，一类是象Bcl-2一样具有抑制凋亡作用，如哺乳动物的Bcl-X1、Bcl-W、Mcl-1、A1、线虫Ced-9、牛痘病毒E1B119kD等，而另一类具有促进凋亡作用，如Bax、Bcl-Xs、Bad、Bak、Bik/Nbk、Bid和Harakiri[2]。
最初在血液淋巴细胞中发现Bcl-2能抑制细胞死亡，随后陆续在其它一些细胞中也发现Bcl-2的这种作用。
但近年来研究发现，除些之外尚存在Bcl-2不敏感的凋亡途径。
本文拟就凋亡与Bcl-2的关系及其研究进展作一综述。
1 Bcl-2敏感的凋亡途径Bcl-2可以抑制由多种细胞毒因素所引起的细胞死亡。
Bcl—2家族蛋白通过Ca2+信号通道调控细胞凋亡
Bcl—2家族蛋白通过Ca2+信号通道调控细胞凋亡Bcl-2家族蛋白是细胞凋亡过程中重要的调控因子，主要通过抑制线粒体中细胞色素c及其他介导细胞凋亡因子的释放，来抑制细胞凋亡。
除此之外，Bcl-2家族蛋白成员还可以调节内质网中Ca2+的释放，促进或抑制细胞的凋亡。
最近研究显示，Bcl-2家族蛋白与内质网（ER）中1，4，5 - 三磷酸肌醇（IP3）受体相互作用，调节其通道开口，抗凋亡蛋白成员抑制内质网过度释放Ca2+，支持细胞生存；促凋亡蛋白成员增强内质网释放Ca2+，上调线粒体中Ca2+的浓度，触发细胞凋亡。
本文就Bcl-2家族蛋白在Ca2+信号通道中的作用做一综述。
标签：Bcl-2；钙离子通道；1，4，5 - 三磷酸肌醇（IP3）受体；细胞凋亡1 Bcl-2蛋白的一般概念Bcl-2（B cell lymphoma-2）是Bcl-2家族蛋白中的一员，其能控制线粒体中促凋亡因子的释放。
Bcl-2基因最早由Tsujimoto等[1]从滤泡性非霍奇金B细胞淋巴瘤患者染色体t（14；18）易位的断点处分离出来，在正常人体中定位于18号染色体，在患者体内则易位于14号染色体。
Bcl-2家族蛋白根据结构同源性和功能分为3类----抗凋亡蛋白包括Bcl-2、Bcl-xL、A-1、Bcl-w、Mcl-1；促凋亡蛋白包括Bax、Bad、Bak、Bim、Bcl-xs等；仅含有BH3结构域的“BH3 only” 蛋白，包括Bad、Bim、Bik、Bid等。
这个家族蛋白几乎所有的成员都能够调节细胞内的细胞器膜的通透性。
众所周知，促细胞凋亡蛋白Bax和Bak能够增强线粒体中细胞色素c的释放。
相反，抗凋亡蛋白Bcl-2、Bcl-xL主要通过抑制线粒体中细胞色素c的释放，保护细胞免于凋亡。
抗凋亡蛋白Bcl-2和其他成员，调控内质网中Ca2+的释放在细胞凋亡中的作用虽不像线粒体通道得到大家的认可，但还是相当重要的。
而且，内质网中释放出来的Ca2+可以触发线粒体释放细胞色素c，促进细胞凋亡。
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Bcl-2BCL-2基因概述自从1972年Kerr提出细胞凋亡（apoptosis）的概念至今，人们对细胞凋亡现象进行了广泛、深入的研究。
但是，凋亡的分子和生化机制迄今尚未彻底明了；而已形成的初步认识大多源于对Bcl-2基因家族的研究。
已知，凋亡进程可分为三个时相：诱导期，效应期和降解期。
在诱导期，细胞接受各种信号从而引发各种不同的效应：进入效应期后，经过一些决定细胞命运（存活/死亡）的分子调控点，细胞进入不可逆的程序化死亡，这些调控分子包括一系列原癌基因和抑制癌基因的产生，其中Bcl-2家族起着决定性的作用；降解期则产生可见的凋亡现象。
Bcl-2基因（即B细胞淋巴瘤/白血病-2基因）是一种原癌基因，它具有抑制凋亡的作用，并用近年来的一些研究已开始揭示这一作用的机制。
目前已经发现的Bcl-2蛋白家族按功能可分为两类，一类是象Bcl-2一样具有抑制凋亡作用，如哺乳动物的Bcl-XL、Bcl-W、Mcl-1、A1、线虫Ced-9、牛痘病毒E1B119kD等，而另一类具有促进凋亡作用，如Bax、Bcl-Xs、Bax、Bak、Bik/Nbk、Bid和Harakiri。
最初在血液淋巴细胞中发现Bcl-2能抑制细胞死亡，随后陆续在其它一些细胞中也发现Bcl-2的这种作用。
但近年来研究发现，除这些之外尚存在Bcl-2不敏感的凋亡途径。
Bcl-2敏感的凋亡途径Bcl-2可以抑制由多种细胞毒因素所引起的细胞死亡。
Bcl-2的过度表达能增强所观察细胞对大多数细胞毒素的抵抗性。
这一发现使人们认识到凋亡的各种信号转导途径有一个共同的通路或交汇点，而该通路或交汇点受Bcl-2调节。
实验表明，Bcl-2可增强细胞对大多数DNA损伤因子的抵抗性，抑制大多数化疗药物所引起的靶细胞凋亡，但其本身并不能抑制这些因素对细胞的损伤；同样地，它也不能促进DNA修复。
p53蛋白是DNA损伤的一个分子传感器，已证实Bcl-2能抑制p53介导的凋亡，但不能抑制p53向核内转位或者p53介导的生长停滞，可能Bcl-2的作用是在DNA损伤后，阻止激活凋亡机制的信号到达其靶分子；在细胞毒性T细胞中，由颗粒酶B激活Caspases家族的一个或多个半胱氨酸蛋白酶所诱导的凋亡不依赖于Bcl-2，颗粒酶B可能仅作用于凋亡路径中Bcl-2调节位点的下游。
以上结果表明在凋亡途径中Bcl-2的作用位点是在信号分子和效应蛋白酶之间的位置。
Bcl-2抑制细胞凋亡可能与其以下几种作用有关：①细胞催抗氧化作用以往研究表明，在去除生长因子所诱发的凋亡中，活性氧损伤（ROS）是促发细胞死亡的主要诱因：Bcl-2的过度表达可减少氧自由基的产生和脂质过氧化物的形成。
提示Cai等[4]的实验表明Bcl-2的抗氧化作用是间接的，即可能在于抑制超氧阴离子的产生而不是直接清除活性氧。
细胞色素c（cytochrome c, Cyt c）作为呼吸链中重要的电子传递体，它从线粒体内膜上的释放会阻断电子向下游传递体，它从线粒体内膜上的释放会阻断电子向下游的传递，危及呼吸链的功能并导致超氧阴离子的加速产生；而Bcl-2可以抑制Cyt c的释放，从而抑制了超氧阴离子的产生。
此外，Bcl-2还可以增加胞内的谷胱甘肽（GSH）等抗氧化剂，升高NAD/NADH 的比值，抑制和凋亡相联系的GSH降低，促进GSH进入核内，从而影响细胞的氧化还原状态。
但也有证据表明，在没有自由基的情况下Bcl-2也能抑制凋亡。
因此，Bcl-2的性质远非仅仅是一种抗氧化剂。
②抑制钙离子跨膜流动Lam等曾报道钙泵特异性抑制剂Thapsigargen（TG）诱导的WEH17.2等细胞的凋亡可被Bcl-2所抑制，其原因是Bcl-2抑制了Ca2+的跨膜流动，提示Bcl-2可通过调节胞内钙离子浓度来调节凋亡。
然而Wei等在神经元细胞GT1-7中发现Bcl-2中发现Bcl-2可抑制由TG所诱导的凋亡，但并不能抑制TG 诱导的胞内钙离子浓度升高；同时Jason等[6]在中国仓鼠卵巢细胞5AHSmyc中去除细胞内贮存Ca2+后发现过度表达的Bcl-2仍可抑制凋亡，提示Bcl-2对胞内Ca2+浓度的调节作用也只能是其抑制凋亡的机制之一。
③离子通道蛋白和吸附/锚定蛋白最近Reed[7]提出Bcl-2蛋白可能具有双重功能：离子通道蛋白和吸附/锚定蛋白，提出Bcl-2抑制凋亡的部分新机制。
③-1 离子通道蛋白体外实验证实，Bcl-2、Bcl-X1和Bax能在线粒体上形成离子通道，提示它们可能参与调节一些与凋亡有关的细胞现象，如线粒体通透性改变（巨孔形成）和线粒体释放凋亡蛋白激活因子——Cyt c和凋亡诱导因子（AIF）。
过度表达的Bcl-2能抑制线粒体通透性改变，并影响巨孔的形成，从而抑制凋亡。
但也有实验发现即使线粒体通透性未改变，Cyt c等凋亡激蛋白也可以释放到胞液中从而诱发细胞凋亡，因此这种观点还有待进一步证实。
在所观察的细胞系及多种情况下，凋亡的发生都伴有Cyt c从线粒体释放，继而伴有Caspases激活，而活化的Caspases降解底物后，其蛋白降解产物又引起线粒体通透性改变，并最终导致凋亡发生。
Yang等与Kluck等发现Bcl-2可以通过抑制线粒体释放Cyt c来抑制凋亡，继而Rosse等和Zhivotovsky等用两种不同的方法证明了即使Cyt c已经释放入胞浆，Bcl-2仍能延迟细胞死亡，这是由于Bcl-2抑制了活化的Caspases对线粒体释放的上游和下游都有Bcl-2调节凋亡的作用点。
AIF作为一种线粒体来源的效应蛋白酶，在分离在胞核中能诱导凋亡，同时还能激发线粒体通透性改变，诱导线粒体释放Cyt c 和Caspase-9，并在体外切割和激活其底物——半胱氨酸蛋白酶CPP32。
体外研究发现，Bcl-2过度表达可能阻止AIF从分离的线粒体上释放，但它不能影响AIF的产生，同时也不能影响AIF促凋亡的功能。
③-2 吸附/锚定蛋白在正常情况下Bcl-2通过其C端疏水残基的伸展而锚定在细胞内膜上，作为吸附/锚定蛋白，可把胞液蛋白固定在膜边，或是引导胞液蛋白与别的膜蛋白相互作用。
Bcl-2可与Bcl-2家族的Bcl-X1、Bcl-Xs、Bax、Bcl-2、Bad和Mc1-1形成同源的蛋白二聚体，而特定的蛋白二聚体则可作为在细胞死亡信号通路上的分子开关。
例如，Bcl-2可与促凋亡Bax形成二聚体，如果Bax相对量高于Bcl-2，则Bax同二聚体的数量增多，从而促进细胞死亡；而如果Bcl-2相对量高于Bax，则促进形成Bcl-2/Bax异二聚体，并使Bcl-2同二聚体的量增多，从而抑制细胞死亡；而促凋亡分子和Bad和Bcl-Ss则竞争结合细胞死亡抑制分子如Bcl-X1或Bcl-2，由此替换了Bax并促进Bax 同二聚体形成，诱导凋亡。
另外，Bcl-2还可与Bcl-2家族外的11种蛋白质结合，包括蛋白激酶Raf-1、蛋白磷酸酶Calcineurin、GTP酶、R-Ras和H-Ras、p53-BP2、朊蛋白Pr-1、Ced-4、BAG-1、Nip-1、Nip-2和Nip-3，并由此实现其抗凋亡作用。
Bcl-2不敏感的凋亡途径Bcl-2抑制凋亡的作用并不是万能的，例如在细胞毒T细胞杀伤作用中，特定的淋巴因子撤离以及某些TNF受体家族介导的凋亡途径中Bcl-2不能抑制凋亡，其原因有可能是这些凋亡诱导剂作用于Bcl-2下游或是独立于Bcl-2的其它凋亡路径。
最近Scaffidi等发现，Jurkat 等细胞（Ⅱ型细胞）中Bcl-2可抑制TNF受体家族中的CD95（Apo-1/Fas）信号通路介导的凋亡，而在SKW6.4等细胞（Ⅰ型细胞）中Bcl-2则不能抑制这种信号通路介导的凋亡。
其结果表明，凋亡途径对Bcl-2敏感与否可能与细胞类型有关。
进一步研究发现，这种差异取决于线粒体是否参与这种凋亡途径，在Ⅰ型细胞中线粒体则未参与该凋亡途径。
因此，Bcl-2可能只抑制依赖于线粒体的凋亡途径。
更进一步研究发现，来源于牛痘病毒的细胞因子应答修饰体A（crmA）是一种丝氨酸蛋白酶抑制剂（serpin）类分子，能抑制一些Caspases 的功能。
而来源于杆状病毒的P35蛋白也能抑制一些Caspases的功能，而且它比CrmA 具有更广泛的Caspases抑制特性。
在组织培养体系中或转基因鼠的T淋巴细胞中CrmA 表达能抑制CD95（Fas/Apo-1）和p55TNF受体Ⅰ诱发的凋亡，但对另一些诸如生长因子撤除，DNA损伤等细胞毒因素引起的凋亡则无能为力，而这些由细胞毒因素引起的凋亡现象则可被Bcl-2及其同系物所抑制，但是Bcl-2又不能抑制由CD95（Fas/Apo-1）和TNF受体介导的凋亡。
由细胞毒因素及TNF受体家族介导的凋亡都可有效地被p35所抑制，提示这些通路都依赖于Caspases的激活。
上述结果表明，在细胞中不同的凋亡激活途径同时存在，其一是需要对CrmA敏感的Caspases参与但又不能被Bcl-2所抑制；而另一个则是Bcl-2可抑制的凋亡途径，其中Caspases对p35敏感，但对CrmA则不敏感。
总结目前Bcl-2是凋亡分子机制研究的主要靶分子。
随着对Bcl-2以及凋亡本身研究的日渐深入，Bcl-2的作用机制和凋亡的分子机制最终被阐明，从而提高对与凋亡有关的疾病的认识和诊治水平。
B-cell lymphoma gene 2在哺乳动物细胞中，调节线粒体外膜通透性，大多数定位在线粒体外膜上，或受到信号刺激后转移到线粒体外膜上。
根据其功能可分为两组：Bcl-2, Bcl-xl, Bcl-w等抑制细胞凋亡；Bax,Bak,Noxa等促进细胞凋亡。
关于Bcl-2家族调控线粒体外膜通透性的机制，假说之一是，细胞接受凋亡信号后促凋亡因子Bax和Bak发生寡聚化，从细胞质中转移到线粒体外膜上，并与膜上的电压依赖阴离子通道相互作用，使通道开放到足以使线粒体内的凋亡因子如细胞色素c等释放到细胞质基质中，引起细胞死亡。