高效毛细管电泳法测定莱菔子中芥子碱含量_蔡梅超
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医结合脾胃杂志，1997，5 ( 4 )：246. [ 6 ] 王喜聪，袁海红，邢彦伟 . 调胃消食散穴位贴敷配合针刺治疗
小儿积滞症 68 例临床观察 [ J ] . 中国现代医生，2009，47 ( 12 )： 108-109. [ 7 ] 陈秀珍 . 针刺四缝穴在儿科临床中的应用 [ J ] . 山东中医药大 学学报，2010，34 ( 2 )：158. [ 8 ] 余惠华 . 捏脊、刺四缝加中药治疗小儿积滞 100 例 [ J ] . 新中 医，1998，30 ( 11 )：21. [ 9 ] 隋康民，王志军，薛兴英 . 针刺配合小儿推拿手法治疗小儿积 滞 75 例疗效观察 [ J ] . 青岛医药卫生，2000：32 ( 4 )：301. [ 10 ] 温乃元，王锦，张飞香 . 捏脊和摩腹手法治疗小儿积滞症 160
活应用以加强脾胃本身之功能，促进本能运化，
即可消除积滞。◆
参考文献 [ 1 ] 黄应培，叶志权 . 自拟运脾消积汤治疗小儿积滞临床观察 [ J ] .
北京中医药大学学报，2005，12 ( 4 )：20-21. [ 2 ] 张春迎，祈建平 . 中药化积汤治疗小儿积滞 40 例 [ J ] . 中医临
样，测定芥子碱峰面积，RSD=0.83%（n=6），表明样
品在 12h 内稳定。
2.7 加样回收试验
取 6 份已测芥子碱含量的莱菔子粉末约 2.5g，
分别加入芥子碱对照品约 3mg，置 50mL 容量瓶中，
加无水甲醇 30mL，按 2.2.2 项下制成溶液，按 2.1 项
下色谱条件进样，测定其回收率，见下表 1。
45
辽宁中医药大学学报
13 卷
植物甾醇等多种成分，其中的芥子碱是其降压作用 的活性成分之一，多以芥子碱硫氰酸盐的形式存在 于药材 [2]。因此，测定芥子碱的含量对控制莱菔子 药材质量具有重要意义。 1 仪器与试剂
Agilent 高 效 毛 细 管 电 泳 仪，石 英 毛 细 管 （75μm×90cm，实 际 长 度 81cm，Agilent 公 司），
莱菔子药材，粉碎，过三号筛。精密称取粉末约 2g，置具塞锥形瓶中，精密加入 70% 甲醇 20mL，密 塞，称定重量，超声提取 30min，放冷，称重，补足失
46
重，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
2.3 线性关系考察
分 别 取 0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mg/mL 的 芥 子 碱
对照品溶液，按 2.1 项下所述电泳条件分别进样
Key words：Semen Raphani；Sinapine；HPCE
莱 菔 子 为 十 字 花 科 植 物 萝 卜 Raphanus satiou L. 的种子，为临床常用药物。该药性味辛甘平，归肺
脾胃经，具有消食除胀、降气化痰的功效 [1]。莱菔子 含有莱菔素（Raphanin）、芥子碱（Sinapine）、亚油酸、
含 量 测 定 的 检 测 波 长 为 326nm，故 本 试 验 也 选 用 326nm 为 检 测 波 长。 本 试 验 考 查 了 0.025mol·L-1 硼 砂：乙 腈 =9：1、0.05mol·L-1 硼 砂：0.01mol·L-1
Na2HPO4=5：1（16℃ pH=9.2）、0.02mol/L Na2HPO4： 0.02mol/L NaH2PO4=1：1（25℃时 pH=6.89）等多种 不 同 缓 冲 液，发 现 0.02mol/L Na2HPO4：0.02mol/L NaH2PO4=1：1（25℃时 pH=6.89）为缓冲液，分离效 果好，分离时间短，峰形尖锐，能达到基线分离。
CAI Mei-chao （Shandong University of Traditional Chinese Medicine，Ji'nan 250355，Shandong，China）
Abstract：Objective ：To determine the content of Sinapine in Semen Raphani. Methods ：Apply the methods of HPCE，and the best condition was using the quartz capillary tube（75μm×90cm，practical length
KQ-250E 型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限 公司）。
芥子碱硫氰酸盐对照品购于中国药品生物制 品鉴定所（供含量测定，批号 111702-200501）；莱 菔子购于建联药店，经本校中药鉴定教研室李峰 教授鉴定为十字花科植物萝卜 R. satious L. 的干 燥成熟种子莱菔子。其余药品试剂均为国产分ຫໍສະໝຸດ Baidu 纯。 2 方法与结果 2.1 分离条件
床医生杂志，2007，35 ( 10 )：65. [ 3 ] 王玉芝 . 脾可欣治疗小儿脾虚性腹泻及消化不良积滞的临床
观察 [ J ] . 首都医药，2000，7 ( 1 )：38. [ 4 ] 李治湖，李永红 . 中药敷脐治疗小儿积滞 30 例 [ J ] . 现代中西
医结合杂志，2004，13 ( 5 )：658-659. [ 5 ] 李锡久，梁虹，马翔，等 . 消积灵治疗小儿积滞 [ J ] . 中国中西
（75μm×90cm，实际长度 81cm），运行缓冲液为 0.02mol/L Na2HPO4：0.02mol/L NaH2PO4=1：1（25℃时 pH=6.89）， 分离电压为 25kV，压力进样 30mbar×8s，温度为 25℃，检测波长为 326nm。结果：芥子碱在 0.2~1.0mg/mL 范围内呈
综上所述，脾胃虚寒是小儿积滞的一个重要 致病原因，随着现代生活水平的提高，加上家长 对小儿的溺爱，医者常常重视小儿饮食过量易导 致积滞的发生的病因，却容易忽略小儿先天脾胃 不 足，稍 吃 寒 凉 之 物 即 可 能 导 致 积 滞 发 生 的 病 因。《幼幼集成》云：“大凡小儿元气完固，脾胃素 强者，多食不伤，过食不饥。若儿先因本气不足， 脾胃素亏者，多食易伤。”针对这类脾胃先天不足 患儿，我们应该“必先以固胃气为主，使养正则积 自除。”运用“温运脾胃”法，可采用多种治法，灵
A
B
A 芥子碱对照品，B 莱菔子药材，1 为芥子碱的峰。 图 1 芥子碱对照品（A）、莱菔子药材 （B）中芥子碱硫氰酸盐分离情况
2.2 溶液制备 2.2.1 芥子碱对照品溶液
精密称取芥子碱对照品约 10mg（五氧化二磷 干燥器中减压干燥 24h），置 10mL 棕色容量瓶中，甲 醇溶解并定容至刻度，然后精密吸取 0.2、0.4、0.6、 0.8mL 分别至 1mL 棕色容量瓶中，甲醇定容至刻度， 即得。 2.2.2 莱菔子溶液
（2）本次试验结果表明莱菔子中芥子碱的含量
大于 0.4%，符合《中华人民共和国药典》规定。◆
参考文献
[ 1 ] 周凤梧 . 实用中药学 [ M ] . 济南：山东科学出版社，1985：671.
is 81cm），0.02mol/L Na2HPO4：0.02mol/L NaH2PO4=1：1（pH=6.89 at 25℃）buffer，pressure injection 30mbar× 8s，at a constant voltage of 25kV and temperature at 25℃ . It was detected on 238nm. Results：Sinapine had a good linearity within 0.2~1.0mg·mL-1（r=0.9995），and the average recovery were 99.50% with RSD 1.21%. Conclusion：This method is feasible for determination of Sinapine in Semen Raphani.
率（%） （%） 99.50 1.21
平均回收率为 99.50%，RSD 为 1.21%，表明回收
率良好。
2.8 样品测定
将 2.2.2 项 下 样 品 溶 液 按 2.1 项 下 色 谱 条 件 进
样，计算莱菔子中芥子碱的含量为 4.61%。
3讨论
（1）《中 华 人 民 共 和 国 药 典》[3] 中 芥 子 碱 的
例 [ J ] . 中国民间疗法，2006，14 ( 12 )：24-25.
收稿日期：2011-03-25 基金项目：国家新药研发大平台项目（2009*ZX09301-013）；山东省自然科学基金项目（ZR2010HM017）；山东省教育厅科技计划项目
（J105LL05）；山东省科技发展计划项目（2008GG2NS02011） 作者简介：蔡梅超（1975-），女，山东青州人，讲师，博士研究生，研究方向：中药新药研究与中药炮制原理研究。
良好的线性关系（r=0.9995），平均回收率为 99.50%，RSD 为 1.21%。结论：高效毛细管电泳法可用于测定莱菔子中
芥子碱的含量。
关键词：莱菔子；芥子碱；高效毛细管电泳法
中图分类号：R122.11
文献标识码：A
文章编号：1673-842X(2011) 09-0045-02
Determination of Sinapine in Semen Raphani by High Performance Capillary Electrophorsis
第13卷 第9期 2011 年 9 月
辽宁中医药大学学报
JOURNAL OF LIAONING UNIVERSITY OF TCM
Vol. 13 No. 9 Sep . ，2011
高效毛细管电泳法测定莱菔子中芥子碱含量
蔡梅超
（山东中医药大学，山东 济南 250355）
摘 要：目的：测定中药莱菔子中芥子碱的含量。方法：采用高效毛细管电泳法，电泳条件为石英毛细管柱
测 定，以 芥 子 碱 浓 度（mg/mL）为 横 坐 标，芥 子
碱 峰 面 积 为 纵 坐 标，回 归 得 方 程：y = 134.53x+
71.63，r=0.9995。表明在 0.2~1.0mg/mL 范围内线
性关系良好。
2.4 精密度试验 取 0.6mg·mL-1 的芥子碱对照品溶液，按 2.1 项
下所述电泳条件连续进样 6 次，记录色谱图，分别计
算芥子碱的峰面积，RSD 为 0.72%，表明仪器精密度
良好。
2.5 重现性试验
取同一莱菔子样品按 2.2.2 项下制成 6 份，按 2.1
项下所述电泳条件进样分析，计算峰面积，RSD 为
1.02%。
2.6 稳定性试验
取莱菔子样品溶液，分别在 0、2、4、6、8、12h 进
分离电压为 25kV，极性为从正极到负极；压 力 进 样 30mbar×8s；检 测 波 长 326nm；运 行 缓 冲 液为 0.02mol/L Na2HPO4：0.02mol/L NaH2PO4=1：1 （25 ℃ 时 pH=6.89）；温 度 为 25 ℃。 所 用 溶 液 经 0.45μm 微孔滤膜膜过滤。在上述条件下测试， 莱菔子中芥子碱硫氰酸盐与其他成分分离较好， 见图 1。
表 1 加样回收试验结果
序号 1 2 3 4 5 6
称样 芥子碱含 加入量 测定量 回收率 平均回收 RSD
量（g） 量（mg）（mg） （mg） （%） 1.003 4.624 4.53 9.21 101.23 1.005 4.633 4.54 9.17 99.93 1.007 4.642 4.53 9.15 99.51 1.003 4.624 4.52 9.14 99.51 1.000 4.610 4.56 9.14 99.34 1.012 4.665 4.58 9.13 97.49
脾益胃之功效，摩腹疗法以掌部或四指指腹着力， 沿中脘→天枢→关元→天枢→中脘作环形摩动， 视具体病情采用顺时针或逆时针方向摩腹。其中 捏脊是通过对督脉和膀胱经的捏拿，达到调整阴 阳、疏 通 经 络、调 和 气 血、恢 复 脏 腑 功 能 的 目 的。 重点揉捏脾俞、胃俞起到健脾益胃之功效。摩腹 疗法能健脾和胃，助消化、增强食欲。此种方法解 决了患儿服药困难的难题，操作简便，健运脾胃从 而消除积滞，且兼有强身健体之功效。 4展望
小儿积滞症 68 例临床观察 [ J ] . 中国现代医生，2009，47 ( 12 )： 108-109. [ 7 ] 陈秀珍 . 针刺四缝穴在儿科临床中的应用 [ J ] . 山东中医药大 学学报，2010，34 ( 2 )：158. [ 8 ] 余惠华 . 捏脊、刺四缝加中药治疗小儿积滞 100 例 [ J ] . 新中 医，1998，30 ( 11 )：21. [ 9 ] 隋康民，王志军，薛兴英 . 针刺配合小儿推拿手法治疗小儿积 滞 75 例疗效观察 [ J ] . 青岛医药卫生，2000：32 ( 4 )：301. [ 10 ] 温乃元，王锦，张飞香 . 捏脊和摩腹手法治疗小儿积滞症 160
活应用以加强脾胃本身之功能，促进本能运化，
即可消除积滞。◆
参考文献 [ 1 ] 黄应培，叶志权 . 自拟运脾消积汤治疗小儿积滞临床观察 [ J ] .
北京中医药大学学报，2005，12 ( 4 )：20-21. [ 2 ] 张春迎，祈建平 . 中药化积汤治疗小儿积滞 40 例 [ J ] . 中医临
样，测定芥子碱峰面积，RSD=0.83%（n=6），表明样
品在 12h 内稳定。
2.7 加样回收试验
取 6 份已测芥子碱含量的莱菔子粉末约 2.5g，
分别加入芥子碱对照品约 3mg，置 50mL 容量瓶中，
加无水甲醇 30mL，按 2.2.2 项下制成溶液，按 2.1 项
下色谱条件进样，测定其回收率，见下表 1。
45
辽宁中医药大学学报
13 卷
植物甾醇等多种成分，其中的芥子碱是其降压作用 的活性成分之一，多以芥子碱硫氰酸盐的形式存在 于药材 [2]。因此，测定芥子碱的含量对控制莱菔子 药材质量具有重要意义。 1 仪器与试剂
Agilent 高 效 毛 细 管 电 泳 仪，石 英 毛 细 管 （75μm×90cm，实 际 长 度 81cm，Agilent 公 司），
莱菔子药材，粉碎，过三号筛。精密称取粉末约 2g，置具塞锥形瓶中，精密加入 70% 甲醇 20mL，密 塞，称定重量，超声提取 30min，放冷，称重，补足失
46
重，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
2.3 线性关系考察
分 别 取 0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mg/mL 的 芥 子 碱
对照品溶液，按 2.1 项下所述电泳条件分别进样
Key words：Semen Raphani；Sinapine；HPCE
莱 菔 子 为 十 字 花 科 植 物 萝 卜 Raphanus satiou L. 的种子，为临床常用药物。该药性味辛甘平，归肺
脾胃经，具有消食除胀、降气化痰的功效 [1]。莱菔子 含有莱菔素（Raphanin）、芥子碱（Sinapine）、亚油酸、
含 量 测 定 的 检 测 波 长 为 326nm，故 本 试 验 也 选 用 326nm 为 检 测 波 长。 本 试 验 考 查 了 0.025mol·L-1 硼 砂：乙 腈 =9：1、0.05mol·L-1 硼 砂：0.01mol·L-1
Na2HPO4=5：1（16℃ pH=9.2）、0.02mol/L Na2HPO4： 0.02mol/L NaH2PO4=1：1（25℃时 pH=6.89）等多种 不 同 缓 冲 液，发 现 0.02mol/L Na2HPO4：0.02mol/L NaH2PO4=1：1（25℃时 pH=6.89）为缓冲液，分离效 果好，分离时间短，峰形尖锐，能达到基线分离。
CAI Mei-chao （Shandong University of Traditional Chinese Medicine，Ji'nan 250355，Shandong，China）
Abstract：Objective ：To determine the content of Sinapine in Semen Raphani. Methods ：Apply the methods of HPCE，and the best condition was using the quartz capillary tube（75μm×90cm，practical length
KQ-250E 型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限 公司）。
芥子碱硫氰酸盐对照品购于中国药品生物制 品鉴定所（供含量测定，批号 111702-200501）；莱 菔子购于建联药店，经本校中药鉴定教研室李峰 教授鉴定为十字花科植物萝卜 R. satious L. 的干 燥成熟种子莱菔子。其余药品试剂均为国产分ຫໍສະໝຸດ Baidu 纯。 2 方法与结果 2.1 分离条件
床医生杂志，2007，35 ( 10 )：65. [ 3 ] 王玉芝 . 脾可欣治疗小儿脾虚性腹泻及消化不良积滞的临床
观察 [ J ] . 首都医药，2000，7 ( 1 )：38. [ 4 ] 李治湖，李永红 . 中药敷脐治疗小儿积滞 30 例 [ J ] . 现代中西
医结合杂志，2004，13 ( 5 )：658-659. [ 5 ] 李锡久，梁虹，马翔，等 . 消积灵治疗小儿积滞 [ J ] . 中国中西
（75μm×90cm，实际长度 81cm），运行缓冲液为 0.02mol/L Na2HPO4：0.02mol/L NaH2PO4=1：1（25℃时 pH=6.89）， 分离电压为 25kV，压力进样 30mbar×8s，温度为 25℃，检测波长为 326nm。结果：芥子碱在 0.2~1.0mg/mL 范围内呈
综上所述，脾胃虚寒是小儿积滞的一个重要 致病原因，随着现代生活水平的提高，加上家长 对小儿的溺爱，医者常常重视小儿饮食过量易导 致积滞的发生的病因，却容易忽略小儿先天脾胃 不 足，稍 吃 寒 凉 之 物 即 可 能 导 致 积 滞 发 生 的 病 因。《幼幼集成》云：“大凡小儿元气完固，脾胃素 强者，多食不伤，过食不饥。若儿先因本气不足， 脾胃素亏者，多食易伤。”针对这类脾胃先天不足 患儿，我们应该“必先以固胃气为主，使养正则积 自除。”运用“温运脾胃”法，可采用多种治法，灵
A
B
A 芥子碱对照品，B 莱菔子药材，1 为芥子碱的峰。 图 1 芥子碱对照品（A）、莱菔子药材 （B）中芥子碱硫氰酸盐分离情况
2.2 溶液制备 2.2.1 芥子碱对照品溶液
精密称取芥子碱对照品约 10mg（五氧化二磷 干燥器中减压干燥 24h），置 10mL 棕色容量瓶中，甲 醇溶解并定容至刻度，然后精密吸取 0.2、0.4、0.6、 0.8mL 分别至 1mL 棕色容量瓶中，甲醇定容至刻度， 即得。 2.2.2 莱菔子溶液
（2）本次试验结果表明莱菔子中芥子碱的含量
大于 0.4%，符合《中华人民共和国药典》规定。◆
参考文献
[ 1 ] 周凤梧 . 实用中药学 [ M ] . 济南：山东科学出版社，1985：671.
is 81cm），0.02mol/L Na2HPO4：0.02mol/L NaH2PO4=1：1（pH=6.89 at 25℃）buffer，pressure injection 30mbar× 8s，at a constant voltage of 25kV and temperature at 25℃ . It was detected on 238nm. Results：Sinapine had a good linearity within 0.2~1.0mg·mL-1（r=0.9995），and the average recovery were 99.50% with RSD 1.21%. Conclusion：This method is feasible for determination of Sinapine in Semen Raphani.
率（%） （%） 99.50 1.21
平均回收率为 99.50%，RSD 为 1.21%，表明回收
率良好。
2.8 样品测定
将 2.2.2 项 下 样 品 溶 液 按 2.1 项 下 色 谱 条 件 进
样，计算莱菔子中芥子碱的含量为 4.61%。
3讨论
（1）《中 华 人 民 共 和 国 药 典》[3] 中 芥 子 碱 的
例 [ J ] . 中国民间疗法，2006，14 ( 12 )：24-25.
收稿日期：2011-03-25 基金项目：国家新药研发大平台项目（2009*ZX09301-013）；山东省自然科学基金项目（ZR2010HM017）；山东省教育厅科技计划项目
（J105LL05）；山东省科技发展计划项目（2008GG2NS02011） 作者简介：蔡梅超（1975-），女，山东青州人，讲师，博士研究生，研究方向：中药新药研究与中药炮制原理研究。
良好的线性关系（r=0.9995），平均回收率为 99.50%，RSD 为 1.21%。结论：高效毛细管电泳法可用于测定莱菔子中
芥子碱的含量。
关键词：莱菔子；芥子碱；高效毛细管电泳法
中图分类号：R122.11
文献标识码：A
文章编号：1673-842X(2011) 09-0045-02
Determination of Sinapine in Semen Raphani by High Performance Capillary Electrophorsis
第13卷 第9期 2011 年 9 月
辽宁中医药大学学报
JOURNAL OF LIAONING UNIVERSITY OF TCM
Vol. 13 No. 9 Sep . ，2011
高效毛细管电泳法测定莱菔子中芥子碱含量
蔡梅超
（山东中医药大学，山东 济南 250355）
摘 要：目的：测定中药莱菔子中芥子碱的含量。方法：采用高效毛细管电泳法，电泳条件为石英毛细管柱
测 定，以 芥 子 碱 浓 度（mg/mL）为 横 坐 标，芥 子
碱 峰 面 积 为 纵 坐 标，回 归 得 方 程：y = 134.53x+
71.63，r=0.9995。表明在 0.2~1.0mg/mL 范围内线
性关系良好。
2.4 精密度试验 取 0.6mg·mL-1 的芥子碱对照品溶液，按 2.1 项
下所述电泳条件连续进样 6 次，记录色谱图，分别计
算芥子碱的峰面积，RSD 为 0.72%，表明仪器精密度
良好。
2.5 重现性试验
取同一莱菔子样品按 2.2.2 项下制成 6 份，按 2.1
项下所述电泳条件进样分析，计算峰面积，RSD 为
1.02%。
2.6 稳定性试验
取莱菔子样品溶液，分别在 0、2、4、6、8、12h 进
分离电压为 25kV，极性为从正极到负极；压 力 进 样 30mbar×8s；检 测 波 长 326nm；运 行 缓 冲 液为 0.02mol/L Na2HPO4：0.02mol/L NaH2PO4=1：1 （25 ℃ 时 pH=6.89）；温 度 为 25 ℃。 所 用 溶 液 经 0.45μm 微孔滤膜膜过滤。在上述条件下测试， 莱菔子中芥子碱硫氰酸盐与其他成分分离较好， 见图 1。
表 1 加样回收试验结果
序号 1 2 3 4 5 6
称样 芥子碱含 加入量 测定量 回收率 平均回收 RSD
量（g） 量（mg）（mg） （mg） （%） 1.003 4.624 4.53 9.21 101.23 1.005 4.633 4.54 9.17 99.93 1.007 4.642 4.53 9.15 99.51 1.003 4.624 4.52 9.14 99.51 1.000 4.610 4.56 9.14 99.34 1.012 4.665 4.58 9.13 97.49
脾益胃之功效，摩腹疗法以掌部或四指指腹着力， 沿中脘→天枢→关元→天枢→中脘作环形摩动， 视具体病情采用顺时针或逆时针方向摩腹。其中 捏脊是通过对督脉和膀胱经的捏拿，达到调整阴 阳、疏 通 经 络、调 和 气 血、恢 复 脏 腑 功 能 的 目 的。 重点揉捏脾俞、胃俞起到健脾益胃之功效。摩腹 疗法能健脾和胃，助消化、增强食欲。此种方法解 决了患儿服药困难的难题，操作简便，健运脾胃从 而消除积滞，且兼有强身健体之功效。 4展望