实验六肝炎甲、乙、丙的意义

临床意义 （1）乙肝的筛选和普查。 （2）HBsAg阴性不能完全排除乙型肝炎。 （3）同时出现HBsAg和抗-HBs，可能是不同亚型重复感 染。 （4）如果仅表现为HBsAg阳性者，传染性较弱。
乙型肝炎表面抗体(HBsAb)
生物学性状 ❖ 是一种保护性抗体 位于病毒表面 ❖ 是机体感染或接种乙肝疫苗的标志 ❖ 如一过性HBsAg阳性，则抗-HBs可以为阴性
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实验六肝炎甲、乙、丙的意义
【操作步骤】
• 在进行测试前必须先完整阅读使用说明书，使 用前将试剂条和血样标本恢复至室温（20℃30℃）。 1 ． 从原包装铝箔袋中取出试剂条， 在1小时内应尽快地使用。 2． 将试剂条插入血 清/血浆标本中。注意：血清/血浆标本液面不能 超过试剂条的标记线。 3． 等待紫红色条带的 出现，测试结果应在15分钟时读取。 30分钟后 判定无效。弱阳性标本会在15分钟至30分钟出 现T线。
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【结果判定】
• 阳性（+）：两条紫红色条带出现。一条位于测试区 （T）内，另一条位于质控区（C）。阳性结果表明： 标本中含有乙肝表面抗原（HBsAg）。 阴性（-）：仅 质控区（C）出现一条紫红色条带，在测试区（T）内 无紫红色条带出现。阴性结果表明：标本中检测不出 乙肝表面抗原（HBsAg）。 无效：质控区（C）未出 现紫红色条带，表明不正确的操作过程或试剂条已变 质损坏。在此情况下，应再次仔细阅读说明书，并用 新的试剂盒重新测试。如果问题仍然存在，应立即停 止使用此批号产品，并与当地供应商联系。
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常用方法
★1、ELISA ★ 2 、金标法
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1、ELISA
待测 抗原
酶标
E
抗体
E
E
底物
显色
固相 抗体
洗板
洗板
E
E
wk.baidu.com
E
温育
E
E
E
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二、分析肝炎标志物检验结果
（一） 乙型肝炎的诊断标志物
✓乙型肝炎表面抗原（HBsAg） ✓乙肝病毒前S1抗原 ✓抗乙肝病毒前S1抗体 ✓乙肝病毒前S2抗原 ✓抗乙肝病毒前S2抗体 ✓乙型肝炎核心抗原（HBcAg）
✓乙肝核心抗体-IgG ✓乙型肝炎表面抗体（抗-HBs） ✓乙型肝炎e抗原（HBeAg） ✓乙型肝炎e抗体（抗-HBe ） ✓乙肝核心抗体-IgM
结果判断
• 按照试剂盒确定的Cut-off值判断结果 • ELISA测定的“灰区”
（可疑结果的含义）
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定性酶免疫测定的CUT-OFF值
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2、HBsAg 胶体金法
• 【测定原理】 HBsAg 胶体金法检测试剂条采用 高度特异性的抗体抗原反应及免疫层析分析技术， 试剂条含有被预先固定于膜上测试区（T）和质 控区（C）的抗体。
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双抗体夹心法
标本
G区：金标特异性抗 体(兔型)
T区：特异性 抗体
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吸水纸
C区：羊抗 兔Ig
• 这条带是HBsAg 抗体-HBsAg-金标粒子的复合 物在膜上结合形成的。如是阴性，则测试区（T） 内将没有紫红色条带。无论HBsAg是否存在于标 本血样中，一条紫红色条带都会出现在质控区 （C）内。质控区（C）内所显现的紫红色条带是 判定是否有足够标本，层析过程是否正常的标准， 同时也作为试剂的内控标准。
实验六肝炎甲、乙、丙的意义
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金溶胶标记蛋白质，胶体金颗粒具有高电子密度的特性，故在金标蛋白的抗
原抗体结合处，显微镜下可见黑褐色颗粒；当这些标记物在相应的标记处大 量聚集时，可在载体膜上呈现肉眼可见红色或粉红色斑点(线)，从而用于抗
原或抗体物质的定位或定性。
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实验六
实验六
一、乙型肝炎表面抗原（HBsAg）测定 二、分析肝炎标志物检验结果 三、类风湿因子（RF）的测定 四、分析生化全项结果
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一、乙型肝炎表面抗原（HBsAg）测定
乙型肝炎的病原体是乙肝病毒（HBV），由 于至今还不能成功地对该病毒进行分离培养， 所以，乙肝的诊断主要依赖于乙肝标志物 （HBsAg、HBsAb 、 HBeAg 、HBeAb 、 抗－HBc)的检测，在大型医院检验科应用 PCR技术进行HBVDNA（乙肝核酸）检测， 来判断HBV是否复制，乙肝患者传染性强弱。 HBsAg是临床使用最广泛的诊断乙肝的指标。 因此，本实验来介绍HBsAg的检测。
注意：测试区（T）内的紫红色条带可显现 出颜色深浅的现象。但是，在规定的观察时 间内，不论该色带颜色深浅，即使只有非常 弱的色带也应判为阳性结果。
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【灵敏度和特异性】
• HBsAg 试剂条在15 分钟时可检测出 5ng/mlHBsAg，30分钟时可检测出1ng/ml HBsAg。 并与ELISA 试剂条比较，实验表 明HBsAg 试剂条的灵敏度可达到99.7%， 特异性为99.66%。
乙型肝炎表面抗原(HBsAg)
生物学性状
❖ 存在于Dane颗粒的表面
❖ 位于病毒表面 ❖ 是一种糖蛋白 ❖ 4种亚型(adr,adw,ayr,ayw) ❖ 判断HBV感染的指标之一 ❖ 刺激机体产生保护性抗体即抗-HBs
Surface Ag
Core Ag (also “e” Ag)
乙型肝炎病毒 ( Hepatitis B Virus )
Dane 颗粒 (schematic
HBV 阳性血清电镜图 Dane 颗粒
DNA
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检测方法： SPRIA（固相放射免疫法） ELISA（酶联免疫吸附试验） RPHA（反向间接血凝试验） 化学发光法
可对血清中的
HBsAg进行定量检测， 对肝炎病人动态疗效 观察很有价值
临床意义
（1）抗-HBs阳性提示急性感染后的康复。 （2）在接受抗-HBs阳性血液的受血者中，可出现短暂性的抗-HBs 阳性。 （3）HBV疫苗接种后，可出现抗-HBs阳性。 （4）抗-HBs与HBsAg同时阳性可见于暴发性肝炎或慢性活动性肝 炎患者。 （5）HBsAg含量消失同时伴抗-HBs的出现，是目前临床上慢性乙 型肝炎治疗的最终目标。