FISH检测在临床上的应用

FISH检测在临床上的应用

FISH在乳腺癌中的应用

1、检测项目：HER-2/neu基因、17号染色体数目

临床意义：1）指导赫赛汀的使用；2）指导临床常规药物的应用：研究表明HER-2/neu基因扩增的病人用高剂量的蒽环类和紫杉醇类药物更有效；3）预后判断：HER-2/neu基因扩增的病人预后差，存在高复发率的危险。

2、与常规的免疫组化检测项目相比的优势：1）免疫组化结果评判存在主观性，对于1＋、2+结果存在不明确的可能；IHC存在10％-20％的假阳性；5％-10％的假阴性；2）免疫组化无法判断是因为HER-2/neu基因扩增还是由于17号染色体的非整倍性造成的蛋白表达，而17号染色体的非整倍性扩增的患者对于赫赛汀治疗效果不明显；FISH可以解决这一问题。3）CISH的优点是在普通光镜下即可检查，但对低倍扩增及染色体非整倍扩增检测灵敏度下降

3、乳腺癌患者TOP2A基因的检测

临床意义：1）指导用药：TOP2A基因异常的乳腺癌患者对于含蒽环类药物的治疗方案更为敏感。TOP2A扩增的病人使用CEF方案进行治疗可以降低61%的复发风险和51%的死亡风险，而没有TOP2A扩增的患者使用CEF方案只能降低6%的复发风险和10%的死亡风险；2）判断预后：TOP2A基因异常的乳腺癌患者预后差，且TOP2A缺失的病人预后更差。4、与常规的免疫组化检测项目相比的优势：1）敏感性和特异性高；2）免疫组化法不能检测TOP2A基因的缺失，而FISH技术可以精确的判断基因的扩增或缺失。

FISH在宫颈癌中的应用

1、检测项目：TERC基因

临床意义：1.）辅助病理分级：如果有TERC基因的扩增，则有90%的可能病理分级在CIN2以上；若无TERC基因的扩增，则有90%的可能病理分级在CIN1以下。

风险预测：伴有hTERC基因扩增的癌前病变的病人有52%-96%的恶变可能。

运用FISH技术进行hTERC基因扩增的检测极有助于宫颈癌的筛查及早期诊断。

2、与传统的子宫颈癌筛查方法的优势：1）细胞形态学检查的敏感性一般在55％－80%左右，存在主观因素及病理分级难以明确的问题；而FISH技术能准确区分宫颈细胞高度癌前病变与低度癌前发育异常，即区分CIN2 和CIN3 与正常、ASCUS及CIN1的灵敏度和特异性超过90%；2）HPV检测虽敏感性高，但特异性低，许多HPV阳性的病人在一年之内

可转阴，并不会导致宫颈癌的发生。

FISH在膀胱癌检测中的应用

1、检测项目：p16基因、3、7、17号染色体数目

临床意义：1）可以排除恶性血尿（确诊肿瘤）；2）膀胱癌术后复发的监测；3）鉴别诊断（可以区分长在肾区的肾癌和肾于癌）

2、FISH检测的优势：1）无创性早期诊断；2）检测与膀胱癌进展与分级相关的染色体异常；3）不受BCG免疫治疗影响；4）在分子水平最先发现复发

FISH在产前检测中的应用

1、检测项目：13、18、21、X、Y染色体数目

临床意义：准确、快速的检测13，18，21，X，Y染色体的数目异常。

2、在产前诊断领域里的优势：对被测细胞并无特殊的要求，分裂期或间期细胞均可进行检测；无需细胞培养，可以做到即取即测；24小时即可出诊断报告，可及时为医生、受检者提供参考数据；分辨率高：传统的核型分析核型分析仅能诊断染色体数目和大片断的异常，对小片断的缺失，如少于5Mb的区段缺失无法分辨；不能检测单基因病。FISH可以检测10kb的基因异常。

检测项目：DiGeroge/VCFS综合症

临床意义：检测胎儿TUPLE1基因状态，诊断胎儿是否患有DiGeroge/VCFS综合症，TUPLE1基因存在于Digeorge关键区，22号染色体微缺失核心部位，该基因缺失可判定有先天性心脏发育不全。ARSA缺失为22号末端缺失综合症，常表现为智力低下；判断父母再次怀有DiGeroge/VCFS综合症胎儿的风险。

FISH在血液肿瘤中的应用

1、淋巴细胞性白血病（慢淋）

检测项目：RB1、P53、A TM、D13S25、CSP12

临床意义：辅助判断患者预后状态，判断生存期；指导临床个性化治疗

预后差:P53缺失（32个月）

预后较差：ATM缺失（79个月）

预后中等：CSP12三体（114个月）

预后较好：RB1缺失、D13S25缺失（133个月）

2、多发性骨髓瘤

检测项目：RB1、P53、1q21、D13S319、IGH

临床意义：辅助判断患者预后状态，判断生存期；指导临床个性化治疗

预后较差：P53缺失（24.7个月）；1q21扩增；IGH发生（4:14）t(14:16)易位

预后中等：RB1缺失（42.3个月）；D13S319缺失(42.3个月)

预后较好：IGH发生t(11;14)易位或无其他遗传改变

3、慢性粒细胞性白血病

检测项目：BCR/ABL融合基因、ASS基因缺失

临床意义：检测BCR/ABL融合基因，辅助诊断CML；指导临床使用靶向治疗药物格列卫；评估用药效果；监测移植后复发

鉴别诊断：伴有ASS基因缺失的患者可以确诊为慢性粒细胞白血病的急变期，生存期显著缩短，预后差。

4、急性粒细胞性白血病

检测项目：CBFB-MYH11融合基因、PML/RARA融合基因、AML1/ETO融合基因

临床意义：

1）判断预后：有CBFB-MYH11基因融合的患者预后较好，采用HDAC方案可获得高DFS 和低复发率；AML1/ETO基因融合阳性是预后好的标志，CR率可达90%，5年长期无病生存期可达50%-70%。

2）确诊分型：PML/RARA融合基因主要见于M3型白血病中；CBFB-MYH11融合基因主要见于M4型血病中；AML1/ETO融合基因主要见于M2b型白血病中。

3）评估用药疗效：有PML/RARA融合基因的患者采用全反式维甲酸治疗可以实现病情缓解率为90%。

5、性染色体错配骨髓移植

检测项目：X、Y染色体

临床意义：用于性染色体错配的骨髓移植的效果监测

6、在淋巴瘤当中的应用

检测项目：IGH/BCL2融合基因、IGH/CCND1融合基因、BCL6基因断裂重组。

临床意义：辅助诊断

FISH在这一在血液肿瘤领域的优势：

1）分辨率高：可以检测100kb左右的异常，远远高于核型分析的分辩率。

2）可以直接体现异常细胞百分比，对于临床后期治疗有着很强的指导作用、耗时短（24小时出结果），操作简单。