(优选)肾功能试验

第二节 血清尿素测定
（一）尿素酶法
1、尿素酶偶联法 尿素＋H2O 尿素酶 2NH3＋CO2 NH3＋Байду номын сангаас-酮戊二酸＋NADH＋H+ 谷氨酸脱氢酶 谷氨酸＋NAD＋ ＋H2O 优点：适用于自动分析仪
（二）二乙酰一肟法
二乙酰一肟＋水 H+ 二乙酰＋羟胺 二乙酰＋尿素 H+ 二嗪化合物（粉红色）
优点：灵敏、简单，显色稳定 缺点：试剂腐蚀性强，加热时有异味，难
• 熟悉：1.肾小管的重吸收；
•
2 .肾小管与集合管的分泌；
•
3.肾脏的组织学结构
• 了解：1.肾脏的解剖结构
教学重点、难点：
• 重点： • 1. 肾小球滤过的动力因素； • 2. 尿素测定的方法比较 • 难点： • 理解尿素测定的注意事项
一、肾脏的排泄功能
二、肾功能的排泄功能试验
以实现自动化
作业
• 预习报告：二乙酰一肟 法测定尿素原理及 注意事项。
授课内容:
• 第三节 血清肌酐测定 • 一、苦味酸法 • 二、速率法 • 第四节 血清尿酸测定 • 一、磷钨酸还原法 • 二、尿酸酶法 • 第五节 内生肌酐清除试验
教学目标与要求：
• 掌握： • 1. 内生肌酐清除率测定原理及临床意义； • 2.血清肌酐测定原理及临床意义； • 3.血清尿酸测定原理及临床意义 • 熟悉： • 1.尿液总蛋白测定； • 2.尿液微量白蛋白测定； • 3.尿液pH值、相对密度及渗透量的测定 • 4.尿液酶的测定
（优选）肾功能试验
授课内容:
• 第一节 概述 • 一、肾脏的排泄功能 • 二、肾功能的排泄功能试验 • 三、肾功能试验的选择与评价 • 第二节 血清尿素氯测定 • 一、二乙酰-亏法 • 二、脲酶比色法
教学目标与要求：
• 掌握：1.肾脏的血液供应；
•
2.肾小球滤过的动力；
•
3.血清尿素的测定原理及临床意义
• 缺点：特异性不高 • 不是肌酐而能起反应的物质称为假肌酐，
相当数量的假肌酐存在于红细胞中，故在 测定血液肌酐时用血清和血浆较好。
（二）酶联法
肌酐＋H2O 肌酸＋ATP
肌酐水合酶 肌酸 肌酸激酶 磷酸肌酸＋ADP
ADP＋磷酸烯醇式丙酮酸 丙酮酸激酶
丙酮酸＋ATP 丙酮酸＋NADH＋H+ 乳酸脱氢酶乳酸＋NAD+
• 尿酸＋磷钨酸→尿囊素＋CO2＋钨蓝 • 缺点：特异性不高，显色褪色速率变化
不定，灵敏度低
（二）尿酸酶法
1、紫外分光法 • 原理：尿酸在282-292nm处有特异吸收
峰 • 优点：灵敏度高，特异性强，其他物质
无干扰；血清标本可直接测定，不需沉 淀蛋白，易于自动化，简单、快速
教学重点、难点
• 重点： • 1.血清内生肌酐清除率测定原理及临床意义； • 2.血清肌酐测定原理及临床意义； • 难点： • 理解内生肌酐清除订测定原理
第三节 血清肌酐测定
（一）Jaffe反应法(苦味酸法)
• 测定肌酐最常用的方法 • 尿、血清中的肌酐与苦味酸盐作用，生成
黄红色的苦味酸肌酐复合物。
优点：特异性高，标本不需去蛋白，特别适 用于自动分析
缺点：工具酶过多，价格昂贵
（三）高效液相色谱法
• 特异性高、准确性好 • 参考方法，评价常规肌酐测定法的准确度
第四节 血清尿酸测定
（一）磷钨酸法 （二）尿酸酶法
1、紫外分光法 2、酶联比色法 3、酶联－紫外分光法 （三）高效液相色谱测定法
（一）磷钨酸法