禽流感的诊断方法有哪些
禽流感应该做哪些检查？
禽流感应该做哪些检查？*导读：本文向您详细介禽流感应该做哪些检查，常用的禽流感检查项目有哪些。
以及禽流感如何诊断鉴别，禽流感易混淆疾病等方面内容。
*禽流感常见检查：常见检查：血常规、尿常规、胸部平片、病毒感染免疫检测、流感病毒抗体*一、检查：1、外周血象白细胞总数一般不高或降低，重症患者多有白细胞总数及淋巴细胞下降。
2、病毒抗原及基因检测取患者呼吸道标本采用免疫荧光法(或酶联免疫法)检测甲型流感病毒核蛋白抗原(NP)及禽流感病毒H亚型抗原，还可用RT-PCR法检测禽流感病毒亚型特异性H 抗原基因。
3、病毒分离从患者呼吸道标本(如鼻咽分泌物，口腔含漱液，气管吸出物或呼吸道上皮细胞)中分离禽流感病毒。
4、血清学检查发病初期和恢复期双份血清抗禽流感病毒抗体滴度有4倍或以上升高，有助于回顾性诊断。
5、胸部影像学检查：重症患者胸部X线检查可显示单侧或双侧肺炎，少数可伴有胸腔积液等。
*以上是对于禽流感应该做哪些检查方面内容的相关叙述，下面再来看看禽流感应该如何鉴别诊断，禽流感易混淆疾病。
*禽流感如何鉴别？：*一、鉴别：临床上应注意与流感，普通感冒，细菌性肺炎，传染性非典型肺炎(SARS)，传染性单核细胞增多症，巨细胞病毒感染，衣原体肺炎，支原体肺炎等疾病进行鉴别诊断。
与流行性感冒鉴别流行性感冒一般分为三种，即甲型，乙型和丙型，乙型和丙型流行性感冒一般只在人群中传播，很少传染到其他动物，甲型流行性感冒大部分都是禽流感，禽流感病毒一般很少使人发病，禽流感主要在鸟类中间传播，偶可感染至人，其临床表现与人类流行性感冒相似，但人禽流感症状重，并发症多，与普通流感有一定区别。
*温馨提示：以上内容就是为您介绍的禽流感应该做哪些检查，禽流感如何鉴别等方面内容，更多更详细资料请关注疾病库，或者在站内搜索“禽流感”了解更多，希望以上内容可以帮助到大家！。
禽流感快速诊断方法研究进展
位 素 探针 敏感 性 相 当 。 黄庚 明等 用 利
Ｐ Ｒ 术 建 立并 优 化 了检 测Ａ Ｖ 酸 的 Ｃ技 Ｉ核
Ｄ Ｇ 记 的ｅ Ｎ 探 针 杂 交 法 。 该探 针 Ｉ标 Ｄ Ａ 具 有 良 好 的 特 异 性 和 敏 感 性 ， 为 从 分 子 水 平 探 讨 Ａ Ｖ的 发 病 机 理 及 ｌ Ｉ 临 床 早 期 快 速 诊 断 Ａ Ｖ提 供 了 新 的 手 Ｉ
依 据 ，并 可 在 不 同亚 型 间产 生 交 叉 保 护 力 。 ｌ 中 ， 类 感 染 Ａ Ｖ后 ， ｌ 临床 禽 Ｉ 其临
流 感 的快 速 诊 断 方 法 有 以下 几 种 ：
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对ＡＩ 快 速 、 确 、 异 的诊 断 非 常 必 要 本 文 就 禽 流 感 快 速 诊 断 方 法 的 研 究 进 ｖ的 准 特 展 进 行 了概 述 ， 以期 为 禽 流 感 的 早 期 诊 断 和 及 时 防 治 提 供 一 定 指 导 。
关 键 词 禽 流 感 快 速 诊 断 研 究进 展
禽流感各种诊断技术的比较
诊断速度较快，步骤比胶体金试纸多，适合小样
本量测定免疫酶试剂盒国内无试剂 RT-PCR*病毒
基因 NY/T772—2004 速度较快，可以鉴定亚型。 RT-PCR 试剂盒农业部兽医诊断中心荧光 RT-PCR 病 毒 基 因 GB/T19438.1-2004 （ 通 用）;GB/T19438.2-2004（H5）GB/T19438.3-2004
禽流感诊断监测方法很多，各种方法都有各 自的应用范围，有各自的优点和局限性。现将各
种方法作一总结，在诊断监测中，应根据具体需
要采用合适的方法。禽流感各种检测方法的比较
见下表。禽流感各种检测方法汇总表检测方法检 测对象依据标准适用性与局限性所用试剂试剂
来源琼脂扩散（AGID）试验*A 型 AIV 抗体
AIV 抗体 NY/T770—2004 敏感性高，适合批量测 定 ELISA 试剂盒 IDEXX 元亨免疫胶体金试纸 A 型
AIV 抗原适合现场快速诊断胶体金试纸条世纪元
亨免疫荧光（IF）试验组织、细胞病毒抗原诊断
笔也不像平常那般顺手。在这个异乡的海边，诸多回忆纷至沓来，如砂砾中的
速度较快，受主观经验影响大，不易掌握抗 AIV 荧光抗体国内无试剂免疫酶渗滤法 A 型 AIV 抗原
高敏感性，操作烦琐，易产生假阳性 NASBA 试剂 盒上海出入境检验检疫局病毒分离 * 病毒
GB/T18936 可最终确诊，周期长鸡胚
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笔也不像平常那般顺手。在这个异乡的海边，诸多回忆纷至沓来，如砂砾中的
GB/T18936 方法简单，敏感性低型抗原、抗血清
笔也不像平常那般顺手。在这个异乡的海边，诸多回忆纷至沓来，如砂砾中的
哈尔滨兽医研究所血凝（HA）及血凝抑制（HI） 试验*血凝素亚型抗原、抗体 GB/36 鉴定 HA
禽流感病毒的分离与鉴定技术
禽流感病毒的分离与鉴定技术孙建宏,刘景利,张从禄①（中国农业科学院哈尔滨兽医研究所，黑龙江哈尔滨150001）①摘要：禽流感病毒的诊断一般是通过鸡胚分离病毒，检测其血凝活性，并应用琼脂扩散试验或其他试验确定其是否为禽流感病毒，再进一步进行亚型鉴定、致病力测定。
如果是H5或H7亚型，还应采用PCR等方法对血凝素裂解位点的氨基酸序列进行测定。
①关键词:流感病毒;分离;鉴定①禽流感（Avianinfluenza，AI）由正黏病毒科A型流感病毒属的流感病毒引起。
该病毒的血清型分为15个HA亚型和9个NA亚型。
禽流感病毒可感染各种家禽和野禽，但多数呈亚临床感染。
一些H5和H7亚型可引起高致病性禽流感，可使鸡群100%死亡。
高致病性禽流感因其传播快、危害大，有的血清型可感染人，世界动物卫生组织（OIE）将其列为A类动物疾病，我国将其列为一类动物疫病。
①禽流感病毒的诊断可以根据临床症状、剖检变化做出初步诊断，进一步确诊需进行实验室检测。
目前一般是通过病毒分离和血清学试验检测病毒或是检测感染鸡的抗体进行鉴定。
近年来，随着分子生物学技术的发展，RT-PCR方法日臻成熟，也逐渐成为一种常用的诊断技术。
文章对这些禽流感的诊断技术分别做一些介绍。
①1禽流感病毒的分离①样本可采集死禽样本或活禽样本。
死禽样本一般采集肠内容物或泄殖腔拭子、鼻拭子、咽喉拭子以及内脏组织（气管、肺、气囊、肠、脾脏、肾、脑、肝脏和心脏等）；活禽样本可采集气管拭子、泄殖腔拭子。
由于采集棉拭子时幼禽容易受伤，所以还可取粪便。
①采集的拭子放入1.0mLPBS（pH7.0～7.4，含抗生素）的离心管中，静止作用30min。
对于泄殖腔拭子和粪便，用过滤器过滤除菌，上清液作为样本。
内脏样本应无菌取样，放于灭菌的玻璃研磨器，用PBS配成100g/L的悬液，加入1/10体积的抗生素，将处理过的样本移至离心管内，3000r/min离心10min，取上清液接种。
①采集或处理的样本在2℃～8℃条件下保存应不超过24h；如果需长期保存，需放置-70℃条件，但应避免反复冻融（最多冻融3次）。
禽流感诊断检测技术的应用
以现场操作，直接取喉气管、泄殖腔棉拭检测，
无须仪器设备，操作简单，10 分钟内即可初步判
夕年想要的是亲自的和他认识，所以她只是继续着她的方案。她们的教
断是否有禽流感病毒存在。2.实验室快速诊断采 用 RT-PCR 检测技术，可以直接鉴定 AIV 的型和 亚型。3.其它快速检测方法包括免疫酶渗滤法和
夕年想要的是亲自的和他认识，所以她只是继续着她的方案。她们的教
小样本量的监测血清学监测：少量血清样本（500 份以下），可直接使用各种亚型的血凝素抗原进 行 HI 试验，检测抗体是否存在以及抗体水平高
低。对于免疫群体，应侧重分析抗体水平和离散
度，评估群体的免疫状态和感染风险。病原学监
测：对于少量的样本（50 份以下），可直接进行 RT-PCR 检测或接种鸡胚分离病毒。（三）大样本 量监测血清学监测：应首先采用（针对 NP、H5、
H7抗体的）间接ELISA对血清样品进行初步筛选，
以提高检测效率，对 ELISA 检测为阴性的样本，
夕年想要的是亲自的和他认识，所以她只是继续着她的方案。她们的教
不必进一步检测；对筛选出的阳性样品再进行 HI 检测，以确定亚型。免疫群体可分析抗体水平的 高低和离要时可采样进行病原学检测。病原学监测：
对于大批量的样本，可用抗原捕获 ELISA 对样品
进行筛选。对阴性样品，不必进一步检测。对阳 性和可疑的样品进行 RT-PCR 检测或接种鸡胚分 离病毒。
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免疫荧光法检测禽流感病毒，如果采用血凝素特
异性的单克隆抗体，还可以初步鉴定病毒的血凝
素亚型。采用血凝素特异性的单克隆抗体介导的 抗原捕获 ELISA，还可以初步鉴定病毒的血凝素 亚型。当然，依靠快速诊断技术仅能作出初步诊
禽流感的诊断技术
禽流感的诊断技术作者：任文美来源：《新农村》2012年第20期禽流感（avian influenza，AI）是由正粘病毒科流感病毒属A型流感病毒引起的禽类从呼吸系统到全身性的感染和/或疾病综合症，根据疫情发生的严重程度，可分为高致病性禽流感（HPAI）、低致病性禽流感（LPAI）和非致病性禽流感（NPAI）。
病禽出现从无症状到厌食、精神萎顿、减蛋等临床症状，以至突然暴发、高度死亡。
其中，HPAI因其造成极其严重的疫情和损失，被国际兽疫局（OIE）列为A类传染病，我国把它定为一类传染病。
对禽流感及时而正确的诊断十分重要，以能采取果断的控制措施。
本病必须进行综合分析，尤以实验室诊断最为重要。
一、现场诊断根据流行病学，临诊症状及剖检变化只能作出可疑诊断。
由于禽流感的现场表现（发病特点、症状及剖检变化）差异较大且无典型性，所以要确诊必须依靠病原分离鉴定及血清学试验。
二、病原分离、鉴定A型流感病毒常在呼吸道或/和消化道中复制增殖，所以，活禽采集病料多从喉头、气管或泄殖腔中采集。
死禽采集气管、肝、肺、脾、肾等组织样品。
以棉花或其他材料制成的拭子、器具采集病料样品，放入加抗生素的无菌肉汤或20%～50%甘油生理盐水中。
最好低温4℃或-70℃下保存，以液态氮或干冰较好。
病料样品在保存或运送前可先行处理，制成10%的悬液，并进行低速离心澄清。
经离心的病料上清液接种SPF鸡胚，取0.1ml，经尿囊腔途径接种（或同时羊膜腔接种）9～11日龄的鸡胚，置37℃孵育3～7，天弃取24h内死去的胚，收集48h至96h的胚液和绒毛尿囊膜作无菌检查，检查鸡胚尿囊液对红细胞的凝集活性。
血凝阴性者，用尿囊液盲传2～5代，如仍未出现血凝时，判为阴性，弃去。
如出现血凝活性则进一步检查。
一般来说，如样品中有病毒存在，初次传代后就足以产生红细胞凝集作用。
出现血凝活性的病毒一般为10-5-10-6 EID 50/ml。
用于病毒鉴定的标准方法是以鸡红细胞来检测胚液的血凝活性，常量法和微量法都可使用。
鸡禽流感鉴别诊断技巧及防治措施
流感病毒可分为甲（A型，可感染人类、禽类和哺乳动物）、乙（B型，主要感染人类）、丙（C型，主要感染人类、猪），其中甲型流感病毒是鸡禽流感病的病原，并能感染人类和其他动物。
禽流感病毒的致病力极强，是禽病中最致命的传染性疾病，鸡群感染后会出现发热，嗜睡，流泪，咳嗽，呆立，鸡冠、颈部、腹下水肿，蛋鸡产蛋下降或产畸形蛋，高致病性禽流感病死率约100%。
鉴于鸡禽流感的高致病率，养殖户必须给予重视，做好早期鉴别和防控措施，这样才能提高鸡群整体素质，严格控制禽流感疫情，保障禽类养殖效益。
1 病原特征鸡禽流感的病原微生物为禽流感病毒，是一种球形的RNA病毒，直径为100±20nm。
从病原菌分类来看，鸡禽流感病毒为A型流感病毒，按照外膜血凝素的不同可分为16种亚型，名称从H1～H16，按其神经氨酸酶可分为10个亚型，名称从N1～N10。
不同亚型的流感病毒的致病力不同，其中4种（H5、H7、H9、H10）对人类具有致病性。
禽流感病毒对环境具有较强的适应力。
①耐低温：禽流感病毒污染的饮水，若水源温度维持在22℃左右，病毒可存活96h，若降低至0℃，则可存活1个月之久，且病毒在低温、潮湿环境能维持较长时间的活力，如在冰冻组织或骨髓存活时间长达10～12个月；②耐干燥：该病毒可在低温、干燥的组织存活6～12个月，在干燥尘土中可存活2周；③不耐高温：56℃30min或60℃10min或70℃3～5min或100℃1～2min均能将禽流感病毒灭活；④不耐直射，阳光直射44±4h即可杀灭禽流感病毒；⑤不耐化学消毒试剂，禽流感病毒对碘复合物、来苏儿、氢氧化钠、过氧乙酸、福尔马林等化学试剂具有较高的敏感性，可通过规范消毒灭活。
2 流行病学2.1 易感动物对禽流感病毒最敏感的禽类为鸡、火鸡，鹅、鸭感染后其症状不典型，多为隐性感染。
除上述禽类外，鹌鹑、鸽、鸵鸟等禽类也可感染该病毒。
若鸡（旱禽）和鸭（水禽）混合饲养，容易出现家禽交叉感染现象，并易出现大面积流行。
如何诊断禽流感(养鸡必看)
流感诊断要点
1、病鸡精神沉郁，采食减少，有呼吸道症状。鸡冠发紫，脚鳞呈蓝紫色。
2、病鸡肿头，流泪流涕，眼睑周围浮肿，肉冠和肉垂肿胀、出血甚至坏死。
3、病鸡出现头颈抽搐或振颤等神经症状。
4、有的毒株主要感染产蛋种鸡群，育雏和育成鸡一般不表现临床症状。发病种鸡群产蛋率下降20~50%，蛋壳粗糙,软皮蛋\褪色蛋增多.
5、机体脱水、发绀。
6、气管充血，有粘性分泌物，支气管栓塞。内脏浆膜黏膜、冠状脂肪有点状出血。肺坏死水肿。
7、腺胃乳头溃疡出血，黏膜上有脓性分泌物。肌胃内膜易剥离，皱褶处有出血斑。
8、肠道广泛性出血和溃疡，充满脓性分泌物。
9、肉种鸡腹腔内有新破裂的卵黄，卵泡变形、充血，严重者卵，如支原体、大肠杆菌等。
禽流感鉴别诊疗要点
2、产蛋（种）鸭
（1）、病鸭主要表现精神不振，下水后羽毛松乱、黏湿，白色、浅绿色水样黏性下痢，1~3天内食 欲下降甚至废绝。
（2）、产蛋率在3~4天内可从高峰期下降到30％甚至更低。刚开产鸭产蛋率不再上升，维持原水平 甚至略降。软壳蛋、薄壳蛋、小蛋等畸形蛋增多，并以软壳蛋增多为主，所产硬壳蛋则蛋壳不光滑、 表面粗糙。种鸭合格蛋减少。死亡率10%~50％不等，多死于蛋性腹膜炎。
发病鸭气管充血、出血，内有大量出血块
发病鸭气管、支气管充血、出血
胸腹气囊膜有出血点
心包发炎、积黄色液体
心肌坏死并有黄色胶冻样炎症
严重的心肌有白色、条纹状坏死和出血
肺部发炎、充血、出血和水肿
发病鸭整个心脏心肌白色条纹状坏死
发病鸭整个心脏变形，心包积液，心肌灰白色坏死
肝脏肿大、出血、质脆、呈土黄色
（4）、鸭流感的传染源较多，多为感染或发病的同舍或附近的鸡、鸭、鹅等家禽，病毒通过病禽 的分泌物、排泄物等污染饲料、饮水及环境，健康鸭通过直接接触和间接接触发生感染，呼吸道和 消化道是主要自然感染途径。由于感染鸭从粪便中大量排出病毒，污染饲养场、河（溪）水及放牧 场地，使本病较易传染给同舍鸭及附近其他禽类。
（3）、减少损：失鸭群一旦发生禽流感，除上报兽医防疫部门，采取隔离、封锁，扑杀濒死鸭， 深埋或焚烧死亡鸭，加强鸭群和环境消毒等措施，防止疫情进一步扩大外，对已接种过疫苗或病症 较轻的鸭群，可采取下述综合措施降低鸭的死亡率，提高和恢复产蛋率，减轻养鸭户的经济损失。
3、治疗： 本病目前没有有效的治疗方法，使用抗生素可以控制并发或继发的细菌感染。
禽流感病毒诊断技术研究进展
禽流感病毒诊断技术研究进展一、引言禽流感是一种高致病性病毒性疾病，目前已在世界范围内造成大量的家禽死亡和经济损失。
禽流感病毒的快速检测和准确诊断对于疫情的防控和阻断至关重要。
该文将介绍目前禽流感病毒诊断技术的研究进展。
二、免疫学诊断技术1. 细胞培养法细胞培养法是禽流感病毒的最早诊断方法之一，通过将感染样品接种细胞培养物中，观察是否有细胞损伤和病毒分离情况。
但由于该方法需要特定实验室条件，并且需要较长时间，因此已渐被其他更先进的诊断技术所取代。
2. 补体结合反应（CFT）CFT是一种免疫学诊断方法，它通过观察血清中禽流感特异性抗体和禽流感病毒抗原之间的补体结合情况来诊断病毒。
但是，由于该方法对试剂质量和操作技巧要求较高，且存在假阴性和假阳性等问题，因此不常用于临床检测。
3. 酶联免疫吸附试验（ELISA）ELISA是一种快速、准确和经济的诊断方法。
该方法利用特异性抗体与抗原之间的特异性结合，通过酶标记活性物质，使结合物可定量检测。
目前，ELISA已被广泛应用于疫情监测和疫苗效果评估等方面。
4. 荧光素酶联免疫吸附试验（F-ELISA）F-ELISA是一种对传统ELISA方法的改进，它利用荧光素作为标记物，从而提高了灵敏度和特异性。
F-ELISA操作简单、快速、可靠，已被广泛用于临床检测和疫情监测。
三、分子诊断技术1. 聚合酶链反应（PCR）PCR是一种高度敏感和特异的分子诊断技术，它能够从样品中扩增病毒DNA或RNA片段，从而进行病毒诊断。
PCR具有快速、准确、可靠的优点，因此已成为禽流感病毒诊断的首选方法之一。
2. 实时荧光定量PCR（RT-qPCR）RT-qPCR将常规PCR与荧光标记技术相结合，能够快速、准确地扩增、检测禽流感病毒。
该方法可用于样品的快速筛选和诊断。
此外，RT-qPCR还可用于研究禽流感病毒的毒株差异和基因变异。
3. 巢式PCR巢式PCR是将PCR的灵敏度和特异性提高到更高水平的方法。
禽流感诊断的程序和方法
禽流感诊断的程序和方法
嘿，朋友们！今天咱来聊聊禽流感诊断的那些事儿！你知道吗，禽流感可不是开玩笑的啊！
比如说咱去菜市场买只鸡，这鸡要是有禽流感，那可就麻烦大啦！那怎么知道这鸡有没有问题呢？这就涉及到诊断的程序和方法啦。
首先呢，医生就像个侦探一样，得仔细观察病人的症状，比如有没有发烧啊、咳嗽啊、呼吸急促啊这些。
这就好比你看到一个人脸色不太对，你就会想他是不是生病了呀。
然后呢，就会进行一些检查。
就像你找东西，得这里翻翻那里找找。
可能会抽血化验呀，看看血液里有没有禽流感病毒的迹象。
还有啊，可能还会用一些特殊的仪器来检查，这可高级啦！就像给人做个全身扫描似的。
这个时候，医生们那可是超级认真的，一点都不能马虎，因为这关系到大家的健康呢！
“哎呀，那万一诊断错了怎么办呀？”你可能会这么问。
放心，医生们都很厉害的啦！他们会反复确认，就像你做一件重要的事情会检查好几遍一样。
禽流感诊断这事儿可太重要了，就像我们出门要带钥匙一样重要！如果不能准确诊断，那后果可不堪设想啊！所以啊，医生们都肩负着很大的责任呢。
咱可得重视禽流感诊断，别不当回事儿。
大家都要健健康康的，不是吗？反正我觉得禽流感诊断真的超级重要，一定要严谨认真对待！。
禽流感诊断及防治措施
禽流感诊断及防治措施作者：张雪松来源：《赤峰学院学报·自然科学版》 2012年第5期张雪松（贵州大学动物科学学院，贵州贵阳 550025）摘要：禽流感对鸡群造成的危害非常严重，尤其是高致病性禽流感.禽流感病毒对上皮细胞和血细胞有较强的亲嗜性，由此而造成普遍性出血，引起器官衰竭，整个机体处于不可挽救的瘫痪状态.禽流感病毒繁殖快，对环境污染严重，传播途径广泛，速度快，控制难度大.本文重点研究了禽流感诊断方法并进一步提出防治措施.关键词：禽流感；诊断；防治措施中图分类号：S851.3 文献标识码：A 文章编号：1673-260X（2012）03-0139-02禽流感病毒是甲型流感病毒的一种，根据外膜血凝素（H）和神经氨酸酶（N）蛋白抗原性的不同，目前禽流感病毒分为15个H亚型（H1~H15）和9个N亚型（N1~N9），各亚型之间的交叉免疫保护性不高，目前人类还没有研制出1种疫苗能够对所有亚型的感染病毒起到预防作用.禽流感病毒对血细胞和上皮细胞的亲嗜性很强，导致器官和组织粘膜、浆膜的上皮细胞严重受损，引发大出血.禽类感一般通过呼吸系统、消化系统和眼结膜直接接触被感染的食物、水、灰尘、粪便和分泌物等感染病毒，禽流感病毒传播速度快，传播渠道广，控制难度大.1 病原学禽流感的病原体是甲型流感病毒的HSNI亚型病毒，1997年香港的禽流感与目前亚洲十个国家和地区发生的禽流感病原体都相同，HSNI型禽流感病毒是人与动物共患的流感病原体，容易引起世界性大流行，由于病毒多变异，导致甲型流感的反复发生，难以彻底消除.禽流感病毒基因组由8个单链RNA片段组成.这8个片段编码10个病毒蛋白，其中8个是病毒粒子的组成成分(HA、NP、MI、MZ、PBI、PBZ和PA)，另两个是分子质量最小的RNA片段，编码两个非结构蛋白一NSI和NSZ.NSI与胞浆包含体有关，但对NSI和NSZ的功能目前尚不清楚.现在已获得了包括H3、HS和在内的12个禽流感病毒亚型HA基因的全部序列以及所有14个血凝素基因的部分序列.禽流感病毒通常为直径80-120纳米球形、丝状物.表面覆盖10-12纳米的密实钉状物.禽流感病毒粒子构成包括：0.8%-1.1%的RNA，70%-75%的蛋白质，20%-24%的脂质和5%-8%的碳水化合物.脂质包括大量的磷脂、少量的胆固醇和糖脂，位于病毒的膜内.碳水化合物包括:核糖(在RNA中)、半乳糖、甘露糖、墨角藻糖和氨基葡糖.病毒粒子主要以糖蛋白或糖脂为主要存在形式.2 流行病学禽流感一般有以下流行病学特点：发病迅速、易传播、感染面广、流行区域大，病情一般很重.2.1 传染源禽流感病毒有三种不同型的传染源，目前发现的禽流感病毒均为A型.一般多见于禽类，人、马、猪也可感染，水貂、海豹、鲸等其他哺乳动物偶尔会感染.2.2 传播途径呼吸道是禽流感传播的主要途径，感染动物可通过咳嗽、打喷嚏等随呼吸道分泌物排出病毒，经飞沫感染其他易感动物.患禽亦可随粪便排出大量病毒，密切接触感染家禽的分泌物和排泄物、受病毒污染的物品和水等可被感染.患禽粪便中的HSNI型禽流感病毒株会在空气中传播，并被风携带而传播.迁徙的候鸟可通过粪便等污染水源和水禽.目前尚无经卵垂直传播的证据.3 诊断3.1 鉴别诊断3.1.1 与新城疫的鉴别相同症状：羽毛蓬乱，翅膀低垂，鼻内分泌物明显增多，嗜睡，晃头、呼吸障碍等.不同症状：感染禽流感通常为胰脏功能破坏，易出血，脚磷见血，头肿.新城疫很少有此症状.新城疫发病时通常抗体都会表现异常，如出现抗体水平紊乱等.因此，若禽类出现以上相同症状时，可通过检查新城疫抗体是否正常，若正常则可能感染禽流感病毒.3.1.2 与减蛋综合症的鉴别因受到低致病性流感病毒感染会使产蛋鸡产蛋数量迅速下降.并引发呼吸道感染，但一般死亡率较低.感染低致病性流感的蛋鸡下的蛋颜色比正常蛋浅，且表面有花斑状纹.患减蛋综合症的病鸡不会出现呼吸道疾病，临床表现为达不到产蛋高峰，产出畸形蛋和软壳蛋较多.3.1.3 与慢性呼吸道病的鉴别感染低致病性和非典型禽流感病毒，临床表现为呼吸道症状明显，粪便为青色、水样.通常死亡率大于30%.病鸡感染呼吸道疾病通常也以呼吸道症状为主，同时有严重的并发症如心包炎、气囊炎和腹腔炎等.由于心包膜的增厚，可见黄白色沉淀物于气囊上.病鸡患慢性呼吸道疾病，使用某些抗生素临床效果明显.3.1.4 与传染性喉气管炎的鉴别相同症状：呼吸障碍，咳、喘，喉咙及气管粘膜充血，出血、溃烂、组织坏死.不同症状：禽流感病鸡会出现消化道疾病，不管是成年鸡还是幼鸡都有可能发病，发病率高，且死亡率也高.传染性喉气管炎的病鸡出现消化道疾病的可能性很小，且一般多发于成年鸡.发病率低，而死亡率较高.3.2 实验室诊断传统诊断方法是以病原学为依据.靠鸡胚将病毒分离，病毒鉴定一般通过血凝和血凝抑制试验.以血清学为依据的诊断方法主要包括：免疫荧光技术综合试验、酶联免疫吸附试验和琼脂扩散试验等.目前，随着生物科技和免疫学的快速发展，各项先进技术应用到禽流感的快速诊断中，使其诊断技术更加完善.如聚合酶链反应、基因芯片、RT-PCR技术、核酸探针技术等.对高致病性禽流感病毒的诊断需要在HA亚型鉴定完以后，进一步做更加精确的试验进行诊断，如进行细胞培养、动物试验及对裂解位点进行序列分析等.4 综合性防制措施4.1 加强生物安全，搞好隔离饲养和消毒工作在许多乡村或偏远地区，小型养殖户大都存在将鸡和水禽混合饲养，或是分开饲养但属于同一场区的现象.水禽一般需要进行户外放养，与迁徙候鸟接触机率较大，候鸟迁徙过程中携带病毒较多，很可能通过粪便将病毒传染给水源或水禽，水禽与鸡处于同一场区，很容易将携带的病毒传染给鸡和其他禽类.因此，要想控制病毒来源，应抑制家禽与候鸟接触，避免污染水源和食物.场区内应将各类动物隔开，杜绝在场区内饲养笼鸟和不明家禽.要从无疫情的地区和鸡场引进种蛋和雏鸡，确保鸡种来源安全可靠，并在厂区内进行自繁自养，鸡舍外要勤消毒，场区地面可用2％～3％热烧碱水喷洒消毒，家禽可用过氧乙酸、威岛牌消毒剂消毒，水源要用漂白粉消毒.温度对流感病毒的影响较大，温度越高其存活时间越短.紫外线可杀死大量病毒，因此，夏季鸡舍要勤通风，阳光照进鸡舍可以大量减少里面的病毒数量，从而降低禽类感染病毒的机率，起到有效防止禽流感的作用.4.2 加强饲养管理，贯彻预防为主的方针第一，要保证家禽拥有充足的饲料和水源，增强鸡的体制和病毒抵抗力.第二增强鸡群的整体免疫力.对鸡群的常见疾病如新城疫、传染性喉气管炎、慢性呼吸道疾病等要建立较强的免疫力.保持鸡舍通风良好，可增强呼吸道粘膜对不良气流的抵抗力，降低呼吸道疾病的发生.4.3 疫苗免疫接种灭活疫苗是目前为止主要的流感疫苗.一般选择流行地区的毒株对鸡胚接种，获取尿囊液，采用甲醛灭活处理，添加矿物油佐剂从而制成灭活疫苗，免疫效果较好.灭活疫通常用于低毒力和中毒力病毒引起的流感.一般多价苗效果好于单联苗.灭活疫苗不能杀死病毒只能抑制病毒传播和降低其病发程度，不能用于高致病性禽流感.随着各国对禽流感病毒研究的不断深入，新型疫苗的开发种类也增加了很多.家禽通过疫苗接种在获得疱疹免疫的同时也具备了一定的禽流感抵抗能力.200日龄非免疫产蛋鸡及20日龄SPF小鸡可安全使用禽流感卵黄抗体，可在实践中广泛应用.接种程序建议：以产蛋鸡为主感染群体的地区，20～30日龄首免，0.3～0.5mL皮下注射，开产前20d二免，0.5mL注射；对种鸡和禽流感频发地区：在300日龄首免；小鸡感染的地区，7～10日龄首免，开产前二免，必要时在300日龄三免；肉仔鸡感染地区：5～7日龄，0.3mL皮下注射，免疫一次即可.特别提醒：免疫灭活苗接种，一般需2次以上；小日龄家禽首次接种时，应尽量避开母源抗体高峰期；水禽进行免疫时或许会产生一些副作用.4.4 防止疫病扩散一旦发现感染高致病性禽流感，必须马上将具体疫情上报相关部门，同时确定疫区范围，并封锁，对疫区内所有感染病毒的禽类要全部捕杀，病死的禽类必须采取烧毁或深埋地下.疫区内的所有可能受到污染的场地、物品都要进行彻底消毒，防止病毒进一步扩散.要对5公里以内的所有禽类采取紧急疫苗接种.疫区周围要加设隔离带进行隔离，隔离区内严禁感染或疑似感染病毒的动物制品外流，并严防隔离区外动物进入疫区场地.5 治疗感染禽流感病毒，要早发现，早治疗.感染高致病性禽流感并非无药可治.鸡群大都实施过疫苗接种，因此具有一定的抗体，多数感染鸡群经过治疗可以治愈.虽然没有直接治愈禽流感的药物，但是通过临床试验，可采取短时间内采取金刚烷胺类药物对病毒进行控制，抑制其繁殖能力，并在以后使用中药配合治疗禽流感，效果明显.用药治疗关键是剂量的把握.金刚烷胺类药品的剂量一定不能盲目加量和随意增加使用时间，因为金刚烷胺对生殖系统会造成不可逆转的损伤，而抗病毒中药的量必须足够，才能起到较好的效果.抗病毒的中药主要有“双黄连口服液”（金银花、黄芩、连翘等），“清瘟解毒散”（天花粉、葛根、白芷等），“荆防解毒散”（金银花、连翘、荆芥等）他们的剂量在治疗禽流感时应该加大到2~4倍.禽流感的对症治疗.禽流感能引起发烧、组织器官损伤和继发感染，针对这些问题可以使用安乃近、氨基比林、阿司匹林等解热药控制体温，使用广谱抗菌素控制继发感染和抗菌消炎，使用维生A、D、E和中药维持生殖系统和组织器官的功能等，增加身体抵抗力，添加黄芪多糖、多种维生素、氨基酸等可以增加机体的抵抗力.参考文献:〔1〕王凤武.禽流感的诊断与防控[J].畜牧与饲料科学,2010,31(5):174-175.〔2〕彭光涛,夏春玲.禽流感诊断研究进展[J].内江科技,2010（5）:43.〔3〕张冠华.禽流感的鉴别诊断与防控要点[J].养殖技术顾问,2010（6）:162.〔4〕张议文,刘桂林.禽流感诊断技术研究进展[J].国外畜牧学-猪与禽,2009,29(3):70-72.〔4〕谷臣君,阳勇,李科.禽流感的研究进展[J].中国畜禽种业,2010(02).〔5〕王先瑜.禽流感的诊断及防治措施[J].畜牧市场,2010(09).〔6〕李存,童贻刚.禽流感治疗药物研究进展[J].生物学杂志,2010(05).〔7〕赵思凯.关于当前禽流感流行情况的探讨[J].北方牧业,2010(19).〔8〕吴敏芳,赵孝安,吴金祥.禽流感的诊断与检疫[J].中国畜禽种业,2010(10).。
高致病性禽流感诊断技术规范
高致病性禽流感诊断技术规范高致病性禽流感（HPAI）是一种严重威胁家禽养殖业的病害，也对人类健康构成潜在威胁。
为了及早发现和防控HPAI，现有的诊断技术已经得到了不断改进和完善。
下面是一份针对HPAI的诊断技术规范，旨在确保准确、快速、有效地诊断和监测HPAI。
1. 采样方法：- 根据病情和流行程度，选择合适的样本收集方法。
常见的样本包括鸟类呼吸道分泌物、粪便和组织。
- 采样时应遵守生物安全规范，使用防护措施，以减少交叉感染的风险。
- 采集的样品应尽快送往实验室进行诊断。
2. 实验室设施：- 实验室应设有适当的生物安全级别，以确保操作人员和周围环境的安全。
- 实验室应配备足够的设备和试剂，以进行HPAI诊断所需的试验。
- 人员应接受相关培训，了解和遵守实验室操作、生物安全和废物处理规定。
3. 分子诊断方法：- 使用反转录聚合酶链式反应（RT-PCR）或实时定量聚合酶链式反应（qPCR）等高灵敏度、高特异性的分子诊断方法，检测HPAI病毒的核酸。
- 确保PCR试剂和仪器的质量控制，并严格遵守反应体系的优化要求。
- 根据世界动物卫生组织（OIE）的指南，选择合适的引物和探针，以确保准确的HPAI病毒检测结果。
4. 血清学诊断方法：- 使用酶联免疫吸附试验（ELISA）或补体结合试验等血清学诊断方法，检测HPAI病毒抗体。
- 选择经验证和经批准的试剂盒和方法，确保有效的抗体检测。
- 根据病情和需要，采集血清样品进行抗体检测，并对结果进行正确解读和分析。
5. 其他诊断方法：- 根据病情需要，可以使用免疫组织化学染色、电镜等其他诊断方法进行辅助诊断。
- 选择合适的方法，根据样品类型和实验室设备能力进行决策。
6. 质量控制：- 实验室应参与质量控制和外部质量评估计划，确保诊断结果的准确性和可靠性。
- 定期进行试剂和仪器的性能验证和校准，及时更新和维护设备。
7. 结果报告和数据管理：- 诊断结果应及时报告给相关部门和组织，以采取必要的防控措施。
人禽流感标准
人得禽流感的诊断标准主要是以下几种：
1、流行病学接触史。
通过患者是否接触病毒、排泄物等进行判断，在接触时如果没有任何的防护措施，可能容易感染疾病。
2、临床表现。
人禽流感有一定的潜伏期，大约是在2~4天左右，患者会出现一系列呼吸道和消化道的症状，如咳嗽、发热、流鼻涕、恶心、腹泻等。
少数患者会有眼部感染，患有结膜炎。
严重的甚至会出现肺炎、呼吸困难，甚至会危及到生命。
3、实验室检查。
可以通过做病毒分离、凝血检查、血常规以及病毒核酸检测进行判断。
禽流感实用诊断技术
７ ℃ 孵 化 ，每 日照 蛋 ２次 ，弃 去 Ｌ ＡＭＰ技术 等分子生物 学技术。病 ３ １ ８ ｈ内死胚 ，２ ４～ ４ ８ ｈ死亡鸡胚置
取 上 清 ，再 用 ０ ． ４ ５ ｍ 的 滤 膜 过 滤 除菌 ，滤 液备 用 。 将 处 理 后 的 样 品 滤 液 接 种 于
１ 日龄非 免疫 鸡胚 ， ０ ． ２ ｍｌ ／ 胚， 技 术、 荧 光 定 量 Ｐ Ｃ Ｒ 技 术 、Ｒ Ｔ － ９～ ｌ
多由 “ 点” 暴发转变为全群暴发。鸭 、
谢 青 梅
，
损失很大。鸡感染禽 流感后可表现 鸡冠发绀，趾部 角质变红趋 向的鸡只 及流 泪。病死 鸡肝脏变 化为主 ，呈
现 偏 淡 的 多 色 彩 、 质 脆 ，胰 腺 、 腺 胃乳 头 出血 常 见 。检 查 ＨＩ 抗 体 可 见 群 体 抗 体 水 平 参 差 不 齐 ， 出现 一 定 ３ ． 未 免疫 鸭 。沉 郁 、 明 显 的神
物 学 技 术 ，不 需 要 分 离 病 毒 ，不 需 要 昂贵 的 Ｐ Ｃ Ｒ 仪 和 电 泳 系 统 ，加 入 染 料 后 检 测 结 果 肉 眼 可视 ，适 合
临床诊断
（ 一）基本观点 禽流感的流行在
一
于基层简 易实验室使用 ；荧光定量
Ｐ Ｃ Ｒ 技 术 也是 非 常准 确 的分 子 生 物 学 技 术 ，但 他 需 要 昂 贵 的荧 光 定 量
１ ．未 免 疫 禽 群 。突 发 、 急 剧 的
倍 数 增 长 的 死 亡 ；萎 顿 、鸡 冠 发 绀
染病。许 多家禽和野鸟对 Ａ型禽流 的鸡只很快死 亡 ；早 期病死鸡 以全 感病毒都 有易感性 ，发病和危 害最 身性 出血性变化 为主。未免疫 鸡群 大的 主要是鸡 、火鸡 。鸭 、鹅 感染 出现 ＨＩ 抗 体 阳性就 可 确诊 。 Ｈ５ 亚型流感病毒死亡率很高，经济
野生动物禽流感标准以及监测方法
野生动物禽流感标准以及监测方法
野生动物禽流感是一种由禽流感病毒感染引起的传染病，
对野生动物和家禽都具有较高的致病性。
为了及时监测和控制野生动物禽流感的传播，制定相关的标准和监测方法是非常重要的。
一、野生动物禽流感标准
1. 病原学检测标准：采用酶联免疫吸附试验（ELISA）、
聚合酶链式反应（PCR）等方法，检测野生动物体内是否含有禽流感病毒的核酸或抗体。
2. 病理学诊断标准：通过野生动物的组织病理学检查，观
察是否存在禽流感病毒引起的病变，如肺部炎症、充血、出血等。
3. 流行病学调查标准：采集野生动物和其周围环境的样本，并结合病毒遗传学分析，确定野生动物禽流感的传播途径和传播范围。
二、野生动物禽流感监测方法
1. 采集样本：野生动物监测主要采集野生动物的血液、粪便、鼻腔和咽喉等样本，通过核酸提取和孵化等技术，检测样本中是否含有禽流感病毒。
2. 感染病毒检测：常用的检测方法包括ELISA、PCR和序
列比对等技术，通过检测野生动物样本中的禽流感病毒核酸或禽流感病毒特异性抗体，确诊野生动物是否感染禽流感病毒。
3. 病理学检查：对于有禽流感病变症状的野生动物，进行
病理学检查，观察组织病变情况和禽流感病毒的存在与否。
4. 流行病学调查：结合监测样本的采集地点、时间和野生动物的传播行为等信息，进行流行病学调查，追溯病毒的来源和传播链路。
以上是关于野生动物禽流感标准以及监测方法的描述。
准确的标准和监测方法可以帮助科研人员和防控部门及时了解野生动物禽流感的流行状况，在有效控制疫情扩散和保护野生动物和家禽健康方面起到重要作用。
禽流感病毒检测方法论文
关于禽流感病毒检测方法的分析与讨论【中图分类号】r446【文献标识码】a【文章编号】1672－3783(2011)08－0270－01【摘要】禽流感病毒的检测方法主要分为血清学检测和分子生物学检测两大类。
血清学检测方法包括琼脂凝胶扩散试验(agp)、血凝抑制试验(hi)、酶联免疫吸附试验( elisa)、神经氨酸酶抑制试验(nit)和病毒中和试验(vn)。
分子生物学检测方法包括rt-pcr、多重rt-pcr、多种改进的rt-pcr和基因探针技术。
【关键词】禽流感病毒;检测;血清学;分子生物学禽流感病毒(aiv)属于正黏病毒科(orthomy xoviridae)流感病毒属,是一种a型流感病毒。
a型流感病毒感染人、猪、马、海豹、水貂、鲸及所有禽类。
在正黏病毒科中a型流感病毒是唯一感染禽类的病毒型。
禽流感病毒呈世界性分布,绝大多数禽流感病毒为隐性感染,感染动物不表现任何临床症状,只有少数禽流感病毒具有迅速传播和高致死性的特性,称之为高致病性禽流感病毒(hpaiv)。
1 血清学检测目前世界上普遍接受的检测禽流感病毒及抗体的标准方法有血清学诊断方法,如琼脂凝胶扩散试验(agp)可鉴定病毒或检测型特异性的血清抗体或基质蛋白(matrix protein，mp);红细胞凝集试验(ha)和红细胞凝集抑制试验(hi)可鉴定病毒或血清抗体的亚型;神经氨酸酶抑制试验(nit)可鉴定病毒或血清抗体亚型等。
采用鸡胚中和试验鉴定病毒或血清抗体的亚型也是一种可以接受的方法,但相对于hi繁琐。
2 分子生物学检测技术2.1 rt-pcr 该方法的基本原理是将从病料或鸡胚尿囊液中抽提出的禽流感病毒rna作为模板,以所设计的上游引物为引物,加入反转录酶和dntp于适合的缓冲液和温度下合成cdna(即反转录的过程)。
再以该cdna为模板,加入根据目的片段设计的上、下游引物,在dna聚合酶作用下利用dntp在pcr仪上合成新的dna链,扩增过程以变性、退火和延伸为一个循环,经25个左右的循环,dna的拷贝数理论上可达295个以上,即3355万倍,扩增产物的量已足够用琼脂糖凝胶电泳检测出来。
养殖厂中动物禽流感的快速检测与诊断
养殖厂中动物禽流感的快速检测与诊断养殖厂中动物禽流感的快速检测与诊断是保障养殖业健康发展的重要措施。
动物禽流感是一种严重的传染病，可引起养殖厂动物群体大规模感染、死亡，严重影响养殖业的生产和经济效益。
因此，在养殖厂中进行动物禽流感的快速检测与诊断对于早期发现感染动物、控制疫情扩散至关重要。
以下是关于养殖厂中动物禽流感的快速检测与诊断的详细分点列出的内容：1. 动物禽流感简介：- 简要介绍动物禽流感的病原体、传播途径和症状表现；- 强调其对养殖厂健康的威胁。
2. 快速检测技术的应用：- 介绍PCR、ELISA等快速检测技术的基本原理；- 解释为何这些技术在动物禽流感的检测中具有高效性和准确性；- 强调快速检测技术在养殖厂中的重要作用。
3. 样本采集和处理：- 详细描述采集动物鼻咽拭子、鸟粪样本等样本的方法；- 强调操作人员需采取必要的个人防护措施，避免交叉污染。
4. 检测结果的分析：- 说明如何解读PCR、ELISA等技术所得到的检测结果；- 总结阳性结果可能意味着疫情爆发，需要进一步采取控制措施；- 强调阴性结果并不完全排除感染可能，建议定期进行检测。
5. 疫情控制与预防措施：- 提出需要对感染动物进行隔离和密切监测；- 强调养殖厂内的卫生环境重要性，包括清洁消毒等；- 建议加强员工防控意识，严禁外来人员进入养殖厂。
6. 兵团联防联控措施：- 强调在动物禽流感疫情出现时，养殖厂应立即向相关政府和兽医部门报告；- 说明政府和兽医部门的调查、排查等措施；- 介绍可能出现的养殖厂封锁、清洗和消毒等应急处置措施。
7. 健康管理与免疫注射：- 强调养殖厂应加强健康管理，提高动物的免疫力；- 建议科学注射疫苗，根据具体情况制定防控计划。
8. 动物禽流感疫情的经济影响：- 分析动物禽流感疫情对养殖业经济产生的影响，包括生产停滞、动物死亡率上升等；- 提出应对这些影响的一些建议，如加强市场监管、提供经济补贴等。
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禽流感的诊断方法有哪些
禽流感必须通过病毒的分离、鉴定来确诊。
病毒的分离及亚型鉴定一般至少需要3-5天。
病毒的致病性必须通过人工静脉接种无特定病原鸡(SPF鸡)来最后确定。
常见的检查方法有六个。
【检查】
1、免疫荧光法(或酶联免疫法)检测
病毒抗原及基因检测取患者呼吸道标本采用免疫荧光法(或酶联免疫法)检测甲型流感病毒核蛋白抗原(NP)及禽流感病毒H亚型抗原。
2、血清学检查
发病初期和恢复期双份血清抗禽流感病毒抗体滴度有4倍或以上升高，有助于回顾性诊断。
3、胸部影像学检查
重症患者胸部X线检查可显示单侧或双侧肺炎，少数可伴有胸腔积液等。
4、血常规检查
外周血象白细胞总数一般不高或降低。
重症患者多有白细胞总数及淋巴细胞下降。
5、RT-PCR法检测
用RT-PCR法检测禽流感病毒亚型特异性H抗原基因。
6、病毒分离
从患者呼吸道标本(如鼻咽分泌物、口腔含漱液、气管吸出物或呼吸道上皮细胞)中分离禽流感病毒。
【鉴别】
1、与流行性感冒鉴别
流行性感冒一般分为三种，即甲型、乙型和丙型。
乙型和丙型流行性感冒一般只在人群中传播，很少传染到其他动物。
甲型流行性感冒大部分都是禽流感，禽流感病毒一般很少使人发病。
禽流感主要在鸟类中间传播，偶可感染至人，其临床表现与人类流行性感冒相似，但人禽流感症状重、并发症多，与普通流感有
一定区别。
2、细菌性肺炎
主要有感染性和理化性如放射线、毒气、药物以及变态反应性如过敏性肺炎等，临床所见绝大多数为细菌、病毒、衣原体、支原体、立克次体、真菌和寄生虫等引起的感染性肺炎，其中以细菌最为常见。
3、衣原体肺炎
肺炎衣原体与鹦鹉热和砂眼衣原体有相同的属特异性抗原，而其他特异性抗原血清学特征却不同。
通常DNA杂交试验和限制性核酸内切酶分析确认其为不同于砂眼和鹦鹉热衣原体的第三种衣原体。
不要轻视重感冒，禽流感的病症与其他流行性感冒病症相似，如发烧、头痛、咳嗽及喉咙痛等，在某些情况下，会引起并发症，导致患者死亡。
因此，若出现发热、头痛、鼻塞、咳嗽、全身不适等呼吸道症状时，应戴上口罩，尽快到医院就诊，并务必告诉医生自己发病前是否到过禽流感疫区，是否与病禽类接触等情况，并在医生指导下治疗和用药。
/qlg/2014/0722/183090.html。