小麦染色体制片

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小麦胚芽鞘体细胞染色体制片技术初探

小麦胚芽鞘体细胞染色体制片技术初探
体较大 , 杂质 少 , 景 清 晰 等特 点 , 满足 染 色体 核 型 分析 和 染 色 体 分 带 的 技 术 要 求 。初 步 建 立 起 以 小 麦 胚 芽 鞘 为 背 可 取 样 对 象 的体 细 胞 染 色体 制 片 方 法 。
关 键 词 小 麦 ; 胚 芽 鞘 ; 染 色 体 制 片
p o e u e t etc lo t ec l ssmpig o jcswe ep ei n rl sa l h d r c d rswi wh a oe p i el a a l be t r rl h l s n mia i e tbi e . y s
Ke r s wh a ; c lo tl ; c r mo o r p r t n y wo d e t o e p i h o s me p e a a i e o

s lss o d t a h o e p i e lwa i f r c r mo o r p r t n a d a g o fe tc u d b c iv d Th u t h we h tt e c lo tl c l e s ft o h o s me p e a a i n o d e f c o l e a h e e . o e c a a t rs iso h e h iu r s f l we h r ce it ft e tc n q e we e a o l c o d:l s a g o wh a n ii u lp a t r n O p o u t n wih e s d ma e t e t i d v d a ln ,p o e t r d c i t o b g e o u n r y l h s s a ir t b e v n e c o c p ,l s mp rt n la e a k r u d ig rv l mea d mo e c ce p a e ,e s e O o s r e u d r mir s o e e s i u iy a d ce r r b c g o n . Th s t c n q e c n s fiet ed ma d f a y t p n l ssa d c r mo o a d n .Th h o s me p e a a i n i e h i u a u f h e n so r o y ea a y i n h o s meb n i g c k e c r mo o r p r t o

以小麦根尖分生组织细胞核及染色体制备高分子量DNA

以小麦根尖分生组织细胞核及染色体制备高分子量DNA

Vol 132,N o 112pp 11920-1923 Dec 1,2006作 物 学 报ACT A AG RONOMIC A SI NIC A第32卷第12期2006年12月 1920~1923页研究简报以小麦根尖分生组织细胞核及染色体制备高分子量DNA 郭东伟1,2 佘茂云2,3 李连城2 陈耀峰1 陈 明2 徐兆师2 马有志2,3Ξ(1西北农林科技大学农学院,陕西杨凌712100;2中国农业科学院作物科学研究所Π农业部遗传育种重点开放实验室,北京100081;3新疆农业大学农学院,新疆乌鲁木齐830052)摘 要:为了克服以叶片为材提取H MW DN A 的局限性,优化了一套简便、实用的提取方法。

该法以细胞周期同步化处理的根尖分生组织为材料,利用机械匀浆释放细胞核或中期染色体制备悬浮液,再以蔗糖密度梯度离心和流式分选技术分别分离细胞核和染色体,经去蛋白、酶切、透析,获得H MW DN A 。

经检测,来自200条根尖(10个胶块)的H M W D N A 的浓度约为4~20ng ΠμL ,而连接、转化后的BAC 克隆平均插入片段超过100kb 。

证明该法适用于提取H M W D N A 以构建BAC 文库。

关键词:高分子量DN A ;蔗糖密度梯度离心;细胞周期同步化;染色体流式分选;BAC 中图分类号:S 512;Q781High Molecular Weight DN A Pr epar ation fr om N uclei or Chr omosomes o f Root Mer istem o f WheatG UO Dong 2Wei 1,2,SHE M ao 2Yun 2,3,L I Lian 2Cheng 2,CHEN Y a o 2F eng 1,CHEN M ing 2,XU Zhao 2S hi 2and MA Y ou 2Zhi 2,3(1A gronom y C ollege ,N orthw es t S ci 2T ech Univers ity of Agriculture and F orestry ,Y angling 712100,Shaanx i ;2K ey Laboratory of C rop G enetics and Breeding ,M ini s try ofAgriculture ΠI ns titute of C rop S ciences ,C hines e A cadem y of Agricult ural S ciences ,B eijing 100081;3A gron om y C ollege ,X injiang A gricultural Univers ity ,Urum qi 810012,X i njiang ,C hina)Abstract :A s imple and practical meth od was o ptimized t o overcome the lim itati ons o f current meth od by wh ich H M W D NA w as preparedfrom leaf powd er.Ro ot tips o f synchron ized meris tem were h om ogen ized to mak e preparing suspensi on containing intact metaph ase chromos omes and nu clei ,wh ich w ere f u rther is olated b y sucros e grad ien t cen trifug ation an d flow s ortin g ,res pectively.Finally ,H MW DN A was prepared w ith deprotein ization ,digestion and dialys is o f nu clei and chrom os omes.T he results sh ow ed th at concentrati on of th e H M WDN A from 200ro ot tips (10plugs )w as ab out 4-20ng ΠμL (4ng ΠμL in chrom os omes DN A and 20ng ΠμL in nu clei D NA ).Th e av erage insert frag ment size was more th an 100kb after linage ,trans form ation and insert frag men t examination by pu lse field gel electroph oresis for H MW DN A from nuclei.Th e similar results w ere obtained b y H M W DN A prepared from chr om os omes.It is con firm ed that the meth od isapplicable t o prepare H MW DN A for cons truction of BAC library.K ey w or ds :H igh molecular weight D NA;Sucros e gradient centri f u gati on;Synchron ization o f cell cycle ;Chrom os ome flow s orting;BA C 大片段DN A 插入文库(如BAC 文库)对于基因组物理作图、大规模基因组测序和基因发掘具有重要意义。

小麦族染色体组命名

小麦族染色体组命名

小麦族染色体组命名的报告,600字
本报告主要介绍了小麦族染色体组的命名规则和原理。

小麦(Triticum)是一种广泛分布于全球的禾本科植物,是大
型农作物种中最重要的组成部分之一。

小麦族染色体组由7个染色体构成,包括3对携带34号染色体和1对携带14号染色体。

因此,小麦族染色体组称为“AABB-CCDD”型染色体组织。

小麦族染色体的命名主要遵循一般的国际公认的命名系统,即“A”、“B”、“C”和“D”开头的染色体称为“homoeologous”染色体;而其他染色体统称为“paleotetraploids”染色体,用“Pt”加数字表示。

染色体组的染色体数量以及各个染色体以及所携带的DNA段
的大小和排列,是小麦族细胞的特征性的基础。

小麦族染色体的命名主要根据这些特征及其种间差异来命名,比如采用字母和数字对其染色体的大小、个数以及染色体的形态进行描述。

具体而言,小麦族染色体的命名包括因子名称、主要物种、染色体号、染色体长度和染色体组织图框架等。

比如,小麦中常见的34号染色体“A”型染色体可以称为Triticum aestivum A-chromosome。

此外,还有14号染色体“D”型染色体,可以称
为T. aestivum D-chromosome。

总之,小麦族染色体组由7个染色体构成,采用国际公认的命名系统来命名不同的染色体,例如以字母和数字的形式表述染色体的大小、个数以及染色体的形态等。

这些类型的染色体提
供了小麦家族生物质的信息,从而为小麦的种质改良提供了可能性。

小麦族染色体组命名

小麦族染色体组命名

小麦族染色体组命名本文旨在详细探讨小麦族染色体组的命名方式。

小麦族一共包含7个染色体,他们的命名方式是由来自不同物种的A、B、D三组染色体组成的。

A组染色体由23条染色体组成,其中21条染色体来自物种Triticum monococcum(小麦),2条染色体分别来自Aegilops speltoides(斯芬塔尔小麦)和Aegilops tauschii(穗小麦)。

B组染色体由14条染色体组成,它们都来自于物种Triticum dicoccoides(双花小麦). D组染色体由6条染色体组成,它们来自物种Aegilops tauschii(穗小麦)。

此外,还有一个特殊的染色体,称为U要素,它来自3种物种:Triticum aestivum(小麦)、Triticum durum(小麦)和Triticum turgidum(杂粮小麦)。

小麦族染色体组命名采用国际上普遍采用的“染色体-原物种-编号”格式,A,B和D组染色体分别用“A,B,D”表示,然后是一个括号内的原物种简写名称和编号,例如A1和B2。

U要素中的染色体用“U”表示,然后是一个括号内的3个物种简写名称,按字典序排列,代表这个特殊染色体来自3种物种,例如U(tse tsita)。

因此,为了简洁有效地命名小麦族染色体组,我们采用“染色体-原物种-编号”格式,详细地记录小麦族染色体来自哪些物种,以及哪些物种组成U要素,使得小麦族染色体组的命名变得清晰明了。

除了物种名称,染色体组还有其他常见命名方式。

在一些研究中,小麦族染色体组也可以简单地用字母“T”,“P”和“R”表示。

其中“T”代表Triticum sp.染色体,“P”代表Aegilops speltoides 染色体,“R”代表Aegilops tauschii 染色体。

此外,还有一种常见的拼写法“7A-7B-7D”,以表示小麦族染色体组的完整性和复杂性,其中“7A-7B-7D”分别表示A组、B组和D组染色体的数量。

不同因素对小麦根尖染色体制片的影响

不同因素对小麦根尖染色体制片的影响

不同因素对小麦根尖染色体制片的影响邹景伟;郭振清;张志雯;任学军;林小虎【摘要】以小麦根尖为材料,探讨了低温、秋水仙素、8-羟基喹啉和对二氯苯4种预处理对小麦根尖细胞有丝分裂积累中期分裂相的效果.结果表明,这4种预处理方法积累有丝分裂中期分裂相效果的明显程度由大到小依次为秋水仙素、低温、对二氯苯和8-羟基喹啉,前2种方法效果明显且差异不大,后2种方法效果略差.在此基础上,对低温预处理后的根尖在制片过程中的一些因素进行了摸索,发现影响制片效果的主要因素是低温预处理时间和HCl解离时间.最终得到以小麦根尖为取样对象的体细胞染色体制片的最适方法.为小麦族物种的染色体加倍、异染色体系的鉴定、细胞遗传学研究等领域提供方法依据.【期刊名称】《种子》【年(卷),期】2016(035)012【总页数】4页(P8-11)【关键词】小麦;根尖体细胞;染色体制片;影响因素【作者】邹景伟;郭振清;张志雯;任学军;林小虎【作者单位】河北科技师范学院生命科技学院,河北秦皇岛066004;河北科技师范学院生命科技学院,河北秦皇岛066004;河北科技师范学院生命科技学院,河北秦皇岛066004;河北科技师范学院生命科技学院,河北秦皇岛066004;河北科技师范学院生命科技学院,河北秦皇岛066004【正文语种】中文【中图分类】S512.1小麦(Triticum aestivum L.)是我国重要的粮食作物。

随着时间的推移和气候条件的变化,对小麦的种质资源创新与品种的改良提出了越来越多的要求[1-3]。

利用小麦近缘属种的优良基因是改良普通小麦性状的重要手段,其主要方法有染色体倍性化、异染色体系和远缘杂交等。

其中,倍性鉴定和异染色体系鉴定是染色体工程育种及其应用的重要鉴定手段[4]。

准确、有效地鉴定出倍性水平及异染色体数目的方法,对控制育种工作的盲目性、显著降低工作量、降低成本、加速育种进程具有重要意义[5]。

在众多鉴定方法中,细胞学鉴定是检验外源染色体的基本手段,染色体制片则是细胞学鉴定的基本技术手段[6-7]。

小麦染色体标本制备方法的优化

小麦染色体标本制备方法的优化

1 材料 与方法
1 . 1 实验 材料
小 麦成 熟 种子 . 1 . 2 实验 仪器 和设 备
P Y X - 2 5 0 Q — C人工气候箱 , 广东韶关科力实验仪器有 限公司 ; H W一 8 B型微量恒温器 , 绍兴市卫星医疗 设备制造有限公司 ; F A 1 1 0 4 N电子天平 ; B C D - 2 0 8 K / A C J N海尔 电冰箱 ; 显微镜 ; M o t i c a m 3 0 0 0数码成像系
验课关注 的重点和难点 . 本文在去壁低渗火焰 干燥 法 的基 础上 , 改 良了小麦染 色体制 片方法 , 分析 了影 响染色体标本制备效果 的主要 因素.
关键词 : ห้องสมุดไป่ตู้胞遗 传学 ; 染色体标本 ; 方法优化 ; 小麦
中图分类号 :Q 7 8 文献标识码 : A
染色体是生物细胞核 中最重要而稳定 的成分 , 它具有特定的形态结构和・定的数 目, 具有 自我复制能 力, 并积极参与细胞的代谢活动 , 能出现连续而有规律 的变化 , 是决定物种繁衍的遗传物质 的载体 J . 植
Vo 1 . 2 7 N o . 2
J u n e 2 01 3
文 章编 号 : 1 0 0 9 - 4 4 9 0 ( 2 0 1 3 ) 0 2 - 0 0 4 7 04 -
小 麦 染 色体 标 本 制 备 方 法 的优 化
张小 娟 , 覃建兵
( 新疆 师范大学分子生物学 与生物信息研究 室 , 新疆 乌鲁木 齐 8 3 0 0 5 4 ) 摘 要: 制备出分裂相多 、 杂质 少 、 背景清 晰 、 染色体分散且形态好 的染色体标本 , 一 直是细胞遗 传学实
多、 杂质少 、 中期染色体分散且形态好 的染色体标本带来了困难 J . 本文以小麦为实验材料 , 在去壁低渗火焰干燥制片方法的基础上 , 做 出了一些改进 , 建立 了一套高效 制备小麦染色体分裂相的方法. 该优化的方法具有实用性强 、 污染少 、 成本低且简单易行等特点 , 为细胞遗 传学实验教学提供一定的参考.

小麦染色体核型分析

小麦染色体核型分析

小麦核型分析实验
实验原理:一个二倍体植物的配子的全套染色体,称为一个染色体组。

各种动植物的体细胞,都有其特定的染色体组型。

染色体组型或称为核型是指染色体组在有丝分裂中期的表型,包括这一组染色体的数目、大小、形态、着丝点位置以及副溢痕、随体的有无等。

染色体组型分析就是对染色体组中的染色体作上述各种形态特征的描述。

实验材料:小麦
实验药品:α-溴代;2%Hcl;卡宝品红;蒸馏水
实验仪器:三角瓶或者其他容器;载玻片;盖玻片;酒精灯;铅笔
实验步骤:
1.种子萌发和取材:小麦种子置于培养皿内湿滤纸上,25℃恒温箱中,根长2-3cm切取。

2.固定:α-溴代固定幼根1-2d。

3.解离:取根尖2个(每个大约0.1-0.2mm)于载玻片上,滴加2%Hcl 2-3滴3min(主要是
进行破壁),3 min后吸干Hcl,再滴几滴蒸馏水保持3min,3min后用吸水纸吸干。

4.染色:在载玻片上滴加卡宝品红染液染色2min,2min后盖上盖玻片,用大拇指垂直往
下压,压好后,用铅笔头进行敲片,边敲边在在酒精灯下烘干。

5.观察:在显微镜下观察,并拍照。

植物显微技术

植物显微技术

植物显微技术名词解释1.细胞周期:是处于母细胞分裂后形成的细胞到下一次再分裂形成两个子细胞之间的时期。

2.分带技术:可以显示染色体内部结构分化的技术。

3.核型:体细胞染色体在光学显微镜下所有可测定的表型特征的总称。

4.混倍体:不同个体和不同细胞的染色体数目变异幅度较大,出现整倍和非整倍细胞的一系列变异,此为混倍体。

5.B-染色体:细胞中多出的一个或几个小染色体,称为B-染色体,或称超数染色体。

6.NOR:核仁组成区,细胞中某一对或几对染色体上负责组织核仁的区域。

7.SAT:随体,次缢痕区至染色体的末端,称之为随体。

8.带型:借助细胞学手段,使染色体显现出深浅不同的染色带。

染色带的数目、部位、宽窄和着色深浅均具有相对稳定性,所以每一条染色体都有固定的分带模式,即称带型9.植物染色体常规制片方法:目前国内外常用的制片技术可分为两种,即压片法和去壁低渗法。

优缺点比较: 压片法和趋避低渗法各有优缺点,前者操作快速简便,节省材料,后者操作稍繁且需酶制剂,但染色体易于展开而不易于导致染色体变形,尤其对一些含有较多成熟细胞的组织,如芽、愈伤组织等,其制片效果明显优于压片法。

10.压片法的流程:1 取材根尖、茎尖、幼叶及愈伤组织等。

在植物染色体的研究中,根尖分生组织为最主要的材料。

2 预处理用化学的或物理的方法对材料进行预先处理,阻止或破坏纺锤体形成,另一个作用是导致染色体高度浓缩,利于分散。

3固定用卡诺氏固定液固定2到24小时。

4解离将固定后的材料置于在预热60摄氏度的1N盐酸中。

5染色染色剂有洋红,卡宝品红等。

6压片第一章植物染色体的分带方法1.分带的类型:1 Giemsa带①c带,显示组成型异染色质,一般不改变其性质,通常存在于NOR、着丝粒、端粒等。

②G带,反映的遗传信息比较多。

2 荧光分带,Q 带、H带、D带、R带。

2.显带机制:c带:①结构以染色质变性迟而复性快,早复性的异染色质便为Giemsa深染而显色。

硬粒小麦染色体的FISH核型分析

硬粒小麦染色体的FISH核型分析

硬粒小麦染色体的FISH核型分析陈星灼;彭红;王亚;杨婷;彭泽;耿广东;张庆勤;张素勤【摘要】采用FISH(荧光原位杂交)技术,分析硬粒小麦(Sauwne 20)染色体的FISH 核型特点,为该种质在小麦新品种选育上的应用提供参考.结果表明,Sauwne 20包括14对染色体,Oligo-pTa 535-2红色探针信号主要分布在A组染色体上,而B组染色体上主要分布着明亮丰富Oligo-pSc 119.2-1绿色探针信号;根据这2种探针在Sauwne 20染色体上的分布特点,可以将其不同染色体进行准确地一一鉴别.Sauwne 20与中国春普通小麦的A组和B组染色体的FISH核型基本相似,但又有一定的差别,不同小麦材料间DNA重复序列表现出遗传多样性.%In this experiment,FISH (Fluorescence in situ hybridization) technique was applied to analyze FISH patterns characteristics of chromosomes in durum wheat (Sauwne 20),which would provide reference for the application of the germplasm in the breeding of new wheat varieties in the present study.The results showed that Sauwne 20 included 14 pairs of chromosomes,Oligo-pTa 535-2 red signals were mainly distributed on chromosomes of A genome,and the group B genome was mainly distributed with bright and rich oligo-psc119.2-1 green probe signals.According to the distribution characteristics of these two probes on Sauwne 20 chromosomes,different chromosomes can be accurately identified.Generally,Sauwne 20 is basically similar to the FISH karyotype of the chromosome A and B of Chinese spring wheat,but there is a certain difference,and the DNA replication sequence of different wheat materials shows genetic diversity.【期刊名称】《种子》【年(卷),期】2018(037)003【总页数】4页(P12-14,18)【关键词】硬粒小麦;FISH;核型【作者】陈星灼;彭红;王亚;杨婷;彭泽;耿广东;张庆勤;张素勤【作者单位】贵州大学农学院, 贵阳550025;贵州大学农学院, 贵阳550025;贵州大学农学院, 贵阳550025;贵州大学农学院, 贵阳550025;贵州大学农学院, 贵阳550025;贵州大学农学院, 贵阳550025;贵州大学农学院, 贵阳550025;国家小麦改良中心贵州分中心, 贵州贵阳550025;贵州大学农学院, 贵阳550025;国家小麦改良中心贵州分中心, 贵州贵阳550025【正文语种】中文【中图分类】S512.1硬粒小麦(Triticum Durum,AABB,2 n=28)是世界重要的粮食作物之一,最早在美国和意大利种植较多,后来传播到北非、中东、欧洲等地并逐步扩散到世界各地。

普通小麦的染色体组成

普通小麦的染色体组成

普通小麦的染色体组成
普通小麦是一种重要的粮食作物,其染色体组成是指普通小麦细胞核中的染色体数量和结构。

普通小麦的染色体组成对于其遗传特征和育种改良具有重要意义。

普通小麦的染色体组成可以简单概括为42条染色体。

这42条染色体分为两组,即21对。

每对染色体都包含一条来自父本的染色体和一条来自母本的染色体。

普通小麦的染色体结构是由DNA和蛋白质组成的复杂结构。

DNA是染色体的主要组成部分,它携带着遗传信息,决定了普通小麦的遗传特征。

蛋白质则起到支持和保护DNA的作用,使染色体能够稳定存在并参与细胞的生物学过程。

普通小麦的染色体组成对于育种改良具有重要意义。

通过研究普通小麦的染色体组成,科学家可以了解不同基因的分布和表达规律,从而揭示普通小麦的遗传机制和性状形成的规律。

同时,染色体组成也为普通小麦的育种改良提供了依据。

通过选取特定的染色体片段或染色体上的遗传标记,育种者可以实现对某种特定性状的选择和提高。

普通小麦的染色体组成还与其适应能力和抗逆性密切相关。

不同染色体上携带的基因决定了普通小麦对各种环境因素的适应能力。

通过研究普通小麦染色体组成的变异和基因的分布情况,可以揭示普
通小麦的适应机制,并为培育抗逆性强的新品种提供理论依据。

总结起来,普通小麦的染色体组成是由42条染色体组成的。

研究普通小麦的染色体组成可以揭示其遗传特征、育种改良的规律,同时也为普通小麦的适应性和抗逆性提供了理论基础。

对普通小麦染色体组成的深入研究有助于进一步了解和利用这一重要的粮食作物。

实验二十八植物染色体压片法

实验二十八植物染色体压片法

遗传学实验指导实验须知一、实验课的目的1、培养锻炼科学的思维方法、实事求是的科学态度和严格的科学作风,提高分析问题解决问题的能力。

2、通过实验加深对理论的理解,学习掌握基本的分子生物学实验技能与实验方法,为今后的学习和研究打下一定的基础。

3、培养学生爱护公物、爱护集体、团结互助的优良道德品质。

二、实验课的要求1、课前必须预习,了解基本原理和主要步骤及意义,写出预习报告。

2、上实验课必须穿白大衣,带实验讲义和实验报告纸。

3、遵守实验制度,注意安全(如水、电、煤气、强酸、强碱、有毒物质等)。

4、实验中要正规操作,动手动脑主动进行实验;掌握关键,力求得出准确结果;仔细观察,认真思考,及时做好记录;综合分析得出正确结论。

5、在实验过程中不许大声喧哗,有问题及时请教老师。

6、器材、药品等按规定使用,严禁乱用乱放。

7、爱护仪器,实验过程中因个人未能按实验要求操作而导致的器材损坏,按规章制度进行赔偿。

8、实验结束后,相关器材要彻底清洗干净,放到指定位置。

9、废弃物按要求分类收集、处理。

10、值日生要打扫干净实验台、地面等,并负责关好门窗,检查水、电、煤气等。

11、因故不能上实验者应有请假手续,是否进行补课由教研室研究决定。

目录实验须知 1 实验一洋葱根尖压片与有丝分裂观察 3 实验二染色体组型分析 5 实验三减数分裂 7 实验四人工诱发多倍体植物 9 实验五植物的离体培养和快速繁殖 11 实验预习报告格式要求 13 实验报告格式要求 13实验一洋葱根尖压片与有丝分裂观察一、实验原理植物根尖的分生细胞的有丝分裂,每天都有分裂高峰时间,此时把根尖固定,经过染色和压片,再置放在显微镜下观察,可以看到大量处于有丝分裂各时期的细胞和染色体。

二、实验目的1、学习根尖染色体压片法。

2、掌握有丝分裂过程。

三、实验材料洋葱(Aillumcepa)的鳞基四、实验器具和药品1.用具:染色板,载玻片,盖玻片,指管,温度计,试剂瓶,滴瓶,镊子,解剖针,毛边纸。

中国特有小麦的易位染色体鉴定

中国特有小麦的易位染色体鉴定

中国特有小麦的易位染色体鉴定
中国特有小麦的易位染色体鉴定报告
随着农业工程的发展,小麦的改良也是大势所趋。

小麦在全球农业生产中占有很重要的地位,而中国作为最大的小麦生产国,对其农业生产和小麦品种选择有着重要影响。

因此,对小麦中存在的染色体易位进行研究非常必要。

本研究以中国特有的小麦品种为主,采用CDS/RAPD分子标
记技术,对植物染色体易位的存在和特征进行了探究。

通过深入研究分析,最终得出如下结论:
(1)中国特有小麦品种中存在着易位变异,其中以易位亚型
2BL/2RS和3BL/3RS数量最多;
(2)部分小麦品种中存在易位泛型,包括2AL/2DL、
5AL/5DL、5AS/5DS和5BL/5RL,但在大多数品种中只有1-2
个泛型易位;
(3)中国特有小麦品种中存在着多种易位变异,但存在差异,有的品种的易位变异程度较小,有的品种的变异程度较大。

因此,本研究根据获取的易位特征,为小麦品种选择、育种提供了理论依据,为小麦育种改良提供了指导意义。

植物染色体制片方法的改进

植物染色体制片方法的改进

植物染色体制片方法的改进作者:肖春林来源:《新疆农垦科技》 2016年第3期肖春林(兵团第六师农业科学研究所,新疆五家渠831300)收稿日期:2016—01—11摘要:以普通小麦(2n=6x=42)为材料,对其种子进行发根,取其根尖分生区进行酶解法染色体制片。

对比常规压片和去壁低渗火焰干燥法制片技术,酶解法制片技术易获得更好的分裂相,分布更加均匀的染色体片,更有利于后期的原位杂交进行信号标记实验。

关键词:小麦;根尖分生区;染色体制片植物染色体制片技术是植物细胞遗传学、染色体工程、植物细胞生物学、植物细胞分类学和物种生物学等众多学科的基本实验技术[1]。

对于染色体形态、结构、遗传行为及细胞变异等遗传学现象的分析,可以大大提高作物育种工作的效率和质量。

因此,改善并提高染色体制片技术显得尤为重要。

目前常用的染色体制片技术有2种,即普通压片技术和去壁低渗火焰干燥技术。

前者虽然操作简单实用,但是需要制片者取材时间适宜,压片力量适中,对操作者的熟练程度要求较高;且处理一些细胞壁坚硬、难以软化的材料时,也不易获得良好的制片[2-3]。

后者相比前者,需要的制片经验较少,且制片效果较好,但操作过程涉及酒精灯,需要火焰干燥和盖玻片压片,对染色体造成部分影响。

酶解法在两者技术的基础上,对部分实验操作进行了改善,不仅可以得到分散良好的有丝分裂中期分裂相,而且还缩短了酶解的时间,提高了制片的效率,从而获得更好的染色体制片,为细胞学观察及相关的原位杂交(GISH)实验做准备。

1材料与方法1.1材料来源市场购买的普通小麦种子。

1.2材料制备1.2.1冷处理将普通小麦种子置于装有湿润滤纸的培养皿内,小麦腹沟朝下贴在滤纸上,于4℃冰箱冷处理24h。

1.2.2发根、剪根冷处理的种子放入25℃培养箱中培养24h以上,待根尖长至2~3cm时剪下。

1.2.3预处理湿润根尖装于2mLEP管中,笑气处理2h左右。

1.2.4固定、保存预处理的根尖用90%冰醋酸浸泡3~5min后转入70%酒精中,4℃冰箱保存。

低温诱导植物染色体数目变化的实验材料

低温诱导植物染色体数目变化的实验材料

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高中生物必修课----染色体变异知识讲解及巩固练习题(含答案解析)

高中生物必修课----染色体变异知识讲解及巩固练习题(含答案解析)

高中生物必修课----染色体变异知识讲解及巩固练习题(含答案解析)【学习目标】1、简述染色体结构变异和数目变异。

2、概述染色体组、二倍体、多倍体及单倍体的概念及联系。

【要点梳理】要点一、染色体变异的概念和类型【高清课堂:染色体变异高清未发布染色体变异的概念和类型】1、概念:细胞内染色体数目、结构发生变化。

2、类型:变异类型主要原因结构变异染色体断裂——复合出现差错整倍体染色体组的倍性变化数目变异非整倍体个别染色体的增减变化要点二、染色体结构的变异1、概念:染色体结构的改变,使排列在染色体上的基因的数目和排列顺序发生改变,从而导致性状的变异。

2、类型:缺失、重复、倒位、易位四种缺失重复倒位易位易位要点诠释:①染色体易位是非同源染色体之间的片段交换。

在减数分裂四分体时期,同源染色体的非姐妹染色单体之间的交叉互换,是基因重组。

②染色体变异,可以用显微镜直接观察,属细胞水平变异。

3、结果:引起染色体上基因的数目或排列顺序发生改变,对生物个体往往是不利的,有的甚至导致生物个体死亡。

要点三、染色体数目的变异1、非整倍体变异:细胞内个别染色体数目的增加或减少。

例如:人类21号染色体正常情况下只有一对同源染色体,而由于某种原因变成了3条,导致21三体综合征;女性由于缺少了1条X染色体,导致性腺发育不良。

机理:减数分裂时,某对同源染色体没有分开或者姐妹染色单体没有分开,导致产生含有(n+1)、(n-1)等配子(如下图所示)。

2、整倍体变异:体细胞内染色体数目以染色体组的形式成倍地增加或减少(1)染色体组的概念染色体组是指细胞中形态和功能各不相同,但是携带着控制一种生物生长、发育、遗传和变异的全部信息的一组非同源染色体。

要点诠释:要构成一个染色体组应具备以下几条:①一个染色体组中不含同源染色体。

②一个染色体组中所含的染色体形态、大小和功能各不相同。

③一个染色体组中含有控制物种生物性状的一整套基因,但不能重复。

(2)体细胞中染色体组数目的判断要确定某生物体细胞中染色体组的数目,可从以下几个方面考虑:①细胞中同种形态的染色体有几条,细胞内就含有几个染色体组。

木原研究所为确认小麦的RFLP、制作染色体图作准备

木原研究所为确认小麦的RFLP、制作染色体图作准备

木原研究所为确认小麦的RFLP、制作染色体图作准备
孙国凤
【期刊名称】《生物技术通报》
【年(卷),期】1989(000)009
【摘要】日本横滨市立大学木原生物学研究所为确认小麦的限制酶片段长度多型性(RFLP),并以此为基础制作一项未能完成的小麦染色体图,正在积极工作。

最近在日本育种学会上发表了 RFLP 的检出条件等研究成果。

从事研究的是该所细胞遗传学部笹隈哲夫、荻原保成助教授等的小组。

木原研究所因探
【总页数】1页(P15-15)
【作者】孙国凤
【作者单位】
【正文语种】中文
【中图分类】Q81
【相关文献】
1.RFLP区分中国小麦秆锈菌不同小种及致病型的应用研究 [J], 曹远银;朱桂清
2.应用PCR-RFLP法作脊灰炎病毒型内分析的研究 [J], 古绍文;刘巍;王树声
3.小麦白粉病抗性基因Pm4a的RFLP标记转化为STS标记的研究 [J], 刘金元;刘大钧;陶文静;李万隆;陈佩度
4.继续推进小麦良种联合攻关研发更多适应中国国情的新品种——国家小麦良种重大科研联合攻关组秘书长、中国农科院作科所研究员肖世和介绍我国小麦产业发展现状及小麦良种联合攻关进展等情况 [J], 祖祎祎
5.小麦科研应以主食制作为风向标——中国粮油学会理事、河南省农业科学院研究员林作辑 [J],
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小麦流式分选染色体的鉴定

小麦流式分选染色体的鉴定

作物学报ACTA AGRONOMICA SINICA 2008, 34(1): 89−94/zwxb/ ISSN 0496-3490; CODEN TSHPA9E-mail: xbzw@DOI: 10.3724/SP.J.1006.2008.00089小麦流式分选染色体的鉴定郭东伟1,2胡甘2佘茂云3李连城1陈明1徐兆师1马有志1,*(1 中国农业科学院作物科学研究所分子育种系, 北京100081; 2 西北农林科技大学农学院, 陕西杨凌712100; 3 新疆农业大学农学院, 新疆乌鲁木齐830052)摘要:构建染色体BAC文库对于简化拥有庞大基因组植物的测序、物理作图和基因克隆具有重要意义。

分选染色体的鉴定是整个文库构建过程的关键环节之一。

本文在前人研究的基础上, 分别采用荧光原位杂交(FISH)、原位PCR(C-PRINS)和PCR方法, 对分选的6VS、3B和7BL染色体(臂)进行了鉴定。

结果表明, 这3种方法都能对流式分选染色体进行有效鉴定, 其中PCR法速度最快、重复性好, 但结果不具可视性、也不能鉴定分选纯度; 而FISH法重复性好、结果具有可视性、能够鉴定分选纯度, 但操作程序复杂耗时, 受探针特异性的限制; C-PRINS法则综合了上述两种方法的优点, 是最具潜力的鉴定方法, 如果与液体原位杂交相结合, 有可能为解决染色体分选问题开辟新的途径, 但也存在重复性差、杂交信号不稳定的缺点。

关键词:小麦染色体; 流式分选; PCR; 原位PCR; 荧光原位杂交Identification of Wheat Chromosomes Sorted by Flow CytometryGUO Dong-Wei1,2, HU Gan2, SHE Mao-Yun3, LI Lian-Cheng1, CHEN Ming1, XU Zhao-Shi1,and MA You-Zhi1, *(1 Department of Molecular Breeding, Institute of Crop Sciences, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100081; 2 Agronomy Coll- ege, Northwest A & F University, Yangling 712100, Shaanxi; 3 Agronomy College, Xinjiang Agricultural University, Urumqi 810012, Xinjiang, China)Abstract: Construction of chromosome specific BAC library plays an important role for simplifying sequencing, physical map-ping and gene cloning of plant with complexity genome such as common wheat, identification of sorted chromosome is a vital step of library construction. Although there were some reports about identification of sorted chromosomes using different methods, the sorted chromosomes were different normal chromosomes and the applicability and feature of various identification methods had also not been commented by the numbers yet. Based on previous research, the identifications of 6VS, 3B and 7BL chromo-somes (arms) sorted from ditelosomic and common wheat were performed through fluorescence in situ hybridization (FISH), primed in situ DNA labeling (C-PRINS) and PCR amplification methods respectively. The results showed that all of these three methods could efficiently identify the flow sorted chromosomes. The chromosome staining before flow sorting and chromosome damage from physical shear force during chromosome suspension preparation and flow sorting did not impact obviously the re-sults of identification. After comparing to these three protocols, the PCR approach was the fastest with better repetition which adapted to determine rapidly constitute of chromosomal peaks on the univariate flow karyotype histogram, but there were no visi-ble signals and the purity of sorted chromosomes could not be determined were the disadvantages of this approach. The FISH approach could provide a visible and repetitive result and was suit for identifying purity of the sorted chromosomes, but it was time-consuming, complex and necessary for special probes. C-PRINS combined the advantages of FISH and PCR, had potential for chromosomes identification, although the hybridization signals was instable and repetition was not so good at present, if com-bined this method with in situ hybridization in suspension, a new way for chromosome flow sorting might be set up.The features of these three methods, some key points during the identification process and their applicability also were discussed. Keywords: Wheat chromosome; Flow sorting; PCR; C-PRINS; FISH基金项目:西北农林科技大学青年教师基金项目作者简介:郭东伟(1973−), 男, 讲师, 博士, 主要从事细胞遗传学方面的研究。

小麦(异源六倍体)的形成过程

小麦(异源六倍体)的形成过程

⼩麦(异源六倍体)的形成过程⼩麦的六倍体属于异源六倍体,它的六个染⾊体组的写法是AABBDD.究其来源是由⼀种⼆倍体植物AA(A表⽰染⾊体组,AA表⽰这个植物体有两个染⾊体组,每⼀组A中含有7条染⾊体,2N=14)和另⼀种⼆倍体植物BB(B表⽰另⼀个染⾊体组,BB表⽰这个植物⼜不同于上⼀个植物AA的两个染⾊体组,但每⼀组B中也含有7条染⾊体,但与A不同,记做2N=14)减数分裂(N=7)并受精作⽤形成的AB(2N=14),但是,请注意,这⾥的A 染⾊体组和B染⾊体组之间并⽆任何染⾊体能配对在⼀起,减数分裂联会紊乱,所以是不可育的.这时,可能由于环境温度骤变导致纺锤丝没有形成,结果染⾊体加倍⽽得出的AABB.因为AB的形成过程是经过受精作⽤的,所以它不叫单倍体,⽽应该叫异源⼆倍体(所谓异源是指物种来源不同),那么它加倍后就叫异源四倍体了,这⾥⾯A这个染⾊体组⾥所有的染⾊体只能和另⼀组A⾥的所有染⾊体配对,成为同源染⾊体.同理B只能和B配对,既然能配对,当然可以进⾏减数分裂,所以AABB这个个体是可育的.后来这个AABB个体⼜和⼀个⼆倍体DD(D表⽰再⼀个染⾊体组,DD表⽰这个植物⼜不同于上两种植物AA和BB 的两个染⾊体组,但每⼀组D中也含有7条染⾊体,但与A、B中的染⾊体均不同,记做2N=14)相遇,再⼀次经历了上述过程,即:AABB减数分裂形成AB(2N=14)与DD减数分裂形成的D(N=7)精卵结合成为ABD(3N=21),因为有受精作⽤,所以这是个异源三倍体,因为没有可以配对的同源染⾊体,所以不可育.还是环境条件造成染⾊体加倍,形成了AABBDD异源六倍体(6N=42).好了,我们可以看到这个怪物的形成过程,也就知道了它虽然叫做六倍体,但是A和B和D这三组染⾊体组中的染⾊体并不能进⾏配对,所以并不能简单的拿42除以6=7对,⽽只能是42除以2=21对同源染⾊体.下⾯我们⽤遗传图解来表⽰⼀下:P ⼀粒⼩麦 x 拟斯卑尔脱⼭⽺草 AA x BB F1 AB(异源⼆倍体) 环境突变、染⾊体加倍 = AABB ⼆粒⼩麦 ⼆粒⼩麦 x ⽅穗⼭⽺草AABB x DD F2 ABD(异源三倍体) 环境突变、染⾊体加倍 = AABBDD 六倍体普通⼩麦 ⼩麦系由⼭⽺草属、⼴义的冰草属和⼩麦属3个属的种类杂交形成的,染⾊体组为AABBDD是6n=42的异源6倍体植物.所以六倍体⼩麦中有21对同源染⾊体.。

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小麦染色体制备方案
小麦品种个非常重要的小麦地方品种, 它被广泛应用于小麦遗传学研究
根尖
胚芽鞘
茎尖
优点: 根尖分生细胞区多为等直径的分裂细 胞,其细胞质浓,细胞核大、细胞核 体积约占整个细胞体积的3/4,是染色 体制片的好材料
缺点: 破坏小麦生长
三、悬浮液法J: 将材料用镊子夹碎、搅拌使其形成细胞悬液,然 后将材料固定20min,视细胞沉淀后,用吸管轻轻 吸去上清液,留1mL左右细胞悬液制备染色体标本。 用吸管滴2~3滴细胞悬液在结晶载玻片上,将在不 骗一端抬起,并轻轻吹气,使细胞迅速分散,然 后在究竟灯火焰上微微加热烤干或自然干燥(候 典云等,2006)
一、常规压片法: 将材料分生区组织铺展于载玻片,然后用不锈钢 刀片、镊子和解剖针钝头等工具轻轻敲打覆盖其 上的盖玻片,使细胞和染色体分散开来。 二、涂片法: 将材料放在预先洁净冷冻的载玻片上,加一滴固 定液,然后用镊子取根尖分生区组织,迅速将材 料敲碎涂抹,并去掉大块组织残渣。然后从载玻 片一侧向材料轻轻吹气,使组织分散成一薄层, 涂抹的载玻片可自然或加热干燥(黄珊珊,2011)
涂片法
悬浮液法J
将材料用镊子夹碎、搅拌使其形成细 胞悬液,然后将材料固定20min,视细 胞沉淀后,用吸管轻轻吸去上清液, 留1mL左右细胞悬液制备染色体标本。 用吸管滴2~3滴细胞悬液在结晶载玻片 上,将在不骗一端抬起,并轻轻吹气, 使细胞迅速分散,然后在究竟灯火焰 上微微加热烤干或自然干燥(候典云 等,2006)
优点: (1)对小麦个体植株伤害小 (2)体积大、分裂相多,便于取材 (3)易于制片。木质化程度相对于根较低,酸 解或者水解时处理时间相对缩短。 (4)染色体较大,杂质少,背景清晰 (植物染色体制片中疑难问题的解析_张羽) 缺点: 胚芽鞘见光即停止生长,实验处理需要遮光
优点: 与传统的根尖材料相比,利用茎尖生长点及幼 叶等分生组织进行染色体制片,具有取材方便、 来源充足等优点,这方面成功的例子很多。 (利用小麦茎尖分生组织进行染色体制片的探 讨_李小军) 缺点: 需要较长时间等待长出幼叶,然后采用伸展 3~5mm长的幼叶作为材料
1、材料预处理 2、材料固定 3、材料解离
4、制片
一、化学方法: 1、0.002mol/L的8-羟基喹啉在室温处理3~5h(董 晓明等,2011;蔡文燕和周桃凤,2012) 2、饱和对二氯苯4℃处理1~2h(王胜等,2010) 3、0.1%~0.2%秋水仙素溶液温室处理2~3h(任琛 等,2012)
二、物理方法 用冰水混合物(及低温)对材料进行预处理 12~36h(时丽冉等,2009)
一、常用方法: 卡诺氏固定液固定(10倍于材料的新鲜卡诺氏液 固定24h) 二、其他方法: 冰甲固定液固定20~24h(杨晓伶和程舟,2005) 有毒,可侵害视觉神经网膜)
一、酶解法: 纤维素酶(1%~5%)和果胶酶(1%~2%)混合液, 酶解前需要先将材料置于0.075mol/L的KCl溶液中 低渗0.5~1.0h,然后加入酶液在25℃保温2~3h (候典云等,2011) 二、酸解法: 将材料用1mol/L盐酸在60℃恒温软化细胞壁,3~5 分钟(郑金双等,2011;李娟娟等,2011)
谢谢老师
将材料分生区组织铺展于载玻片,然 后用不锈钢刀片、镊子和解剖针钝头 常规压片法 等工具轻轻敲打覆盖其上的盖玻片, 使细胞和染色体分散开来。 将材料放在预先洁净冷冻的载玻片上 ,加一滴固定液,然后用镊子取根尖 分生区组织,迅速将材料敲碎涂抹, 并去掉大块组织残渣。然后从载玻片 一侧向材料轻轻吹气,使组织分散成 一薄层,涂抹的载玻片可自然或加热 干燥(黄珊珊,2011)
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