实验二 植物根尖细胞有丝分裂及染色体制片技术
实验观察植物根尖分生组织细胞的有丝分裂
D.①③④
2.(08江苏生物)在完成了观察洋葱根尖分生区细胞有丝分裂实验后，教师给学生 提供了2份资料。 资料一 一份“实验报告”的部分内容
（一）解离：剪取洋葱根尖5cm，放入盛有质量分数为15%的盐酸和体积分数为 95%的酒精混合液（体积比为1:1）的玻璃皿中，在室温下解离3～5min。 （二）染色：把根尖放在盛有0.01g/mL龙胆紫溶液的玻璃皿中染色3～5cm。 （三）漂洗：将根尖放入盛有清水的玻璃皿中漂洗约10min。 （四）制片：将根尖放在载玻片上，加一滴清水，并用镊子把根尖弄碎，盖上
（三）材料用具 1.洋葱（可用葱、蒜代替） 2.显微镜、载玻片、盖玻片、玻璃皿、剪刀、镊子、滴管 3.解离液（质量分数为15%的盐酸，体积分数为95%的酒精） 4.碱性染液（龙胆紫溶液或醋酸洋红溶液）
实验：观察植物根尖分生组织细胞的有丝分裂
（四）方法步骤 1.洋葱根尖的培养 2.制作装片：解离→漂洗→染色→制片 P116 3.观察和记录: 先低倍镜后高倍镜 4. 绘图：
7、实验材料的选择
（1）洋葱的根尖可用于观察 植物细胞有丝分裂 的实验，这是因为其根尖分生
区细胞进行有丝分裂；而 洋葱鳞片叶的外表皮 细胞可用于观察植物细胞的质壁
分离和复原的实验，这是因为其具有 紫色大液泡 ，同时还可以利用洋葱鳞片
叶内表皮观察 DNA和RNA
在细胞中的分布。
（2）人的 口腔上皮细胞 可用于观察 线粒体 及 DNA和RNA在细胞内的
（3）制片时，需要压片，但用力大小要适当，要使根尖被 压平，细胞分散开。
1.（09·江苏卷）有1位同学做根尖有丝分裂实验，在显微镜中观察到
C 的图像如图所示。造成这种情况的原因可能是 (
)
①取材位置不合适 ②取材时间不合适
生物实验报告《观察植物细胞的有丝分裂》实验报告
生物实验报告《观察植物细胞的有丝分裂》实验报告实验目的：观察和了解植物细胞的有丝分裂过程，掌握有丝分裂的特点和步骤。
实验原理：有丝分裂是一种细胞分裂方式，指的是细胞在分裂过程中通过有丝分裂纺锤进行染色体的分离，从而形成两个完全相同的细胞。
有丝分裂包含有七个阶段：间期（I期）、早期前期（early prophase）、晚期前期（late prophase）、中期（metaphase）、晚期（anaphase）、晚期后期（late telophase）和细胞质分裂期（cytokinesis）。
其中，晚期前期至晚期是有丝分裂的关键阶段。
实验材料：1. 含有植物根尖的玻片制片。
2. 染色剂（如洋红）。
3. 显微镜。
实验步骤：1. 将待观察的植物根尖放置在玻片上。
2. 加入一滴染色剂（如洋红），待染色剂覆盖植物根尖。
3. 用草纸或玻片片尾轻轻压碎植物根尖，使细胞释放染色体。
4. 将载玻片放置于显微镜下，调节倍数使细胞可见。
5. 使用显微镜观察植物细胞的有丝分裂过程。
实验结果：通过显微镜观察，在实验中观察到了植物细胞的有丝分裂过程。
在晚期前期至晚期的关键阶段，我们观察到染色体逐渐缩短厚实，进入中期时染色体排列成单排线状，晚期时染色体分离到两侧，最终形成两组完全相同的细胞。
实验结论：通过观察植物细胞的有丝分裂过程，我们了解到有丝分裂的特点和步骤。
有丝分裂是一种重要的细胞分裂方式，通过有丝分裂纺锤的介导，使染色体得到准确分离，从而形成两个完全相同的细胞。
有丝分裂是细胞生物学中的关键过程，对于细胞发育和生长具有重要意义。
植物根尖细胞染色体制片于有丝分裂过程观察的心得体会
植物根尖细胞染色体制片于有丝分裂过程观察的心得
体会
观察植物细胞有丝分裂是高中时期生物学科的重要实验之一，在实验中能够让我们清楚地观察到植物细胞有丝分裂中不同时期展现
出来的特点，帮助提高我们对于有丝分裂的理解，提高生物学习兴趣。
本文分析了植物细胞有丝分裂实验的描述和体会，希望能够让植物细胞有丝分裂实验的变得更加完善和精准。
植物细胞的有丝分裂是把母细胞中的遗传物质，通过分裂的方式平均分配到两个字细胞中的过程。
母细胞的遗传物质主要是存在于细胞核的染色体上，在有丝分裂过程中，染色体形态并不是固定的，而是连续变化的，因此染色体的有丝分裂分为间期、前期、中期、后期等阶段，不同的是其中染色体的差别比较大，因此通过实验，能够让我们更加清晰的观察和理解植物细胞有丝分裂的变化过程。
实验材料选择
大蒜根尖培养。
想要看到染色体的行为变化，选择材料是最关键的一步，材料选择中需要考虑各种因素，例如说洋葱，生长容易受到季节的影响，同时染色体的体积较小，因此在这次试验中我选择了大蒜作为实验材料，大蒜的根尖细胞中染色体的体积比较大，便于观察，同时培养期比较短，不用受到季节的限制。
在室内温度 15-26C的环境中，大蒜根部生长速度较快，首先把蒜瓣用铁丝串号，放在装满水的韶破上，这趟能够让大蒜的底部接触到水面同时不会被水淹没，然后把烧杯放到 25C的恒温箱中，每隔六个小时就需要换睡衣次，不
到两天的时间，根部就会长出根尖。
必须要注意经常换水，否则容易因为阳气不足导致生长缓慢或者是腐烂。
实验二 洋葱根尖有丝分裂标本的制备与观察0810
1、取材
洋葱根的结构
1.根冠 2.分生区 3.伸长区 4.根毛区 5.表皮 6.中柱 根冠 分生区 伸长区 根毛区 表皮 中柱
7.皮层 皮层
2、细胞分裂的类型
• 无丝分裂：又称直接分裂，由Remark（1841）发现 于鸡胚血细胞，不涉及纺锤体形成及染色体变化 。 • 有丝分裂 有丝分裂：又称为间接分裂，由Fleming (1882)和 Strasburger(1880)发现。 • 减数分裂：DNA复制一次，细胞连续分裂两次。
8、封片保存 、
如制片标本符合要求，则把玻片放在干冰或 冰箱中冻结，然后用刀片迅速把盖玻片和载玻片 分开，用电吹风吹干玻片，经二甲苯透明后，滴 中性树胶，加盖玻片封片，制成永久制片。 制作完成的制片标本要贴上标签，注明材料 名称、可观察到的有丝分裂典型时期、制片时间、 制作者等信息。
五、注意事项
4、解离
将根尖用蒸馏水冲洗后，放入1mol/L的盐酸 将根尖用蒸馏水冲洗后，放入1mol/L的盐酸 1mol/L 1.5ml离心管 每管放入2 离心管， 60℃水浴， （1.5ml离心管，每管放入2根）中，60℃水浴，恒 温条件下解离10~15min 10~15min。 温条件下解离10~15min。
cytokinesis
细胞周期
Cell cycle
核分裂
Nuclear division
实验报告根尖细胞有丝分裂
根尖细胞有丝分裂的观察一、实验目的通过实验，学会以压片法观察植物染色体的操作，加深对细胞有丝分裂的理解。
二、实验原理1、染色原理：苏木精素在进入了细胞内部的铁钒溶液的媒介作用下，通过苏木精与铁的结合，使其能进入核内对DNA进行染色。
2、材料处理①减去主根：减去主根有利于侧根的生长与分化，便于获得大量材料②以低浓度秋水仙素预处理：使根细胞能正常分裂，使分裂受到一定抑制③控制温度：温度与分裂高峰出现的时间有关3、预处理①秋水仙素：纺垂丝在细胞分裂的中期出现，秋水仙素可抑制纺垂丝活动，打断纺垂丝，使细胞分裂停留于中期②8 –羟基喹啉：能降低细胞质的粘滞度，使染色体更易于在细胞质中散开③秋水仙素的作用相对较平衡，而8 –羟基喹啉对染色体有一定伤害作用，时间长了易造成染色体间交联，优点在于能较好的显示缢痕与副缢痕④预处理以8 –羟基喹啉（0.002m）以2h为宜，如学生不需进行核型分析则可处理2个半小时，时间太长则缩短过于严重⑤以低温预处理可降低细胞质粘度，有利于染色体散开4、固定①时间：以12-24h为宜，小根，嫩根时间较短，太长了则易引起细胞变脆（冰乙酸）②如不长久保存材料，可将材料自固定液中一步浸入70%乙醇，但需洗得无冰乙醇味，如需长久保存则自固定液中从90%-80%-70%乙醇中，并在保存瓶中加入2-3滴甘油冰箱保存5、水解①用孚尔根法与改良苯酚品红法以1NHd 60℃下水解，时间以10-12min为宜，短则不易敲片（参见后）6、分色①45%冰乙酸：脱去细胞质内染色，并将细胞核内的染色变淡②烤片：以不烫手为宜，太热则烤焦细胞烤片作用：a.使分色更为容易，b.通过加热使细胞胀大，利于压片时染色体更好的分散。
三、实验材料：植物根尖细胞四、实验用具与溶液：显微镜，玻片，镊子，青霉素瓶，长吸管，解剖针，刀片，水溶锅，（酒清灯），吸水纸，压片板，擦镜纸，油镜瓶、改良苯酚品红，45%乙酸、固定液、90%，80%，70%乙醇五、实验步骤1、取1-2条根，加入少量经预热的1NHd，于60℃下水溶水解min（准确），小心吸出Hd，以蒸馏水小心洗三洗，加入少量改良苯酚品红染液，染色20-30min，小心吸出染液，加入蒸馏水小心洗3次。
植物细胞有丝分裂的制片和观察
操作要点
1.解离：培养好的根尖先用95％的酒精漂洗再放入1mol /L的HCl中60℃水浴5min左右
2.漂洗：先在清水中浸置2min,再用清水洗去解离液2-3 次，最后置于盛有清水的培养皿中
3.取材：用刀片切取根尖2-3mm处的分生区，并切去乳白 色的根冠
4.染色：用镊子尖把大蒜根尖弄碎（或者用刀片将根尖 均匀切成三份）,用卡宝品红染色,6～8min后， 盖上盖玻片,再盖上一个载玻片，用拇指轻压载 玻片随即用一次性筷子进行敲片。
（3）仔细观察：先找中期，再找其余各时期，注意染色
体特点
（4）移动观察：慢慢移动片，完整观察各个时期
实用文档
四、实验流程 1.大蒜根尖培养及固定 2.装片制作
解离→漂洗→取材→染色
3.观察
低倍镜观察→高倍镜观察→仔细观察→移动观察
注意：a.观察时应先找到呈矩形的分生区细胞，在
一个视野里观察时，要注意边观察边移动装片， 观察有丝分裂各个时期。 b.显微镜下观察到的都是死细胞，不能看到细 胞分裂的动态变化。 c.在显微镜下观察到间期细胞的数目最多
固定的作用：杀死细胞，固定细胞形态， 维持染色体的完整
性，提 实用文档 高染色效果
四、实验流程
1.大蒜根尖培养及固定
2.装片制作
解离液：1mol/L的HCl 目 的：使组织中的细胞分离开
（1）解离 操作：先用95%的酒精漂洗，在HCL中
60℃水浴5min左右 注意（：a）解离充分是实验成功的必备条件
（1）解离 染色剂：卡宝品红染液（使染色体（质）着色）
（2）漂洗 （3）取材
（4）染 色
染色时间过长—细胞全被染色，
时间：6-8min
无法观察
实验二植物染色体制片及有丝分裂观察
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ遗传学实验
植物染色体制片及有丝分裂观察
实验目的：
① 学习并掌握植物染色体玻片标本的制作方法; ② 观察植物细胞有丝分裂过程及各个时期的染色 体行为；
预习要求
实验目的
• 学习并掌握植物染色体玻片标 本的制作方法;
预习要求
流程: 材料要求,取材方法,实验 流程和各操作步骤实施原因 发根→预处理→固定→解离→ 低渗→ 软化→染色→压片→镜 检
解离的目的？如何判断解 离的效果？其他的解离方 法？
5 软化：将解离好的根尖冲洗后，放入45%醋酸 中软化10min左右。
请问解离与软化 的目的是什么？
6 染色：切取1-2mm的分生区，用改良苯酚品 红染液染色10-20min。
为保证染色的 充分要注意哪 些问题？
7 压片：盖上盖玻片，在酒精灯上烤片。然后 固定盖玻片，用铅笔垂直、用力敲击盖片几下，将 材料压成一层细胞。
取材时间？
• 2 预处理：将剪取的新鲜材料于0.02%秋水仙素溶 液中室温下处理3-4h。
预处理的目的？ 还有其他方法吗？
实验步骤：
3 固定：将经过预处理和未经预处理的材料冲 洗后转移至卡诺氏固定液中，室温下处理24h。水 洗放入70%乙醇中保存。
固定的作用？固定剂的组 成？对固定剂配制的要求？
4 解离：将冲洗后的根尖放入0.1mol/L的HCl 中， 60℃下处理8-10min（可视具体情况而定）。
实验材料
• 洋葱、大蒜的鳞茎，玉米、蚕豆的种子等。本实 验选用大蒜。
实验用品
• 用具：显微镜、剪刀、镊子、解剖针、载玻片、 盖玻片、水浴锅、酒精灯、铅笔、吸水纸等。 • 药品：蒸馏水、卡诺氏固定液、45%醋酸、秋水 仙素、改良苯酚品红染液等。
遗传学实验整理
实验02、有丝分裂染色体制片及观察原理2 步骤1 注意1二、实验原理 2有丝分裂是一个连续过程，可分为分裂间期和分裂期，分裂期又分为前期、中期、后期、末期。
植物细胞有丝分裂主要在根尖、茎间、芽的生长点、幼叶叶缘及茎间形成层等分生组织，将生长旺盛的植物分生组织经过取材、固定、解离、染色、压片等处理，就可以观察到植物细胞的有丝分裂现象。
由于植物根尖容易取材、操作方便，经常被用来进行植物细胞有丝分裂过程的观察：①根尖取材容易，操作和鉴定也比其它器官与组织方便；②实验室内采用种子萌发后所长出的新鲜幼嫩根尖，不受植物生长季节的影响和限制，并且可以大量获得；③对于某些珍贵而又稀少的试验材料，取用自然条件下生长植株的根尖，比取用茎尖、花器等对材料的伤害要小得多；④采用实验室内种子发根，切取根尖后的种苗通常还可以进行正常种植，利于后续研究进行。
五、实验方法11.发根：①水培法②砂培法取材：上午10:00～11:00；下午4:00～5:002.预处理：将剪下的根尖立即放入0.1％秋水仙碱水溶液中，以药液浸没根尖为度，处理3～4h。
抑制和破坏纺锤丝的形成，使根尖细胞延迟其染色体的分离，增加中期分裂相，并使染色体分散于细胞中，以便观察计数。
3.固定材料经预处理后用流水冲洗，然后投入卡诺液(3份甲醇:1份冰乙酸，现配现用)中固定20～24h，用95％的乙醇洗两次，转入70％乙醇中保存备用。
固定的目的是将材料迅速杀死，并使染色体形态、结构尽可能保持不变和便于染色。
4. 解离常用酸解法：从70％乙醇中取出固定好的根尖→流水冲洗3min→吸水纸吸干→放入盛有适量1mol/L HCl，60±0.5℃水浴保温的青霉素瓶中→解离10min。
5.染色与压片（改良石炭酸品红染色）：解离后材料水洗3min并吸干，取1/2个根尖的乳白色分生组织于载玻片上夹碎捣烂，滴加1～2滴染液，染色10～15min，将滤纸放在盖玻片上，用拇指用力压盖玻片，再用手固定住盖玻片，同时用铅笔的橡皮头在材料部位垂直轻敲几下，使材料分散均匀。
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后期：每一条染色体的着丝粒分裂，两条染色单体彼
此分开形成两条子染色体，子染色体在纺锤丝的牵引下， 分别移向两极。 末期：移向两极的染色体逐渐松散成染色质，纺锤丝 逐渐消失，在赤道面上开始出现细胞板，把一个细胞分隔 成两个子细胞，核膜重新形成，核仁出现，逐渐进入间期 状态。
三 实验材料
洋葱(2n=16)的鳞茎
尖。 2 预处理
将剪取的洋葱根尖(0.5-1cm)放入0.1%秋水仙素溶液中
室温下处理3-4小时，然后用水冲洗几次。 3 固定 将经过预处理的根尖放入卡诺氏固定液中固定3-24小时。
4 解离
将固定液中的洋葱根尖取出，在蒸馏水中洗净，然后放 入1N的盐酸中，室温下处理10-15min。目的是使胞间层的果
四 实验器具及药品
药品：蒸馏水、卡诺氏固定液(无水乙醇：冰醋
酸=3:1)、45%醋酸、 1N盐酸、秋水仙素、改良
苯酚品红染色液或1%醋酸洋红染色液等。
用具：显微镜、刀片、镊子、解剖针、载玻片、 盖玻片、酒精灯、吸水纸等。
五 实验步骤
1 根尖培养
将洋葱鳞茎下部浸入水中，当根长出1-2cm时，切下根
六 观察结果
七 实验作业 1 在上述实验过程中，固定、解离的作用是什么？ 2 绘制出所观察到的有丝分裂各时期的染色体行 为图像。
胶物质解体，使细胞易于分散，便于压片。
5 软化 将解离好的根尖冲洗后，放入45%的醋酸中软化10min左 右。 6 染色 将洋葱根尖置于载玻片上，用小刀片将根冠和伸长区切 除，只留下1-2mm左右的生长区，然后滴一滴1%醋酸洋红染 色液或改良苯酚品红染色液，染色5-10min。
7 压片
加盖玻片，用手指垂直瞬间用力压片(切勿移动盖玻 片)，这样得到的染色体才能在一个水平面上。为了使细 胞质透明增加染色效果，将载玻片在酒精灯上微微加热， 吸去多余的染液。最后用吸水纸将周围染色液吸干。 8 镜检 先在低倍镜下找到细胞，找到分裂相后再换成高倍 镜，仔细观察有丝分裂各个时期染色体的行为。
散附着于载玻片和盖玻片之间，在显微镜下就可以看到
大量处于有丝分裂各个时期的细胞，并进行染色体行为 的观察。
间期：一般持续时间比较长，是核内染色体DNA合
成的过程，能够看到核的变化，如核仁体积增大、核内 存在染色质，一般情况下看不到染色体。
前期：细胞核内染色体呈细丝状，在核内互相缠绕
成团。核仁开始消失，核膜随之破裂。此时，染色体已 经有两条染色单体所组成，只在着丝粒处连结。 中期：各染色体的着丝粒排列在赤道面上，两臂伸 向赤道面的两旁。纺锤体完全形成，其一端与染色体的 着丝粒相连接，另一端集中于细胞的极处。中期染色体 高度浓缩，具有各物种染色体的典型形态，是染色体计 数的最好时期。
实验二 植物根尖细胞有丝分Βιβλιοθήκη 裂及染色体制片技术一 实验目的
1 学习并掌握植物根尖有丝分裂玻片标本的制作方法。
2 观察并了解植物根尖细胞有丝分裂各个时期染色体的
行为变化。
二 实验原理
植物生长旺盛的分生组织如根尖、茎尖、幼叶等都 在进行着有丝分裂。取这些组织为材料，经过固定后迅 速杀死细胞，并使细胞内的物质和生活状态得以保持， 再经过解离、染色、压片等过程，可以迅速地将细胞分