玉米染色体制片心得

甜玉米染色体制片心得

10科4 第二小组

成功之前总会经历失败，我们小组第一次实验整整持续了两天，用了低渗制片法，也用了压片法，但都看不到染色体，以失败告终，失败原因有以下几方面：

1.取材时根尖较长，分裂最旺盛期已过

2.酶液用水来配，酶解过程中会使细胞吸收涨破

3.酸解时间过长

4.低渗时转速设置不合理

5.染液染色效果差

6.整个实验时间安排欠合理

总结失败的原因，最后制定另一套实验方案，并严谨进行实验，最后终于看到较满意的染色体，实验步骤归纳如下：

实验步骤：

1.催芽培养（10.29下午）

将甜玉米11-6种子置于水中浸泡1小时后，放入铺有两层纱布的培养皿中，加适量水置于培养箱中培养。

2.预处理（11.1 18:20）

①配制0.1%秋水仙碱：将1%秋水仙碱稀释到0.1%

②取材：玉米根尖长到1~2cm，切根尖0.5cm

③处理：将根尖放入0.1%秋水仙碱中室温下进行预处理，当时时间为18:40

3.固定（11.1 21:40）

用蒸馏水冲洗3次，吸去蒸馏水，注入固定液（乙醇：酒精=3:1）固定

4.酶解（11.2 12:00）

①配酶液：各称取0.25g的果胶酶和纤维素酶溶解到刚配制好的0.1%醋酸钠中，定容至10mL.

②解离：将根尖从固定液中夹出置于酶液中酶解，当时时间为12:40

5.染色、观察（11.2 16:00-21:00）

①洗去酶液：将酶液吸掉（16:30完成），加入0.1mol/L醋酸钠将酶液渗出，然后转让45%醋酸中

②染色：染色前用蒸馏水水洗根尖一次，然后加入改良品红染色12min.

③压片观察：敲破观察。

经过小组成员的配合和努力，本次实验总算有了个满意的结果，当然对于我们的成功，黎杰强老师功不可没，在这我代表小组全体成员对黎杰强老师百忙之中抽空过来给我们耐心指导表示万分感谢！。