生物参考区间建立与验证

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钾钠氯生物参考区间验证分析

［３３吴凤丽，马晓光，孙玉珍，等．血清ＣＫ—ＭＢ活力假性增高原因分析及临床意义［Ｊ］．中国实验诊断学，２００７，１１（８）：１０４１—
１０４３．
［４］李艳，张平安，张健，等．肌酸激酶同工酶ＣＫ—ＭＢ质量测定［Ｊ］．上海医学检验杂志，２０００，１５（４）：２３８—２３９．
山西医药杂志２０１４年１月第４３卷第１期ＳｈａｎｘｉＭｅｄＪ，Ｊａｎｕａｒｙ２０１４，Ｖｏ１．４３，Ｎｏ．１
Байду номын сангаас
ＭＢ的测定＿５］。总之，ＣＫ—ＭＢ活性检测由于检测方法的局限
性，易受各种因素影响，出现假性升高，而ＣＫ—ＭＢ质量由于采用的是微粒子酶联免疫化学发光技术，可排除测定过程中的干扰反应，测定结果更准确可靠。因此当有众多影响因素干扰ＣＫ—ＭＢ活性测定时应选择ＣＫ—ＭＢ质量检测。
Ｅ５］程文芬．肌酸激酶同工酶比肌酸激酶高的原因探讨ＥＪ］．包头医学，２００９，３３（１）：２０．（收稿日期：２Ｏ１３一Ｏ８—２３）
钾钠氯生物参考区间验证分析
杨俊英张萍侯临平
参考区间又称参考范围。参考区间是目前实验室最常用的解释检验报告的一个 “决策支持工具 ”ｌ１］。适宜的生物参考区间对疾病的预防、诊断、疗效及预后都有重要的意义］。但参考区间建立研究工作量和成本巨大，目前普遍认为，临床实验室引用参考区间比自己建立参考区间更为现实、合理＿３］。本研究依据ＷＳ／Ｔ４０２的有关规定，对本实验室全自动生化分析仪生化常规项目血清钾（Ｋ）、钠（Ｎａ）、氯（Ｃ１）的生物参考区间进行验证分析。１材料和方法１．１一般资料

参考区间及临界值如何验证或建立

检验科
2
检验报告单：需要关注
1. 我们提供的参考区间、临界值或临床决定值是否合适？ 2. 最好能提供检验方法、试剂厂商的信息！
3
内容
• 参考区间的验证和建立
1
• 临界值的验证和建立
2
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参考区间的验证和建立
参考文献 1. Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI). Defining, Establishing, and Verifying Reference Intervals in the Clinical Laboratory; Approved Guideline-Third Edition CLSI Document EP28-A3c (ISBN 1-56238-682-4). Clinical and Laboratory Standards Institute,940 West Valley Road, Suite 1400, Wayne, PA, 19087-1898, USA, 2010. 2. 临床实验室检验项目参考区间的制定 WS/T 402-2012.
6. 特殊情况：若通过招募受试者来选择参考个体有困难，则可从查体人群中选择临床诊断基本正常者作为参考个体。
《生物参考区间和临床决定值评价程序》（PKUPHL-2-PF-033-V2）
13
参考区间的验证和建立
标本采集、运输、检测和存储：按SOP操作。
《生物参考区间和临床决定值评价程序》（PKUPHL-2-PF-033-V2）
4. 入选受试者：获取临床资料，主要包括：年龄、性别、身高、体重、血压、心率、性别、吸烟，心电图检查结果，实验室检测指标等。入选受试者各项相关实验室指标无异常，保留受试者体检结果。

生物参考区间建立与验证

收集动物模型的生物标志物数据，并进行必要的预处理和标准化。
统计分析
验证与应用
运用适当的统计方法对数据进行分析，确定动物模型中生物标志物的参考区间。
通过独立样本验证参考区间的准确性和可靠性，最终将参考区间应用于药物研发、疾病机制研究和临床试验中。
03
生物参考区间验证方法
内部验证
80%
拆分样本法
推动标准化建设
制定统一的生物参考区间建立标准和规范，确保不同实验室和研究机构之间的结果可比性和一致性。
加强质量控制和监管
建立完善的质量控制体系，对生物参考区间的建立过程进行严格监管和评估，确保结果的准确性和可靠性。
推动新技术和新方法的应用
1 2 3
关注新技术发展
密切关注生物医学领域的新技术进展，如高通量测序、蛋白质组学等，及时将其应用于生物参考区间的建立和验证。
模型选择
在建立生物参考区间模型时，需要选择合适的模型类型和参数设置，以确保模型的稳定性和准确性。
模型验证
生物参考区间模型需要进行严格的验证，包括内部验证和外部验证，以确保模型的泛化能力和实用性。
结果解释和应用挑战
结果解释
生物参考区间的结果解释需要考虑多种因素，如人群特征、生理状态、疾病影响等，需要进行综合分析和判断。
统计分析
运用适当的统计方法对数据进行分析，确定生物标志物的参考区间。
验证与应用
通过独立样本验证参考区间的准确性和可靠性，最终将参考区间应用于临床实践和科研中。
基于疾病人群数据建立
选择特定疾病人群
针对特定疾病选择具有代表性的患者样本，确保样本具有相似的疾病特征和病程。
统计分析
运用适当的统计方法对数据进行分析，确定疾病状态下生物标志物的参考区间。

NCCLS-C28-A2(临床实验室如何确定和建立生物参考区间)

临床实验室如何确定和建立生物参考区间（核准指南――第二版）1内容简介此指南是专为指导临床诊断实验室、诊断仪器试剂制造商和临床检验工作者在定量实验检测中确定参考值和参考区间而制定的。

它包括在临床医学实验室中建立可靠的参考区间所用的方法步骤和推荐程序。

而该推荐程序的主要内容是如何用最简便和最务实的方法去建立一个能保证足够可靠性和实用性的参考区3种方法。

无论你的诊断实验室规模大小，无论你是何种试剂生产商，倘若你想通过一项参考值研究来建立参考区间，你就必须遵循此文献提供的特定的指导方针和程序。

该文献包括了建立足够的和适当的决定参考区间的最低标准。

如果实验室规模太小且缺乏必要的资源去执行这一标准，按照稍后在文件中讨论的该议题程序，那么唯一可接受的替代方法就是，采用相同的或可比较的分析系统，对已经合适地确定的参考区间藉着调用的方法进行参考区间的验证后使用。

本文献从对某些术语定义的解释着手，因为术语对参考值的讨论是极其重要的。

所采用的术语均为国际临床化学家联合会（IFCC）的EPTRV分会提出建议，经过仔细探究后旨在形成更有系统和更明确的理论阐述。

此指南内容包括如何建立参考区间并且叙述了种种要素的特性，诸如用来实验的参考对象的选择程序，考虑分析前和分析中影响因素的重要性，估计有效参考区间的计算方法和要求，参考值的调用等等涉及这一议题的问题均将讨论到。

有关参考区间的描述和应用问题也有涉及，最后有一简单章节谈到如何检测一批重要的但并非主要的参考值话题。

2国际单位的使用(SI单位)虽然国家临床实验标准委员会（NCCLS）通常认可使用国际单位（SI），但这些不能总是与国际理位一致。

分子的)浓度（3分会及●●●●注意:参●样品组的分布和使用适当的统计方法来评估。

●参考限,n-：一个以描述为目的的并取自参考分布范围的值。

注意:常见的做法是确定一个参考限以便描述参考值级数。

假如所有参考值均大于或等于该值，它就是参考下限；而当所有参考值均小于或等于该值时，它就是参考上限。

参考区间的建立与验证

参考区间的建立与验证
参考区间的建立与验证是统计学中非常重要的概念，它是指在对一个总体（population）进行研究时，为了推断总体某个参数（如均值、比例等）的取值范围而设置的一个区间。

参考区间可以用来估计总体参数的值，也可以用来测试一个假设是否为真。

那么，如何建立参考区间呢？首先，我们需要收集样本数据，并且假设数据来自一个正态分布的总体。

接着，我们可以使用样本均值和样本标准差来计算出一个置信水平为α的参考区间。

通常情况下，我们使用95%或者99%的置信水平。

例如，如果我们想要建立总体均值的参考区间，我们可以使用下面的公式：
样本均值±Zα/2 * σ/√n
其中，Zα/2是标准正态分布的分位数，n是样本的大小，σ是总体标准差。

如果总体标准差是未知的，我们可以使用样本标准差来代替。

建立了参考区间之后，我们需要验证它是否可靠。

一种验证的方法是检验样本的均值是否在参考区间内，如果是，那么说明该参考区间是可靠的。

但是，这种方法有些问题，因为单个样本均值可能会偏离总体均值。

因此，更加可靠的方法是进行假设检验。

我们可以先提出一个关于总体均值的假
设，然后根据样本数据得到一个样本均值和一个标准误差，最后计算出一个检验统计量，检验统计量与参考区间的关系将决定我们是否拒绝或接受原假设。

通常，我们使用t检验或z检验来进行假设检验。

总之，参考区间的建立与验证是统计学中重要的概念，它可以帮助我们推断总体某个参数的取值范围，并且进行假设检验，让我们能够更加客观地分析数据并做出正确的决策。

APTT、PT、FIB生物参考区间适用性验证探讨

（Ｉ）ＦＢ现用的生物参考区间进行验证，确保其适用于临床。方法
按美国临床实验室标准化委员会（ＣＬ）ＮＣＳ
参与验证的３个项目中，
Ｃ８Ａ２．２推荐方法，各验证项目选择健康参考个体２０名，采集符合要求对象标本，实验室操作手册（Ｏ）按ＳＰ要求进行规范检测，用性能评价符合要求的ＡＬＦＴＲＬＳ血凝仪检测标本。结果采ＣＵＵＡＰＵ２０名健康参考个体１００％结果落在现用的生物区间内。讨论度、程序，并推广应用。关键词：生物参考区问；健康参考个体；验证本次验证的项目现用的生物参考区间适用于本
Ａｅｏ２ｒｃｍｍｅｄｔｎｍｅｈｄ，２ｅｅｅｃｎｉｉｕｌｗｒｈｓｎｎａｉｔｏｏ０ｒｆｒｎｅｉｄｖｄａｓｅｅｃｏｅ．Ｔｅｗｈｌｌｏａｌｓｗｒｅｅｔｄｂｅａｔ— ｈｏｅｂｏｄｓｍｐｅｅｅｄｔｃｅｙｔｕｏｈ
实验室，可以继续使用；实验的验证具有科学的说服力，容易发现生物参考区问的偏离，得建立完善的验证制值
ＳｕｙｏｈａｉａｉｎｆｒｂｏｏｙｒｆｒｎｅｉｔｒａｆＡＰＴｒ，ＰａｄＦＢＣＥＮｕｓａｔｄｎｔｅｖｌｔｏｉｌｇｅｅｅｃｅｖｌｄｏｎｏＴｎＩＨＧｉｈｎ，ＹＡＮＧＹｕｅｏｙ，
ｉｔｒａａｄｉｗｎｓａｌｈｎｅｆｃｅｆａｉｎｓｓｅ．ａｄｐｏｔｇｔｅａｐｉａｉｎｎｅｌｎｓｏｈｅｔｂｉｉｇａｐｒｅｔｒｃｔｙｔｍｖｓｖｉｉｏｎｒｍｏｉｈｐｌｔ．ｎｃｏ

Vitros5.1FS自动生化分析仪生物参考区间验证

ＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃｈｏｎｇｑｉｎｇ４０００１６，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＯｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏａｕｔｈｅｎｔｉｃａｔｅｔｈｅｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｒｅｆｅｒｅｎｃｅｉｎｔｅｒｖａｌｏｆ２０ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙｔｅｓｔｉｔｅｍｓｏｎＶｉｔｒｏｓ５．１ＦＳ（Ｊｏｈｎｓｏｎ．
ｌ。ｈｅｖａｌｉｄａｔｉｏｎｏｆｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｒｅｆｅｒｅｎｃｅｉｎｔｅｒｖａｔｏｎＶｉｔｒｏｓ５．１ＦＳ
ＺｏｕＬｉｎ，ＺｈａｎｇＬｉｐｉｎｇ，ＸｕＨｕａｊｉａｎ
３３月第４２卷第３期
・
调查报告・
Ｖｉｔｒｏｓ５．１ＦＳ自动生化分析仪生物参考区间验证
邹麟，张莉萍△，徐华健４０００１６）
（重庆医科大学附属第一医院检验科
摘要：目的验证强生公司Ｖｉｔｒｏｓ５．１ＦＳ自动生化分析仪２Ｏ项常规生化检测指标的生物参考区间。方法根据生物参考
制订不同的生物参考区间，以确保临床诊断结果的准确性。关键词：参考值；实验室技术和方法；化学，临床

生物参考区间评审程序

生物参考区间和临床决定值评审程序1目的规范各检验项目生物参考区间和临床决定值的评审。

2范围本程序适用于检验科检验项目生物参考区间和临床决定值的评审。

3职责3.1 各专业组组长带领本组人员负责评审本组检验项目的生物参考区间；3.2 检验科主任负责组织本检验科人员与临床医生共同进行评审工作；3.3 技术负责人批准评审后的生物参考区间。

4 定义和术语4.1 参考个体（reference individual）根据明确规定的选择(入组)标准，选择出参加实验的个体，通过检验可以得到相应的参考值。

通常情况下，“健康人”的标准是难以制定的，但可以制定不健康因素的排除标准。

4.2 参考人群(reference populations) 是参考个体所代表的群体，为数量未知的假设实体，可以只有一个成员(为自身或其他人做参考)。

4.3 参考标本组(reference sample group) 指选出代表参考人群的、适当数量的参考个体。

统计意义上，一定数量的参考个体是参考人群中的一个抽样组。

参考区间的建立过程是对参考标本组的具体研究。

4.4 参考值(reference value) 是对参考个体的某一特定被测量进行检测而得到的值。

对一个参考个体进行某项目检测得到的值为该个体的参考值，从参考标本组可以得到一组参考值。

参考值反应在健康状态下，人的解剖、生理和生化等机能指标数据的波动状态。

4.5 参考分布(reference distribution) 是指一组参考值的分布状态。

4.6 参考限(reference limit) 是从参考分布得到的界限值，用于描述部分参考值的位置，如小于或等于上限、大于或等于下限。

将参考值由小到大排列，对大多数分析物，可以参考值分布的2.5％为低限，以97.5％为高限。

当只有单侧参考限具临床意义时，可以确定5％或95％为参考限。

4.7 参考区间(reference interval) 是在上、下参考限之间的参考值分布范围。

郑州地区表观健康人群sdLDL-C生物参考区间的建立与验证

㊃8㊃检验医学与临床2024年1月第21卷第1期 L a b M e d C l i n,J a n u a r y2024,V o l.21,N o.1㊃论著㊃D O I:10.3969/j.i s s n.1672-9455.2024.01.002郑州地区表观健康人群s d L D L-C生物参考区间的建立与验证*刘凤珍,郭凤霞,毋小玉,魏晓霞,崔发财ә河南省人民医院检验科,河南郑州450003摘要:目的采用过氧化物酶法检测并建立郑州地区表观健康人群血清小而密低密度脂蛋白胆固醇(s d L D L-C)活性值参考区间,并进行验证㊂方法选取2019年6月至2022年6月在该院特需中心体检健康的785例成年人为研究对象,并按照性别和年龄(18~<30岁㊁30~<40岁㊁40~<50岁㊁50~<60岁和ȡ60岁)进行分组㊂采用过氧化物酶法检测血清s d L D L-C活性值,采用K o l m o g o r o v-S m i r n o v(K-S)法对各组数据进行正态性检验,采用双侧95%C I进行s d L D L-C活性值参考区间上下限的设定㊂另收集100例体检健康者血清样本进行参考区间验证,当比率值(R)ȡ90%,判断验证通过㊂结果郑州地区表观健康人群s d L D L-C活性值呈正态分布,男性为(0.700ʃ0.151)mm o l/L,女性为(0.670ʃ0.137)mm o l/L,男女比较,差异有统计学意义(P<0.01)㊂女性各年龄组间血清s d L D L-C活性值比较,差异无统计学意义(P>0.05),男性各年龄组间血清s d L D L-C活性值比较,差异有统计学意义(P<0.05),进一步分析显示18~<30岁组㊁30~<40岁组和40~< 50岁组间差异无统计学意义(P>0.05),50~<60岁组与ȡ60岁组间差异无统计学意义(P>0.05),因此将男性合并为18~<50岁组和ȡ50岁组㊂郑州地区表观健康人群血清s d L D L-C活性值参考区间为女性(18~80岁)0.400~0.938mm o l/L㊁男性(18~<50岁)0.440~1.004mm o l/L㊁男性(ȡ50岁)0.368~0.976mm o l/L㊂100例体检健康者的比率值为0.98,新建立的参考区间验证通过㊂结论该研究初步建立和验证了郑州地区表观健康人群血清s d L D L-C活性值参考区间,为心血管疾病的发病风险评估以及诊断治疗提供参考依据㊂关键词:小而密低密度脂蛋白胆固醇;参考区间;表观健康人群;验证;郑州中图法分类号:R-331文献标志码:A文章编号:1672-9455(2024)01-0008-04E s t a b l i s h m e n t a n d v e r i f i c a t i o n o f s d L D L-C a c t i v i t y v a l u e b i o l o g i c a l r e f e r e n c e i n t e r v a l a m o n ga p p a r e n t l y h e a l t h y p e o p l e i n Z h e n g z h o u a r e a*L I U F e n g z h e n,G U O F e n g x i a,WU X i a o y u,WE I X i a o x i a,C U I F a c a iәD e p a r t m e n t o f C l i n i c a l L a b o r a t o r y,H e n a n P r o v i n c i a l P e o p l e's H o s p i t a l,Z h e n g z h o u,H e n a n450003,C h i n aA b s t r a c t:O b j e c t i v e T o d e t e c t s e r u m s m a l l d e n s e l o w d e n s i t y l i p o p r o t e i n c h o l e s t e r o l(s d L D L-C)b y p e r-o x i d a s e m e t h o d a m o n g t h e a p p a r e n t l y h e a l t h y p e o p l e i n Z h e n g z h o u a r e a t o e s t a b l i s h i t s a c t i v i t y v a l u e r e f e r e n c e i n t e r v a l,a n d t o c o n d u c t t h e v e r i f i c a t i o n.M e t h o d s A t o t a l o f785h e a l t h y a d u l t s b y p h y s i c a l e x a m i n a t i o n i n t h e S p e c i a l N e e d s C e n t e r o f t h i s h o s p i t a l f r o m J u n e2019t o J u n e2020w e r e s e l e c t e d a s t h e s t u d y s u b j e c t s a n d g r o u p e d a c c o r d i n g t o s e x a n d a g e(18-<30y e a r s o l d,30-<40y e a r s o l d,40-<50y e a r s o l d,50-<60y e a r s o l d a n dȡ60y e a r s o l d).T h e a c t i v i t y v a l u e o f s e r u m s d L D L-C w a s d e t e c t e d b y t h e p e r o x i d a s e m e t h o d.T h e K o l m o g o r o v-S m i r n o v(K-S)t e s t w a s u s e d t o c o n d u c t t h e n o r m a l i t y t e s t o f t h e d a t a i n e a c h g r o u p,a n d t h e u p-p e r a n d l o w e r l i m i t s o f s d L D L-C a c t i v i t y v a l u e r e f e r e n c e i n t e r v a l s w e r e s e t w i t h b i l a t e r a l95%c o n f i d e n c e i n-t e r v a l s(C I).T h e o t h e r100s e r u m s a m p l e s f r o m h e a l t h y p h y s i c a l e x a m i n a t i o n s u b j e c t s w e r e c o l l e c t e d t o c o n-d u c t t h e r e f e r e n c e i n t e r v a l v e r i f i c a t i o n.W h e n t h e r a t i o v a l u e(R)ȡ90%,t h e v e r i f i c a t i o n w a s j u d g e d t o b e p a s s e d.R e s u l t s T h e s e r u m s d L D L-C a c t i v i t y v a l u e s a m o n g t h e a p p a r e n t l y h e a l t h y p e o p l e i n Z h e n g z h o u a r e a s h o w e d t h e n o r m a l d i s t r i b u t i o n,w h i c h w a s(0.700ʃ0.151)mm o l/L f o r m a l e s a n d(0.670ʃ0.137)mm o l/L f o r f e m a l e s,a n d t h e d i f f e r e n c e b e t w e e n t h e m a l e s a n d f e m a l e s w a s s t a t i s t i c a l l y s i g n i f i c a n t(P<0.01).T h e r e w a s n o s t a t i s t i c a l d i f f e r e n c e o f s d L D L-C a c t i v i t y v a l u e s i n f e m a l e s a m o n g t h e v a r i e d a g e g r o u p s(P>0.05), w h i l e w h i c h i n m a l e s h a d s t a t i s t i c a l d i f f e r e n c e s a m o n g t h e v a r i e d a g e g r o u p s(P<0.05).F u r t h e r a n a l y s i s s h o w e d t h a t t h e r e w a s n o s t a t i s t i c a l l y s i g n i f i c a n t d i f f e r e n c e a m o n g t h e a g e g r o u p s o f18-<30y e a r s o l d, 30-<40y e a r s o l d a n d40-<50y e a r s o l d(P>0.05),a n d b e t w e e n t h e a g e g r o u p s o f50-<60y e a r s o l d a n dȡ60y e a r s o l d(P>0.05),t h e r e f o r e,t h e m a l e s w e r e c o m b i n e d i n t o t h e18-<50y e a r s o l d g r o u p a n dȡ*基金项目:国家自然科学基金项目(82002199)㊂作者简介:刘凤珍,女,主管技师,主要从事临床生化检验及肿瘤早期诊断相关研究㊂ә通信作者,E-m a i l:c u i f a c a i1@163.c o m㊂50y e a r s o l d g r o u p.T h e r e f e r e n c e i n t e r v a l o f s e r u m s d L D L-C a c t i v i t y v a l u e i n a p p a r e n t l y h e a l t h y p e o p l e i n Z h e n g z h o u a r e a w e r e0.400-0.938mm o l/L f o r f e m a l e s(18-80y e a r s o l d),0.440-1.004mm o l/L f o r m a l e s (18-<50y e a r s o l d),0.368-0.976mm o l/L f o r m a l e s(ȡ50y e a r s o l d).T h e R v a l u e o f100h e a l t h y a d u l t s i n p h y s i c a l e x a m i n a t i o n w a s0.98a n d t h e n e w l y e s t a b l i s h e d r e f e r e n c e i n t e r v a l o f s e r u m s d L D L-C p a s s e d t h e v e r i-f i c a t i o n.C o n c l u s i o n T h e r e f e r e n c e i n t e r v a l s o f s e r u m s d L D L-C a c t i v i t y v a l u e s a m o n g t h e a p p a r e n t l y h e a l t h y a d u l t s i n Z h e n g z h o u a r e a a r e p r e l i m i n a r i l y e s t a b l i s h e d a n d v e r i f i e d,w h i c h p r o v i d e s t h e r e f e r e n c e b a s i s f o r t h e r i s k a s s e s s m e n t,d i a g n o s i s a n d t r e a t m e n t o f c a r d i o v a s c u l a r d i s e a s e s o n s e t.K e y w o r d s:s m a l l d e n s e l o w d e n s i t y l i p o p r o t e i n c h o l e s t e r o l;r e f e r e n c e i n t e r v a l;a p p a r e n t l y h e a l t h y a-d u l t s;v a l i d a t i o n;Z h e n g z h o u冠心病(C H D)是世界范围内引起人类死亡的主要原因,而动脉粥样硬化是导致C H D发生的主要危险因素[1]㊂小而密低密度脂蛋白胆固醇(s d L D L-C)属于低密度脂蛋白胆固醇(L D L-C)亚型,它与低密度脂蛋白(L D L)受体亲和力低且不易被降解代谢,在循环系统中停留时间长且易被氧化,因此更易渗入动脉血管壁堆积并介导泡沫细胞的形成[2],参与动脉粥样硬化过程㊂多项研究结果表明,体内高s d L D L-C水平与C H D的发病风险密切相关,且s d L D L-C检测的敏感性高于传统的L D L-C检测[3-4]㊂s d L D L-C检测方法众多,不同试剂厂家提供的参考区间存在差异,参考区间的不适用将会对患者的诊断和治疗造成影响㊂截至目前,国家卫生健康委员会已陆续更新㊁发布了10个部分的‘临床常用生化检验项目参考区间“行业标准,但s d L D L-C参考区间尚未包含在内㊂为此,本研究拟采用过氧化物酶法检测郑州地区表观健康人群血清s d L D L-C活性值,并初步建立和验证适合本地区的参考区间㊂1.1一般资料随机选取2019年6月至2022年6月在本院特需中心体检健康的785例成年人为研究对象1,用于建立血清s d L D L-C活性值参考区间,其中男性18~<30岁70例,30~<40岁74例,40~< 50岁64例,50~<60岁84例,ȡ60岁77例;女性18~<30岁87例,30~<40岁94例,40~<50岁97例,50~<60岁78例,ȡ60岁60例㊂将其按照性别和年龄(18~<30岁㊁30~<40岁㊁40~<50岁㊁50~<60岁和ȡ60岁)进行分组㊂另选取2022年8月在本院特需中心体检健康的100例成年人为研究对象2,用于验证新建立的血清s d L D L-C活性值参考区间㊂纳入标准:健康人群分布覆盖郑州市六区六县且居住1年以上,血压正常,体质量指数(B M I) 18.5~<23.9k g/c m2,血常规㊁尿常规㊁血脂和血糖均正常,胸部X线片或胸部C T㊁心电图及B超检查均正常㊂排除标准:有吸烟史㊁饮酒史㊁糖尿病史㊁家族遗传病史和慢性病史,既往或目前患心脑血管疾病㊁肾脏疾病㊁内分泌系统疾病㊁消化系统疾病㊁代谢和营养性疾病㊁风湿性疾病㊂本研究经本院医学伦理委员会审批通过[审批号:(2020)伦审第76号]㊂1.2仪器与试剂血清s d L D L-C活性值检测试剂盒及配套校准品和质控品均购自宁波美康生物科技股份有限公司,检测仪器为A B B O T T A R C H I T E C T c16000全自动生化分析仪㊂1.3方法1.3.1标本采集及检测采集所有研究对象空腹8 h外周静脉血3m L于含分离胶无抗凝剂的真空采血管中,2h内离心(2980ˑg,5m i n)并分离血清,保存于-80ħ超低温冰箱㊂样本检测前应确保检测系统处于在控状态,采用过氧化物酶法检测健康体检者血清s d L D L-C活性值㊂1.3.2参考区间的建立和验证根据美国临床实验室标准化协会(N C C L S)C28-A2文件‘医学实验室参考区间的定义㊁建立和确认“[5]进行参考区间的建立,收集研究对象1血清s d L D L-C活性值数据,采用狄克逊(D i x o n)检验法剔除离群值,对有效数据进行正态性检验并计算95%C I㊂根据W S/T402-2012文件‘临床实验室检验项目参考区间的制定“[6]进行参考区间验证,检测研究对象2血清s d L D L-C活性值,以新建参考区间内样本数与总样本数比值为比率值(R),Rȡ0.90判定参考区间验证合格㊂1.4统计学处理采用S P S S19.0统计软件进行数据分析,正态性检验采用K o l m o g o r o v-S m i r n o v(K-S)法,符合正态分布的计量资料采用xʃs表示,两组间比较采用独立样本t检验,多组间比较采用单因素方差分析㊂若资料符合正态分布,采用正态分布法建立s d L D L-C活性值的参考区间,以xʃ1.96s作为参考区间的上下限㊂以P<0.05为差异有统计学意义㊂2结果2.1正态性检验 K-S法检验结果显示,郑州地区表观健康人群血清s d L D L-C活性值服从正态分布(P>0.05),进一步按照性别和年龄进行分组后,各组血清s d L D L-C活性值也均服从正态分布(P>0.05)㊂2.2血清s d L D L-C活性值的性别及年龄组间比较男性表观健康人群血清s d L D L-C活性值显著高于女性(P<0.01),提示需按照性别设置参考区间㊂单因素方差分析结果显示,女性各年龄组间血清s d L D L-C活性值比较,差异无统计学意义(P> 0.05)㊂男性各年龄组间血清s d L D L-C活性值比较,差异有统计学意义(P<0.05)㊂男性18~<50岁各㊃9㊃检验医学与临床2024年1月第21卷第1期 L a b M e d C l i n,J a n u a r y2024,V o l.21,N o.1年龄组间s d L D L-C活性值比较,差异无统计学意义(P>0.05),但显著高于ȡ50岁各年龄组s d L D L-C 活性值(P<0.05),提示男性需按照18~<50岁和ȡ50岁设置参考区间㊂见表1㊂表1不同年龄的表观健康成年人血清s d L D L-C活性值比较(xʃs,mm o l/L)性别年龄(岁)n s d L D L-C女18~804160.670ʃ0.13718~<30870.641ʃ0.13430~<40940.681ʃ0.13540~<50970.674ʃ0.13050~<60780.686ʃ0.138ȡ60600.663ʃ0.155F1.445P0.218男18~893690.700ʃ0.151ә18~<30700.702ʃ0.177*#30~<40740.732ʃ0.119*#40~<50640.743ʃ0.126*#50~<60840.682ʃ0.158ȡ60770.661ʃ0.152F3.894P0.004注:与18~80岁女性比较,әP<0.01;与50~<60岁男性比较,*P<0.05;与ȡ60岁男性比较,#P<0.05㊂2.3血清s d L D L-C活性值参考区间的建立郑州地区表观健康人群血清s d L D L-C活性值服从正态分布,选取正态分布图双侧95%C I(xʃ1.96s)作为参考区间的上限和下限㊂参考区间为女性(18~80岁)0.400~0.938m m o l/L,男性(18~<50岁)0.440~1.004m m o l/L,男性(ȡ50岁)0.368~0.976m m o l/L㊂2.4血清s d L D L-C活性值参考区间的验证100例健康人群中,有98例的血清s d L D L-C活性值在新建立参考区间内,有2例超出参考区间,R=0.98> 0.90,参考区间验证合格㊂3讨论L D L-C是临床用于预防C H D高风险人群发病的首选干预指标[7],然而近年研究报道,部分C H D患者发病前L D L-C水平未见异常,另有部分C H D高风险人群通过饮食或药物治疗降低体内L D L-C水平后,C H D事件发生风险仍未降低[8-9]㊂因此,单纯的L D L-C检测并不能完全反映C H D患者真实的血脂水平㊂s d L D L-C属于L D L-C亚型,多项研究显示s d L D L-C水平与C H D发病风险密切相关[10-12],其作为预测和评估C H D发病风险的指标比L D L-C更敏感,已被美国国家胆固醇教育计划成人治疗组列入新发现的主要心血管疾病危险因素之一㊂目前,越来越多的实验室已经开展了s d L D L-C检测,过氧化物酶法具有操作简便㊁检测时间短㊁易于大批量样本检测等优点,已成为常用的检测方法,然而基于该方法的各试剂厂家提供的s d L D L-C参考区间存在差异,且厂家建立参考区间时纳入的研究对象受地域限制,不具有代表性㊂为了更好地发挥s d L D L-C的临床应用价值,建立适合本地区的s d L D L-C参考区间尤为重要㊂本研究结果显示,血清s d L D L-C活性值在郑州地区表观健康人群中呈正态分布,男性整体高于女性,女性不同年龄段间血清s d L D L-C活性值差异无统计学意义(P>0.05),男性18~<50岁的3个年龄组间s d L D L-C活性值差异无统计学意义(P>0.05),但显著高于ȡ50岁各年龄组s d L D L-C活性值,提示男性需按照18~<50岁和ȡ50岁分段设置参考区间㊂根据数据分析结果,本研究初步建立了郑州地区表观健康人群血清s d L D L-C活性值参考区间,并参考W S/T402-2012文件进行了参考区间的验证㊂我国目前已建立s d L D L-C活性值参考区间的地区有成都[13]㊁兰州[14]和呼和浩特[15],其研究结果均表明s d L D L-C活性值在人群中的分布具有性别差异,男性整体均值高于女性,这与本研究结果一致㊂然而s d L D L-C活性值在表观健康人群中的分布状态以及在各年龄段间的差异性表现与上述地区存在差异,这可能与地域㊁气候环境及生活习惯等因素有关,也可能与纳入研究的样本量有关,后续笔者将进一步扩大样本量进行验证,同时本研究结果也有待得到本地区其他医疗机构的验证㊂综上所述,本研究初步建立和验证了郑州地区表观健康人群血清s d L D L-C活性值参考区间,有助于筛查心脑血管疾病高风险人群,便于临床采取有效的干预手段来降低心脑血管疾病的发生率和病死率㊂参考文献[1]L U X,L I U Z,C U I Q,e t a l.A p o l y g e n i c r i s k s c o r e i m-p r o v e s r i s k s t r a t i f i c a t i o n o f c o r o n a r y a r t e r y d i s e a s e:a l a r g e-s c a l e p r o s p e c t i v e C h i n e s e c o h o r t s t u d y[J].E u rH e a r t J,2022,43(18):1702-1711.[2]台润东,黄淑田,马娇婷,等.小而密低密度脂蛋白与冠状动脉粥样硬化相关性研究进展[J].中西医结合心脑血管病杂志,2021,19(11):1841-1843.[3]I S H I I J,K A S H I W A B A R A K,O Z A K I Y,e t a l.S m a l l d e n s el o w-d e n s i t y l i p o p r o t e i n c h o l e s t e r o l a n d c a r d i o v a s c u l a r r i s k i n s t a t i n-t r e a t e d p a t i e n t s w i t h c o r o n a r y a r t e r y d i s e a s e[J].J A t h-e r o s c l e r T h r o m b,2022,29(10):1458-1474.[4]庞晓彬.血清小而密低密度脂蛋白胆固醇表达水平与冠心病的关系分析[J/C D].中西医结合心血管病电子杂志, 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总补体活性CH50生物参考区间的建立及验证

2016:34-35.[2]邬玲仟,李生斌,梁德生.人类单基因遗传疾病/中华民族基因组多态现象研究[M].西安:西安交通大学出版社, 2015:55-58.[3]崔英霞,武建国.基因组印记与基因组印记病[J].医学研究生学报,2001,4(14):70-73.[4]E L HAMAM S Y A R.R o l e o f D N A m e t h y l a t i o n i n i m-p r i n t i n g d i s o r d e r s:a n u p d a t e r e v i e w[J].J A s s i s t R e p r o dG e n e t,2017,34(5):549-562.[5]孟新璐,魏瑗,赵扬玉.选择性宫内生长受限的表观遗传学研究进展[J].中华妇产科杂志,2019,54(2):131-134.[6]MO N K D,MA C K A Y D J G,E G G E R MA N N T,e t a l.G e-n o m i c i m p r i n t i n g d i s o r d e r s:l e s s o n s o n h o w g e n o m e,e p i g-e n o m e a n d e n v i r o n m e n t i n t e r a c t[J].N a t R e v G e n e t, 2019,20(4):235-248.[7]中华医学会儿科学分会内分泌遗传代谢学组,‘中华儿科杂志“编辑委员会.中国P r a d e r-W i l l i综合征诊治专家共识(2015)[J].中华儿科杂志,2015,53(6):419-424. [8]中国医师协会医学遗传学分会,中国医师协会青春期医学专业委员会临床遗传学组,中华医学会儿科学分会内分泌遗传代谢学组.染色体基因组芯片在儿科遗传病的临床应用专家共识[J].中华儿科杂志,2016,54(6):410-413.[9]染色体微阵列分析技术在产前诊断中的应用协作组.染色体微阵列分析技术在产前诊断中的应用专家共识[J].中华妇产科杂志,2014,48(8):570-572.㊃短篇论著㊃总补体活性C H50生物参考区间的建立及验证郭慧娟,尚晓泓,陈勋(中国中医科学院西苑医院检验科,北京100091)摘要:目的建立本实验室总补体活性(C H50)的参考区间,为临床诊断提供参考㊂方法对C H50的试剂说明书提供的参考区间进行验证㊂按照‘中华人民共和国卫生行业标准W S/T404.1-2012临床常用生化检验项目参考区间“制定标准来建立和验证C H50参考区间㊂选择该院体检科进行体检的健康人群,进行体外定量测定血清中的C H50㊂结果试剂说明书提供的C H50参考区间未通过验证㊂重新建立参考区间并通过了验证㊂不同性别组C H50检测结果差异无统计学意义㊂结论对于验证未通过的参考区间应重新建立参考区间并进行验证㊂关键词:血清总补体活性;生物参考区间;建立;验证补体是一组具有酶的活性并且不耐热的球蛋白,存在于动物和人的正常新鲜血清中㊂总补体活性的测定通常用检测血清总补体活性(C H50)的方法来表示㊂在临床上C H50用于以系统性红斑狼疮为首的自身免疫性疾病的诊断㊂参考区间(R I s)是临床诊断中最常用和可靠的决策工具[1]㊂目前,参考区间已成为国际上的通用的㊁规范的医学术语㊂W S-T404文件认为临床实验室应首选文本文件的参考区间㊂因建立参考区间工作量繁重,所以引用参考区间比自己建立参考区间更加现实㊁合理[2]㊂但是引用参考区间之前应对此参考区间进行验证和评估,以证明此参考区间适合于本实验室㊂目前,实验室检测C H50是采用日本公司提供的试剂,参考区间采用试剂说明书提供的说明书(C H50参考区间23~46U/m L)㊂对此参考区间进行验证,若验证通过,则引用此参考区间;如果验证未通过,则应该重新建立自己实验室的参考区间㊂对此参考区间进行评估验证时,参考的是W S-T402-2012㊂室内质控采用的是伯乐生理水平和病理水平的质控品,室内质控结果符合本实验室制定的质控规则;C H50项目参加了卫生部的室间质评并且全部通过㊂1资料与方法1.1一般资料征得参考个体的知情同意,通过体格检查㊁问卷调查㊁实验室检查㊁肝胆脾超声检查筛选参考个体,满足以下要求:(1)自觉健康;(2)无消化系统疾病㊁呼吸系统疾病㊁肾脏疾病㊁急慢性感染㊁免疫系统疾病㊁血液系统疾病等;(3)近期未曾大量失血㊁手术或服用药物;(4)无营养不良㊁素食㊁酗酒㊁嗜烟;(5)近期无剧烈运动或重体力劳动;(6)女性未处于怀孕或哺乳期㊂1.2仪器及试剂德国罗氏C O B A S8000以及日本日立公司补体价测定试剂盒㊂1.3检验原理脂质体免疫测定法㊂1.4质量控制 C H50室内质控结果符合规定的1-3S和2-2S质控规则,参加卫生部的室间质控,成绩为100.0%㊂1.5统计学处理采用S P S S进行统计学分析㊂以P<0.05为差异具有统计学意义㊂2结果2.1引用参考区间的验证收集20例健康参考个体的样本,在已经通过性能验证的检测系统上进行检测,检测结果95.0%(19例)落在引用参考区间以内,不超过5.0%(1例)结果落在引用参考区间以外,说明该参考区间有效;否则说明参考区间无效㊂按照W S /T 402-2012中小样本验证参考区间进验证㊂筛选合格的参考个体20名,进行采样并检测㊂20个测定结果与需要验证的参考区间进行比较,若落在参考区间外的测定值不超过2个(符合率ȡ90.0%),则此参考区间可以直接使用;若3个或3个以上测定值超出此范围,则需要重新筛选20名参考个体,重复以上操作;同样若有小于2个结果超出此参考区间(符合率ȡ90.0%),则此参考区间可以直接使用;若仍有3个或3个以上的结果超出此范围,则应该考虑是否有人群差异,则应该建立本实验室的参考区间㊂筛选合格的参考个体20名,依照本实验室操作规程进行采集㊁处理和分析这些样本㊂超出参考区间的数据不超过2个,即通过验证;若超过2个,则另选20例合格参考个体重新按照上述判断标准进行验证㊂3组各20例参考个体的检测结果均未通过引用参考区间的验证㊂查阅资料显示此参考区间是1986年日本日立公司在日本收集的数据建立的,可能此参考区间不符合本地区的人群㊂所以应该建立本实验的参考区间㊂2.2 参考区间的建立选择2016年10月至2016年11月来本院体检科进行体检和相关检查均正常的健康者,年龄20~79岁,男154例,女125例㊂检测结果先做离群点判断㊂离群值剔除采用D I X O N 方法㊂此方法是首先将检测结果按照由大到小的顺序进行排序并计算极差(R ),然后分别计算最大值和最小值与其相邻数值的差值(D m a x ,D m i n ),若D m a x/R ȡ1/3或D m i n /R ȡ1/3,则将最大值或最小值作为离群值给以剔除㊂将测定数据进行离群值检测,结果D m a x /R ɤ1/3㊁D m i n /R ɤ1/3,说明收集的数据符合要求㊂见表1㊂表1 C H 50测定结果测定结果(U /m L )参考个体例数(n )测定结果(U /m L )参考个体例数(n )20~30950~609330~403360~704640~508770~8011参考个体测定结果不是正态分布,不宜采用x ʃ1.96s 表示95.0%数据分布范围;应采用百分位数法,确定2.5%和97.5%位数的参考限,以此确定参考区间㊂根据百分数确定的参考区间为(31~71)U /m L ㊂2.3 参考区间的验证筛选合格的参考个体20例,先进行离群值检测,若剔除离群值后例数不足20例,则需要补足20例;然后进行小样本验证此参考区间㊂超出设定参考区间的数据不超过2个(10.0%),即通过验证㊂将测定数据进行离群值检测,结果D m a x /R ɤ1/3㊁D m i n /R ɤ1/3,说明收集的数据符合要求㊂20个参考个体中,一个参考个体的检测结果超出设定参考区间的数据,超出参考区间的数据比例低于10.0%,通过验证,证明此参考区间可以在本实验室使用㊂3 讨论生物参考区间是临床判断是否健康的标准,实验室必须保证给临床提供正确的适用的生物参考区间,否则会导致误诊,甚至错误的治疗,所以实验室建立生物参考区间工作意义重大[3]㊂但是依照国际临床化学协会提出的建立实验室生物参考区间的方法[4]要求严格,程序繁琐,实验室现行条件自行制定所有检测项目的生物参考区间存在客观难度㊂根据W S -T404的建议,引用参考区间比自己建立参考区间更加合理和现实,但是应该对引用的参考区间予以验证,若验证未通过,则应该选择参考人群建立实验室自己的参考区间㊂在对C H 50试剂厂家提供的参考区间进行验证时,发现提供的参考区间不适合本实验室㊂所以按照W S -T 402建立参考区间的流程进行建立新的参考区间并予以验证㊂通过此流程保证了检验科给临床提供准确的生物参考区间,保证了此参考区间的可靠和适用㊂参考文献[1]MA L A T I T.W h e t h e r w e s t e r n n o r m a t i v e l a b o r a t o r y va l -u e s u s e d f o r c l i n i c a l d i a g n o s i s a r e a p pl i c a b l e t o I n d i a n p o pu l a t i o n A n o v e r v i e w o n r e f e r e n c e i n t e r v a l [J ].I n d i a n J C l i n B i o c h e m ,2009,24(2):111-122.[2]I c h i h a r a K ,B o y d J C .A n a p p r a i s a l o f s t a t i s t i c a l pr o c e d u r e s u s e d i n d e r i v a t i o n o f r e f e r e n c e i n t e r v a l s [J ].C l i n C h e mL a b M e d ,2010,48(11):1537-1551.[3]陈桂山,杨有业,梁锦胜,等.临床医学实验室生物参考区间的建立[J ].检验医学,2008,23(4):421-424.[4]S O L B E R G H E ,S T AMM D.I n t e r n a t i o n a l F e d e r a t i o n o fC l i n i c a l C h e m i s t r y I F C C .I F C C r e c o mm e n d a t i o n -t h e o r y of r e f e r e n c e v a l u e s .P a r t 4.C o n t r o l o f a n a l yt i c a l v a r i a t i o n i n t h e p r o d u c t i o n ,t r a n s f e r a n d a p pl i c a t i o n o f r e v e r e n c e v a l -u e s [J ].C l i n C h i m A c t a ,1991,202(1-2):S 5-S 11.。

参考区间及临界值如何验证或建立 PPT

参考区间： CNAS认可的要求
1. 实验室应规定生物参考区间或临床决定值，将此规定的依据文件化，并通知用户。
2. 当特定的生物参考区间或决定值不再适用服务的人群时，应进行适宜的改变并通知用户。
3. 如果改变检验程序或检验前程序，实验室应评审相关的参考区间和临床决定值（适用时）。
参考区间的验证和建立
数据分析：验证
≤2个结果超出待验证区间
Pass
≤2个结果超出待验证区间
Pass
20个结果
3个或4个结果超出待验证区间
20个结果
≧3个结果超出待验证区间
≥5个结果超出待验证区间
检查分析程序，参考人群差异，自行建立
《生物参考区间和临床决定值评价程序》（PKUPHL-2-PF-033-V2）
17
前期准备工作： 1. 新仪器新项目：仪器校准、人员培训、熟悉仪器操作； 2. 对检验程序进行验证：包括精密度、正确度、定量限、
分析测量范围、干扰等； 3. 制定参考区间验证方案和计划； 4. 提交伦理审查申请。
《生物参考区间和临床决定值评价程序》（PKUPHL-2-PF-033-V2）
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参考区间的验证和建立
参考区间的验证和建立
数据分析：首先检查看有无离群值，即最大值和次大值或次小
值和最小值的差值是否超过1/3极差，如有离群值，须先去除离群值，再选择参考个体，补齐20例（验证）或120 例（建立），且无离群值。
《生物参考区间和临床决定值评价程序》（PKUPHL-2-PF-033-V2）
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参考区间的验证和建立
大家应该也有点累了，稍作休息
大家有疑问的，可以询问和交流
参考区间：CAP认可的要求

血细胞参数个性化参考区间的建立及验证

血细胞参数个性化参考区间的建立及验证岳波;刘曼娇;唐大海;贺嘉蕾;蒋梦洁;韦晓强;李丹杰;张尚珍【摘要】Objective To establish and verify the personalized reference interval of blood cells.Methods The results of blood cells from 2 089 health subjects in 2014,2015 and 2016 were collected.The ratio of the later results to the previous results was defined as the fluctuation (λ).The ratio (λ1) of the results of 2015 to the results of 2014 was calculated and λ1 was analyzed statistically to establish the fluctuation reference interval (CIλ).The ratio (λ2) of the results of 2016 to the results of 2015 was calculated.λ2 was used to verify λ2.The personalized reference interval (CIp) was established by multiplying each result of 2015 and CIλ.CIp was verified by results of 2016.The ratio of the upper and lower limits of CIp was calculated.The ratio of the upper and lower limits of the reference interval (WS/T 405) was calculated.Results The values of CIλ were as follows:WBC (0.66 to1.53),L(0.67 to 1.51),M (0.50 to2.00),N(0.56 to 1.78),E(0.4 to 2.51),PLT(0.76 to 1.32),RBC(0.92 to 1.12),Hb(0.92 to 1.11),Hct(0.91 to 1.12),MCV(0.95 to 1.07),MCH(0.95 to 1.05)and MCHC(0.94 to 1.06).The validation tests of CIλ and CIp showed that both CIλ and CIp were suitable for this pared with the reference interval of professional criteria,the ratio of the upper and lower limits of the CIp was smaller than that of traditional criteria.Conclusion CIp for this laboratory was established and pared with traditional criteria,CIp should be more personalized and highly sensitive.%目的建立血细胞参数个性化参考区间并验证.方法随机选取2014、2015、2016连续3年各项检查结果均正常的体检健康者,共2 089例,收集血常规结果.将体检者同一指标的后一次检测结果与前一次的比值定义为波动性(λ).计算2015年结果与2014年的比值(λ1),对λ1进行统计学分析并建立波动性参考区间(CIλ);计算2016年结果与2015年的比值(λ2),用λ2对CIλ验证.将各体检者2015年血常规结果分别与CIλ的上、下限相乘,得出各体检者的个性化参考区间(CIp),用2016年的血常规结果对CIp验证;分别计算CIp和行业标准参考区间的上、下限比值.结果CIλ:白细胞计数(0.66 ～1.53)、淋巴细胞绝对值(0.67 ～1.51)、单核细胞绝对值(0.50 ～2.00)、中性粒细胞绝对值(0.56 ～1.78)、嗜酸性粒细胞绝对值(0.4 ～2.51)、血小板计数(0.76 ～1.32)、红细胞计数(0.92 ～1.12)、血红蛋白(0.92～1.11)、红细胞压积(0.91 ～1.12)、平均红细胞体积(0.95 ～1.07)、平均红细胞血红蛋白含量(0.95 ～ 1.05)、平均红细胞血红蛋白浓度(0.94 ～1.06);CIλ的验证试验表明CIλ适合该实验室;CIp的验证试验表明CIp 适合该实验室;与行业标准参考区间相比,CIp的上、下限比值更小.结论建立并验证了CIp;CIp较传统参考区间更敏感、个性化.【期刊名称】《临床检验杂志》【年(卷),期】2017(035)002【总页数】4页(P107-110)【关键词】个性化医疗;血细胞;参考区间;波动性【作者】岳波;刘曼娇;唐大海;贺嘉蕾;蒋梦洁;韦晓强;李丹杰;张尚珍【作者单位】解放军第四一一医院检验科,上海200081;解放军第四一一医院检验科,上海200081;解放军第四一一医院检验科,上海200081;解放军第四一一医院检验科,上海200081;解放军第四一一医院检验科,上海200081;解放军第四一一医院检验科,上海200081;解放军第四一一医院检验科,上海200081;解放军第四一一医院检验科,上海200081【正文语种】中文【中图分类】R4462015年美国启动“精准医学计划”，引发各国密切关注和迅速跟进。

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中国成人肝脏功能项目和电解质项目的参考区间
项目血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）单位 U/L 性别男女男女男女男女男/女男/女男/女男/女男/女男/女男/女参考区间 9～50 7～40 15～40 13～35 10～60 7～45 45～125 20-49岁：35～100 50-79岁：50～135 65～85 40～55 20～40 1.2～2.4 3.5～5.3 137～147 99～110
Your Topic Goes Here 三、参考区间的建立方法
中国成人血细胞分析项目的参考区间（仪器法）
项目白细胞(WBC) 中性粒细胞绝对值(Neut#) 淋巴细胞绝对值(Lymph#) 嗜酸性粒细胞绝对值(Eos#) 嗜碱性粒细胞绝对值(Baso#) 单核细胞绝对值(Mono#) 中性粒细胞百分数(Neut%) 淋巴细胞百分数(Lymph%) 嗜酸性粒细胞百分数(Eos%) 嗜碱性粒细胞百分数(Baso%) 单核细胞百分数(Mono%) 红细胞(RBC)
Your Topic Goes Here 三、参考区间的建立方法
标本采集——分析前质量控制
个体准备
饮食空腹时间药物、烟、酒运动应激
标本采集
环境时间体位标本类型技术
标本处理
运输凝块血清/血浆分离储存据检测时间
Your Topic Goes Here 三、参考区间的建立方法
标本检测——生化项目质量保证
Your Topic Goes Here 三、参考区间的建立方法
统计分析——参考区间计算
• 建立参考区间：分布判断
参考值95%的分布范围 x-1.96s，x+1.96s P2.5—P97.5
Your Topic Goes Here 三、参考区间的建立方法
统计分析——分组判断
• Z检验（正态分布，或接近正态分布）
妇女4.8-6.2%；D-D妊娠妇女高；甲状腺激素不同孕期
参考区间） • 困难更大：人群募集、标本采集、情绪饮食控制
Your Topic Goes Here 三、参考区间的建立方法
多中心实验室联合建立参考区间的趋势
• 工程浩大：数量、质量 • 各医院参考区间不同：医生、患者、医疗资源
• CLSI：相同项目不用试剂仪器厂家、实验室参照相同标

甲亢或甲减疾病血液系统疾病呼吸系统疾病吸烟量饮酒量 2周内服用药物肥胖：BMI≥28 怀孕或产后不足1年 6个月内做过手术 4个月内献血或输血
Your Topic Goes Here 三、参考区间的建立方法
参考人群选择——实验室检查
• 尿检：正常 • 免疫学排除：HBsAg、HCV-Ab、HIV-Ab • 生化学排除：血糖、血脂等
Your Topic Goes Here 三、参考区间的建立方法
标本检测——血液项目质量保证
• 精密度：使用3个浓度全血质控品，重复测定4次/天，测定5 天；计算CV值（CLSI EP-15）
• 正确度：5支新鲜血标本（8h内），每份新鲜血标本测定2
次，计算bias • 室内质控：3个浓度，连续3天不同时间段测定，计算10-20 次检验结果均值，至少用13s，22s规则 • 机器报警，涂片地理区域
东北地区华北地区华东地区西北地区西南地区华南地区
承担单位
中国医科大学附属第一医院北京大学第三医院复旦大学附属中山医院第四军医大学第一附属医院四川大学华西医院广东省中医医院
基于中国人群多中心研究结果，可溯源至国际公认参考方法，广泛征求临床意见
Your Topic Goes Here 三、参考区间的建立方法
Your Topic Goes Here 一、参考区间的概念
• 参考个体 ( reference individuals ) 按明确标准选择的用作检验对象的个体。注：通常是符合特定标准的健康个体。 • 参考人群 ( reference population ) 由所有参考个体所组成的群体。注：通常参考人群的个体数是未知的，因此参考人群是一个推想的实体。 • 参考样本组 ( reference sample group ) 从参考人群中选择的用以代表参考人群的足够数量的个体。 • 参考值 ( reference values ) 通过对参考个体某一特定量进行观察或测量而得到的值（检验结果）。注：参考值从参考样本组中获得。
性别男 /女男 /女男 /女男 /女男 /女男 /女男 /女男 /女男 /女男 /女男 /女男女男女男女男 /女男 /女
男 /女男 /女
参考区间 3.5～9.5 1.8～6.3 1.1～3.2 0.02～0.52 0～0.06 0.1～0.6 40～75 20～50 0.4～8.0 0～1 3～10 4.3～5.8 3.8～5.1 130～175 115～150 0.40～0.50 0.35～0.45 82～100 27～34
济存在差异，生物学变异等存在决定不同国家和地区需建立符合本地人群特征的参考区间
• 方法学和检测技术不断更新，人民生活水平提高，许多项
目参考区间不再适用
Your Topic Goes Here 三、参考区间的建立方法
• 2008 CLIS C28-A3文件《How to define and determine
Your Topic Goes Here 一、参考区间的概念
参考个体 Comprise a 参考人群 From which is selected a 参考样本组 On which are determined 参考值 On which is observed a 参考分布 From which are calculated 参考限 That may define 参考区间
参考人群选择——调查问卷
年龄吸烟、饮酒
性别
民族联系方式职业环境睡眠锻炼
药物使用情况
维生素摄入情况近期住院、手术近期输血、献血病史、家族史过敏史
饮食
针对女性的特殊问题
Your Topic Goes Here 三、参考区间的建立方法
参考人群选择——体格检查
• BMI、腰围、臀围 • 血压 • 全身全系统体格检查：一般情况，心肺腹查体，
Z=
Z*=3(naverage/120)1/2=3[(n1+n2)/240]1/2
• 判断标准：如果Z值大于Z*值，或者较大SD大于
较小的1.5倍，建议分组，临床可接受
Your Topic Goes Here 三、参考区间的建立方法
特殊人群参考区间的建立
• 特殊人群：儿童、妊娠、少数民族 • 必要性：不适用性（HbA1c 妊娠妇女4-5.5%，非妊娠
口腔、甲状腺、淋巴结、四肢、脊柱、关节等
• 问诊：症状、病史
Your Topic Goes Here 三、参考区间的建立方法
参考人群选择——排除标准

急慢性感染动脉粥样硬化、血管病烧伤和肌肉创伤心脏病、高血压慢性肾病糖尿病肝胆管疾病自身免疫性疾病过敏性疾病
reference intervals in the clinical laboratory—— Approved guidelines》
• 2012 我国常用生化、血液项目参考区间建立和验证相关行
业标准起草
Your Topic Goes Here 三、参考区间的建立方法
参考人群募集
募集人群来源分布
• 精密度：使用高低浓度质控品，重复测定4次/天，测定5天；计算CV值，小于试剂说明书的标称指标（CLSI EP-15）
• 正确度：使用新鲜冰冻血清及NIST标物，重复测定5次，连
续2天；计算偏倚(bias)与1/2TEa比较，超出，查找原因（试剂、校准、参数、仪器等） • 室内质控：每天不同时段分析质控品5次，连续4天，计算质控品的均值和标准差，质控图，符合质控规则
• 主观感觉？ • 潜在/亚临床疾病 • 界定方法：疾病？健康生活方式？自我感觉（农村）？影像学（脂肪肝）？对参考个体健康状况评估进行详细记录就显得尤为重要，可便于他人再次评估，且为其他实验室进行参考区间的转移和验证时提供参考依据
Your Topic Goes Here 三、参考区间的建立方法
血清天门冬氨酸氨基转移酶(AST)
血清 γ-谷氨酰转移酶 (GGT) 血清碱性磷酸酶 (ALP) 血清总蛋白(TP) 血清白蛋白 (ALB) 血清球蛋白(GLB) 白蛋白/球蛋白(A/G) 血清钾离子(K＋) 血清钠离子(Na＋) 血清氯离子(Cl－)
U/L
U/L U/L
g/L g/L g/L mmol/L mmol/L mmol/L
Your Topic Goes Here 一、参考区间的概念
• 参考分布 ( reference distribution ) 参考值的分布。注：参考人群的推想分布可用参考样本组的参考分布及合适的统计方法进行试验；参考人群推想分布的参数可用参考样本组的参考分布及合适的统计方法来估计。
• 参考限 ( reference limit ) 一个来自参考分布用于分类目的的值。注：参考限通常是使规定部分的参考值分别小于等于或大于等于的下侧或上侧限值，参考限将参考值分类；参考值可能与其他类型的决定限不同。
Your Topic Goes Here 二、参考区间建立的意义
• 参考区间是临床检验结果的评价标准，可帮助临床医师做
出正确的诊断和治疗决策
• 参照体外诊断试剂厂家提供的数据或文献报道，而这些数
据多来源于其他国家二三十年前参考区间或小样本局部地
区人群或数据库参考区间的研究结果
• 不同国家、地区、民族，生活环境、饮食、遗传背景、经

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