HE染色步骤
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常规HE染色步骤
(1)二甲苯(Ⅰ)5-10 min
(2) 二甲苯(Ⅱ)5-10 min
(3) 95%乙醇(Ⅰ)1-3 min (4)95%乙醇(Ⅱ)1-3 min (5)80%乙醇 1 min (6)蒸馏水 1 min (7)苏木精液染色5-15 min
(8 ) 流水稍洗去苏木精液1-3 s
(9) 1%盐酸乙醇1-3 s
(10) 稍水洗10-30 s
(11)促蓝液返蓝10-30 s
(12) 流水冲洗10-15 min (13)蒸馏水过洗1-2 s
(14) 0.5%曙红液染色1-3 min
(15) 蒸馏水稍洗1-2 s
(16) 80%乙醇稍洗1-2 s
(17) 95%乙醇(Ⅰ)3-5min
(18) 95%乙醇(Ⅱ)3-5 min
(19) 无水乙醇5-10 min
(20) 无水乙醇5-10 min
(21) 二甲苯(Ⅰ)3-5 min
(22) 二甲苯(Ⅱ)2-5 min
(23) 二甲苯(Ⅲ)3-5 min
(24) 中性树胶封固
结果:细胞浆红色,细胞核蓝紫色。
转:常规HE染色步骤
(1)二甲苯(Ⅰ)5-10 min
(2) 二甲苯(Ⅱ)5-10
min
(3) 95%乙醇(Ⅰ)1-3
min
(4)95%乙醇(Ⅱ)1-3 min
(5)80%乙醇 1 min
(6)蒸馏水
1 min
(7)苏木精液染色5-15 min
(8 ) 流水稍洗去苏木精液1-3 s
(9) 1%盐酸乙醇1-3 s (12) 流水冲洗20-30mi n
(13)蒸馏水过洗1-2 s (14) 0.5%曙红液染色1-3 min
(15) 蒸馏水稍洗1-2 s
(16) 80%乙醇稍洗1-2 s (17) 95%乙醇(Ⅰ)2-3 s (18) 95%乙醇(Ⅱ)3-5 s (19) 无水乙醇5-10 min
(20) 石炭酸二甲苯无水乙醇5-10 min (21) 二甲苯(Ⅰ) 2 min
(22) 二甲苯(Ⅱ) 2 min (23) 二甲苯(Ⅲ) 2 min
(24) 中性树胶封固
注:①第(10)、(11)步可省去,(12)步冲水时间需延长至20-30min。
②第(20)步如果不用石炭酸二甲苯,可改用无水乙醇。
1.取材组织块,经固定后,常规石蜡包埋,4μm切片。
2.切片常规用二甲苯脱蜡,经各级乙醇至水洗:二甲苯(I)5min→二甲苯(Ⅱ)5min →100%乙醇2min→95%的乙醇1min→80%乙醇1min→75%乙醇1min→蒸馏水洗2min。(各两次,然后把水吸干)
3.苏木素染色5min,自来水冲洗。(吸干水)
4.盐酸乙醇分化30s(提插数下)。
5.自来水浸泡15min或温水(约50℃)5min。(吸干水)
6.置伊红液2min。
7.常规脱水,透明,封片:95%乙醇(I)min→95%乙醇(Ⅱ)1min→100%乙醇(I)1min→100%乙醇(Ⅱ)1min→二甲苯石碳酸(3:1)1min(省略)→二甲苯(I)1min →二甲苯(Ⅱ)1min→中性树脂封固。
HE染色步骤
一、HE染液的配制: