病理片HE染色步骤
he染色流程(一)
he染色流程(一)he染色简介•什么是he染色?•为什么需要he染色?流程1. 样本制备•获取组织样本(如组织切片)•将样本固定在载玻片上•进行脱水和透明化处理2. 血液片制备•获取新鲜血液样本•密度离心分离白细胞•将细胞悬液涂布在载玻片上•进行干燥和固定处理3. 染色液制备•准备hematoxylin溶液和eosin溶液•根据需要进行稀释4. he染色•将载玻片浸入hematoxylin溶液中，染色一段固定时间•洗去多余溶液•将载玻片浸入eosin溶液中，染色一段固定时间•再次洗去多余溶液•干燥载玻片5. 倒置显微镜观察•将he染色载玻片放置在倒置显微镜上•调整镜头和光照条件以观察染色效果•进行细胞组织结构的分析和判定结论•he染色是一种常用的细胞和组织染色方法•它可以用于观察细胞和组织的形态结构•he染色广泛应用于病理学和组织学领域，有助于疾病的诊断和治疗参考文献•[论文/reference]•[书籍/reference]注意：此处所提供的流程仅为示例，实际操作中可能存在差异。
请严格按照实验室标准操作，并遵循相关实验室安全规定。
he染色简介•什么是he染色?–he染色是一种常用的细胞和组织染色方法，用于观察细胞和组织的形态结构。
•为什么需要he染色?–he染色可以帮助病理学家和研究人员观察细胞和组织的结构，对疾病的诊断和治疗起到重要的作用。
流程1. 样本制备•获取组织样本(如组织切片)。
•将样本固定在载玻片上，保持其原始形态。
•进行脱水和透明化处理，以去除组织中的水分，便于染色。
2. 血液片制备•获取新鲜血液样本。
•密度离心分离白细胞，得到富含白细胞的细胞悬液。
•将细胞悬液涂布在载玻片上，形成血液片。
•进行干燥和固定处理，以保持细胞形态。
3. 染色液制备•准备hematoxylin溶液和eosin溶液，用于染色。
•根据需要进行稀释，以调整染色液的浓度。
4. he染色•将载玻片浸入hematoxylin溶液中，染色一段固定时间。
HE染色实验步骤
HE染色实验步骤染色实验是生物学中常用的染色技术，用于观察细胞结构、细胞器和染色体等生物学特征。
在这个实验中，我们将使用HE染色法来染色细胞和组织切片。
HE染色法是最常用的组织染色方法之一，用于观察组织结构和组织细胞的形态。
以下是HE染色实验的步骤：1.准备组织标本在进行染色实验之前，首先需要准备好需要染色的组织标本。
组织标本可以是新鲜的组织样本，也可以是已固定和包埋的组织切片。
在准备组织标本时，需要确保组织标本的质量和完整性，以保证染色结果的准确性。
2.制备切片将组织标本切割成薄片，通常厚度在5-10微米之间。
为了获得更好的染色效果，切片应该尽可能薄且均匀。
切片可以使用切片刀或者切片机进行切割。
切片完成后，将切片放在载玻片上，待干燥。
3.脱脂和脱水将切片放入甲醇中脱脂，去除切片中的脂肪物质。
脱脂时间一般为1-2分钟。
脱脂完成后，将切片依次浸入95%乙醇、70%乙醇和蒸馏水中进行脱水处理，时间每次均为1-2分钟。
脱水处理的目的是去除切片中的水分，以便后续染色。
4.染色处理将脱水后的切片依次浸入hematoxylin染料、蒸馏水、酸性洗涤剂和eosin染料中进行染色处理。
hematoxylin染料用于染色细胞核，eosin染料用于染色胞质。
染色时间根据实验需要，通常为1-10分钟。
染色完成后，将切片洗净并进行脱水处理。
5.脱水和封片将染色后的切片依次浸入70%乙醇、95%乙醇和透明剂中进行脱水处理。
脱水完成后，将切片放入透明剂中进行透明化处理，以使组织切片更加透明。
最后，将切片放入显微镜载玻片上，加入透明胶封片，并静置干燥。
6.观察和记录将封片好的切片放入显微镜中，用适当的倍数镜头观察组织结构和细胞形态。
观察时，可以记录下细胞核的形态、胞质的颜色和组织结构等信息。
通过观察和记录，可以得到关于组织和细胞的详细信息，为后续研究和分析提供参考。
7.结果分析根据观察和记录的结果，对染色切片进行分析和比较。
he染色步骤HE实验步骤
he染色步骤 HE实验步骤动物病理切片小结[样本处理]动物麻醉后，开胸，暴露心脏，头皮针插入左心室尖，打开37?生理盐水输液装置，从右心耳下沿剪开右心房，灌洗至流出的生理盐水无血(20min)，换4%多聚甲醛固定液灌注(约5min)[固定]4%多聚甲醛固定。
[石蜡切片]? 取样从固定中取出待切组织，用手术刀切成2mm厚度的小样，装入脱水小盒中，铅笔标号纸条同放入小盒后流水洗30min，蒸馏水浸洗? 处理Mice:脱水50%乙醇 2-3h170%乙醇 1-2h80%乙醇 1h95%乙醇 2h(1h+1h)100%乙醇 2h(1h+1h)透明二甲苯 35min+35min浸蜡 1h+1h+1h (62?蜡)[HE染色]脱蜡二甲苯? 15min二甲苯? 15min二甲苯:无水乙醇(1:1) 2min无水乙醇? 2min无水乙醇? 2min95%乙醇 2min85%乙醇 2min70%乙醇 2min50%乙醇 2min蒸馏水 5min(如果是DAB染色要抗原修复)HE染色? 苏木素 6-8min (时间可以延长，现在10-30min)? 冲洗 1min(反向将载玻片反向冲洗，注意不要脱片)2? 含1%盐酸的乙醇进行分色(用75%乙醇配)2-3s动作要快? 氨水反蓝 >10min? 伊红 10s? 冲洗固定脱水95%乙醇 2min100%乙醇? 2min100%乙醇? 2min二甲苯? 2min二甲苯? 2min 树胶封片组织浸蜡-常规石蜡切片制作组织经过透明剂的完全透明后，被移放于65?左右熔化的石蜡中，于65?的电热恒温箱中浸渍的过程称为浸蜡。
组织在脱水时，组织中的脂类和类脂等物质在脱水剂的作用下被溶解掉，留下了许多腔隙，许多管腔组织和血管，也有许多腔隙，这些都严重地影响了切片。
组织浸蜡时，由于诱导剂(二甲苯)的作用，石蜡进入到组织的各个角落，并在各个角落中保存下来。
当石蜡包埋后冷却时，这浸入到里3面的石蜡便可起到支撑的作用，而且使组织不致于变形，塌陷等现象，使切片能完整的切出，便于镜下观察。
HE染色步骤[推荐]
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HE染色步骤[推荐]
染色是加入染料将细胞或组织着色的过程。
HE染色是指使用
血红蛋白染成红色，细胞核染成蓝色的染色方法。
HE染色步骤如下：
1. 取制好的玻片（细胞或组织已固定在玻片上），用甲醇或乙醇进行脱水，使细胞或组织变得透明。
2. 将玻片放入染料盒中，加入苏丹三液（血红蛋白染料）浸泡。
时间通常为5-10分钟。
洗净玻片以去除多余的染料。
3. 将玻片放入氧化性酸液中（酸性洗涤液或稍微含有酒精的酸性水溶液），将苏丹三液中的铁离子还原成溶于水的亚铁离子。
时间通常为1-2分钟。
4. 接下来，将玻片放入碱性染色液中（含有甲苯重组溶液和酸性洗涤液的甲苯重组溶液），染色液中的亚铁离子被氧化成沉淀（血红蛋白）。
5. 最后，将玻片漂洗并脱水，然后用透明介质将玻片封闭，使其防止氧化。
通过HE染色，可以使细胞核染成蓝色，血红蛋白染成红色，
从而在显微镜下清晰地观察细胞或组织的结构和特征。
这是一种常用的组织学染色方法。
HE染色方法与步骤吐血整理
HE染色方法与步骤吐血整理染色是一种常见的实验技术，用于观察和分析生物样品中的细胞或组织结构。
HE染色是一种常用的组织和细胞染色方法，它能够同时染色细胞核和细胞质，因此得名HE（hematoxylin and eosin）染色。
下面是HE染色的步骤：1.染色前的准备工作：-选择合适的组织样品，通常是已固定和包埋的组织切片。
-准备好需要使用的试剂和设备，包括显微镜玻片、切片刀、染色盘、醇和蜡解剂、染色液和显微镜。
-将切片从包埋蜡中去蜡，并通过浸泡在蜡解剂中来溶解蜡质。
2.组织切片的处理：-将组织切片通过水洗涤，去除蜡解剂和剩余的蜡质。
-将切片通过不同浓度的醇溶液进行脱水处理，使得切片逐渐转移到无水状态。
-将脱水处理后的切片通过透明质量更好的试剂（如亚硫酸氢钠或甘油）进行透明处理，以利于细胞的观察。
3.组织切片的染色：-首先进行碱性染色，即将切片浸泡在染色盘中的伊洛酮溶液中，伊洛酮是一种天然的染色物质，能够与细胞核结构中的DNA结合，使细胞核染色为暗蓝色。
-然后进行酸性染色，即将切片浸泡在染色盘中的苏木精溶液中，苏木精是一种带正电荷的染色物质，能够与细胞质结构中的负电荷部分结合，使细胞质染色为粉红色。
4.组织切片的脱水和封片：-将染色后的切片通过不同浓度的醇溶液进行脱水处理，使得切片从水状态逐渐转移到无水状态。
-将切片在醇溶液中固定一段时间，然后转移到透明的试剂（如苏木精和二甲苯混合溶液）中进行浸泡。
- 最后将切片取出，放在显微镜玻片上，滴入固定剂（如Canada Balsam）并加盖玻片，使切片固定在玻片上。
5.显微镜观察和分析：-使用显微镜观察染色后的组织切片，并通过不同增大倍数的镜头进行详细观察。
-根据观察到的细胞和组织结构，进行分析和研究，并将观察结果记录下来。
需要注意的是，HE染色是一种简单、快速且广泛应用的染色方法，但在不同类型的组织和细胞中可能会有不同的染色效果。
因此，在进行HE染色时，需要根据具体实验要求和样品的特点，进行相应的优化和调整。
he染色流程步骤
he染色流程步骤HE 染色啊，这可是病理实验中的一项重要技术呢！就好像是给组织细胞精心打扮一番，让它们能更好地展现在我们眼前。
首先得准备好切片，这就像是给模特准备好展示的舞台。
切片要切得薄而均匀，就像裁衣服一样，得有好手艺。
然后把切片放到烤片机上稍微烤一下，让它能稳稳地待在那儿，就像给它定个型。
接下来就是染色的关键步骤啦！先把切片放到苏木精溶液里泡一泡，这苏木精就像是神奇的魔法药水，能让细胞核变得蓝汪汪的，特别好看。
就好像给细胞核穿上了一件蓝色的漂亮衣服。
染完细胞核，就得让细胞质也美起来呀。
这时候就要用到伊红溶液啦，把切片放进去，细胞质就会染上那鲜艳的红色，哇，一下子就生动起来了，就像给细胞质化了个美美的妆。
染完色可还没完事儿呢！还得经过一系列的脱水、透明步骤。
就好像给化好妆的模特做最后的整理，让一切都更加完美。
脱水呢，就像是把多余的水分挤出去，让切片变得更清爽。
透明呢，则像是给切片罩上一层薄薄的面纱，让它更有朦胧美。
最后一步就是封片啦！把切片用盖玻片封起来，就像是给模特穿上了一件华丽的外套，保护好它。
你说这 HE 染色是不是很神奇呀？就这么一步步的，把那些原本我们肉眼很难看清的组织细胞变得清晰又漂亮。
它就像是一个小小的魔法，让我们能更好地了解身体内部的奥秘。
想想看，如果没有 HE 染色，我们怎么能那么清楚地看到细胞的结构和形态呢？怎么能对疾病做出准确的诊断呢？它可是病理诊断的重要手段之一呢！所以啊，一定要好好掌握 HE 染色的流程步骤，这可关系到我们对生命的探索和了解呢！可不能马虎哟！这就像是学一门手艺，得用心去学，才能学好。
你说是不是呢？你要是学会了这一手，那可就厉害了，感觉就像掌握了打开生命奥秘大门的钥匙呢！。
HE染色操作流程
HE染色操作流程HE染色（Hematoxylin and Eosin Staining）是一种常用的组织学染色方法，用于观察和诊断组织学切片。
HE染色通过染色剂HE染料的组合，使细胞核染成紫色，胞质染成粉红色，从而揭示组织的结构与形态。
HE染色的操作流程一般包括标本处理、脱水、透明化、分解蜡和染色五个步骤。
下面将详细介绍每个步骤的具体操作。
1.标本处理：首先，将切割好的组织标本放入10%中性缓冲福尔马林进行固定，一般固定时间为24-48小时。
固定后，将组织标本转移到70%乙醇中进行离子交换，使组织中的水分逐渐去除。
2.脱水：将固定的组织标本依次转移到浓度逐渐提高的乙醇溶液中，如80%乙醇、95%乙醇和绝对乙醇，每个乙醇浓度保持15-30分钟。
这个过程称为脱水，目的是逐渐去除组织中的水分，使组织内的乙醇浓度逐渐升高。
3.透明化：将脱水后的组织标本依次转移到透明剂中，如苯并三氮唑、次氯酸、二氯甲烷等。
每种透明剂浓度和时间要根据实验需求进行调整，这个步骤的目标是使组织中的乙醇慢慢溶解，透明度增强。
4.分解蜡：将透明后的组织标本转移到蜡纸中，加热到60-65°C的融点，使固定的组织标本逐渐融化。
蜡纸是由石蜡和植物油混合而成，有助于固定和保护组织的形态。
5.染色：将脱蜡的组织标本依次转移到碱性染料（如血红素）溶液中，染10-15分钟，然后洗净；接着将组织标本转移到酸性染料（如紫杉醇）溶液中，染5-10分钟，然后洗净。
紫杉醇染料使细胞核染色成紫色，血红素染料使细胞胞质染色成粉红色。
最后用安全过滤垫将组织标本封装在玻片上，去除水分，然后用覆盖玻片进行固定。
HE染色操作常规流程
HE染色操作常规流程1.实验前准备：1.1收集待染色的样本（如组织切片、细胞涂片等），确保样本保存完整和无污染。
1.2准备好所需的染色试剂：包括有水洗试剂（如去离子水）、染色试剂（如伊红、伊红酒精和亚甲蓝）、染色剂工作液（如伊红酒精和亚甲蓝溶液）等。
2.试片处理：2.1将组织切片或细胞涂片分别放入热腺管或玻璃片上。
2.2连续经过苯酚甲酸苯酯脱脂、乙醇梯度洗脱等步骤，去除样本中的脂肪和碱性物质，以减少后续染色的干扰。
2.3用去离子水洗涤样本，使其充分湿润，除去残存的试剂。
3.染色操作：3.1把处理好的样本放入腺管或玻璃片，倒入伊红酒精溶液中，用大约15-30分钟染色，使细胞和组织成为红色。
3.2轻轻用清水漂洗试品，去掉多余染色液。
3.3加入亚甲蓝液，使样本转为蓝色，使细胞核染色成深蓝色，时间为1-2分钟。
3.4再次用清水将试品漂洗干净。
4.固定和封片：4.1用醋酸纤维素或氯仿等溶剂固定染色后的试片，使试样中的颜色得以固定。
4.2在试片上加一滴封片剂（如封片胶）。
4.3将盖玻片缓慢地放在试片上，使封片剂均匀地覆盖整个样本。
4.4将封片剂封住，使细胞和组织样本能够在显微镜下观察。
5.显微镜观察：5.1将染色好的试片放在显微镜下，调整镜头，适当调节光线强度和聚焦位置，以便观察样本的细节。
5.2观察细胞和组织的形态、染色强度和细胞核的染色情况，并进行必要的记录和照片拍摄。
以上就是HE染色操作的常规流程。
通过此流程，我们可以对细胞和组织样本进行染色，从而得到对染色体分辨和鉴定的结果。
这一技术使我们能够更好地了解细胞和组织样本中的结构和功能，对于生物学和遗传学的研究具有重要意义。
病理片HE染色步骤
病理片HE染色步骤病理片HE染色步骤：烤片80度半小时(1)二甲苯（Ⅰ）5min(2)二甲苯（Ⅱ）5 min(3)二甲苯（III）5min(4)100%乙醇（Ⅰ）2min(5)90%乙醇（Ⅱ） 2 min(6)80%乙醇（III）2min(7)70%乙醇（IV）2 min(8) 流水冲洗5min(9) 苏木精液染色5 min(10) 流水稍洗去苏木精液1-3 s(11) 1%盐酸乙醇1-3 s(12)流水过洗至返蓝(13) 0.5%伊红液染色1-3 min(14) 蒸馏水稍洗1-2 s(15) 80%乙醇稍洗1-2 s(16) 95%乙醇（Ⅰ）2-3 s(17) 100%乙醇（Ⅱ）3-5 s(18) 二甲苯（Ⅰ）2 min(19) 二甲苯（Ⅱ）2 min(20) 二甲苯（Ⅲ）2 min(21) 中性树胶封固* 冷冻切片HE染色步骤：（1）冰冻切片固定10～30 s（2）水洗1～2 s（3）苏木精液染色（60℃）30～60 s（4）流水洗去苏木精液5～10 s（5）1%盐酸乙醇1～3 s（6）稍水洗1～2 s（7）促蓝液返蓝（8）流水冲洗15～30 s（9）0.5%曙红液染色30～60 s（10）蒸馏水洗1～2 s（11）80%乙醇1～2 s（12）95%乙醇1～2 s（13）无水乙醇1～2 s（14）石炭酸二甲苯2～3 s（15）二甲苯（Ⅰ）2～3 s（16）二甲苯（Ⅱ）2～3 s（17）中性树胶封固。
H-E染色评定标准：（1）切片完整，厚度4-6微米，厚薄均匀，无皱褶无刀痕；（2）染色核浆分明，红蓝适度，透明洁净，封裱美观。
he染色解读
HE染色，全称为苏木精-伊红染色（Hematoxylin and Eosin Staining），是生物学和医学领域中常用的一种细胞和组织染色方法。
它主要用于观察细胞核的形态结构、染色体的分布以及细胞质的成分。
HE染色方法简单、结果清晰，因此在病理学、细胞学和遗传学等领域得到了广泛的应用。
HE染色的原理是通过化学反应使细胞和组织中的特定成分着色，从而呈现出不同的颜色。
在HE染色过程中，首先使用苏木精（Hematoxylin）对细胞核进行染色，使其呈现出深蓝色或紫蓝色；然后使用伊红（Eosin）对细胞质进行染色，使其呈现出粉红色或红色。
通过对比两种颜色的分布，可以清晰地观察到细胞核和细胞质的结构。
HE染色的主要步骤如下：1. 切片制备：将组织切成薄片，通常厚度为4-10微米。
切片的质量直接影响到染色结果的准确性和清晰度。
2. 固定：将切片放入固定液中，使细胞内的蛋白质凝固，防止后续染色过程中细胞结构的破坏。
3. 脱水：将固定后的切片依次放入不同浓度的酒精溶液中，使水分逐渐减少，有利于染料的渗透。
4. 渗透：将切片放入含有苏木精的染液中，使染料渗透到细胞内。
此时，细胞核内的DNA 与苏木精结合，呈现出深蓝色或紫蓝色。
5. 清洗：将切片从染液中取出，用清水冲洗，去除多余的染料。
6. 分化：将切片放入含有酸性溶液的染液中，使细胞核内的苏木精与酸性溶液反应，呈现出不同的深浅程度。
这一步骤有助于区分细胞核的不同区域。
7. 清洗：将切片从染液中取出，用清水冲洗，去除多余的酸性溶液。
8. 脱水：将切片依次放入不同浓度的酒精溶液中，使水分逐渐减少，有利于染料的渗透。
9. 渗透：将切片放入含有伊红的染液中，使染料渗透到细胞质中。
此时，细胞质内的蛋白质与伊红结合，呈现出粉红色或红色。
10. 清洗：将切片从染液中取出，用清水冲洗，去除多余的染料。
11. 透明：将切片放入透明剂中，使切片透明化，便于观察。
12. 封片：将透明后的切片放在载玻片上，用封片胶封住，避免水分蒸发和污染。
HE染色试验技术及注意事项
HE染色试验技术及注意事项HE染色是一种常用的细胞和组织染色技术，被广泛应用于组织学、病理学以及生物学研究中。
本文将介绍HE染色试验的技术步骤和注意事项。
1.取得组织标本：首先需要取得待染色的组织标本。
一般情况下，可选择人体组织或动物组织。
组织标本应尽可能新鲜，并采用适当的方法进行保存。
2.固定组织标本：将组织标本固定在染色盘或载玻片上，以便后续的染色过程。
一般可选择使用福尔马林等化学物质进行固定，固定时间根据组织类型和标本大小而有所差异。
3.脱水：将固定的组织标本逐渐脱水，以去除组织中的水分。
这一步骤可以通过使用乙醇或异丙醇等溶剂进行。
4.渗透：在脱水之后，组织标本需要通过将其浸入合适的介质中进行渗透。
一般可使用有机溶剂，如丙酮或二甲苯。
5.制片：将渗透的组织放置在试管或盛有液体的容器中，然后将其切割成较薄的切片。
切片的厚度一般为3-5微米。
切片可以使用组织切割机或手工切片进行。
6.上染剂：将切片放入HE染色试剂中，浸泡一定时间以完成染色。
HE染色试剂主要由酸性染料和碱性染料组成，其中酸性染料为苏木精，碱性染料为伊红。
7.清洗：用去离子水或蒸馏水轻轻冲洗染色后的切片，以清除未结合的染色剂。
8.脱水：将染色后的切片通过逐渐浸入不同浓度的醇溶液中进行脱水，去除多余的水分。
9.透明化：使用透明介质，如柳酮或醋酸酯，使切片透明并保护其结构。
10.固定封片：将透明的切片放置在载玻片上，涂上适当的封片胶固定。
然后将载玻片放至烘箱中，进行封片胶的固化。
1.样本的存放：取得的组织标本必须及时固定和保存，以避免样本的腐败和变形。
2.染色时间控制：染色时间的长短会影响到最终染色结果的清晰度。
过长或过短的染色时间都会导致结果模糊不清。
3.清洗彻底：在清洗环节，要确保切片上的染色剂完全被清洗干净，以避免染色剂残留影响结果。
4.切片的薄度：切片的厚度直接影响到染色结果的清晰度和质量，因此需要掌握好切片的技巧和标本的处理。
病理HE染色流程
病理HE染色流程HE染色流程主要分为固定、脱水、清理、浸透、染色、脱色、洗涤和封片几个步骤。
下面将详细介绍每个步骤的操作。
1.固定：将取得的组织标本放入含有10%中性缓冲福尔马林中固定。
固定过程中，福尔马林可与细胞内的蛋白质发生共价结合，固定细胞组织。
2.脱水：将已固定的组织标本放入连续浓度逐渐增高的乙醇溶液（通常为70%、85%和95%乙醇）中脱水，以去除组织中的水分。
每种乙醇中的时间一般为1-2小时。
3.清理：将乙醇脱水后的组织标本放入清理剂（如苯、半乳索甘和二甲苯等）中浸泡，以溶解并除去脂类物质。
清理的时间一般为2个小时。
4.浸透：将清理后的组织标本放入浸透剂（如苯乳、半乳索甘和二甲苯等）中浸泡。
浸透剂可与标本中的清理剂互溶，并在选择性的清理脂质的同时，逐渐溶解脱水的细胞质内部结构。
浸透的时间一般为2个小时。
5.染色：将浸透后的组织标本放入酸性染料和碱性染料的混合物中浸泡。
酸性染料主要染色细胞核，如黑苦味酸铁染料；碱性染料主要染色胞质，如伊红染料。
染色的时间一般为5-15分钟。
6.脱色：将染色后的组织标本放入脱色剂（如乙醇和苯）中浸泡，以去除多余的染色剂。
脱色的时间一般为1-2分钟。
7.洗涤：将脱色后的组织标本用水流洗涤，以除去余留在标本上的脱色剂和染色剂。
8.封片：将洗涤后的组织标本放入玻璃干拭片中，用透明石蜡和玻璃片封住，以保护标本并便于观察。
以上是病理HE染色的主要步骤和操作方法。
HE染色可以清晰地显示出细胞核和胞浆的形态结构，帮助病理学家对组织样本进行诊断和评估。
虽然HE染色流程简单，但操作时需要细心和耐心，以确保染色结果的准确性和可靠性。
HE染色实验步骤
HE染色实验步骤HE染色是一种常用的细胞染色方法，用于染色细胞核和胞质。
以下是HE染色实验的详细步骤：1.组织样本的固定：将组织样本（如组织切片）固定在玻片上，以使其保持形态和结构。
常见的固定剂有甲醛、乙醇等。
将切片置于固定剂中浸泡一段时间，通常为24小时。
2.脱水：将固定的组织样本进行脱水处理，以去除其中的水分。
脱水过程常采用不同浓度的乙醇溶液，从低浓度到高浓度逐渐浸泡，通常为70%乙醇、80%乙醇、90%乙醇和绝对乙醇。
每个乙醇浓度的浸泡时间可以根据需要调整，但通常为2-3分钟。
3.渗透：为了使切片更容易与染料接触并吸收，需要对其进行渗透处理。
常见的渗透剂是亚麻酸，通常在乙醇浓度为90%时进行处理。
将切片放入亚麻酸中浸泡2-3分钟。
4.包埋：将渗透处理后的组织切片逐步置于熔蜡中，使其被包裹在蜡中。
可用化学品如戊二醛蜡、乙蜡等作为包埋材料。
首先，将切片置于低熔点蜡中，如55-60℃的乙蜡，浸泡30分钟至1小时。
然后，将切片置于高熔点蜡中，如60-65℃的戊二醛蜡，浸泡1小时至数小时。
5.包块切割：将包埋的组织块放在切片机中，用刀片切成薄片。
通常切片厚度为4-5μm。
切好的切片将浮在热水中，并从切片机上取出。
6.切片贴片：使用刷子将切片轻轻移至玻片上。
刷子应先浸泡在水中，然后轻轻刷过切片以避免切片损坏。
7.焙烧：将装有切片的玻片放在干燥器中，或将其放在烘箱中进行干燥。
干燥温度和时间可根据需要进行调整，通常为60-70℃，2-3小时。
8. 染色：使用Harris液体染料进行染色。
HE染色中的染料包括酸性染料苏丹Ⅰ（hematoxylin）和碱性染料伊红（eosin），也称为碱性苏丹染料。
将组织样本浸入苏丹Ⅰ染料中，时间为2-5分钟。
然后将其转移到酸性水中漂洗30秒至1分钟，以去除多余的苏丹Ⅰ染料。
接下来，将样本浸入伊红染料中，时间为1-2分钟。
最后，将样本漂洗并在流水下冲洗。
9.脱色：如果染色后的切片颜色过浓，需要进行脱色处理。
he染色步骤HE实验步骤
he染色步骤 HE实验步骤动物病理切片小结[样本处理]动物麻醉后，开胸，暴露心脏，头皮针插入左心室尖，打开37?生理盐水输液装置，从右心耳下沿剪开右心房，灌洗至流出的生理盐水无血(20min)，换4%多聚甲醛固定液灌注(约5min)[固定]4%多聚甲醛固定。
[石蜡切片]取样从固定中取出待切组织，用手术刀切成2mm厚度的小样，装入脱水小盒中，铅笔标号纸条同放入小盒后流水洗30min，蒸馏水浸洗处理Mice:脱水50%乙醇 2-3h170%乙醇 1-2h80%乙醇 1h95%乙醇 2h(1h+1h)100%乙醇 2h(1h+1h)透明二甲苯 35min+35min浸蜡 1h+1h+1h (62?蜡)[HE染色]脱蜡二甲苯? 15min二甲苯? 15min二甲苯:无水乙醇(1:1) 2min无水乙醇? 2min无水乙醇? 2min95%乙醇 2min85%乙醇 2min70%乙醇 2min50%乙醇 2min蒸馏水 5min(如果是DAB染色要抗原修复)HE染色苏木素 6-8min (时间可以延长，现在10-30min)冲洗 1min(反向将载玻片反向冲洗，注意不要脱片)2含1%盐酸的乙醇进行分色(用75%乙醇配)2-3s动作要快氨水反蓝 >10min伊红 10s冲洗固定脱水95%乙醇 2min100%乙醇? 2min100%乙醇? 2min二甲苯? 2min二甲苯? 2min 树胶封片组织浸蜡-常规石蜡切片制作组织经过透明剂的完全透明后，被移放于65?左右熔化的石蜡中，于65?的电热恒温箱中浸渍的过程称为浸蜡。
组织在脱水时，组织中的脂类和类脂等物质在脱水剂的作用下被溶解掉，留下了许多腔隙，许多管腔组织和血管，也有许多腔隙，这些都严重地影响了切片。
组织浸蜡时，由于诱导剂(二甲苯)的作用，石蜡进入到组织的各个角落，并在各个角落中保存下来。
当石蜡包埋后冷却时，这浸入到里3面的石蜡便可起到支撑的作用，而且使组织不致于变形，塌陷等现象，使切片能完整的切出，便于镜下观察。
he染色方法及步骤
he染色方法及步骤HE 染色啊，这可是病理实验里常用的染色方法呢！它就像是给细胞和组织化了个美美的妆，让我们能更清楚地看清它们的模样。
首先呢，得准备好切片。
这切片就像是一张等待上色的画布。
然后把切片放进二甲苯里，让它好好泡个澡，把上面的脏东西都洗掉。
接下来就是染色的关键时刻啦！把切片放进苏木精溶液里，这苏木精就像是神奇的魔法药水，能把细胞核染得蓝蓝的，就像给细胞核戴上了一顶蓝色的小帽子。
染完之后，再用水冲洗一下，把多余的苏木精冲掉。
然后呢，把切片放进盐酸酒精里分化一下，让细胞核的颜色更加清晰、分明。
再用水冲洗干净。
这时候，该伊红上场啦！伊红就像是给细胞穿上了一件红色的外衣，让细胞质变得红红的。
把切片放进伊红溶液里泡一泡，然后再冲洗干净。
经过这么一番折腾，切片就像是化好了妆的美人，变得格外动人啦！你想想啊，这就好像是给细胞举办了一场盛大的化妆舞会。
细胞核穿着蓝色的礼服，细胞质穿着红色的裙子，在显微镜下翩翩起舞。
染完色后，还要把切片进行脱水、透明。
就像是给化好妆的美人再喷上一层定妆喷雾，让妆容更加持久。
最后呢，用中性树胶封片，把这美丽的画面永远地保存下来。
HE 染色方法虽然看起来步骤挺多，但只要我们认真细心地去做，就一定能染出漂亮的切片。
这就像是我们做一件事情，只要有耐心，肯下功夫，就一定能做好。
而且啊，HE 染色对于病理诊断来说可是非常重要的呢！医生们通过观察染色后的切片，就能判断出细胞有没有病变，病情严不严重。
所以说呀，HE 染色可真是个神奇的技术呢！它让我们能更深入地了解细胞的世界，为医学研究和临床诊断提供了重要的帮助。
你说，这是不是很厉害呢？。
病理HE染色流程
HE染色流程以及染色过程中的一些注意事项：一取材和固定取材后经固定24小时（4%PA灌注取材的后固定6~8小时）以后，流水冲洗24小时，置于70%~80%乙醇中，可长期保存。
二脱水和包埋1、95%A LC（二道）Ⅰ2~4hⅡ 2h2、无水AL C（二道）Ⅰ 1.5hⅡ1h3、二甲苯+无水乙醇（1：1）20min4、二甲苯（二道）Ⅰ 10m in（注：脱水透明esp.透明时间可适当延长）Ⅱ 10m in5、浸软蜡（50~52℃）（二道）Ⅰ 30minⅡ 1h6、浸硬蜡（58~60℃）（二道）Ⅰ30minⅡ 30m in7、包埋：注意温度、切面。
三切片修、切、展、贴、烤（烤片55~60℃） 3~10h四HE染色1、二甲苯脱蜡五道，每道5~10分钟2、无水乙醇Ⅰ5minⅡ 5min3、95%乙醇Ⅰ 5minⅡ 5m n4、80%乙醇5min5、70%乙醇 5m in6、D．W．3~5mi n7、H arris苏木素液5min（冬天可适当延长，eg.20mi n）8、水洗9、0.5%盐酸酒精分色 3~10secon ds，镜下观察10、水洗蓝化 15~30min（注意换水）11、70%乙醇5min12、80%乙醇5min13、伊红液（95%乙醇溶液）3~30s econd s14、95%乙醇Ⅰ 1m inⅡ5min15、无水乙醇Ⅰ5minⅡ 5mi n16、二甲苯+乙醇（1：1） 5mi n17、二甲苯Ⅰ 5minⅡ 5m inⅢ5min18、中性树胶封片。
HE染色注意事项：1. 染色时调节pH值很重要。
如果组织块在福尔马林中固定时间长，组织酸化而影响细胞核着色。
he染色步骤及注意事项
he染色步骤及注意事项一、组织固定1.组织取材后应立即进行固定，以防止组织自溶。
常用的固定剂有甲醛、乙醇等。
2.固定时应将组织放入适当的容器中，加入足够的固定剂，确保组织充分浸泡。
3.固定时间根据组织类型和大小而定，一般为数小时至数十小时。
二、切片制备1.固定后的组织需进行脱水、透明和浸蜡等处理，然后进行切片。
2.切片厚度应根据组织类型和染色需求而定，一般为3-5微米。
3.切片应平整、均匀，无皱褶、气泡等缺陷。
三、pH值调节1.在进行HE染色前，需将切片用pH值约为7.2-7.4的磷酸盐缓冲液（PBS）冲洗。
2.pH值调节有助于染色过程中组织的着色和分色。
四、控制分色时间1.HE染色过程中，分色时间对染色效果影响较大。
应严格控制分色时间，确保切片染色均匀、清晰。
2.分色时间过长可能导致切片颜色过深，过短则可能使切片颜色过浅。
五、彻底脱去酒精1.在染色过程中需使用酒精进行脱水，因此染色结束后需用无水乙醇彻底脱去切片中的酒精。
2.脱去酒精有助于提高切片的透明度和染色效果。
六、保持切片湿润1.在整个染色过程中，应保持切片湿润，以防止切片干燥和收缩。
2.可以使用甘油等保湿剂来保持切片湿润。
七、封片注意事项1.染色结束后，需用中性树胶等封片剂将切片封固。
2.封片时应避免气泡和溢胶，以保证切片平整和美观。
八、洗涤步骤1.在染色过程中，需用流水将切片上的染液冲洗干净。
2.洗涤时应彻底，以防止残留染液对切片产生影响。
九、避免空气暴露1.在染色过程中，应尽量避免切片暴露在空气中，以防止氧化和褪色。
2.可以使用湿盒或塑料薄膜等将切片包裹，以减少空气接触。
十、保持切片的湿润1.在储存和运输过程中，应保持切片湿润，以防止其干燥和收缩。
2.可以使用甘油等保湿剂来保持切片湿润。
同时，应避免阳光直射和高温环境，以防止切片褪色和变质。
HE染色操作常规流程
HE染色操作常规流程
切好的片子应在60~70℃左右的烤箱中烘烤30分钟以上才能进行染色。
HE染色手工程序：
脱蜡
1、二甲苯Ⅰ（AR）5分钟
2、二甲苯Ⅱ（AR）5分钟
3、100%酒精Ⅰ（AR、无水乙醇）1分钟
4、100%酒精Ⅱ（AR、无水乙醇）1分钟
5、95%酒精（工业酒精或医用酒精）1分钟
6、80%酒精（工业酒精或医用酒精）1分钟
7、自来水浸洗1分钟
以上3~7称为进水过程。
染色
1、苏木素染液6分钟
2、水冼1分钟
3、0.5-1%盐酸酒精分化片刻（上下三次颜色由蓝变红）
4、自来水冲冼15分钟以上
（然后95%酒精片刻，主要是避免所带的水份稀释以下的伊红酒精，此步可免）
5、1%伊红酒精浸染1~2分钟
6、水冼1分钟
脱水、透明、封固
95%酒精Ⅰ1分钟
95%酒精Ⅱ1分钟
100%酒精Ⅰ1分钟
100%酒精Ⅱ1分钟
石炭酸二甲苯(1:3) 10秒钟
以上称为脱水。
二甲苯Ⅰ透明1分钟
取出后用中性树胶（上海产，预先用二甲苯溶解，粘稠度适中即可）封固。
染色结果：
核：蓝黑色
胞浆：不同程度的粉红色
肌纤维：较深的粉红色
胶元纤维：淡红色
红细胞：桔红色。
HE染色的步骤及方法
HE染色的步骤及方法HE染色（hematoxylin and eosin staining）是一种广泛应用于组织学研究与临床病理学中的常规染色方法，用于显示组织和细胞的形态结构、特征和组织的组织学构造。
HE染色的主要步骤包括固定、脱水、透明、浸染、洗涤、脱色、洗涤、著色、酸洗、洗涤和封片等。
下面将详细介绍每个步骤的具体方法。
1.固定：将待染的组织标本放入含有4%至10%的缓冲醛（如10%的中性缓冲醛）中固定。
固定的时间一般为24至48小时，具体时间根据组织的大小和种类而定。
2.脱水：在固定后，将组织标本转移到带有不同浓度的乙醇溶液中进行脱水。
脱水的目的是逐渐将水分从组织中溶解掉，以便更好地进行后续处理。
常用的乙醇浓度为70%、80%、95%、绝对乙醇和绝对乙醇。
3.透明：将脱水的组织标本转移到透明剂中，如苯酚、甘油等。
透明的目的是去除残留的乙醇，并将标本与石蜡相容，以便进行后续处理。
4.浸染：将透明的组织标本转移到硬化的石蜡中，通过加热使其温度达到融点，使组织与石蜡充分浸透。
通常情况下，标本需要浸染多次以确保充分浸透。
5.洗涤：将浸染好的组织放入清洁的容器中，用去离子水或缓冲液轻轻洗涤，以去除未浸透的石蜡。
6. 脱色：将洗净的组织标本放入xylene或但醇溶液中进行脱色，以去除标本中的石蜡。
脱色时间视标本的大小和种类而定，通常为30分钟至1小时。
7.再洗：将脱色的组织标本用去离子水或缓冲液轻轻洗涤，以去除残留的脱色剂。
8. 著色：将洗净的组织标本置于染色剂中进行著色。
HE染色中，常用的染色剂为血红和嗜酸性染料安伊汀（Eosin）。
组织标本一般需在血红染色剂中浸泡2至5分钟，然后脱水，再在安伊汀染色剂中浸泡2至5分钟。
也可根据需要调整具体的染色时间。
9.酸洗：将著色好的组织标本用弱酸性缓冲液进行酸洗，以去除过量的染色剂。
酸洗时间一般为几秒钟至几分钟。
10.再次洗涤：将经酸洗的组织标本用去离子水或缓冲液轻轻洗涤，以去除残留的酸洗液。
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病理片
HE染色步骤：
烤片80度半小时
(1)二甲苯（Ⅰ）5min
(2)二甲苯（Ⅱ）5 min
(3)二甲苯（III）5min
(4)100%乙醇（Ⅰ）2min
(5)90%乙醇（Ⅱ） 2 min
(6)80%乙醇（III）2min
(7)70%乙醇（IV）2 min
(8) 流水冲洗5min
(9) 苏木精液染色5 min
(10) 流水稍洗去苏木精液1-3 s
(11) 1%盐酸乙醇1-3 s
(12)流水过洗至返蓝
(13) 0.5%伊红液染色1-3 min
(14) 蒸馏水稍洗1-2 s
(15) 80%乙醇稍洗1-2 s
(16) 95%乙醇（Ⅰ）2-3 s
(17) 100%乙醇（Ⅱ）3-5 s
(18) 二甲苯（Ⅰ）2 min
(19) 二甲苯（Ⅱ）2 min
(20) 二甲苯（Ⅲ）2 min
(21) 中性树胶封固
* 冷冻切片HE染色步骤：
（1）冰冻切片固定10～30 s
（2）水洗1～2 s
（3）苏木精液染色（60℃）30～60 s
（4）流水洗去苏木精液5～10 s
（5）1%盐酸乙醇1～3 s
（6）稍水洗1～2 s
（7）促蓝液返蓝
（8）流水冲洗15～30 s
（9）0.5%曙红液染色30～60 s
（10）蒸馏水洗1～2 s
（11）80%乙醇1～2 s
（12）95%乙醇1～2 s
（13）无水乙醇1～2 s
（14）石炭酸二甲苯2～3 s
（15）二甲苯（Ⅰ）2～3 s
（16）二甲苯（Ⅱ）2～3 s
（17）中性树胶封固。
H-E染色评定标准：
（1）切片完整，厚度4-6微米，厚薄均匀，无皱褶无刀痕；（2）染色核浆分明，红蓝适度，透明洁净，封裱美观。