人Human白细胞介素-2IL-2ELISA检测试剂盒使用方法
rat-IL-2 中文
白细胞介素2酶联免疫检测试剂盒定量测定酶联免疫吸附试验使用说明书本试剂盒只作为实验室研究使用，不得作为临床诊断的依据产品编号：50R-E.1109检测种属：大鼠检测介质：血清-血浆-组织匀浆-细胞培养液引言使用前请仔细阅读使用说明书。
试验原理此白细胞介素2检测试剂盒是竞争性抑制法酶联免疫吸附实验。
使用纯化的抗体包被微孔板，使其充分吸附在微孔壁上，制成固相载体。
酶联亲和物中含有酶标记的抗原。
试验过程中加入待测样本和酶联亲和物与包被在微孔上的抗体一起温育反应使其充分结合在微孔壁上，共同竞争包被在微孔上的固相抗体，形成标记抗原复合物。
反应过后冲洗掉未结合的部分，再加入底物反应，底物在酶的作用下变为蓝色，并在酸的作用下转化为最终的黄色。
通过读取吸光度值来绘制出标准曲线，并在标准曲线上反算出待测样本的浓度。
试剂盒组成需要但未提供的试剂和器材贮藏条件1、试剂盒贮存在2-8℃，包被微孔板干燥保存。
2、试剂有效期内保持稳定，显色液应为无色。
如果发色或变蓝应及时更换。
警告和使用1、在试验之前要将试剂盒在室温下平衡至少30分钟。
2、不要重复使用手中的吸头和试管，否则会引起交叉污染，导致试验失败。
3、该试剂盒内不包含有传染性试剂。
4、不要混用不同批号的试剂和包被微孔板。
5、试验过程中所有试剂和待测样本应充分混合。
6、包被微孔板应干燥保存，避免受潮。
7、如有剩余试剂请放置2-8℃保存。
8、试验过程要严格按照说明书操作，先后顺序不得颠倒。
9、如果样本量较大应注意加样时间，避免加样过慢或间隔时间过长。
10、使用和贮存底物Ⅱ时应注意避光。
11、试验期间室内温度应始终保持在18-28℃。
并保持室内清洁，无粉尘。
12、避免直接接触试剂盒内的液体，一旦接触请尽快用水清洗。
13、在试验过程中不要吸烟、使用化妆品和吃喝。
这将对操作者的健康及试验结果造成影响。
14、不要用嘴吸取试剂瓶内的试剂。
样本的采集和制备1、[血清]操作过程中避免受到刺激，使用非焦化和不含有内毒素的试管，静脉穿刺收集血液并迅速离心，分离出血清[1000×g离心20分钟]。
人(Human)和肽素(copeptin)ELISA试剂盒说明书
本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断人（Human）和肽素（copeptin）ELISA检测试剂盒使用说明书检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。
往预先包被和肽素（copeptin）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。
用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的和肽素（copeptin）呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法1.血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2.血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。
3000转离心30分钟取上清。
3.细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4.组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。
3000转离心10分钟取上清。
5.保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品1.酶标仪（450nm）2.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3.37℃恒温箱操作注意事项1.试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。
从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2.实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。
3.浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释5倍，最终结果乘以5才是样本实际浓度。
4.严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5.所有液体组分使用前充分摇匀。
试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无标准品0.3mL*6管0.3mL*6管无样本稀释液6mL3mL无检测抗体-HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无终止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无注：标准品（S0-S5）浓度依次为：0、1.5、3、6、12、24pmol/L试剂的准备20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
达科为IL-2 ELISA试剂盒说明书
6. 实验操作中请使用一次性的吸头，避免交叉污染。 7. 使用前检查试剂盒内各种试剂；试剂稀释、加样和中止反应
充分混匀或者摇匀对实验结果尤为重要，最好使用低速频 率振荡器或者反应过程中每 15 分钟手工摇匀一次。 8. 实验板孔加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应孔的孵育 时间一致。 9. 使用洁净的塑料容器盛装洗涤液。
即用型
即用型
*：96/48 Tests
4、 需要实验者自行准备的试剂与仪器：
1． 酶标仪（建议参考仪器使用说明提前预热） 2． 微量加液器及吸头：P10，P50，P100，P200，P1000 3． 蒸馏水或去离子水 4． 全新滤纸 5． 旋涡振荡器和磁力搅拌器 6． 37℃温箱
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5、 注意事项：
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10. 洗涤过程中反应孔中残留的洗涤液应在滤纸上充分拍干，滤 纸上看不到水印。勿将滤纸直接放入反应孔中吸水。
11. TMB 对光敏感，避免长时间暴露于光下，避免金属接触影 响结果。有毒，避免用手接触！准备使用的 TMB 若变为蓝 色，表明 TMB 已经污染，请丢弃。请在终止反应后 10 分 钟内读取 OD 值。
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8、结果分析：
1. 有两种设定空白对照的方案： 1) 将 TMB 空白显色孔设为对照。所有的标准品和样品的 吸光值减去空白孔的吸光值后，在坐标纸上画出曲线，以吸 光值作为纵坐标，以浓度作为横坐标。 2) 将零孔设为对照。得到的数据可以直接在坐标纸上画出 曲线。
2. 根据样品的吸光值在坐标上找出对应的浓度。用户也可以使 用各种应用软件来计算。若样品 OD 值高于标准曲线上限，应 适当稀释后重测，计算浓度时应乘以稀释倍数。
人IL-1β ELISA kit说明书
标本收集: 1. 收集血液的试管应为无热原和内毒素试管。 2. 血浆抗凝剂推荐EDTA。 3. 避免溶血，高血脂标本。 4. 标本应清澈透明，悬浮物应离心去除。
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5. 标本收集后若不及时检测，请按一次用量分装，冻存于－20℃，避免反复冻融。 6. 可根据实际情况，将标本做适当倍数稀释(建议做预实验，以确定稀释倍数) 。
60分钟。 5. 洗板4次。 6. 除空白孔外，加入酶结合物工作液(100ul/孔)。用封板胶纸封住反应孔，37℃孵箱孵育30分
钟。 7. 洗板4次。 8. 加入显色剂100ul/孔，避光37℃孵箱孵育10--15分钟。 9. 加入终止液100ul/孔,混匀后即刻测量OD450值(5分钟内)。
结果判断: 1. 每个标准品和标本的OD值应减去零孔的OD值。 2. 手工绘制标准曲线。以标准品浓度作横坐标，OD值作纵坐标，以平滑线连接各标准品的坐标
灵敏度，特异性和重复性: 1. 灵敏度：最小可测人IL-1β达2pg/ml. 2. 特异性：不与IL－2,3,4,5,6,8,10,12,IFN,TNF及sTNF-RII等反应。 3. 重复性：板内，板间变异系数均<10%.
白细胞介素(IL-2)检测及临床意义
白细胞介素（IL-2）检测及临床意义
一、概述
白细胞介素-2 (IL-2)又称T细胞生长因子。
主要由T细胞产生。
是在淋巴细胞增殖分化过程中重要的细胞生长因子，生理作用有刺激T细胞生长、诱导细胞毒作用和对B细胞的生长及分化均有一定的促进作用等
二、检测方法
IL-2主要检测方法为生物素亲合素系统的双抗体夹心ELISA 法。
三、临床意义
1、IL-2可提高人体对病毒、细菌、真菌和原虫等感染的免疫应答，促进细胞毒性T淋巴细胞(CTL)、自然杀伤细胞(NK 细胞)、淋巴因子激活的杀伤细胞(LAK 细胞)和肿瘤浸润性淋巴细胞(TIL)增殖，并使其杀伤活性增强，进而清除体内肿瘤细胞和病毒感染细胞等。
2、IL-2 还可以增加抗体和干扰素 (IFN)等细胞因子的分泌，在机体免疫应答中具有非常重要的作用，是一种免疫增强剂，具有抗病毒、抗肿瘤和提高机体免疫功能等作用。
3、IL-2的表达异常与临床多种疾病有密切关系，尽管外周血、尿液中IL-2 水平，或激活淋巴细胞上清液中IL-2水平的异常没有疾病特异性，但是可作为相关疾病的辅助诊断、预后及疗效观察提供可靠数据。
4、IL-2升高：肿瘤、心血管病、肝病等疾病时均可使 IL-2 水平升高，在器官移植后早期排斥反应时也出现IL-2表达升高。
5、IL-2降低：在多种原发性免疫缺陷病和继发性免疫缺陷病时均可伴有 IL-2 水平降低，如 SLE、麻风和艾滋病等。
biosharp 人IL-2 ELISA 试剂盒使用说明书
一、产品简介 ������������������� ���������二、检测原理 ������������������� ���������三、试剂盒组分 ������������������� ���������四、储存条件 ������������������ ����������五、注意事项 ������������������ ����������六、其它实验材料 ������������������� ��������七、使用说明 �������������������� �������7.1、样品收集、处理及保存方法 �������������������� � 7.2、试剂准备 �������������������� ������� 7.3、操作步骤 �������������������� ������� 7.4、操作流程图 �������������������� ������� 7.5、操作要点提示 �������������������� ���7.6、结果判断 �������������������� �������八、常见问题分析及解决 ���������� ������������� 2 2 3 3 3 4 4 4 4 5 6 6 6 8目 录全国统一热线：400-600-4213 Elisa试剂盒使用说明书本试剂盒用于定量检测人血清、血浆或细胞培养上清液等样本中天然和重组IL-2浓度。
使用前请仔细阅读说明书并检查试剂组分，如有任何疑问请与北京兰杰柯科技有限公司或经销商联系，公司将为您提供强有力的技术支持。
仅供研究，不用于临床诊断。
二、检测原理本实验采用双抗体夹心ELISA，用抗人IL-2单克隆抗体预包被酶标板，加入适度稀释的样本和标准品，其中IL-2会与其单抗结合，洗去游离成分；加入生物素化的抗人IL-2抗体，抗人IL-2抗体与结合在单抗上的人IL-2结合而形成免疫复合物，洗去游离的成分；加入辣根过氧化物酶标记的亲合素，生物素与亲合素特异性结合，洗去未结合的酶结合物；加入显色剂，若反应孔中有IL-2，辣根过氧化物酶会使无色的显色剂现蓝色；加终止液变黄。
人白介素IL试剂盒的操作说明书
人白介素I L试剂盒的操作说明书Document serial number【UU89WT-UU98YT-UU8CB-UUUT-UUT108】人白介素6（IL-6）试剂盒的操作说明书人白介素6（IL-6）试剂盒的操作说明书本试剂盒仅供研究使用。
检测范围：96T0-8ng/L使用目的：本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中白介素6（IL-6）含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人白介素6（IL-6）水平。
用纯化的人白介素6（IL-6）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入白介素6（IL-6），再与HRP标记的白介素6（IL-6）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在 HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的白介素6（IL-6）呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人白介素6（IL-6）浓度。
试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品（16ng/L）0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
8ng/L5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液4ng/L4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液2ng/L3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液1ng/L2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液0.5ng/L1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。
用ELISA试剂盒检测人白介素1β IL-1b 方法步骤
双抗体夹心ELISA法检测样本中IL-1β的浓度检测原理:本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法检测样本中IL-1β的浓度。
IL-1β捕获抗体已预包被于酶标板上，当加入标本或参考品时，其中的IL-1β会与捕获抗体结合，其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。
当加入生物素化的抗人IL-1β抗体后，抗人IL-1β抗体与IL-1β接合，形成夹心的免疫复合物，其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。
随后加入辣根过氧化物酶标记的亲合素。
生物素与亲合素特异性结合，亲合素连接的酶就会与夹心的免疫复合物连接起来；其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。
最后加入显色剂，若样本中存在IL-1β将会形成免疫复合物，辣根过氧化物酶会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质，在加入终止液后呈黄色。
通过酶标仪检测，读其450nm处的OD值，IL-1β浓度与OD450值之间呈正比，通过参考品绘制标准曲线，对照未知样本中OD值，即可算出标本中IL-1β浓度。
标本收集:1.标本的收集请按下列流程进行操作：A.细胞上清标本离心去除悬浮物后即可；B.血清标本应是自然凝固后，取上清，避免在冰箱中凝固血液；C.血浆标本，推荐用EDTA的方法收集若待测样本不能及时检测；D.标本收集后请分装，冻存于－20℃，避免反复冻融。
2.血清标本不应添加任何防腐剂或抗凝剂；3.标本应清澈透明，检测前样本中如有悬浮物应通过离心去除；4.请勿使用溶血，高血脂或污染的标本检测，否则结果将不准确。
注：正常人血清或血浆样本请用标本缓冲液做倍比稀释后再检测。
注意事项:1.试剂盒请保存在2～8℃。
2.浓缩洗涤液因在低温下可能有结晶，请水浴加热使结晶完全溶解后再配制工作液。
3.若标准品复溶后，请在三天内用完。
4.底物请勿接触氧化剂和金属。
5.加样时，请及时更换枪头，避免交叉污染。
6.严禁混用不同批号的试剂盒组份。
7.充分混匀对保证反应结果的准性很重要，在加液后请轻轻叩击边缘以保证混匀。
8.室温反应，请严格控制在25～28℃。
IL-2,白介素2,大鼠白介素2ELISA试剂盒kit说明书
IL-2,白介素2,大鼠白介素2ELISA试剂盒kit说明书ELISA常用的方法：双抗体夹心法、间接法、竞争法以及BAS-ELISA等。
IL-2,白介素2,大鼠白介素2ELISA试剂盒kit说明书培养细胞检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。
通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂，以使细胞破坏并放出细胞内成份。
离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
适应：科研实验保存温度: 2~8°规格：96T/48T96T指可以做94个标本，2个标准对照48T指可以做47个标本，1个标准对照96T-84个样本主要组织相容性复合体Ⅰ类48T-42个样本引起ELISA 试剂盒测定错误结果的原因主要有：①标本因素；②试剂因素；③操作因素。
引起ELISA 试剂盒测定错误结果的原因主要有：①标本因素；②试剂因素；③操作因素。
重复性：＜15% ，规格： 96T/48T ，标本：血清、血浆、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等。
白介素2检测动物种类：人、猴、大鼠、小鼠、豚鼠、黄金地鼠、兔、猪、犬、牛、绵羊、山羊、鹅、鸡、虾、河蟹、鲈鱼、猴,植物类,鸟类等检测标本类型：血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液、唾液、关节滑液、肺泡灌洗液等检测指标：趋化因子、生长因子、抑制因子、炎症因子、营养因子、脂肪因子、血管生成因子、动脉粥样硬化因子、基质金属蛋白酶等实惠点：选用进口材料：专业的技术支持，可靠的实验结果，优秀的产品质量，低廉的市场价格，实惠、经济、可靠。
优点：高灵敏度、高精密度，高重现性，高特异性。
不仅有高可靠性的实验结果，更为您节约实验成本和时间。
技术服务：。
白介素2受体,IL-2R,山羊白介素2受体ELISA试剂盒使用说明书
白介素2受体，IL-2R,山羊白介素2受体ELISA试剂盒使用说明书性状：试剂盒kit(含试剂+酶联板+覆膜等)。
ELISA：2-8℃，六个月白介素2受体，IL-2R,山羊白介素2受体ELISA试剂盒使用说明书（1）要注意避免出现严重溶血。
血红蛋白中含有血红素基团，其有类似过氧化物的活性，因此，在以HRP为标记酶的ELISA测定中，如血清标本中血红蛋白浓度较高，则其就很容易在温育过程中吸附于固相，从而与后面加入的HRP底物反应显色。
（2）样本的采集及血清分离中要注意尽量避免细菌污染，一则细菌的生长，其所分泌的一些酶可能会对抗原抗体等蛋白产生分解作用；二则一些细菌的内源性酶如大肠杆菌的β-半乳糖苷酶本身会对用相应酶作标记的测定方法产生非特异性干扰。
白介素2受体，IL-2R,山羊白介素2受体ELISA试剂盒使用说明书在elisa实验前的注意事项：1 仔细阅读说明书2 确定试剂盒在有效期内3 按说明书确定所有试剂齐全（数量、体积）4 标本制备要规范，每份标本体积要按2-3个复孔以上的量制备（贮存），尽量分装做备份。
短期内无法实验者，注意低温保存。
白介素2受体，IL-2R,山羊白介素2受体ELISA试剂盒使用说明书试剂盒分两种规格48T/96T，每次实验的标准曲线一般设7个不同浓度，加上空白孔，标准曲线一共需要8个孔。
因此，一个48T试剂盒最多可以测定40个样本（不做重复且一次用完），一个96T试剂盒最多可以测定88个样本（不做重复且一次用完）。
可以根据实际样本数量和实验计划选择合适的产品规格。
的比色测定由酶标仪进行。
有的同行可能会认为，既然由酶标仪进行，那么此时便可以万事大吉了，其实不然，因为当代较为先进的酶标仪，均有较多的功能，使用不当，会得到令人难以理解的实验结果。
如使用酶标仪比色测定后，有许多的阴性测定孑L的吸光度值为负数；或测定假阳性率大大增加等等。
这主要是没有正确地理解和使用酶标仪所致。
此外，在加入底物开始显色反应前，好是先检查一下底物溶液的有效性，即可将A和B两种液各加1滴于清洁的空板孔或eppendorf管中，观察是否有显色出现，如有，则说明底物已变质。
ELISA法检测人重组IL-2
抗原
固相载体
双抗原夹心法（ 双抗原夹心法（抗-HBs等）示意图 等
实验材料
• • • • 人IL-2检测试剂盒 检测试剂盒 IL-2 酶标仪 移液器
实验步骤
1. 加样：将预包被板条固定于板架上。每次 加样：将预包被板条固定于板架上。 试验设阴性对照1孔 阳性对照1孔 试验设阴性对照 孔、阳性对照 孔，分别 加入阴、阳性对照50ul（1滴）；设空白对 加入阴、阳性对照 （ 滴）；设空白对 照1孔，不加样品。其余孔加入待测样品 孔 不加样品。 50ul。 。 2. 加酶：空白对照孔不加酶，其余孔加入酶 加酶：空白对照孔不加酶， 标记物50ul（1滴）。 标记物 （ 滴 3. 温育：振荡混匀，置37℃温育 分钟。 温育：振荡混匀， 分钟。 ℃温育30分钟
4. 洗涤：弃去孔内液体，将稀释后的洗液注 洗涤：弃去孔内液体， 满各孔，静置30－ 秒 弃去孔内洗液， 满各孔，静置 －60秒，弃去孔内洗液， 扣干。重复洗6次 扣干。重复洗 次。 5. 显色：每孔加入底物缓冲液 显色：每孔加入底物缓冲液50ul（1滴）， （ 滴 再加入底物液50ul（1滴），振荡混匀，置 振荡混匀， 再加入底物液 （ 滴），振荡混匀 37℃温育 分钟。 分钟。 ℃温育15分钟 6. 终止：每孔加入终止液 终止：每孔加入终止液50ul（1滴），轻拍 （ 滴），轻拍 混匀。在单波长450nm或双波长 混匀。在单波长 或双波长 450nm/630nm下，用空白孔校零，再读取 下 用空白孔校零， 各孔OD值。 各孔 值
间接法
酶 酶标记抗体 抗体
抗原
1.将抗体包被在固相载体上。 将抗体包被在固相载体上。 将抗体包被在固相载体上 2.如样品中含有抗原，则结合 如样品中含有抗原， 如样品中含有抗原 为抗原抗体复合物。 为抗原抗体复合物。 3.再加入酶标记抗体，则结合 再加入酶标记抗体， 再加入酶标记抗体 为抗体-抗原 抗原-酶标记抗体复合 为抗体 抗原 酶标记抗体复合 物。 4.酶催化底物并显色。 酶催化底物并显色。 酶催化底物并显色
小鼠白细胞介素2IL-2试剂盒使用方法
小鼠白细胞介素2（IL-2）试剂盒使用方法检测范围：96T30 ng/L -1200 ng/L使用目的：本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆及相关液体样本中白细胞介素2（IL-2）含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠白细胞介素2（IL-2）水平。
用纯化的小鼠白细胞介素2（IL-2）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入白细胞介素2（IL-2），再与HRP标记的白细胞介素2（IL-2）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的白细胞介素2（IL-2）呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中小鼠白细胞介素2（IL-2）浓度。
试剂盒组成1 30倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7 终止液6ml×1瓶2 酶标试剂6ml×1瓶8 标准品（2400ng/L）0.5ml×1瓶3 酶标包被板12孔×8条9 标准品稀释液 1.5ml×1瓶4 样品稀释液6ml×1瓶10 说明书1份5 显色剂A液6ml×1瓶11 封板膜2张6 显色剂B液6ml×1/瓶12 密封袋1个标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
1200 ng/L 5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液600 ng/L 4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液300 ng/L 3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液150 ng/L 2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液75 ng/L 1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。
人白细胞介素2(IL-2)说明书
人白细胞介素2（IL-2）酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。
检测范围：96T40pg/ml-1200pg/ml使用目的：本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中白细胞介素2（IL-2）含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人白细胞介素2（IL-2）水平。
用纯化的人白细胞介素2（IL-2）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入白细胞介素2（IL-2），再与HRP标记的白细胞介素2（IL-2）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的白细胞介素2（IL-2）呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人白细胞介素2（IL-2）浓度。
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。
加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7.温育：操作同3。
8.洗涤：操作同5。
9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
ELISA检测试剂盒使用指南
ELISA检测试剂盒使用指南ELISA（酶联免疫吸附试验）是一种常用的免疫学实验方法，用于检测病原体、抗体或其他分子的存在和浓度。
它具有高灵敏度、高特异性、易操作和较低成本的优势，被广泛应用于生物医学研究、临床诊断和免疫学领域。
本篇文章将介绍ELISA检测试剂盒的使用指南，包括实验准备、试剂的使用步骤和结果解读。
一、实验准备1.阅读检测项目的说明书：在使用试剂盒前，仔细阅读说明书，了解试剂的使用方法、灵敏度和特异性等关键信息。
2.样本准备：根据实验要求，准备样本。
如果需要检测血清中的抗体水平，可以采集血液样本，离心分离血清；如果需要检测细胞培养上清中的分子，将上清收集，并使其清晰，避免细胞或杂质的污染。
3.样本预处理：根据实验需求，对样本进行必要的预处理。
例如，可以通过加热、稀释、酶解等方式来处理样本，以改变样本组分和浓度。
4.准备品质控制样品：制备阳性和阴性控制样品，用于评估试剂盒和实验操作的稳定性和准确性。
5.实验器材准备：准备所需实验器材，如酶标板、移液器、微孔板洗涤仪等。
确保器材的干净和完整，并按照说明书要求对其进行预处理。
二、试剂使用步骤1.试剂准备：根据说明书要求，将试剂从冰箱中取出，并在室温下放置一段时间使其恢复到室温。
确保试剂瓶盖紧闭，并避免暴露在直接阳光下。
2.实验操作：按照说明书的要求，将试剂加入到酶标板中，并根据实验设计进行标准曲线的设置。
标准曲线用于测量未知样品的数量，并计算出浓度。
3.孵育：根据试剂盒的要求，将酶标板放入孵育箱中进行孵育。
孵育温度和时间应根据实验要求进行调整。
4.洗涤：使用洗涤缓冲液对酶标板上的不特异性结合物进行洗涤。
洗涤过程应准确控制洗涤孔板次数和洗涤液的体积。
5.补液：在洗涤完成后，加入辣根过氧化物酶标况稀释液，促进酶标物与特异性结合物的反应。
6.孵育：根据试剂盒的要求，将酶标板放入孵育箱中进行二次孵育。
7.反应停止：根据试剂盒的要求，加入相应的停止液，停止酶反应。
人白介素试剂盒检测方法原理步骤说明书
人IL-10定量分析酶联免疫检测试剂盒IL-10介绍:人IL-10 是由160个氨基酸组成4个α螺旋结构细胞因子, 分子量为18.5 kDa。
在水溶液中以二聚体形式存在, 分子量约为39 kDa。
人IL-10是个多效性因子, 能够对多个细胞起作用, 关键表现为免疫抑制和免疫刺激两方面作用, 尤其是在调整淋巴系和髓系细胞功效方面饰演关键作用。
IL-10 也含有单核细胞/巨噬细胞依靠、抗原刺激引发PBMNC 和 NK 细胞合成其它细胞因子抑制作用。
巨噬细胞膜介导共刺激引发T细胞和NK细胞活化后产物及功效也可被IL-10所抑制。
IL-10是单核细胞/巨噬细胞功效强有力调整物。
IL-10作为细胞介导免疫反应抑制物, 能够抑制像前列腺素E2、 TNF-α、 IL-1、 IL-10和 IL-8等很多引发炎症细胞因子。
IL-10 能够促进可溶性TNF受体释放和ICAM－1和B7在细胞表面表示。
IL-10还参与B细胞、柱状细胞及胸腺细胞增殖和分化调控。
人IL-10与鼠类IL-10在DNA序列和氨基酸序列上高度同源, 其DNA序列中一个开放基因框与艾伯斯坦-巴尔病毒基因组上基因框BCRF1高度同源, 这可能在病毒感染中饰演关键角色原因。
在很多与寄生虫感染报道中, IL－10表示也会增加, 如曼森氏血吸虫感染、利什曼原虫感染、弓形虫感染、锥虫感染等。
分枝杆菌感染如麻风分枝杆菌、结核杆菌、鸟分枝杆菌等感染也会引发IL－10表示升高。
检测原理:本试剂盒采取双抗体夹心ELISA法检测样本中IL-10 浓度。
IL-10 捕捉抗体已预包被于酶标板上, 当加入标本或参考品时, 其中IL-10 会与捕捉抗体结合, 其它游离成份经过洗涤过程被除去。
当加入生物素化抗人IL-10 抗体后, 抗人IL-10 抗体与IL-10 接合, 形成夹心免疫复合物, 其它游离成份经过洗涤过程被除去。
随即加入辣根过氧化物酶标识亲合素。
生物素与亲合素特异性结合, 亲合素连接酶就会与夹心免疫复合物连接起来; 其它游离成份经过洗涤过程被除去。
人白细胞介素2受体α（IL-2Rα（CD25））-ELISA试剂盒说明书
人白细胞介素2受体α (IL-2Rα/CD25)酶联免疫吸附测定试剂盒使用说明书产品编号：E-EL-H1030（本试剂盒仅供体外研究使用、不用于临床诊断!）声明：尊敬的客户，感谢您选用本公司的产品。
本产品选用世界著名生产厂家的原料，采用专业ELISA kit生产技术制造。
适用于体外定量检测人血清、血浆、组织匀浆或细胞培养上清液中天然和重组IL-2Rα/CD25浓度。
使用前请仔细阅读说明书并检查试剂组分！如有疑问，请及时联系伊莱瑞特生物科技有限公司。
*: [96T/48T]（打开包装后请及时检查所有物品是否齐全完整）检测原理:本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。
用抗人IL-2Rα/CD25抗体包被于酶标板上，实验时标本或标准品中的IL-2Rα/CD25会与包被抗体结合，游离的成分被洗去。
依次加入生物素化的抗人IL-2Rα/CD25抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。
抗人IL-2Rα/CD25抗体与结合在包被抗体上的人IL-2Rα/CD25结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。
加入显色底物(TMB)，TMB在辣根过氧化物酶的催化下现蓝色，加终止液后变黄。
用酶标仪在450nm 波长处测OD值，IL-2Rα/CD25浓度与OD450值之间呈正比，通过绘制标准曲线求出标本中IL-2Rα/CD25的浓度。
标本收集:1.血清：全血标本于室温放置2小时或4℃过夜后于1000×g离心20分钟，取上清即可检测，收集血液的试管应为一次性的无热原，无内毒素试管。
2.血浆：抗凝剂推荐使用EDTA.Na2，标本采集后30分钟内于1000×g离心15分钟，取上清即可检测。
避免使用溶血，高血脂标本。
3.组织匀浆：用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织，以去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将组织剪碎。
将剪碎的组织与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样本对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。
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人(Human) 白细胞介素-2（IL-2）ELISA 检测试剂盒使用方法
用途：
人IL-2 ELISA试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织、缓冲液中细胞上清液及各种体液中的IL-2 。
本试剂盒可以检测天然和重组的IL-2 。
本试剂盒专用于科研、而非用于临床诊断。
试验原理：
人IL-2 试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知IL-2 浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。
先将IL-2 和生物素标记的抗体同时温育。
洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。
再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。
产生颜色。
颜色的深浅和样品中IL-2 的浓度呈比例关系。
试剂盒内容及其配制
自备材料
1．蒸馏水。
2．加样器：5ul、10 ul、50 ul、100 ul、200、500 u、1000lul。
3．振荡器及磁力搅拌器等。
安全性
1．此试剂盒的人血制品中的HbsAg、和抗HIV为阴性，但没有实验室可完全保证此血制品不会传染肝炎、AIDS或其它传染病，依据当地的安全条例处理本试剂盒里的成份及血清和血浆等样品。
2．避免直接接触终止液和底物A、B。
一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。
3．实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
4．不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
操作注意事项
1．试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。
稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
2．实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
3．不用的其它试剂应包装好或盖好。
不同批号的试剂不要混用。
保质前使用。
4．使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。
5．使用干净的塑料容器配置洗涤液。
使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6．洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
7．底物A应挥发，避免长时间打开盖子。
底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。
避免用手接触，有毒。
实验完成后应立即读取OD值。
8．加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
9．按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
样品收集、处理及保存方法
1、血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。
使用不含热原和内毒素的试管。
收集血液后，1000×g
离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2、血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。
1000×g离心30分钟去除颗粒。
3、细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4、保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70 ℃保存，避免反复冷冻。
尽可能的不要使
用溶血或高血脂血。
如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。
不要在37℃或更高的温度加热解冻。
应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
试剂的准备
1．标准品：标准品的系列稀释应在实验时准备，不能储存。
稀释前将标准品振荡混匀。
稀释比例按下表中进行：
2．洗涤缓冲液（20×）的稀释：蒸馏水20倍稀释。
操作步骤
1．使用前，将所有试剂充分混匀。
不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。
2．根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。
每个标准品和空白孔建议做复孔。
每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。
3．加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。
立即加入50ul的生物素标记的抗体。
盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。
4．甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。
重复此操作四次。
如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。
5．每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。
6．甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。
重复此操作四次。
如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。
7．每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育15分钟。
避免光照。
8．取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。
9．在450nm波长处测定各孔的OD值。
建议使用的实验方案
结果分析
以吸光度OD值为纵坐标（Y），相应的IL-2 标准品浓度为横坐标（X），做得相应的曲线，样品的IL-2 含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。
局限
6号标准品以上的结果为非线性的，根据此标准曲线无法得到精确的结果。
试剂盒性能
1．灵敏度：最小的检测浓度小于1号标准品。
稀释度的线性。
样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。
2．特异性：不与人其它细胞因子反应。
3．重复性：板内、板间变异系数均小于10%。