人白细胞介素23(IL-23)说明书
达优 小鼠 IL-12 IL-23 p40 预包被 ELISA kit说明书
产品信息和操作指南Mouse IL-12 /IL-23 p40预包被 ELISA kit Cat# : DKW12-2123-048 / DKW12-2123-096本试剂盒专用于科研，而非用于诊断Mouse IL-12 /IL-23 p40DKW12-2123目录产品简介 (1)知识背景 (1)试剂盒提供的试剂 (2)需要实验者自行准备的试剂与仪器 (2)注意事项 (3)试剂的配制 (5)操作过程 (7)结果分析 (9)试剂盒的保存 (9)操作步骤一览表 (10)参考文献 (11)ELISA测定中可能会出现的问题及解决方法 (12)预包被ELISA 试剂盒系列产品 (15)1、产品简介：达优®小鼠IL-12 /IL-23 p40 ELISA试剂盒是通过酶联免疫吸附技术，定量检测细胞培养上清液和小鼠血清、血浆和其他体液中天然和重组IL-12 /IL-23 p40 的浓度。
本试剂盒为预包被板，“夹心一步”完成，整个过程孵育时间不超过2.5小时，洗涤8次，操作时间大大减少。
本试剂盒专用于科研，而非用于诊断。
使用前请仔细阅读说明书并检查试剂盒组分，若有任何疑问请与达科为生物工程有限公司联系，E-mail：*************.检测范围：500-7.8 pg/mL灵敏度：2 pg/mL重复性：板内、板间变异系数均＜10％。
2、知识背景：白介素23（Interleukin-23,IL-23）是一个异二聚体细胞因子，它与白介素12含有一段相同的40kDa，即p40亚基，通过二硫键与p19亚基连接。
而IL-12 是由p40与p35亚基组成。
p40的单体和二聚体也可以单独被分泌（1-7）。
哺乳动物中可以表达出p40的有巨噬细胞，树突状细胞，单核细胞，朗格汉斯细胞，中性白细胞，角质化细胞，浆细胞树突状细胞和小神经胶质细胞（8-13）。
3、试剂盒提供的试剂：试剂规格配制Cytokine standard 2/1瓶* 干粉状，按瓶上说明操作Biotinylated antibody 2/1瓶* 1：100用Dilution buffer R（1×）稀释Streptavidin-HRP 2/1瓶* 1：100用Dilution buffer R（1×）稀释Dilution buffer R（1×） 3/2瓶* 即用型Washing buffer（50×）1瓶 150∶用蒸馏水稀释TMB 1瓶即用型Stop solution 1瓶即用型Precoated ELISA plate 8×12或8×6*即用型封板膜 2/1张* 即用型说明书1份*：96/48 Tests4、需要实验者自行准备的试剂与仪器：1．酶标仪（建议参考仪器使用说明提前预热）2．微量加液器及吸头：P10，P50，P100，P200，P1000 3．蒸馏水或去离子水4．全新滤纸5．旋涡振荡器和磁力搅拌器6．37℃温箱5、注意事项：1.试剂应按瓶上标签说明储存，使用前室温平衡20-30分钟。
白介素-23的生物学功能
白介素-23的生物学功能李艳春;鲁继荣【摘要】白细胞介素(IL)是一组具有重要作用的细胞因子,由免疫细胞或非免疫细胞产生,自1979 年开始定名以来,随着分子生物学和细胞生物学技术的迅速发展,目前已见报道的有29种(IL-1 ～ IL-29).IL-23是2000年发现的一种白细胞介素,由p19和p40两个亚基组成.近几年对IL-23的深入研究,发现它具有多种生物学功能,如作用于T细胞使之产生多种细胞因子,作用于树突状细胞及巨噬细胞,影响相关细胞因子的分泌等,从而使IL-23在多种疾病中都发挥了重要的作用.文章就IL-23的分子结构、生物学功能及其在相关疾病中的作用等方面作了综述.【期刊名称】《临床儿科杂志》【年(卷),期】2010(028)003【总页数】3页(P295-296,299)【关键词】白介素-23;生物学功能;疾病【作者】李艳春;鲁继荣【作者单位】吉林大学第一医院儿内一科,吉林长春,130021;吉林大学第一医院儿内一科,吉林长春,130021【正文语种】中文【中图分类】R725IL-23是2000年发现的一种白细胞介素，目前已发现其具有多种生物学功能，并在多种疾病中发挥作用。
1 IL-23的分子结构IL-23由p19和IL-12中的p40两个亚基组成，它们之间以二硫键相联结。
p19是Oppmann等发现的衍生于IL-6细胞因子家族的新细胞因子。
p19的cDNA序列编码189／196个氨基酸多肽（人／鼠），其相应蛋白的相对分子质量分别为18 700和19 800。
人和鼠的p19相应蛋白质中均含有5个半胱氨酸残基，无N-糖基化位点，两者有70%同源，其蛋白质组成大部分与IL-12p35、IL-6和G-CSF相近。
2 IL-23的受体IL-23的受体由IL-12R中的一个亚基IL-12Rβ1和IL-23R两个亚基组成。
IL-23R 是一种新细胞因子受体亚单位，它是与IL-12 Rβ2和gp130相似的促红细胞生成素受体家族中的一个新成员，人IL-23R的基因定位于人1号染色体距离IL-12Rβ2大约150 kb的地方。
白细胞介素-22(IL-22)及其研究现状
白细胞介素-22(IL-22)及其研究现状于丹军;金玉怀;张红娟;李军良【摘要】白细胞介素22（IL-22）是2000年由Dumoutier等发现的-种新型细胞因子，与IL-10有23％的同源性，曾被命名为IL-TIF（Interleukin-10-related T cell—derived inducible factor）。
鉴于与IL-10的结构相似，其受体是-个Ⅱ型细胞因子受体家族的新成员，以及其在白细胞内的产物和作用的确认，由Xie等将它重命名为人类细胞因子白细胞介素-22（Interleukin-22，IL-22）。
目前对它的研究尚处于起始阶段。
【期刊名称】《中国疗养医学》【年(卷),期】2006(015)006【总页数】3页(P401-403)【关键词】细胞因子白细胞介素;Ⅱ型细胞因子;IL-10;受体家族;cell;同源性;细胞内【作者】于丹军;金玉怀;张红娟;李军良【作者单位】066100,秦皇岛市第一人民医院;066100,秦皇岛市第一人民医院;066100,秦皇岛市第一人民医院;066100,秦皇岛市第一人民医院【正文语种】中文【中图分类】R3白细胞介素 22（IL-22）是 2000年由 Dumoutier等发现的一种新型细胞因子,与IL-10有 23%的同源性，曾被命名为 IL-TIF（Interleukin-10-related T cell-derived inducible factor）。
鉴于与 IL-10的结构相似，其受体是一个Ⅱ型细胞因子受体家族的新成员，以及其在白细胞内的产物和作用的确认，由 Xie等将它重命名为人类细胞因子白细胞介素 -22（Interleukin-22，IL-22）[1，2]。
目前对它的研究尚处于起始阶段。
鼠白细胞介素（m IL-22）在鼠体外可由 IL-9激活的 T细胞和肥大细胞产生；在体内，通过注射抗CD3抗体可在脾脏中产生，注射 LPS 2h以也后可在其他组织中产生 [1]。
脑脊液ADA和IL-23的测定对结核性脑膜炎的诊断价值论文
脑脊液ADA和IL-23的测定对结核性脑膜炎的诊断价值【摘要】目的：测定结核性脑膜炎（tuberculous meningitis,tbm）患者脑脊液中腺苷脱氨酶（ada）和白细胞介素-23（il-23）的水平，探讨二者对tbm的临床诊断价值。
方法：按照tbm的临床诊断标准和排除标准，选择临床确诊的tbm病例50例为研究对象，选择20例非结核性中枢神经系统疾病作为对照组，收集每个病人的首次腰穿脑脊液，采用elisa法测定脑脊液中ada 和il-23的水平。
结果：实验组脑脊液ada的水平为13.51±2.55u/l，明显高于对照组（p＜0.01），实验组脑脊液il-23的水平为85.99±7.92pg/ml，明显高于对照组（p＜0.01）。
结论：ada 和il-23水平的测定是一种简单、快捷、有效的诊断tbm的辅助方法。
【关键词】结核性脑膜炎；脑脊液；腺苷脱氨酶；白细胞介素-23【中图分类号】r446 【文献标识码】a 【文章编号】1004-7484（2012）08-0309-01determination of ada and il-23 in csf in diagnosis of tuberculosis meningitiszhu ya-juan;fan li-chao(shenyang chest hospital,shenyang 11001, china)【abstract】objective：we examined the adenosine deaminase(ada) and interleukin-23(il-23) level in thecerebrospinal fluid (csf) from the patients with tbm and explored their clinical valus.methods：according to the diagnosis and excluding criteria of tbm,50 patients with tbm and 20 patients with non-tuberculotic disease in central nervous were chosen.collected csf and determined by enzyme-linked immunosorbent assay(elisa).results：the levels of ada in tbm patients is 13.51±2.55u/l,significantly higher than non-tbm patients. the levels of il-23 in tbm patients is 85.99±7.92pg/ml,significantly higher than non-tbm patients.conclusions：the measurement of ada and il-23 levels might provide a simple、quick and effective diagnosis method of tbm.【key words】tuberculous meningitis; cerebrospinal fluid; adenosine deaminase; interleukin-23结核性脑膜炎是常见的神经系统结核病，是一种重症结核病，由于结核杆菌经淋巴系统和血行播散进入脑膜，并在脑膜和软脑膜形成结核结节，之后结节破溃，导致大量结核杆菌进入蛛网膜下腔，导致结核性脑膜炎[1]。
人白细胞介素2(IL-2)说明书
人白细胞介素2（IL-2）酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。
检测范围：96T40pg/ml-1200pg/ml使用目的：本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中白细胞介素2（IL-2）含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人白细胞介素2（IL-2）水平。
用纯化的人白细胞介素2（IL-2）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入白细胞介素2（IL-2），再与HRP标记的白细胞介素2（IL-2）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的白细胞介素2（IL-2）呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人白细胞介素2（IL-2）浓度。
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。
加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7.温育：操作同3。
8.洗涤：操作同5。
9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
白细胞介素的定义及分类
白细胞介素的定义及分类一、白细胞介素的定义白细胞介素（interleukin;IL）简称白介素，是由多种细胞产生并作用于多种细胞的一类细胞因子。
由于最初是由白细胞产生又在白细胞间发挥作用，所以由此得名，现仍一直沿用。
现在是指一类分子结构和生物学功能已基本明确，具有重要调节作用而统一命名的细胞因子。
白细胞介素在传递信息，激活与调节免疫细胞，介导T、B细胞活化、增殖与分化及在炎症反应中起重要作用。
白细胞介素的生理学特点1、产生细胞与作用细胞多样有些白介素可由2种以上免疫细胞产生；一种白介素可对多种细胞发挥作用。
2、合成分泌快，大多为近距离发挥作用，降解快。
3、分子质量小，生物学作用强白介素多为小分子糖蛋白，体内含量极微，但发挥作用很显著。
白细胞介素命名及分类名称的由来关于免疫反应的表达和调节，有来源于淋巴细胞或巨噬细胞等许多因子参与，其生物活性各有不同（例如巨噬细胞活化，促进T细胞繁殖等）。
在研究这些因子的过程中，研究者各以自己测得的活性进行命名，十几年报道了近百种因子。
后来借助分子生物学技术进行比较研究发现，以往许多以生物活性命名的因子实际上是具有多效性的同一物质。
为了避免命名的混乱，1979年第二届国际淋巴因子专题会将免疫应答过程中白细胞间相互作用的细胞因子统一命名为白细胞介素（interleukin;IL），在名称后加阿拉伯数字编号以示区别，例如IL-1、IL-2…，新确定的因子依次命名。
二、分类白细胞介素是非常重要的细胞因子家族，目前发现了35种白细胞介素，分别命名为IL-1—IL-35。
其功能复杂，成网络，复杂重叠。
几类白细胞介素简介人白细胞介素1β (Human Interleukin 1β)人IL-1β为IL-1家族的成员之一，IL-1家族包括IL-1α、IL-1β、IL-1ra、IL-18及IL-1F5至F10。
所有家族成员都具有12β链，β三叶草构像。
IL-1α和IL-1β为不同基因的产物，虽其氨基酸序列只有大约25%的同一性，但它们识别相同的细胞表面受体。
Stelara靶点及其药物研究
3、Ilumya（tildrakizumab）
靶点：IL-23 公司：默沙东/太阳制药（Sun Pharmaceutical） Ilumya（tildrakizumab）是默沙东（MSD）和太阳制药公 司开发的一款IL-23特异性抗体，可以选择性结合IL-23的p19亚基， 并抑制其与IL-23受体作用，从而抑制促炎细胞因子和趋化因子的 释放。2018年3月，Ilumya获得美国FDA批准，治疗适合接受全 身治疗或光疗的中度至重度斑块型银屑病成人患者。
4、Mirikizumab
靶点：IL-23 公司：礼来（Eli Lilly and Company） Mirikizumab是礼来公司开发的一款靶向IL-23的p19亚基的全人源化单克隆抗体。目前，礼来 公司已经开展多项3期临床试验，评估mirikizumab治疗银屑病、克罗恩病和溃疡性结肠炎的效果。 根据礼来在2019年美国消化疾病周（DDW）医学会议上公布的结果，mirikizumab在治疗中重度克 罗恩病患者的2期临床试验中获得了积极结果：与安慰剂相比，mirikizumab在治疗12周后显著降低 临床和内镜检测到的疾病活动。治疗银屑病的关键性3期临床试验有望在2020年获得结果。 在中国，mirikizumab注射液已获得6项临床试验默示许可，针对中重度活动性溃疡性结肠炎、 中 重 度 活 动 性 克 罗 恩 病 适 应 症 。 此 外 ， 礼 来 产 品 管 线 中 还 有 一 款 靶 向 I L - 2 3 的 抑 制 剂 LY - 9 0 0 0 2 1 ， 和 一款靶向IL-23/CGRP的双抗，目前正在1期临床研究阶段。
在中国，乌司奴单抗注射液于2017年11月首次获批，用于治疗中重度斑 块状银屑病，是中国国内获批的首个全人源“双靶向”IL-12和IL-23抑制剂。 2019年5月，乌司奴单抗在中国被加入到第二批临床急需境外新药名单中。
IL-23促进人肺腺癌A549细胞的迁移和侵袭
IL-23促进人肺腺癌A549细胞的迁移和侵袭张森;黎军;张洁;张乐;林苹【摘要】背景与目的前炎症因子白细胞介素23( interleukin 23,IL-23)是与慢性炎症和肿瘤微环境相关的一种重要的细胞因子,同时IL-23受体在结直肠癌、肺癌、口腔鳞癌等肿瘤细胞中有表达.本研究旨在探讨IL-23能否促进人肺腺癌细胞A549的迁移和侵袭并探讨其机制.方法用划痕试验和Transwell小室法测定IL-23对A549的迁移和侵袭的影响,用Real-time PCR和ELISA检测IL -23对基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase9,MMP-9)的mRNA和蛋白表达的影响,通过IL-23中和抗体阻断IL-23的作用,进一步证实IL-23对A549迁移和侵袭的影响.结果 IL-23明显增加了A549细胞的迁移和侵袭能力；同时IL-23能提高A549细胞MMP-9的mRNA表达和其培养上清中MMP-9的蛋白表达,IL-23中和抗体能有效地阻断IL-23对A549的迁移和侵袭的作用.结论 IL-23可刺激A549细胞表达MMP-9,从而促进A549细胞的迁移和侵袭.%Background and objective Interleukin 23 (IL-23) is a pro-inflammatory cytokine that plays an important role in inflammatory disease and tumor microenvironment TheIL-23 receptor is expressed in colon, lung, and oral carcinomas. We performed this study to investigate whether IL-23 promotes directly carcinoma cell migration and invasion as well as further explore its mechanism. Methods The migration and invasion of human lung adenocarcinoma A549 cells induced by IL-23 were detected by a scratch test and Transwell experiment MMP-9 expression of the mRNA and protein levels of AS49 cells cultured with and without IL-23 was respectively detected by Real-time PCR and ELISA. The effect of IL-23 onAS49 cells was farther verified using anti-IL-23pl9 neutralization antibody (Ab IL-23pl9) to eliminate IL-23. Results IL-23 remarkably promoted A549 cell migration and invasion. MMP-9 expression in A549 cells was upregulated by IL-23 stimulation. In addition, the effect of IL-23 on the migration and invasion of AS49, as well as the MMP-9 expression in A549 cells induced by IL-23, was eliminated by Ab IL-23pl9. Conclusion IL-23 promotes the migration and invasion of AS49 cells by inducing MMP-9 expression.【期刊名称】《中国肺癌杂志》【年(卷),期】2012(015)005【总页数】7页(P253-259)【关键词】IL-23;A549肺腺癌细胞;迁移;侵袭;MMP-9【作者】张森;黎军;张洁;张乐;林苹【作者单位】610041成都,四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室老年医学研究室;610041成都,四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室老年医学研究室;610041成都,四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室老年医学研究室;610041成都,四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室老年医学研究室;610041成都,四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室老年医学研究室【正文语种】中文【中图分类】R734.2许多肿瘤的发生都与慢性炎症性疾病相关[1]，例如：结肠癌、非小细胞肺癌、胃癌等[2-4]。
人白细胞介素17(IL-17)说明书
人白细胞介素17（IL-17）酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关液体样本中白细胞介素17（IL-17）的含量。
实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人白细胞介素-17（IL-17）水平。
用纯化的人白细胞介素-17（IL-17）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入白细胞介素-17，再与HRP标记的羊抗人抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的白细胞介素-17（IL-17）呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人白细胞介素-17（IL-17）含量。
试剂盒组成：样本处理及要求：1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。
2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。
3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。
离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。
通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。
离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
5. 组织标本：切割标本后，称取重量。
加入一定量的PBS，PH7.4。
用液氮迅速冷冻保存备用。
黄芪注射液治疗膜性肾病30例疗效观察
黄芪注射液治疗膜性肾病30例疗效观察摘要：目的：探究黄芪注射液治疗膜性肾病的临床疗效。
方法：选取我院2022年1月-2023年1月接收的30例膜性肾病患者，随机分为普通组（n=15）及试验组（n=15），比较两组患者血清炎症因子及ALB、24h尿量、24h UP。
结果：治疗前两组患者各项对比指标均无显著差异（P>0.05）；试验组患者治疗后的各项炎症因子及24h UP均低于普通组，LB、24h尿量高于普通组（P＜0.05）。
结论：使用黄芪注射液治疗膜性肾病比西药治疗的疗效更好，具有较强的应用推广价值。
关键词：黄芪注射液；膜性肾病；临床疗效膜性肾病成年肾病综合征的主要病因，约占20%-40%。
膜性肾病无特定发病年龄，但多见于成年人，儿童患者则较为罕见。
膜性肾病的起病具有较强的隐匿性，少部分患者会出现蛋白尿症状，随着病情的发展，患者会出现高血压症状，且伴有不同程度的水肿表现，症状较为严重的患者还会出现胸腔积液等症状[1]。
患者患病后如未经过及时医治，则会使病情进展为慢性肾功能减退，此时患者只能通过移植肾器官或透析治疗维持生命，对患者的身心健康造成严重影响，并给家庭带来沉重的经济负担。
基于此，本文对黄芪注射液治疗30例膜性肾病患者展开研究，分析其具体效果。
1资料与方法1.1一般资料选取本院2022年1月-2023年1月间收治的30例膜性肾病患者，使用随机分组法分为普通组和试验组，每组15例患者。
试验组：患者男女比9:6，年龄41-65岁，平均(48.48±3.02)岁，病程2-10年，平均(6.52±2.08)年。
普通组：患者男女比10:5，年龄43-64岁，平均(48.13±2.95)岁，病程3-9年，平均(6.18±1.93)年。
两组一般资料经对比差异不显著（P>0.05）。
纳入标准：（1）患者确诊为膜性肾病；（2）患者无传染性疾病；（3）本次研究征得患者家属同意，患者均自愿加入。
人白介素4(IL4)ELISA试剂盒说明书
人白介素4 (IL-4)酶联免疫分析试剂盒说明书厦门慧嘉生物科技有限公司本试剂盒仅供研究使用检测范围：ng/ml - 100 ng/ml最低检测限：ng/ml特异性：本试剂盒可同时检测天然或重组的人IL-4，且与其他相关蛋白无交叉反应。
有效期：6个月预期应用：ELISA法定量测定人血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中IL-4含量。
说明：1.试剂盒保存：-20℃（较长时间不用时）；2-8℃（频繁使用时）。
2.浓洗涤液低温保存会有盐析出，稀释时可在水浴中加温助溶。
3.中、英文说明书可能会有不一致之处，请以英文说明书为准。
4.刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质，此为正常现象，不会对实验结果造成任何影响。
概述：白细胞介素-4（白介素-4，Interleukin-4，IL-4）是II型辅助T细胞（Th2细胞）分泌的细胞因子。
白细胞介素-4的生物作用，包括刺激活化B细胞和T细胞增殖、CD4+T细胞分化成II型辅助T细胞。
它也在调节体液免疫和适应性免疫中起关键作用。
白细胞介素-4诱导B细胞抗体类别转换向IgE，上调第二型主要组织兼容性复合体的产生。
它最初被认为是B淋巴细胞分化因子(BCDF)，同时也是B淋巴细胞刺激因子(BSF1)。
随着后来人和鼠IL-4被分子化克隆及表达，发现了IL-4的多种功能作用于B淋巴细胞及其他造血及非造血细胞，包括T淋巴细胞、单核细胞、巨噬细胞，肥大细胞、骨系及红细胞系祖细胞，纤维母细胞及内皮细胞等。
IL-4在体外及体内均呈现出抗肿瘤效应。
实验原理：用纯化的抗体包被微孔板，制成固相载体，往包被抗IL-4抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗IL-4抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。
TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的IL-4呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。
IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-17和IL-23在精神分裂症患者血清中的表达及其临床应用价值
IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-17和IL-23在精神分裂症患者血清中的表达及其临床应用价值李泽兵;李冬;杨雪松;孙祖俊;林萍;王峰;林斐然;徐筱;谢红涛【摘要】目的研究精神分裂症患者血清白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、IL-17和IL-23水平变化及其在精神分裂症中的辅助诊断价值.方法选取85例精神分裂症患者(病例组),以85名体检健康者作为正常对照组.采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测2个组的血清IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-17和IL-23水平,比较病例组药物治疗前、治疗3个月末的变化.采用受试者工作特征(ROC)曲线评价血清细胞因子对精神分裂症的辅助诊断价值.采用Pearson相关分析评价细胞因子水平与阳性和阴性症状量表(PANSS)评分之间的相关性.结果病例组治疗前血清IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-17、IL-23水平高于正常对照组(P<0.01).病例组治疗3个月末的血清IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-17和IL-23水平均低于治疗前(P<0.01),与正常对照组比较差异无统计学意义(P>0.05).ROC曲线分析显示,IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-17、IL-23辅助诊断精神分裂症的曲线下面积(AUC)分别为0.723、0.772、0.686、0.685、0.679.IL-1β、IL-17、IL-23与PANSS总分、阳性症状评分、一般精神病理学症状评分、攻击危险性评分均呈正相关(P<0.05),TNF-α与阳性症状评分呈正相关(P<0.05),而IL-6与PANSS总分、阴性症状评分呈正相关(P<0.05).结论精神分裂症患者存在IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-17和IL-23的激活.血清细胞因子在精神分裂症的辅助诊断中有一定的价值,且与临床症状具有相关性.【期刊名称】《检验医学》【年(卷),期】2018(033)008【总页数】5页(P697-701)【关键词】细胞因子;精神分裂症;辅助诊断;临床症状【作者】李泽兵;李冬;杨雪松;孙祖俊;林萍;王峰;林斐然;徐筱;谢红涛【作者单位】上海市普陀区精神卫生中心,上海 200065;同济大学附属同济医院,上海 200065;同济大学医学院,上海 200092;同济大学附属同济医院,上海 200065;上海市精神卫生中心,上海 200030;上海市普陀区精神卫生中心,上海 200065;上海市临床检验中心,上海 200126;上海市普陀区精神卫生中心,上海 200065;上海市普陀区精神卫生中心,上海 200065【正文语种】中文【中图分类】R446.62精神分裂症是一类常见的精神症状复杂、至今未明确病理基础的重性精神障碍，多起病于青年或成年早期，具有知觉、思维、情感、认知、行为及社会功能等多方面的障碍和精神活动不协调[1]。
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人白细胞介素23（IL-23）酶联免疫分析（ELISA）
试剂盒使用说明书
本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关液体样本中白细胞介素23（IL-23）的含量。
实验原理：
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人白细胞介素23（IL-23）水平。
用纯化的人白细胞介素23（IL-23）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入白细胞介素23（IL-23），再与HRP标记的白细胞介素23（IL-23）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的白细胞介素23（IL-23）呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人白细胞介素23（IL-23）浓度。
试剂盒组成：
试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份
封板膜2片（48）2片（96）
密封袋1个1个
酶标包被板1×481×962-8℃保存
标准品：450ng/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存
样本处理及要求：
1.血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上
清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。
2.血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心
20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。
3.尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程
中如有沉淀形成，应再次离心。
胸腹水、脑脊液参照实行。
4.细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。
离心20分钟左右（2000-3000转/
分）。
仔细收集上清。
检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。
通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。
离心20分
钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
5.组织标本：切割标本后，称取重量。
加入一定量的PBS，PH7.4。
用液氮迅速冷冻保存备
用。
标本融化后仍然保持2-8℃的温度。
加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。
离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
分装后一份待检测，其余冷冻备用。
6.标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。
若不能马上
进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融.
7.不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤
1.标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在第一、第二孔中分别加标
准品100μl，然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从第一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。
（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为300ng/L，200ng/L，100ng/L，50ng/L，25ng/L）。
2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样
品孔。
在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。
加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。
5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此
重复5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7.温育：操作同3。
8.洗涤：操作同5。
9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色
15分钟.
10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。
测定应在加终止
液后15分钟以内进行。
注意事项：
1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。
一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4．请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。
如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。
5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．底物请避光保存。
7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9．本试剂不同批号组分不得混用。
10.如与英文说明书有异，以英文说明书为准。
计算：
以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，
在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD
值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释
倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标
准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值
代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释
倍数，即为样品的实际浓度。
（此图仅供参考）
试剂盒性能：
1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.92以上。
2.批内与批间应分别小于9%和15%
检测范围：
15ng/L-400ng/L
保存条件及有效期：
1.试剂盒保存：2-8℃。
2．有效期：6个月。