糖蛋白的研究进展

糖蛋白药物糖基化及其表达系统的研究进展

２ＱｎｄｏＧｏｆｌｒｕｕｎｈｉｈｒａｅｉｌｏ，ｔ，ｈｎｏｇＱｎｄｏ２６２ＣｉａｉａｒｗｕＧｏｐＨａｇａＰａｍｃｕａＣ．ＬｄＳａｄｎ，ｉｇａ，６０，ｈｎ）ｇｔｃ．４
ＡｓａｔＰｏｉ—ａｅｒｇｏｓｔｔａｏｔｕｒｒｆｅｐｒａｉａｒｙｂｉｇｇｃｐｏｉｓＴｅｐｒｏｅｏｉｒｉｂｔｃ：ｒｔｎｂｓｄｄｕｓｎｔｕｅｂｕｑａｅｏｗａｐｏｌｗｔａｍｊｉｅｌｏｒｔｎ，ｈｕｐｓｆｈｓｅｅｒｅｃｉａｔｎｖｓｈｏｔｎｙｅｔｖｗ
关键词：蛋白；基化；达系统糖糖表
Ｔｈｏｅｏｌｃｎｎｇｙｏｒｔｉｎｌｃｐｏｅｎｅｐｅｓｏｙｔｍｅｒｌｆｇｙａｓｉｌｃｐｏｅｎａｄｇｙｏｒｔｉｘｒｓｉｎｓｓｅ
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糖蛋白药物糖基化及其表达系统的研究进展
ｉｏｈｇｌｈｅｉｆｅｃｆｌｃｓｌｔｎｏｐｉｌｈｒｐｕｉｆｃｃ，ａｄｔｖｕｔｈｒｔｏｘｒｓｉｎｓｓｍｓｔｃｉｖｓｔｉｈｉｔｔｎｕｎｅｏｙｏｙａｉｎｏｔｇｈｌｇｏｍａｅａｅｔｅｆａｙｎｏｅａａｅｔｅｍｅｓｆｐｅｓｏｙｔｏａｈｅｅｔｃｉｌｉｅｅｏｔｌｇｙｏｙａｉｎＭａｐｉｌｃｓｌｔ．ｍｍａｉｎｃｌｃｌｒ，ｗｉｈｉｕｒｎｌｈｒｄｃｉｎｓｓｅｏｈｉｅｆｒｇｙｏｒｔｉｓｈｓｓｖｒｉａｖｎｍａｏｌｅｌｕｔｅｈｃｓｃｒｅｔｔｅｐｏｕｔｙｔｍｆｏｃｏｌｃｐｏｅｎ，ａｅｅａｄｓｄａ — ａｕｙｏｃｌｔｇｓｉｃｕｉｇｈｇｏｔｏｏｄ，ｏｇｃｃｅｔｓａｄ，ｍｐｒｎｌｌｔｄｃｎｒｌｏｅｌｃｓｌｔｎＩｉｗｏｉ，ｅｓｘｒｓｉｎａｅｎｌｄｎｉｈｃｓｆｏｓｌｎｙｌｉｎｉｏｔｔｇｍｅａｙ，ｉｅｏｔｖｒｇｙｏｙａｉ．ｎｖｅｆｔｓｙａｔｅｐｅｓｍｉｏｏｈｏｓｓｅｒｕｒｎｌｅｎｘｌｒｄａｌｒａｉｅｏｍａｙｔｍｓａｅｃｒｔｂｉｇｅｐｏｅｓａｔｎｔｓｔｍｍａｉｎｃｌｃｌｒｅａｓｈｙｏｆｒｓｖｒｄａｔｇｓｓｃｏｕｔｅ — ｅｙｅｖｌｅｌｕｔｅｂｃｕｅｔｅｆｅｅａａｖｎａｅ，ｕｈａｒｂｓｘａｕｅｌｓｐｅｓｏｓａａｌｅｍｅｔｔｎ，ａｄｔｅａｉｔｅｆｒＮ—ｌｃｓｌｔｎ，ｓｅｉｌｐｓｒｌｈｖｅｔｒｐｒｐｃｉｅｉｐｌａｒｓｉｎ，ｃｂｅｆｒｎａｉｌｏｎｈｂｌｙｔｐｒｍ，ｇｙｏｙａｉｅｐｃａｙｉｏｏｏｌａｔｉｗｉａｅａｂｔｅｓｅｔａｐｉ — ｏｓｌｅｖｎｃ

P-糖蛋白非多药耐药功能的研究进展

瘤细胞中高表达，它在很多正常组织中表达，在多功
Ｐｇ是ＡＰ结合盒（Ｔ－ｉｄｎａｓｔ， — ＰＴＡＰｂｎｉｇｃｓｅｅｔＡＣ）运超家族的一个成员，对分子质量为Ｂ转相１６０Ｕ，１８．８×１由２０个氨基酸组成，一和ｃ端形Ｎ端一成相似的两部分结构，氨基酸序列具有高度同源性。
．
６２
生理科学进展２１０２年第４３糯第１期
Ｐ糖蛋白非多药耐药功能的研究进展・
林桂先毛建文张文军
（广东药学院基础学院，广州５００）１０６
：ｆ：
摘要
Ｐ糖蛋白（ —Ｐ是多药耐药基因ＭＲ１码的蛋白，介导肿瘤产生多药耐药性的药泵功一Ｐｇ）Ｄ编其
３ＺｏｈｕＹ，ＬｅＪｅ，ＲｅｏＣ，ｅ１Ｒｅｕａｉｎｏｌｃｓｏ — ｎＭｔ．ｇｌｔｆｕｏｅｈｍｅａｏｇ
ｏｔｓｈｏｇＰ１ＦｘｎｅａｔｎＮａｄ，０１，ｓａｉｔｒｕｈቤተ መጻሕፍቲ ባይዱａＸＢ一－ｏＯ１ｉｔｒｃｉ．ｔＭｅ２ｓｏ１
９ＴｏｐＡ，ｃｗｒｅＳＩ１ｌｈｏｔｌｙｌｘｈｒｅＪＳｈａｚＲ．ＲＥｐａｃｎｒｓｃｃｉＡ１ｅ — ａｏｎ
ｐｒｓｉｎａｄｐｏｔｓｅｌｐｏｉｒｔｏｈｒｕｇＸＢＰ一ｅｓｏｎｒｍｏｅｃｌｒｌｆａｉｎｔｏｈｅ１．ＣｅｌｌＳｒｓａｒｎｅ．２０，５：７～５８．ｔｅｓＣｈｐｅｏｓ０１１４９０

血吸虫糖蛋白研究进展

原特异性较差，虫卵抗原有明显交叉反应，与
而且无种特异性ｌ。通过碘分子标记及免４ｊ
疫沉淀反应表明，种抗原决定簇存在于分这子量＞２０３０，８和１Ｄａ糖蛋白上。现７ｋ等已证明３，２和２Ｄ８３０ｋａ的糖蛋白分子含有
有关血吸虫疫苗的研究迄今已有７０余年的历史。２Ｏ世纪９Ｏ年代中期ＷＨＯ厂１ＲＩＤ选定了６种曼氏血吸虫候选疫苗分子，们它
是２ＤａＧＴ、７ｋａ副肌球蛋白、２ｋ８ｋＳ９Ｄ６Ｄａｌｖ５２Ｄａ酸丙糖异构酶（Ｉ、３ｋｒ一、８ｋ磷ＴＰ）２Ｄａ
糖蛋白是一类通过一定结构特征的糖链和肽链中特定的氨基酸残基连接而成的结合
蛋白，在于动物各种组织、官和体液中。存器虽常见的糖链和肽链的连接方式有两种：Ｎ一糖苷键和糖苷键。Ｎ一苷键连接的糖链糖（称为Ｎ一链）通过糖链还原端的Ｎ一简糖是乙酰氰基葡萄糖（ＣＮＡＣ）肽链中某些ＧＬ－和ＡＮ酰基上的氮原子相连。Ｎ链结构复Ｓ糖杂而且多变。Ｏ一苷键连接的糖链（糖糖
择性地激活与保护性免疫应答相关的抗原表位，值得深入探讨的问题。是
叉反应，明糖蛋白主要存在于虫卵和童虫说

P_糖蛋白的生理作用及中药对其影响的研究进展

朴达 (valspodar ,PSC 833) 、比立考达 ( biricodar ,V X2 710) 等。其中比较具有代表性的是伐司朴达和比立
P2gp 主要定位在脑毛细血管内皮细胞与血液考达。第三代 P2gp 抑制剂通过构效关系和组合化
循环接触的腔膜面上 (即毛细血管内皮细胞的顶端学技术来弥补第二代 P2gp 抑制剂的不足 ,主要有 :
剂、calcein 和罗丹明 123 等。
( + / + ) 小鼠脑浓度高 87 倍。当 BBB 上不存在 P2
P2gp 的药物外排作用主要有 4 大特点 : (1) P2 gp 时 ,伊维菌素和环孢霉素 A (Acyclosporin CsA) 在
gp 的作用底物广泛 ; (2) 2 种 P2gp 底物可以与 P2gp 脑中的浓度增加 ,即可通过 BBB 。BBB 处的 P2gp 具
合物 ,调节 A TP 的产生 ,使 P2gp 利用 A TP 水解的全量的伊维菌素喷洒 ,许多 mdrla (2/ 2) 小鼠死亡 ,而
能量将疏水亲脂性药物泵出胞外。P2gp 也能转运 mdrla ( + / + ) 小鼠和 mdrla ( + / 2) 小鼠没有死
其他外源性化合物 ,包括地高辛、多环芳烃、阿片制亡。[3H]伊维菌素在 mdrla (2/ 2) 小鼠脑浓度比 mdrla
BCECs 摄取[3H]CsA 大约增加 3 倍。当静脉给予 P2 4. 2 单味中药对 P2gp 的影响田晖等[15 ] 研究发
gp 抑制剂维拉帕米 1 mg/ kg 时 ,长春新碱在脑细胞现防己、北豆根等的有效成分之一汉防己甲素 ( te2
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ

糖组学中糖蛋白糖链的研究技术及进展

糖组学中糖蛋白糖链的研究技术及进展1988年牛津大学Dwek教授在Annual Review of Biochemistry上发表了题为“Glycobiology” (糖生物学) 的综述，首次提出了糖生物学这一概念，标志着糖生物学这门学科的诞生[1]。

在十几年后，糖生物学在糖链结构、生物合成、生理功能等方面取得了极大地进展。

作为第3种生命信息分子的糖链正越来越受到重视，于是糖组学被誉为是继基因组学和蛋白质组学后的第三领域。

糖组是指细胞内所有的糖链，包括糖复合物[2]。

糖组学是研究糖链的表达、调控和生理功能的科学，通过研究糖链确定基因所携带的遗传信息与功能之间的关系。

糖组学的研究依赖于糖组研究技术的发展，其中糖蛋白和糖链的研究技术比较成熟，本文主要对这两方面进行综述。

1.糖组学研究的内容及意义基因对生命活动的调控是由基因所编码的蛋白质及其所合成的糖链和脂类来体现的，因此基因功能的阐明不仅需要基因组学的研究，还必须开展蛋白质组学和糖组学的研究。

糖链、核酸和蛋白质都是生物大分子，但是糖链的结构远比核酸和蛋白质复杂，这是由于聚糖的糖单位之间糖苷键的链接方式的多样性[3]。

糖链参与几乎所有真核生物的每一生命过程，其功能是复杂而多样的在分子内，糖蛋白糖链影响蛋白质的折叠、溶解度、半衰期、抗原性及生物活性等。

在分子间，糖链可以通过糖基化影响蛋白的功能，更重要的是还与信号传递、细胞通讯密切相关。

.糖与糖之间的相互作用介导细胞-细胞相互作用也被证实.因此糖组学的重要研究内容之一就是作为信息分子的糖类如何在细胞识别和信号传导中发挥作用[4]。

为了研究糖类在细胞识别和信号传导中的作用首先要完成4个方面：什么是基因编码糖蛋白，即基因信息；实现被糖基化的位点，即糖基化信息；聚糖结构，即结构信息；糖基化功能，即功能信息[5]。

目前预测细胞内超过５０％的蛋白质为糖蛋白，在这些糖蛋白中蛋白质是生理功能的主要承担者，而糖链则通过改变蛋白质的折叠方式、生物活性、溶解度、疏水性、聚合、降解、电荷、粘度及质量，对蛋白质的功能起修饰作用。

糖蛋白药理研究进展

Ａｎｌ．０４Ｄｃ９（）：６０—１３ａ２０ｅ；９６１３ｇ６７
ｇｉｇａｄｍｎｙｔｅｔ．ｅｔＡｎｌ．０５Ｎｖ１１（：ｏｎｂｏｉａｈｓｒｃｏｌｅｍｙＡｎｓａ２０ｏ；０５）ｈｇ
的清除作用。任国艳研究发现，海蜇口腕部糖蛋白可以清除自由基，提高机体免疫力。张艳研究发现裸燕麦糖蛋白
对邻苯三酚自氧化产生的０、ｅｔｎ系产生的・Ｈ、ＰＦｎｏ体ＯＤ—
Ｐ自由基均能有效清除，Ｈ并呈一定的剂量效应关系Ｊ。钟
ｖｍｉｎｒａｍｅｔｙｄｏｅｉｏｒｏｄｎｅｔｏｏｔｇｔｅｔｎｂｒｐｒｄｌｏｎａｓｎｒｎ．Ａｎｓｈｓｏｏｙｉｅｔｅｉｌｇ．
ｐｔｎｓｈｓｒｔｉｌｉｄｒｋｓｏｅｆｒｔｅｐｅｉｔｏｆｐｓ— ａｉｔｉｔｙｗｉａｓｍｐｉｅｉｃｒｏｒｄｃｉｎｏｏｔｅｏｈｆｓｈ
洁研究发现蒲公英糖蛋白粗品可以有效的清除ＤＰ・、ＰＨ０・・Ｈ自由基，和Ｏ具有较强的还原能力，并且可以有效
连构成的分子。是生物体内重要的一类大分子，种类繁多，
分布广泛，具有多种重要功能。从天然植物中分离得到的
２０ｕ；０（：０４—１００５Ｊｎ１２６）１９０
１ＧａＪｃｏ，ｈｉｐＢＫ．ｒｎｏｚｄ，ｏｂｅ— ｂｉｄｓｕｙｏ１ｎＴ，ｏｐＡＰｌｉＡａｄｍｉｅｄｕｌｌｔｄｆｎ

生物技术通报BIOTECHNOLOGY BULLETIN2009年第3期·综述与专论·收稿日期：2008-09-18作者简介：郭慧（1983-），女，在读硕士研究生，研究方向：动物分子生物学；E -mail ：hupoahui@ 通讯作者：张映（1954-），女，教授，研究方向：动物分子生物学糖蛋白广泛存在于生物体内，具有很多重要功能。

糖蛋白作为细胞信息功能的承担者，既是激素、凝集素、酶、毒素、病毒和细菌等的识别点，又是细胞表面抗原、糖分化抗原和癌发育抗原。

糖蛋白上的糖链好像细胞表面的天线，是细胞相互识别、粘着、信号接收、免疫应答、接触抑制、细胞分化、增殖以及受体功能等的分子基础[1]。

1糖蛋白的结构糖蛋白是由长度较短，带分支的寡糖与多肽链共价连接而形成。

糖蛋白的糖链可以是直链和分支链，糖基数一般1～15个左右，但也有含20个糖基的巨寡糖。

不同糖蛋白分子中，其糖链数目不等，分布亦不均。

如膜糖蛋白的糖链全部分布在暴露于膜外侧面的肽链上，理论上讲，糖链有无数种结构形式[2]。

然而，生物体内有某种限制因素，使实际存在的糖链类型大减，分为两类糖链，即N -连接的糖链和O -连接的糖链。

1.1N -连接的糖链N -糖链根据五糖核心结构（N -连接的糖蛋白链均含此结构）连接其它糖的情况，可分3类：高甘露糖型：寡糖链只含有甘露糖和N -乙酰氨基葡萄糖，而且只有甘露糖连接在五糖核心区上，如卵蛋白。

复杂型：寡糖链除含有甘露糖和N -乙酰氨基葡萄糖外，还有半乳糖、岩藻糖和唾液酸等。

杂合型（混合型）：既有高甘露糖链，又有N -乙酰氨基半乳糖链连在五糖核心结构上。

1.2O -连接的糖链O -连接的糖链存在多种形式，其结构共同点是由一个或少数几种单糖与某些含羟氨基酸连接，不存在共有的核心结构。

但在O -乙酰半乳糖胺（O -Gal NAC ）连接的糖链中已发现有4种核心结构，研究最多的是粘蛋白血浆蛋白和膜蛋白[3]。

P-糖蛋白诱导作用的研究进展

收稿日期２０１７０９０４通信作者Ｔｅｌ：０２５－８３２７１１２８Ｅｍａｉｌ：ｇｕａｎｇｊｉｗａｎｇ＠ｈｏｔｍａｉｌｃｏｍＴｅｌ：１３９１５９９０９０７Ｅｍａｉｌ：ｊｇｓｕｎ＠ｃｐｕｅｄｕｃｎ
基金项目国家自然科学基金资助项目（Ｎｏ８１７７３９８７，Ｎｏ８１５３００９８）；“重大新药创制”国家科技重大专项资助项目（Ｎ１０１００１）
ｄｏｉ：１０．１１６６５／ｊ．ｉｓｓｎ．１０００－５０４８．２０１８０１０４
引用本文许悦，陈根富，熊涛，等Ｐ糖蛋白诱导作用的研究进展［Ｊ］．中国药科大学学报，２０１８，４９（１）：２６－３３Ｃｉｔｅｔｈｉｓａｒｔｉｃｌｅａｓ：ＸＵＹｕｅ，ＣＨＥＮＧｅｎｆｕ，ＸＩＯＮＧＴａｏ，ｅｔａｌＲｅｓｅａｒｃｈｐｒｏｇｒｅｓｓｏｆＰｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎｉｎｄｕｃｔｉｏｎ［Ｊ］．ＪＣｈｉｎａＰｈａｒｍＵｎｉｖ，２０１８，４９（１）：２６－３３
ＲｅｓｅａｒｃｈｐｒｏｇｒｅｓｓｏｆＰｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎｉｎｄｕｃｔｉｏｎ
ＸＵＹｕｅ１牞２牞ＣＨＥＮＧｅｎｆｕ２牞ＸＩＯＮＧＴａｏ２牞ＰＥＮＧＹｉｎｇ１牞ＲＵＡＮＴｉｎｇｔｉｎｇ１牞２牞ＷＡＮＧＧｕａｎｇｊｉ１牞ＳＵＮＪｉａｎｇｕｏ１
１ＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＤｒｕｇＭｅｔａｂｏｌｉｓｍａｎｄＰｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃｓ牞ＣｈｉｎａＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ牞Ｎａｎｊｉｎｇ２１０００９牷２ＤＭＰＫＳｅｒｖｉｃｅｓＤｅｐａｒｔｍｅｎｔ牞ＷｕＸｉＡｐｐＴｅｃ牗Ｓｈａｎｇｈａｉ牘Ｃｏ牞Ｌｔｄ牞Ｓｈａｎｇｈａｉ２００１３１牞Ｃｈｉｎａ
ＴｈｉｓｓｔｕｄｙｗａｓｓｕｐｐｏｒｔｅｄｂｙｔｈｅＮａｔｉｏｎａｌＮａｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅＦｏｕｎｄａｔｉｏｎｏｆＣｈｉｎａ牗Ｎｏ８１７７３９８７牞Ｎｏ８１５３００９８牘牞ａｎｄｔｈｅＮａｔｉｏｎａｌＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙＭａｊｏｒＰｒｏｊｅｃｔｆｏｒＳｉｇｎｉｆｉｃａｎｔＮｅｗＤｒｕｇＣｒｅａｔｉｏｎ牗Ｎｏ２０１５ＺＸ０９５０１００１牞Ｎｏ．２０１７ＺＸ０９１０１００１牘

糖蛋白抗肿瘤作用及其机制的研究进展

在海洋天然产物的开发与研究中，人们发现有许多具有生物活性的糖蛋白，些糖蛋白具有结构新、这活性强的特点，抗肿瘤、菌、在抗免疫调节以及免抑制等方面起着非常重要的作用。糖蛋白为糖链和蛋白质的共价复合物，其糖蛋白在生物体内种类较多，泛地分布在动物、物、广植微生物中，离或结合状态广泛存在于细胞内外。蛋白糖链以游糖具有高度不均一性。一般情况下，糖所占的比例跟蛋白部分相比较小。糖蛋白中糖类和蛋白类的相互作用参与了许多生理和病理过程，在生物体内其蛋白质是生理功能的主要承担者，链对蛋白质的功能起修饰作用『糖１白质糖基化＿。蛋
宁夏农！．：ｉｉＪｎｇａｕａｏＡａｄＦｒ．三ｅ
鱼！！！！二
糖蛋白抗肿瘤作用及其机制的研究进展
王慧昀，吴杰连袁野，
江西科技师范大学，西南昌３０１江３０３
修饰是最重要的翻译后修饰之一，许多蛋白质功能的实现
年备受重视，但糖链结构的复杂和分析工具的缺乏阻碍了
研究的进展［然而蛋白质组学和糖组学的技术发展已使糖３１，
蛋白和糖链的定量成为可能蛋白质组学和糖组学正逐渐。与肿瘤生物标记物的选择和肿瘤侵袭转移研究相结合，推动抗肿瘤医学的发展和临床转化圈。在肿瘤细胞中，糖蛋白和糖链变化有多种形式，细胞如

P糖蛋白在不同组织中的分布与功能研究进展

P糖蛋白在不同组织中的分布与功能研究进展聂昊;王晖【摘要】P糖蛋白(P-gp)作为一种ATP结合盒转运载体蛋白在许多组织中均有分布.P-gp不仅与多药耐药密切相关,而且在维持机体平衡、保护组织器官中也发挥着重要作用,具有多重生理功能,有望成为诸多疾病的诊断指标与治疗靶点.本文就P-gp在人体不同组织中表达与功能的研究现状做简要介绍,阐述P-gp在不同组织中的含量、分布与功能,并从结构、转运机制以及单核酸多态性角度进行分析和解释.%P-glycoprotein (P-gp) , as an ATP-binding cassette (ABC) transporter, plays an important role in multidrug resistance (MDR) , maintenance of the body balance and protection of the human tissues. P-gp processes multiple physiological functions, and may become the new diagnosis index and therapeutic target for many diseases. In this paper, we review the recent study on the expression and function of P-gp in different human tissues, and illuminate P-gp from structure, transport mechanism as well as single nucleotide polymorphisms (SNP).【期刊名称】《广东药学院学报》【年(卷),期】2012(028)004【总页数】5页(P456-460)【关键词】P糖蛋白;多药耐药;单核酸多态性【作者】聂昊;王晖【作者单位】广东药学院中药学院,广东广州510006;广东药学院中药学院,广东广州510006【正文语种】中文【中图分类】Q71P糖蛋白(P-glucose protein,P-gp)是一种ATP依赖性膜转运体，在人体内由多药耐药(multi-drug resistance,MDR)基因MDR1编码，属于ABC(ATP-binding cassette，三磷酸腺苷结合盒式结构)转运蛋白超家族[1]。

P—糖蛋白介导的心血管系统药物相互作用研究进展

P—糖蛋白介导的心血管系统药物相互作用研究进展P-糖蛋白（P-gp）是一种依赖ATP的外排转运蛋白，可将药物由细胞内泵出细胞外，对药物在人体的吸收、分布、代谢、排泄等产生重要影响。

P-gp的底物、抑制剂及诱导剂普遍存在于常用药物中，当药物合用时，某些药物通过抑制或诱导P-gp而与合用的药物发生相互作用，使药物的清除率或生物利用度发生改变，增强或减弱疗效。

因此合理利用P-gp介导的药物相互作用，对临床联合用药有着重要的指导意义。

标签：p-糖蛋白；药物相互作用；地高辛；维拉帕米；他林洛尔P-gp是一种分子量170KD的细胞内组织特异性转运蛋白，是由ATP结合盒B亚家族成员1转运蛋白（ABCB1）基因编码的产物。

P-gp由1280个氨基酸残基组成，具有12个跨膜区和2个ATP结合位点，其结构类似通道蛋白，具有膜转运蛋白的功能，主要定位于肝脏、肾脏、脑毛细血管、胎盘、胃肠道的上皮细胞膜表面[1]。

P-gp是一种ATP能量依赖性跨膜外排泵，通过ATP供能，将细胞内的药物泵出细胞外，阻止有毒代谢产物经肠道和血脑屏障被吸收，并将其排泄至肝脏和肾脏，降低细胞内药物浓度。

作为一种药物外排泵，P-gp的外排作用具有底物广泛性、ATP依赖性、竞争性及饱和性等特点。

药物的相互作用是指药物与药物之间、药物与食物之间发生物理、化学、生物的相互作用，导致药理作用减弱或增强的现象[2]。

有益的相互作用可以增强药物疗效，减少不良反应及费用，而有害的药物相互作用可能导致治疗失败，对于一些治疗指数很低的药物，甚至会导致药物蓄积，产生严重后果。

药物的相互作用可发生在药物吸收、分布、代谢和排泄的各个环节，其机制较复杂，目前已证实代谢酶、转运蛋白及受体与之相关[3]。

临床上常见的转运蛋白包括P-gp，乳腺癌耐药蛋白（BCRP），多药耐药性相关蛋白（MRP）等。

作为一种膜转运蛋白，P-gp的表达可被抑制或诱导，由于其底物、抑制剂及诱导剂普遍存在于常用药物中，所以当底物与抑制剂或诱导剂合用时，可产生转运体水平上的药物相互作用，由此引起的药物疗效不佳或中毒反应不容小觑。

汉坦病毒糖蛋白的结构及功能研究进展

中图分类号：Ｒ７．３３９３文献标志码：Ａ文章编号：１０５７（０２００６００５．６３２１）４．０３— ４
Ｒｅｅｒｈａａｅｎｔｕｔｅａｄｆｎｃｉｎｏａａｉｕｌｃｐｒｔｉｓａｃｄｖｎｃｓｉｓｒｃｕｒｎｕｔｏｆｈｎｔｖｒｓｇｙｏｏｅｎ
汪第一次分离出病原体后，今已发现有十几种血至清型或二十几种基因型，中汉滩病毒（ａｔａｉ其Ｈｎａｎｖｒ，ＴＶ）多布拉戈．尔格莱德病毒（ｏｒｖ．１ＨＮ、２３贝ＤｂａａＢｌｒｄｉｓＤＢ、城病毒（ｅｕｉｓｅａｅｖｕ，ＯＶ）汉ｇｒＳｏｌｒ，ｖｕＳＯ、马拉病毒（ｕｍｌｉｓＰＵ等主要ＥＶ）普Ｐｕａａｖｕ，ＵＶ）ｒ
ＡｂｔａｔＨｎａｉｓｓａｓｕａｉａｅ：ｅｏｒａｉｆｖｒｉｎｌｙｄｏｅ（Ｒ）ａｄｈｎａｉｓｕｍｎｒｓｃ：ａｔｒｅｕｅｈｍｎｄｓｓｓｈｍｒｇｅｔｒａｓｎｒｍＨＦＳｎａｔｒｌｏａｒｖｕｃ２ｅｈｃｅｗｈｅｖｕｐｙｓｎｒｍｅＨＳ．ｈｅｂａｅｇｃｐｏｉｉａｐｒｎｓｕｔｒｒｔｎｏａｔｉｓｈｓｅｉｉｍｉｙｉｔ — ｙｄｏ（Ｐ）Ｔｅｍｒｎｌｏｒｅｎｉｏｔｔｔｃａｐｏｅｆｎｖｒ．Ｔｉｒｖｗｗｌａｌｒｍｙｔｎｓｍａｒｕｌｉｈａｕｅｌｎｎｏ

糖组学中糖蛋白糖链的研究技术及进展

糖组学中糖蛋白糖链的研究技术及进展1988年牛津大学Dwek教授在Annual Review of Biochemistry上发表了题为“Glycobiology”(糖生物学) 的综述，首次提出了糖生物学这一概念，标志着糖生物学这门学科的诞生[1]。

在十几年后，糖生物学在糖链结构、生物合成、生理功能等方面取得了极大地进展。

作为第3种生命信息分子的糖链正越来越受到重视，于是糖组学被誉为是继基因组学和蛋白质组学后的第三领域。

糖组是指细胞内所有的糖链，包括糖复合物[2]。

糖组学是研究糖链的表达、调控和生理功能的科学，通过研究糖链确定基因所携带的遗传信息与功能之间的关系。

糖组学的研究依赖于糖组研究技术的发展，其中糖蛋白和糖链的研究技术比较成熟，本文主要对这两方面进行综述。

1.糖组学研究的内容及意义基因对生命活动的调控是由基因所编码的蛋白质及其所合成的糖链和脂类来体现的，因此基因功能的阐明不仅需要基因组学的研究，还必须开展蛋白质组学和糖组学的研究。

糖链、核酸和蛋白质都是生物大分子，但是糖链的结构远比核酸和蛋白质复杂，这是由于聚糖的糖单位之间糖苷键的链接方式的多样性[3]。

糖链参与几乎所有真核生物的每一生命过程，其功能是复杂而多样的在分子内，糖蛋白糖链影响蛋白质的折叠、溶解度、半衰期、抗原性及生物活性等。

在分子间，糖链可以通过糖基化影响蛋白的功能，更重要的是还与信号传递、细胞通讯密切相关。

.糖与糖之间的相互作用介导细胞-细胞相互作用也被证实.因此糖组学的重要研究内容之一就是作为信息分子的糖类如何在细胞识别和信号传导中发挥作用[4]。

为了研究糖类在细胞识别和信号传导中的作用首先要完成4个方面：什么是基因编码糖蛋白，即基因信息；实现被糖基化的位点，即糖基化信息；聚糖结构，即结构信息；糖基化功能，即功能信息[5]。

目前预测细胞内超过５０％的蛋白质为糖蛋白，在这些糖蛋白中蛋白质是生理功能的主要承担者，而糖链则通过改变蛋白质的折叠方式、生物活性、溶解度、疏水性、聚合、降解、电荷、粘度及质量，对蛋白质的功能起修饰作用。

糖蛋白生物活性研究综述

医药学以及食品科学的工作者从事这一领域的研究。
关键词：糖蛋白：物技术：体生生物
中图分类号：３Ｑ５
文献标识码：Ａ
文章编号：０５４５（０９０ — ０１Ｏ１０ — ６０２０）４０３一２
ＢｉｌｇｃｌｔｖｔｆＧｌｃｐｒｔｉＳｎｔｓｓｏｏｉａｉｉｙｏｙｏｏｅｎｙｈｅｉＡｃ
（）１糖蛋白提取与纯化研究。物糖蛋白主要是从自然植界中的植物中提取分离得到的，由于糖蛋白类物质的特殊性，目前还没有具有针对性的提取方法，多采用与植物多糖或蛋白质相类似的提取方法。由于糖蛋白是极性很强的亲水
６总结
对糖蛋白结构研究的方法还有很多，但是因为糖蛋白结构的复杂性，至今还没有一种有效的研究糖蛋白全结构的
的延长而逐渐上升，现蕾期含量基本稳定，对也较高。在相
３结论
（）从拉巴豆粗蛋白质含量和产量综合考虑，现蕾期１
１糖蛋白研究的现状
糖蛋白是一类十分重要的糖复合物，９３年首次被１７
２糖蛋白的组成
糖蛋白含有几乎所有的氨基酸，其中苏氨酸五、丝氨
Ｍｎｅｉｏｔｕ在其著作中提出的，ｒｌ他将糖复合物划分为糖蛋白和糖脂大类。１０年美国生物化学家协会的蛋白９８质命名协会
参考文献
… 陈惠黎。１王克夷．糖复合物的结构和功能【．上海医科大学Ｍ】上海
出版社，９７８ — ５．１９：５２４

糖蛋白抗肿瘤研究进展

老等显著的药用功效和保健功能Ｉ。】］
糖蛋白能够抗肿瘤主要有两方面的原因，方面是糖蛋一白能够提高免疫力，增强机体各方面的功能，而达到抗肿来从瘤的目的；一方面糖蛋白抗肿瘤主要是能够抑制肿瘤细胞，另诸多的细胞实验能够证明。笔者对国内外天然提取的糖蛋白在抗肿瘤实验的研究现状做一综述。
止抗体的识别。糖蛋白具有调解和开关激素功能、内转运胞
量对小鼠ｓ。抑瘤率高达７以上。２祝雯等［从河蚬水溶性蛋白中分离纯化了一种命名为５
ＣｐＦ —ａ的碱性糖蛋白，Ｔ结果显示，Ｆ —ａ对ＢＬ４４ＭＴＣｐＥ７０癌细胞生长具有抑制作用。中国海洋大学管角螺肌肉用盐水浸提，ＤＡＥｃｌ — 经Ｅ — ｅｌｕ
糖蛋白抗肿瘤研究进展
吕克凡高世勇
糖蛋白是由一个或多个寡糖链通过不同连接方式与蛋白质部分的多肽骨架共价相连而成。在生物体内的糖蛋白种类繁多，泛存在于动物、物和某些微生物中，生物体内它广植在以不同形式存在而发挥作用，细胞膜、胞问基质、浆、是细血粘液、素等的重要构成成分。糖蛋白中糖链维持蛋白质结构激稳定，抗蛋白酶水解，与多肽链在内质网的折叠启动及防抵参

抗β2：糖蛋白1抗体

抗β2：糖蛋白1抗体概述糖蛋白1（CD55）是一种细胞表面蛋白质，它在调节免疫反应和保护细胞免受自身免疫攻击方面起着重要作用。

抗β2：糖蛋白1抗体是针对糖蛋白1的单克隆抗体，被广泛用于疾病诊断和治疗中。

本文将介绍抗β2：糖蛋白1抗体的作用机制、临床应用和研究进展。

作用机制抗β2：糖蛋白1抗体能够结合糖蛋白1，从而阻止其与激活的免疫盾牌分子（如C3b和C4b）结合，减少溶血素的识别和调节，进而抑制细胞溶解作用。

此外，抗β2：糖蛋白1抗体还能够通过激活补体系统、促进天然杀伤细胞的ADCC （抗体依赖性细胞介导毒性）来发挥免疫调节作用。

临床应用1. 自身免疫性疾病抗β2：糖蛋白1抗体在治疗自身免疫性疾病方面表现出色。

例如，在临床实践中，抗β2：糖蛋白1抗体被广泛用于治疗免疫性溶血性贫血、自身免疫性血小板减少性紫癜等疾病。

2. 移植排斥反应由于抗β2：糖蛋白1抗体可抑制补体系统的活化，因此在器官移植等领域也有应用。

研究表明，使用抗β2：糖蛋白1抗体可有效减少移植物的排斥反应，提高移植成功率。

3. 抗癌治疗近年来，研究人员还发现抗β2：糖蛋白1抗体在抗癌治疗中具有潜力。

该抗体被认为能够增强免疫细胞对癌细胞的杀伤作用，使其成为一种有前景的免疫疗法。

研究进展随着对抗β2：糖蛋白1抗体作用机制的深入研究，人们发现不同的次型抗体可能在免疫调节过程中扮演不同的角色。

此外，针对抗β2：糖蛋白1抗体的改良和优化也成为了当前的热点研究方向，以提高其临床应用效果。

结论抗β2：糖蛋白1抗体作为一种重要的免疫治疗药物，展现出了广泛的应用前景。

在未来的研究和临床实践中，我们有望看到更多关于这一抗体的新突破，为疾病治疗带来更多可能性。

人类血小板膜糖蛋白GPⅠbα研究进展

人类血小板膜糖蛋白GPⅠbα研究进展血小板粘附和血栓形成在正常止血中，以及在急性冠状动脉综合征和血栓形成病变的发病机理中起主要作用。

血管内皮细胞破裂后，血管性血友病因子(vWF)结合在血管内膜下，血小板被初始捕获，在高剪切力流体条件下，血小板膜糖蛋白GPIb/Ⅸ/Ⅴ复合物与血管性血友病因子之间可逆性粘附[1]。

GPIb/Ⅸ/Ⅴ复合物由4个多肽构成，分别为GPIbα、GPIbβ、GPⅨ和GPⅤ，均属于富含亮氨酸重复序列的跨膜蛋白，是vWF的血小板受体，和其他分子共同参与止血和血栓形成[2]。

其中，最大的多肽GPIbα行使完全的配体结合功能，GPIbα可以和固着的vWF相互作用，高剪切力激活是血小板黏附于血管壁的关键，GPIbα和vWF 的黏附对抗快速血流的流体动力学引发血栓形成和促进血小板的激活，阐明GPIbα功能将有助于对预防动脉血小板栓塞的探讨[3]。

现对人类血小板膜糖蛋白GPⅠbα的结构功能及其临床意义做如下综述：1 GPⅠbα重要的结构特点血小板GPIb受体是一种由GPIbα和GPIbβ二硫化物亚单位组成的异质二聚体,与GPV和GPIX, 在血小板膜上形成了约25000拷贝GPIb-V-IX复合物。

复合物的四个成员属于亮氨酸富集基序家族,其序列是以短串联亮氨酸重复片段(LRRs)为主要特征[4]。

糖蛋白GPIba是由位于17号染色体的基因编码，是糖蛋白Ib/IX/V受体复合物最主要的配体结合亚单位,具有所有已知的细胞外配体结合位点[5]。

糖蛋白Iba包含细胞外球状区域N末端的8个富含亮氨酸串联重复序列（LRRs），3个阴离子硫酸化酪氨酸残基序列,一个高度糖基化的巨糖肽核心区域,以及横跨膜序列和胞质C末端尾巴，与vWF结合的位点已被定位于GPⅠbα的N-末端45 kD结构域[6]。

分离出来的GPⅠbα结构域呈现出一个细长的形状，有一个凹面和一个凸面，通过不同的结构形成两个末端之间的侧面。

N-末端部分存在一个类似手指的β-发夹结构，它以一个Cys4和Cys17之间的二硫键定位在底部；C-末端部分包含一个α-螺旋和一个长环，其中的两个二硫键分别在Cys209-Cys248和Cys211-Cys264[7]。

P糖蛋白抑制药逆转肿瘤多药耐药的研究进展

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ｄｒｕｇｓｗｉｔｈｉｎｔｒａｖｅｎｏｕｓｌｙａｄｍｉｎｉｓｔｅｒｅｄｍａｇｎｅｔｉｃｌｉｐｏｓｏｍｅｓｉｎ［Ｊ］．ＩｎｔＪＯｎｃｏｌ，２０００，１７（２）：ｏｓｔｅｏｓａｒｃｏｍａｂｅａｒｉｎｇｈａｍｓｔｅｒｓ３０９－３１５．［１１］ＧｒｕｔｔｎｅｒＣ，ＲｕｄｅｒｓｈａｕｓｅｎＳ，ＴｅｌｌｅｒＪ．Ｉｍｐｒｏｖｅｄｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓｏｆｍａｇｎｅｔｉｃｐａｒｔｉｃｌｅｓｂｙｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎｏｆｄｉｆｆｅｒｅｎｔｐｏｌｙｍｅｒｍａｔｅｒｉａｌｓａｓ［Ｊ］．ＪＭａｇｎＭａｇｎＭａｔｅｒ，２００１，２２５（１２）：１－７．ｐａｒｔｉｃｌｅｍａｔｒｉｘ
１０］Ｚｏｓｕｑｕｉｄａｒ（ＬＹ３３５９７９）为环丙基二苯并环庚烷衍生物［，
。
是高效、高选择性的Ｐｇｐ抑制药，它对Ｐｇｐ有很高的亲和力，
１０～１００ｎｍｏｌ · Ｌ浓度时就能够逆转由Ｐ在体外实验中它在５
依赖型转运蛋白家族，具１２８０个氨基酸，相对分子量
４］１７００００～１８００００。Ｐｇｐ最先在ＭＤＲ肿瘤细胞中被发现［，它

植物糖蛋白的提取及其生物活性研究进展

Ｃｍｍｒ，ｉｊ０１４ＣｉａｏｅｃＴａｉ３０，ｈｎ）ｅｎｎ３
Ａｂｓｒｃ：ｉａｅｕｔａｔＴｈｓｐｐｒｓｍｍａｉｅｈｅｅｏｍｅｔｆｈｘｒｃｉｎａｄｐｒｆｃｔｏｆｔｅｐａｔｇｙｏｒｔｉｎｒｚｓｔｅｄｖｌｐｎｅｅｔａｔｏｎｕｉｉａｉｎｏｈｌｎｌｃｐｏｅｎｉｏｔｒｃｎｅｒ，ｓｗｅｌｓｉｓｂｏｏｉａｃｉｉｉｓａｄｐｙｉｌｇｃｌｕｃｉｎｏｄｆｒｎｌｎｓｓｕｃｓｅｅｔａａｌａｉｌｇｃｌｔｖｔｎｈｓｏｏｉａｎｔｓｆｍｉｅｅｔａｔｏｒｅ．ｙｓｔａｅｆｏｒｆｐＫｅｒｓｇｙｏｒｔｉ；ｌｎ；ｘｒｃｉｎｂｏｃｉｉｉｓｙｗｏｄ：ｌｃｐｏｅｎｐａｔｅｔａｔ；ｉａｔｖｔｏｅ
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第１第期卷４３
食品ＩＪ发民研究与开叩Ｗ丌的提取及其生物活性研究进展
张淑媛，吴蕾庞广昌，。任云霞（天津市食品生物技术重点实验室，天津商业大学生物技术与食品科学学院，天津３０３）０１４
（ｉｊｅａｏａｒｏｏｉｅｈｏｇ，ｏｅｅｆｉｅｈｏｇｎｏｄｃｎｅＴａｊｎｅｉＴａｉＫｙｂｒｔｙｆｏｄｏｃｎｌｙＣｌｇｏｅｎｌｙｄｏｉｃ，ｉｉＵｉｒｔｏｎｎＬｏＦＢｔｏｌｏＢｔｏａＦＳｅｎｎｖｓｙｆ
计划项目（重点ｚ２０１）Ｄ０７６作者简介：张淑媛（９５）女（）在读硕士，１８一，汉，研究方向：生物活性

糖蛋白药物的多糖结构解析进展

生物技术进展２０１６年㊀第６卷㊀第４期㊀２４４~２４８ＣｕｒｒｅｎｔＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ㊀ＩＳＳＮ２０９５￣２３４１进展评述Ｒｅｖｉｅｗｓ㊀收稿日期:２０１６￣０４￣２５ꎻ接受日期:２０１６￣０５￣０４㊀基金项目: 十二五国家科技重大专项(２０１４ＺＸ０９２０１０４１)ꎻ河北省科技计划项目(１６２７２４０１Ｄ)资助ꎮ㊀作者简介:刘艳玲ꎬ硕士研究生ꎬ主要从事生物技术药物质量控制研究ꎮＥ￣ｍａｉｌ:ｙａｎｌｉｎｇｌｉｕ２０１０＠１６３.ｃｏｍꎮ∗通信作者:王志明ꎬ高级工程师ꎬ研究方向为生物技术药物研发ꎮＥ￣ｍａｉｌ:138****2037＠１３９.ｃｏｍ糖蛋白药物的多糖结构解析进展刘艳玲ꎬ㊀刘晓志ꎬ㊀赵㊀伟ꎬ㊀王志明∗华北制药集团新药研究开发有限责任公司ꎬ抗体药物研制国家重点实验室ꎬ石家庄０５００１５摘㊀要:细胞表达的治疗性单克隆抗体多数是糖蛋白ꎮ附着在蛋白质上的多糖直接影响蛋白质药物的稳定性㊁生物活性及免疫原性ꎮ因此ꎬ应对糖蛋白产品上的多糖进行充分分析ꎬ以控制产品质量ꎮ然而ꎬ糖蛋白上多糖的复杂性对检测带了艰巨挑战ꎮ介绍了糖蛋白上多糖分析的最新进展ꎬ以及利用凝集素芯片技术的高通量多糖分析法ꎬ重点介绍了用于检测糖基化位点㊁糖链结构和含量的测定分析方法ꎬ以期为糖蛋白药物的研发提供参考ꎮ关键词:治疗性糖蛋白药物ꎻ多糖分析ꎻ凝集素芯片技术ＤＯＩ:１０.３９６９/ｊ.ｉｓｓｎ.２０９５￣２３４１.２０１６.０４.０４ＰｒｏｇｒｅｓｓｏｎＧｌｙｃａｎＡｎａｌｙｓｉｓｏｆＴｈｅｒａｐｅｕｔｉｃＧｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎＬＩＵＹａｎ￣ｌｉｎｇꎬＬＩＵＸｉａｏ￣ｚｈｉꎬＺＨＡＯＷｅｉꎬＷＡＮＧＺｈｉ￣ｍｉｎｇ∗ＳｔａｔｅＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＡｎｔｉｂｏｄｙＲｅｓｅａｒｃｈ＆ＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔꎬＮｅｗＤｒｕｇＲｅｓｅａｒｃｈａｎｄＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔＣｏｍｐａｎｙＬｔｄ.ꎬＮｏｒｔｈＣｈｉｎａＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＣｏｒｐｏｒａｔｉｏｎꎬＳｈｉｊｉａｚｈｕａｎｇ０５００１５ꎬＣｈｉｎａＡｂｓｔｒａｃｔ:Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｍｏｎｏｃｌｏｎａｌａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ(ｍＡｂｓ)ａｒｅｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎｓｐｒｏｄｕｃｅｄｂｙｌｉｖｉｎｇｃｅｌｌｓｙｓｔｅｍｓ.Ｔｈｅｇｌｙｃａｎｍｏｉｅｔｉｅｓａｔｔａｃｈｅｄｔｏｔｈｅｐｒｏｔｅｉｎｓｃａｎｄｉｒｅｃｔｌｙａｆｆｅｃｔｐｒｏｔｅｉｎｓｔａｂｉｌｉｔｙꎬｂｉｏａｃｔｉｖｉｔｙａｎｄｉｍｍｕｎｏｇｅｎｉｃｉｔｙ.Ｔｈｅｒｅｆｏｒｅꎬｇｌｙｃａｎｖａｒｉａｎｔｓｏｆａｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎｐｒｏｄｕｃｔｍｕｓｔｂｅａｄｅｑｕａｔｅｌｙａｎａｌｙｚｅｄａｎｄｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄｔｏｅｎｓｕｒｅｐｒｏｄｕｃｔｑｕａｌｉｔｙ.Ｈｏｗｅｖｅｒꎬｔｈｅｉｎｈｅｒｅｎｔｃｏｍｐｌｅｘｉｔｙｏｆｐｒｏｔｅｉｎｇｌｙｃｏｓｙｌａｔｉｏｎｐｏｓｅｓａｄａｕｎｔｉｎｇａｎａｌｙｔｉｃａｌｃｈａｌｌｅｎｇｅ.Ｔｈｉｓｒｅｖｉｅｗｐｒｏｖｉｄｅｄａｎｕｐｄａｔｅｏｆｒｅｃｅｎｔａｄｖａｎｃｅｓｉｎｇｌｙｃａｎａｎａｌｙｓｉｓꎬｉｎｃｌｕｄｉｎｇｔｈｅｐｏｔｅｎｔｉａｌｕｔｉｌｉｔｙｏｆｌｅｃｔｉｎ￣ｂａｓｅｄｍｉｃｒｏａｒｒａｙｆｏｒｈｉｇｈｔｈｒｏｕｇｈｐｕｔｇｌｙｃａｎｐｒｏﬁｌｉｎｇ.Ｅｍｐｈａｓｉｓｗａｓｐｌａｃｅｄｏｎｃｏｍｐａｒｉｓｏｎｏｆｔｈｅｍａｊｏｒｔｙｐｅｓｏｆａｎａｌｙｔｉｃｓｆｏｒｕｓｅｉｎｄｅｔｅｒｍｉｎｉｎｇｕｎｉｑｕｅｇｌｙｃａｎｆｅａｔｕｒｅｓｓｕｃｈａｓｇｌｙｃｏｓｙｌａｔｉｏｎｓｉｔｅꎬｇｌｙｃａｎｓｔｒｕｃｔｕｒｅａｎｄｃｏｎｔｅｎｔꎬｗｈｉｃｈｗａｓｅｘｐｅｃｔｅｄｔｏｐｒｏｖｉｄｅｒｅｆｅｒｅｎｃｅｆｏｒｒｅｓｅａｒｃｈｏｆｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎｓ.Ｋｅｙｗｏｒｄｓ:ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎｓꎻｇｌｙｃａｎａｎａｌｙｓｉｓꎻｌｅｃｔｉｎｍｉｃｒｏａｒｒａｙ㊀㊀细胞表达的生物技术药物多数是糖蛋白ꎬ包括单克隆抗体㊁重组蛋白㊁融合蛋白㊁生长因子㊁细胞因子㊁酶和激素ꎮ这些药物被用于癌症㊁自身免疫性疾病及其他危及生命的疾病的治疗ꎮ适度糖基化对药物的溶解性㊁稳定性㊁生物活性㊁安全性㊁药代动力学和药效动力学等特征具有重要影响ꎮ药物糖基化不但可以增加药物体外稳定性ꎬ还可以保护蛋白药物免受体内蛋白酶的降解ꎮ非糖基化促红细胞生成素(ｅｒｙｔｈｒｏｐｏｉｅｔｉｎꎬＥＰＯ)较糖基化ＥＰＯꎬ更易受到化学物质㊁ｐＨ变化或是加热引起的变性或降解ꎮ蛋白质糖基化可以影响蛋白药物ＰＫ/ＰＤ特征ꎬ研究显示ꎬ末端半乳糖部分糖基化蛋白ꎬ较末端唾液酸完成糖基化蛋白具有更短的循环寿命ꎮ由于肝细胞表达的唾液酸糖蛋白受体同半乳糖结合ꎬ促进了肝脏对部分糖基化蛋白的清除ꎮ特异性结合末端甘露糖㊁Ｎ￣乙酰葡糖胺(ＧｌｃＮＡｃ)和岩藻糖凝集素样受体ꎬ也可以清除含有上述糖基的糖蛋白药物ꎮ此外ꎬＦｃ片段糖基化对于Ｆｃ和Ｆｃγ受体相互作用至关重要ꎮ人Ｆｃγ受体分为激活型受体(ＦｃγＲＩａ㊁ＦｃγＲＩＩａ和ＦｃγＲＩＩＩａ)及抑制型受体(ＦｃγＲＩＩｂ)ꎮＦｃ片段糖基化影响抗体ＦｃγＲｓ或补体Ｃ１ｑ的亲和常数ꎬ进而影响其免疫功能ꎬ如抗. All Rights Reserved.体依赖性细胞介导的细胞毒作用(ａｎｔｉｂｏｄｙ￣ｄｅ￣ｐｅｎｄｅｎｔｃｅｌｌ￣ｍｅｄｉａｔｅｄｃｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙꎬＡＤＣＣ)㊁抗体依赖性细胞吞噬(ａｎｔｉｂｏｄｙ￣ｄｅｐｅｎｄｅｎｔｃｅｌｌ￣ｍｅｄｉａｔｅｄｐｈａｇｏｃｙｔｏｓｉｓꎬＡＤＣＰ)和补体依赖的细胞毒作用(ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔｄｅｐｅｎｄｅｎｔｃｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙꎬＣＤＣ)ꎮ优化Ｆｃ片段的糖基化ꎬ可以提高治疗性单克隆抗体的药物活性ꎮ１　蛋白质的糖基化修饰蛋白质糖基化是复杂的翻译后修饰过程ꎬ在蛋白特定位点上进行糖基化修饰ꎬ通常修饰位点是天冬酰胺残基(Ｎ￣链接)或是丝氨酸/苏氨酸残基(Ｏ￣链接)ꎬＮ￣链接糖基化修饰通常发生在Ａｓｎ￣Ｘ￣Ｓｅｒ/Ｔｈｒ(Ｘ是非脯氨酸氨基酸)ꎬＯ￣链接糖基化修饰通常发生在丝氨酸(Ｓｅｒ)或苏氨酸(Ｔｈｒ)残基上ꎬ通过Ｎ￣乙酰半乳糖胺(Ｇａｌ￣ＮＡｃ)和Ｓｅｒ/Ｔｈｒ的羟基形成Ｏ￣糖苷键ꎮ蛋白质糖基化过程从内质网开始ꎬ将Ｇｌｃ３Ｍａｎ９ＧｌｃＮＡｃ２糖链添加到Ａｓｎ￣Ｘ￣Ｓｅｒ/Ｔｈｒ序列的Ａｓｎ上ꎮ通过各种糖苷酶修剪ꎬ糖蛋白被运输到高尔基体进行下一步修饰ꎮ通过多次催化修饰ꎬ形成多种Ｎ￣糖链结构ꎬ如高甘露糖ꎬ复杂㊁混合糖等结构ꎮＯ￣链接糖的生物合成ꎬ是在高尔基体内将ＵＤＰ￣ＧａｌＮＡｃ转化为Ｇａｌ￣ＮＡｃꎬ再连接到Ｓｅｒ/Ｔｈｒ残基上ꎮＯ￣ＧａｌＮＡｃ前体的起源不同ꎬ因此产生了８种Ｏ￣ＧａｌＮＡｃ聚糖核心结构ꎬ哺乳动物中常见是其中的４种聚糖核心结构ꎮ蛋白质药物的糖基化通常受到宿主细胞类型和发酵条件(如培养基㊁ｐＨ㊁温度㊁搅拌)的影响ꎮ治疗性蛋白药物通常使用哺乳动物细胞㊁酵母或转基因动物进行生产ꎬ每种宿主系统都具有独特的糖基化机制ꎬ生产的蛋白药物也具有不同的糖基化模式[１ꎬ２]ꎮ哺乳动物细胞(如中国仓鼠卵巢细胞)被广泛用于治疗性糖蛋白的生产ꎮ哺乳动物细胞表达的蛋白可能含有少量非人源多糖ꎬ如高含量甘露糖修饰的Ｎ￣羟乙酰神经氨酸(Ｎｅｕ５Ｇｃ)和末端α１￣３￣半乳醣(α￣Ｇａｌ)ꎮ其他表达系统(转基因植物和转基因动物)可能会产生更多的非人源多糖ꎬ如木糖蛋白多糖㊁Ｎｅｕ５Ｇｃ或末端α￣Ｇａｌꎬ这些多糖的存在可以引起药物的免疫原性反应ꎮ由于复杂的糖基化过程ꎬ在糖基化模式上会存在宏观和微观的异质性ꎮ宏观异质性是指糖基化位点和数量的变化ꎬ而微观异质性是指在特定位点上的糖链结构的变化ꎮ宏观和微观的异质性有助于产生多样性糖基ꎬ虽然其蛋白质氨基酸系列相同ꎬ但糖基化位点㊁糖含量或结构都有可能不同[３]ꎮ治疗性糖蛋白药物糖链异质性的多水平(糖蛋白药物㊁多糖㊁单糖水平)分析面临着诸多挑战ꎮ治疗性糖蛋白药物ꎬ特别是生物仿制药的研发过程中ꎬ通常要联合使用多种方法对其糖基化的性质进行分析ꎬ如糖基化位点㊁糖链结构和数量等ꎮ高效液相色谱法(ＨＰＬＣ)㊁毛细管电泳(ＣＥ)㊁质谱(ＭＳ)㊁等电聚焦(ＩＥＦ)和凝集素芯片法等方法常被用于完整糖蛋白㊁糖肽多糖㊁多糖和单糖分析[４]ꎮ可以直接对完整糖蛋白多糖的一般模式和异质性进行分析ꎮ可以使用电喷雾电离－飞行时间质谱(ＥＳＩ￣ＴＯＦ)和反相(ＲＰ)的高效液相色谱或排阻色谱(ＳＥＣ)完成上述检测ꎮＲＰＬＣ￣ＭＳ检测可以为蛋白质检测提供更好的色谱分离ꎬ并在检测完整的单克隆抗体时表现出很高的分辨率[大约(１５００００ʃ１.５)Ｄａ]ꎬ但检测过程需要较高柱温(６０~８０ħ)ꎮ虽然ꎬＳＥＣ￣ＭＳ可以使用非变性或变性流动相在室温条件下工作ꎬ得到高质量的质谱结果ꎬ但是其分辨率比ＲＰ低ꎮＬＣ￣ＥＳＩ￣ＭＳ可以用于更复杂的治疗性蛋白检测ꎬ如促红细胞生成素ꎬ这个产品中包括了１个Ｏ￣糖基化位点和３个Ｎ￣糖基化位点[５]ꎮ而传统ＥＳＩ￣ＴＯＦ￣ＭＳ可以用于分析结构更复杂的异构糖蛋白ꎬ如ｄａｒｂｅｐｏｅｔｉｎ￣α(已知含有５个Ｎ￣糖基化位点)[６]ꎬ但在变性条件下检测仍难以完成ꎬ最近开发的ＯｒｂｉｔｒａｐＥｘａｃ￣ｔｉｖｅＴＭ和高分辨质谱仪联用ꎬ可以在自然条件下得到高度复杂的高分辨的糖链信息[７]ꎬ这项技术的优势在于ꎬ使用水性醋酸铵缓冲液对检测蛋白离子化处理ꎬ使得蛋白处于无电荷的天然折叠状态ꎮ此外ꎬＥＳＩ￣ＭＳ和ＭＡＬＤＩ￣ＭＳ的联合使用可以用于小型完整糖蛋白的多糖分析ꎬ但是质谱的分辨率低[５]ꎮ为了提高分析的灵敏度ꎬ可以将单克隆抗体药物还原为重链和轻链再进行分析ꎮ常使用二硫苏糖醇㊁β￣巯基乙醇㊁半胱胺等还原剂ꎮ另外可以选择木瓜蛋白酶㊁胃蛋白酶㊁ＩｄｅＺ和ＩｄｅＳ将单克隆抗体降解为更小的片段ꎮ木瓜蛋白酶作用于ＩｇＧ铰链区上方ꎬ将ＩｇＧ裂解为３个片段ꎬ２个Ｆａｂ和１个Ｆｃ片段ꎬ胃蛋白酶作用于ＩｇＧ铰链区下方ꎬ将ＩｇＧ裂解为Ｆ(ａｂ )２和降解的Ｆｃ片段ꎮ５４２刘艳玲ꎬ等:糖蛋白药物的多糖结构解析进展. All Rights Reserved.ＩｄｅＺ和ＩｄｅＳ将ＩｇＧ裂解为Ｆ(ａｂ )２和一个完成的Ｆｃ片段[８]ꎮ也可以ＣＥ￣ＭＳ进行糖基异质性分析ꎮ使用ＩＥＦ㊁ＣＥ㊁ｃＩＥＦ或是ＩＥＸ色谱法ꎬ在完整糖蛋白水平上进行蛋白质唾液酸化的异质性分析ꎮ这些方法通常用于质量控制检测ꎻＩＥＦ和ＩＥＸ是传统方法ꎬ但与ＭＳ不兼容ꎮＣＥ和ｃＩＥＦ是新兴技术具有高速㊁高分辨率和ＭＳ兼容等优势ꎬ但毛细血管可能会吸附蛋白质[９]ꎮ２㊀糖蛋白药物中糖基化位点及多糖组成分析㊀㊀利用ＥＳＩ￣ＭＳ或ＭＡＬＤＩ￣ＭＳ对蛋白质的糖基化位点和占有率进行分析ꎮ可以使用这种方法分析很难从肽链上解离的Ｏ￣链接糖基ꎮ通过多肽分析ꎬ可以检测其他翻译后的多糖修饰ꎮ用对蛋白质系列高度特异的蛋白酶ꎬ如胰蛋白酶㊁Ｌｙｓ￣Ｃ或Ｇｌｕ￣Ｃꎬ将糖蛋白降解为适当的片段ꎮ再用多种组合方法对片段进行检测ꎬ例如对ＥＰＯ的检测ꎮ糖蛋白质降解形成糖多肽ꎬ在ＭＳ分析之前ꎬ通常使用ＨＰＬＣ对糖多肽进行分类富集ꎬ以克服因电离子引起的糖肽信号抑制ꎮ可以通过ＨＰＬＣ和ＥＳＩ￣ＭＳ的联合使用实现在线检测ꎬ或使用ＭＡＬＤＩ￣ＭＳ进行离线检测ꎬ现在较为广泛高效使用的ＬＣ￣ＥＳＩ￣ＭＳ可以实现在线检测ꎮ由于共洗脱高丰度糖肽的离子抑制ꎬ使用传统Ｃ１８柱ＲＰＬＣ￣ＭＳ分析检测低丰度糖肽时面临诸多挑战ꎮＨＩＬＩＣ可以更好地分离亲水性糖多肽和常规多肽ꎮ但是ꎬ具有相同质量糖多肽的异构体不能通过这种方法进行分离ꎮ最近ꎬ一种新型纳米ＬＣ￣ＭＳ方法可以用于分离糖多肽异构体ꎮ在包被微流毛细管芯片的多孔石墨碳中ꎬ链霉蛋白酶Ｅ可以将糖多肽异构体的肽链进行非特异性消化ꎬ使肽链的氨基酸残基小于３个ꎬ便于糖多肽的分离和检测ꎮ另一方面ꎬ发酵过程中Ｆｃ糖基化的高通量检测技术得到了发展[１０]ꎮ用结合ＰｒｏｔｅｉｎＡ９６孔板对ＩｇＧ进行纯化ꎬ胰蛋白酶消化糖蛋白ꎬＨＩＬＩＣ提取ꎬ再进行ＥＳＩ￣ＭＳ分析ꎬ这种方法可以不使用ＨＰＬＣ对糖多肽进行分离[１１]ꎮ单电荷离子产生的ＭＡＬＤＩ质谱图相对简单ꎬ因此ＭＡＬＤＩ较ＥＳＩ更适合用于糖肽分析ꎮ但是存在非唾液酸糖肽的衰变对实验的干扰ꎬ需要在ＭＡＬＤＩ￣ＭＳ分析时对样品进行唾液酸衍生处理ꎮ糖肽串联质谱分析可以测定糖肽上的糖基化位点及多糖组成ꎮ最近开发的电子转移解离(ＥＴＤ)技术ꎬ可以裂解肽键对糖蛋白的糖基化位点进行分析ꎮ而碰撞诱导解离(ＣＩＤ)技术ꎬ可以将多糖从糖肽上解离下来ꎬ分析多糖的组成和序列信息ꎮ将这些方法组合在一个ＬＣ￣ＭＳ实验中ꎬ可以得到有效的糖肽序列信息[１２]ꎮＣＥ￣ＭＳ可以在糖肽水平上对其特异结合位点的微观异质性进行有效分析ꎮ传统ＲＰＬＣ￣ＭＳ检测中ꎬ高度亲水性肽可能与ＲＰ色谱基质发生作用ꎬ造成样品在上样和脱盐过程中的丢失ꎮ因此ＣＥ￣ＭＳ可以更好的用于亲水性多肽检测并实现完整的序列覆盖ꎮ３㊀糖蛋白药物中解离多糖的组成分析Ｎ￣糖苷酶Ｆ可以将Ｎ￣链接多糖从糖蛋白上解离下来ꎮ通常使用还原碱性技术将Ｏ￣链接多糖从糖蛋白上释放ꎬ但是ꎬ很难将全部的多糖释放ꎮＭＡＬＤＩ￣ＴＯＦＭＳ对糖链进行快速鉴定ꎬ使用甲基化加强电离的有效性和唾液酸化糖的稳定性ꎮ此外ꎬ酯化唾液酸可以增加唾液酸的稳定性ꎬ同时可以使用ＭＡＬＤＩ￣ＭＳ对不同的唾液酸键(ａ２￣３和ａ２￣６)进行分别检测ꎮ为了方便ＨＰＬＣ和ＭＳ的多糖分析ꎬ通常使用还原胺化反应对多糖进行荧光标记ꎮ最常用的荧光标记物有:２￣氨基苯甲酰胺(２￣ＡＢ)和氨茴酸(２￣ＡＡ)ꎮ２￣ＡＢ缺少负电荷ꎬＨＰＬＣ是数据库建立的金标准ꎬ但是电离效率低ꎮ２￣ＡＡ带有一个负电荷ꎬ适用于ＣＥ和ＭＡＬＤＩ分析ꎮ最近研究表明ꎬ普鲁卡因胺较２￣ＡＢ荧光标记多糖ꎬ具有更好的电离效率和荧光强度ꎬ有利于对应低丰度Ｎ￣链接多糖的分析[１３]ꎮＨＰＬＣ和ＭＳ分析前的纯化步骤有利于多余标签和盐的去除ꎬ他们包括用于标记检测的ＨＩＬＩＣ㊁ＲＰ㊁ＰＧＣ和凝胶过滤等方法[１４]ꎮ使用ＨＩＬＩＣ㊁ＲＰ￣ＨＰＬＣ或阴离子交换ＨＰＬＣ(ＡＥ￣ＨＰＬＣ)等色谱方法对标记的多聚糖进行分离ꎮＨＩＬＩＣ较ＨＰＬＣ方法在分离多糖时ꎬ表现出更好的分辨率ꎮ２￣ＡＢ标记的多糖洗脱同２￣ＡＢ标记的葡聚糖标准(葡萄糖均聚物)进行比较ꎬ葡聚糖标准是一组葡萄糖聚合数已知的物质标准ꎮ这６４２生物技术进展ＣｕｒｒｅｎｔＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ. All Rights Reserved.个信息可以用于计算单糖丰度ꎬ预测糖链结构ꎮ另一方面ꎬ没有荧光标记的Ｎ￣糖链ꎬ可以通过ＨＰＬＣ同ＨＰＡＥＣ￣ＰＡＤ或是ＰＧＣ色谱联用进行分析ꎬ但是方法的耐用性和重复性较差ꎮ荧光标记的解离多糖也可以使用ＣＥ进行分析ꎬ得到高灵敏度和分辨率的分析结果ꎮ低聚糖ＣＥ分析常使用ＡＰＴＳ(或２￣ＡＡ等)作为荧光标记物ꎬ可以用于区分糖链结构的同分异构体ꎮ然而ꎬ只有几个多糖标准有相对应的糖链结构ＣＥ峰信号ꎮ因此ꎬ利用ＣＥ对糖苷外切酶顺序消化的寡糖进行分析ꎬ可以得到更详细的多糖序列信息ꎮＭＳ和ＣＥ￣ＭＳ联用可以对肽和糖型特性进行分析ꎬ但在寡糖分析中的应用有限ꎮ利用ＨＩＬＩＣ㊁ＣＥ和ＨＰＡＥＣ￣ＰＡＤ等７种方法ꎬ对Ｆｃ解离的多糖进行分析ꎬ各种分析方法得到的糖型和含量结果相似ꎮ由于寡糖异构和支链的存在ꎬ对糖链结构的确认带来了挑战ꎮ传统方法是使用糖苷外切酶ꎬ将末端的单糖依次解离ꎬ再用ＨＩＬＩＣ㊁ＣＥ或ＭＡＬＤＩ￣ＭＳ进行分析ꎮ根据不同糖苷酶实验得到的葡萄糖数目㊁消化时间和质谱数据变化ꎬ推测糖链原始结构对于新糖链结构分析ꎬ使用这些方法可以得到有价值的信息ꎬ但是方法耗时长ꎬ且需要高纯度糖苷酶进行糖链消化[１５]ꎮＬＣ￣ＥＳＩ￣ＣＩＤ￣ＭＳ/ＭＳ用于糖链测序ꎬ具有速度快㊁灵敏度高的优势ꎮ使用ＭＳ分析糖苷链方式时ꎬ需要在负离子模式低能量ＣＩＤ条件下ꎬ使用ＥＳＩ￣ＱＴＯＦＭＳ将糖苷环切开ꎮ但是ꎬＭＳ分析不能解决结构异构体及确定糖链的三维结构等问题ꎮ上述问题可以通过核磁共振(ＮＭＲ)和结晶Ｘ射线等方法解决ꎮ核磁共振被用于新糖链信息结构的确认ꎬ但是需要样品量大ꎮ新研发的离子迁移(ＩＭ)ＭＳ技术ꎬ根据分子大小㊁形状㊁电荷情况将其电离为气相ꎬ增加了检测糖链异构体的有效性ꎮ４㊀糖蛋白药物中解离单糖的组成分析释放单糖定量分析可以提供特定末端单糖的含量信息ꎬ如唾液酸㊁甘露糖￣６￣磷酸(Ｍ６Ｐ)㊁Ｎ￣乙酰葡萄糖胺和Ｏ￣连接单糖ꎮ唾液酸残基可以由温和酸水解或神经氨酸酶特异性的水解ꎮ通常使用ＨＰＡＥＣ￣ＰＡＤ对唾液酸进行定量分析ꎮ使用唾液酸标准ꎬ可以完成唾液酸的绝对定量ꎮ将唾液酸进行荧光标记后ꎬ可以进行ＲＰ￣ＨＰＬＣ分析ꎮ对于其他单糖ꎬ通常使用浓酸水解法再用ＨＰＬＣ进行分离ꎮ特别是唾液酸选择性水解后ꎬ通常使用三氟乙酸进行多糖水解ꎬ产生的氨基单糖通常被Ｎ￣乙酰化ꎮ酸水解常见问题是酸性条件下糖链的不完全水解及水解单糖不稳定ꎮ通常使用ＨＰＡＥＣ￣ＰＡＤ进行非唾液酸单糖的定性和定量分析ꎬ并使用２￣脱氧葡萄糖作为这些中性单糖的标准ꎮ５㊀利用凝集素芯片技术解析糖蛋白药物的多糖结构㊀㊀凝集素是一组糖结合蛋白(Ｇｂｐｓ)ꎬ在植物和许多物种中存在ꎬ可以选择性地与蛋白质结合的多糖分子或是解离的多糖分子进行相互作用ꎮ基于这种特性ꎬ人们开发了多糖分析方法ꎬ基于凝集素芯片开发的几种技术平台ꎬ用于治疗糖蛋白药物的多糖分析[１６ꎬ１７]ꎮ特定凝集素被固定到固相载体上(如玻璃载片)ꎬ使用化学物质(如环氧㊁ＮＨＳ酯㊁金或氨基)活化或生物物质(如链霉亲和素)事先将固相载体活化ꎮ凝集素包被后ꎬ使用Ｔｒｉｓ缓冲液或牛血清白蛋白封闭固相载体上残余的活性位点ꎮ将糖蛋白样品在检测芯片上同特定凝集素结合ꎬ通过洗涤程序去除未结合糖蛋白ꎬ再经特定显色技术检测ꎮ这样的操作程序会破坏凝集素和多糖之间的稳态相互作用[１５]ꎮ因为相对于抗原－抗体和生物素－亲和素复合物的高结合性ꎬ凝集素－多糖复合物的结合性相对较弱ꎮ近期开发的荧光系统ꎬ可在没有洗涤过程的情况下对凝集素－多糖相互作用进行实时监控[１８]ꎮ该检测平台已经应用于检测纯化后的糖蛋白㊁粗提取膜蛋白㊁活细胞质膜蛋白质等多种糖蛋白ꎮ有研究比较了３种色谱分析(ＨＰＡＥＣ￣ＰＡＤ㊁２￣ＡＡＨＩＬＩＣ㊁２￣ＡＢＨＩＬＩＣ)和凝集素法用于治疗性单克隆抗体的多糖分析[１９ꎬ２０]ꎮ凝集素法可识别单克隆抗体多糖结构类ꎬ检测结果与其他方法一致[２１]ꎮ已经有商业凝集素芯片(包含４５种不同凝集素)由于检测ＦＤＡ批准多种治疗性糖蛋白药物(含９种单克隆抗体)ꎮ对于治疗性蛋白质药物检测ꎬ凝集素法在检测多糖变异体中具有优势ꎮＭＳ方法需要涉及较多的样品处理步骤ꎬ而凝集素法可直接作用于完整糖蛋白ꎬ且需要样品量小ꎮ７４２刘艳玲ꎬ等:糖蛋白药物的多糖结构解析进展. All Rights Reserved.该凝集素芯片ꎬ与精密的检测系统结合后ꎬ为治疗性蛋白质药物多糖检测提供了一个快速的高通量平台ꎮ但是凝集素法仍面临挑战ꎬ使用凝集素多是天然物质ꎬ可与糖蛋白的亲和力弱ꎬ阻碍了技术的进一步推广ꎮ６　展望蛋白质药物的糖基化复杂性使其分析面临诸多挑战ꎮ糖蛋白类药物的正交方法可用来描述其糖基化特征:①糖含量(中性糖㊁氨基糖和唾液酸)ꎻ②糖链结构ꎬ寡糖模式ꎻ③糖基化位点ꎮ糖蛋白的检测方法取决于检测目的和方法属性ꎮＩＥＦ㊁ＩＥＸ和ＣＥ及其组合方法ꎬ常用于完整性糖蛋白唾液酸类异质性的检测ꎮＨＰＬＣ被广泛用于检测解离的寡糖含量ꎮＭＳ￣ＨＰＬＣ用于检测糖基化位点和糖结构ꎮ然而ꎬ检测低聚糖前需要将糖链解离ꎻ进行检测时ꎬ必须保证多糖的有效解离和方法的适当调整ꎬ以保证多糖的结构没有太大的改变ꎮ新近发展的凝集素芯片技术ꎬ可直接测量完整蛋白多糖的变化ꎬ而无需将其从蛋白质上解离ꎬ这在蛋白质的糖基化方面ꎬ对现有技术是一个有力补充ꎮ参㊀考㊀文㊀献[１]㊀ＣｈｏｉＢＫꎬＷａｒｂｕｒｔｏｎＳꎬＬｉｎＨꎬｅｔａｌ..ＩｍｐｒｏｖｅｍｅｎｔｏｆＮ￣ｇｌｙｃａｎｓｉｔｅｏｃｃｕｐａｎｃｙｏｆｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎｓｐｒｏｄｕｃｅｄｉｎＰｉｃｈｉａｐａｓｔｏｒｉｓ[Ｊ].Ａｐｐｌ.Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ.Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ.ꎬ２０１２ꎬ９５(３):６７１－６８２.[２]㊀ＴｕｒｙａｎＩꎬＨｒｏｎｏｗｓｋｉＸꎬＳｏｓｉｃＺꎬｅｔａｌ..ＣｏｍｐａｒｉｓｏｎｏｆｔｗｏａｐｐｒｏａｃｈｅｓｆｏｒｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅＯ￣ｌｉｎｋｅｄｇｌｙｃａｎａｎａｌｙｓｉｓｕｓｅｄｉｎｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎｏｆｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔｐｒｏｔｅｉｎｓ[Ｊ].Ａｎａｌｙ.Ｂｉｏｃｈｅｍ.ꎬ２０１４ꎬ４４６:２８－３６.[３]㊀ＧａｂｉｕｓＨＪ.Ｇｌｙｃｏｂｉｏｍａｒｋｅｒｓｂｙｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｏｍｉｃｓａｎｄｇｌｙｃａｎｐｒｏｆｉｌｉｎｇ(ｇｌｙｃｏｍｉｃｓ):ｅｍｅｒｇｅｎｃｅｏｆｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｉｔｙ[Ｊ].Ｂｉｏｃｈｅｍ.Ｓｏｃ.Ｔｒａｎｓａｃ.ꎬ２０１１ꎬ３９(１):３９９－４０５. [４]㊀ＬｏｍｂａｒｄｉＡꎬＡｎｄｒｅｏｚｚｉＣꎬＰａｖｏｎｅＶꎬｅｔａｌ..Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎｏｆｔｈｅｏｌｉｇｏｓａｃｃｈａｒｉｄｅｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｏｆｃｏｍｍｅｒｃｉａｌｆｏｌｌｉｃｌｅｓｔｉｍｕｌａｔｉｎｇｈｏｒｍｏｎｅｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎｓ[Ｊ].Ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓꎬ２０１３ꎬ３４(１６):２３９４－２４０６.[５]㊀ＳｅｇｕＺＭꎬＨｕｓｓｅｉｎＡꎬＮｏｖｏｔｎｙＭＶꎬｅｔａｌ..ＡｓｓｉｇｎｉｎｇＮ￣ｇｌｙｃｏｓｙｌａｔｉｏｎｓｉｔｅｓｏｆｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎｓｕｓｉｎｇＬＣ/ＭＳＭＳｉｎｃｏｎｊｕｎｃｔｉｏｎｗｉｔｈｅｎｄｏ￣Ｍ/ｅｘｏｇｌｙｃｏｓｉｄａｓｅｍｉｘｔｕｒｅ[Ｊ].Ｊ.ＰｒｏｔｅｏｍｅＲｅｓ.ꎬ２０１０ꎬ９(７):３５９８－３６０７.[６]㊀ＳｃｈｗａｒｚｅｒＪꎬＲａｐｐＥꎬＲｅｉｃｈｌＵ.Ｎ￣ｇｌｙｃａｎａｎａｌｙｓｉｓｂｙＣＧＥ￣ＬＩＦ:ｐｒｏｆｉｌｉｎｇｉｎｆｌｕｅｎｚａＡｖｉｒｕｓｈｅｍａｇｇｌｕｔｉｎｉｎＮ￣ｇｌｙｃｏｓｙｌａｔｉｏｎｄｕｒｉｎｇｖａｃｃｉｎｅｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ[Ｊ].Ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓꎬ２００８ꎬ２９(２０):４２０３－４２１４.[７]㊀ＭｉｙａｈａｒａＫꎬＮｏｕｓｏＫꎬＭｏｒｉｍｏｔｏＹꎬｅｔａｌ..ＰｒｏｇｎｏｓｔｉｃｖａｌｕｅｏｆａｌｔｅｒｅｄＮ￣ｇｌｙｃｏｓｙｌａｔｉｏｎｏｆｃｉｒｃｕｌａｔｉｎｇｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎｓｉｎｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈｕｎｒｅｓｅｃｔａｂｌｅｐａｎｃｒｅａｔｉｃｃａｎｃｅｒｔｒｅａｔｅｄｗｉｔｈｇｅｍｃｉｔａｂｉｎｅ[Ｊ].Ｐａｎｃｒｅａｓꎬ２０１５ꎬ４４(４):５５１－５５６.[８]㊀ＢｕｃｋＰＭꎬＫｕｍａｒＳꎬＳｉｎｇｈＳＫ.ＣｏｎｓｅｑｕｅｎｃｅｓｏｆｇｌｙｃａｎｔｒｕｎｃａｔｉｏｎｏｎＦｃｓｔｒｕｃｔｕｒａｌｉｎｔｅｇｒｉｔｙ[Ｊ].ｍＡｂｓꎬ２０１３ꎬ５(６):９０４－９１６.[９]㊀ＳｏｎｇＷꎬＭｅｎｔｉｎｋＲＡꎬＨｅｎｑｕｅｔＭＧꎬｅｔａｌ..Ｎ￣ｇｌｙｃａｎｏｃｃｕｐａｎｃｙｏｆＡｒａｂｉｄｏｐｓｉｓＮ￣ｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎｓ[Ｊ].Ｊ.Ｐｒｏｔｅｏｍ.ꎬ２０１３ꎬ９３:３４３－３５５.[１０]㊀ＲｅｕｓｃｈＤꎬＨａｂｅｒｇｅｒＭꎬＭａｉｅｒＢꎬｅｔａｌ..ＣｏｍｐａｒｉｓｏｎｏｆｍｅｔｈｏｄｓｆｏｒｔｈｅａｎａｌｙｓｉｓｏｆｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｉｍｍｕｎｏｇｌｏｂｕｌｉｎＧＦｃ￣ｇｌｙｃｏｓｙｌａｔｉｏｎｐｒｏｆｉｌｅｓｐａｒｔ１:ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ￣ｂａｓｅｄｍｅｔｈｏｄｓ[Ｊ].ｍＡｂｓꎬ２０１５ꎬ７(１):１６７－１７９.[１１]㊀ＬｕＣꎬＷｏｎｓｉｄｌｅｒＪＬꎬＬｉＪꎬｅｔａｌ..Ｃｈｅｍｉｃａｌｌｙ￣ｂｌｏｃｋｅｄａｎｔｉｂｏｄｙｍｉｃｒｏａｒｒａｙｆｏｒｍｕｌｔｉｐｌｅｘｅｄｈｉｇｈ￣ｔｈｒｏｕｇｈｐｕｔｐｒｏｆｉｌｉｎｇｏｆｓｐｅｃｉｆｉｃｐｒｏｔｅｉｎｇｌｙｃｏｓｙｌａｔｉｏｎｉｎｃｏｍｐｌｅｘｓａｍｐｌｅｓ[Ｊ].Ｊ.Ｖｉｓｕａｌ.Ｅｘｐ.ꎬ２０１２ꎬ６３:ｅ３７９１.[１２]㊀ＰａｔｗａＴꎬＬｉＣꎬＳｉｍｅｏｎｅＤＭꎬｅｔａｌ..Ｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎａｎａｌｙｓｉｓｕｓｉｎｇｐｒｏｔｅｉｎｍｉｃｒｏａｒｒａｙｓａｎｄｍａｓｓｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ[Ｊ].ＭａｓｓＳｐｅｃｔ.Ｒｅｖ.ꎬ２０１０ꎬ２９(５):８３０－８４４.[１３]㊀ＳｚｅｋｒｅｎｙｅｓＡꎬＰａｒｔｙｋａＪꎬＶａｒａｄｉＣꎬｅｔａｌ..ＳａｍｐｌｅｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎｆｏｒＮ￣ｇｌｙｃｏｓｙｌａｔｉｏｎａｎａｌｙｓｉｓｏｆｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｍｏｎｏｃｌｏｎａｌａｎｔｉｂｏｄｉｅｓｂｙｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ[Ｊ].ＭｅｔｈｏｄｓＭｏｌ.Ｂｉｏｌ.ꎬ２０１５ꎬ１２７４:１８３－１９５.[１４]㊀ＪａｙｏＲＧꎬＴｈａｙｓｅｎ￣ＡｎｄｅｒｓｅｎＭꎬＬｉｎｄｅｎｂｕｒｇＰＷꎬｅｔａｌ..Ｓｉｍｐｌｅｃａｐｉｌｌａｒｙｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ￣ｍａｓｓｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙｍｅｔｈｏｄｆｏｒｃｏｍｐｌｅｘｇｌｙｃａｎａｎａｌｙｓｉｓｕｓｉｎｇａｆｌｏｗ￣ｔｈｒｏｕｇｈｍｉｃｒｏｖｉａｌｉｎｔｅｒｆａｃｅ[Ｊ].Ａｎａｌｙ.Ｃｈｅｍ.ꎬ２０１４ꎬ８６(１３):６４７９－６４８６.[１５]㊀ＢｏｎｎｅａｕＪꎬＤｕｍｅｓｔｒｅ￣ＰｅｒａｒｄＣꎬＲｉｎａｕｄｏ￣ＧａｕｊｏｕｓＭꎬｅｔａｌ..Ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃｒｅｖｉｅｗ:ｎｅｗｓｅｒｏｌｏｇｉｃａｌｍａｒｋｅｒｓ(ａｎｔｉ￣ｇｌｙｃａｎꎬａｎｔｉ￣ＧＰ２ꎬａｎｔｉ￣ＧＭ￣ＣＳＦＡｂ)ｉｎｔｈｅｐｒｅｄｉｃｔｉｏｎｏｆＩＢＤｐａｔｉｅｎｔｏｕｔｃｏｍｅｓ[Ｊ].Ａｕｔｏｉｍ.Ｒｅｖ.ꎬ２０１５ꎬ１４(３):２３１－２４５. [１６]㊀ＫｏｂａｙａｓｈｉＹꎬＭａｓｕｄａＫꎬＢａｎｎｏＫꎬｅｔａｌ..Ｇｌｙｃａｎｐｒｏｆｉｌｉｎｇｏｆｇｅｓｔａｔｉｏｎａｌｃｈｏｒｉｏｃａｒｃｉｎｏｍａｕｓｉｎｇａｌｅｃｔｉｎｍｉｃｒｏａｒｒａｙ[Ｊ].Ｏｎｃｏｌ.Ｒｅｐ.ꎬ２０１４ꎬ３１(３):１１２１－１１２６.[１７]㊀ＫｕｎｏＡꎬＫａｔｏＹꎬＭａｔｓｕｄａＡꎬｅｔａｌ..Ｆｏｃｕｓｅｄｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌｇｌｙｃａｎａｎａｌｙｓｉｓｗｉｔｈｔｈｅｐｌａｔｆｏｒｍａｎｔｉｂｏｄｙ￣ａｓｓｉｓｔｅｄｌｅｃｔｉｎｐｒｏｆｉｌｉｎｇｆｏｒｇｌｙｃａｎ￣ｒｅｌａｔｅｄｂｉｏｍａｒｋｅｒｖｅｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ[Ｊ].Ｍｏｌ.Ｃｅｌｌ.Ｐｒｏｔｅｏｍ.ꎬ２００９ꎬ８(１):９９－１０８.[１８]㊀ＰｉｌｏｂｅｌｌｏＫＴꎬＭａｈａｌＬＫ.Ｌｅｃｔｉｎｍｉｃｒｏａｒｒａｙｓｆｏｒｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎａｎａｌｙｓｉｓ[Ｊ].ＭｅｔｈｏｄｓＭｏｌ.Ｂｉｏｌ.ꎬ２００７ꎬ３８５:１９３－２０３. [１９]㊀ＣｏｏｋＭＣꎬＫａｌｄａｓＳＪꎬＭｕｒａｄｉａＧꎬｅｔａｌ..Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎｏｆｏｒｔｈｏｇｏｎａｌｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃａｎｄｌｅｃｔｉｎ￣ａｆｆｉｎｉｔｙｍｉｃｒｏａｒｒａｙｍｅｔｈｏｄｓｆｏｒｇｌｙｃａｎｐｒｏｆｉｌｉｎｇｏｆａｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｍｏｎｏｃｌｏｎａｌａｎｔｉｂｏｄｙ[Ｊ].Ｊ.ＣｈｒｏｍａＢ:Ａｎａｌ.Ｔｅｃｈｎｏｌ.Ｂｉｏｍｅｄ.ＬｉｆｅＳｃｉ.ꎬ２０１５ꎬ９９７:１６２－１７８.[２０]㊀ＺｈａｎｇＬꎬＬｕｏＳꎬＺｈａｎｇＢ.Ｔｈｅｕｓｅｏｆｌｅｃｔｉｎｍｉｃｒｏａｒｒａｙｆｏｒａｓｓｅｓｓｉｎｇｇｌｙｃｏｓｙｌａｔｉｏｎｏｆｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｐｒｏｔｅｉｎｓ[Ｊ].ｍＡｂｓꎬ２０１６ꎬ８(３):５２４－５３５.[２１]㊀ＣｈｅｎＰꎬＬｉｕＹꎬＫａｎｇＸꎬｅｔａｌ..ＩｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆＮ￣ｇｌｙｃａｎｏｆａｌｐｈａ￣ｆｅｔｏｐｒｏｔｅｉｎｂｙｌｅｃｔｉｎａｆｆｉｎｉｔｙｍｉｃｒｏａｒｒａｙ[Ｊ].Ｊ.ＣａｎｃｅｒＲｅｓ.Ｃｌｉｎ.Ｏｎｃｏｌ.ꎬ２００８ꎬ１３４(８):８５１－８６０.８４２生物技术进展ＣｕｒｒｅｎｔＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ. All Rights Reserved.。